UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)

FACULTAD DE ODONTOLOGA

Proyecto de investigacin
DETERMINACION DEL GRADO DE CONTAMINACION DEL AGUA DE
LAS UNIDADES DENTALES EN LA FACULTAD DE ODONTLOIA DE LA
UNMSM

AUTORES:
ALEXIS VALLEJOS ESQUEN
GONZALO OLIVARES SALINAS
LUCERO ROMERO JIMENEZ
LILIANA SANCHEZ GONZALES

ASESOR:
SYLVIA CHEIN VILLACAMPA

2017
 INDICE
RESUMEN

INTRODUCCIN

CAPTULO I PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1 Descripcin de la realidad problemtica

1.2 Formulacin del problema
1.3 Objetivos de la investigacin

CAPTULO II MARCO TERICO

2.1 Antecedentes de la investigacin

2.2 Bases tericas

2.2.1 Contaminacin del agua en clnicas odontolgicas

2.3 Uso del agua en odontologa

2.3.1 Qu es una unidad dental?
2.3.2 Procesos en el tratamiento del agua

2.4 Microorganismos presentes en el agua odontolgica.

2.5. Mtodos frecuentes para la determinacin de

microorganismos
2.5.1 Composicin
2.5.2 Condiciones
2.5.3 Controles
2.5.4Clasificacin

2.6. Hipotesis

CAPTULO III
CAPTULO IV
MATERIAL Y MTODO
RESULTADOS
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
RESUMEN
Se llev a cabo una investigacin para determinar el grado de contaminacin del
agua de las unidades dentales de la clnica IV
de la facultad de Odontologa de la UNSMS, usando para ello recoleccin de
muestras de agua y examinando los medios de incubacin a los que era expuesta,
siendo CALDO LACTOSADO, AGAR SABOURAUD Y AGAR TSA los elegidos.

INTRODUCCION
La prctica odontolgica se ha ido desarrollando a lo largo de los aos,
aumentando las medidas de bioseguridad a la hora de tratar a los pacientes, lo
cual ha sido muy importante y fundamental para reducir la transmisin de
enfermedades infecciosas.
Estas incluyen el aumento del uso de guantes, la desinfeccin de los equipos
dentales, de los instrumentos y tambin protocolos a seguir para disminuir la
contaminacin del ambiente en el cual se labora.
Una de estas medidas ha sido el cuidar la limpieza y desinfeccin del agua que se
utiliza para el tratamiento, al usar la pieza de mano o la jeringa triple por ejemplo.
Esta investigacin trata de medir la contaminacin de esta agua en las unidades
de nuestra facultad, algo importante a saber para tomarlo como ejemplo de
formacin en bioseguridad, y tambin como profesionales de la salud en el cuidado
y consideracin para y con nuestros pacientes.
 CAPITULO I

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1 Descripcin de la realidad problemtica

El agua que se encuentra dentro de la botella, de la unidad dental, est en
contacto directo con la boca de los pacientes, al usar la jeringa triple, la pieza de
mano, otros instrumentos tambin en los que se necesita de la salida de agua para
realizar el trabajo deseado. Es sumamente importante que, siguiendo las normas
de bioseguridad, esta agua se cambie continuamente, para evitar sobretodo la
aparicin de coliformes, bacterias y hongos, que resultarn muy dainos si
entraran en contacto con el paciente.

1.2 Formulacin del problema

Habr presencia de coliformes u otros microorganismos dainos a a la salud en
el agua de las unidades dentales?

1.3 Objetivos de la investigacin

El objetivo de esta investigacin fue medir el grado de contaminacin del agua en
botellas de las unidades dentales instaladas en las clnicas de la facultad de
odontologa de la UNMSM, mediante incubacin de muestras de esta, en medios
de cultivo.
 CAPTULO II
MARCO TERICO

2.1 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIN:

Flores M (2014), realiz un estudio cuyo objetivo fue determinar el grado de

contaminacin de las piezas de mano instaladas en las unidades dentales de la
Clnica 1 de la FO UNMSM en distintos turnos, para ello toma una muestra de 31
piezas de mano, se etiquetaron las muestras de agua extradas de estas piezas de
mano al momento de accionarse y aislando las colonias, investigacin que
demostr que la contaminacin al final del turno es muchsima ms alta que al
empezar.

Arreaga E (2009), Realiz una investigacin en la que evalu la calidad

bacteriolgica del agua de consultorios dentales. Se estudiaron 46 consultorios de
la Ciudad de Mxico, muestreando: jeringa triple, dispensador de vasos y
suministro de agua de unidades dentales, efectundose 2 determinaciones de
coliformes fecales y totales, se utiliz un cuestionario para determinar el
conocimiento de los profesionales sobre el origen y calidad del agua. 17
consultorios presentaron contaminacin, 16 utilizan agua de suministro abierto, 30
utilizan sistema flush mas una marca comercial de agua. De 16 consultorios con
agua de suministro abierto, 7 presentaron contaminacin.

Avila S y col (2014), realizaron un estudio cuyo propsito fue evaluar la calidad
bacteriolgica del agua empleada en las unidades odontolgicas de una clnica
universitaria en el oriente de Colombia utilizando la Escherichia coli y el
Enterococcus spp como indicadores de contaminacin, el tipo de investigacin fue
experimental. Para ello se tomaron muestras de agua de la pieza de mano de alta
velocidad, la jeringa triple y el tanque de agua de seis unidades. Los resultados de
este estudio indicaron un alto grado de contaminacin bacteriana que no cumple
con los parmetros microbiolgicos establecidos en la Norma tcnica de agua
potable, se concluy que las clnicas deben mejorar sus protocolos o adoptar otros,
para as disminuir el riesgo de contraer cualquier tipo de infeccin.

Paipay Santos L. y colaboradores (2014) realizaron un estudio cuyo objetivo fue

determinar la presencia de bateras y hongos en las superficies contactadas por el
operador durante la toma de radiografas intraorales en el cuarto de toma y caja de
procesado de los mdulos de la clnica dental de la Facultad de Estomatologa,
Universidad Peruano Cayetano Heredia. El tipo de investigacin fue experimental,
para ello se tomaron muestras de 6 superficies contactadas durante la toma y
revelado de radiografas en 5 das al azar y no consecutivos, usando una plantilla
estril de 25 cm2 y un hisopo estril con caldo tripticasa de soya y otro con agua
destilada. Se utilizaron diferentes medios de cultivos para el aislamiento. La
identificacin fue a travs de pruebas bioqumicas. Cuyo resultado se encontr una
concentracin bacteriana variada en todas las superficies radiogrficas. Adems
se encontraron microorganismos comensales y patgenos, y los ms prevalentes
fueron los bacilos gram negativos (pseudomona stutzeri) y con menor frecuencia
los cocos gram positivos (enterococcus faecalis ) . Las conclusiones fueron que los
resultados obtenidos destacan la necesidad de adecuar la infraestructura o evaluar
las normas de limpieza y desinfeccin aplicadas e implementar programas de
monitoreo, para disminuir el riesgo de adquirir infecciones en la prctica
radiogrfica.

Dr. Chris H. Milleri (1996) realiz un estudio cuyo propsito fue determinar la
diversidad y patogenicidad de los microbios descubiertos en el agua usado en
clnica, que estn presentes en el agua delas unidades dentales y existen en la
bicapa que cubre las paredes de las tuberas de agua. El mejoramiento de la
calidad microbiana del agua en las unidades dentales segn estn disponibles los
medios es una parte natural del mantenimiento de la calidad, sea para la atencin
adecuada al paciente o equipo de trabajo. Por ejemplo la Legionella pneumophila y
otras especies, son bacterias de gramnegativo y que naturalmente estn presentes
en el agua y podran adquirir proteccin contra el cloro en el agua domstica
donde viven libremente, esta bacteria ha sido detectada en el agua de las
unidades dentales, se descubri alrededor de 42 unidades de 35 lugares de
prctica en Austria, tambin se les hall en Londres y EEUU. Su trabajo presenta
la solucin en la filtracin, y que sugiere que se cambie una vez al da, llevando
sus enfoques para eliminar los patgenos en los suministros de agua, con
diferentes grados de xito.

Csar Camilo Zambrano Gari y Jorge Alberto Luna-Fontalvo (2013)

realizaron un estudio cuyo objetivo fue determinar la diversidad microbiana
presente en el ambiente y superficie de la Clnica Odontolgica de la Universidad
del Magdalena .El tipo de investigacin es experimental a partir de la bsqueda de
microorganismos infecciosos y contaminantes como bacterias y hongos .Se
realizaron cuatro monitoreos , en cada uno 16 puntos de muestreo: seis bandejas y
siete lmparas de diferentes unidades odontolgicas , la sala de esterilizacin ,
sala de ciruga y la sala de espera .Se emplearon tcnicas de sedimentacin en
placas estticas y barridos con trula para el estudio microbiolgico del ambiente y
superficies(bandejas y lmparas de las unidades odontolgicas ) respectivamente.
En los resultados se encontr en el ambiente de la sal de espera tuvo mayor
abundancia de bacterias y hongos .El gnero staphylococcus fue recuperado en
mayor proporcin con 48.790 UFC / m2/30 min y el recuento toal de hongos fue de
13.150UFC/m2/30 min en menor escala se determinaban los gneros bacterianos
pseudomas , enterococcus moraxella y el grupo de coliformes totales .Se
identficaron hongos de los gneros aspergillus , curvularia , geotrichum y
haplosporangium .En conclusin , demostrando que las condiciones del ambiente
externo de la clnica influye directamente sobre la concentracin de
microorganismos mencionados anteriormente .

