PRCTICA 11

MTABOLISMO DE CARBOHIDRATOS, COMPUESTOS

NITROGENADOS Y LPIDOS

I. INTRODUCCIN

El metabolismo es el ensamble de las transformaciones moleculares y de transferencia de

energa que se desarrollan sin interrupciones dentro de la clula o del organismo. Los
procesos son ordenados, interviniendo procesos de degradacin (catabolismo) y de
sntesis orgnica (anabolismo). Se puede distinguir el metabolismo basal (durante el
sueo) y el metabolismo en actividad (actividad cotidiana). Toda actividad celular y del
organismo requiere de energa, pero tambin, de nutrimentos especficos (protenas,
cidos nucleicos, lpidos, minerales, vitaminas), que deben moverse a travs de
membranas, con frecuencia contra un gradiente de concentracin, lo que implica un gasto
importante de energa. Los niveles de energa y las concentraciones de nutrimentos deben
estar disponibles constantemente y debern satisfacer la tasa de actividad y sus
variaciones.

Metabolismo de carbohidratos (CHOs)

Los carbohidratos de la racin proporcionan ms del 50% de la energa necesaria para el

trabajo metablico, el crecimiento, la reparacin, la secrecin, la absorcin, la excrecin
y el trabajo mecnico. El metabolismo de CHOs incluye las reacciones que experimentan
los CHOs de orgenes alimentarios o los formados a partir de compuestos diferentes a los
CHOs. La oxidacin de este tipo de glcidos proporciona energa, se almacenan como
glucgeno, sirven para la sntesis de aminocidos no esenciales y ante el exceso de CHOs
se favorece la sntesis de cidos grasos.

Metabolismo de lpidos

Los cidos grasos (AG) son los componentes principales de los lpidos complejos
(triacilgliceroles, fosfolpidos). Los triacilgliceroles son la forma ms importante de
almacenamiento de energa en los animales. Este tipo de almacenamiento presenta sus
ventajas, al oxidarse el C de los AG producen ms ATP que cualquier otra forma de C,
adems, los lpidos estn menos hidratados que los polisacridos, por lo que ocupan
 menos espacio. Los AG se incorporan a las membranas celulares. El principal rgano de
interconversin y metabolismo de lpidos es el hgado.

Metabolismo de protenas

Las protenas funcionan como enzimas, para formar estructuras, pero adems los
aminocidos pueden utilizarse como fuente de energa o como sustratos para otras rutas
biosintticas. En los animales superiores, los aminocidos provienen de la protena de la
dieta o por recambio metablico de protena endgena. El exceso de aminocidos se
degrada parcialmente para dejar esqueletos de carbono para biosntesis o se degradan
totalmente para producir energa. Los aminocidos son catabolizados a travs de la
remocin del nitrgeno (N), a travs de dos rutas principales: la transaminacin y la
desaminacin oxidativa. En la transaminacin, un aminocidos dona su grupo amino al
-cetoglutarato (ciclo de Krebs) se forma un -cetocido y glutamato, el coenzima
utilizado es principalmente el piridoxal fosfato. Esta reaccin es reversible y se encuentra
ampliamente distribuida en los tejidos, especialmente: cerebro, corazn, rin, hgado.
Slo la lisina, treonina, prolina e hidroxiprolina no sufren transaminacin. La
regeneracin del -cetoglutarato se consigue mediante la desaminacin oxidativa del
glutamato catalizada por la glutamato deshidrogenasa unida al NAD

II. OBJETIVOS

Demostrar la degradacin de la glucosa en forma aerbica y por fermentacin.

Determinar la hidrolisis de almidn, gelatina, urea y lecitina. Por microorganismo.

Enumerar el mtodo y microorganismo que degradan y/o utilizan, la glucosa, el almidn,

la gelatina, la urea y le lecitina

Afianzar las destrezas en la siembra por puntura en medios slidos.

III. MATERIALES Y MTODOS

A) MTABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS
Mtodo oxidativo fermentativo
microorganismos I II III IV V
Bacillus sp x x
Escherichia Coli x x
Aceite 3ml 3ml
 Se realiz con la siembra en suspensin en caldo Glucosa Rojo Fenol, el Primer tubo
es el tubo control. Luego se llev a una temperatura de 37 durante 24 horas.

Hidrolisis del Almidn

Se realiz por siembra de puntura en agar almidn. En una placa Petri se hizo la
siembra con los microorganismo Bacillus sp, Escherichia Coli y Proteus sp, luego
se llev a un temperatura de 37 por 24 horas.
B) METABOLISMO DE COMPUESTOS NITROGENADOS

Licuefaccin de gelatina

microorganismos I II III IV
Bacillus sp x
Escherichia Coli x
Proteus sp x
Se realiz la siembra por picadura en medio Gelatina, el primer tubo es el tubo
control, luego se llev a 37 durante 48 horas.

Hidrolisis de Casena

Se realiz por siembra de puntura en agar casena. En una placa Petri se realiz la
siembra con los microorganismo Bacillus sp, Escherichia Coli y Proteus sp, luego
se llev a un temperatura de 37 por 24 horas

Hidrolisis de Urea
microorganismos I II III IV
Bacillus sp x
Proteus sp x
Pseudomonas sp x
Se realiz la siembra por estra en agar Urea (indicador de PH), el primer tubo es
el tubo control, luego se llev a 37 durante 24 horas.

C. METABOLISMO EN LPIDOS

Hidrolisis de Lecitina

Se realiz por siembra de puntura en agar Lecitina. En una placa Petri se realiz la
siembra con los microorganismo Bacillus sp, Escherichia Coli y Proteus sp, luego
se llev a un temperatura de 37 por 24 horas
IV. RESULTADOS
A) MTABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS
Mtodo oxidativo fermentativo

Los tubos II y III se quedan amarillos por lo tanto

bacillus sp es una bacteria anaerobia facultativa,
oxida y fermenta el carbohidrato
Los tubos IV y V tambin quedan amarillos, es
decir, E. Coli es una bacteria anaerobia facultativa,
oxida y fermenta el carbohidrato

Microorganismo
Bacillus sp E. Coli
Oxidativo x x
Fermentativo x x

Hidrolisis del Almidn

Se observ en las tres regiones

crecimiento bacteriano (una colonia por
regin un tanto color azul), alrededor se
nota un halo claro lo cual indica la
hidrolisis, ms notorio est en la regin 1
(Bacillus Sp)

Hidrolisis de Urea

Se observ el cultivo ureasa positivo, por

el claro cambio de color en todos los
tubos, ms notorio en el tubo II (Proteus
sp)
B) METABOLISMO DE COMPUESTOS NITROGENADOS
Licuefaccin de gelatina

Se observ en el tubo II y IV una

licuefaccin positiva, un estado fluido. Y
en el tubo III se observ una licuefaccin
negativa, es decir, se vio estado slido

Hidrolisis de Casena

Se observ una hidrolisis de casena

positiva, ya que desapareci el color
blanco (color incoloro) alrededor del
crecimiento bacteriano.

C) METABOLISMO EN LPIDOS
Hidrolisis de Lecitina

Se observ una hidrolisis de lecitina.

Alrededor de las colonias hay presencia
de halos algo incoloros.

D) DISCUSION
Rodrguez E, Gamboa M, Hernndez F, Garca J (2005) nos dicen que para la prueba de
OF se inoculan 2 tubos. Uno se sella en su superficie para evitar el contacto con el oxgeno
y ofrece as condiciones anaerobias que propician la fermentacin. El otro se mantiene
expuesto al aire lo que facilita la difusin de oxgeno y por tanto la oxidacin del
carbohidrato en las capas superficiales del medio. Si se inocula una bacteria que solo es
capaz de utilizar oxidativamente el carbohidrato, produce una cantidad muy pequea de
cido, la superficie del tubo sin sellar se pondr amarilla y el fondo permanecer verde,
el tubo sellado permanecer verde, en este caso la bacteria se considera oxidadora, Si la
bacteria inoculada, adems de oxidar el carbohidrato, es capaz de utilizarlo
fermentativamente, ambos tubos se pondrn totalmente amarillos, en este caso la bacteria
se considera fermentadora. En nuestra prctica se observ metabolismo fermentativo,
crecimiento de Bacillus sp. en el tubo II, y en el tubo I metabolismo fermentativo de E.
coli. En ambos tubos se observa crecimiento, pero en el segundo tubo es aerbicamente
obligado.

Mira J (1973) nos dice que La hidrlisis produce azcares que son directamente utilizados
por todos los microorganismos vivientes. En la hidrlisis enzimtica por accin de las
enzimas las ms comunes son: alfa y beta amilasa. Para una eficiente hidrlisis enzimtica
del almidn por las amilasas conviene que est gelatinizado, por esta razn se realiza un
cocimiento del almidn antes de la adicin de dichas enzimas. La amilasa acta en los
procesos de digestin de carbohidratos, especficamente acta sobre el almidn, es una
enzima glagoltica, hidroliza los enlaces glucosidicos del tipo alfa 1,4 de la fraccin
amilasa de la molcula de almidn. En nuestra prctica se observa mayor crecimiento
microbiano en el punto 1 (siembra de Bacillus sp.) donde la bacteria produce amilasa

Olivas E, Alarcn L (2004) nos dicen que La gelatina es una protena que tiene la
capacidad de gelificar, cuando es hidrolizada por la gelatinasa en los aminocidos que la
componen pierde su caracterstica de gelificar. Se incorpora a diferentes medios de cultivo
para determinar la capacidad de un microorganismo de producir enzimas proteolticas
(proteinasas), detectadas por digestin o licuefaccin de la gelatina. La gelatina es
hidrolizada por la gelatinasa en sus aminocidos constitutivos, con prdida de sus
caractersticas gelificantes, la prueba es positiva cuando est en un medio licuado y un
tubo de control: medio solido y negativo cuando el medio se mantiene slido, se vuelve
a incubar durante un periodo adicional y un tubo control: medio slido. En nuestra
practica el tubo I y III se observ un medio licuado, en estado lquido (Bacillus sp, Proteus
sp respectivamente) y el tubo II un medio slido con turbidez
 Olivas E, Alarcn L (2004) nos dice que la casena es una protena encontrada en la leche,
cuando la leche es mezclada con un medio de cultivo, el medio pierde su transparencia y
se vuelve turbio debido a que la casena reacciona con los iones de calcio y forma
complejos coloidales insolubles de caseinato de calcio. Cuando la enzima caseinasa
cataliza la hidrolisis de la casena, los aminocidos resultantes se disuelven en el medio
acuoso y el medio se torna de nuevo transparente alrededor de la colonia del
microorganismo. Este fenmeno permite detectar la degradacin de la protena. En la
prctica se observ que si hubo Hidrlisis de casena, desapareci el color blanco
alrededor del crecimiento microbiano.

E) CONCLUSION

Se demostr la degradacin de la glucosa en forma aerbica y por fermentacin.

Se determin la hidrolisis de almidn, gelatina, urea y lecitina. Por microorganismo.

Se enumer el mtodo y microorganismo que degradan y/o utilizan, la glucosa, el

almidn, la gelatina, la urea y le lecitina

Se afianz las destrezas en la siembra por puntura en medios slidos.

F) REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Evelyn Rodrguez, Mara Gamboa, Francisco Hernndez, Jorge Garca (2005)
Bacteriologa general. Principios y prcticas de laboratorio

Jos Mira Gutirrez (1973) El diagnostico bioqumico de las micobacterias.

Publicaciones de la universidad de Sevilla

Evangelina Olivas, Luis Alarcn (2004) Manual de prcticas de Microbiologa bsica y

Microbiologa de alimentos 1era edicin