Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
II UNIDAD
CURSO:
Inmunologa
APELLIDOS Y NOMBRES:
PRACTICAS:
PROFESORA:
Dra. Manuelita
SECCION Y MESA:
A mesa 1
TRUJILLO-PERU
2017
PRACTICA N5
I. INTRODUCCIN:
II. OBJETIVOS:
2. Reaccin de precipitacin
IV. DISCUSIN:
Las reacciones de aglutinacin y de precipitacin son la base de la mayor parte de las tcnicas
inmunolgicas. Su principio se basa en la reaccin antgeno-anticuerpo. Para comprender lo
anterior es necesario definir qu es un antgeno y un anticuerpo. Antgeno es una sustancia
de alto peso molecular, con cierta rigidez estructural y que tiene la particularidad de ser
parcialmente metabolizado por clulas especializadas llamadas macrfagos, por lo tanto
es capaz de generar una respuesta inmune en un organismo que la detecte como un agente
extrao. Mientras que un anticuerpo es una glicoprotena, producida por linfocitos B
activados, llamados clulas plasmticas, como respuesta a la presencia de un antgeno en el
organismo, a su vez los anticuerpos pueden ser producidos por lneas celulares in vitro, como
es el caso de la produccin de anticuerpos monoclonales. Dichos anticuerpos llamados
tambin inmunoglobulinas, se presentan en cinco clases principales, IgG, IgM, IgA, IgD e
IgE, que se diferencian entre s por sus caractersticas fsicas, qumicas y biolgicas.1,2,3 La
capacidad inmunognica de distintas partculas, es en orden decreciente la siguiente:
protenas, glicoprotenas, polisacridos, lpidos y azcares. Las reacciones de precipitacin
son medibles en cantidad y son fciles de ejecutar.
Las tcnicas de aglutinacin son slo semicuantitativas y algo ms difciles. La
aglutinacin de los antgenos nativos insolubles o de las partculas recubiertas por el antgeno
puede evaluarse a simple vista con o sin la ayuda del microscopio. Entre las ventajas de las
reacciones de aglutinacin estn su alto grado de sensibilidad y la enorme variedad de
substancias identificables a travs del uso de partculas que estn recubiertas por antgeno o
por anticuerpo. Segn Coombs existen 3 requerimientos principales en las pruebas de
aglutinacin:
1. Disponibilidad de una suspensin estable de clulas o de partculas.
2. Presencia de uno o ms antgenos cercanos a la superficie.
3. Conocimiento de que los anticuerpos "incompletos" o no aglutinables no son localizables
sin modificacin (reacciones antiglobulina).
Aglutinacin directa:
Un antgeno celular o de partculas insolubles es aglutinado directamente por el anticuerpo.
Un ejemplo de esto es la aglutinacin de los eritrocitos del grupo A por antisueros anti- A,
la aglutinacin de los eritrocitos RH positiva por el antisuero anti-D o la aglutinacin del
antgeno brucelar por anticuerpos anti-Brucella. Gran cantidad de partculas como pueden
ser eritrocitos, bacterias, hongos y virus pueden ser aglutinados por anticuerpos sricos,
algunas veces de manera inespecfica y otra muy especfica, siendo sta ltima, respuesta a
una previa inmunizacin del organismo productor de los anticuerpos sricos. Las pruebas
para identificar anticuerpos especficos son llevadas a cabo titulando seriadamente
antisueros en diluciones al doble en presencia de una cantidad constante de antgeno.
Aglutinacin indirecta:
Se refiere a la aglutinacin de las clulas recubiertas de antgeno o a las partculas inertes
que son portadoras pasivas de antgenos solubles. Se tienen ejemplos de lo anterior en la
utilizacin de partculas de gelatina en la bsqueda de anticuerpos contra Treponema
pallidum por aglutinacin pasiva (TPPA), la fijacin del ltex para VDRL en la sfilis y en
la utilizacin de eritrocitos en la prueba de hemaglutinacin indirecta (HAI) en la bsqueda
de anticuerpos contra Tripanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas. De
manera alterna, el antgeno puede ser localizado recubriendo partculas de ltex o eritrocitos
con anticuerpo purificado y practicando la llamada aglutinacin inversa
Hemaglutinacin viral:
Otra categora de aglutinacin que involucra la aglutinacin espontnea de los eritrocitos por
ciertos virus, es la reaccin de hemaglutinacin viral, la cual puede inhibirse de manera
especfica en presencia de anticuerpos antivirales. Por lo tanto, la hemaglutinacin viral
puede emplearse para medir la cantidad de virus o para determinar, por inhibicin homloga,
el ttulo de los anticuerpos dirigidos en contra de los virus hemaglutinantes.
