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Introduccin:
Son el examen fsico y una historia clnica completa los que determinan el nmero y tipo de
las pruebas analticas que se deben solicitar. No se justifica el uso de un perfil analtico amplio
para el diagnstico o valoracin global, sino que los exmenes deben ser ordenados en forma
lgica y racional segn las condiciones individuales de cada paciente. Con ello se logra una
reduccin de los costos de la atencin mdica y se aumenta la eficiencia y la efectividad del
servicio de urgencias.
En nuestro medio, el diagnstico de las causas de enfermedad o muerte que afectan a las
diferentes especies animales es de fundamental importancia para la aplicacin rpida de
medidas teraputicas y de control. La capacidad de un laboratorio para confirmar la sospecha
de una enfermedad est directamente relacionada con la calidad de las muestras remitidas
para el diagnstico. El profesional de campo tiene la responsabilidad de seleccionar,
recolectar, preservar y enviar adecuadamente las muestras convenientes para el diagnstico.
En la toma de muestras de los animales domsticos vamos a tener que ver el manejo de
animales agresivos y no agresivos y tener una mesa de operaciones para realizar diversas
funciones como las punciones de la vena ceflica, safena, yugular y otras. Y a la vez
adquirimos otros tipos de muestras.
Objetivos:
Conocer las tcnicas de envo y toma de muestras de laboratorio para diferentes tipos
de muestras tomadas en un estudio clnico.
Saber qu tipo de muestra es necesaria y como se obtiene para el estudio de las
distintas patologas.
Conocer los mtodos de obtencin de las muestras ms caractersticas (orina, heces,
exudados); asimismo, saber sobre la extraccin, manejo y seleccin correcta de una
muestra.
Referir el tipo de muestras que se solicitan y para que estudios son utilizados.
En el captulo I, se hablar en una manera resumida sobre el tema para saber de que
se tratar posteriormente.
En el captulo II, conoceremos conceptos bsicos y todo lo referente a nuestro tema
con mayor amplitud.
En el captulo III, se dar a conocer los mtodos y tcnicas empleadas, as como
tambin el lugar, la fecha, la hora y pequeos detalles.
A. MUESTRAS SUPERFICIALES:
1. Muestras de piel :
Tenemos dos posibilidades para obtener la muestra, ya sea procediendo a alzar a los
grmenes con el asa bacteriolgica, por simple raspado ligero o con la ayuda del bistur
proceder a raspar algo enrgicamente los bordes de la lesin, de manera no solo
obtendremos los microorganismos sino tambin las capas superficiales de la piel, esto
provechoso en el caso de ciertas determinaciones.
Finalmente puede ser que en determinados casos se presente ndulos los cuales estn por
debajo de piel, siendo mas palpables que visibles; en este caso procedemos tambin a raspar
con el bistur el lugar de la lesin llegando hasta el ndulo de manera que una ves obtenida la
pulpa, esta puede ser procesada y as llegar a observar al microbio.
2. Muestra de pelo:
Tambin hay dos posibilidades, la primera cuando los grmenes se hallan localizados en el
folculo piloso, en este caso Serra suficiente a raspar la regin con asa bacteriolgica previo
lavado de la zona con agua destilada, tambin se deber arrancar el pelo a fin de aislar al
germen a partir del folculo piloso.
La segunda posibilidad severa cuando el tallo del pelo este atacado, (micosis) en esta
situacin procederemos a corta el pelo para su observacin o posterior procesamiento en
cultivo.
3. Muestra de uas:
Tambin vamos a ver que se presenta dos tcnicas, de acuerdo al sitio atacado.
La primera se utiliza cuando la lesin asienta el lecho ungueal, en estas tcnicas desplazamos
el asa bacteriolgica, previo lavado de la regin con agua destilada por el lecho ungueal con
un solo trazo firme y seguro.
B. MUESTRA DE CAVIDADES:
Consignamos a las muestras de mucosas, conducto auditivo externo, esputo, orina, heces
fecales.
a) Mucosas:
1. Mucosa nasal:
Si la lesin es mucho mas interna, entonces ser necesario que un especialista la obtenga
con instrumental que nosotros ya no poseemos, Hay otras oportunidades en que es preciso
utilizar un cincel delgado y largo que podemos fabricar a partir de un sujetador de papel (clip)
el cual es convertido en un alambre rectilneo y posteriormente aplastado uno de los extremos
obtendremos un pequeo cincel, con el cual una ves esterilizado procedemos a raspar
lesiones sospechosas.
2. Mucosa oral:
En esta cavidad tomar cualquier muestra pues tenemos gran visibilidad, as podemos
observar donde se localizan una lesin y posteriormente utilizando el hisopo llevar a cabo la
toma de muestra. Por otra parte para fines de investigacin podemos escoger cualquier
segmento de la mucosa oral puesto que esta posee una flora variada de microorganismos.
Para tomar muestras de los espacios interdentales se utiliza el hilo estril, el cual se introduce
en estos para recoger el sarro dental o cualquier otro producto, procediendo luego a sembrar
o realizar el correspondiente frotis.
3. Mucosa farngea:
Necesitamos un hisopo y el baja lenguas pues al utilizar este elemento vamos a ser que
cumpla la funcin es decir, deprimir la lengua para que de esta manera tengamos la visibilidad
y la comodidad para trabajar posteriormente utilizamos el hisopo, siempre tomando en cuenta
que antes de proceder a esta tcnica debemos utilizar un antisptico para realizar la asepsia
de la cavidad oral.
Utilizamos tambin un hisopo pero en este caso debemos tener en cuenta el criterio
anatmico, y esto se explica por el hecho que el conducto auditivo externo es un tubo que se
dirige de afuera hacia adentro de arriba hacia abajo y de atrs hacia delante; en otras
palabras describe un trayecto oblicuo, as que en virtud a esta disposicin el momento de
efectuar la toma de muestra deberemos retraer el pabelln auricular de manera que tengamos
la entrada al conducto totalmente visible, luego debemos medir por simple observacin en el
hisopo mas o menos dos centmetros (esto por que este conducto tiene un profundidad de 1.5
a 2 cm) e introducirlo posteriormente; finalmente procedemos a imprimir movimientos de
rotacin obteniendo la muestra.
Hay que tener cuidado de no daara la membrana timpnica por accin brusca o introduccin
mayor a la profundidad anatmica establecida.
c) Heces fecales:
Debe poseer sistema de rosca y tapa que asegure este sistema, o en su defecto un
tapo que asegure hermticamente.
En la posible debe ser estril, aunque se puede utilizar un embase bien lavado.
1. Heces diarreicas:
En este caso obtenemos un volumen similar al de un cuchara sopera ms o menos viene ser
una cantidad de 10 ml. Estas muestras deben procesarse dentro de un margen de tiempo
prudencial pues al acidificarse muchos grmenes patgenos se lisan.
2. Heces slidas:
C. MUESTRAS ESPECIALES:
1. Sangre:
La sangre se extrae de los animales para una gran variedad de propsitos. Los cientficos han
de ser conscientes de que el proceso puede ser innecesariamente estresante para un animal,
sencillamente por el trato, el tipo de anestesia o la incomodidad que se asocia a una
determinada tcnica. Los cambios fisiolgicos asociados al incremento de tensin (estrs)
pueden incluso invalidar los resultados (Kaufmann, 1990; Sarlis, 1991).
La tcnica de extraccin de sangre consta de una serie de pasos que deben seguirse
rigurosamente:
Limpiar la piel con alcohol (70 %) sobre el sitio de la ven puntura en una rea de
unos 5 cm., frotando rigurosamente.
Despus de retirar la aguja la piel del paciente se desinfectara otra vez con
alcohol el 70%.
o Tamao de la muestra.
o Seleccin de la muestra adecuada y envo
o Solicitud de la tcnica diagnstica e interpretacin de los resultados.
Para aves con nefritis o problemas en la produccin de huevos, deben ser colectadas
muestras de riones u oviducto, adems de muestras respiratorias. En situaciones donde se
sospeche la nefritis inducida por bronquitis, se deben seleccionar muestras de riones para
examen histopatolgico as como aislamiento viral (Cavanagh, 1999). Muestras de sangre de
aves agudamente afectadas y de pollos convalescientes deben ser sometidas a ensayos
serolgicos. Una alta proporcin de virus recuperado ha sido reportado de tonsilas cecales o
heces (Alexander, 1978).
TOMA DE MUESTRA PARA CLERA AVIAR
4. Heces de aves enfermas. Se realizar la necropsia a los animales que hayan muerto
recientemente siempre que no se encuentren en estado de descomposicin. Si el tcnico que
realiza la inspeccin clnica observa indicios de IA-AP proceder al sacrificio de los animales
enfermos en el nmero que estime oportuno para la realizacin de la necropsia
3. Con la misma solucin y utilizando algodn desinfectar los pezones. Dejar secar (2
minutos). Eliminar los dos primeros chorros de leche antes de tomar la muestra.
5. En caso de que la infeccin est plenamente localizada en uno de los cuartos o se requiera
localizar el cuarto afectado, siguiendo las mismas recomendaciones, tomar de 2 a 3 ml de
leche del cuarto afectado o de cada cuarto por separado.
6. Identificar la muestra correctamente y mantenerla refrigerada hasta la llegada al laboratorio.
Suero separado a partir de muestra de sangre extrada de en tubo seco sin anticoagulante.
Para Micro aglutinacin e Inmunofluorescencia.
B- Para hemocultivo:
Realizar la toma precozmente, en perodo febril, primeros 5 das de evolucin yantes de iniciar
tratamiento antibitico.
Sembrar al lado del enfermo, como otros hemocultivos. El citrato de sodio anticoagulante
puede ser inhibitorio. En este caso se siembran 4 tubos con medio de cultivo semislido
Fletcher, que provee nuestro laboratorio.
Se inocula una gota de sangre en el primero, dos en el segundo, tres gotas en cada uno de
los tubos restantes. Enviar rpidamente al laboratorio, sin refrigerar, mientras tanto, conservar
a 25-30C.
Se envan muestras de tracto intestinal, orina para denotar exceso de glucosa (causada por la
toxina y es un sntoma bastante constante orientativo, en adultos). Tambin debemos mandar
muestras de hgado.
Incluso podramos enviar un cordero que est muy afectado como muestra (vivo), ya que la
ser los clostridios bacterias anaerobias sera ms fcil aislarlo de muestras recin cogidas del
cordero.
Las muestras se deben enviar en condiciones de anaerobiosis. Muestras de rganos en
recipientes estanco, emplear bolsas rgidas, que no pierdan lquido, porque si no van
goteando (y no es plan de ir diseminando clostridios por ah, aunque no sea zoonosis). Si
enviamos el animal debemos hacer que llegue lo ms rpido posible.
Con el cordero vivo se buscan clostridios por un lado (entero toxemia) y colis por otro
(diarreas neonatales); adems de aislarlos debern cuantificarlos, para as poder discernir si
es flora normal o patolgica. De los colis se busca el antgeno K99; tambin buscaremos
posibles toxinas (clostridios). Se debera mandar una muestra a parasitologa para buscar
Cryptosporidium. Tambin a histopatologa para posibilidad de que exista rotavirus o
coronavirus.
Las muestras de hgado se procesan para ver si existen clostridios, en caso de que se aslen
entero toxemia, ya que su sola presencia en el hgado es patolgica.
Se consideran muestras de eleccin las secreciones vaginales tras parto y/o aborto, as como
leche e incluso semen. La excrecin de brcelas por vagina se produce de forma masiva
incluso hasta 30 das post parto. La eliminacin por leche suele realizarse de forma poco
intensa y discontinua, por lo que en ocasiones el aislamiento no resulta exitoso. Es frecuente,
al igual que en otras especies, que no exista aislamiento positivo a partir del feto y s lo haya a
partir de escobillones de exudados fetales, como consecuencia de la infeccin placentaria
(placentitis) pero no fetal.
Se procedi a seleccionar a los bovinos para iniciar con el muestreo sanguneo, mediante la
sujecin del animal utilizando la mocheta e inmovilizando al animal con ayuda de una soga,
para evitar un movimiento brusco y as proseguir con la toma de la muestra sangunea.
El mtodo a emplearse fue puncin y extraccin de la sangre en el bovino sea de sus venas
yugular y/o coccgea, antes se realiz previa desinfeccin del rea donde se efectu la
puncin con alcohol y algodn utilizando vacutainers con sus respectivas agujas y mbolos,
anticoagulante EDTA (sales sdicas y potsicas del cido Etilen Diamino Tetractico) siendo
con la proporcin de 0.5 mm., de EDTA para 5 ml., de sangre, una vez obtenida las muestras
sanguneas se procedi a mezclar suavemente en forma homognea para evitar la formacin
de cogulos con la ayuda de un lpiz de cera rotul para su debida identificacin de la
muestra, seguidamente se coloco en una gradilla porta tubos y esta a su vez en una caja de
tecnopor con hielo.
la toma de muestras de los animales, de ndole tan diversa como sangre durante campaas
de saneamiento ganadero, vigilancia epidemiolgica, o para diagnstico de enfermedades,
tejidos obtenidos mediante las necropsias y las biopsias, y otras como exudados, heces y
orina. Todos estos procedimientos generan una gran cantidad de residuos biolgicos que
favorecen la diseminacin de agentes infecciosos, aunque no todos stos representan el
mismo grado de riesgo para las personas que estn en contacto, el resto de animales de la
explotacin y el medio ambiente.
Lugar y fecha:
Mtodo:
La prctica realizada fue expuesta por el Dr. Daniel Paredes Profesor del curso de Patologa
Animal, con su mtodo explicativo nos dio a conocer la toma de diversas muestras en un
ganado vacuno de temprana edad (vaquillonas)
Materiales:
Soga.
Vaquillonas
Guantes.
Mandil blanco u otro color en forma obligatoria.
Agujas.
Portaobjetos.
Tubos de vaco
Bolsas de plstico
Cuaderno de apuntes
Cmara digital y/o celular.
IV. Resultados:
En esta practica se pudo notar que por falta de informacin o conocimiento mayormente los
campesinos criadores o productores de animales, son los que frecuentemente mandan las
muestras sin las tcnicas correspondientes y eso hace que en le laboratorio dificulta el trajo y
por lo tanto los resultados de la muestra. Pero con el explicado del profesor nosotros los
futuros ingenieros estando en el campo debemos impartir los conocimientos a los dems.
VI. Conclusiones:
Es necesario conocer las ubicaciones de las diferentes venas ya que es aplicable para una
toma de muestra sangunea, existiendo diferentes lugares de puncin.
En esta prctica se llego a conocer las tcnicas y las formas de toma de muestras para el
estudio y envi a un laboratorio.
VII. recomendaciones:
VIII. Bibliografa: