Trabajo de Labo 2

UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE ICA
Facultad de Medicina Humana Daniel Alcides Carrin
Introduccin:
La glucosa es la principal fuente de energa del organismo.
La insulina, producida en las clulas de los islotes del
pncreas, facilita la entrada de glucosa en las clulas de los
tejidos. Una deficiencia de insulina o una disminucin de su
actividad ocasiona un aumento de la glucosa en sangre.
La glucemia basal es el nivel de glucosa que se encuentra
en el plasma sanguneo en estado de ayunas (mnimo 6 u 8
horas). La prueba de la glucemia basal se realiza a travs de
una muestra de sangre venosa y se realiza normalmente por
la maana y despus del descanso nocturno. La glucemia
basal alterada (GBA), es un nivel de glucemia basal situado
entre los 110 y los 126 mg/dl.
Este indicador se utiliza para identificar personas con un alto riesgo de desarrollar
diabetes tipo 2; se encuentran concentraciones elevadas de glucosa en suero o
plasma en pacientes con diabetes mellitus y con otras condiciones o sndromes. La
hipoglucemia puede darse como respuesta al ayuno, o bien puede ser debida a
frmacos, venenos, errores congnitos del metabolismo o gastrectoma previa. El
diagnstico clnico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico
ensayo, sino que debe integrar los datos clnicos y de laboratorio.
Fundamento:
La glucosa presente en la muestra origina, segn las reacciones acopladas descritas
a continuacin, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.
Glucosa + O2 + H2O--------------------- Glucnico + H2O2
2 H2O2 + 4-Aminoantipirina + Fenol---------------- Quinonaimina + 4 H2O
A. reactivo: fosfatos 100 mmol/L, fenol 5mmol/L, glucosa oxidasa >10 U/ml,
peroxidasa> 1U/ml, 4-aminoantipirina 0,4 mmol/L, pH 7,5
S. patron de glucosa/urea/creatinina. Glucosa 100mg/dl (5,55 mmol/L), urea 50mg/dl,
creatinina 2mg/dl. Patron primario acuoso.
Propsito:
Al trmino de la prctica el alumno habr realizado correctamente la tcnica de
determinacin de glucosa basal basndose en tcnicas sencillas que requieren el
correcto uso del instrumental y material que se describe en la tcnica. Asimismo
obtendr el conocimiento necesario y la experiencia que podr aplicar en el futuro.
Tcnica:
Aparatos Instrumental Sustancias, reactivos y
muestra biolgica
Bao mara Equipo vacutainer Agua
Espectrofotmetro Tubo con tapa roja Muestra biolgica
Centrifuga (sin aditivos). (sangre venosa)
Pipeta graduada Reactivo de glucosa
3 tubos de ensaye Patrn de Glucosa
Micro pipeta
Puntas
Celdas para
espectrofotmetro.
Procedimiento:
1) Obtener una muestra se sangre venosa en un tubo rojo (sin aditivos) dejar que
se coagule y centrifugar 5 minutos a 3200 rpm.
2) Atemperar el reactivo a temperatura ambiente.

3) En un tubo de ensaye rotulado como blanco se coloca un mililitro de
reactivo(A).
4) En un tubo de ensaye rotulado como patrn se colocan 10 ul de patrn (S) y
un mililitro de reactivo (A).
5) En otro tubo rotulado como muestra se colocan 10 ul de muestra y un mililitro

de reactivo (A).
6) Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (de
16 a 25 C) o durante 5 minutos a 37 C.
7) Verter el contenido de los tubos a las celdas para espectrofotmetro.
8) Calibrar el espectofotmetro a 500 nm, Teclear 500, luego second function y

go to.
9) Insertar el blanco y presionar zero abs

10) Leer las absorbancias del problema y el estndar.
Frmula:
La concentracin de glucosa en la muestra:

A muestra\ A patrn x C patrn= C glucosa *La unidad es mg/dL
Referencia:
Suero y plasma2:
Neonato, prematuro 25-80 mg\dl= 1,39-4,44mmol\L
Neonato, a termino 30-90 mg\dl=1,67-5,00 mmol\L
Nios, adultos 70-105 mg\dl= 3,89-5,83 mmol\L
OBJETIVO
Que el alumno determine las concentraciones de glucosa postprandial con el
mtodo de la glucosa oxidasa, para explicar los resultados obtenidos con los valores
normales de referencia de la tcnica para poder sugerir una posibilidad diagnostica.
FUNDAMENTO
La glucosa oxidasa convierte la glucosa en perxido de hidrgeno y cido D-
glucnico. La perxidasa cataliza la oxidacin del perxido de hidrgeno a 4-
aminofenazona con la subsecuente unin con el p-hidroxibencensulfonato. El
producto final es un chidroquinolena el cual absorbe a 500 nm. La intensidad del color
es directamente proporcional a la concentracin de la glucosa.
GLUCOSA POSPRANDIAL
En la persona no diabtica, los valores de glucosa posprandial no exceden de
145 mg/dl, por el mtodo de glucosa oxidasa o hexocinasa; los niveles aumentan
moderadamente en personas mayores de 50 aos.
MATERIAL
7 tubos de ensaye
3 tubos p/ rotular 3 muestras
Gradilla de aluminio
Pipeta automtica de 100L
Agua destilada
Pipeta de 5 ml
PROCEDIMIENTO
1.- Tomar la primera muestra (en ayuno) 5ml de sangre a las 9:40am,
centrifugar y separar el suero libre de clulas. [Despus de la toma indicarle al
paciente que desayune.]
2.- Rotular los tubos para la muestra: tubo 1, 2, 3 (M) - numero de muestra
Equipo 2 Nombre del paciente.
3.- Preparar la 1 solucin de la manera siguiente:
M(Muestra)
Reactivo de Trabajo 3.0ml
(ml.)
Muestra (l) (Suero del 30l
paciente).
4.- Leer la ABS en el espectrofotmetro a 505 nm.

Encontrar la Glucosa en mg/dL de la muestra de suero.
Clculos:
Abs muestra
100
Abs estndar
5.- Tomar la segunda muestra (5ml) de sangre 1hr despus del desayuno [a
las 10:40am], centrifugar y separar el suero, obtenerlo libre de clulas.
M(Muestra)
(ml.)
paciente).

Clculos:
Abs muestra
100
Abs estndar
8.- Tomar la tercera muestra (5ml) de sangre 2hr despus del desayuno [a las
11:40am], centrifugar y separar el suero, obtenerlo libre de clulas.

M(Muestra)
(ml.)
paciente).

Clculos:
Abs muestra
100
Abs estndar
CONCLUSIN
Es muy importante conocer como obtenemos nuestra fuente de energa, ya que es
base para nuestra vida, y como estudiantes del rea clnica es de suma importancia
no solo conocer esto, sino ms a fondo para as poder tratar con patologas referentes
a estas vas metablicas como lo son la diabetes mellitus, que hoy en da son muy
frecuentes y que se esperan que sigan siendo pronunciadas en un futuro.
Con respecto a las pruebas realizadas en el laboratorio es necesario conocer el
procedimiento de ellas axial como sus valores normales para poder detectar una
anomala en ellas y solucionarla.
La tolerancia a la glucosa se indica por la naturaleza de la curva de glucosa en sangre

despus de la administracin de una dosis de prueba de este azcar.
El colesterol es el principal esterol del organismo humano y precursor de todos los dems
esteroides corporales. Se encuentra formando parte de membranas celulares,
lipoprotenas, cidos biliares y hormonas esteroideas.
El colesterol es un importante constituyente de los clculos biliares, pero su principal
funcin patolgica, lo constituye la produccin de aterosclerosis de arterias vitales,
causando enfermedad coronaria, cerebrovascular y vascular perifrica.
El origen del colesterol en el organismo tiene dos fuentes, la externa y el que produce el
propio organismo. Debido a que el organismo puede producir su propio colesterol, existe
la posibilidad que personas que no consuman colesterol, tengan niveles sanguneos
elevados por tener algn desorden gentico-metablico que conlleva a dicha elevacin.
Estos desordenes son ms comn de lo que se cree y son la principal causa de ateroma y
de enfermedades vasculares, entre ellas el infarto agudo al miocardio. Por esto la
importancia de determinar en forma precoz los niveles elevados de colesterol en los
pacientes.
Los alimentos derivados de animales son ricos en colesterol especialmente huevos, lcteos
y las carnes. La mayora de este est en forma esterificada. El organismo absorbe
aproximadamente la mitad del colesterol contenido en la dieta. Los esteroles vegetales son
escasamente absorbidos por el organismo.
El hgado es el principal rgano productor (10 % del total), siendo otros rganos
importantes en la produccin el intestino, corteza suprarrenal, testes y ovario. La sntesis
del colesterol se halla regulada sobre todo por la ingesta de colesterol en la dieta.
El aumento del LDL-colesterol a nivel sanguneo lleva a un conjunto de proceso que

desembocan en la formacin de placas inestables en las paredes de los vasos sanguneos,
conocidos como ateromas. Estas placas reducen la luz de las arterias y venas, y si una de
estas placas se desprende puede producir ya sea un infarto agudo al miocardio o en el
cerebro un derrame
Principio del mtodo
El colesterol presente en la muestra origina un compuesto coloreado segn la reaccin

siguiente.
CHE
Esteres colesterol + H20 Colesterol + cidos Grasos
CHOD
Colesterol + O2 4-Colestenona + H2O2
POD
2H2O2+ Fenol+4-aminofenazona Quinonimia + 4 H2O
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de colesterol presente en

la muestra ensayada.
Significado clnico
El colesterol es una sustancia grasa presente en todas las clulas del organismo. El hgado produce
naturalmente todo el colesterol que necesita para formar las membranas celulares y producir ciertas
hormonas. La determinacin del colesterol es una de las herramientas mas importantes para el
diagnostico y clasificacin de lipemias. El aumento del nivel del colesterol es uno de los principales
factores de riesgo cardiovascular.
El Diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clnicos y de laboratorio.
Reactivo
R PIPES pH 6.9 90mmol/L

Fenol 26mmol/L
Colesterol Estereasa(CHE) 1000 U/L
Colesterol Oxidasa(CHOD) 300U/L
Peroxidasa (POD) 650U/L
4-Aminofenazona (4-AF) 0.4mmol/L
Cholesterol Cal Patrn primario acuoso de colesterol
Material
Una gradilla
3 tubos
Espectrofotmetro
Procedimiento
Pipetear:
Blanco patrn Muestra

R(ml) 1,0 1,0 1,0
Patrn l - 10 -
Muestra l - - 10
Calcular
(A) Muestra X Conc. Patrn = mg/dL de Colesterol en la muestra.

(A) Patrn
Blanco Patrn Muestra

0.000 0.382 0.288
0.288 X 200 = 150.78 mg/dl de colesterol

0.382
Conclusin
En esta prctica se determino el colesterol .El colesterol es el principal esterol del organismo
humano y precursor de todos los dems esteroides corporales. Se encuentra formando parte
de membranas celulares, lipoprotenas, cidos biliares y hormonas esteroideas
Los niveles normales es menos de 200, el resultado fue de 150.78 mg/dl que se encuentra
dentro del rango. Un aumento del colesterol puede causar enfermedades cardiovasculares.
Es importante su correcta realizacin ya que ayuda en el diagnstico oportuno de formacin

de ateromas que provocan los infartos.
OBJETIVO
Determinar los niveles de triglicridos en la sangre.
INTRODUCCIN
Los triglicridos son acilgliceroles, un tipo de lpidos formados por una

molcula de glicerol, que tiene esterificada sus tres grupos hidroxilo, por
tres cidos grasos saturados o insaturados.
Los triglicridos forman parte de las grasas, sobre todo de origen animal.
Los aceites son "acidos grasos" en estado lquido de origen vegetal o que
provienen del pescado.
Metabolismo de los triglicridos
Las grasas se hidrolizan en el intestino delgado en sus cidos grasos y

glicerina para atravesar la pared intestinal, aislados o en forma de jabones
al combinarse con los jugos pancreticos e intestinales. Luego son
reconstruidos de nuevo al otro lado de la pared intestinal y se combinan
con protenas sintetizadas por el intestino, formando unas lipoprotenas
llamadas quilomicrones, que se transportan al hgado, desde donde se
distribuyen al resto de clulas del cuerpo, sobre todo las adiposas y
musculares en forma de lipoprotenas VLDL. Las clulas del tejido adiposo
son las principales clulas de reserva de grasas.
Niveles altos de triglicridos:
Puede tener varias causas:
Exceso de peso: los triglicridos aumentan generalmente a medida

que aumenta el peso.
Consumo excesivo de caloras: Los triglicridos se elevan a medida
que se aumenta de peso o se ingieren demasiadas caloras,
especialmente provenientes de azcar y del alcohol. El alcohol
aumenta la produccin de triglicridos en el hgado.
Edad: los niveles de triglicridos aumentan regularmente con la

edad.
Medicamentos: Algunas drogas como los anticonceptivos, esteroides,

diurticos causan aumento en los niveles de los triglicridos.
Enfermedades: La diabetes, el
hipotiroidismo, las enfermedades
renales y hepticas estn asociadas
con niveles altos de triglicridos.
Entre los grupos que deben vigilar
con mayor cuidado su nivel de
triglicridos se encuentran los
diabticos y las mujeres despus de
la menopausia. Ms de un 75% de
los diabticos tienen los niveles de
triglicridos altos y el 30% de las
mujeres que han pasado por la
menopausia sufren de este mismo
problema.
Herencia: algunas formas de altos niveles de triglicridos ocurren

entre miembros de una misma familia.
Los niveles bajos de triglicridos pueden deberse a:
Dieta baja en grasas

Hipertiroidismo
Sndrome de malabsorcin
Desnutricin
Otras afecciones bajo las cuales se puede realizar el examen son:
Sndrome de quilomicronemia
Hiperlipidemia adquirida
Hiperlipidemia familiar combinada
Disbetalipoproteinemia familiar
Hipertrigliceridemia familiar
Deficiencia familiar de lipoproteinlipasa
Diabetes mellitus no insulinodependiente (DMNID)
Accidente cerebrovascular secundario a la ateroesclerosis

Accidente cerebrovascular secundario a la estenosis de la cartida
FUNDAMENTO DEL MTODO:
Los triglicridos son hidrolizados enzimticamente a glicerol, el cual,

mediante GK y GPO, libera el perxido de H que se valora mediante la
reaccin de Trinder, de acuerdo a las siguientes reacciones.
Triglicridos + H2O . LPL > Glicerol + c. Grasos.
Glicerol + ATP . GK > Glicerol-3-fosfato + ADP
Glicerol-3-P + O2 . GPO > Dihidroxiacetona-P + H2O2
H2O2 + 4-AF + p-clorofenol . POD > Quinona + H2O
MATERIAL
Espectrofotmetro
Tubos
Pipetas automticas
REACTIVOS:
Reactivo 1 Tampn GOOD Ph 7.5 50 mmol/L
p-clorofenol 2 mmol/L
Reactivo 2 Lipoproteinlipasa 150000 U/L
Vial enzimas Glicerol Kinasa 500 U/L
Glicerol-P-oxidasa 2500 U/L
Peroxidasa 440 U/L
4-Aminofenazona 0.1 mmol/L
ATP 0.1 mmol/L

Standard Sol. Triglicridos 200 mg/dL
MUESTRA:
Suero
TCNICA:
Blanco Standard Muestra

Standard -- 10L --
Muestra -- -- 10 L
Reactivo al uso 1.0 mL 1.0 mL 1.0 mL
1. Mezclar e incubar a 5 minutos a 37C 10 minutos a temperatura

ambiente.
2. Medir la D. ptica a 505 nm (490-550), frente al blanco de reactivos.
3. El color es estable 30 min.
Clculo
D.O.muestra
xconc.S tan dard conc.muestra
D.O.Stabdard
Factor de conversin: mg/Dl x 0.0113 = mmol/L
Conc. Standard: 200 mg/Dl
Valores normales
Valores sospechosos a partir de 150 mg/Dl (1.7 mmol/L)

Valores elevados a partir de 200 mg/Dl (2.26 mmol/L)
DATOS DEL PACIENTE.

NOMBRE: Ivonne Espinoza Cruz
SEXO: Femenino
EDAD: 42 aos.
FECHA: 4 de marzo del 2008.
LUGAR: Chilpancingo, Guerrero.
EXAMEN: Triglicridos
RESULTADO: 260 mg/dL
Agregar en un tubo de ensaye

1.0 mL de reactivo.
Agregar 10 microlitos de la
muestra (suero).
Mezclar e incubar durante 5 minutos

a 37C 10 minutos a temperatura ambiente.
Leer la muestra, no despus de 30

minutos.
DISCUSIN
En esta prctica se determin el nivel de triglicridos en la sangre, el

resultado obtenido se encuentra por encima de los valores normales
(hipertrigliceridemia), es posible que el paciente curse por una cirrosis,
dieta baja en protenas y alta en carbohidratos, sndrome nefrotico o
hipertiroidismo.
Puede existir un margen de error debido a un mal pipeteo o un mal tiempo

para hacer la lectura.
Los niveles de triglicridos varan con la edad y del tiempo que tenga el
paciente de haber ingerido alimentos.
CONCLUSIN.
La prueba de triglicridos es un anlisis que se utiliza para determinar el

nivel de estos en la sangre, as como tambin para evaluar la funcin
heptica y un posible riesgo cardiovascular.
Los triglicridos son transportados a todo el organismo para dar energa

o bien para ser almacenados como grasa.
La creatinina es una molcula de deshecho que se genera a partir del metabolismo

muscular. La creatinina proviene de la creatina, una molcula muy importante para la
produccin de energa muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se
convierte en creatinina cada da. La creatinina se transporta desde los msculos por medio
de la sangre hacia el rin. Los riones filtran la mayora de la creatinina y la eliminan en
la orina.
Aunque es una sustancia de deshecho, la creatinina es una prueba diagnstica esencial,

ya que se ha observado que su concentracin en sangre indica con bastante fiabilidad el
estado de la funcin renal. Si los riones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina
y por lo tanto sta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina puede avisar de una
posible disfuncin o insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten sntomas. Por
eso la creatinina suele figurar en los anlisis de sangre que se realizan comnmente.
MATERIALES
Pipeta automtica, de ul
Pipeta de 1ml
Muestra (sangre)
Espectrofotmetro
Tubos de ensayo
Cubetas de 1cc
Tubo tapa lila
REACTIVOS
Reactivo Tapa Blanca: solucin de cido pcrico
Reactivo Tapa Azul: solucin de hidrxido
Standard: solucin de creatinina 2 mg/dl.
PROCEDIMIENTO
1. Preparar el reactivo de trabajo, con la mezcla de los reactivos de los frascos de tapa
blanca y azul
2. Centrifugar la muestra de sangre a 3000 rpm por 5 minutos.
4. En tres cubetas de 1cc marcadas B (Blanco), S (Estndar) y D (Desconocido), colocar:
B S D
R. Trabajo 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
Estndar - 100 ul -
Muestra - - 100 ul
5. Leer la densidad ptica en espectrofotmetro a 492 nm.

6. Leer la absorbancia despus de 30 s de haber puesto la cubeta, esperar a los 90 s y
tomar anotar una nueva medida.
7. Calcular el resultado.
NORMALIDAD
Valores normales de Creatinina:
0,7 1,4 mg/dl Varones
0,6 1,1 mg/dl Mujeres
Los adultos con mucha masa muscular pueden tener ms creatinina en la sangre que la
poblacin normal. Las personas ancianas, por otro lado, pueden tener menos creatinina
en la sangre de lo normal.
RESULTADOS
Absorbancia
Blanco 0,000 nm
Estndar Muestra
30 s 0,608nm 0,527nm
90 s 0,623nm 0,532nm
0,608 0,623 = 0, 015

0,527 0,532 = 0,005
0,005 / 0,015 = 0,333 * 2 = 0,666 Normal
Resultado de Creatinina 0,66 mg%
CONCLUSIN
Realizamos una determinacin de creatinina cintica, tomando la cantidad de reaccin a
los 30s y a los 90s. Se puede notar, mientras se esperar los segundos, el incremento de
la medida de absorbancia en el espectrofotmetro. Por cual trabajamos junto al
espectrofotmetro para tener una medida ms exacta y, al colocar el reactivo en la cubeta
inmediatamente iniciar la medicin de la absorbancia. El color del reactivo fue azul, una
vez actuado sobre la muestra y estndar result amarillo.
Para obtener el resultado se rest la absorbancia de los 90s menos la de los 30s, una vez
obtenido el resultado se dividi la muestra para el estndar y este resultado se multiplic
para la cantidad conocida del reactivo estndar: 2 mg/dl. As obteniendo el resultado de
0,66 mg/dl, el cual entra en el rango de la normalidad.
Propsito
Determinar la actividad de la enzima GPT en suero humano.
Los aminocidos tienen un rol fundamental en los seres vivientes, ya que constituyen
protenas y son precursores de algunas hormonas y otros compuestos de inters biolgico
(neurotransmisores, histamina, anillos porfirnicos, nucletidos, etc.). El organismo puede
sintetizar una parte de los -aminocidos para el suplemento proteico y otra parte proviene
de la dieta (aminocidos esenciales).
Las transaminaciones son reacciones de intercambio de un grupo amino entre dos grupos
carbonados, siendo reemplazado el grupo amino por una funcin cetona. El papel de las
transaminaciones es doble:
1. Permiten realizar la interconversin de los aminocidos.
2. Posibilitan la separacin de la parte nitrogenada de los aminocidos apartados en
exceso, constituyendo el primer paso de catabolismo de aminocidos.
Las transaminasas son enzimas que cumplen la funcin de catalizar las transaminaciones para
la produccin de los aminocidos necesarios para la sntesis de protenas en el hgado. La
Aspartato Aminotransferasa o Glutmico Oxalactico Transaminasa (AST o GOT) se localiza
sobre todo en la mitocondria y est presente en otros rganos adems del hgado, como son:
el miocardio, musculo esqueltico, riones, cerebro, pncreas, pulmn, leucocitos y
eritrocitos. Por el contrario la Alanino Aminotransferasa o Glutmico Pirvico Transaminasa
(ALT o GPT) se localiza fundamentalmente a nivel citoslico o en el hepatocito, lo que explica
su mayor especificidad.
Determinaciones RANDOX
Mtodo colorimtrico (Reitman y Frankel) para la determinacin de transaminasas en suero.
La actividad de las transaminasas es proporcional a la cantidad de oxaloacetato y piruvato
formados en un tiempo prefijado, medidos colorimtricamente por la accin de la 2,4-
dinitrofenil-hidrazina (DNFH) en un medio alcalino (tampn fosfatos: 100 en GOT;
150 en GPT).
GOT/AST GPT/ALT
La AST/GOT, cataliza la transferencia del grupo La ALT/GPT, cataliza la transferencia del grupo
amino del aspartato al oxoglutarato, con la amino de la alanina al oxoglutarato, con la
formacin de glutamato y oxaloacetato. Se formacin de glutamato y piruvato. Se mide por
mide por la monitorizacin de la concentracin la monitorizacin de la concentracin de piruvato
de oxaloacetato hidrazona formado con 2,4- hidrazona compuesto de 2.4-dinitrofenil-
dinitrofenil-hidrazinina. hidrazina.

+ +
. .
> + > +
Valores Normales
GOT/ASP El valor de transaminasas disminuye:
Hombres 8-30 En caso de embarazo.
Mujeres 6-25 Insuficiencia vitamina B6.
El valor de transaminas aumenta debido a:
GPT/ALT
Hombres 8-35 Anomalas hepticas: hepatitis virales, infecciosas o toxicas,
Mujeres 6-25 cncer de hgado o cualquier otra enfermedad que cause destruccin
de las clulas hepticas.
Otras patologas: enfermedades autoinmunes, obesidad, sobrepeso, alcoholismo, miopatas,
infarto al miocardio, parasitosis y pancreatitis.
Esfuerzos musculares y traumatismos.
Edad: personas mayores de 60 aos pueden presentar niveles muy elevados de transaminasas.
Diagrama de Flujo
Extraer 2-3mL de sangre

venosa y colocar en un tubo
con heparina.
Con un ayuno no menor

a 8 hrs y no mayor a
12hrs.
Centrifguar por 15 minutos
a 2000rpm.
R1. Tampon R1. Tampon GOT
Tampon fosfato Tampon fosfato
L-alanina L-aspartato
-oxoglutarato Obtener el plasma -oxoglutarato
sanguineo sin
R2. 2.a-dinitrofenilhidrazina hemolizacion. R2. 2.a-dinitrofenilhidrazina
R3. NaOH R3. NaOH
Kit ALT/GPT Kit AST/GOT
Blanco Muestra Blanco Muestra
Aadir 100L de agua Aadir 100L de agua

Aadir 100L de muestra y Aadir 100L de muestra y
destilada y 500L del destilada y 500L del
500L del tampon (R1). 500L del tampon (R1).
tampon (R1). tampon (R1).
Mezclar e incubar a Mezclar e incubar a

37C por 30min. 37C por 30min.
Aadir 500L
Aadir 500L 2,4-DNFH (R2).
2,4-DNFH (R2).
Mezclar y reposar a Mezclar y reposar a

20-25C por 20 min. 20-25C por 20 min.
Aadir 5mL de Aadir 5mL de

NaOH (R3). NaOH (R3).
Mezclar y leer la Mezclar y leer la

absorbancia de la absorbancia de la
muestra a 546nm frente muestra a 546nm frente
al reactivo blanco al al reactivo blanco al
cabo de 5min. cabo de 5min.
Disposicin de Residuos
Inactivar con hipoclorito de sodio y desechar en la tarja.
Resultados Valores de Referencia Kit RANDOX

Lectura absorbancia ALT: 0.105 ALT U/L AST U/L
Lectura absorbancia AST: 0.025 0.025 4 0.020 7
0.050 8 0.030 10
Paciente: -- 0.075 12 0.040 13
Sexo: Femenino Edad: 20 aos 0.100 17 0.050 16
Valor ALT: 8.33 U/L Valor AST: 17.85* U/L Valores Normales en suero: hasta 12U/L
para ALT y AST.
Conclusiones
El procedimiento a seguir para la determinacin de actividad de transaminasas, as como los valores
normales, dependen del Kit a usar. Aunque la mayora de los Kits manejan una tcnica colorimtrica,
los reactivos, como las concentraciones y los clculos pueden variar, por lo cual es de suma importancia
indicar el Kit que se us y manejar los valores de referencia y normales que vienen indicados, para
evitar algn error en la determinacin.
En este caso, el valor de ALT se encuentra dentro del lmite indicado, mientras que el valor de AST lo
rebasa. Aunque el alto valor de AST puede ser causado por alguna patologa, cabe destacar que la
paciente no se encontraba en ayuno, por lo cual el valor obtenido de AST pudo ser afectado, tambin
puede ser debido a un error de toma de tiempos en las incubaciones.

Trabajo de Labo 2

Enviado por

Dados do documento

Descrição original:

Direitos autorais

Formatos disponíveis

Compartilhar este documento

Compartilhar ou incorporar documento

Opções de compartilhamento

Você considera este documento útil?

Este conteúdo é inapropriado?

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Trabajo de Labo 2

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE ICA

Facultad de Medicina Humana Daniel Alcides Carrin

2) Atemperar el reactivo a temperatura ambiente.

5) En otro tubo rotulado como muestra se colocan 10 ul de muestra y un mililitro

7) Verter el contenido de los tubos a las celdas para espectrofotmetro.

8) Calibrar el espectofotmetro a 500 nm, Teclear 500, luego second function y

9) Insertar el blanco y presionar zero abs

La concentracin de glucosa en la muestra:

3.- Preparar la 1 solucin de la manera siguiente:

4.- Leer la ABS en el espectrofotmetro a 505 nm.

6.- Preparar la 2 solucin de la manera siguiente:

7.- Leer la ABS en el espectrofotmetro a 505 nm.

9.- Preparar la 3 solucin de la manera siguiente:

10.- Leer la ABS en el espectrofotmetro a 505 nm.

La tolerancia a la glucosa se indica por la naturaleza de la curva de glucosa en sangre

El aumento del LDL-colesterol a nivel sanguneo lleva a un conjunto de proceso que

Principio del mtodo

El colesterol presente en la muestra origina un compuesto coloreado segn la reaccin

Esteres colesterol + H20 Colesterol + cidos Grasos

Colesterol + O2 4-Colestenona + H2O2

2H2O2+ Fenol+4-aminofenazona Quinonimia + 4 H2O

La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de colesterol presente en

R PIPES pH 6.9 90mmol/L

Blanco patrn Muestra

(A) Muestra X Conc. Patrn = mg/dL de Colesterol en la muestra.

Blanco Patrn Muestra

0.288 X 200 = 150.78 mg/dl de colesterol

Es importante su correcta realizacin ya que ayuda en el diagnstico oportuno de formacin

Determinar los niveles de triglicridos en la sangre.

Los triglicridos son acilgliceroles, un tipo de lpidos formados por una

Metabolismo de los triglicridos

Las grasas se hidrolizan en el intestino delgado en sus cidos grasos y

Niveles altos de triglicridos:

Puede tener varias causas:

Exceso de peso: los triglicridos aumentan generalmente a medida

Edad: los niveles de triglicridos aumentan regularmente con la

Medicamentos: Algunas drogas como los anticonceptivos, esteroides,

Herencia: algunas formas de altos niveles de triglicridos ocurren

Los niveles bajos de triglicridos pueden deberse a:

Dieta baja en grasas

Otras afecciones bajo las cuales se puede realizar el examen son:

Accidente cerebrovascular secundario a la ateroesclerosis

FUNDAMENTO DEL MTODO:

Los triglicridos son hidrolizados enzimticamente a glicerol, el cual,

Triglicridos + H2O . LPL > Glicerol + c. Grasos.

Glicerol + ATP . GK > Glicerol-3-fosfato + ADP

Glicerol-3-P + O2 . GPO > Dihidroxiacetona-P + H2O2

H2O2 + 4-AF + p-clorofenol . POD > Quinona + H2O

Reactivo 1 Tampn GOOD Ph 7.5 50 mmol/L

Vial enzimas Glicerol Kinasa 500 U/L

Glicerol-P-oxidasa 2500 U/L

Peroxidasa 440 U/L

4-Aminofenazona 0.1 mmol/L

ATP 0.1 mmol/L

Blanco Standard Muestra

Reactivo al uso 1.0 mL 1.0 mL 1.0 mL

1. Mezclar e incubar a 5 minutos a 37C 10 minutos a temperatura

Conc. Standard: 200 mg/Dl

Valores sospechosos a partir de 150 mg/Dl (1.7 mmol/L)

DATOS DEL PACIENTE.

Agregar en un tubo de ensaye

Mezclar e incubar durante 5 minutos

Leer la muestra, no despus de 30