Emprega uma fase mvel lquida e uma fase estacionria
finamente dividida e que, para ter um fluxo razovel, opera a presses elevadas.
A separao dos compostos de uma mistura ocorre devido
a diferena entre os coeficientes de partio entre a fase mvel e fase estacionria.
Principais componentes do cromatgrafo em fase lquida:
reservatrio de fase mvel, bombas, injetor, coluna de separao e detector. CROMATOGRAFIA EM FASE LQUIDA DE ALTA EFICINCIA (CLAE/HPLC) Caractersticas e vantagens do mtodo CLAE:
coluna recheada com partculas de pequeno
tamanho ( 3 - 10 mm);
alta resoluo;
anlise no destrutiva;
velocidade de separao;
monitorao contnua do efluente da coluna;
medio quantitativa exata;
anlises repetitivas e reprodutivas com a mesma
coluna;
automao do procedimento analtico e do
tratamento dos dados. CROMATOGRAFIA EM FLUIDO SUPERCRTICO Combina as melhores caractersticas da CG e da CLAE, permitindo a separao de compostos que no podem ser convenientemente trabalhados com as tcnicas citadas.
Para compostos termicamente instveis ou no volteis que
no possuam grupos funcionais detectveis por espectroscopia ou tcnicas eletroqumicas.
Princpio baseia-se no fato de que
fluidos supercrticos tm densidade, viscosidade e outras propriedades intermedirias entre estado lquido e gasoso, o que possibilita a dissoluo de grandes molculas no volteis e apolares (n-alcanos e aromticos policclicos, por exemplo).
Fase mvel mais empregada: scCO2.
DERIVATIZAO
Esta tcnica consiste na formao de derivados volteis dos
constituintes que so inapropriados para anlise direta num CG, devido a sua lata polaridade, baixa volatilidade ou instabilidade trmica.
Utilizao de reagentes de derivatizao, os mais comuns so
os que possuem o grupo Si(CH3)3.
Reagentes com tomos de Br ou Cl no grupo silil, so
utilizados para preparar derivados a serem analisados em CG equipados com detector de captura de eltrons.
A tcnica pode proporcionar pode melhor resoluo.
Para compostos de massa molecular elevada no uma
tcnica adequada, para estes casos usa-se cromatografia a gs co pirlise. Ex.: anlise de polmeros. policclicos, por exemplo). AMOSTRAGEM POR HEADSPACE
Princpio fundamental : anlise da fase gasosa em equilbrio
com a fase lquida ou slida da amostra. Dois tipos: esttico e dinmico.
Os mtodos que utilizam a amostragem por headspace visam
minimizar a influncia da matriz ou dos componentes da amostra sobre a resposta do detector.
A tcnica tem alta reprodutibilidade e mantm a integridade
qumica das molculas. MICROEXTRAO EM FASE SLIDA (SPME) Introduzida em 1990 por Arthur Pawliszyn, por ser uma tcnica de extrao (ou amostragem) de manuseio simples, no utilizar solvente, possuir um alto poder de concentrao (sensibilidades dos detectores de CG) e ser aplicvel a muitos tipos de analitos.
A tcnica utiliza uma fibra de slica fundida recoberta com
filme fino de um polmero ou de um slido adsorvente que mergulhada na amostra (modo direto) ou no seu headspace.
Na extrao direta - a fibra inserida diretamente na amostra
e os analitos so transportados da amostra para a fase extratora. Para acelerar este processo, usa-se agitao mecnica.
No modo headspace - os analitos tm de
ser transportados atravs da barreira de ar antes de atingirem o recobrimento da fibra. Essa modificao serve, principalmente, para proteger a fibra de possveis danos provocados por interferentes de elevada massa molecular ou baixa volatilidade presentes na amostra.
Depende diretamente das condies experimentais e da
amostra sensibilidade e reprodutibilidade do mtodo analtico. PURGA E COLETA /PURGA E ARMADILHA (PURGE AND TRAP)
Mtodo para remoo de constituintes volteis de lquidos e
slidos, concentrao destes constituintes e introduo destes num CG.
Retira a totalidade dos constituintes da amostra. Sendo a
remoo dos constituintes polares difcil.
O analista deve estabelecer o tempo e a temperatura
necessrios para retirar a totalidade dos constituintes da amostra.