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CAROS COLEGAS

No sentido de aprimorar as fontes bibliogrficas para esta cadeira e para que estas
estivessem mais sucintas e organizadas, decidimos elaborar um resumo de um dos livros
recomendados, o Kuby, recorrendo s 6 e 7 edies. Esta tarefa incidiu nos captulos
que correspondem aos temas que foram lecionados no decorrer das aulas.
Numa primeira leitura rpida pode parecer um pouco extenso. No entanto, tendo em
conta que se baseiam nica e exclusivamente no contedo do livro, tentmos condensar
a substncia sem omitir ou descurar algo que pudesse comprometer a sua compreenso
e correta apreenso. Procurmos recorrer sempre a uma linguagem assertiva e simples
que, ainda assim, ser sempre periodicamente pautada por erros de traduo ou
explanaes menos conseguidas.
Esperamos que com esta sebenta vos habilitemos a penetrar na intimidade do mundo
da Imunologia, deslindando ilustres mistrios que vos permitam, enfim, passar
cadeira.
Os autores
NDICE
CLULAS E RGOS DO SISTEMA IMUNITRIO (CAP. II) ............................................................ 3
ANTIGNIOS (CAP. III) .............................................................................................................. 19
ANTICORPOS (CAP. IV) ............................................................................................................. 25
INTERAES ANTIGNIO-ANTICORPO (CAP. VI) ..................................................................... 35
MAJOR HISTOCOMPATIBILITY COMPLEX (MHC) (CAP. VII).................................................. 37
PROCESSAMENTO E APRESENTAO DOS ANTIGNIOS (CAP. VIII) ......................................... 43
RECEPTOR DE CLULAS T (TRC) (CAP. IX) ............................................................................ 49
MATURAO, ATIVAO E DIFERENCIAO DOS LINFCITOS T (CAP. X) ............................... 53
MATURAO, ACTIVAO E DIFERENCIAO DOS LINFCITOS B (CAP. XI) ............................ 59
RECETORES E SINALIZAO: CITOCINAS E QUIMIOCINAS (CAP. XII) ...................................... 67
SISTEMA COMPLEMENTO (CAP. XIII)....................................................................................... 79
RESPOSTAS EFECTORAS - IMUNIDADE MEDIADA POR ANTICORPOS E CLULAS (CAP. XIV) .... 91
MIGRAO LEUCOCITRIA E INFLAMAO (CAP. XV) ........................................................... 103
REACES DE HIPERSENSIBILIDADE (CAP. XVI) ...................................................................115
RESPOSTA IMUNE S DOENAS INFECCIOSAS (CAP. XVII) .................................................... 125
VACINAS (CAP. XVIII) ...........................................................................................................133
SIDA E OUTRAS IMUNODEFICINCIAS (CAP. XIX) ...................................................................139
TOLERNCIA E AUTO-IMUNIDADE (CAP. XX) ........................................................................151
IMUNOLOGIA DA TRANSPLANTAO (CAP. XXI) ..................................................................155
CANCRO E SISTEMA IMUNITRIO (CAP. XXII) .......................................................................165
CLULAS E RGOS DO SISTEMA IMUNITRIO (CAP. II)
O sistema imunitrio (SI) possui vrios rgos e tecidos. Os rgos classificam-se em primrios
e secundrios, e esto ligados pelo sistema linftico. As clulas do SI so os leuccitos, que so
de vrios tipos. Os linfcitos so os nicos leuccitos que apresentam as propriedades de
diversidade, especificidade, memria, reconhecimento pertencem imunidade adquirida.
As restantes clulas tm funes de imunidade inata (como a fagocitose e activao do
complemento) e de activao de linfcitos, regulao da imunidade adquirida. H ainda
citocinas, molculas libertadas na resposta inflamatria, com funo de regulao imunitria e
de sinalizao.

HEMATOPOIESE
Todas as clulas derivam da HSC hematopoietic stem cell, indiferenciada e pluripotente. No
desenvolvimento das clulas do SI, h diferenciao das linhas celulares mielide (inclui a
eritride) e linfide. O comprometimento com uma linha depende do microambiente indutor
de hematopoiese, ou seja, da presena de factores de crescimento (p. ex. GM-CSF, G-CSF, M-
CSF) e citocinas, mas tambm da capacidade das clulas progenitoras em adquirir receptores e
resposta a esse estmulo. Os estmulos podem ser factores solveis que se difundem ou
molculas de membrana no estroma que provocam contacto clula a clula. Os linf. T e
macrfagos activados produzem estas substncias hematopoiticas.
A regulao da hematopoiese feita atravs de:
Citocinas produzidas pelas stem-cells na medula ssea.
Linfcitos-T activados e macrfagos.
Regulao gentica da expresso de determinados receptores de membrana.
Remoo de clulas por induo de apoptose.

3
Um erro em qualquer um
destes factores pode
levar a alteraes graves,
como proliferao
descontrolada
(culminando, p. ex. em
leucemias), induo
precoce ou inibio da
morte celular
programada, erros de
diferenciao.
A hematopoiese pode ser
estudada in vitro com
recurso a placas de Petri
com um meio com
clulas do estroma,
culturas de clulas
estaminais ou de clulas
progenitoras.
necessrio adicionar as
citocinas de crescimento,
os CSF (colony-
stimulating factors) e a EPO (eritropoietina).
A hematopoiese regulada ao nvel gentico - existem vrios genes responsveis pelo
desenvolvimento das linhas celulares. O estudo feito em ratinhos knockout, em que um gene
marcado para disrupo. Na ausncia da funo daquele gene, so estudadas as
consequncias. O gene GATA-2 est relacionado com as 3 linhas celulares (eritride, mielide e
linfide) e o factor Ikaros com a linha linfide.
A Morte Celular Programada um mecanismo homeosttico essencial cada clula tem um
tempo definido de sobrevivncia; no caso dos leuccitos, os linfcitos so os que apresentam
maior longevidade, at 20-30 anos (alguns linf. T); os neutrfilos, de apenas algumas horas ou
dias. A apoptose, o conjunto de mecanismos de morte celular programada, controlada por
vrios genes, entre eles o FAS e as caspases (indutor e proteases) e o Bcl-2 (inibidor). Esta famlia,
Bcl-2 e Bcl-X, codifica protenas que inibem a apoptose. So importantes no desencadear de uma
infeco, pois o organismo pode no conseguir produzir clulas suficientes. Inibindo-se a
apoptose, o nmero de clulas aumenta.
Uma activao do Bcl-2 leva a proliferao de clulas de linfoma. Por outro lado, aps
uma infeco necessrio eliminar o excesso de linfcitos.
Linfcitos T activados tm menores nveis de protena Bcl-2 e so mais susceptveis a
apoptose que linf. nave ou de memria.
Um estmulo antignico leva diminuio da susceptibilidade a apoptose. No timo,
glucocorticides tambm induzem a fase efectora da apoptose.

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Apoptose Necrose
Diminuio do volume celular
retraces da membrana, condensao do Aumento do tamanho e ruptura
citoplasma
Corpos apoptticos Extravasamento do contedo celular
na membrana, com os organelos, para com libertao de enzimas lticas e
destruio controlada por macrfagos inflamao
Cromatina condensada e fragmentao do
DNA
As clulas estaminais hematopoiticas podem ser enriquecidas h estudos que indicam que
existem antignios de diferenciao, que marcam as clulas que j entraram na hematopoiese
e perderam a pluripotncia. Por citometria de fluxo com cell-sorting e Ac Anti-Ag de
diferenciao possvel purificar as clulas de MO de tal modo que haja muito mais clulas
pluripotentes, CD34+ (marcador, apesar de no especfico, de clulas estaminais); nesta
elevanda concentrao de clulas pluripotentes, com os factores de crescimento adequados,
possvel uma clula originar todas as linhas hematopoiticas. Este mecanismo pode
transformar-se num tratamento de doenas como a SCID (Severe-combined Immunodeficiency).

CLULAS DO SISTEMA IMUNITRIO os linfcitos so as clulas centrais, responsveis pela


imunidade adquirida e por propriedades do sistema imunitrio como diversidade,
especificidade, memria e distino self/ nonself. Os restantes leuccitos desempenham
importantes papis de fagocitose e destruio de agentes estranhos, apresentao antignica,
secreo de citocinas.

Clulas Linfides
Constituem 20-40% dos leuccitos e 99% das clulas na linfa. O ser humano tem em mdia 1011
linfcitos em permanente circulao no sangue e linfa, com capacidade de migrao para os
tecidos. H 3 grandes populaes, com base na membrana e funo:
Linfcitos B;
Linfcitos T;
Clulas NK.
Os linfcitos B e T inactivados so pequenos, mveis, no-fagocitrios; no so distinguveis
morfologicamente. Linf. B e T que no interagiram com Ag so ditos nave; so clulas paradas
em G0, de citoplasma muito pequeno, ncleo com cromatina densa e poucos organelos. Tm
uma sobrevivncia muito curta. A interaco com o Ag na presena de certas citocinas leva
progresso do ciclo, aumentando o tamanho tornam-se linfoblastos. Os linfoblastos
proliferam e diferenciam-se em clulas efectoras e em clulas de memria. As clulas de
memria so semelhantes a pequenos linfcitos mas com molculas diferentes superfcie; as
efectoras so maiores e com mais organelos.
A diferenciao dos linfcitos pode ser avaliada pela reaco de anticorpos monoclonais com as
molculas de superfcie. Os anticorpos monoclonais que reagem com uma molcula de
membrana particular so agrupados em CD cluster of differenciation. Se no houver
reconhecimento por Ac conhecidos, mas por um novo Ac, atribudo um novo CD reflectindo
uma nova molcula.

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Linfcitos B
Matura na medula ssea em grande parte dos mamferos, incluindo o Homem (na Bolsa
de Fabricius nas aves).
Os linf. B maturos distinguem-se inequivocamente dos outros linfcitos pela sntese e
exposio na membrana de molculas de Ac, que servem de receptores de Ag, que so
directamente reconhecidos. O linfcitos B reconhecem Ag SOLVEIS e Ag ligados a
molculas.
Outras molculas de superfcie (muitas vezes no especficas de linf. B):
o CD45, na forma B220;
o Molculas MHC II permitem a funo como APC;
o CR1 e CR2 receptores de molculas do complemento;
o FcRII (CD32) receptor IgG;
o B7-1 (CD80) e B7-2 (CD86) interagem com CD28 e CTLA-4, molculas
reguladoras importantes na superfcie de diferentes linf. T, incluindo Th.
o CD40 interage com o CD40L na superfcie das Th, de modo essencial para a
sobrevivncia de linf. B estimulados por antignios e para a subsequente
diferenciao em plasmcitos ou linf. B de memria.
A activao e diferenciao de clones de linf. B com especificidade induzida
selectivamente por:
o Interaco entre Ag e Ac de membrana num linf. B nave (mas j maturo);
o Interaco com linf. Th e macrfagos.
O linf. B divide-se sucessivamente e diferencia-se num perodo de 4 a 5 dias, criando
PLASMCITOS e LINF. B DE MEMRIA. Os plasmcitos de um clone, com menor
quantidade de Ac de membrana, sintetizam e libertam novos Ac (especficos de Ag); so
clulas terminais, sem maior diferenciao; morrem aps 1 ou 2 dias.

Linfcitos T
Maturam no timo.
Tm receptores de Ag na superfcie: o TCR (T-cell receptor), que tem uma estrutura
diferente das Ig sendo, no entanto, relativamente semelhante no local de ligao do Ag.
O TCR no reconhece antignios livres, mas apenas Ag ligados a classes particulares de
molculas self, a maioria molculas codificadas pelo MHC. No reconhece Ag solveis,
portanto.

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Para ser reconhecido pela maioria dos linf. T, o Ag tem de ser apresentado com
molculas MHC na superfcie das APC ou de clulas infectadas por vrus, tumorais, de
enxertos.
Alm do TCR, os linf. T exprimem:
o CD3 (e outros complexos de polipeptdeos);
o CD4 (os linf. Th) ou CD8 (dimrica, os linf. Tc) - glicoprotenas;
o CD28 nos linf. T maduros; um receptor para o sinal co-estimulatrio das
molculas B7, nos linf. B e outras APC;
o CD40L (=CD154) no Th, ligando para a CD40 na superfcie das APC;
o CD45 uma molcula de transduo de sinal.
No geral, a expresso de CD4 ou CD8 restringe a classe de molculas MHC que so
reconhecidas; diferencia tambm duas subpopulaes: Th (T-helper, CD4+, restritos a
MHC classe II) e Tc (T-citotxicos, CD8+, restritos a MHC classe I). A razo normal
Th/Tc= CD4/CD8 2:1 pode estar alterada em imunodeficincias, doenas auto-
imunes, etc.
No entanto, esta classificao no absoluta. Os linfcitos CD4+ reconhecem MHC
classe II e os CD8+ MHC classe I; mas por vezes linf. CD4+ podem actuar como citotxicos
e alguns linf. Tc podem produzir citocinas e ter efeitos semelhantes a Th.
Th activado por apresentao de Ag+MHC II apenas expresso na APC; divide-se,
dando origem a um clone especfico para o mesmo complexo Ag-MHC II; este tipo de
linf. T secreta vrias citocinas que activam linf. B, T e outras clulas. Alteraes destas
citocinas levam a mudana na resposta imunitria por outros leuccitos. H muitos tipos
de Th, caracterizados por funes e padres de produo de citocinas diversos. Por
exemplo:
o Th1: padro de citocinas que facilita inflamao e activa linf. T e macrfagos;
o Th2: activa particularmente linf. B e respostas mediadas por anticorpos IL-4;
o Th17: produtores de IL-17; til para combate a fungos; pr-inflamatrio;
o Treg: linfcitos T-reguladores, CD4+, FOXP3+, CD25+;
Tc activado por apresentao Ag+MHC I na superfcie de uma clula self alterada, na
presena de citocinas prprias. Esta activao leva a clula a proliferar e a diferenciar-
se em CTL linfcito T citotxico (efector). As CTL produzem poucas citocinas; possuem
a capacidade para reconhecer e eliminar cl. self alteradas.
Outra subpopulao est sob pesquisa: Ts T-supressoras. As Ts so controversas a
supresso mediada por linf. T pode ser apenas uma consequncia de actividade Th ou
Tc, sem ser um tipo diferente.
No entanto, apesar de no
terem sido individualizadas
ainda, certo que alguns linf. T
auxiliam a supresso da
imunidade humoral e da
imunidade mediada por clulas.

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Clulas NK
Descobertas em 1976; 5-10% dos linfcitos; pequena populao de linfcitos granulosos
de grandes dimenses com citotoxicitade contra clulas tumorais sem imunizao
prvia.
Tm um papel importante na defesa contra clulas tumorais e contra clulas infectadas
com alguns vrus (no todos);
No possuem TCR nem Ac de membrana (no tm marcadores de superfcie de linf. T
nem B) reconhecem clulas-alvo de duas formas diferentes:
o Receptores NK para distinguir anomalias de superfcie noutras clulas, como
uma da expresso de molculas MHC I e perfis antignicos anmalos;
o ADCC Antibody-dependent Cell-mediated cytotoxicity: Reconhecimento de Ac
Anti-tumor ou Anti-viral ligados a estas clulas o organismo produz Ac que se
ligam aos Ag de superfcie de clulas alterada; os Ac so reconhecidos por
clulas NK, que tm CD16, um receptor da regio Fc da IgG. O receptor liga-se a
estes Ac causando destruio da clula marcada.
o Tm CD56 e CD16 superfcie; a CD16 um FcR para IgG;
Actualmente comea a reconhecer-se uma populao, as NK1-T. Este tipo de clulas
pode ser responsvel por uma resposta rpida que ocorre enquanto as respostas Th
ainda se esto a desenvolver. Tm caractersticas de cl. NK e de linf. T:
o Tm TCR, que ao contrrio do comum interage com molculas MHC-like (CD1)
em vez das molculas MHC I ou II reconhecidas pelo TCR dos linf. T.
o Tal como clulas NK, tm nveis variveis de CD16 superfcie, assim como
outros receptores tpicos de cl. NK; podem destruir clulas.
o Quando activadas, podem favorecer a produo de Ac pelos linf. B, tal como a
inflamao e o desenvolvimento e proliferao de linf. Tc.

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Fagcitos mononucleares
O sistema fagoctico mononuclear
consiste em moncitos circulantes
no sangue e macrfagos nos
tecidos. Na hematopoiese a linha
granuloctica-monoctica forma
promoncitos, que vo para o
sangue e se diferenciam em
moncitos. Os moncitos circulam
cerca de 8h no sangue; depois,
migram para os tecidos e
diferenciam-se em macrfagos
especficos de tecido ou em clulas
dendrticas. Na transformao
para macrfago a clula aumenta
o tamanho, o nmero e a
complexidade de organelos; a
capacidade fagoctica aumenta,
produzindo nveis mais altos de
enzimas hidrolticas; comea a
segregar factores solveis. Os
macrfagos podem estar fixos
num tipo de tecido ou livres.
Existem clulas derivadas de
macrfagos em diversos tecidos,
como os macrfagos alveolares, as clulas de Kupffer, as clulas mesangiais, as clulas da
microglia e os osteoclastos.
Os macrfagos esto geralmente quiescentes e so activados por uma grande variedade de
estmulos no decurso da resposta imunitria a fagocitose de Ag pode ser um dos estmulos
activadores; citocinas do linf. Th, mediadores inflamatrios e componentes da parede
microbiana podem tambm funcionar como catalisadores. No entanto, o IFN- libertado pelos
Th um dos mais potentes activadores de macrfagos.
Os macrfagos activados produzem respostas mais eficazes que os quiescentes:
Maior actividade fagocitria;
Maior capacidade de destruio celular;
Maior secreo de mediadores da inflamao;
Maior capacidade para activar clulas T;
Apenas os macrfagos activados produzem protenas citotxicas para eliminar
patogneos (cl. infectadas por vrus, tumorais, bactrias intracelulares);
Expressam nveis mais altos de MHC II so APCs (APC Antigen Presenting Cell). Existe
grande cooperao macrfago<->linf Th na resposta imunitria.
FAGOCITOSE Ingesto e digesto de Ag exgenos e endgenos (microorganismos, partculas
insolveis, clulas lesadas, factores de coagulao). Tem vrias fases:

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Quimiotaxis1: os macrfagos so atrados e movem-se em direco aos mediadores de
inflamao libertados no local.
Adeso: o Ag adere membrana clula do macrfago. As protenas isoladas bactrias
capsuladas aderem com mais dificuldade que bactrias no-capsuladas e partculas
virais.
Emisso de Pseudpodes: estimulada pela adeso, h protuses da membrana
plasmtica que rodeiam o material a fagocitar.
Fuso dos Pseudpodes: faz com que se crie o fagossoma, vescula com o material para
fagocitose, que entra na via de endocitose.
Fuso com lisossoma: Fagolisossoma, digesto por enzimas lisossomais.
Exocitose: dos produtos de digesto.
OPSONIZAO O macrfago possui ainda receptores de Ac: se o material a fagocitar est
coberto por Ac, h reconhecimento mais fcil e fagocitose mais eficaz do que do Ag por si s. O
Ac funciona como Opsonina, uma molcula que liga o Ag e o macrfago para promover a
fagocitose. Este processo chama-se opsonizao. (Mais informao no captulo sobre
antignios).
ACTIVIDADE CITOTXICA E ANTIMICROBIANA produzem substncias que destroem os materiais
fagocitados; muitos destes mediadores so espcies reactivas de oxignio (ROS).
Mecanismos de toxicidade dependentes do oxignio Os macrfagos activados produzem
ROS/ROIs (reactive oxigen intermediates) e RNIs (reactive nitrogen intermediates), com
potencial antimicrobiano. Durante a fagocitose existe uma exploso respiratria no
macrfago activado, activando vrias oxidases de membrana que produzem anio superxido,
perxido de hidrognio e outros agentes oxidantes, muito txicos. Com a exposio a Ag de
membrana de patogneos (LPS, p. ex.) e a IFN-, os macrfagos a expresso de NOS, a
produo de NO muito txico para bactrias, fungos, parasitas.
MECANISMOS DE TOXICIDADE INDEPENDENTES DO OXIGNIO os macrfagos activados sintetizam
lisozima + enzimas hidrolticas, que no necessitam de oxignio para actuar. Produzem tambm
defensinas, ricas em cistena, que formam canais permeveis a ies na membrana das bactrias.
As defensinas podem destruir muitas bactrias como S. aureus, S. pneumoniae, E. coli, P.
aeruginosa, H. influenzae. Produzem ainda TNF- (Tumor Necrosis factor ), citotxico para
(algumas) clulas tumorais.
PROCESSAMENTO ANTIGNICO E APRESENTAO apesar de muitos antignios ingeridos pelos
macrfagos serem degradados e eliminados, existe alguma apresentao. Com a activao do
macrfago mais complexos Ag-MHC II se deslocam para a membrana.
Secreo de Factores os macrfagos libertam muitas protenas importantes para a resposta
imunitria, como:
Citocinas IL-1, TNF-, IL-6 promovem resposta inflamatria, a IL-1 activa linf. T e a
combinao das 3 promove a febre (actua sobre o centro da termorregulao
hipotalmico); o TNF- causa morte celular;
Protenas do complemento so maioritariamente produzidas no fgado, mas tambm
nos macrfagos;

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Quimiotaxis ou quimiotaxia: Diz-se quando uma clula dirige o seu movimento/aco de acordo com a
concentrao/presena de algum elemento, como acontece com os macrfagos e os mediadores de
inflamao que sinalizam o local.

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Enzimas hidrolticas importantes na fagocitose, a acumulao pode levar a leso
tecidular.
Clulas granulocticas
Neutrfilos, eosinfilos ou basfilos, consoante a morfologia e propriedades tintoriais (afinidade
por ambos os corantes, pela eosina ou pela hematoxilina, respectivamente). So fagcitos
excepto os basfilos. Os neutrfilos (50-70% dos leuccitos) so mais numerosos que os
eosinfilos (1-3%) e os basfilos (<1%).

Neutrfilos
Produzidos na MO; libertados para o sangue perifrico, circulam 7-10h antes de
migrarem para os tecidos, onde duram poucos dias.
A MO liberta doses adicionais de neutrfilos na resposta infeco so geralmente as
primeiras clulas a chegar ao local de inflamao. H Leucocitose (aumento do nmero
de leuccitos em circulao) na resposta a infeces.
Tm ncleo trilobado, tendo por vezes o nome de PMN (polimorfonucleares).
Extravasamento: movimento dos neutrfilos circulantes para os tecidos. Ocorre em
vrios passos:
o A clula adere ao endotlio vascular; entra nos espaos entre clulas endoteliais
adjacentes; passa a membrana basal do endotlio, saindo completamente do
espao vascular e entrando no tecido.
Uma srie de factores quimiotcticos, produzidos na inflamao, promovem o
recrutamento dos neutrfilos para o local: molculas do complemento; componentes
da coagulao; citocinas produzidas por linf. T activados e macrfagos.
Os neutrfilos tm grnulos primrios (maiores, mais densos, tm peroxidase, lisozima
e enzimas hidrolticas) e secundrios (tm colagenase, lactoferrina, lisozima) e as
enzimas lticas e bactericidas esto em ambos; os grnulos fundem-se com fagossomas
para digesto e eliminao do contedo. Tm mecanismos aerbios e anaerbios para
produzir substncias antimicrobianas; matam os microorganismos ingeridos mais
frequentemente que os macrfagos; tm uma capacidade respiratria superior, criando
mais intermedirios reactivos de oxignio e de azoto; expressam nveis maiores de
defensinas que os macrfagos.

Eosinfilos
Clulas fagocitrias de ncleo bilobado que migram para os tecidos; papel menos
importante que os neutrfilos excepto no que toca ao combate a parasitas os seus
grnulos lesam a membrana dos parasitas.

Basfilos
Granulcitos no fagocitrios; libertam substncias farmacologicamente activas dos
seus grnulos; importantes na resposta alrgica.

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Mastcitos
Os precursores so libertados indiferenciados pela MO; s se diferenciam na passagem
para os tecidos onde actuam por exemplo a pele, tecido conjuntivo, epitlio de
mucosas; os seus grnulos contm histamina e outros componentes; actuam com os
basfilos na reaco alrgica.

Clulas Dendrticas (DC)


O nome deve-se presena de
prolongamentos citoplasmticos mltiplos;
so difceis de isolar porque os
prolongamentos so facilmente lesados. H
muitos tipos de clulas dendrticas, mas a
maioria das clulas maturas tem a funo de
apresentar antignios aos linf. Th. Tipos de
clulas dendrticas conhecidas:
o Cl. de Langerhans, cl. dendrticas
intersticiais, cl. mielides, cl
dendrticas linfides.
o Tm origem na linha mielide e linfide da hematopoiese.
o Todas expressam altos nveis de molculas MHC classe I e classe II
simultaneamente e molculas da famlia de co-estimuladores B7.
So apresentadores de Ag mais potentes que macrfagos e linf. B (que
tm de ser activados antes de funcionarem como APC).
o As clulas imaturas adquirem os Ag por fagocitose ou endocitose e processam-
no para apresentao, j por clulas maturas; na resposta a uma infeco ou
inflamao tanto as formas imaturas como as maturas migram para os ndulos
linfticos, onde sensibilizam os linf. Th, que necessitam desta apresentao para
iniciar a sua resposta.
o Existem ainda as cl. dendrticas foliculares no tm origem na MO, no so
APC (no expressam molculas MHC II); no activam linf. Th. Localizam-se nos
folculos linfticos (ricos em linf. B) e tm na sua superfcie receptores Ac, que
recebem complexos Ag-Ac a ligao dos linf. B a estes Ag ligados pode ser
fundamental para a sua resposta.

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RGOS DO SISTEMA IMUNITRIO
So distinguveis, quanto funo, em primrios
timo e medula ssea , secundrios gnglios
linfticos, tonsilas, MALT, GALT, BALT e at
tercirios cutneo-associados.

rgos Linfides Primrios


Tm o microambiente para desenvolvimento e
maturao dos linfcitos Timo e Medula ssea

rgos Linfides Secundrios


Aprisionam antignios encontrados em tecidos ou
espaos vasculares especficos, so locais onde os
linfcitos maduros interagem efectivamente com
os antignios.
Os vasos sanguneos e linfticos ligam estes rgos,
criando uma unidade funcional.

rgos Linfides Primrios


Local onde os linfcitos imaturos, criados na
hematopoiese, maturam e se tornam
comprometidos com uma especificidade
antignica particular. A clula s se torna
imunocompetente depois de maturar num rgo
linfide primrio.

Timo
rgo mpar, nico, bilobado, no mediastino anterior. Tem o seu auge de desenvolvimento no
incio da puberdade (70g na infncia), quando o SI est no auge do desenvolvimento, atrofiando
depois (3g no idoso). Possui:
Crtex: densa, linf. T imaturos, timcitos;
Medula: esparsa, tem poucos timcitos.
Ambas as regies possuem elementos do estroma: rede de clulas epiteliais, dendrticas,
macrfagos que interagem com os timcitos. Algumas clulas epiteliais do crtex emitem
prolongamentos que envolvem mltiplos timcitos, criando complexos so as ditas nurse
cells.
Funo: maturar e seleccionar um repertrio de linf. T, que proteja o organismo de infeco.
Neste processo, os timcitos tm uma grande variedade de TCR criados aleatoriamente.
Assim, grande parte no tem a capacidade de reconhecer complexos Ag-MHC e s uma pequena
parte consegue. O timo tem a capacidade de induzir a morte dos timcitos que no reconhecem
os complexos Ag-MHC (SELECO POSITIVA) e dos que apresentam autorreactividade -reagem
com antignios MHC -self - e que poderiam causar autoimunidade (SELECO NEGATIVA).
95% dos timcitos no chega a maturar.
Doenas que afectem a funo do timo ou pessoas/animais timectomizados mostram muito
baixos nveis de linf. T circulantes e ausncia de imunidade mediada por clulas, tendo
imunodeficincia e susceptibilidade aumentada a infeces.

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Medula ssea
o rgo de origem e de maturao dos linfcitos B, a partir de progenitores linfides. As clulas
do estroma da medula ssea interagem com os linf. libertando citocinas necessrias para o seu
desenvolvimento.
Tal como na seleco tmica, um processo semelhante elimina os linf. B que no so funcionais
ou que so autorreactivos (Nota: os linf. B no precisam de apresentao antignica!).

Sistema linftico
Recebe o lquido intersticial que no retorna aos capilares linfa. A linfa flui para capilares
linfticos, depois vasos linfticos. O maior vaso linftico o canal torcico, que drena na veia
subclvia esquerda. A linfa no tem meio de propulso que no a bomba muscular esqueltica;
serve como modo de controlar a volmia no sistema circulatrio. Os vasos linfticos possuem
vlvulas unidireccionais que evitam o refluxo.
Quando um Ag desconhecido entra no sist. linftico levado para gnglios linfticos, onde
aprisionado. medida que a linfa passa pelos vasos e gnglios, fica enriquecida em linfcitos
transporte de linfcitos e Ag do tecido conjuntivo para tecido linfide organizado, onde a
resposta se processa. O sistema linftico tem ainda a funo de absorver as gorduras.
rgos Linfides Secundrios
Podem ser mais ou menos organizados:
Gnglios linfticos interpostos nos vasos linfticos;
Bao;
Tecido linftico difuso no sistema respiratrio;
Folculos linfticos.

Gnglios Linfticos
Tm a funo de preparar a resposta imunitria contra o Ag que chega e aprisionado.
Estruturas encapsuladas com uma rede reticular com linfcitos, macrfagos e clulas
dendrticas. As clulas dendrticas podem ser foliculares ou interdigitadas. Tem vrios vasos
linfticos aferentes (permitindo maior entrada, que se faz pelo crtex, favorecendo a captura de
Ag) mas apenas um eferente (de modo a concentrar a linfa em Ag e linfcitos no entanto,
apesar da grande proliferao linfocitria no gnglio, muitos linfcitos entram directamente do
sangue pelas vnulas ps-capilares, enriquecendo a linfa).
Crtex: linfcitos maioritariamente B, macrfagos, cl. dendrticas foliculares em
folculos linfticos.
Paracrtex: maioritariamente linf. T, cl. dendrticas interdigitadas. a zona dependente
do timo: sem a funo deste rgo, esta zona fica praticamente despovoada.
Medula: menos densamente povoada, clulas da linha linfide; tem plasmcitos.
Aps apresentao antignica pelas APC no paracrtex h activao, no mesmo local, dos linf.
B pelos Th. Estas clulas, juntas, proliferam. Os plasmcitos produzem alguma IgM e IgG.
Durante 4-7 dias da estimulao Ag, alguns linf. B e Th migram para o crtex, para os folculos
linfides.

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Folculos Linfides
H dois tipos de folculos linfoides primrio e secundrio:
O primrio difuso, com cl. dendrticas em rede e linf. B quiescentes.
O secundrio forma-se aps estimulao antignica; apresenta um anel concntrico de
linf. B, a rodear o centro germinativo, com linf. B em proliferao, alguns linf. Th,
macrfagos e cl. dendrticas foliculares. Apenas alguns linf. B activados chega a
proliferar no centro germinativo, havendo uma seleco rigorosa que leva apoptose
de 90%. Linf. B activados que produzam Ac com maior fora de ligao ao Ag so
seleccionados positivamente. Dos 10% que sobrevive, podem diferenciar-se em
plasmcitos produtores de Ac ou cl. de memria.
No folculo primrio, interaces entre lnf. B, linf, Th e cl. dendrticas leva ao desenvolvimento
para folculo secundrio. Os plasmcitos produzidos no centro germinativo migram para a
medula do gnglio ou so encaminhados, p. ex, para a MO.

Bao
Tem a funo de preparar respostas a Ag na corrente sangunea. Enquanto os gnglios esto
especializados na resposta a Ag nos tecidos em volta, o bao est especializado em filtrar o
sangue e Ag sanguneos/ em circulao. Responde, portanto, a infeces sistmicas. No tem
vasos linfticos em nmero significativo, porque todos os Ag e linfcitos que recebe so
provenientes da circulao sangunea. Possui:
Polpa branca: tem muitos linfcitos, maioritariamente T, que formam uma rede
periarteriolar com folculos linfides ricos em linf. B associados.
Zona marginal (rica em linf. B, em torno da rede periarteriolar, na periferia da polpa
branca), com macrfagos e cl. dendrticas interdigitadas que recebem os Ag e os
apresentam. Os linf. Th so activados, activam linf. B e ambos migram para o folculo. O
folculo primrio converte-se em secundrio, com o desenvolvimento do centro
germinativo e a proliferao e diferenciao de linf. B.
Polpa vermelha: rede de sinusides com macrfagos, poucos linfcitos. o local de
filtrao de hemcias.
A esplenectomia aumenta a susceptibilidade a infeces, principalmente bacteriemia, mas
tambm outras.

MALT Tecido Linfide Associado a Mucosas


A mucosa do aparelho digestivo (GALT Gut), respiratrio e urogenital (BALT Bladder) cria
uma rea muito ampla, propcia para a entrada de patogneos. Esta rea defendida pelo MALT,
que pode ser desde uma toalha difusa de clulas linfides na lmina prpria a formaes muito
organizadas, como tnsilas, folculos linfticos, placas de Peyer. O MALT tem uma importante
funo efectora, comprovado pelo seu elevado nmero de plasmcitos. Os plasmcitos das
mucosas produzem sobretudo IgA, a Ig das mucosas.
No intestino, o GALT tem linfcitos intraepiteliais, com TCR-, receptor pouco comum que tem
uma diversidade limitada de reconhecimento de Ag. O intestino tem a capacidade de endocitar
Ag directamente do lmen, pelas clulas M, sendo uma grande fonte de estimulao do SI. As
clulas M tm um formato especial, achatado, sem microvilosidades e com uma invaginao
basal. No plo basal ligam-se clusters de linf. B e T e macrfagos; os Ag endocitados so
directamente recebidos pelas clulas, que so mais facilmente activadas. As clulas M
predominam nos ditos locais de induo.

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A mucosa uma barreira muito funcional de proteco contra agresses, sendo essencial como
mecanismo de imunidade inata. Uma das razes so as tight-junctions entre clulas.
Curiosamente, alguns patogneos usam as clulas M como meio de entrada, causando a sua
destruio ou sendo simplesmente endocitados. So exemplos a Salmonella enteroinvasiva, a
Vibrio cholerae e o vrus da poliomielite.

Tecido Linfide Cutneo-Associado


A pele, importante barreira ao ambiente exterior, um tecido essencial na imunidade inata,
devido sua grande rea. A epiderme possui vrios tipos celulares com funo imunitria:
Os queratincitos libertam citocinas que podem induzir reaco inflamatria local; alm
disso, podem ser estimulados para exibirem molculas MHC II superfcie e
funcionarem como APC.
As clulas de Langerhans, na profundidade da epiderme, so clulas dendrticas.
Expressam altos nveis de MHC II superfcie e funcionam como potentes activadoras
de linf. Th. O seu padro de migrao para os gnglios linfticos descrito abaixo e
permite a integrao de todo o SI em respostas localizadas.
Tem tambm linfcitos intraepidrmicos, semelhantes a linfcitos intraepiteliais do
MALT (maioria CD8+ e com receptores T . Esto bem situados para encontrar Ag que
penetrem a pele e para os combater.
H ainda linfcitos CD4+ e CD8+ na derme; a maioria foi previamente activada ou tem
funo de memria.

FUNO SISTMICA DO SISTEMA IMUNITRIO


O sistema Imunitrio constitudo por uma grande diversidade de clulas e rgos dispersos
pelo organismo; no entanto, em qualquer aco, a resposta cooperativa, integrada e
coordenada por todo o sistema. Numa leso cutnea, por exemplo, a resposta processa-se da
seguinte forma:
Leso tecidular com infeco resposta inflamatria: aumento do fluxo sanguneo,
vasodilatao, da permeabilidade vascular sinais quimiotcticos para recrutamento
de fagcitos e linfcitos para a rea afectada;
Os factores gerados nesta fase inicial da infeco estimulam a resposta pela imunidade
adquirida;
As cl. dendrticas neste caso, clulas de Langerhans (na pele e mucosas) captam os
Ag do patogneo e migram pelos vasos linfticos para gnglios linfticos. Uma vez l
diferenciam-se e tornam-se parte da populao de cl. dendrticas interdigitadas no
gnglio; iniciam os mecanismos de resposta adquirida, apresentando Ag aos linf. Th;
Os linf. Th podem ento ser activados, proliferar e produzir substncias importantes:
o Que estimulam linf. B para a produo de Ac, neste caso dependente de linf. T.
A produo de Ac pode ter incio tambm estimulada pela chegada de Ag ao
gnglio pela linfa.
o Quimiotcticos, que promovem a migrao linfocitria dos vasos para o gnglio,
pelo endotlio de vnulas ps-capilares.
o Os linfcitos que respondem ao Ag so retidos 48h no gnglio, para activao e
proliferao, antes de serem libertados pelo vaso eferente do gnglio.

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o Quando livres, migram para o sangue pela veia subclvia; nos vasos prximos
da inflamao o endotlio est mais aderente a linf. T activados e leuccitos
(pelos factores quimiotcticos libertados), guiando-os para o local onde so
necessrios.
o Numa fase posterior da resposta, os Ac produzidos no gnglio so tambm
levados pela corrente sangunea at ao local, saindo com o plasma devido ao
aumento da permeabilidade vascular.
o O resultado desta aco coordenada de molculas difusveis, clulas e rgos
uma resposta direccionada e eficaz contra a infaco.
CLULAS E RGOS LINFIDES comparaes evolutivas
Imunidade Inata: a partir dos invertebrados e tambm em algumas plantas;
Imunidade Adquirida: apenas a partir dos Vertebrados (resposta mediada por linf. T, cl.
e rgos linfides, ainda que muito variveis entre diferentes ordens).
A tendncia evolutiva no que diz respeito ao desenvolvimento do SI passa por desenvolver novos
rgos e mecanismos em ordens mais evoludas mantendo, no entanto, os de ordens mais
antigas. Por ordem evolutiva:
GALT, esboo de bao e timo comum maioria;
MO hematopoitica e gnglios linfticos
Centros germinativos com capacidade proliferativa nos folculos linfticos
A evoluo fez-se do seguinte modo:
Agnatha2 Peixes (cartilagneos sseos) Anfbios Rpteis Aves Mamferos
A nvel celular, apenas a partir dos peixes com mandbula (Gnathosomata) e
cartilaginosos (tubares e raias) se desenvolveu a imunidade adquirida, com a presena
de linf. T e B.
Apenas espcies com imunidade adquirida tm clulas com receptores especficos de Ag (linf. T
e B) superfcie; todas as outras no so capazes de reconhecer e reagir contra um Ag especfico,
no tendo especificidade nem memria imunitria.

2
Primeiros vertebrados sem mandbula (ex: lampreia)

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ANTIGNIOS (CAP. III)
Antignios: so todas as substncias reconhecidas pelo receptor das imunoglobulinas do linf. B,
ou pelo TCR complexado com o MHC. Podem ser:
Celulares ou no celulares (os no celulares, solveis);
De natureza qumica diferente: Protenas, polissacardeos, lpidos/glicolpidos;
Capazes de estimular linfcitos T, ou B, ou ambos;
Naturais ou sintticos. Os naturais podem ser Autoantignios (do prprio, self);
Alloantignios (da mesma espcie); Xenoantignios (de uma espcie diferente).
Antigenicidade Imunogenicidade
Antigenicidade: capacidade de interagir com os receptores celulares de superfcie ou os
anticorpos (produtos da estimulao e resposta imunitria).
Imunogenicidade: capacidade para induzir uma resposta imunitria celular ou humoral, criando
linfcitos se interagir com Linf. B, Plasmcitos (B efectores) e B de memria; se interagir com
Linf. T, T-helper, T-citotxicos, T de memria.
Um Imunognio SEMPRE um antignio, mas o contrrio no verdade. A imunogenicidade
no uma propriedade intrnseca do antignio, mas depende das particularidades do meio
biolgico em que o Ag se encontra.

Existem diferenas na resposta imunitria consoante o tipo de reconhecimento do imunognio,


que feito por processos diferentes em linf. B e T. O hospedeiro assim uma pea
fundamental na resposta, uma vez que o mesmo antignio pode ter diferentes respostas
consoante o poder imunognico que tem para o indivduo. As protenas so as molculas mais
imunognicas; os polissacardeos os segundos classificados. Os lpidos e c. nucleicos
geralmente no so imunognicos a no ser quando complexados com protenas ou
polissacardeos.
Para a imunidade mediada por clulas, apenas protenas, alguns lpidos e glicolpidos so
imunognios; o reconhecimento NO DIRECTO, mediado pelo MHC molculas do MHC e
partes do antignio so expressos superfcie da clula para que sejam identificados como
imunognios. Para o reconhecimento de lpidos e glicolpidos existe uma molcula de
membrana MHC-like, a CD1.

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PROPRIEDADES DO IMUNOGNIO que contribuem para a imunogenicidade:
Substncia estranha ao organismo: para ocorrer resposta imunitria, o Ag tem de ser
identificado como nonself; do mesmo modo, as molculas self tm de ser toleradas
pelos linfcitos, capacidade adquirida na sua maturao, por apresentao antignica
controlada. Assim a distncia filogentica entre duas espcies condiciona a proximidade
estrutural entre elas, e o grau de semelhana dos Ag presentes o que determina menor
imunogenicidade com uma maior semelhana estrutural. As excepes so protenas
conservadas ao longo da evoluo (transversais entre espcies), como o colagnio, ou
clulas self que no so alvo de apresentao, como o caso dos espermatozides ou das
clulas da crnea.
Tamanho molecular: maior tamanho, maior imunogenicidade, com algumas excepes.
No geral: 100000Da muito imunognico; 5000-10000Da pouco imunognico.
Composio qumica e heterogeneidade/complexidade: partculas mais heterogneas
(heteropolmeros vs homopolmeros) e mais complexas so mais imunognicas por
exemplo, uma protena com vrios aa diferentes e com estrutura terciria ou quaternria
ser mais imunognica, ou um polmero com vrios acares diferentes. Homopolmeros
sintticos so menos imunognicos, geralmente, no tendo tanta influncia o seu
tamanho face a heteropolmeros mais pequenos.
o Em termos de estrutura e de epitopos, a 1 um determinante sequencial, a 2,
3, 4 so conformacionais (determinantes do epitopo usado para interaco).
Capacidade para ser processado e exposto com uma molcula do MHC, superfcie de
uma clula apresentadora de antignios ou clula self alterada: molculas maiores so
mais imunognicas porque so mais rapidamente fagocitadas e apresentadas; molculas
que no so degradadas e apresentadas com o MHC so fracos imunognios, como os
produtos sintticos anlogos dos biolgicos (por exemplo D-aminocidos, que no so
degradados).

PROPRIEDADES DO SISTEMA BIOLGICO que contribuem para a imunogenicidade:


Gentipo do receptor: espcie, tipo TCR, BCR, genes reguladores, perfil HLA ou MHC -
diferentes polimorfismos de um gene e diferentes gentipos do indivduo determinam
a rapidez do processamento dos imunognios, determinando a resposta final disto so
exemplo os vrios gentipos para o MHC, que condicionam diferentes graus de reaco,
diferentes tempos de processamento e apresentao aos linfcitos T, por exemplo,
numa famlia; o mesmo se aplica para o BCR e TCR, entre outros.
Dose + meio de administrao do antignio: cada imunognio tem uma curva dose-
resposta. Dosagem e meio de administrao ptimos: pico de resposta. Menor
quantidade de imunognio pode no desencadear resposta por falta de activao linf.
ou por tolerncia a baixas doses ( a tolerncia pode ser induzida por doses muito altas
tambm!). O meio de administrao condiciona os rgos mais envolvidos: intravenosa,
bao; subcutnea, gnglios linfticos.
o Repetio da exposio (boosters): produo clonal especfica, logo dose
requerida para resposta.
o Administrao subcutnea>Intravenosa>Oral.

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Presena de adjuvantes: substncias que, quando misturadas com o antignio,
aumentam a imunogenicidade deste reconhecimento pelos TLR. O mecanismo no
conhecido, mas os adjuvantes:
o Prolongam a persistncia do Ag ex. alum
o Melhoram a co-estimulao ex. adjuvante completo de Freund, LPS
bacteriano
o Aumentam a inflamao local ex. adjuvante completo de Freund, alum
o Estimulam a proliferao linfocitria no especfica de Ag ex. LPS bacteriano

EPITOPOS
As clulas no reconhecem o antignio como um todo, mas pequenas pores: os EPITOPOS ou
DETERMINANTES ANTIGNICOS.
EPITOPOS: regies imunologicamente activas do imunognio, que se ligam ao receptor celular
especfico membranar ou ao paratopo do anticorpo. Os anticorpos tm vrios paratopos, logo
um receptor reconhece e reage de forma diferente a diferentes epitopos do mesmo antignio.
Os linfcitos podem utilizar vrias estruturas como um epitopo: por exemplo, para antignios
proteicos, podem ser usados elementos da estrutura primria, secundria, terciria ou
quaternria; para polissacardeos, muitas vezes ramificados, vrias ramificaes podem ser
interpretadas juntas como epitopo.
Reconhecimento por linfcitos B: de antignios solveis, livres em soluo; usam como epitopos
partes muito acessveis do antignio. O local de reconhecimento do Ag costuma ser hidroflico,
para estar exposto na membrana e se ligar a Ag livres em circulao.
Reconhecimento por linfcitos T: geralmente, por reconhecimento de antignios com molculas
MHC superfcie de APCs ou clulas alteradas; o epitopo para os Linf. T geralmente
indissocivel da parte da molcula MHC exposta.

Epitopos e Linfcitos B
O reconhecimento e interaco correctas entre o anticorpo e o epitopo do Ag dependem
do local de ligao ao Ag no anticorpo superfcie do linf. B tamanho, forma uma
vez que as ligaes so no-covalentes, importante que a ligao seja adequada. O
epitopo no pode ser maior que o local de reconhecimento do anticorpo (paratopo).
Os epitopos podem conter aminocidos sequenciais e no sequenciais. A desnaturao
de uma protena leva a perda de estrutura e pode fazer com que deixe de ser

21
reconhecida pelo anticorpo. Grandes Ag so reconhecidos como um todo, na interaco
paratopo e suas margens (epitopos conformacionais); pequenos Ag so colocados
dentro do local de ligao /fenda, de modo mais compacto.
o Epitopo sequencial determinante sequencial depende da sequncia de aa
para ser reconhecido;
o Epitopo conformacional (no IMUNOLGICO
sequencial) determinante
conformacional depende da
NO IMUNOLGICO
estrutura para ser
reconhecido, aa distantes na
sequncia que ficam prximos
quando a estrutura da
molcula se forma.
Os epitopos reconhecidos por Ac de linf. B tendem a estar em zonas flexveis do
imunognio, com mobilidade de local/resduo. No entanto, a ligao tem menos
afinidade do que com epitopos rgidos.
Protenas complexas tm mltiplos epitopos sobrepostos, alis, grande parte da
superfcie da molcula complexa (globular, por exemplo) potencialmente antignica.
Assim, diferentes espcies tm o potencial de reconhecer diferentes pores da
molcula. Alguns epitopos so IMUNODOMINANTES, isto , induzem maior resposta do
que outros numa espcie particular. A imunodominncia est relacionada com as
propriedades do epitopo, da molcula e dos mecanismos de regulao do animal.

Epitopos e Linfcitos T
No perdem propriedade com alterao conformacional. Ao contrrio dos epitopos
reconhecidos pelos linf. B, os epitopos reconhecidos pelos linf. T no perdem as
propriedades com a desnaturao. Isto acontece porque o reconhecimento por
apresentao de antignios processados, ou seja, molculas MHC combinadas com
peptdeos antignicos, cuja estrutura j foi destruda, no afectando esta o processo de
reconhecimento.
O reconhecimento por um complexo trimolecular T-cell receptor, molcula MHC e
peptdeos antignicos. O peptdeo liga-se a uma fenda na molcula MHC, e fica
encapsulada entre a MHC e o TCR, quando estes se ligam topo a topo. Ao contrrio
dos epitopos para linf. B, em que interessa a ligao ao Ac, no caso de reconhecimento
com linf. T interessa a qualidade da ligao molcula MHC e tambm ao TCR.
O processamento antignico requerido para que a partcula interaja com a molcula
MHC, especificamente. Este processamento varia com a provenincia do Ag, que pode
ser endgeno ou exgeno.
Os epitopos reconhecidos pelos linf. T so muitas vezes internos, ou seja, esto dentro
da molcula e so expostos pelo processamento.

Resposta Primria (humoral ou celular) Ag intacto


Resposta Secundria humoral Ag intacto
Resposta Secundria celular Ag intacto ou desnaturado
(Resposta Primria 1 contacto, IgM; Secundria contactos subsequentes, + rpida,
IgG, switching de classe)

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HAPTENOS E O ESTUDO DA IMUNOGENICIDADE
HAPTENO: molcula orgnica, pequena, que
tem propriedades antignicas mas no , por
si s, imunognica. A partcula torna-se
imunognica quando ligada a uma protena,
o portador, formando um complexo
hapteno-portador, imunognico.
Os anticorpos produzidos contra este
complexo vo reconhecer como epitopos
pores do hapteno isolado, da protena
portadora isolada, do complexo como um
todo. Assim, a conjugao faz com que o
hapteno, que inicialmente e isolado no
produz resposta, passe a ser reconhecido
pelo sistema imunitrio e funcione como um
verdadeiro imunognio.
A implicao dos haptenos no estudo das reaces cruzadas; aps produo de Ac anti-
hapteno, a introduo de outros haptenos idnticos pode produzir resposta por semelhana
estrutural dos epitopos (para os quais o organismo j foi sensibilizado). O Ac vai reconhecer o
epitopo se ele for igual (partilhado) ou estruturalmente muito semelhante, mesmo que a
molcula seja distinta, reagindo contra ele. O fenmeno de reaco cruzada a excepo
especificidade da interaco Ag-Ac.
Um exemplo do uso de haptenos o teste de gravidez usado antigamente, por inibio da
aglutinao. Se houver hCG na urina, no se forma precipitado porque os Ac reconhecem a hCG
e ligam-se hormona solvel, e no ao complexo hCG-hapteno. Se no houver hCG na urina h
ligao Ac-complexo e aglutinao (o complexo imunognico e em proporo adequada com
o Ac precipita, enquanto no caso da mulher grvida h mais hCG, solvel e livre, que se liga ao
Ac inibindo a aglutinao).
-Interesse de substncias que funcionem como haptenos podem obter-se Ac contra elas
prprias. Se em diferentes haptenos a configurao total for mantida e s variar o derivado no-
inico, um mesmo Ac liga-se a todos eles.
Os receptores da imunidade inata e da imunidade adquirida diferem. Os da imunidade adquirida
(Ac e TCR) so altamente especficos para certas zonas do antignio e partes da sua estrutura.
Os receptores da imunidade inata reconhecem padres muito menos especficos geralmente,
zonas de um agente patognico que foram mantidas durante a evoluo e que so, por isso,
diferentes do hospedeiro filogeneticamente afastado.
Os receptores deste tipo so PRRs: Pattern-recognition receptors. Reconhecem glcidos,
algumas protenas e lpidos, alguns padres de cidos nucleicos. Raramente estes receptores
originam problemas de autoimunidade, porque os factores reconhecidos so produzidos pelo
agressor e nunca pelo hospedeiro, o que difere da subtileza das diferenas entre os epitopos
nonself e self da imunidade adquirida.

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Um exemplo de PRR solvel a CRP (protena C-reactiva), que facilita a opsonizao1 quando
ligada a uma molcula estranha (bacteriana), alm de activar o complemento e a lise mediada
pelo complemento; outro a protena de ligao ao LPS das bactrias gram-negativas.
Um exemplo de PRR ligadas a membranas so o SR (Scavenger receptor) e o TLR (Toll-like
receptor). O TLR activado, p. ex, por agentes patognicos e causa activao da transcrio e
sntese e secreo de citocinas, o que recruta macrfagos e neutrfilos para o local de
inflamao. O TLR pode tambm recrutar e activar macrfagos, clulas NK e clulas dendrticas
para apresentao antignica aos linfcitos T.
A interaco entre produo e sinalizao por citocinas e a activao dos linfcitos T
demonstra a ligao entre as imunidades inata e adquirida na resposta eficaz a antignios.

1
Opsonizao Processo pelo qual molculas (opsoninas) so ligadas membrana do elemento
perigoso para o organismo, impedindo a sua ligao a outras clulas (infeco) e facilitando a
fagocitose. Isto pode ser feito por molculas do complemento ou por antignios, que criam uma
pelcula de sinalizao. Uma importante opsonina a protena C3b do complemento. O
reconhecimento faz-se por molculas do complemento ou por clulas fagocitrias, como os
macrfagos.

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ANTICORPOS (CAP. IV)
Anticorpos: so protenas de ligao aos antignios, segregados pelos plasmcitos. Encontram-
se no soro, a maioria na fraco gama do proteinograma electrofortico.

Funes:
Receptores membranares de linfcitos B (IgD e IgM);
Neutralizao;
Regulao da resposta imunitria;
Iniciao da resposta a um Ag:
o Fomao de imunocomplexos;
o Activao do complemento (IgG1, 2,3, IgM);
o Opsonizao (IgG1,3, 4);
o Imunidade das mucosas (IgA e IgM);
o Imunidade neonatal (IgG);
o Hipersensibilidade tipo I, imediata (IgE);
o Citotoxicidade mediada por Ac:
IgG macrfagos, moncitos, neutrfilos, NK, Linf. T;
IgE Eosinfilos;
Anticorpos de membrana nos linfcitos B conferem especificidade na ligao aos antignios. A
interaco especfica entre o anticorpo de membrana e o antignio que possibilita a formao
de clones antignio-especficos de linfcitos B.
Os anticorpos produzidos em resposta a um
antignio so heterogneos. A maioria dos
antignios so complexos e tm vrios
determinantes antignicos diferentes; o
sistema imunitrio (SI), em resposta, recruta
vrios clones de linfcitos B e produz
anticorpos para os vrios epitopos
(=determinantes antignicos) do antignio. Os
anticorpos produzidos por cada clone so
monoclonais, mas no total a resposta a um
antignio POLICLONAL: necessrio
considerar que, no soro, existem produtos de
vrios clones que criam uma resposta
policlonal e heterognea para os antignios
com que o SI contacta.
Os anticorpos do soro chamam-se
IMUNOGLOBULINAS (Ig), para as distinguir de
outras protenas na fraco das gama-
globulinas. Encontram-se na fraco gama do
proteinograma electrofortico, na sua
maioria, mas tambm podem ser encontradas na fraco beta-2 (e tambm noutras, alfa e beta).
Podem ser sIg, se segregadas, ou mIg, se ficarem na membrana.
O linfcito B pode ter na superfcie vrios tipos de Ig, sequencialmente: primeiro, quando
imaturo, IgM, que com a maturao coexiste com IgD, antes da exposio ao Ag; o linfcito B de

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memria tem IgM, IgG, IgA ou IgE na membrana. Contudo, a especificidade para o Ag no muda
e constante para determinado linfcito, quaisquer que sejam as classes de Ig que expresse,
mesmo que simultaneamente.

ANTICORPOS SO HETERODMEROS
Os Ac partilham a estrutura: tm 4 cadeias peptdicas, iguais duas a duas; 2 cadeias leves (L, peso
molecular 25000) e 2 cadeias pesadas (H, peso molecular 50000). A cadeia leve une-se pesada
por pontes dissulfito, alm de ligaes no-covalentes, criando um heterodmero H-L. Ligaes
idnticas unem os dois heterodmeros H-L entre eles, pela ligao H-H, formando um dmero
de dmeros. O nmero de pontes dissulfito H-H e a sua localizao varia entre Igs.
As Ig possuem:
Domnio V (highly variable domains): So regies de grande variabilidade, VL na
cadeia leve e VH na cadeia pesada, uma regio V por cada cadeia. Tm o terminal amina
da cadeia peptdica; tm cerca de 100-110 aa. So estas regies que determinam a
especificidade da ligao de um anticorpo a um antignio que lhe complementar, da
que nestas regies haja CDR (complementarity-determining regions), ou regies de
hipervariabilidade; as CDR da cadeia leve e pesada so o que constitui o local de ligao
Ag-Ac, ou seja, integram o paratopo. So as CDR (ou HV) que tm maior variabilidade; o
resto do domnio V, Fr, no to varivel.
Domnio C (constant domains): So regies semelhantes para a mesma classe de Ig,
CL e CH. Existem vrias regies C, uma em cada cadeia leve e trs ou quatro em cada
cadeia pesada. Tm o terminal carboxilo da cadeia peptdica. Os Anticorpos so
glicoprotenas e, geralmente, os locais de glicosilao so nas regies C. A glicosilao
provavelmente aumenta a solubilidade das molculas de Ac e afecta a taxa de
eliminao.
Regio de charneira: onde o Ac dobra a cadeia pesada, uma regio rica em
prolina. No est presente em todas as cadeias pesadas (p. ex, ausente na M e E, que
tm um domnio adicional no meio da cadeia). Para cima desta zona, como 2 braos,
ficam os fragmentos ab (Fab), que ligam o antignio, cada um com uma cadeia leve e o
domnio V e um C da cadeia pesada; para baixo fica o fragmento c (Fc), apenas as
unies entre domnios C das cadeias pesadas.
Digesto de Ig por papana e pepsina a digesto por papana origina 3 fragmentos, 2 iguais
(Fab) e um diferente (Fc); a digesto por pepsina origina 1 fragmento, o F(ab)2 (os 2 Fab unidos),
uma vez que o Fc destrudo pela enzima. A reduo por mercaptoetanol destri pontes S-S e
separa cadeias leves de pesadas.

Cadeias Leves
So de dois tipos, k e ; na espcie humana, 60% so k e 40% so . Uma molcula de anticorpo
possui apenas UM TIPO de cadeia leve, k ou , nunca ambas. As cadeias apresentam uma
variabilidade ligeira de aminocidos que cria 4 subtipos.

Cadeias Pesadas
So de 5 tipos, , , , , (istipos) correspondendo classificao das diferentes classes de
anticorpos: IgM (), IgG (), IgA (), IgD (), IgE (). Possuem um domnio V e 3 ou 4 domnios C;
as regies C classificam os 5 tipos de cadeia pesada. Cada cadeia pesada associa-se a uma cadeia
leve. As cadeias pesadas associam-se com outra do mesmo tipo. Existem 2 subtipos de cadeia

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e 4 subtipos de cadeia . As cadeias e contm um domnio C extra, compensando a falta da
regio de charneira.
O monmero de anticorpo tem duas cadeias pesadas idnticas e duas cadeias leves idnticas,
numa estrutura H2L2; pode ser uma associao de monmeros, (H2L2)n. A estrutura de cada Ig
depende dos nveis de organizao da protena, da sua estrutura primria, secundria, terciria
ou quaternria respectivamente a sequncia linear de aa, a formao de pregueamento em
folha anti-paralela, a formao de estruturas globulares e a associao destas estruturas. A
estrutura quaternria o que permite a interaco entre cadeias leves e pesadas e a formao
dos vrios domnios, entre eles o local de ligao ao antignio e vrios outros locais com funes
biolgicas efectoras.
Cada domnio forma: um loop sobre ele mesmo, unindo os bordos por pontes dissulfito; uma
folha em comprimento. As folhas interagem entre elas por intermdio de pontes dissulfito
e pontes hidrognio, como uma sandwich cujo recheio so as ligaes entre cadeias. As
ligaes so feitas entre domnios semelhantes, por exemplo, CH2-CH2, CH3-CH3 e CH1-CL. Os
aminocidos hidrofbicos ficam virados para o espao entre cadeias.

A regio CDR a regio, em cada domnio V, responsvel pela interaco e ligao com o
antignio ou hapteno. H indcios de que mais CDR da cadeia pesada interajam com o Ag do que
CDR da cadeia leve. Para a ligao, h indcios de que o anticorpo, o antignio ou ambos alteram
a sua estrutura para uma melhor complementaridade.
A regio CH1 e CL permitem aumentar as possibilidades de ligaes estveis VL VH, aumentando
as ligaes entre elas e at as ligaes ao antignio, possibilitando mais combinaes estveis e
mais complementaridade.
A regio de charneira rica em prolina e cistena, susceptvel clivagem por enzimas. No tem
homologia com os outros domnios, d flexibilidade IgG, D e A criando 2 segmentos dobrados
como uma dobradia de porta. Assim, os braos Fab podem assumir vrios ngulos quando o
Ag se liga. Movem-se alinhando com os epitopos, ou os epitopos e a superfcie celular; o Fc
move-se para facilitar as funes efectoras.

27
O Fc tem funes efectoras; enquanto o Fab responsvel pela interaco com o Ag, o Fc
interage com protenas do soro ou receptores de membrana de clulas, tendo vrias funes,
como:
Opsonizao: a promoo de fagocitose dos antignios pelos macrfagos e
neutrfilos. Protenas de membrana, os FcR (Fc receptors), ligam-se regio constante
das Ig; esto presentes na superfcie dos fagcitos acima mencionados; a ligao de
vrios anticorpos contendo o mesmo antignio (p. ex, uma bactria) ao FcR produz um
sinal que culmina com a fagocitose do complexo Ac-Ag. No interior do fagcito, o
patogneo sofre digesto enzimtica, danos oxidativos, ruptura da sua membrana por
peptdeos anti-bacterianos.
Activao do Complemento: IgM e IgG (nos humanos) tm a capacidade de activar o
sistema do complemento, um conjunto de glicoprotenas do soro que consegue perfurar
a membrana celular. Um importante produto da activao desta via o fragmento C3b,
que se liga de forma inespecfica ao complexo Ag-Ac junto do local onde o sistema foi
activado. A ligao do C3b permite a fagocitose; a ligao a eritrcitos (que possuem
receptores para o C3b) e o transporte at aos macrfagos residentes no fgado e bao,
que destroem o complexo sem destruir o eritrcito; o C3b permite a remoo dos
patogneos e a sua destruio, com ou sem a morte da clula qual o complexo ou o
C3b aderiu. A activao do complemento requer 2 Fc prximas uma da outra.
Citotoxicidade mediada por clulas dependente de Anticorpos (ADCC): A ligao do
anticorpo ligado a clulas alvo ao FcR de vrios tipos celulares, particularmente as
clulas NK, direcciona a citotoxicidade destas para a clula alvo.
Transcitose dos Anticorpos: Algumas Ig conseguem atravessar epitlios, num processo
de transcitose, chegando s mucosas. A capacidade de transporte depende das
caractersticas do Fc. No humano e no rato, a IgA a maior Ig capaz de transcitose, se
bem que a IgM tambm seja transportada para as mucosas. A IgG, tambm nestas
espcies, atravessa a placenta e as mucosas passando da me para o feto; isto ocorre
no 3 trimestre de gestao e o que protege o feto, de forma transitria, logo aps o
nascimento. NOTA: a transcitose da IgG materna um fenmeno de Imunizao Passiva;
este fenmeno diferente da Imunizao activa, em que h a produo autnoma de
Ig. A imunizao passiva usada por vezes em algumas terapias com anticorpos.

28
CLASSES DE ANTICORPOS E FUNES BIOLGICAS

IgG
A mais abundante no sangue, ~= a 80%;
2 cadeias e 2 cadeias leves, k ou (apenas um tipo!);
4 subclasses, de acordo com os 4 subtipos de CH (diferenas nos aa), mas 90-95% de
homologia;
Monmeros;
Em termos de concentrao sangunea: IgG1>IgG2>IgG3>IgG4;
Diferenas na extenso da regio de charneira e no n e localizao de pontes S-S entre
CH;
Atravessam a placenta (IgG2 apenas de forma residual), importantes na proteco do
feto;
IgG3 activa o complemento, tambm IgG1 e IgG2 (ordem decrescente), IgG4 no
activa;
IgG1 e IgG3 tm afinidade para FcR dos fagcitos, medeiam opsonizao; IgG2 tem
baixa afinidade, IgG4 intermdia;
IgG3 tem regio de charneira mais longa e com mais pontes S-S;
IgG1 tem menor glicosilao;
Semi-vida ~= 23 dias, produo, glicosilao.

29
IgM
5~10%
2 cadeias L, k ou , 2 H do isotipo (com 4 domnios);
IgM monomrica: na membrana plasmtica de linfcitos B;
IgM pentamrica: secretada por plasmcitos; 5 unidades monomricas unidas por
pontes S-S no CH 3 e 4.
Cada pentmero possui uma cadeia adicional ligada por S-S a dois Fc, a cadeia J (joining),
que une os 5Fc dos monmeros que esto voltados uns para os outros, ou seja, no
centro do pentmero; a cadeia J adicionada imediatamente antes da secreo;
Tem 10 Fab, locais de ligao ao Ag, 2 por cada monmero no entanto, ligam-se apenas
10 haptenos ou pequenos Ag ou 5 Ag de maiores dimenses (obstruo fsica);
a 1 a ser produzida em resposta a um Ag;
a 1 a ser produzida pelo recm-nascido;
Maior valncia: as IgM so muito eficientes para reagir com Ag repetitivos, sendo ideais
para aglutinar hemcias ou neutralizar vrus, p. ex, com menos molculas de IgM que as
de IgG que seriam precisas;
As IgM so mais eficientes que as IgG na activao do complemento;
Difunde mal devido ao tamanho, est em concentrao no fluido intersticial. As
cadeias J permitem que a IgM se ligue a receptores celulares e seja transportada pelos
epitlios at s zonas de secrees da mucosa. Depois da IgA, a que tem maior
secreo para as mucosas, sendo auxiliar nesta funo.
glicosilao

IgA
10-15%
2 subtipos: IgA1 e IgA2; IgA1
monomrica, colar de glcidos na regio
charneira, 50% das IgA das secrees,
90% das IgA nas secrees; IgA2 H e L
ligadas por ligaes no-covalentes;
Principal Ig nas secrees e mucosas (Ig
das MUCOSAS), como leite materno,
saliva, lgrimas, muco respiratrio,
genitourinrio, digestivo;
No soro, monomrica, por vezes
polimrica (dmeros, tetrmeros,) se
polimrica tem cadeia J;
A sIgA (IgA secretada) um dmero ou
tetrmero, com cadeia J e um
polipeptdeo chamado Componente Secretor, que responsvel pela ligao s
membranas para passagem e produzido pelas clulas epiteliais das mucosas; tem 5
domnios Ig-like;
1. O dmero ou tetrmero liga-se ao receptor poli-Ig na membrana basolateral da clula
epitelial, por ponte S-S;
2. O complexo transportado at ao lmen;

30
3. O Receptor poli-Ig clivado, deixando a componente secretora ligada IgA, que passa
a sIgA a presena do componente secretor permite a proteco contra a clivagem
pelas proteases da mucosa;
Liga vrios grandes Ag, com vrios epitopos (bactrias, vrus); dificulta infeco e adeso
dos patogneos;
Os complexos Ag-Ac ficam retidos no muco e so eliminados (clios, movimentos
peristlticos);
A quantidade de IgA no jejuno ultrapassa a quantidade na Medula ssea, Bao e linfa;
Os plasmcitos que segregam IgA residem nos tecidos subepiteliais;
O leite materno contm sIgA, que ajuda na imunizao passiva do recm-nascido no 1
ms.

IgE
~=0%, concentrao 0,3g/ml, no obstante, grande potencial biolgico;
Medeia REACES DE HIPERSENSIBILIDADE tipo I, imediatas;
2 cadeias leves e 2 pesadas, tipo , com 4
domnios;
Liga-se a FcR na membrana de basfilos (sangue)
ou mastcitos (tecidos); com a ligao de Ag
(alergnios) desgranulao (exocitose dos
grnulos) dos basfilos e mastcitos - >
manifestaes alrgicas, por resposta
histamina, prostaglandinas, citocinas,;
A desgranulao localizada mediada por IgE pode
estimular acumulao de clulas para defesa anti-
parastica;
Vida mdia 2,5 dias;
glicosilao, sntese.

IgD
0,2%;
Ac na membrana de linfcitos B maduros, com a
IgM;
Sem funo biolgica efectora conhecida, em
investigao;
glicosilao, sntese.

DETERMINANTES ANTIGNICOS NAS IG


Os Ac, sendo glicoprotenas, so fortes imunognios. Induzem resposta imunitria, a partir de 3
tipos de determinantes antignicos: isotipos, alotipos, idiotipos.
Isotipos: so as variaes entre cadeias pesadas e as variaes entre tipos e subtipos de
cadeias leves; todos os indivduos da mesma espcie expressam todos, espcies
diferentes no, da que se possam produzir Ac anti-cadeias leves ou anti-cadeias
pesadas humanas, em animais;

31
Alotipo: diferenas na sequncia de aa entre indivduos da mesma espcie, diferenas
allicas do mesmo isotipo; anti-Ac so detectveis aps transfuso ou reaco s Ig
maternas no feto;
Idiotipo: diferenas especficas nas sequncias V das cadeias L e H de cada Ac.

B-CELL RECEPTOR
As caudas das mIg so demasiado curtas para interagir com vias de sinalizao intracelulares
(tirosina cinase, prot. G) BCR (B-cell Receptor) fulcral, sendo constitudo por:
Poro transmembranar com mIg e 2 heterodmeros associados, Ig e Ig, ligados por
S-S, com 61 e 48 aa respectivamente.
FcR: interage com o Fc do Ac; em clulas da imunidade inata, um meio de activao de outras
vias pelos Ac, como a fagocitose, no processo de Opsonizao; a interaco cruzada dos FcR
possibilita a regulao da activao e diferenciao de clulas do SI e, por vezes, a diminuio
das respostas celulares.

A SUPERFAMLIA DAS IG
A estrutura caracterstica das cadeias das Ig, leves e pesadas, indica que tiveram evoluo
comum a partir de um gene que codificava um peptdeo de cerca de 110 aa. Vrias outras
protenas tm este ancestral comum, pertencendo superfamlia das Ig: parte do B-cell
receptor; Poly-Ig receptor (componente secretor para IgA e IgM); T-cell receptor; CD4, CD8,
entre outras; molculas MHC classe I e classe II; molculas de adeso, VCAM-1, ICAM-1, ICAM-
2, LFA-3; factor de crescimento derivado das plaquetas. A maioria destas molculas no capaz
de ligar Ag, sugerindo que a estrutura tpica das Ig tem outras funes, como a melhor interaco
com a superfcie da clula.

ANTICORPOS MONOCLONAIS
A produo de anticorpos monoclonais em laboratrio essencial para aumentar a eficcia de
anti-soros especficos para testes de diagnstico e experincias in vitro. A tcnica de produo
foi criada por Khler e Milstein em 1975.
A tcnica consiste na fuso de um plasmcito normal, produtor de anticorpos, com uma clula
de mieloma (plasmcito mutado, canceroso), gerando um HIBRIDOMA. O hibridoma possui a
imortalidade celular tpica das clulas cancerosas e as funes secretoras de um plasmcito,
criando culturas que produzem indefinidamente grandes quantidades do anticorpo secretado
pelo plasmcito.
Fazendo a cultura dos hibridomas, em meio selectivo com HAT: apenas os hibridomas
sobrevivem (plasmcitos e clulas de mieloma morrem). Faz-se seleco do Ac pretendido por
ELISA ou RIA. Aps o isolamento, faz-se a seleco dos clones Produo monoclonal.
Existem algumas dificuldades tcnicas, nomeadamente o facto de as culturas de clulas de
mieloma imortais serem susceptveis ao HAT, no sendo possvel manter a secreo de Ac nos
hibridomas. Em alternativa, imortalizam-se clulas B, acrescentando ainda Ag EBV (vrus Epstein-
Barr) para manter a secreo de Ac. necessrio usar clulas in vitro uma vez que os humanos
no podem ser imunizados com o mesmo espectro de Ag que os animais. No entanto, em meio
in vitro os linfcitos B s produzem IgM de baixa afinidade a soluo passa por imunizar
ratinhos, j com linfcitos B e T humanos, para posterior seleco dos B e produo de Ac
monoclonais.
Os Ac monoclonais so teis no diagnstico; nos testes de gravidez; na administrao de

32
frmacos, como reagentes para teraputica; na imagiologia, marcados com substncias
radioactivas.
Pode fazer-se tambm a produo de IMUNOTOXINAS: complexando uma toxina com um
anticorpo monoclonal anti-clula tumoral, na regio de ligao clula, pode administrar-se a
toxina directamente sobre o tumor. Por exemplo, toxina diftrica, Shigella, , que inibem a
sntese proteica e tm funo anti-tumoral com poucas (ou at uma) molculas. Esta tcnica
ainda est em estudo, com resultados promissores e mais investigao sobre a segurana em
curso.
ABZIMAS: Anticorpos monoclonais catalticos, que catalisam reaces, tendo um dualismo
anticorpo-enzima; a ligao Ag-Ac semelhante a uma ligao enzima-substrato, com a
diferena de que o Ac no altera o Ag; no entanto, quando ligado com uma certa afinidade, por
ligaes no covalentes, estabiliza o Ag para posterior alterao qumica enzimtica,
funcionando como catalisador. As Abzimas a energia de activao necessria, tendo papel de
enzima apesar de serem Ac, uma vez que detectam e ligam o Ag como Ac.

33
INTERACO ANTIGNIO-ANTICORPO (CAP. VI)
A interao Ag-Ac semelhante interao enzima-substrato, mas no resulta em alteraes
qumicas irreversveis nem do Ac nem do Ag. altamente especfica e reversvel, e envolve vrias
interaes no-covalentes entre o epitopo do Ag e as
CDRs da Regio Varivel do Ac:
Pontes de hidrognio
Ligaes inicas
Interaes hidrofbicas
Foras de Van der Waals
As interaes no covalentes so fracas e a curta
distncia, por isso para criar uma ligao forte so
necessrias em grandes quantidades juntamente com
uma elevada justaposio e complementaridade entre
Ag e Ac (que est na base da sua especificidade).

AFINIDADE E AVIDEZ
Afinidade traduz a fora de ligao entre 1 CDR e 1 Epitopo. quantificvel atravs da
constante de equilbrio (Ka) ou atravs da Equao de Scatchard. Uma ligao com baixa
afinidade facilmente dissocivel.
[-]
+ - = [][]

Avidez traduz a fora total de ligao entre 1 Ac multivalente (1 valncia = 1 stio de ligao)
e 1 Ag com vrios epitopos. Em sistemas biolgicos representa melhor a realidade do que a
afinidade, pois entre Ag e Ac multivalentes a ligao de um epitopo a um paratopo num local
facilita outra ligao num outro local. Por vezes, a alta avidez compensa a baixa afinidade, como
acontece com as IgM.

REACTIVIDADE CRUZADA
Embora a reaco Ag-Ac seja muito especfica, um Ac pode ligar-se a Ag diferentes se:
Partilharem um epitopo
Tiverem um epitopo muito semelhante
frequente entre Ag polisacardicos que contenham resduos semelhantes, como o caso do
Sistema ABO. A produo dos Ac anti-A ou anti-B no induzida pela exposio a Ag dos glbulos
vermelhos mas sim por reatividade cruzada com Ag semelhantes de bactrias intestinais.
Linfcitos B que produzam Ac contra os Ag dos prprios eritrcitos so eliminados durante a
Seleo Negativa.

Muitos vrus e bactrias tm epitopos idnticos ou semelhantes a componentes das clulas


humanas. Por vezes, esses epitopos induzem a formao de Ac que por reatividade cruzada
interagem com esses componentes, danificando os tecidos numa reao autoimune. o que
acontece com o antignio M de Streptococcus pyogenes.

Algumas vacinas utilizam este princpio. Por exemplo, a vacina da varola contm Vaccinia virus,
e induz a produo de Ac que tambm reagem com o vrus da varola.

35
O Kuby inclui aqui uma longa seco sobre as vrias tcnicas usadas no laboratrio de
imunologia, que est resumida na Sebenta Imunologia 2010 (por captulos).

36
MAJOR HISTOCOMPATIBILITY COMPLEX (MHC) (CAP. VII)
Conjunto de genes fortemente ligados cujos produtos esto envolvidos no reconhecimento
celular, discriminao entre self e nonself, histocompatibilidade/histoincompatibilidade de
tecidos transplantados, desenvolvimento de
resposta imunitria (humoral ou mediada por
clulas). A molcula MHC indica aos linfcitos T
que a APC uma clula self, e a sua maioria
apenas reconhece Ag quando esto ligados a um
MHC, sendo que o conjunto de molculas MHC
expressas por um indivduo influencia o espectro
de Ag aos quais os seus linfcitos T conseguem
reagir. Da a sua importncia em doenas
infeciosas e autoimunes. O MHC conhecido
como HLA no Homem e H-2 no rato.

GENES
Nos humanos localiza-se no cromossoma 6 e est organizado em regies que codificam 3 classes
de molculas:
MHC Classe I glicoprotenas expressas na superfcie de quase todas as clulas
nucleadas que apresentam Ag peptdicos a clulas TC, 3 genes clssicos (A, B, C) podem
expressar at 6 MHC I clssicos diferentes em cada indivduo
MHC Classe II glicoprotenas expressas principalmente em APC que apresentam Ag
peptdicos processados a clulas TH, 3 genes clssicos (DP, DQ, DR)
MHC Classe III protenas extracelulares com funes imunitrias (no Sistema
Complemento, na Inflamao), TNF e outros produtos

Genes ditos no clssicos codificam molculas ligeiramente diferentes a nvel de estrutura e


funo das molculas MHC classicamente descritas. Cada ser humano pode expressar at 6
variantes de molculas MHC Classe I clssicas diferentes pois pode ter at 6 alelos diferentes
nos 3 loci clssicos dos 2 cromossomas (a Microglobulina 2 muito conservada e no participa
na ligao ao peptdeo Ag), e at 12 variantes de molculas MHC Classe II diferentes (como

37
um heterodmero uma das cadeias pode ser codificada pelo cromossoma materno e a outra pelo
paterno). Por isso o MHC pode ser considerado polignico.

HAPLTIPOS
O MHC altamente polimrfico e herdado em hapltipos, ou seja, existem vrios alelos
possveis para cada loci mas so herdados em conjunto (a ocorrncia de crossing-over muito
rara, porm significativa para gerar variabilidade na espcie). Cada indivduo recebe assim dois
blocos hapltipos , um de cada progenitor, sendo geralmente heterozigoto e expressando
ambos (co-dominncia). Assim, em regra, dois irmos no sero histocompatveis com os pais,
mas tm 1/4 de probabilidade de o serem entre eles.

ESTRUTURA DO MHC

MHC Classe I:
Cadeia grande cadeia transmembranar, possui 3 domnios externos 1, 2 e 3, muito
polimrfica (mas 3 altamente conservado)
Microglobulina 2 muito conservada, ligada no covalentemente Cadeia , interage com 1,
2 e 3, no codificada no MHC (est no cr. 15)
Par distal (1-2) plataforma de folhas ladeada por hlices forma o sulco de ligao dos
peptdeos
Par proximal (3- Microglobulina 2) estrutura semelhante s Ig
H elevada homologia entre 3, Microglobulina 2 e a Regio Constante das Ig. 3 interage com
CD8. necessria a interao de Microglobulina 2 com a Cadeia e com um peptdeo
temporrio para o MHC Classe I adquirir a conformao correta.

38
MHC Classe II:
2 cadeias polipeptdicas diferentes e cada uma com dois domnios externos (1 e 2, 1 e
2), ligadas no covalentemente
Par distal (1- 1) sulco de ligao dos Ag processados
Par proximal (2-2) estrutura semelhante s Ig
Esta molcula surge individualmente na membrana celular. Porm, em cristalografia, forma
dmeros (dmeros de dmeros, com 2 cadeias e 2 ), estando os sulcos de ligao dos Ag
orientados em direes opostas. Ainda no se sabe se esta forma dimrica ocorre in vivo, mas a
presena de alguns locais de ligao a CD4 sugere que sim.
Cada domnio de MHC Classes I e II codificado por um exo diferente.

MHC Classe III:


Diferentes das outras classes em termos de estrutura e funo, no so membranares.

Outras molculas semelhantes a MHC Classe I mas no codificadas no MHC apresentam Ag no


peptdicos a linfcitos T. o caso de CD1, que apresenta Ag lipdicos de bactrias.

INTERAO PEPTDICA
Uma molcula de MHC apresenta um s peptdeo. Cada variante de MHC capaz de se ligar a
um conjunto de numerosos Ag diferentes e alguns Ag podem ligar-se a vrias variantes de MHC
diferentes, sendo a ligao promscua e no especfica (ao contrrio da ligao entre TCR e
Ag). A capacidade do MHC de interagir com determinado Ag varia entre indivduos,
possivelmente porque o polimorfismo ocorre principalmente na regio de ligao aos Ag.

MHC Classe I:
Liga peptdeos endgenos e apresenta-os a linfcitos CD8+, podendo desencadear uma resposta
por imunidade celular. Cada tipo de MHC I (A, B e C nos humanos) liga um conjunto especfico
de peptdeos. Uma clula nucleada expressa cerca de 105 cpias de cada variante de MHC I, pelo
que apresenta muitos peptdeos (diferentes e iguais) em simultneo, e pensa-se que bastam
100 complexos MHC-peptdeo para que um linfcito TC reconhea e lise a clula. NKC tm
recetores para MHC I que as podem estimular ou inibir.
Os peptdeos ligados tm 2 caractersticas: tm entre 8 e 10 aminocidos (os com 9 so mais
comuns e ligam-se com maior afinidade) e contm Resduos de Ancoragem. Estes so
sequncias de aminocidos normalmente hidrofbicos essenciais para a ligao ao sulco do
MHC I, uma vez que as suas cadeias laterais so complementares superfcie do sulco.
Dependem da variante de MHC I, mas podem variar ligeiramente nos aminocidos desde que

39
sejam semelhantes. Geralmente, como estes resduos esto nas extremidades do peptdeo, este
forma um arco sobre o pavimento do sulco e fica mais exposto para interagir com o TCR.

MHC Classe II:


Liga peptdeos exgenos (p.e. peptdeos derivados da digesto de molculas MHC I de uma
clula fagocitada) e apresenta-os a linfcitos CD4+, podendo desencadear uma resposta por
imunidade humoral.
Os peptdeos ligados tm em regra entre 13 e 18 aminocidos Como o sulco do MHC II aberto
nas duas extremidades o peptdeo pode ir para alm das mesmas, como um longo cachorro
quente num po (analogia usada no Kuby Immunology, 6 edio). No h resduos de
ancoragem, os 13 aminocidos centrais determinam a ligao ao MHC II ao longo de vrios stios
e no s nas extremidades, no se formando nenhum arco.

Porm, a associao entre o tipo de um linfcito T e a classe de MHC que reconhece nem sempre
absoluta (p.e. podem haver linfcitos TC que reconheam Ag ligados a MHC II).

VARIEDADE
O MHC muito varivel entre espcies e entre indivduos, devido a polimorfismo nos vrios
locus e a variabilidade do nmero de genes (p.e. DR pode ter entre 2 e 9 genes, estando
representados 4 no esquema da pg. 1). Tendo em conta o nmero de combinaes possveis
de alelos e nmero de genes para MHC I e II calcula-se um total de 2.25 x 1018 fentipos possveis.
Contudo, este nmero incerto pois poder ser inferior ao real, visto que praticamente s a
populao europeia foi estudada, ou superior tendo em conta a ocorrncia de linkage
disequilibrium (hapltipos), devido a um ainda reduzido nmero de geraes desde as
populaes fundadoras, seleo natural ou diferente propenso ocorrncia de crossing-over
de determinadas regies. Logo, existe muita dificuldade nos transplantes de rgos em
encontrar dadores e recetores com MHC compatveis.

REGULAO DA EXPRESSO
MHC Classe I so expressos na maioria das clulas nucleadas (neurnios e espermatozides em
alguns estgios de desenvolvimento no expressam). Em clulas saudveis apresentam
protenas da mesma, enquanto que em clulas infetadas por vrus apresentam protenas virais
(que variam consoante a variante de MHC I, que varia consoante o indivduo).
MHC Classe II apenas expresso em APCs, nomeadamente macrfagos, clulas dendrticas e
linfcitos B. Clulas tmicas epiteliais e outras clulas (endoteliais, queratincitos) podem ser
induzidas por citocinas a express-lo e funcionar como APC em certas circunstncias.
A regulao feita por:
Ativao da APC expresso de MHC II
TNF, IFN , e expresso de MHC
IFN , corticoesterides, prostaglandinas expresso de MHC II em linfcitos B
Alguns vrus expresso de MHC (por diminuio da transcrio ou das molculas
transportadoras do MHC, estratgia para evitar a resposta imunitria)

40
RESPOSTA IMUNITRIA
A variabilidade da resposta imunitria induzida por MHC II explicada por dois modelos:
Determinant-selection model diferentes molculas MHC II tm diferentes
capacidades de ligar o Ag processado
Holes-in-the-repertoire model linfcitos T com TCR que reconheam Ag estranhos
muito semelhantes a Ag do prprio podem ser eliminados durante o processamento no
timo
Pensa-se que ambos os modelos esto corretos. Diferenas nas capacidades dos MHC se ligarem
a determinado peptdeo ou de um TCR reconhecer o complexo MHC-peptdeo pode levar os
indivduos a reagir mais ou menos intensamente a certos Ag.

DOENAS
Certos alelos de MHC esto associados a doenas autoimunes, vricas, alteraes do fator
complemento, alteraes neurolgicas e alergias, atravs de mecanismos complexos. Algumas
das doenas mais importantes so Espondilite Anquilosante, Narcolepsia e Hemocromatose
Hereditria.
A variabilidade allica em MHCs de pessoas doentes costuma ser inferior da populao em
geral.

41
PROCESSAMENTO E APRESENTAO DOS ANTIGNIOS (CAP. VIII)
Para ser reconhecido por um linfcito T, o Ag tem de ser processado (razo pela qual um Ag
desnaturado pode desencadear uma Resposta Secundria Celular) e ento formado um
complexo peptdeo-MHC para apresentao antignica. As clulas intervenientes na
apresentao antignica so:
Clulas-alvo apresentam Ag ligados a MHC I
APCs (Antigen-Presenting Cells) apresentam Ag estranhos ligados a MHC II. Tm
capacidade de produzir o sinal co-estimulatrio B7. So clulas dendrticas,
macrfagos, linfcitos B e quase todas as clulas nucleadas (exceto os linfcitos T)
durante uma etapa tardia da resposta inflamatria em funo das etapas anteriores
O modo de entrada na clula e o local do processamento definem a ligao do Ag a MHC I ou II,
o que determina o seu reconhecimento por TC ou TH e posterior resposta imunitria:
Ag endgenos Ag dentro da prpria clula, naturais (estruturas da clula ou
resultantes da sua degradao) ou induzidos por infeo intracelular (como protenas
vricas), so processados por via endgena ou citoslica
Ag exgenos extracelulares, so processados por via exgena ou endoctica

Self-MHC Restriction
Os linfcitos T apenas reconhecem Ag quando apresentados por um MHC self, ou seja, quando
o linfcito e a Clula-alvo/APC tm o mesmo hapltipo de MHC.

CLULAS
APCs Profissionais APCs No Profissionais
Clulas Dendrticas (vrios tipos) Fibroblastos (pele) Clulas Tmicas Epiteliais
Macrfagos Clulas da Glia (crebro) Clulas Tiroideias Epiteliais
Linfcitos B Clulas Pancreticas Clulas Endoteliais
Em rigor, todas as clulas do organismo poderiam ser designadas por APCs pois expressam MHC
I ou MHC II. Porm, por conveno, clulas que apresentam peptdeos a linfcitos T CD8+ so
designadas por Clulas Alvo, enquanto que as que apresentam a linfcitos T CD4+ so
designadas APCs.
Clulas Alvo quase todas as clulas nucleadas expressam MHC I, pelo que podem
funcionar como Clulas Alvo. Apresentam Ag endgenos a linfcitos TC e
frequentemente so clulas infetadas por vrus ou microrganismos intracelulares,
cancergenas, envelhecidas ou alognicas
APCs expressam MHC II e emitem um sinal co-estimulatrio B7 (CD 80 ou CD 86):
o Profissionais:
Clulas Dendrticas as mais eficazes, constitutivamente tm elevada
expresso de MHC II e atividade co-estimulatria, podem ativar clulas TH
naive
Macrfagos tm de ser ativados por fagocitose (ao contrrio de outras
APCs) de Ag particulados para expressar MHC II e uma molcula
membranar co-estimulatria B7
Linfcitos B expressam MHC II constitutivamente mas precisam de ser
ativados para expressar uma molcula co-estimulatria B7

43
o No Profissionais podem ser induzidas a expressar MHC II ou um sinal co-
estimulatrio, atuam durante curtos perodos de tempo durante uma resposta
inflamatria, so menos importantes (apresentam Ag de vez em quando)

PROCESSAMENTO

A maior parte dos peptdeos degradada em aminocidos, e no apresentada em MHC.

Via Citoslica
Os nveis das vrias protenas so precisamente
regulados nas clulas, atravs de um processo
contnuo de sntese e degradao. Algumas
protenas tm como destino final a apresentao em
MHC I em vez da degradao total em aminocidos.
1 Degradao de protenas intracelulares
(normalmente marcadas com ubiquitina) no
Proteossoma. Os Proteossomas envolvidos na
apresentao antignica geram preferencialmente
peptdeos com uma terminao hidrofbica e/ou
bsica Resduos de Ancoragem que se ligam a
molculas MHC Classe I e contm 2 subunidades
codificadas no MHC (LMP2 e LMP7) e outra que no
(LMP10, tambm chamada MECL-1), que so
induzidas por elevados nveis de IFN-
2 Transporte dos peptdeos resultantes so
para o RER pela TAP, com gasto de ATP. A TAP
(Transporter associated with Antigen Processing)
est na membrana do RER e um heterodmero de
2 protenas, TAP1 e TAP2, cada uma com maior
afinidade para peptdeos com 8-10 a.a. e com
terminaes hidrofbicas ou bsicas, ou seja, que se
liguem facilmente a MHC I

44
3 Ligao de um peptdeo a um MHC I auxiliado por Chaperones. As cadeias e 2-
microglobulina so sintetizadas no RER, e a montagem dos peptdeos na molcula MHC I exige
um peptdeo no sulco de ligao e chaperones calnexina, calreticulina e tapasina:
3.1. Calnexina liga-se Cadeia
3.2. Ligao da Microglobulina 2 Cadeia liberta a Calnexina e forma o MHC I, que se
liga a Calreticulina e Tapasina
3.3. Tapasina aproxima uma TAP do MHC I, permitindo que este adquira um peptdeo
3.4. Complexo MHC I-peptdeo, agora estvel e com o folding completo, dissocia-se da
Calreticulina e Tapasina e sai do RER via Golgi para a membrana celular

Os genes de TAP e de LMP so polimrficos, pelo que diferenas na clivagem de Ag proteicos ou


no transporte para o RER podem contribuir para a variao da resposta a diversos Ag endgenos
entre indivduos. Deficincias na TAP podem gerar vrias doenas com sintomas de
imunodeficincia e autoimunidade, uma vez que se um peptdeo no se ligar ao MHC I este no
adquire a conformao correta e no migra para a superfcie celular.

Via Endoctica
1 Fagocitose (com hidrlise enzimtica do Ag)
Endocitose mediada por recetores (como nos linfcitos B) ou pinocitose, sem
degradao do Ag
2 Degradao do Ag em peptdeos com 13-18 a.a. O Ag atravessa vrios compartimentos
ou vesculas endocticas sucessivamente mais cidas (endossomas recentes endossomas
tardios ou endolisossomas lisossomas)
3 Transporte de MHC II para as vesculas endocticas guiado pela Cadeia Invariante. MHC II
so sintetizados no RER, contudo, importante que no se liguem aos peptdeos transportados
pela TAP. Assim, 3 molculas MHC ligam-se a um trmero de 3 protenas Cadeia Invarivel
(tambm conhecida como Ii ou CD74) pelo sulco de ligao, impedindo a ligao de peptdeos
endgenos e ainda contribuindo para o folding, sada do RER para o Golgi e direcionamento para
as vesculas endocticas da protena de MHC II

Trmero de 3 protenas Ii, em tons diferentes

45
4 Degradao do trmero de Cadeia Invarivel em CLIP nas vesculas endocticas. medida
que vai passando por vesculas sucessivamente mais cidas (endossomas recentes
endossomas tardios lisossomas), a Cadeia Invarivel vai sendo degradada at restar apenas
um fragmento ligado ao sulco de ligao do MHC II, o CLIP (CLass II associated Invariant chain
Peptide).
5 CLIP substitudo por um peptdeo Ag exgeno. Reao catalisada nas vesculas
endocticas pela HLA-DM
6 HLA-DO pode-se ligar a HLA-DM e inibir a reao. HLA-DO apenas expressa em linfcitos
B e clulas do Timo
7 MHC II-peptdeo transportado para a membrana celular. A ligao do peptdeo
necessria para a aquisio da conformao correta e transporte para a superfcie celular de
MHC II

No caso dos linfcitos B, o Ag captado pelas Ig na sua membrana e o conjunto endocitado,


seguindo-se o processamento intracelular. Depois o Ag apresentado por um MHC II a linfcitos
T CD4+. Praticamente no apresentam por MHC I.

Processamento de Ag exgenos por um linfcito B que faz Endocitose Mediada por Recetores, atuando os Ac
membranares como recetores. As etapas iniciais da sntese de MHC II no esto representadas

46
Na Via Citoslica, o Ag liga-se ao MHC I no RER, enquanto que na Via Endoctica o Ag se liga ao
MHC II numa vescula endoctica.

Apresentao de Ag no peptdicos
CD1 uma famlia de genes e protenas que apresentam Ag no peptdicos (lpidos e glicolpidos)
e que so estruturalmente semelhantes a MHC Classe I. A sua expresso varia entre tipos de
clulas, tm padres de trfego celulares diferentes entre si, so processadas de uma maneira
diferente e so reconhecidas por vrios tipos de linfcitos.

Apresentao Cruzada de Ag Exgenos


necessria para que uma clula no APC infetada (no expressa as molculas co-estimulatrias
necessrias para ativar linfcitos T CD8+ naive) ou APC com Ag adquiridos pela via exgena
ativem uma resposta citoltica. Por vezes, APCs desviam Ag exgenos obtidos por endocitose
para a Via Endgena e MHC I. Se ativar linfcitos T CD8+ diz-se cross-priming, se neles induzir
tolerncia diz-se cross-tolerance. As clulas que mais utilizam este processo so as Clulas
Dendrticas, principalmente as que residem em rgos linfoides secundrios (pensa-se que

47
recebem Ag de APCs circulantes ou clulas infetadas senescentes). Tambm ocorre em linfcitos
B, macrfagos, neutrfilos e mastcitos. Foram propostos dois modelos, ambos com evidncias
e que provavelmente coexistem:
Enzimas especiais de processamento de Ag ligam Ag exgenos a MHC I
Enzimas especiais de endocitose enviam Ag exgenos para um compartimento
endoctico onde os peptdeos resultantes so transportados para o citosol por TAP
nessas vesculas e depois ligados a MHC I
Pensa-se que, para evitar respostas citolticas
acidentais a Ag no patognicos ou self, as clulas
dendrticas necessitam de ser licenciadas por
linfcitos T CD4+ ativados antes de fazerem
apresentao cruzada:
Clula dendrtica apresenta um Ag em MHC
II pela Via Exgena a um linfcito TH,
ativando-o
Linfcito TH ativado estimula molculas co-
estimulatrias na clula dendrtica e
secreta citocinas (principalmente IL-2)
Esta segunda opinio licencia a clula
dendrtica a apresentar Ag internalizados
em MHC I e ajuda a ativar linfcitos T CD8+
nave

48
RECEPTOR DE CLULAS T (TRC) (CAP. IX)
Ao contrrio dos anticorpos, a maioria dos TCR,
no reagem com antignios solveis, mas com
antignios processados ligados a uma molcula do
MHC.
A molcula responsvel pela especificidade das
clulas T um heterodmero composto por
cadeias e ou e . O TCR , como o
anticorpo, caracterizado por alto grau de
especificidade, sendo por isso considerado uma
molcula do sistema imunitrio adaptativo
enquanto que alguns TCR reconhecem classes
de antignios presentes em grupos patognicos
no processados e apresentados pelo MHC,
actuando a nvel da imunidade inata.
A maioria das clulas T humanas em circulao
expressa TCR .

ESTRUTURA E FUNES
As estruturas dos domnios dos heterodmeros TCR e so estritamente similares s das
imunoglobulinas.
Cada cadeia do TCR possui dois domnios com
pontes de dissulfidro que se estendem por 60 a 75
aminocidos dentro das cadeias. A extremidade
aminoterminal de ambas as cadeias apresenta
sequncia varivel, sendo a restante sequncia da
cadeia conservada.
Os domnios do TCR um varivel (V) e um
constante (C) so estruturalmente homlogos aos
domnios V e C das imunoglobulinas. Os domnios
variveis do TCR tm trs regies hipervariveis
equivalentes a regies de determinao de
complementariedade (CDRs) das cadeias leves e
pesadas das imunoglobulinas.
Aps o domnio constante, cada cadeia do TCR
contm uma curta sequncia de conexo na qual um resduo de cistena forma uma ligao
dissulfidro com a outra cadeia do heterodmero. Aps a regio de conexo existe uma regio
transmembranar de 21 a 22 aminocidos que ancora cada cadeia membrana plasmtica
composta por aminocidos carregados positivamente que promovem tambm a interao entre
as cadeias do heterodmero do TCR e as cadeias do complemento CD3 transdutor de sinal.
Na extremidade carboxiterminal, cada cadeia do TCR apresenta uma curta cauda citoplasmtica
de 5 a 12 aminocidos
Verificam-se diferenas nas regies de ligao ao antignio entre TCRs e como o ngulo
formado entre as regies V e C que no TCR de 147o e no TCR de 111 o.

49
ORGANIZAO E REARRANJO DOS GENES DO TCR
Os genes que codificam os TCR e so expressos apenas em clulas da linhagem de clulas
T.
Como no caso dos genes das imunoglobulinas, os genes funcionais do TCR so produzidos por
rearranjo dos segmentos V e J nas famlias das cadeias e e V, D e J nas famlias das cadeias
e . A localizao da famlia de genes de cada cadeia significativo ao impedir que os
receptores e sejam co-expressos por um mecanismo de excluso allica.
A cadeia (como a cadeia L das Ig) codificada por segmentos de genes V, J e C. A cadeia
(como a cadeia H das Ig) codificada por segmentos de genes V, D, J e C. O rearranjo de
segmentos de genes das cadeias e dos
TCR resulta na unio de V-J para a cadeia
e V-D-J para a cadeia .
O mecanismo de rearranjo de DNA
similar ao das imunoglobulinas com a
presena de sequncias sinais de
recombinao (RSSs) octmeros e
nonameros conservados contendo
sequencias espaadas de 12 ou 23 pares
de bases a flanquear cada segmento de
gene V,D e J. A recombinao pode
ocorrer apenas entre RSSs.
As clulas pr-T expressam genes
activadores de recombinao (RAG-1 e
RAG-2). A enzima recombinase RAG1/2 reconhece os sinais de reconhecimento dos octmeros
e nonameros e catalisa a unio V-J e V-D-J durante o rearranjo gnico atravs da introduo de
uma quebra numa cadeia de DNA entre as sequncias codificantes e de sinalizao e exciso das
alas de DNA formadas no processo.
A regio constante de cada cadeia do TCR codificada por um segmento de gene C que tem
mltiplos exes: o primeiro exo codifica para a maioria do domnio C da cadeia correspondente,
o exo seguinte uma sequncia de conexo, seguido por exes que codificam a regio
transmembranar e a cauda citoplasmtica.
Para alm da flexibilidade de juno, a adio de nucletidos na regio P por variao na
clivagem por endonuclease e na regio N, catalisada por uma transferase contribuem para a
diversidade do TCR.
Ao contrrio dos genes das Ig, os genes do TCR no sofrem mutao somtica, ou seja, os genes
funcionais do TCR gerados por rearranjos gnicos durante a maturao da clula T no timo
possuem as mesmas sequncias dos encontrados na populao de clulas T perifricas maduras.
Assim, evita-se que a especificidade da clula T mude aps a seleco tmica o que reduz a
possibilidade de mutaes ao acaso que gerem clulas T autoreactivas.

50
COMPLEXO DO RECEPTOR DA CLULAS T: TCR-CD3
O TCR est associado membrana com um complexo de transduo de sinal de mltiplos
componentes, CD3 cuja funo semelhante do complexo Ig-/Ig- do receptor das clulas B.
A molcula acessria participa na transduo do sinal aps a interaco de uma clula T com o
antignio, mas no influencia a interao.
A sua expresso necessria expresso do TCR na membrana, pelo que a perda dos genes que
codificam o CD3 leva perda de todo o complexo molecular.
O CD3 um complexo de 3 cadeias polipeptdicas invariveis que se associam para formar 3
dmeros: heterodmero de cadeias e , heterodmero de cadeias e e homodmero de de 2
cadeias (90%) ou heterodmero .
As regies transmembranares de todas as cadeias do CD3 contm um aminocido carregado
negativamente (aspartato ou glutamato) que interage com 1 ou 2 aminocidos carregados
positivamente na regio transmembranar de cada cadeia do TCR.
As caudas citoplasmticas das cadeias do CD3 contm um motivo de activao de
imunoreceptor baseado em tirosina (ITAM) que interage com tirosina cinases e promove a
transduo do sinal. Cada cadeia , e contm um ITAM, enquanto as cadeias e contm 3
cpias.

MOLCULAS DE MEMBRANA ACESSRIAS DA CLULA T


Embora o reconhecimento de complexos antignio-MHC seja mediado apenas pelo complexo
TCR-CD3, vrias outras molculas de membrana intervm no reconhecimento do antignio e na
activao da clula T, reforando a interao entre as clulas T e as clulas apresentadoras de
antignios ou as clulas-alvo, actuando na transduo do sinal ou executando ambas as funes.
Os co-receptores CD4 e CD8 ligam-se a regies conservadas das molculas do MHC da classe I e
II, reconhecem o complexo peptdeo-MHC e participam na transduo do sinal.
Os domnios extracelulares do CD4 e CD8 ligam-se s regies conservadas das molculas do MHC
nas APCs ou clulas-alvo. O CD8 liga-se a molculas MHC da classe 1 em contacto com domnios
2, 3 e 2-microglobulina enquanto o CD4 interage com o MHC II atravs do contacto do
domnio distal de membrana do CD4 com um bolso hidrofbico formado por resduos dos
domnios 2 e 2 do MHC II.

51
A afinidade do TCR por complexos peptdeo-MHC aumentada por molculas de adeso celular
como CD2, LFA, CD28 e CD45R que ligam se forma independente a outros ligandos nas APC ou
clulas-alvo. Verifica-se ainda aumento transitrio da expresso de molculas de adeso celular
na membrana.

ESTRUTURAS TRIDIMENSIONAIS DOS COMPLEXOS TCR-PEPTDEO-MHC


O complexo TCR -peptdeo-MHC consiste numa nica molcula de TCR ligada a uma nica
molcula de MHC e pptido. O TCR contacta com o MHC atravs dos seus domnios variveis.
As alas CDR3 das cadeias e do TCR juntam-se no centro
do pptido, a ala do CDR1 da cadeia fica na extremidade
N-terminal e o CDR1 da cadeia na extremidade C-terminal
enquanto as alas CDR2 contactam com o MHC.
O reconhecimento do complexo peptdeo-MHC ocorre
atravs de alas variveis na estrutura do TCR. CDR1 e CDR3
das cadeias e contactam com o pptido e uma grande
rea do MHC.
No caso da interao com MHC classe II verifica-se um maior
nmero de resduos de contacto o que concorda com a
maior afinidade de ligao j referida.

ALORREACTIVIDADE DAS CLULAS T


Para alm da reaco com MHC prprio e com antignios estranhos, as clulas T respondem s
molculas do MHC estranhas, uma reaco que leva rejeio de enxertos alognicos.
O reconhecimento do MHC estranho pode ser directo clulas T reconhecem molculas do MHC
alognico em clulas estranhas como se fossem molculas do MHC prprio ou indirecto: as
clulas T reconhecem o MHC estranho aps este ser processado e os seus fragmentos serem
apresentados ligados ao MHC prprio.