Inhibicin de la aglutinacin:
La inhibicin de la aglutinacin, si se arregla de manera cuidadosa con antgenos altamente
purificados, puede ser usada como un indicador sensible de la cantidad del antgeno en
diversos lquidos de los tejidos.
Las macromolculas pueden difundir libremente a travs de geles; dicha difusin esta
limitada por la concentracin del gel. Empleando soportes adecuados, en especial aquellos
que como base tienen agar disuelto en electrolitos, es posible hacer migrar antgenos y
anticuerpos de modo que al encontrarse interaccionen. Pueden utilizarse tambin geles con
base de pectina, alginatos, pliacrilamida y aun tiras de acetato de celulosa gelatinizado.
Los precipitados que se originan se visualizan como ntidas bandas de precipitacin, que
permanecern estables mientras un mayor aflujo de molculas de los reactivos no provoquen
su redisolucin.
Se han descripto numerosas tcnicas cualitativas y cuantitativas basadas en este principio,
entre las que pueden citarse la difusin simple monodimensional, difusin doble
monodimensional, difusin doble bidimensional, difusin radial, etc..
REACCIN DE PRECIPITACIN
V. CONCLUSIONES:
1. Se realiz algunas aplicaciones prcticas de la realizacin de la reaccin de
aglutinacin as como la tcnica de su ejecucin.
I. INTRODUCCIN:
II. OBJETIVO:
0.5 ml hemolisina
1 1
1
0.5 ml sangre 2 2
de carnero 3 3 0.5 ml C 2
4 4 activo 3
5 5 4
6 6 5
7 7 6
7
(-) LISIS
Llevamos a incubar
0.5 ml hemolisina a 37C por 15 - 30
1 1
1
0.5 ml sangre 2 2
de carnero 3 3 0.5 ml C 2
4 4 inactivo 3
5 5 4
6 6 5
7 7 6
7
(+) NO LISIS
V. DISCUSIN:
Una propiedad importante del sistema del complemento es que sus componentes son
enzimticamente alterados durante la reaccin, de modo que no reaccionarn en una
nueva secuencia de reacciones, es decir si el complemento es consumido durante las
reacciones antgeno-anticuerpo, esto es llamado fijacion de complemento y ocurre
cuando un anticuerpo de tipo IgG o IgM reacciona con el antgeno en presencia de
complemento, aun cuando ste no sea requerido en la reaccin.
La prueba de fijacin de complemento se lleva a cabo en dos fases. En la fase primera se
mezclan el suero del cobayo (previamente calentado a 36C) y el antgeno en presencia
de una cantidad determinada de complemento; esta mezcla es generalmente incubada
durante 30 minutos a 37C. Si se forman los complejos antgeno-anticuerpo, el
complemento es fijado. En la segunda fase se aade el sistema indicador que consiste en
glbulos rojos de carnero y anticuerpos contra glbulos rojos de carnero. La ocurrencia
de hemlisis indica que el complemento no fue utilizado por lo tanto, en la fase 1 no se
ha producido una reaccin Ag-Ac especfica. En cambio, la ausencia de hemlisis, indica
que el complemento ha sido fijado y por lo tanto que en la fase 1 se ha producido una
reaccin Ag-Ac, en este caso se considera una reaccin de fijacin del complemento
positiva, mientras que en el primer caso se considera negativa la reaccin de fijacin de
complemento. Utilizando un antgeno conocido, esta tcnica puede ser empleada para
detectar y medir anticuerpos presentes en sueros. Al ocurrir la reaccin del antgeno con
los anticuerpos del suero, sta reaccin Ag-Ac se puede poner de manifiesto mediante
una prueba de fijacin de complemento.
En Inmunologa, el sistema del complemento, uno de los componentes fundamentales
de la respuesta inmunitaria en la defensa, por ejemplo, ante un agente hostil. Consta de
un conjunto de molculas plasmticas implicadas en una danza bioqumica coordinada,
cuya funcin es de potenciar la respuesta inflamatoria, facilitar la fagocitosis y dirigir la
lisis de clulas incluyendo la apoptosis.1 Constituyen un 15% de la fraccin de
inmunoglobulina del suero.
Va clsica:
Denominada as porque se descubri primero. Su activacin es iniciada por
inmunocomplejos formados por IgG (Inmunoglobulina G) e IgM (Inmunoglobulina M).
Esta va inicia con la unin de dos (en el caso de la participacin de IgG) o ms (en el
caso de IgM) molculas de Inmunoglobulinas unidas a los antgenos respectivos.
Va alternativa:
Filogenticamente ms primitiva, su activacin fundamental no es iniciada por
inmunoglobulinas, sino por polisacridos y estructuras polimricas similares
(lipopolisacridos bacterianos, por ejemplo). Esta va constituye un estado de activacin
permanente del componente C3 que genera C3b. En ausencia de microorganismos o
antgenos extraos, la cantidad de C3b producida es inactivada por el Factor I. Cuando
C3 se une a una superficie invasora (evade la accin del Factor I), forma un complejo con
el Factor B, el cual se fragmenta por accin del factor D en presencia de Mg++. El
complejo C3bBb es altamente inestable y la va alterna no contina sin el rol estabilizador
de una protena circulante llamada properdina. Se forma de ese modo la C3 convertasa de
la va alterna (compuesta por C3bBb), la cual acta enzimticamente sobre molculas
adiccionales de C3, amplificando la cascada. Incluso algo de este C3b se puede unir a la
C3 convertasa y formar la C5 convertasa de la va alterna (C3bBb3b) que activara a C6,
convergiendo en los mismos pasos finales de la va clsica.
Va de las lectinas:
Es una especie de variante de la ruta clsica, sin embargo se activa sin la necesidad de la
presencia de anticuerpos.Se lleva a cabo la activacin por medio de una MBP (manosa
Binding Protein/proteina de unin a manosa) que detecta residuos de este azcar en la
superficie bacteriana,y activa al complejo C1qrs. De otra manera, una segunda esterasa,
la esterasa asociada a MBP acta sobre C4. El resto de la va es similar a la clsica
Estas vas producen una enzima con la misma especificidad: C3; y a partir de la activacin
de este componente siguen una secuencia terminal de activacin comn. El propsito de
este sistema de complemento a travs de sus tres vas es la destruccin de
microorganismos, neutralizacin de ciertos virus y promover la respuesta inflamatoria,
que facilite el acceso de clulas del sistema inmune al sitio de la infeccin.
A. Lisis de clulas
El MAC (Membrane Attack Complex/Complejo de ataque a la membrana) puede lisar
bacterias gram-negativas, parsitas, virus encapsulados, eritrocitos y clulas nucleadas.
Las bacterias gram-positivas son bastante resistentes a la accin del complemento.
B. Respuesta inflamatoria
Los pequeos fragmentos que resultan del clivaje de componentes del complemento, C3a,
C4a y C5a, son llamados anafilotoxinas. Estas se unen a receptores en clulas cebadas y
basfilos. La interaccin induce su degranulacin, liberando histamina y otras sustancias
farmacolgicamente activas. Estas sustancias aumentan la permeabilidad y
vasoconstriccin vascular. As mismo, C3a, C5a y C5b67 inducen monocitos y
neutrfilos a adherirse al endotelio para iniciar su extravasacin.
C. Opsonizacin
C3b es la opsonina principal del complemento. Los antgenos recubiertos con C3b se
unen a receptores especficos en clulas fagocticas, y as la fagocitosis es facilitada.
D. La neutralizacin de virus
C3b induce la agregacin de partculas virales formando una capa gruesa que bloquea la
fijacin de los virus a la clula hospedera. Este agregado puede ser fagocitado mediante
la interaccin de receptores del complemento y C3b en clulas fagocticas.
I. INTRODUCCIN:
Los glbulos rojos o hemates son clulas sanguneas, por lo tanto todos los tenemos. Sin
embargo, en la membrana de los glbulos rojos pueden existir unas protenas especiales:
son las glucoprotenas A y B. As, un glbulo rojo puede tener protena A, protena B,
tener ambas o no tener ninguna. De manera que un individuo tendr grupo sanguneo A
si sus glbulos rojos tienen la glucoprotena A en su membrana, siguiendo el mismo
criterio para el resto de los grupos (si no existe protena, entonces ser de grupo sanguneo
O).
As:
A B AB O
Grupo
sanguneo
Glbulos
rojos
En la Antgeno No
membrana Antgeno B Antgenos A antgenos
A yB
En el plasma Anti-B Anti-A No anticuerpos Anti-A y
Anti-B
De la misma manera, el factor Rh es otra protena que existe en los glbulos rojos de
algunas personas. Su nombre viene del mono en el que fue descubierta, el macacco rhesus.
El factor Rh positivo es un factor hereditario dominante.
Este asunto tiene especial importancia en donaciones de sangre. Como hemos visto, un
individuo A tiene en su plasma anticuerpos anti-B, as que no podr recibir sangre de un
individuo B, pues estos anticuerpos provocaran la coagulacin de la sangre del donante
en los vasos sanguneos de la persona receptora.
