EL OPERN

Biologa Molecular para Ingeniero Biotecnlogo

INTRODUCCIN

En nuestro recorrido por la biologa molecular hemos revisado que son los
genes, cmo se replican y cmo se transmiten. Tambin hemos visto que
la informacin contenida en los genes se transcribe a ARN y que el ARN
mensajero se traduce a protenas. De manera que la informacin
contenida en los genes se convierte en protenas. Sin embargo, an no
hemos visto de qu manera la clula regula su funcionamiento, es decir,
Cmo decide la clula que protenas necesita producir en cada momento
y qu cantidad de protena es necesario sintetizar?

En los organismos pluricelulares con diferentes rganos y tejidos est

claro que existe un reparto de las funciones, de manera que las clulas de
diferentes tejidos llevan a cabo distintas misiones y para ello necesitan
sintetizar diferentes tipos de protenas. De forma que un hepatocito (clula
del hgado) produce una coleccin de protenas diferentes a las de un
reticulocito. Por consiguiente, en los diferentes tejidos de un individuo
pluricelular adulto, se estn expresando distintas bateras de genes.

REGULACIN DE LA EXPRESIN GNICA EN BACTERIAS

En las bacterias, a pesar de ser organismos unicelulares, tambin es

necesario regular la expresin de los genes adaptndola a las
necesidades ambientales. Es un principio de economa celular el que la
expresin de los genes est regulada segn las circunstancias celulares.
Un buen ejemplo de esta situacin en bacterias es la regulacin de las
enzimas implicadas en el metabolismo de los azcares. Las bacterias
pueden emplear para obtener energa distintas fuentes de carbono, como
la glucosa, lactosa, galactosa, maltosa, ramnosa y xilosa. Existen enzimas
capaces de introducir cada uno de estos azcares en la bacteria y
enzimas capaces de romperlos para obtener energa. Lgicamente, sera
un despilfarro energtico producir simultneamente todos los enzimas
necesarios para metabolizar los diferentes azcares mencionados. Por
consiguiente, sera mucho ms econmico para la clula producir
solamente las enzimas necesarias en cada momento, es decir, si en el
medio en el que vive la bacteria la principal fuente de carbono es la
lactosa, solamente se expresaran los genes necesarios para metabolizar
la lactosa, mientras que los otros genes no se expresaran. Por tanto, es
esencial que exista un mecanismo de regulacin de la expresin gnica,
de manera que los genes se expresen cuando sea necesario.

La regulacin de la produccin de protenas (sntesis de protenas)

considerando el proceso en su conjunto, puede llevarse a cabo en tres
niveles:

Replicacin
Transcripcin
Traduccin.

De los tres niveles de regulacin, uno de los mejor conocidos actualmente

es la regulacin durante la transcripcin. Aunque la regulacin de la
transcripcin en eucariontes es ms compleja que en bacterias, muchos
de sus aspectos son similares. Por tanto, comenzaremos por el estudio de
la regulacin de la transcripcin en bacterias.

SISTEMAS CONSTITUTIVOS Y SISTEMAS ADAPTATIVOS

Es evidente que existen algunos procesos metablicos que son

necesarios para el funcionamiento normal de casi todas las clulas, de
manera que existen una serie de necesidades bsicas para el
mantenimiento normal de una clula. Por consiguiente, los genes que
codifican para las enzimas necesarias para el metabolismo bsico celular
se estn expresando continuamente, es decir, se expresan de forma
constitutiva o continua. Por tal motivo, a este tipo de genes se les
denomina, "genes que guardan la casa" o genes constitutivos. Estos
genes que se estn expresando continuamente no significa que su
actividad no est regulada, simplemente estn sometidos a un tipo de
regulacin diferente que hace que se estn expresando siempre. Los
genes constitutivos codifican para sistemas enzimticos
constitutivos, que se necesitan siempre para la actividad normal de la
clula.

Frente a los genes constitutivos, nos encontramos con los genes que se
expresan solamente en determinadas situaciones y que, por consiguiente,
codifican para enzimas que solamente se necesitan en momentos
concretos. A este tipo de genes se les llama genes adaptativos y a las
enzimas codificadas por ellos, sistemas enzimticos adaptativos. Se
denominan as pensando en que se expresan cuando la clula se adapta
a una determinada situacin ambiental. En algunos libros de texto se
denomina a este tipo de genes, genes regulados, sin embargo, esta
nomenclatura no es demasiado buena, ya que parece que los nicos
genes cuya expresin est regulada seran estos.

SISTEMAS INDUCIBLES Y SISTEMAS REPRESIBLES

Sistemas inducibles: cuando el sustrato sobre el que va actuar la enzima

provoca la sntesis del enzima. Al efecto del sustrato se le
denomina induccin positiva. Por ejemplo, en E. coli en ausencia de
galactsido (sustrato) hay de unas diez unidades de galactosidasa
(enzima) por miligramo de materia seca, mientras que en presencia de
galactsido se detectan hasta 10.000 unidades de galactosidasa por
miligramo de materia seca. Al compuesto que desencadena la sntesis del
enzima se le denomina Inductor.

Sistemas represibles: cuando el producto final de la reaccin que

cataliza el enzima impide la sntesis de la misma. Este fenmeno recibe el
nombre de induccin negativa. Al compuesto que impide la sntesis del
enzima se le denomina correpresor.

Los sistemas inducibles se corresponden a procesos catablicos de

degradacin, por ejemplo, el opern lactosa, el opern arabinosa, el
opern maltosa. Se trata de sistemas enzimticos encargados de
degradar la lactosa, arabinosa, maltosa, etc.

Los sistemas represibles se corresponden con procesos sntesis o

Anabolismo, por ejemplo el opern triptfano y el opern histina. Se trata
de las rutas metablicas que conducen a la sntesis de triptfano y sntesis
de histidina.

CONTROL POSITIVO Y CONTROL NEGATIVO

Control positivo: Se dice que un sistema est bajo control positivo

cuando el producto del gen regulador activa la expresin de los genes,
acta como un activador.
Control negativo: se dice que un sistema est bajo control negativo
cuando el producto del gen regulador reprime o impide la expresin de los
genes, acta como un represor.

ELEMENTOS DEL OPERN

Jacob, Monod y colaboradores analizaron el sistema de la lactosa en E.

coli, de manera que los resultados de sus estudios permitieron establecer
el modelo gentico del Opern que permite comprender como tiene lugar
la regulacin de la expresin gnica en bacterias. Jacob y Monod
recibieron en 1965 el Premio Nobel pos estas investigaciones.

Un Opern es grupo de genes estructurales cuya expresin est regulada

por los mismos elementos de control (promotor y operador) y genes
reguladores.

Los principales elementos que constituyen un opern son los siguientes:

Los genes estructurales: llevan informacin para polipptidos. Se

trata de los genes cuya expresin est regulada. Los operones
bacterianos suelen contener varios genes estructurales, son
polignicos o policistrnicos. Hay algunos operones bacterianos que
tienen un solo gene estructural. Los operones eucariticos suelen
contener un slo gen estructural siendo monocistrnicos.

El promotor (P): se trata de un elemento de control que es una

regin del ADN con una secuencia que es reconocida por la ARN
polimerasa para comenzar la transcripcin. Se encuentra
inmediatamente antes de los genes estructurales. Abreviadamente
se le designa por la letra P.

El operador (O): se trata de otro elemento de control que es una

regin del ADN con una secuencia que es reconocida por la protena
reguladora. El operador se sita entre la regin promotora y los
genes estructurales. Abreviadamente se le designa por la letra O.
 El gen regulador (i): secuencia de ADN que codifica para la
protena reguladora que reconoce la secuencia de la regin del
operador. El gen regulador est cerca de los genes estructurales del
opern pero no est inmediatamente al lado. Abreviadamente se le
denomina gen i.

Protena reguladora: protena codificada por el gen regulador. Est

protena se une a la regin del operador.

Inductor: sustrato o compuesto cuya presencia induce la expresin

de los genes.

Elementos del opern lactosa

Elementos de Promotor
control Operador
Elementos que Protenas reguladoras
intervienen en la Molculas
Efectores
regulacin de la difusibles
expresin gnica en Inductores
bacterias. Elementos del Genes
Codifican para polipptidos
Opern. Estructurales
Codifica para protena
Gen regulador
reguladora
EL OPERN LACTOSA: CONTROL NEGATIVO

El Opern lactosa, que abreviadamente se denomina Opern lac, es un

sistema inducible que est bajo control negativo, de manera que la
protena reguladora, producto del gen regulador i, es un represor que
impide la expresin de los genes estructurales en ausencia del inductor.
El inductor del sistema es la lactosa. Como veremos ms adelante,
el opern lac tambin est bajo control positivo, ya que existe otra protena
que estimula la transcripcin de los genes estructurales.

Los genes estructurales del opern lactosa son los siguientes:

El gen z+: codifica para la b-galactosidasa que cataliza la hidrolisis

de la lactosa en glucosa ms galactosa.

El gen y+: codifica para la galactsido permeasa que transporta b-

galactsidos al interior de la clula bacteriana.

El gen a+: codifica para la tiogalactsido transacetilasa que

cataliza la transferencia del grupo acetil del acetil Coenzima A al 6-
OH de un aceptor tiogalatsido. Este gen no est relacionado con el
metabolismo de la lactosa.

El verdadero inductor del sistema es la Alolactosa y no la lactosa de

manera que la -galactosidasa transforma la lactosa en Alolactosa. En
los estudios del opern lactosa se utiliza como inductor un anlogo
sinttico de la lactosa que es el Isopropil tiogalactsido (IPTG). El IPTG
no necesita ser transportado por la galactsido permeasa para entrar en
la bacteria.
Las cepas normales de E. coli son inducibles, de manera que en ausencia
del inductor (la lactosa), la protena represora producto del gen i se
encuentra unida a la regin operadora e impide la unin de la ARN-
polimerasa a la regin promotora y, como consecuencia, no se transcriben
los genes estructurales.

Opern lactosa en ausencia de lactosa

Sin embargo, en presencia del inductor (la lactosa), este se une a la
protena reguladora que cambia su conformacin y se suelta de la regin
operadora dejando acceso libre a la ARN-polimerasa para que se una a la
regin promotora y se transcriban los genes estructurales. Por
consiguiente, la presencia del inductor hace que se expresen los genes
estructurales del opern, necesarios para metabolizar la lactosa.

Opern lactosa en presencia de lactosa

Tambin es conveniente recordar que los tres genes estructurales del
opern lactosa se transcriben juntos en un mismo ARNm, es decir que los
ARN mensajeros de bacterias suelen ser policistrnicos, polignicos o
multignicos. Sin embargo, en eucariontes los mensajeros suelen
sen monocistrnicos o monognicos, es decir, corresponden a la
transcripcin de un solo gen estructural.

Opern lactosa: ARNm multignico o policistrnico

En la siguiente tabla se muestra la expresin de los genes del opern

lactosa en ausencia y en presencia del inductor (lactosa) en una bacteria
normal i+ p o z+y+a+. SI = significa que se expresan, NO = significa que no
se expresan.

Expresin de los genes estructurales del Opern lactosa

Bacteria
normal Ausencia de inductor (Sin Presencia de inductor (Con
lactosa) lactosa)
Genotipo z+ y+ a+ z+ y+ a+
i+ p o z+y+a+ NO NO NO SI SI SI
EL OPERN TRIPTFANO
El opern triptfano (opern trp) es un sistema de tipo represible, ya que
el aminocido triptfano (Correpresor) impide la expresin de los genes
necesarios para su propia sntesis cuando hay niveles elevados de
triptfano. Sin embargo, en ausencia de triptfano o a niveles muy bajos
se transcriben los genes del opern trp. Los elementos del opern trp son
en esencia semejantes a los del opern lactosa:
Genes estructurales: existen cinco genes estructurales en el siguiente
orden trpE-trpD-trpC-trpB-trpA.
Elementos de control: promotor (P) y operador (O). El promotor y el
operador estn al lado de los genes estructurales y en el siguiente orden:
P O trpE-trpD-trpC-trpB-trpA. Curiosamente, las enzimas codificadas por
estos cinco genes estructurales actan en la ruta metablica de sntesis
del triptfano en el mismo orden en el que se encuentran los genes en el
cromosoma.
Gen regulador (trpR): codifica para la protena reguladora. Este gen se
encuentra en otra regin del cromosoma bacteriano aunque no muy lejos
del opern.
Correpresor: triptfano.

En el siguiente esquema se indican los elementos del Opern Triptfano:

Los genes estructurales del opern triptfano se encuentran en el mismo
orden que actan las productos codificados por ellos en la ruta biosinttica
del triptfano (ver el siguiente esquema).

Orden de los genes estructurales del opern triptfano y ruta de sntesis del triptfano

En ausencia de triptfano, o cuando hay muy poco, la protena reguladora

producto del gen trpR no es capaz de unirse al operador de forma que la
ARN-polimerasa puede unirse a la regin promtora y se transcriben los
genes del opern triptfano.

Opern triptfano: en ausencia de triptfano

En presencia de triptfano, el triptfano se une a la protena reguladora o
represora cambiando su conformacin, de manera que ahora si puede
unirse a la regin operadora y como consecuencia la ARN-polimerasa no
puede unirse a la regin promotora y no se transcriben los genes
estructurales del opern trp.

Opern triptfano: en presencia de triptfano

NOTA IMPORTANTE:
Por tanto, la diferencia esencial entre el opern lac (inducible) y el opern
trp (represible), es que en este ltimo el represor del triptfano solamente
es capaz de unirse al operador cuando previamente est unido al trp.
INTERACCIN ENTRE OPERONES

Es obvio que en las clulas existen muchos genes que estn sometidos a
diferentes sistemas de regulacin. Si nos fijamos en dos sistemas
enzimticos cualesquiera, puede darse los siguientes casos:
Que ambos sean dependientes: de manera que la presencia de uno
de ellos sea necesaria para la presencia del otro.
Que sean excluyentes: la presencia de uno impide la presencia del
otro.
Que sean alternativos: la presencia de uno no depende de la
presencia del otro.
Esta situacin puede explicarse suponiendo que los productos finales
catalizados por los diferentes enzimas acten como inductores o
correpresores del otro sistema. Por ejemplo, el producto de un enzima
induce la expresin de los genes de otro sistema enzimtico, o por el
contrario, el producto de otra enzima impide la expresin de los genes de
otro sistema enzimtico.
Por consiguiente, las interacciones entre operones son algo frecuente en
los seres vivos y hacen ms complejo el entendimiento de la regulacin
de la expresin gnica.