OUTROS TPICOS EM CROMATOGRAFIA

CROMATOGRAFIA EM FASE LQUIDA

DE ALTA EFICINCIA (CLAE/HPLC)

Emprega uma fase mvel lquida e uma fase estacionria

finamente dividida e que, para ter um fluxo razovel, opera a
presses elevadas.

A separao dos compostos de uma mistura ocorre devido

a diferena entre os coeficientes de partio entre a fase
mvel e fase estacionria.

Principais componentes do cromatgrafo em fase lquida:

reservatrio de fase mvel, bombas, injetor, coluna de
separao e detector.
 CROMATOGRAFIA EM FASE LQUIDA
DE ALTA EFICINCIA (CLAE/HPLC)
Caractersticas e vantagens do mtodo CLAE:

coluna recheada com partculas de pequeno

tamanho ( 3 - 10 mm);

alta resoluo;

anlise no destrutiva;

velocidade de separao;

monitorao contnua do efluente da coluna;

medio quantitativa exata;

anlises repetitivas e reprodutivas com a mesma

coluna;

automao do procedimento analtico e do

tratamento dos dados.
 CROMATOGRAFIA EM FLUIDO
SUPERCRTICO
Combina as melhores caractersticas da CG e da CLAE,
permitindo a separao de compostos que no podem ser
convenientemente trabalhados com as tcnicas citadas.

Para compostos termicamente instveis ou no volteis que

no possuam grupos funcionais detectveis por espectroscopia
ou tcnicas eletroqumicas.

Princpio baseia-se no fato de que

fluidos supercrticos tm densidade,
viscosidade e outras propriedades
intermedirias entre estado lquido e
gasoso, o que possibilita a dissoluo
de grandes molculas no volteis e
apolares (n-alcanos e aromticos
policclicos, por exemplo).

Fase mvel mais empregada: scCO2.

 DERIVATIZAO

Esta tcnica consiste na formao de derivados volteis dos

constituintes que so inapropriados para anlise direta num CG,
devido a sua lata polaridade, baixa volatilidade ou instabilidade
trmica.

Utilizao de reagentes de derivatizao, os mais comuns so

os que possuem o grupo Si(CH3)3.

Reagentes com tomos de Br ou Cl no grupo silil, so

utilizados para preparar derivados a serem analisados em CG
equipados com detector de captura de eltrons.

A tcnica pode proporcionar pode melhor resoluo.

Para compostos de massa molecular elevada no uma

tcnica adequada, para estes casos usa-se cromatografia a gs
co pirlise. Ex.: anlise de polmeros. policclicos, por exemplo).
 AMOSTRAGEM POR HEADSPACE

Princpio fundamental : anlise da fase gasosa em equilbrio

com a fase lquida ou slida da amostra. Dois tipos: esttico e
dinmico.

Os mtodos que utilizam a amostragem por headspace visam

minimizar a influncia da matriz ou dos componentes da
amostra sobre a resposta do detector.

A tcnica tem alta reprodutibilidade e mantm a integridade

qumica das molculas.
 MICROEXTRAO EM FASE SLIDA
(SPME)
Introduzida em 1990 por Arthur Pawliszyn, por ser uma tcnica
de extrao (ou amostragem) de manuseio simples, no utilizar
solvente, possuir um alto poder de concentrao (sensibilidades
dos detectores de CG) e ser aplicvel a muitos tipos de analitos.

A tcnica utiliza uma fibra de slica fundida recoberta com

filme fino de um polmero ou de um slido adsorvente que
mergulhada na amostra (modo direto) ou no seu headspace.

Na extrao direta - a fibra inserida diretamente na amostra

e os analitos so transportados da amostra para a fase
extratora. Para acelerar este processo, usa-se agitao
mecnica.

No modo headspace - os analitos tm de

ser transportados atravs da barreira de ar
antes de atingirem o recobrimento da fibra.
Essa modificao serve, principalmente,
para proteger a fibra de possveis danos
provocados por interferentes de elevada
massa molecular ou baixa volatilidade
presentes na amostra.

Depende diretamente das condies experimentais e da

amostra sensibilidade e reprodutibilidade do mtodo analtico.
 PURGA E COLETA /PURGA E
ARMADILHA (PURGE AND TRAP)

Mtodo para remoo de constituintes volteis de lquidos e

slidos, concentrao destes constituintes e introduo destes
num CG.

Retira a totalidade dos constituintes da amostra. Sendo a

remoo dos constituintes polares difcil.

O analista deve estabelecer o tempo e a temperatura

necessrios para retirar a totalidade dos constituintes da
amostra.