RECEPTOR
Este sistema explica la enfermedad hemoltica del recin nacido. Esta enfermedad, de
aparicin habitual en el segundo hijo, poda incluso llegar a provocar la muerte de ste.
Cuando la madre es Rh negativa, el padre Rh positivo y el beb Rh positivo, ste ltimo
puede estimular la produccin de anticuerpos de la madre, ya que los glbulos rojos del
hijo pasarn por la placenta a la madre. Son los anticuerpos anti-Rh, que podran
reaccionar contra los hemates del hijo.
Esta enfermedad, hoy en da, se puede prevenir mediante la vigilancia sistemtica de las
embarazadas Rh negativas y administrndolas adecuadamente la inmunoglobulina anti-
Rh.
En las transfusiones, tanto el donante como el receptor deben pertenecer al mismo grupo
sanguneo ABO y Rh. Slo excepcionalmente, se puede transfundir sangre de otros
grupos compatibles.
II. OBJETIVOS:
IV. RESULTADOS:
V. DISCUSIN:
V. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
I. INTRODUCCIN:
Existen las llamadas autovacunas usadas en el tratamiento del acn, extrayendo de las
pstulas pus que luego de ser plaqueadas, se siembran y aislan (staphilococus), as se
tiene la vacuna que se aplica al paciente directamente en la zona de donde procede el
antgeno.
La enfermedad es tan antigua como la propia existencia de los seres vivos. En la doble
vertiente salud-enfermedad el hombre ha intentado controlar los procesos de enfermedad,
para ello ha venido creando a travs de los tiempos una gran cantidad de armas para curar
las enfermedades, pero tambin ha procurado averiguar la manera de cmo prevenirlas.
Entre estos procedimientos contamos en la actualidad con los procesos de higiene e
inmunizacin, es en este ltimo apartado donde se encuentran las vacunas.
El proceso de inmunizacin consiste en aumentar las defensas del organismo ante los
agentes nocivos. Esto se puede lograr mediante dos procedimientos: la inyeccin de
sueros que contienen inmunoglobulinas, es decir, los anticuerpos o defensas que
desarrolla el organismo frente a una enfermedad (inmunizacin pasiva) y la inmunizacin
activa (vacunas).
Las vacunas son preparadas a base del agente que causa la enfermedad. Estas pueden estar
constituidas por: agente causante de la enfermedad vivo, aletargado (es decir, disminuido
en su capacidad de desencadenar la enfermedad), muerto o fracciones (trozos) del agente
productor de la enfermedad.
La palabra vacuna, luego derivada a vacunacin, fue propuesta por el propio Pasteur como
recuerdo de haberse realizado las primeras investigaciones en vacas enfermas de viruela.
Las vacunas con toxinas inactivadas, ttanos y difteria, son quizs las que conllevan la
metodologa menos sofisticada de todas y, por el contrario, es posible que sean de las ms
eficaces. Adems se pueden utilizar como carriers (portadores) de componentes menos
inmungenos. Por cierto, en estos sistemas debe tenerse muy presente que aunque ocurra
una respuesta colateral frente al toxoide tetnico nunca es suficiente y no disculpa de usar
las pertinentes vacunaciones antitetnicas.
Parece comprobado que los toxoides, tetnico o diftrico, la vacuna antipertussis acelular
y especialmente los adyuvantes de aluminio exacerban las respuestas de tipo Th2,
tericamente favorecedoras de enfermedades como el lupus o la atopia. Por el contrario,
la BCG, la tos ferina de clulas enteras, los adyuvantes derivados de bacterias o las
saponinas, incrementan una respuesta Th1, tericamente favorecedora de enfermedades
como la diabetes o la artritis reumatoide. A pesar de los temores, no se ha podido probar
que las vacunas modifiquen el equilibrio inmunitario hasta el punto de favorecer otras
enfermedades. Por el contrario, pudiera facilitar la maduracin de la respuesta inmune
(Figura 1).
Figura 1. Las vacunas, adems de ocasionar una respuesta especfica, es posible que
tengan algn tipo de influencia global sobre el sistema inmunitario.
Se sabe que algunas vacunas, como la de BCG, sarampin, pertussis de clula entera, y
coadyuvantes derivados de productos bacterianos, son estimulantes de una respuesta de
tipo Th1 que promueve inmunidad celular retardada y citotoxicidad.
III. PROCEDIMIENTO:
Control de esterilidad:
- Sembrar en medios enriquecidos (Tioglicolato, agar sangre), para ver si el germen
est vivo (Por 5,6 7 das).
IV. CONCLUSIONES:
V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFCAS: