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Instituto tecnolgico superior sucre

Gestin ambiental
Microbiologa 1
Nombre: Lucia Sanchez
Curso: 2D2
PRCTICA DE LABORATORIO No. 1

Tema: observacin de la Reproduccin Asexual en levaduras (Saccharomyces


cerevisiae)

Objetivos
Objetivo general: observar la reproduccin asexual de levaduras para comparar con
los conocimientos tericos adquiridos en clase

Objetivo especficos:
1. Diferenciar el tipo de reproduccin entre las levaduras y las bacterias.
2. Determinar la importancia de la glucosa en los procesos metablicos de las
levaduras y los seres vivos

Marco terico
Los hongos son microorganismos eucariotas pluricelulares filamentosos, no presentan
pigmentos fotosintticos y son quimiohetertrofos aerobios estrictos. A diferencia de las
plantas, presentan un bajo grado de diferenciacin en los tejidos.
Poseen pared celular contiene quitina1 un polisacrido que le da rigidez y es responsable
de su morfologa y en ocasiones celulosa. Algunos hongos presentan cpsula, formada
por polisacridos, con propiedades inmungenas y antifagocitarias.
La estructura o cuerpo vegetativo de un hongo se denomina talo3. El talo est formado
por filamentos, o hifas, de unas 5um de dimetro, que generalmente estn ramificadas.
Las hifas son tubos largos que estn formadas por la pared celular de quitina (componente
mayoritario) y el citoplasma con sus inclusiones y ncleos con la informacin gentica.
En el citoplasma se realiza la actividad bioqumica del hongo.
Las hifas pueden estar separadas en clulas por paredes transversales (septos) en los
hongos superiores (Eumicetos), o carecer de paredes en los hongos inferiores
(Ficomicetos2).

1
Quitina: es de estructura similar a la celulosa pero en la que se han sustituido los grupos hidroxilos del
2 carbono por grupos NHCOCH3. Aparece en la pared celular de hongos, exoesqueleto de insectos y
caparazn de los crustceos.
2
Ficomicetos: carecen de septos y son uninucleados por muy ramificadas que estn las hifas
El conjunto de hifas se llama micelio. En el micelio se distinguen dos partes: una que
penetra en el medio de cultivo y se extiende por su superficie (micelio vegetativo), y otra
que se proyecta y contiene las esporas (micelio reproductor o areo).
Los hongos crecen por el extremo de las hifas (crecimiento apical). Una pequea cantidad
de micelio es suficiente para la formacin de un nuevo talo.
Levaduras
Las levaduras son hongos que crecen generalmente por gemacin, en forma de agregados
sueltos de clulas independientes, que pueden ser globosas, ovoides, cilndricas o
alargadas.
En algunos casos, forman cadenas de clulas alargadas (pseudohifas3), adheridas de modo
suelto (blastospora), semejantes a un micelio, por lo que se les denomina pseudomicelio.
Algunas especies forman breves extensiones de verdadero micelio, con frecuencia
septado (tabicado). Hay especies de levaduras esporgenas. No existe, por tanto, un lmite
de separacin definido entre levaduras y otros hongos que forman un micelio tpico.
Algunos hongos patgenos para el hombre presentan dimorfismo, pueden existir en la
naturaleza en forma de levadura (forma parasitaria) o en forma filamentosa (forma
saprfita).
Las levaduras, cuando crecen sobre medios slidos, forman colonias de aspecto
caracterstico que recuerdan a las colonias bacterianas. En casi todas las especies de
inters industrial, el modo habitual de reproduccin vegetativa es por gemacin. A
diferencia de los mohos, las levaduras no pueden identificarse solamente por sus
caracteres morfolgicos; se precisa la ayuda de pruebas bioqumicas para la identificacin
especfica.
Reproduccin asexual
Reproduccin asexual (hongos imperfectos) Los hongos que tienen reproduccin asexual
o desconocida (estado anamorfo) se denominan Deuteromycetos.
a. Gemacin6 en levaduras (unicelulares)
b. Fragmentacin de las hifas (utilizado para resiembras en laboratorio)
c. Esporulacin por germinacin de esporas
Las esporas son estructuras unicelulares de resistencia que contienen toda la informacin
gentica necesaria para el desarrollo completo de un nuevo hongo.
La estructura del hongo que produce las esporas asexuales se denomina conidifora. Se
forman por estrangulamiento del extremo de las hifas. Los conidiforos son hifas
especializadas que presentan gran diversidad de forma, color, tamao, tipo de septacin,
etc.

3
Pseudohifas: se diferencian de las hifas verdaderas porque no tienen septos verdaderos,
sino estrechamientos o constricciones.
Dichas estructuras formadoras de esporas tienen gran importancia en la determinacin
taxonmica de los hongos. Las agrupaciones de esporas que all se forman se denominan
conidios.
Glucosa en el metabolismo
La glucosa es un tipo de hidrato de carbono, que es un compuesto de carbono, oxgeno e
hidrgeno. Especficamente, es un monosacrido, que significa "unidad de azcar
simple". Los monosacridos pueden ocurrir en la naturaleza por s solos o se pueden
combinar en carbohidratos ms grandes. Los carbohidratos comunes que contienen
glucosa incluyen el azcar de mesa, el azcar de la leche y el almidn. Los seres humanos
utilizan la glucosa como combustible celular principal, y la levadura lo hace tambin; en
ambos casos, es una importante fuente de energa.
Metabolismo aerbico
Si bien hay muchas especies diferentes de levaduras y difieren metablicamente unas de
otras, todas pueden metabolizar la glucosa en condiciones aerbicas, que significa "con
oxgeno". Esto da como resultado la produccin de una gran cantidad de energa, as como
el dixido de carbono como producto de desecho y agua. Estos son los mismos productos
de desecho que se forman cuando se metaboliza la glucosa para obtener energa. En
general, si el oxgeno est presente, la levadura lo utiliza para procesar la glucosa, ya que
es mucho ms eficiente que la metabolizacin de la glucosa sin oxgeno.
Metabolismo anaerbico
Si no hay oxgeno presente, algunas especies de levadura pueden sobrevivir y pueden
metabolizar la glucosa a travs de una va alternativa que resulta en la formacin de
significativamente menos energa y diferentes productos finales. Los productos del
metabolismo anaerbico (que significa "sin oxgeno") son el dixido de carbono y etanol,
que es el alcohol que se bebe. Los seres humanos no producen los mismos productos
durante el metabolismo anaerbico de la glucosa, que produce cido lctico en su lugar.

Materiales
- Microscopio
- 2 Vasos de precipitacin
- Tela de asbesto
- Cuchara
- 1 Agitador
- 1 Mechero
- Reloj
- Portaobjetos y cubreobjetos
- Mandil
- 2 Goteros
- Papel toalla
- Jabn lquido
Reactivos:
- Azul de metileno
- 20 gramos de azcar
- Agua destilada
- Levadura de pan (20 gramos)

Metodologa
Se realiza la limpieza del rea de trabajo y de los materiales a utilizar durante la misma
prctica luego se deposita la levadura en un vaso de precipitacin con 50 ml de agua, y
se agita hasta obtener una solucin uniforme.
Despus se Coloca una gota de solucin de levaduras en un portaobjetos, la cual debe
estar cubierta con el cubreobjetos, luego se observa el microscopio con el objetivo 10x
localizando a las levaduras y ms tarde cambiar al objetivo de 40x, para anotar las
observaciones pertinentes; se sujeta el aro metlico al soporte universal, colocando la
tela de asbesto y prendiendo el mechero de alcohol.
Por otro lado se Agrega una cucharada de azcar a la solucin de levaduras y se agita
suavemente para despus colocar el vaso sobre la tela de asbesto y calentar durante 10
segundos, se retira el mechero y esperar 5 minutos. Ahora bien se Agita la solucin y se
coloca una gota de la muestra en un portaobjetos, cubrindola y colocndola en el
microscopio. Luego se Observa las levaduras con los objetivos de menor y de mayor
aumento, retirar la preparacin del microscopio y levantar el portaobjetos, se aade una
gota de azul de metileno y repetir el enfoque anterior.
Finalmente se Identifica las clulas de levaduras con sus gemas y las clulas hijas
adheridas a las madres; se distingue el ncleo de las clulas y se anota todas las
observaciones antes y despus de la tincin
Resultados

Fig1: levaduras disueltas en agua destilada con lente de 40x

Fig2: levaduras disueltas en agua destilada con azul de metileno, en el lente de 40x
Fig3: levaduras mezcladas con glucosa y reposadas cinco minutos, con lente de 40x

Fig4: levaduras mezcladas con glucosa y reposadas quince minutos, con lente de 40x

Discusin
Los resultados de la observacin de levaduras dice que:
Las colonias de levaduras suelen ser de color crema, ms o menos lisas, o de
aspecto seco y plegado, y de tamao variable. Por ello, el aspecto
morfolgico de la colonia no representa un habitualmente carcter
distintivo importante entre las diferentes especies. (Egusquiza, 2009)
Por lo que en comparacin con nuestros resultados obtenemos una variacin en cuanto
al color de las levaduras aunque cabe recalcar que nosotros utilizamos un reactivo (azul
de metileno) por lo que su color se ve afectado, en cuanto a su aspecto ms o menos
liso, de aspecto seco, plegados y de tamao variable obtuvimos los mismos resultados
los cuales se pueden observar en la Fig.1
Segn los resultados de la observacin de la reproduccin asexual de las levaduras:
Clulas de distintos tamaos; las pequeas corresponden a clulas recin
formadas por gemacin que an no han alcanzado su tamao normal.
Clulas reproducindose por gemacin. El contacto, en algunos casos, entre
una clula grande y otra pequea indica que las dos clulas hijas que
acaban de formarse por gemacin an no se han separado.
Las distintas tonalidades ocres del citoplasma indican la presencia de
grnulos de glucgeno (polisacrido de reserva de los hongos) en el
citoplasma. (Herce, 2012)
Podemos deducir que los resultados son los mismos ya que por la presencia de glucosa
en la mezcla de levaduras con agua destilada y dejndola reposar por 15 minutos,
nosotros tambin pudimos observar la gemacin asexual de estos hongos.
Cabe recalcar que con la ayuda del reactivo azul de metileno, se pudo distinguir la
membrana, el citoplasma y el ncleo de estos como se puede observar en la Fig.4

Conclusiones
Nosotros llegamos a la conclusin de que La reproduccin Asexual es un proceso en el
cual solo interviene un progenitor y solo ocurre en organismos unicelulares como las
levaduras, est clula se divide en dos y forma dos nuevas clulas idnticas.
Por lo tanto la diferencia que hay es que el tipo de reproduccin de las bacterias a
nicamente asexual y se reproducen por fisin binaria en cambio las levaduras tienen
los dos tipos de reproduccin, sexual y asexual, a su vez la asexual se divide en
reproduccin por brotacin y gemacin y por biparticin
Finalmente la glucosa es importante en el proceso de gemacin asexual por que provee
de energa a las clulas para completar dicho proceso

Cuestionario
Qu microorganismos son de mayor tamao: las bacterias, o las levaduras?
Las levaduras ya que miden 1-10 um ancho por 2-3 um de longitud mientras que las
bacterias miden 2 m de largo por 0,5 m de dimetro
Qu clase de microorganismos son las levaduras?
Son organismos eucariotas, clasificados como hongos, ya sean ascomicetos o
basidiomicetos microscpicos, con forma unicelular predominante en su ciclo de vida,
generalmente caracterizados por dividirse asexualmente y sexualmente
Cul es la forma de reproduccin de las bacterias y las levaduras; y cul es la
diferencia entre estos dos tipos de reproduccin?
Las bacterias se reproducen de manera asexual, a travs de una divisin celular llamada
mitosis, una vez que alguna ha alcanzado el tamao propicio. Como resultado, de una
bacteria se forman dos nuevas idnticas, lo cual puede llegar a ser, en casos
particularmente veloces, cada 9,8 minutos.
Mientras que las levaduras tienen los dos tipos de reproduccin, sexual y asexual, a su
vez la asexual se divide en reproduccin por brotacin y gemacin y por biparticin
Qu funcin tuvo la glucosa durante la prctica?

Para qu se someti la muestra a una temperatura mayor?


Para conseguir la temperatura adecuada para las levaduras, la recomendada para una
buena accin de la levadura es 26C. Temperaturas ms bajas retendrn la accin,
temperaturas altas debilitan su accin (sobre 35C) Y sobre los 60C se muere
totalmente. Para una buena conservacin se puede refrigerar a 5C.

Bibliografa

Herce, E. Q. (2012). Observacion de levaduras . Blogger.


http://ccnnvalledeloja1eso.blogspot.com/2012/02/observacion-de-levaduras.html

Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC). (2014). Seres modlicos entre


la naturaleza y el laboratorio
http://www.seresmodelicos.csic.es/llevat.html

Egusquiza, A. D. (2009). GUIA DE LABORATORIO MICROBIOLOGIA II.


https://es.scribd.com/doc/39929921/PRACTICA-6-ANALISIS-MICROBIOLOGICO-
DE-LOS-HONGOS

Hendrickson, Kirstin. (2001). Biochemistry


https://muyfitness.com/metabolismo-levadura-glucosa-info_31033/

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