2.2 BASES TERICAS

Para el uso clnico, el agua debe estar completamente tratada y limpia, libre de
cualquier microorganismo perjudicial para la salud, es interesante como Las
civilizaciones ms antiguas han dejado antecedentes grabados en los que se
puede conocer que ya existan tratamientos de purificacin del agua.

Textos en snscrito describen la purificacin del agua a partir de hervirla y filtrarla.

En Egipto, por el ao 1300 aC, se hace referencia a un sistema de sifones para
separar impurezas en suspensin, ms adelante los romanos colocan un sistema
de sedimentacin en sus acueductos previos al suministro pblico.

En Venecia como en otras ciudades, la captacin pluvial se canalizaba a filtros de

arena previos al almacenamiento en cisternas o aljibes. Pero es hasta el siglo XVIII
que se patentan en Francia e Inglaterra como sistemas de tratamiento, y
posteriormente aplicados a gran escala en 1804 en Pailey, Escocia, donde se
incluye sedimentacin y filtracin con arena.

Con los avances tecnolgicos y las experimentaciones se supo de la importancia

del agua limpia en operaciones o tratamientos de la salud, pues el agua es un
mtodo de limpieza que suele tener contacto con las reas que se est tratando,
por lo que se llev a usar cloro liquido como purificador y as eliminar todo tipo de
microorganismo, por lo que en Amrica se inici la produccin masiva de cloro
lquido hasta 1909 en donde se emplea para el tratamiento del agua. En Filadelfia
1913 se probaron otros mtodos alternativos como el ozono y las radiaciones
ultravioleta, que no se popularizaron por ser ms costosos pero que hoy en da se
han vuelto ms competitivos y aplicables, debido a su alta precisin y seguridad.

2.2.1 CONTAMINACIN DEL AGUA EN CLNICAS ODONTOLGICAS

Ya que existen diversas clnicas en nuestro pas y en el mundo, no tenemos la

certeza del mantenimiento de limpieza que se debe emplear para un adecuado
proceso dental y evitar una infeccin o contagio de alguna enfermedad. En estos
tratamientos el uso del agua es imprescindible tanto para la higiene de las manos
del odontlogo as como para la preparacin de materiales de impresin y el
enfriamiento de los instrumentos rotatorios utilizados en operatoria y prtesis.

El agua de las clnicas odontolgicas puede presentar contaminacin bacteriana,

ya que pasa por una red de distribucin hacia las mltiples unidades dentales que
cuentan con un sistema hidrulico constituido en su mayor parte por mangueras de
plstico rgido flexible que a su vez, distribuye al dispensador de agua, mismo
que surte a la jeringa triple y al dispositivo usado para enjuagar la boca o llena
vasos.

Entonces primero debemos conocer:

2.3 USOS DEL AGUA EN ODONTOLOGA

Para que la clnica pueda desenvolverse al mximo con sus servicios es esencial
que esta cuente con una fuente de agua confiable y as mantener la limpieza que
debe caracterizar a una institucin de salud.
En la clnica odontolgica de la UNMSM, los procedimientos que se llevan a diario
incluyen al agua desde que el paciente entra a la consulta pues el alumno debe
lavarse las manos para dar inicio a la cita.
En un tratamiento de operatoria o prtesis al utilizar la pieza de mano, la llave
deber dar paso al agua para as evitar un sobrecalentamiento y dao pulpar al
paciente.
Si se va hacer un tratamiento preventivo como profilaxis o colocacin de sellantes,
el agua es necesaria para eliminar residuos de la pasta profilctica y para la
eliminacin del cido grabador respectivamente.
Al realizar un tratamiento periodontal, es necesario hacer lavados constantes para
eliminar el exceso de sangre en la cavidad oral y mantener as la visibilidad del
objetivo.
Al realizarse cirugas, debe haber un cuidado extremo del agua utilizada para
evitar el calentamiento seo, ya que si se introducen agentes patgenos en las
heridas, existe un riesgo de que se deteriore o retrase la cicatrizacin1.

2.3.1 Qu es una unidad dental?

Es el equipamiento por el cual el profesional de odontologa se desenvuelve para

llevar a la atencin del paciente, esta unidad presenta cantidad de instrumentos
como turbina, micromotor y jeringa triple, que son necesarios para la intervencin y
trabajo dentro de la cavidad bucal.
Otros que consisten equipos de menor envergadura que facilitan y complementan
el desempeo del odontlogo. Los de uso ms frecuente son por ejemplo:
Amalgamador (prepara la amalgama). Destartrador (eliminacin de clculos o
trtaro supra y subgingival). Lmpara de Fotocurado (polimeriza las resinas). Otros
equipos, como electro bistur, hemosuctor y otros.
Pero entre ellos una unidad que se relaciona con la contaminacin del agua
odontolgica es la unidad de agua.

UNIDAD DE AGUA
Esta unidad est ligada al uso del agua odontolgica, as que se debe dar un
correcto mantenimiento para evitar la acumulacin de microorganismos y as
reducir las infecciones en una clnica odontolgica.
Filtro de agua
Salivero
Llena vaso
Eyectores de saliva
Por presin de agua.
Por presin de aire.

Tratamiento respectivo del agua odontolgica

Diversos estudios demuestran el potencial de dispersin de los agentes

infecciosos en aerosol y por salpicaduras durante el tratamiento dental,
especialmente en el uso de jeringa triple, pieza de mano y cavitrn, puesto que se
utiliza el agua arrojada en forma de spray. Tambin se tiene establecido que una
de las fuentes por la que los microorganismos contaminan, procede del suministro
de agua de la UD2.

Segn Mills, el agua de las unidades odontolgicas utilizada para irrigar la cavidad
bucal de los pacientes durante la atencin clnica debera cumplir con los
parmetros de aceptabilidad del agua potable para consumo humano. La
Asociacin Dental Americana (ADA) realiz un estudio en el ao 1974 en el cual se
analiz la flora nasal de 30 odontlogos, resultando 9 de ellos portadores de las
mismas especies de Pseudomonas que haban sido aisladas a partir del agua de
las unidades dentales seleccionadas en dicha investigacin. Por consiguiente, el
agua de consumo en nuestra poblacin puede considerarse como
microbiolgicamente no segura y sugiere la posible fuente de infeccin
concerniente a las lneas de agua de la unidad dental. Diversas organizaciones y
autores como la ADA coinciden en afirmar que la contaminacin bacteriana de las
lneas de agua de la unidad odontolgica puede provenir del suministro pblico3.
Actualmente hay cuatro categoras de productos que se utilizan para el tratamiento
de las unidades de agua dentales: sistemas de agua independiente, sistemas de
agua estril, filtracin y protocolos de tratamiento qumico4.
2.3.2 Procesos en el tratamiento del agua

1. Desbaste o cribado: Es el primer paso importante en el agua que contiene

slidos gruesos. Se define como el proceso por el cual los slidos en suspensin
de tamao grande, se eliminan del agua antes de entrar en la factora.

2. Coagulacin: Consiste en la sedimentacin de los slidos en suspensin

formadas por material muy pequeo, en lagunas o balsas de sedimentacin
(tambin conocidas como clarificadores o depsitos de asentamiento. Como
coagulantes se pueden utilizar diferentes productos qumicos. Los ms utilizados
son los basados en aluminio.

3. Floculacin: Se realiza para acelerar el proceso de sedimentacin. Es la

agrupacin de las partculas coaguladas en el proceso de coagulacin. 30 Es un
mecanismo principal en la eliminacin de la turbidez del agua.

4. Sedimentacin: Tambin conocida como la clarificacin, es la eliminacin de

las partculas en suspensin, los flculos qumicos, los precipitados y otros slidos
sedimentables por efecto de la gravedad. De forma simple se puede decir que
separa el lquido de los slidos.

5. Filtracin: Algunas veces llamado proceso de pulido porque implica la

eliminacin de partculas en suspensin, haciendo pasar el agua por una capa de
material poroso o granular, arena por ejemplo. A medida que el agua fluye a travs
del filtro se atrapan las partculas en suspensin.

6. Ablandamiento del agua: Los mtodos ms frecuentes para reducir la dureza

del agua son la descarbonatacin en las depuradoras grandes y el intercambio
inico en las depuradoras pequeas.

7. Desinfeccin: Proceso que inactiva los organismos patgenos en el agua

mediante qumicos o agentes equivalentes. No supone eliminacin de formas de
resistencia.

Puede ser:

1. Primaria: Con la cual se matan los quistes de Giardia, las bacterias y los virus.
31

2. Secundaria: Es el mantenimiento del desinfectante residual, que evita vuelvan a

crecer microorganismos en las tuberas de distribucin entre la planta depuradora
y el consumidor.3
2.4 Microorganismos presentes en el agua odontolgica.

Lmites permisibles del agua segn normas de la OMS y las

establecidas por MINSA y DIGESA en el Per

Coliformes Fecales:
La cantidad de coliformes fecales recomendada por las Guas de
la OMS es de:

Toda agua destinada a ser bebida

E. coli o bacterias coliformes termotolerantes. No detectables en ninguna muestra de
100 ml
Agua tratada que alimenta al sistema de distribucin
E. coli o bacterias coliformes termotolerantes No detectables en ninguna muestra de
100 ml
Agua tratada presente en el sistema de distribucin
E. coli o bacterias coliformes termotolerantes No detectables en ninguna muestra de
100 ml.
Fuente: calidad del agua potable p.41

En el caso del agua utilizada en las unidades odontolgicas, se han encontrado

diversos tipos de bacterias gracias a estudios bacteriolgicos realizados. Aunque
en muchas ocasiones los microorganismos hallados no son patgenos puesto que
algunos provienen directamente de la flora normal bucal, otros provienen
directamente Calidad del agua de unidades odontolgicas del agua o de la biocapa
que se forma en la superficie de las jeringas dentales por su constante exposicin
a la humedad. Los microorganismos dentro de los conductos acuticos de las
unidades odontolgicas existen en 2 tipos de comunidades: uno est presente en
el agua y se le conoce como microbio planctnico, el otro est en forma de ssil
unido a las paredes interiores de los conductos acuticos denominado biocapa o
biopelicula .
Las bacterias que frecuentemente se encuentran en el agua de las unidades
odontolgicas son: Enterococcus spp., Achromobacter xyloxidans, Acinetobacter
spp., Alcaligenes denitrificans, Bacillus spp., Bacillus subtitis, Enterobacterias,
Flavobacterium spp., Klebsiella pneumoniae, Legionella pneumophila, Legionella
spp., Methylobacterium mesophilica, Lactobacillus spp., Micrococcus luteus,
Moraxella spp., Pasteurella spp., Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia,
Staphylococcus spp, Serratia marcescens, Streptococcus spp., Xanthomonas spp,
Mycobacterium gordonae, Ochromobacterium anthropi, Veillonella alkalescens,
entre otras.
Pero el principal para determinar la contaminacin el agua es el coliforme.
El grupo coliforme constituyen un grupo heterogneo con hbitat primordialmente
intestinal para la mayora de las especies que involucra, es constante, abundante y
casi exclusivo de la materia fecal, su capacidad de sobrevivencia y multiplicacin
fuera del intestino tambin se observan en aguas potables, por lo que este grupo
se utiliza como indicador de contaminacin fecal en agua; encontrandose que
mientras mayor sea el nmero de coliformes en agua, mayor ser la probabilidad
de estar frente a una contaminacin reciente.
Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no slo sobreviven, sino que se
multiplican, por lo que en los alimentos el grupo coliforme adquiere un significado
distinto al que recibe en el agua. Cuando los productos alimenticios han recibido
un tratamiento trmico (pasteurizacin, horneado, coccin, etc.), estos
microorganismos se utilizan como indicadores de malas prcticas sanitarias.
Para su estudio, se dividen en dos grupos. El grupo de bacterias coliformes totales
el cual comprende a todos los bacilos Gram-negativos aerobios o anaerobios
facultativos, no esporulados, que fermentan la lactosa con produccin de gas en
un lapso mximo de 48 h. a 35C 1C. Este grupo est conformado por 4
gneros principalmente: Enterobacter, Escherichia, Citrobacter y Klebsiella.

El grupo de coliformes fecales, est constituido por bacterias Gram-negativas

capaces de fermentar la lactosa con produccin de gas a las 48 h de incubacin a
44.5 0.1C. Este grupo no incluye una especie determinada, sin embargo la ms
prominente es Escherichia coli.

La demostracin y el recuento de organismos coliformes, puede realizarse

mediante el empleo de medios de cultivo lquidos y slidos con caractersticas
selectivas y diferenciales.

Escherichia coli es un bacilo corto Gram negativo que se encuentra clasificado

dentro de la familia Enterobacteriaceae (bacterias entricas), existe como
comensal en el intestino delgado de humanos y animales. Sin embargo, existen
algunas cepas de E. coli patgenas que provocan enfermedades diarreicas. Estas
se clasifican con base en las caractersticas que presentan sus factores de
virulencia nicos, cada grupo provoca enfermedad mediante un mecanismo
diferente. Se sabe que sus propiedades de adherencia a las clulas epiteliales de
los intestinos grueso y delgado son codificadas por genes situados en plsmidos.
De manera similar las toxinas son mediadas por plsmidos o fagos.

Este grupo de bacterias se encuentra constituido por las siguientes cepas: E. coli
enterotoxignica (ETEC), E. coli enteropatgena (EPEC), E. coli
enterohemorrgica (EHEC), E. coli enteroinvasiva (EIEC), E. coli enteroagregativa
(EAEC) y E. coli enteroadherente difusa (DAEC). Existen otras cepas que no han
sido perfectamente caracterizadas; de las cepas anteriores, las 4 primeras estn
implicadas en intoxicaciones causadas por el consumo de agua y alimentos
contaminados.

Escherichia coli enterotoxignica ETEC es reconocida como el agente causal

de la diarrea del viajero, la cual se caracteriza por diarreas acuosas con o sin
fiebre. Este tipo de infecciones es muy frecuente en pases subdesarrollados y
afecta principalmente a los nios.

Patognesis: El microorganismo es capaz de producir dos tipos de toxina. Una

toxina termolbil de aproximadamente 89 kDa cuya secuencia, antigenicidad y
funcin es similar a la toxina del clera, la otra toxina que produce es termoestable
y es de bajo peso molecular (4 kDa) y es capaz de resistir temperaturas de
ebullicin hasta por 30 minutos.

La infeccin puede ser adquirida por el consumo de alimentos tales como

vegetales frescos (lechuga en ensaladas) y agua. La dosis infectiva para adultos
ha sido calculada en aproximadamente 108 bacterias, por otra parte en jvenes y
ancianos la dosis infectiva puede ser ms baja.

Escherichia coli enteropatgena ECEP. Es causa importante de diarrea en los

lactantes particularmente en los pases en vas de desarrollo. La ECEP se adhiere
a las clulas de la mucosa del intestino delgado. Sus factores de virulencia
favorecen la adhesin y en ocasiones penetra a las clulas mucosas. La infeccin
por ECEP provoca diarrea acuosa generalmente autolimitada aunque en
ocasiones puede ser crnica.

Patognesis. El microorganismo produce dos protenas: la intimina que es

codificada por el gen eae y un factor de adherencia que es codificado por un
plsmido, ambas protenas permiten su unin a los enterocitos y la destruccin de
las microvellosidades intestinales.

Las epidemias causadas por este microorganismo se deben al consumo de agua

contaminada y productos crnicos. En estudios con voluntarios se encontr que la
dosis infectiva es de 106 microorganismos. La diarrea por ECEP se ha vinculado
con mltiples serotipos especficos de E. coli los cuales pueden ser identificados
mediante la tipificacin del antgeno O (somtico) y en ocasiones del antgeno H
(flagelar).

Escherichia coli enteroinvasiva EIEC. Este microorganismo se encuentra

estrechamente relacionado con el gnero Shigella, produce una enfermedad
similar a la shigelosis. La enfermedad se presenta comnmente en nios de pases
subdesarrollados y en personas que viajan a dichos lugares. La EIEC provoca la
enfermedad (diarrea disentrica invasiva) al invadir las clulas epiteliales de la
mucosa intestinal.

A pesar de que la dosis infectiva para Shigella es de 10 a 100 microorganismos, en

el caso de EIEC la dosis infectiva es de aproximadamente 106 bacterias. Algunas
caractersticas importantes de este microorganismo que permiten diferenciarlo de
la cepa tpica de E. coli son: No utiliza la lactosa como fuente de carbono, no
descarboxilan la lisina, es inmvil y anaerognicas.

La patogenicidad de este organismo se debe a su capacidad para invadir y destruir

el epitelio del colon debido a que es capaz de evadir la lisis en los fagolisosomas.

Escherichia coli enterohemorrgica EHEC produce verotoxina, denominada as

por su efecto citotxico sobre las clulas Vero, una lnea de clulas renales de
mono verde africano. Existen al menos dos variantes antignicas de la toxina. La
ECEH se ha asociado con colitis hemorrgica, una variedad grave de diarrea; y
con el sndrome urmico hemoltico, enfermedad capaz de producir insuficiencia
renal aguda, anemia hemoltica microangioptica y trombocitopenia. La verotoxina
tiene propiedades similares a la toxina shiga producida por algunas cepas de
Shigella dysenteriae tippo 1; De los serotipos de E. coli que producen la verotoxina
el ms comn y el nico que puede identificarse en muestras clnicas es el
O157:H7. La E. coli O157:H7 no emplea sorbitol y es negativa a la prueba de
MUG.

La causa ms comn de esta infeccin es el consumo de carne sin cocinar o poco

cocinada, particularmente carne picada procesada en grandes cantidades. Los
casos de colitis hemorrgica y sus complicaciones asociadas pueden prevenirse
mediante la coccin completa de la carne
En la siguiente tabla se resumen algunas propiedades y sntomas causados por
las cepas de Escherichia coli antes descritas.
2.5 Mtodos frecuentes para la determinacin de microorganismos

Medio de cultivo para bacterias, hongos u otros microorganismos

Medios de cultivo
Concepto: Son preparados que intentan reproducir artificialmente las condiciones
del hbitat natural de los agentes bacterianos. Sus componentes deben cubrir
todas las necesidades nutricionales de las bacterias que se van a estudiar y deben
incorporarse en una mezcla justa y equilibrada.23

2.5.1 Composicin:

1. Peptonas: Son mezclas complejas de compuestos orgnicos nitrogenados

y sales minerales que se obtienen por digestin enzimtica o qumica de
protenas animales o vegetales. Las peptonas son muy ricas en pptidos y
aminocidos pero pueden ser deficientes en determinadas vitaminas y
sales.

2. Extractos: Para su preparacin, ciertos rganos o tejidos animales o

vegetales los cuales son extrados con agua y posteriormente concentrados
hasta la forma final de pasta o polvo

3. Fluidos corporales: Estos contribuyen no solamente con factores de

crecimiento, sino tambin con sustancias que neutralizan inhibidores del
crecimiento de algunas bacterias.

4. Indicadores de pH: Indicadores cido- base se aaden a menudo a los

medios de cultivo con objeto de detectar variaciones del pH.

5. Sistemas amortiguadores: Algunos componentes son incorporados al

medio de cultivo de cultivo para mantener el pH dentro del rango ptimo de
crecimiento bacteriano. Los microorganismos ms comunes son neutrfilos
(el pH ptimo para su crecimiento est prximo a la neutralidad), y sales
como fosfatos bisdicos o bipotsicos, o sustancias como las peptonas,
previenen una desviacin del pH.

6. Agentes reductores: Para crear condiciones que permitan el desarrollo de

los grmenes microaerfilos o anaerobios. Agentes selectivos: La adicin
de determinadas sustancias puede convertirlo en selectivo.24
 7. Agua: Componente bsico y universal para la vida. Hidratos de carbono: El
utilizado universalmente es la glucosa, pero en algunos medios se agregan
tambin otros monosocridos como fructosa, disacridos como maltosa o
sacarosa o polisacridos como almidn. Constituyen, tras la degradacin
enzimtica por el microorganismo, una fuente de energa y de carbono.

8. Agentes soldificantes: se incorporan para obtener medios de cultivo

slidos o semislidos. El ms utilizado es el agar que es un polmero
obtenido de algas rojas como gelidium corneum, pero tambin existen el
silicagel y la gelatina.

2.5.2 Condiciones: Debe tenerse en cuenta la temperatura, la atmsfera, presin

osmtica, humedad y el pH adecuados.

2.5.3 Controles: Se establecern tres tipos de controles antes de considerarlos

aptos para su uso. Los cuales son: control de esterilidad, control de calidad y
control de caducidad.25

2.5.4Clasificacin: Segn su utilizacin en el laboratorio:

Medios generales: Permiten el desarrollo de una gran variedad de
microorganismos.

Medios de enriquecimiento: Favorecen el crecimiento de un determinado tipo de

microorganismo, sin llegar a inhibir totalmente el crecimiento del resto.

Medios selectivos: Permiten el crecimiento de un tipo de microorganismo

determinado, inhibiendo el desarrollo de los dems.

Medios diferenciales: Son aquellos en los que se ponen de relieve propiedades

que un determinado tipo de microorganismo posee.2

2.6 HIPTESIS
Debido que en la clnica IV de la Facultad de Odontologa de la UNMSM, se sabe que el
mantenimiento del agua para el uso de la clnica se da de manera manual y se
mantiene dentro de una botella , la cual puede ser un medio propicio para el
crecimiento de microrganismos si no se da una adecuada bioseguridad se recomienda
utilizar agua destilada y no agua directa del cao , mediante esta investigacin
veremos si existe microrganismo en el agua de la botella odontolgica .
 CAPITULO III

MATERIALES

La placa de Petri: Es un recipiente redondo,

de cristal o plstico, con una cubierta de la
misma forma que la placa, pero algo ms grande
de dimetro, para que se pueda colocar encima
y cerrar el recipiente, aunque no de forma
hermtica. Se utiliza en Microbiologa para
cultivar clulas, observar la germinacin de las
semillas o examinar el comportamiento de
pequeos animales.
En esta investigacin se utiliz para llevar a cabo las
incubaciones necesarias, en el Agar TSA y en el Imagen 1
Agar Sabouraud. Placa Petri titulada, AGAR TSA.

Agar TSA: Medio utilizado para propsitos generales,

favorece el desarrollo y aislamiento de una gran
variedad de microorganismos aerobios, y anaerobios
facultativos y estrictos.
El agregado de sangre, permite el aislamiento y
cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios
nutricionalmente exigentes y la observacin de
reacciones de hemlisis.
En esta investigacin se us para la deteccin de
bacterias.

Agar Sabouraud: Es un medio de cultivo que por sus

caractersticas funciona como medio de
enriquecimiento para hongos y que en caso de Imagen 2
contener cloranfenicol u otro antibitico, se convierte Agar TSA
en un medio selectivo para los mismos. El medio
contiene peptonas y una elevada concentracin de glucosa que favorece el
crecimiento de los hongos sobre las bacterias.

Caldo lactosado: es un medio recomendado como prueba presuntiva para

investigar la presencia de bacterias del grupo coliforme en agua, productos
lcteos, etc.
Es un medio rico en nutrientes, y no contiene inhibidores del crecimiento
bacteriano.
 El extracto de carne y la peptona, son la fuente de carbono y nitrgeno,
mientras que la lactosa es el hidrato de carbono. Por la fermentacin de la
lactosa, se produce cido y gas, y ste ltimo se demuestra al usar las
campanas Durham.
Se lo usa tambin como medio de preenriquecimiento, porque permite
recuperar clulas injuriadas, diluye sustancias txicas o inhibitorias y favorece
el desarrollo de Salmonella con respecto a otras bacterias

Fosforos
Mechero
Alcohol
Algodn
Micropipeta
Envase de muestra
Tubo de ensayo
Horno: A 37
Agua de la botella de la unidad dental de la clnica IV
Guantes esteriles

Mtodo:

Procedimiento
La metodologa usada para determinar el grado de contaminacin del agua en las
unidades dentales, fue la recoleccin de esta y posteriormente el anlisis en
medios de cultivo.

1. Preparacin del frasco

Instrumentos:
Frasco estril de 10 ml
Agua de la botella de la clnica
Guantes estriles

Para el trabajo se recolecto 5ml de agua de una botella de una

unidad dental de la clnica IV usando guantes estriles y todas las
precauciones necesarias para evitar la contaminacin.

Imagen 3 y 4
Agua de la clnica
 2. Incubacin en Caldo Lactosado
Instrumentos:
Tubo de ensayo
Guantes estriles
Algodn
Gradilla
Horno
Micropipeta

Se verti con la micropipeta 1ml de agua dentro del tubo de

ensayo del caldo lactosado y posteriormente se coloc en la
gradilla para dejarlo incubar por 4 dias a 37C en el horno.

Imagen 5
Instrumentos para la
preparacin del caldo

Imagen 6
Caldo lactosado listo para
poner al horno

3. Agar TSA
Instrumentos:
Placas Petri
Medio de cultivo
Pinzas estriles
Mechero
Guantes estriles

Usando el mechero, se calent hasta el rojo vivo las pinzas de

metal, esterilizndolas, para luego sumergirlas en el agua y

Imagen 7
Incubacin el agua en el agar TSA
esparcirlas en el medio de cultivo, con forma de estras y lneas rectas.
Posteriormente se las tap e incub en el horno a 37C.

4-Agar Saubouroud
Instrumentos:
Placas Petri
Medio de cultivo
Pinzas estriles
Mechero
Guantes estriles

Usando el mechero, se calent hasta el rojo vivo las

pinzas de metal, esterilizndolas, para luego
sumergirlas en el agua y esparcirlas en el medio de
cultivo, con forma de estras y lneas rectas.
Posteriormente se las tap e incub en el horno a Imagen 8
Agar saubouroud
37C.
Resultados
Al pasar los siete das, volvimos al laboratorio para observar los cambios que se
pudieron dar en el caldo lactosado y en la placa Petri, con respecto a la presencia de
coliformes y bacterias.
Caldo Lactosado:
El caldo lactosado es un medio rico en nutrientes que permite el crecimiento
bacteriano, perfecto para ver el desarrollo de posibles coliformes presentes en el agua
de botella usado en la clnica de la Facultad de Odontologa de la Universidad Nacional
Mayor de San Marcos.
Al analizar la muestra nos percatamos que el caldo no sufri ningn tipo de alteracin,
su contextura, volumen y color segua siendo el mismo. Adems, la presencia de aire
dentro del tubo de ensayo indica la ausencia de coliformes, por lo que el agua de
botella de la clnica IV est libre de presencia de coliformes.

Imagen 9 y 10
Caldo lactosado sin
coliformes

Agar TSA:
El Agar tsa, anteriormente cubierta por una capa del agua de la botella, tampoco
presentaba cambios ni presencia de bacterias (circulares, ovaladas, ameboides,
planas o lisas). Estas deberan haberse formado en la superficie, por lo tanto la
ausencia de ellas nos indica que el agua de la botella de la clnica IV est libre de
presentar bacterias que puedan afectar la salud del paciente.

Imagen 11
Agar TSA limpio
Agar Sabouraud:
A pesar de encontrar un hongo en la muestra, ste era
un hongo ambiental, presente en el ambiente, por lo que
su presencia en el agua de botella es nula. Su aparicin
en el Agar Sabouraud se debe principalmente al
momento de captar la muestra y el contacto de esta con
el ambiente, por lo que este hongo no es propio del
agua.
Siendo el nico hongo encontrado en la muestra,
podemos afirmar que el agua de la clnica IV est libre
de hongos perjudiciales a la salud.

Figura 12
Presencia de un hongo
ambiental.

Conclusiones
Luego de haber desarrollado los experimentos demostrativos pudimos conocer el
nivel de contaminacin que presenta el agua de botella de la clnica IV de la
facultad de Odontologia de la UNMSM. Podemos asegurar que el agua de la
botella de la clnica IV no presenta bacterias coliformes ni hongos perjudiciales a la
salud, lo que demostrara el cuidado y precaucin que se tiene con los materiales
que se usan en los pacientes.
 BIBLIOGRAFA

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