52
MATURAO, ATIVAO E DIFERENCIAO DOS LINFCITOS T (CAP. X)
Apesar das suas diferenas, todos os grupos de linfcitos T do nosso organismo (T
reguladoras, helper, e citotxicas e ainda as T ) derivam das mesmas clulas, as clulas
hematopoiticas T progenitoras. Os percursores de clulas T sofrem maturao no timo e
ativao posterior na periferia. Uma vez maduras, as clulas T desempenham variadas funes,
baseadas sempre no reconhecimento de antignios MHC-dependente.

MATURAO
O processo bsico de maturao dos linfcitos T demora cerca de 3 semanas, e ocorre no timo,
compreendendo 4 fases fundamentais.

Comprometimento de clulas hematopoiticas com a linhagem celular T


1. As primeiras fases da hematopoiese originam clulas T progenitoras a partir de clulas
tronco multipotentes;
2. 8/9 semana de gestao, estas migram para o crtex do timo, comprometendo-se
com a linhagem T graas ao da protena Notch, e passam a designar-se timcitos;
3. Os timcitos tm capacidade proliferativa, e ainda no expressam nenhum marcador de
superfcie dos linfcitos, como o TCR e os complexos CD, podendo ser designadas de
clulas duplo-negativas 1 (DN1);
4. A diferenciao de timcitos vai iniciar-se por expresso das protenas RAG, necessrias
ao rearranjo dos genes do TCR.

Rearranjo dos genes TCR, com consequente expresso diferencial de recetores


membranares

1. Inicia-se o rearranjo dos genes das cadeias , e do TCR. Os genes da cadeia ainda
esto demasiado compactados para serem acedidos pelas recombinases;
2. Comea a haver expresso dos complexos membranares CD44, CD25 e c-Kit clulas
DN2;
3. Os linfcitos T maduros vo diferenciar-se a partir da transio DN2-DN3, sofrendo
poucas alteraes fenotpicas. Estas clulas so os primeiros linfcitos maduros a
detetar-se no feto, e a sua abundncia relativa vai reduzir-se at idade adulta, em que
s representam menos de 5% do nmero total de linfcitos;
4. Continuao do rearranjo profundo dos genes do TCR. Perda de expresso de CD44 e c-
Kit fentipo DN3, que vai dar origem aos linfcitos T ;
5. As clulas DN3 expressam o recetor pr-TCR. Este vai induzir a paragem de rearranjo
dos genes TCR , e e a iniciao do rearranjo dos genes da cadeia ;
6. Aps este rearranjo as clulas diminuem muito a expresso de CD25 e tornam-se DN4.
Estas vo diferenciar-se em clulas Duplo-positivas (DP), que expressam os recetores
CD3, CD4 e CD8, alm do TCR;
7. A partir das clulas DP vo-se diferenciar os linfcitos T helper, T citotxicos, e outras
linhas linfocitrias, incluindo os linfcitos T reguladores e as clulas Natural Killer 1.

53
54
Seleo das clulas T que reconhecem MHC prprio (garante competncia) e que
no reagem a antignios prprios (garante tolerncia).
1. Seleo positiva ainda no crtex do timo, as clulas epiteliais corticais, que expressam
o MHC, interagem com os recetores dos timcitos DP. As clulas DP cujo heterodmero
TCR reconhecer e se ligar ao MHC prprio (I ou II) sobrevivem e migram para a
medula do timo. As clulas que no interagem com as molculas do MHC prprio sero
eliminadas por apoptose;
2. O recetor de membrana que no interagiu com o MHC eliminado. Assim, as clulas
que se ligam ao MHC II com o CD4, perdem o CD8, indo tornar-se Linfcitos T helper, e
as que se ligam ao MHC I com o CD8, perdem o CD4, indo tornar-se Linfcitos T
citotxicos;

3. Seleo negativa - as clulas dendrticas e os macrfagos da medula do timo, que


expressam MHC I e II que podem estar ligados a auto-antignios, interagem com os
timcitos que expressam recetores de alta afinidade para molculas de MHC prprias
ou que reagem a auto-antignios. Todas as clulas que interajam na medula do timo
sofrem apoptose, e as que no reagem, sendo por isso tolerantes a auto-antignios,
sobrevivem. A seleo negativa o mecanismo principal da tolerncia central (a
tolerncia perifrica est descrita no captulo XX);
4. Assim, apenas as clulas cujo TCR lhes permite ligarem-se com baixa afinidade ao MHC
prprio e que no reagem a auto-antignios completam o processo de maturao e
saem para a periferia como Linfcitos CD4 ou CD8. Estes correspondem a 2% dos
timcitos iniciais, sendo os restantes 98% eliminados por apoptose.

Maturao extra-tmica
1. Aps sada do timo, as clulas T CD4 e CD8 designam-se emigrantes tmicos recentes
(RTE), no possuindo ainda as possibilidades de cativao e expanso clonal;
2. Pensa-se que a maturao final ocorre por interaes com MHC e outros complexos das
clulas apresentadoras de antignios (APC) nos rgos linfides secundrios, onde se
originam ento linfcitos T nave.

55
ATIVAO
Aps sada do timo, os linfcitos T nave circulam entre o sangue e os gnglios linfticos at
entrarem em contacto com um antignio estranho, sofrendo ento ativao e diferenciao.
A ativao dos linfcitos T nave o evento central da resposta imune adaptativa, consistindo
na interao do complexo TCR-CD3 com um antignio processado e ligado a uma molcula de
MHC (MHC I para clulas CD8 e II para CD4).

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Esta interao conduz ao processo de ativao e expanso clonal das clulas T: enquanto os
linfcitos T nave so clulas quiescentes, com metabolismo baixo, cromatina condensada e
paradas em G0 no ciclo celular, os linfcitos T ativados, ou seja, que j contactaram com
antignios alvo, produzem e segregam uma srie de protenas fundamentais (nomeadamente
citoquinas) para a resposta imunitria e entram em proliferao, diferenciando-se em clulas T
memria e clulas T efetoras.
Devido sua rpida diviso, os linfcitos T ativados correspondem maioria dos linfcitos
encontrados em periferia, ultrapassando em muito os nmeros de linfcitos T nave.
A ativao de clulas T regulada por uma srie de cascatas enzimticas complexas, que so
sumarizadas no esquema que se segue, e necessita de pelo menos dois sinais para se iniciar: o
sinal 1 (interao TCR-CD3 com o antignio) e um sinal co-estimulador, produzido pela
interao entre o CD28 da clula T e as molculas B7 das APC. Na ausncia deste o linfcito
mantem-se em anergia clona, no sofrendo ativao.

DIFERENCIAO DAS CLULAS T


Os linfcitos T ativos podem dividir-se em dois grupos fundamentais: linfcitos T efetores,
responsveis em parte pela resposta imune adaptativa humoral e celular, e linfcitos T de
memria, que iro provocar uma resposta posterior a nova invaso pelo mesmo antignio.
Descreve-se agora por etapas o processo de diferenciao:

57
1. Aumento da transcrio e da secreo de IL-2 no linfcito ativado, e consequente
estimulao autcrina do recetor de IL-2;
2. Diviso celular rpida provocada pela interleucina 2: a clula vai dividir-se 2 a 3 vezes
por dia ao longo de 4 a 5 dias, garantindo um elevado nmero de clones dirigido para
aquele antignio especfico;
3. Execuo de diferentes funes efectoras, que dependem dos recetores de membrana
expressos, e que sero explicadas em captulos posteriores;
a. Os linfcitos T helper (CD4) diferenciam-se em Th1 e Th2, sendo responsveis
pela secreo de citoquinas e auxlio s clulas B;
b. Os linfcitos T citotxicos (CD8) so responsveis pela imunidade celular, tendo
atividade citotxica para clulas com o antignio reconhecido;
c. Os linfcitos T reguladores (CD25) regulam negativamente a resposta imune.
4. Diferenciao de alguns linfcitos T efetores em linfcitos T de memria, que voltam a
entrar em quiescncia e s se vo dividir se entrarem em novo contacto com o mesmo
antignio, desencadeando uma resposta secundria mais forte e rpida.

58
MATURAO, ACTIVAO E DIFERENCIAO DOS LINFCITOS B (CAP. XI)
As 3 fases principais que levam transformao de clulas B progenitoras, localizadas na medula
ssea, em linfcitos B de memria ou plasmcitos (linfcitos B activos) so, tal como nos
linfcitos T, a maturao, a activao e a diferenciao. A maturao uma fase independente
de antignios que ocorre na medula ssea. J a diferenciao e activao dependem de
linfcitos T helper e de estimulao por um antignio especfico, ocorrendo em rgos linfides
secundrios.

MATURAO
A maturao de linfcitos B o conjunto de processos que leva transformao de clulas B
progenitoras em linfcitos B virgens. Decorre desde a vida embrionria inicial, no saco vitelino
e fgado, e ao longo de toda a vida, na medula ssea. A maturao depende da ocorrncia de
vrias cadeias de eventos simultneas e interligadas:

59
Proliferao e diferenciao inicial de clulas B progenitoras na medula ssea,
dependente das clulas do estroma
1. No estado mais precoce do desenvolvimento, h contacto directo entre as pr-B e as
clulas do estroma, atravs de CAMs (VCAM-1 das clulas do estroma liga-se VL4 da
pr-B);
2. Interaco c-kit da pr-B com Stem Cell Factor (SCF) das clulas do estroma estimula a
diviso celular e a diferenciao das primeiras em clulas pr-B;
3. Produo de IL-7 pelas clulas do estroma e ligao ao receptor da clula pr-B induz
maturao e perda de contacto directo entre as clulas e o estroma. A partir de agora
as ltimas iro regular as fases subsequentes maturao de linfcitos B apenas
distncia, atravs de citocinas;
4. As clulas pr-B podem tambm dividir-se at 6 a 8 vezes. A sua maturao em clulas
B imaturas depende do rearranjo gentico abaixo descrito.

Rearranjo dos genes de Imunoglobulinas das clulas tronco linfides


1. Rearranjo dos genes da cadeia pesada Dh-Jh (em primeiro lugar) e Vh-DhJh na clula
pr-B origina clulas pr-B;
2. O rearranjo bem-sucedido dos genes da cadeia leve na clula pr-B o factor
determinante para a sua diferenciao em clula B imatura. Devido excluso allica,
apenas um isotipo de cadeia leve expresso num linfcito B, pelo que o arranjo dos
genes da cadeia leve compromete a clula B imatura a uma especificidade antignia
especfica;
3. A maturao gentica das clulas B na medula ssea culmina com a produo de clulas
B imaturas portadoras de IgM, que ainda no so funcionais.

Evoluo dos marcadores de superfcie celular da linhagem B


1. No estgio pr-B, as clulas no apresentam cadeias de anticorpos leves nem pesadas,
expressando CD45R e molculas transdutoras de sinal Ig-alfa/Ig-beta que depois se iro
associar s cadeias de anticorpo de membrana. Expressam ainda o correceptor CD19, e
ainda os CD43, c-Kit, CD24 e HSA;
2. As clulas pr-B deixam de expressar o CD43 e o c-Kit por aco parcrina da IL-7, e
passam a ter o CD25, receptor de IL-2;
3. Aps o rearranjo dos genes das Imunoglobulinas, a IgM aparece superfcie das clulas
B imaturas, que perdem a expresso do CD25.

60
SELECO NEGATIVA DE CLULAS B AUTO-REACTIVAS
Aps estes processos, as clulas B imaturas so sujeitas aos mecanismos de seleco: as clulas
B imaturas j expressam Imunoglobulinas M com cadeias leves especficas para um determinado
antignio. Assim, todas as clulas que se ligarem aos antignios em circulao na medula ssea,
ou seja, que reconhecerem antignios prprios, iro geralmente entrar em apoptose aps
ligao ao antignio, ocorrendo a deleco selectiva de clulas B reactivas a auto antignios.
Por vezes, pode haver recuperao de algumas destas clulas por novo rearranjo dos genes da
cadeia leve.
As que passarem este processo sairo da medula ssea como clulas B virgens, que ao contrrio
das primeiras j respondero positivamente ao encontro com um antignio estranho. Apenas
cerca de 10% das clulas B que a medula ssea produz entram em circulao. Os restantes 90%
sofrem este processo de deleco clonal.

ACTIVAO DOS LINFCITOS B VIRGENS


A activao, diferenciao e proliferao de Linfcitos B ocorrem na periferia em resposta a uma
interaco com um antignio especfico para a Ig de membrana do linfcito. Estes mecanismos
levam proliferao de plasmcitos e de clulas B de memria.
Na ausncia de activao, os linfcitos B virgens, que em termos de ciclo celular so clulas
paradas em fase G0, morrem ao fim de algumas semanas por apoptose.

61
Os mecanismos de activao e diferenciao podem dividir-se em dois grupos os despoletados
por antignios timo-dependentes, dependentes de linfcitos T helper, e os despoletados por
contacto com antignios timo-independentes, que se podem dividir nos tipos 1 e 2.
As propriedades dos diferentes tipos de antignios esto descritos abaixo. de destacar a
propriedade de activao policlonal dos TI-1, que efectuada por ligao adicional do antignio
ao Toll TLR-4 das clulas B no-especficas.

Sinal 1 e 2 - ligao os receptores


Para que uma clula B virgem em G0 seja activada, so necessrios dois sinais diferentes: para
antignios TI, tanto o sinal 1 como o sinal 2 so produzidos imediatamente aps contacto com
o antignio. Para antignios TD, o sinal 2 fornecido por ligao atravs do CD40 ao linfcito Th.
Em ambos os casos, o sinal 1 produzido por ligao de antignios multivalentes fazem ligao
s IgMs de mem brana (mIgM). No entanto, para ambos os tipos de antignios, a produo de
citocinas estimulantes por T helper importante na proliferao linfocitria (IL 2, 4 e 5).

Sinalizao intracelular activao do ciclo celular


Como as Igs tm caudas citoplasmticas curtas, este mecanismo est dependente das Ig-alfa e
Ig-beta que se encontram nas proximidades dos anticorpos de membrana. Estas activam uma
diversidade de cinases que sero responsveis por
1. Mudar padres de expresso gnica
2. Activar o ciclo celular
3. Provocar mudanas funcionais
4. Diferenciar a clula

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Importncia do complexo de co-receptor das clulas B
1. Correceptor estimulador: constitudo por 3 protenas de membrana: CD19, CR2 e
TAPA-1. O CD19 tem uma poro intracitoplasmtica longa responsvel pela
amplificao de sinais emitidos pelo complexo BCR. O CR2 recebe um produto clivado
pelo complemento, C3d, e funciona com um receptor para TAPA-1.
2. Correceptor inibidor: constitudo pelo CD22, que est associado ao BCR em repouso e
emite um sinal negativo que inibe a activao dos linfcitos.

DIFERENCIAO E SELECO POSITIVA DOS LINFCITOS B ACTIVOS EM CENTROS


GERMINATIVOS
7 a 10 dias aps a exposio de linfcitos virgem a antignios TD, surgem os centros germinativos
de linfcitos B, onde ocorrem os 3 eventos major da sua diferenciao: maturao da afinidade,
mudana de classe e formao de clulas plasmticas e clulas B de memria. Os centros
germinativos esto localizados em folculos linfides, localizados nos rgos linfides
secundrios ou noutros rgos como o intestino.
Na zona escura dos centros germinativos, as clulas B activadas sofrem intensa proliferao,
sendo conhecidas como centroblastos. Estes originam centrcitos, com maior quantidade de Ig
de membrana, que vo migrar para zona clara e contactar com o antignio apresentado pelas
clulas dendrticas.
Os centrcitos que no contactarem com o antignio apresentado sofrem apoptose. Os que
sobreviverem a esta seleco positiva recebem um sinal de sobrevivncia das clulas T helper e
diferenciam-se em plasmoblastos (que se iro diferenciar me plasmcitos) e clulas B de
memria.

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Maturao de afinidade
Consiste no aumento da afinidade dos anticorpos produzidos para o antignio especfico contra
o qual so direccionados. So dependentes dos processos de hipermutao somtica nos genes
de Igs nos centros germinativos, e posterior seleco por clulas dendrticas dos linfcitos com
Ig de maior afinidade para o antignio apresentado

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Mudana de classe
A mudana de classe dos anticorpos produzidos pelo linfcito B permite que, para um mesmo
antignio, haja uma diversidade de funes e respostas biolgicas desempenhadas pelos
anticorpos. Resulta da propriedade dos domnios das cadeias VH de se associarem com uma
regio constante de qualquer isotipo, o que permite mudar actividade biolgica mas manter a
afinidade do Ac.
A resposta humoral a antignios TD marcada pela mudana massiva para classes no Ig-M,
enquanto a resposta a antignios Ti marcada sobretudo pela produo de IgM.
Nos primeiros, essencial a ligao a linfcitos T helper (CD40-CD40L) para que ocorra mudana
de classe, como patente na sndrome de hper IgM.

Formao de plasmcitos
Formados nos centros germinativos mas no s, os plasmcitos no tm anticorpos de
membrana, segregando em vez disso elevadas quantidades de anticorpos especficos de uma
determinada classe.
A formao de plasmcitos exige modificao do processamento de RNA, para mudar da forma
membranar para a forma secretada do anticorpo. Exige ainda o aumento exacerbado da
transcrio e traduo das cadeias leves e pesadas.

Formao de clulas B de memria


Os linfcitos B maduros seleccionados podem tambm diferenciar-se em clulas B de memria.
Estes possuem um conjunto de caractersticas nicas sintetizadas na tabela abaixo, das quais se
destacam os anticorpos de membrana: dado que esta diferenciao ocorre aps a mudana de
classe, as clulas B de memria podem, ao contrrio das virgens, expressar no s IgM e IgD mas
tambm IgG, IgA e IgE.
As clulas B de memria so responsveis por desencadear a resposta secundria, uma resposta
imunitria a um antignio j antes combatido. Esta resposta qualitativa e quantitativamente
diferente, sendo mais rpida e mais eficaz que a resposta primria.

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66
RECETORES E SINALIZAO: CITOCINAS E QUIMIOCINAS (CAP. XII)
As citocinas so molculas pelas quais as clulas do sistema imunitrio comunicam e podem
estar na forma solvel ou ligada membrana celular. Elas podem ser classificadas em grupos:
Interleucinas citocinas que comunicam entre leuccitos;
Quimiocinas citocinas que permitem a mobilizao de clulas do sistema imunitrio.
Estas pertencem a uma classe de molculas chamadas de quimioatractantes
molculas que atraem clulas por influenciarem a montagem, desmontagem e
contractilidade das protenas do citoesqueleto e da expresso de molculas de adeso
na superfcie da membrana celular. As quimiocinas atraem clulas com os recetores
apropriados para regies onde a concentrao de quimiocina mais elevada.
As suas aes quando se ligam ao respetivo
recetor podem ser:
Mudar a expresso de molculas de
adeso e recetores de quimiocinas
na membrana alvo ajudando uma
clula a mover-se de uma
localizao para outra;
Sinalizar uma clula do sistema
imunitrio a aumentar/diminuir a
atividade de enzimas, alterar a sua
expresso gnica ou
alterar/potenciar os seus efeitos;
Instruir a uma clula quando
sobrevive ou quando morre.

PROPRIEDADES GERAIS DAS CITOCINAS E QUIMIOCINAS


As citocinas medeiam a ativao, proliferao e diferenciao da clula alvo
As citocinas ligam-se a recetores especficos que esto na membrana das clulas alvo e alteram
a atividade enzimtica e a expresso gnica. A suscetibilidade de uma clula a uma citocina
determinada pela presena do recetor correspondente na membrana celular. Estes recetores
tm uma elevada afinidade e, aliado a uma secreo de citocinas que feita muito prximo dos
recetores, uma pequena quantidade de citocinas pode mediar efeitos biolgicos poderosos.
As citocinas regulam a intensidade e a durao da resposta imunitrias estimulando ou inibindo
a ativao, proliferao e/ou diferenciao de vrias clulas, regulando a secreo de outras
citocinas ou de anticorpos ou ainda induzindo a morte celular. Podem ainda modular a
expresso de vrios recetores para quimiocinas, outras citocinas ou ainda para a prpria clula.

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As citocinas ainda exibem:
Pleiotropia a mesma citocina tem efeitos diferentes dependendo da clula alvo;
Redundncia duas ou mais molculas com a mesma funo;
Sinergia o efeito combinado de duas citocinas na atividade celular maior que o seu
efeito somado individualmente;
Antagonismo os efeitos de uma citocina inibem os efeitos de outra;
Induo em cascata a ao de uma citocina numa clula alvo induz a clula a produzir
uma ou mais citocinas adicionais.
Estes atributos permitem regular a atividade celular numa forma coordenada e interativa.

As citocinas tm numerosas funes biolgicas


As principais clulas produtoras de citocinas so os linfcitos T helper, clulas dendrticas e
macrfagos. As principais respostas fisiolgicas que requerem envolvimento de citocinas so:
Induo de uma resposta imunitria celular e humoral;
Induo de resposta inflamatria;
Regulao da hematopoiese;
Cicatrizao de feridas.
Normalmente uma clula alvo exposta a uma mistura de citocinas que combinando os seus
efeitos exerce a sua funo na clula. Raramente atuam sozinhas.

As citocinas podem provocar e dar suporte ativao de subpopulaes especficas


de clulas T
Vrias citocinas intervm no processo de ativao/suporte de subpopulaes especficas de
clulas T:
O linfcito T helper do tipo 1 segrega citocinas que promovem a diferenciao e
atividade de macrfagos e linfcitos T citotxicos. IL-12 e o interfero (IFN) induzem a
sua diferenciao;
O linfcito T helper do tipo 2 ativa clulas B para produzir anticorpos. IL-4 e IL-5
suportam a sua formao;

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O linfcito T helper do tipo 17 promove a diferenciao de neutrfilos e macrfagos
ativados e suporta o estado inflamatrio. IL-17 e IL-23 induzem a sua formao.
A diferenciao e atividade de cada subpopulao de clulas suportada pela ligao de
diferentes combinaes de citocinas em que cada combinao leva transmisso de sinais
intracelulares especficos levando clula T helper diferenciar-se num determinado tipo.

A ativao celular pode alterar a expresso de recetores e molculas de adeso


Para uma clula responder a uma molcula de sinalizao tem de expressar os recetores para
essa molcula. A resposta dessa clula a essa molcula pode, portanto, ser controlada atravs
da alterao da expresso do recetor. Por exemplo, a estimulao de uma clula T por um
antignio:
Induz alteraes na expresso de recetores para quimiocinas levando a que s as clulas
que foram previamente estimuladas pelo antignio migrem pela ao das quimiocinas;
Regula a expresso de molculas de adeso;
Regula a expresso de recetores para citocinas.

As citocinas esto concentradas entre as clulas secretora e alvo


Durante o perodo em que as clulas secretora e alvo esto em contacto, o aparelho secretor da
clula secretora est orientado de forma a que as citocinas sejam libertadas diretamente para a
regio da membrana da clula alvo que est em contacto prximo com a clula secretora,
permitindo que a concentrao efetiva de citocinas na regio de contacto entre as duas clulas
seja muito maior do que fora. Esta forma de libertao deve-se:
Ao tempo de vida curto das citocinas;
Ao tempo curto de atuao das citocinas;
distncia curta a que atuam.

Sinalizao atravs de mltiplos recetores pode ajustar a resposta celular


As citocinas podem ligar-se a mais do que um recetor e os recetores pode ligar mais do que uma
molcula de sinalizao. Assim, sinais recebidos atravs de mais do que um recetor so
integrados ao nvel de uma resposta biolgica atravs de vias de sinalizao que ajustam a
expresso de fatores de transcrio e da atividade de enzimas.

Famlias de citocinas e seus recetores


Existem seis famlias de citocinas:
Interleucina 1;
Hematopoetina;
Interfero;
Fator de necrose tumoral;
Interleucina 17;
Quimiocinas.

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Citocinas da famlia da interleucina 1 induzem a libertao de sinais
proinflamatrios
Citocinas da famlia da interleucina 1 so segregadas muito cedo numa resposta imunitria pelas
clulas dendrticas e moncitos ou macrfagos. A segregao de IL-1 estimulada pelo
reconhecimento de antignios bacterianos, vricos ou parasitrios por recetores do sistema
imune inato.
Os membros desta famlia:
So proinflamatrios induzindo um aumento da permeabilidade capilar no local da
secreo assim como uma amplificao do nvel de migrao leucocitria para os tecidos
infetados;
Sinalizam o fgado a produzir protenas de fase aguda (Interfero tipo 1, IL-6 e
quimiocina CXCL8) induzindo mltiplos efeitos protetores como a destruio do RNA
viral e a induo de febre;
Ativam as clulas T e B;
As principais citocinas desta famlia so:
IL-1 e IL-1 sintetizadas como percursores pro IL-1 (biologicamente ativo e est
ligado membrana celular) e pro IL-1 (requer processamento posterior e solvel). As
duas sofrem ao de uma enzima proteoltica (caspase-1) dentro da clula secretora
para serem ativadas;
IL-18 expressa em moncitos, macrfagos e clulas dendrticas e segregada cedo
na resposta imunitria;
IL-33 expressa no tecido muscular liso e epitlio dos brnquios e a sua expresso
pode ser induzida por IL-1 e TNF- nos pulmes e fibroblastos da pele. Induz os
linfcitos T helper do tipo 2 a libertar citocinas que promovem a interao entre os
linfcitos T com os linfcitos B, mastcitos e eosinfilos;
IL-1Ra liga-se aos recetores IL-1R1 e previne a interao com o recetor IL-1AcP
impedindo a transduo de sinal;
IL-18BP liga-se ao IL-18 impedindo que este interaja com o seu recetor. O seu efeito
inibitrio potenciado pela ligao de IL-1F7;

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Os recetores para os membros desta famlia so:
Recetores para o IL-1 - IL-1R tipo 1 (IL-1R1) e IL-1R tipo 2 (IL-1R2). O primeiro expresso
em muitas clulas, ativo apenas quando ligado membrana e precisa de uma protena
acessria (IL-1RAcP) para o funcionamento completo. O segundo expresso apenas em
clulas B e inativo. Tanto os recetores como a protena acessria existem ligados a
membranas como solveis. A sua maior ou menor expresso permite que o organismo
regule os efeitos das citocinas fazendo com que os recetores inativos ou na forma
solvel compitam com os recetores ativos pelas citocinas;
Recetores para o IL-18 constitudo por IL-18R e IL-18R;
Recetores para o IL-33 constitudo por T1/ST2 em conjunto com o IL-1RAcP.

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Citocinas da famlia da hematopoetina (classe 1) induzem uma diversidade de
funes nas clulas alvo
Vrias citocinas pertencem a esta famlia entre as quais (s esto representadas algumas e com
algumas das suas funes):
IL-2 Sinaliza o incio da diferenciao da proliferao de clulas T e B;
IL-3 Ativa moncitos e induz a diferenciao em megacaricitos. Induz a proliferao
de eosinfilos e desgranulao dos basfilos.
IL-4 Promove as clulas T nave a diferenciar-se em linfcitos T helper tipo 2;
IL-5 - Induz a proliferao de eosinfilos e desgranulao dos basfilos.
IL-6 Sinaliza o incio da diferenciao de clulas B para plasmcitos e da secreo de
anticorpos; Importante para o incio da resposta imune.
IL-12 Promove as clulas T nave a diferenciar-se em linfcitos T helper tipo 1;
G-CSF Essencial para o crescimento e diferenciao de neutrfilos;
GM-CSF Fator de diferenciao para granulcitos e moncitos. Induz a proliferao de
eosinfilos, a diferenciao em megacaricitos e desgranulao dos basfilos.
Os recetores para as citocinas desta famlia so:
Regies homlogas de ligao de citocinas (CHRs - Cytocine-binding Homology
Regions) esta classe de recetores divide-se em trs subfamlias:
o Subfamlia de recetores IL-2 inclui recetores para IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15, IL-
21. So constitudos por 1 cadeia especfica de citocinas , 2 cadeias especficas
de citocinas e 1 cadeia especfica (responsvel pela transduo do sinal e
reconhecimento da citocina). Este recetor encontra-se sob 3 formas: (1) IL-2R
(CD25) tem baixa afinidade, liga-se citocina mas no faz a transduo do
sinal; (2) IL-2 tem afinidade intermdia e capaz de fazer a transduo de

72
sinal; (3) IL-2 - tem alta
afinidade e o maior
responsvel pelos efeitos
das citocinas. A expresso
das trs cadeias que
podem constituir os
recetores varia dentro do
tipo de clula e do seu
estado de diferenciao.
Os recetores de afinidade
intermdia so expressos
em clulas T em descanso e
nas clulas Natural Killer, enquanto que os recetores de baixa e alta afinidade
so expressos em clulas T e B ativadas. A funo dos recetores de baixa
afinidade restringir a expresso de recetores de alta afinidade para garantir
que apenas as clulas T ativadas por um antignio proliferem.
o Subfamlia de recpetores GM-CSF inclui receptores para IL-3, IL-5 e GM-CSF.
constitudo por duas subunidades: (1) protena receptora especfica de
citocinas tem baixa
afinidade; (2) subunidade
sinalizadora aps a
ligao da citocina protena
receptora especfica de
citocinas , liga-se a ela e o
receptor fica com alta
afinidade permitindo a
transduo do sinal. IL-3 e
GM-CSF antogonizam um
com o outro devido
competio pelo receptor e
pelo nmero limitado de
subunidades .
o Subfamlia de receptores gp130 inclui recetores para IL-6, IL-11, LIF, OSM,
CNTF e IL-27.

Citocinas da famlia dos interferes (classe 2)


Existem interferes de trs tipos que pertencem a esta famlia:
Interferes tipo 1 esto includos os interfero e . So secretados por macrfagos
ativados, clulas dendrticas e clulas infetadas por vrus aps reconhecerem os
componentes virais atravs de recetores de reconhecimento de padres (PRRs pattern
recognition receptors). Estes interferes vo depois ligar-se aos respetivos recetores
localizados em diferentes clulas: (1) induzindo ribonucleases para destruir o RNA viral
e celular; (2) inibindo a sntese proteica prevenindo que as clulas infetadas produzam
mais vrus; (3) inibindo o funcionamento normal da clula; (4) destruindo as clulas

73
infetadas; (4) aumentam a expresso de protenas do complexo MHC na superfcie das
clulas aumentando a sua capacidade de apresentao antignica;
Interferes do tipo II est includo o interfero que produzido por clulas T e
Natural Killer ativadas. Este um potente modulador da resposta imune adaptativa,
aumentando o nmero de clulas T helper tipo 1 e induzindo a ativao de macrfagos
com a subsequente destruio de qualquer patogneo intracelular e diferenciao de
linfcitos T citotxicos. Tambm aumenta a expresso de protenas do complexo MHC
na superfcie das clulas aumentando a sua capacidade de apresentao antignica.
Interferes do tipo III esto includos os interferes 1 (IL-29), 2 (IL-28A) e 3 (IL-28B)
e regulam a expresso de genes controlando a replicao viral e replicao da clula
hospedeira.
Existem membros desta famlia que so minoritrios. Aqui incluem-se IL-10, secretada
por moncitos e por clulas B, T e dendrticas que regulam a resposta imunitria.
Os recetores para as citocinas desta famlia so semelhantes aos da famlia das hematopoetinas
(classe 1) mas no possuem a sequncia WSXWS caracterstica dos recetores da famlia das
hematopoetinas (classe 2).

Nota:
JAK Janus Activated Kinases
STAT Signal Transducers and
Activators of Transcription

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Sendo esta a generalidade da transduo do sinal nos recetores de citocinas das classes I e II
como que o sistema imunitrio induz uma resposta especfica a cada citocina?
Elevada especificidade na ligao da citocina no seu recetor;
Alguns recetores esto ligados a enzimas JAK especficas e ativam fatores de transcrio
STAT nicos;
A atividade dos fatores de transcrio STAT especfica pois cada um s reconhece
sequncias especficas em genes promotores;
S os genes promotores que uma determinada clula permite expressar que podem
ser ativados pelos fatores de transcrio STAT.
Os inibidores dos recetores desta famlia so a protena inibidora do STAT ativado (PIAS),
supressor da sinalizao de citocinas (SOCS) e fosfatases de tirosina.

Membros da famlia de necrose tumoral (TNF) podem sinalizar o desenvolvimento,


a ativao e a morte
Os membros desta famlia tm como funes principais a regulao do desenvolvimento, funo
efetora e homeostase das clulas do sistema muscular, neuronal e imune. Existem vrios:
TNF- citocina proinflamatria secretada na forma solvel por macrfagos ativados
mas tambm por linfcitos, fibroblastos e queratincitos em resposta inflamao,
infeo e ambientes de stress. Para exercer os seus efeitos biolgicos liga-se ao
recetores TNF-R1 e TNF-R2;
TNF- (Linfotoxina-) produzida por linfcitos ativados na forma solvel e liga-se em
recetores localizados em neutrfilos, clulas endoteliais e osteoclastos sinalizando a sua
ativao. Em outras clulas pode levar ao aumento da expresso das glicoprotenas do
MHC e molculas de adeso;
Linfotoxina- citocina ligada membrana celular importante na diferenciao
linfocitria;
BAFF e APRIL importante na ativao, diferenciao e proliferao dos linfcitos B;
CD40L citocina expressa na superfcie da membrana das clulas T necessria para a
diferenciao das clulas B;
Fas Ligand (FasL) ou CD95L induz a apoptose ao ligar-se ao respetivo recetor (Fas
CD95);
Os recetores para as citocinas desta famlia so caracterizados por terem
domnios ricos em cistena (CDRs). Normalmente encontram-se na
superfcie da membrana celular mas existem alguns que podem surgir na
forma solvel que se ligam s citocinas inibindo a sua sinalizao.

75
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Membros da famlia do IL-17 so proinflamatrios
Pertencem a esta famlia as interleucinas 17A, 17B, 17C, 17D e 17F. Estas so encontradas em
neutrfilos, queratincitos e outras clulas no linfides e coordenam a libertao de
proinflamatrios e citocinas que mobilizem neutrfilos. A IL-17E uma exceo nestas funes
promovendo a diferenciao de linfcitos T helper de tipo 2 anti-inflamatrios e suprimem as
respostas dos linfcitos T helper de tipo 17.
IL-17A libertada por linfcitos T ativados e estimula a produo de fatores que
sinalizam um estado proinflamatrio (IL-6, CXCL8 e G-CSF);
Os recetores para as citocinas desta famlia so compostos por 5 cadeias proteicas (IL-17RA, IL-
17RB, IL-17RC, IL-17RD, IL-17RE) que variam no seu arranjo para formar vrios tipos de
recetores.

As quimiocinas dirigem a migrao de leuccitos


As quimiocinas so pequenas citocinas que se ligam a recetores na membrana celular e induzem
o movimento de leuccitos seguindo um gradiente de concentrao at fonte das quimiocinas.
A esta forma de mobilizao de clulas designa-se por quimiotaxia.
Os recetores para as quimiocinas so recetores acoplados a uma protena G (GPCRs) e so
classificados de acordo com o tipo de quimiocina qual ligam (por exemplo recetores CCR ligam-
se a quimiocinas CC e os recetores CXCR reconhecem quimiocinas CXCL). A especificidade
intrnseca dos recetores balanceada pela capacidade de muitos recetores ligarem a mais do
que uma quimiocina de uma determinada famlia e de mais do que uma quimiocina se ligarem
a mais do que um recetor.

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ANTAGONISTAS DAS CITOCINAS
So protenas que inibem a atividade das citocinas ligando-se diretamente ao recetor da citocina
impedindo a transduo de sinal ou bloqueiam uma citocina ativa de ligar-se ao recetor ou
ligam-se citocina impedindo que esta se ligue ao recetor. Exemplos disto so o IL-1Ra que se
liga ao recetor IL-1 ou IL-2R (CD25) que forma um recetor para IL-2 solvel depois de clivado
prevenindo que a IL-2 se ligue ao recetor que est ligado membrana celular inibindo a sua
funo.

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SISTEMA COMPLEMENTO (CAP. XIII)
Conjunto de protenas que so maioritariamente produzidas no fgado, esto dissolvidas no
sangue na sua forma inativa e cooperam com os sistemas imunitrios inato e adaptativo para
eliminar patogneos do sangue e tecidos. Estas protenas interagem entre si em cascada e os
seus componentes podem ser classificados em sete categorias funcionais:

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Componentes iniciadores do complemento iniciam a respetiva cascada atravs da
ligao a partculas solveis ou ligadas membrana celular;
Mediadores enzimticos enzimas proteolticas que clivam e ativam outros membros
da cascata. Estas so ativadas por ligao a outras macromolculas, mudana de
conformao ou clivadas por outra protase;
Opsoninas ou componentes de ligao a membranas C3b e C4b estimulam a
fagocitose atravs da sua ligao s clulas microbianas e servem como locais de ligao
para clulas fagocticas que tenham recetores para C3b e C4b;
Mediadores inflamatrios (anafilotoxinas) aumentam o suprimento de sangue na
rea em que acuam ligando-se a recetores que esto nas clulas endoteliais e
provocando vasodilatao. Tambm atraem outras clulas para o local de leso
tecidular;
Protenas de ataque membrana formam o complexo de ataque membrana (MAC)
inserindo-se na membrana celular de microorganismos invasores criando buracos que
levam lise do patogneo;
Protenas recetoras do complemento esto na superfcie da membrana celular e
ligam-se a protenas especficas do sistema complemento sinalizando funes celulares
especficas;
Componentes reguladores do complemento As clulas do hospedeiro esto
protegidas contra as protenas do sistema complemento atravs de protenas
reguladoras na forma solvel ou ligadas membrana celular. Exemplos so o fator I que
degrada C3b e a protectina que inibe a formao do complexo de ataque membrana.

PRINCIPAIS VIAS DE ATIVAO DO SISTEMA COMPLEMENTO


Existem trs vias principais atravs das quais o sistema complemento pode ser ativado: a via
clssica, a via da lectina e a via alternativa. Embora a forma como estas vias ativam o sistema
complemento seja diferente todas convergem para a formao de um complexo enzimtico, C3
convertase, capaz de clivar a molcula C3 em dois fragmentos (C3a e C3b). Aps esta convertase
estar formada formada uma outra, a C5 convertase, por adio ao complexo de C3b. Esta
convertase vai clivar C5 em C5a (mediador inflamatrio) e C5b (fator que inicia a formao do
complexo de ataque membrana.

A via clssica iniciada pela ligao de um anticorpo


Esta via comea pela formao de complexos antignio-anticorpo e s aqueles que so
formados por anticorpos IgM ou algumas subclasses de IgG que so capazes de ativar esta via.
Estes complexos vo depois originar mudanas de conformao na regio Fc do anticorpo
levando exposio do local de ligao para o complexo C1. Este precisa de se ligar a duas destas
regies para que a ligao seja estvel. Aps esta ligao, a poro C1r ativada e cliva outra
molcula C1r ativando-a. Estas vo depois clivar as molculas C1s ativando-as. C1s tem dois
substratos C4 e C2. O primeiro hidrolisado em C4a (anafilotoxina) e C4b. Este ltimo liga-se a
C2. C2 torna-se agora mais suscetvel degradao enzimtica da C1s e clivada em C2a, que
enzimaticamente ativa se ligada a C4b, e C2b. Origina-se ento o complexo C4b2a que a C3
convertase desta via. Esta convertase degrada agora C3 originando C3a (anafilotoxina) e C3b.
Esta convertase origina um efeito de ampliao j que uma s convertase pode degradar mais

80
de 200 molculas de C3. C3b vai atuar de trs formas diferentes de forma a proteger o
hospedeiro:
Liga-se covalentemente s superfcies microbianas permitindo que clulas fagocticas
com recetores para C3b possam fagocitar o microorganismo (opsonizao);
Liga-se s regies Fc dos anticorpos que participam nos complexos antignio-anticorpo
levando sua solubilizao atravs da ligao a fagcitos ou hemcias que tenham
recetor para C3b e so fagocitados ou destrudos no fgado;
Ligam-se membrana onde est a C3 convertase para formar o complexo enzimtico
C4b2a3b que corresponde C5 convertase desta via. Esta vai clivar C5 em C5a
(anafilotoxina) e C5b (componente do complexo de ataque membrana).

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A via da lectina iniciada quando protenas solveis reconhecem antignios
microbianos
A via da lectina, como a via clssica, procede ativao da C3 convertase composta por C4b e
C2a. No entanto, esta via utiliza lectinas (protenas que reconhecem carbohidratos especficos
que se encontram na membrana microbiana) em vez de anticorpos como o seu recetor
especfico para reconhecer uma ameaa e iniciar o processo de ativao do complemento. Esta
via utiliza tambm protenas MASP em vez das C1s e C1r. A protena MASP-2 estruturalmente
relacionada com as protases C1s e clivam C2 e C4 dando origem C3 convertase (C4b2a).
A lectina de ligao manose (MBL) liga-se a resduos de manose que so encontrados na
superfcie da membrana de alguns microbianos ativando o complemento via lectina. Esta lectina
expressa no fgado.

A via alternativa iniciada de trs formas distintas


A via alternativa pode ser iniciada pela:
Via alternativa tickover - iniciada
quando C3, que est em elevada
concentrao no soro, sofre hidrlise
espontnea (C3(HO)). Na presena do
io magnsio a protena fator B liga-se
C3(HO) ficando mais suscetvel
degradao enzimtica e clivada pela
protase fator D levando formao de
Ba (que se solta) e Bb, que fica ligado,
originando o complexo C3(HO)Bb que
corresponde C3 convertase desta via na
forma solvel. Este complexo vai clivar
C3 em C3a e C3b. Esta C3 convertase est
constantemente a ser formada no
plasma mas rapidamente degradada.
Se existir uma infeo presente as
molculas C3b recentemente formadas
ligam-se membrana dos microbianos e
ao C3b vai se ligar o fator B. Este vai ser
degradado posteriormente pelo fator D FIGURE 6-8
(a) Spontaneous
com a formao de complexos C3bBb que hydrolysis of soluble C3 to C3(H2O) allows the altered
corresponde C3 convertase desta via conformation of C3(H2O) to bind factor B, rendering it
susceptible to cleavage by factor D. The resulting
ligada membrana celular. A ligao complex C3(H2O)Bb forms a fluid phase convertase
desta C3 convertase instvel at que a capable of cleaving C3 to C3a and C3b. (b) Some of
the C3b molecules formed by the fluid phase
properdina se ligue. Aps a ligao da convertase bind to cell membranes. C3b, like C3(H2O)
properdina, vai-se gerar grandes binds factor B in such a way as to make B susceptible
to factor D-mediated cleavage. (c) However,
quantidades de C3b na membrana membrane-bound C3bBb is unstable in the absence
microbiana. A adio de C3b C3 of properdin (factor P), which binds the C3bBb
complex on the membrane and stabilizes it. Addition
convertase vai originar o complexo of a second C3b molecule to the C3bBb complex
C3bBbC3b, a C5 convertase desta via. Esta forms the C5 convertase, which is also stabilized by
factor P.

82
convertase necessita de ser estabilizada pelo fator P. A C5 convertase vai ento clivar C5
para formar C5a e C5b.
Via alternativa ativada pela
properdina A properdina
para alm de estabilizar a C3
convertase ligada
membrana celular pode ser a
responsvel por iniciar a via
alternativa.
Via alternativa ativada por
protases protases como a
trombina ou calicrena podem
iniciar a via alternativa.

83
As trs vias de ativao do sistema complemento convergem para a formao de C5
convertase
Independentemente da constituio do complexo que d origem C5 convertase, o objetivo
dela em todas as via o mesmo, clivar C5 em C5a e C5b. Este ltimo originado na superfcie
da clula alvo ou do imunocomplexo e d origem a um local de ligao aos restantes
componentes do complexo de ataque membrana. C5b extremamente lbil e rapidamente
inativado e precisa de ser estabilizado pela ligao de C6 para que possa ser funcional.

C5 inicia a formao do complexo de ataque membrana (MAC)


Para que o complexo de ataque membrana se possa formar preciso que o C5b se ligue C6 e
a seguir C7 de forma a por em exposio as regies hidrofbicas da membrana celular na
superfcie de C7 permitindo que este se possa inserir na membrana. A seguir vai-se inserir C8.
Este constitudo por C8 e C8. A ligao de C8 ao complexo C5b67 permite que C8 se possa
inserir na membrana fosfolipdica. A partir de agora o complexo C5b678 tem a capacidade de
criar um pequeno poro que capaz de destruir, por exemplo, hemcias, mas no consegue
destruir clulas nucleadas. Para isso, necessrio um ltimo passo, a ligao e posterior
polimerizao de C9 no complexo C5b678. Vai-se ento originar um complexo C5b678 rodeado
por um complexo poly-C9. Este complexo poly-C9 origina um poro maior que o anterior levando
perda da integridade da membrana celular levando morte celular.

FUNES DO SISTEMA COMPLEMENTO

84
RECETORES DO SISTEMA COMPLEMENTO E EFEITOS NAS CLULAS

O SISTEMA COMPLEMENTO AUMENTA AS DEFESAS DO HOSPEDEIRO CONTRA INFEES


Morte celular induzida pelo complexo de ataque membrana
Os anticorpos e o sistema complemento tm uma grande importncia na defesa contra os vrus
e podem ser cruciais no controlo da propagao dessa infeo durante a fase aguda e
protegendo o organismo contra a reinfeo. A maioria dos vrus com involucro e as bactrias
gram negativas so suscetveis lise mediada pelo sistema complemento. No entanto, se a
membrana celular no existir superfcie, como acontece com as bactrias gram positivas, o
sistema de ataque membrana j no consegue destruir o microorganismo.

Promoo da opsonizao
Esta pode ser a funo fisiologicamente mais importante realizada pelo sistema complemento.
A opsonizao com anticorpos e o complemento permite uma proteo contra a infeo viral.
O anticorpo e o complemento criam uma pequena camada proteica volta dos vrus
neutralizando a sua capacidade de infetar as clulas ao impedir que o vrus se ligue aos recetores
presentes nas clulas alvo do vrus no hospedeiro. Tambm promove a fagocitose atravs da
ligao das protenas do complemento ao respetivo recetor seguido de destruio intracelular
da partcula digerida.

85
Promoo da inflamao
C3a, C4a e C5a so anafilotoxinas e por isso induzem
inflamao. C3a e C5a ainda acuam como
quimiocinas para algumas classes de leuccitos.
A ligao destas anafilotoxinas aos respetivos
recetores resulta na secreo de mediadores
solveis como TNF- e IL-6. Estes vo depois induzir
um aumento localizado da vasodilatao, permitir a
mobilizao de leuccitos para o local de infeo,
aumentam a motilidade do tecido muscular liso que
ajuda a propulsionar o deslocamento de fluido para
o local de infeo, promovem a fagocitose de
agentes invasores e a desgranulao localizada de
granulcitos com a resultante libertao de
histamina e prostaglandinas.

O SISTEMA COMPLEMENTO MEDEIA A INTERFACE ENTRE O SISTEMA IMUNITRIO


INATO E ADAPTATIVO

O complemento e as clulas apresentadoras de antignios


As clulas dendrticas, folicular dendrticas e macrfagos expressam recetores para protenas do
sistema complemento. MBL, C1q, C3b e C4b ao ligarem-se ao respetivo recetor aumentam a
capacidade de captar antignios. Para alm desta funo, o recetor da anafilotoxina C5aR
modula nas clulas apresentadoras de antignios a sua migrao e afeta a produo de
interleucinas, particularmente IL-12, que vai dirigir a resposta da clula T em direo ao fentipo
T helper tipo 1.

O complemento e a imunidade humoral mediada por clulas B


CD21 um recetor com especificidade para C3b e seus produtos de degradao. Se C3b for
encontrado na superfcie membranar de um microorganismo, este fica ligado at sofrer
protelise. Uma clula B que tenha uma imunoglobulina que reconhea aquele microorganismo
vai conseguir ligar-se a ele atravs dessa imunoglobulina e atravs do recetor CD21, que se liga
a C3b. Consequentemente vai haver um aumento da interao entre a clula B e o antignio,
reduzindo a quantidade de antignio necessrio para que a clula B seja ativada.

86
O complemento e a imunidade mediada por clulas T
Ainda est em estudo mas j existem resultados noutros animais que evidenciam a influncia
do sistema complemento na resposta imune mediada por clulas T.

O SISTEMA COMPLEMENTO AJUDA NA FASE DE CONTRAO DA RESPOSTA IMUNITRIA


Aps um resposta imunitria podem ainda continuar presente alguns complexos antignio-
anticorpo solveis no sangue ou rgos linfides e excesso de linfcitos. Para eliminar estes
excessos sem induo de inflamao, o sistema complemento tem uma ao importante.

Eliminao de corpos e clulas apoptticas


Aps a apoptose de uma clula ser iniciada, esta parte-se em vesculas chamadas de corpos
apoptticos. C1q liga-se especificamente a estes corpos apoptticos e ajuda na sua eliminao.
A deposio de C1q inicia a via clssica do sistema complemento e as clulas apoptticas so
opsonizadas por C3b permitindo a sua eliminao pelos fagcitos.

Eliminao de imunocomplexos
A ligao de C3b a imunocomplexos facilita a sua ligao por CR1 nos eritrcitos. Apesar dos
eritrcitos no expressarem muito CR1, estes so as clulas mais numerosas no sangue. Desta
forma os eritrcitos tm uma importncia fundamental na eliminao de imunocomplexos
revestidos por C3b levando-os ao fgado e bao onde so retirados do eritrcito e fagocitados.

A REGULAO DO SISTEMA COMPLEMENTO


A atividade do sistema complemento passivamente regulado por protenas de
estabilizao e pela composio da membrana celular
A relativa instabilidade de muitos componentes do sistema complemento o primeiro
mecanismo de proteo das clulas do hospedeiro contra ativaes inadvertidas do sistema
complemento.
O segundo mecanismo de proteo resulta na diferena na composio de carbohidratos entre
a membrana celular das clulas do hospedeiro e dos microorganismos invasores.

O inibidor de C1, C1INH, promove a dissociao dos componentes de C1


C1IHN uma protena do plasma que pertence classe das serpinas (protenas inibidoras de
protases de serina) e atua formando um complexo com as protases de C1, C1r2s2, levando
dissociao de C1q e impedindo a ativao de C2 e C4. C1IHN inibe as protases de serinas C3b
e MASP2 inibindo as vias clssica e da lectina do sistema complemento.

Fatores aceleradores do decaimento promovem o decaimento de C3 convertases


Muitos fatores que esto ligados membrana celular das clulas do hospedeiro levam a um
aceleramento do decaimento do complexo C4b2a. Nestes fatores incluem-se o fator acelerador
do decaimento (DAF ou CD55), CR1 (CD35) e C4BP (Binding Protein). Da degradao do
complexo C3b2a resulta na libertao de C2a (difunde-se) e C4b (que degradado pelo fator I).
Isto acontece para a via clssica e da lectina.
Na via alternativa, DAF e CR1 ligam-se ao fator H separando a C3 convertase desta via em C3b
( degradado) e Bb (difunde-se).
O fator H e C4BP so componentes reguladores solveis do sistema complemento. A funo do
fator H assegurada pela ligao a polianies como o cido silico e heparina que so

87
componentes importantes das superfcies celulares dos eucariotas mas no dos procariotas. J
a funo de C4BP assegurada pela ligao a proteoglicanos da membrana celular do
hospedeiro como o heparan sulfato. Desta forma as clulas do hospedeiro so protegidas da
deposio dos componentes do sistema complemento.

Fator I degrada C3b e C4b


Fator I consegue clivar C3b e C4b, que esto associados membrana, em fragmentos inativos.
Fator I requer a presena de cofatores para que possa funcionar:
Cofator de protelise de membrana (MCP ou CD46) e CR1 ligados
membrana celular;
Fator H e C4BP solveis.
A degradao de C3b e C4b conduzida, ento, pelo fator I em colaborao com as protenas
de membrana CD46 e CR1 e pelas protenas solveis fator H (para C3b) e C4BP (para C4b). Como
as protenas que esto ligadas membrana no existem nas clulas microbianas, C3b e C4b
continuam ligados membrana exercendo os seus efeitos.
CD46 tambm um fator que controla a apoptose das clulas T. Apenas quando CD46 perdido
que a via clssica do sistema complemento pode prosseguir aumentando a ligao de C3b s
clulas T em apoptose e consequente fagocitose.

Protectina inibe o ataque do complexo de ataque membrana


A protectina (CD59) liga-se a qualquer complexo C5b678 que se deposite na superfcie
membranar das clulas do hospedeiro e previne a sua insero. Bloqueia tambm a ligao de
C9 ao complexo de ataque membrana em desenvolvimento.
A vitronectina liga-se a qualquer complexo C5b67 na fase solvel que so libertados das clulas
microbianas impedindo a sua insero nas clulas do hospedeiro.

Carboxipeptidases podem ativar as anafilotoxinas C3a e C5a


A atividade anafilotxica regulada pela clivagem de resduos de arginina na regio C-terminal
de C3a e C5a por carboxipeptidases que se encontram no soro. Aps esta clivagem a atividade
anafilotxica inativada.

88
89
RESPOSTAS EFECTORAS - IMUNIDADE MEDIADA POR ANTICORPOS E CLULAS
(CAP. XIV)
RESPOSTAS EFECTORAS MEDIADAS POR ANTICORPOS
Os anticorpos so gerados por plasmcitos (clulas B activadas) e protegem o organismo de
diversas formas: neutralizao, opsonizao, fixao do sistema complemento e atravs de um
processo designado por citotoxicidade mediada por clulas dependente de anticorpos.
A habilidade dos anticorpos mediarem estas respostas depende da sua especificidade para o
antignio e do seu isotipo que determina se um anticorpo fixar o complemento, a que
receptores se ligaro e que efeitos celulares iro ter.

Anticorpos medeiam a eliminao de patgenos numa variedade de maneiras


Neutralizao
Muitos vrus e algumas bactrias ganham entrada nas clulas do hospedeiro atravs da sua
ligao a protenas especficas estimulando a endocitose. Anticorpos que se liguem a estas
protenas so molculas efectoras potentes pois vo impedir que o patgeno inicie a infeco.
Estes anticorpos so conhecidos por anticorpos neutralizantes. Os patgenos neutralizados so
tipicamente fagocitados por macrfagos.
Os anticorpos neutralizantes tambm podem ser usados para bloquear a entrada de toxinas
dentro das clulas.
Fisiologicamente, a neutralizao a proteco mais eficaz contra a infeco. Contudo, devido
rapidez com que os microorganismos proliferam, permite que gerem variantes gnicas capazes
de escaparem a estes anticorpos neutralizantes.
Opsonizao
As clulas fagocticas do sistema imune inato tm dois conjuntos de receptores capazes de se
ligarem a patgenos: os receptores imunes inatos (receptores de reconhecimento padro) e os
receptores Fc (permite a ligao de imunocomplexos a anticorpos).
Os primeiros so importantes na activao de clulas apresentadoras de antignios e na
modulao de sinais que iro ser transmitidos aos linfcitos.
Os segundos geram sinais e regulam a reposta efectora das clulas do sistema imune inato. A
ligao de um complexo antignio-anticorpo a um receptor Fc num fagcito ir induzir a
internalizao do complexo e a digesto interna do patgeno em lisossomas.
Fixao do Sistema Complemento
Complexos anticorpo-antignio podem induzir uma cascata do sistema complemento. Quando
anticorpos associados a protenas do sistema complemento ligam-se superfcie de bactrias e
de alguns vrus com invlucro, ocorre a iniciao da cascata que resulta na formao de um
complexo de ataque membrana. A capacidade de estimular o dano membranar mediado pelo
sistema complemento designa-se por fixao do sistema complemento.
Toxicidade mediada por clulas dependente de anticorpos
Os anticorpos podem recrutar a actividade de mltiplas clulas citotxicas incluindo as clulas
NK e granulcitos. Estas clulas expressam receptores Fc e podem us-los para ligarem-se aos
anticorpos permitindo-lhes ganhar especificidade antignica. Anti corpos que se liguem s
clulas NK vo dirigir a sua actividade citotxica a uma clula alvo especfica.

91
Classes de anticorpos mediam diferentes respostas efectoras
A especifidade dos anticorpos definida pela sua regio Fab e o seu isotipo ou classe pela regio
Fc. Dependendo do tipo de ajuda que as clula T recebem durante a sua activacao e s citocinas
a que so expostas as clulas B iro secretar uma das 4 maiores classes de antignios: IgM, IgA,
IgE e IgG. IgD expressa em clulas B imaturas mas muito pouca ou nenhuma secretada por
plasmocitos.
Funes efectoras da IgM
As IgM so produzidas durante uma resposta imunitria primria. Protegem-nos contra
patgenos comuns, particularmente aqueles que vm do tracto digestivo e outras reas
mucosas. So muito bons a fixar o sistema complemento e induzem eficientemente a lise dos
patgenos aos quais se ligam. So ainda bons a formar complexos anticorpo-antigenio que so
eficientemente fagocitados por macrofagos.
Funes efectoras das IgG
Todas as variantes de IgG ligam-se a receptores Fc e potenciam a fagocitose realizada por
macrofagos. IgG1 boa a fixar o sistema complemento e a mediar o ADCC pelas clulas NK. IgG3
tambm boa a fixar o sistema complemento.
Funes efectoras de IgA
IgA pode neutralizar toxinas e patgenos e previne que estes entrem na corrente sangunea.
No consegue fixar o complemento, no i diz inflamao e actua continuamente em antignios
e patgenos que tipicamente no nos causa ameaa. A IgA na forma dimrica e polimrica liga-
se ao seu receptor que est nas clulas endoteliais iniciando a endocitose e transporte de
molculas da membrana basolateral para a apical das clulas endoteliais e para dentro dos
tecidos.
Existem 2 subtipos de IgA, a IgA1 (mais prevalente no soro) e a IgA2 (mais prevalente em
secrees). As duas medeiam ADCC ao ligarem-se aos receptores Fc nas clulas natural killer e
iniciam a desgranulao de granulcitos.
Funes efectoras da IgE
Tem uma grande importncia na proteco contra helmintas e protozorios. Tm um potente
efeito ao induzir a desgranulao de eosinfilos e basfilos que causa a libertao de molculas
como a histamina que fazem dano permanente ao patgeno.

Receptores Fc medeiam muitas funes efectoras dos anticorpos


Os receptores Fc permitem que clulas imunitrias no especificas possam tirar vantagem da
especificidade dos anticorpos e focar as suas funes celulares num antignio ou patgeno
especifico. Providenciam tambm uma ligao entre os sistemas imunes humoral e celular.
Quando o complexo antignio-anticorpo faz ligaes cruzadas com mltiplos anticorpos os
receptores Fc iniciam a resposta efectora. Se ocorrer ligao a apenas um s anticorpo o
receptor Fc nada faz.
Existe uma grande variedade de receptores Fc que variam:
Na classe do anticorpo a que se ligam
Nas clulas que os expressam
Nas suas propriedades de sinalizao
Todas juntas, estas propriedades definem uma funo efectora distinta que o anticorpo
pode executar.

92
93
Visualizao geral das repostas efectoras de anticorpos e receptores Fc
Depois de uma infeco, as clulas B encontram o patgeno e as suas protenas nos rgos
linfides secundrios. Aquelas que se ligam aos antignios so activadas e se receberem a ajuda
de clulas T diferenciam-se em plasmcitos, clulas produtoras de anticorpos. A classe que
produzida vai depender de quanto tempo vai demorar a resposta imunitria e da natureza do
patgeno. Uma infeco pode induzir a produo de mltiplas classes de anticorpos com a
mesma especificidade.
Os plasmcitos libertam os anticorpos de diversos locais (ndulos linfticos, bao e medula
ssea). IgM, produzidos precocemente numa resposta imunitria, podem encontrar o patgeno
na corrente sangunea e iniciar uma cascata do sistema complemento. Tambm podem ser
carregados por poli IgRs para o lmen de outros tecidos e ligarem-se a patgenos criando
complexos antignio-anticorpo que podem ser fagocitados por macrfagos. IgG, produzidos
tardiamente numa resposta imunitria, podem fixar o sistema complemento, opsonizar o
patgeno ou serem transportados para o interior de tecidos para interagir com as clulas inatas
que expressam FcRs activando a sua actividade inflamatria. Enquanto que patgenos
extracelulares influenciam a mudana de classe nas clulas B para classes que consigam fixar o
sistema complemento, patgenos intracelulares influenciam a mudana de classe para classes
que consigam recrutar clulas citotxicas. Estes vo libertar o seu contedo provocando a
apoptose da clula infectada, eliminando-a.

94
RESPOSTAS EFECTORAS MEDIADAS POR CLULAS
Dentro das clulas com actividade citotxica incluem-se as clulas T citotxicas (CD8+), linfcitos
NKT e clulas NK. Todas induzem a morte celular iniciando a apoptose nas clulas alvo.
Conseguem eliminar clulas infectadas por patgenos intracelulares, clulas tumorais e clulas
que foram sujeitas a stress por elevadas temperaturas ou trauma. As clulas NK so ainda
responsveis pela rejeio de rgos em transplantes A resposta imune mediada por clulas
est preparada para reconhecer e atacar qualquer clula que exiba caractersticas non-self ou
altered-self.

Linfcitos T citotxicos reconhecem e matam clulas infectadas ou tumorais atravs


da activao de TCR
As respostas imunes mediadas por clulas T podem ser divididas em dois grandes grupos de
acordo com a populao efectora que mobilizada: clulas T citotxicas e as clulas T helper.
A resposta mediada pelos linfcitos T citotxicos divide-se em duas fases:
Primeira fase - Linfcitos T naive sofrem activao e posterior diferenciao para um
linfcito T citotxico funcional num rgo linfide secundrio;
Segunda fase Linfcitos T citotxicos reconhecem complexos antignicos ligados a
molculas do MHC tipo 1 numa clula alvo especfica que vai culminar na destruio das
clulas alvo. Os linfcitos T citotxicos so predominantemente CD8+ e so restritos ao
MHC de classe 1. Como qualquer clula nucleada exprime molculas do MHC de classe
1, os linfcitos T citotxicos podem reconhecer e eliminar quase todo o tipo de clulas
do organismo que exiba antignios especficos que sejam reconhecidos por ele no
contexto de uma molcula do MHC de classe 1.
Formao dos linfcitos T citotxicos a partir dos percursores de linfcito T citotxico
(CTL-P)
S aps o CTL-P ter sido activado que se diferencia num linfcito T citotxico funcional. Esta
activao requer pelo menos 3 sinais:
Sinal proveniente de um antignio especfico transmitido pelo TCR aps
reconhecimento de um complexo peptdio-MHC classe 1 numa clula apresentadora de
antignios;
Sinal coestimulatrio transmitido pela interaco entre CD28-CD80/86 entre um CTL-P
e uma clula apresentadora de antignios;
Sinal induzido pela interaco entre IL-2 e o seu receptor de elevada afinidade induzindo
a proliferao e diferenciao de um CTL-P activado por um antignio para um linfcito
T citotxico funcional;
necessrio a ajuda das clulas T helper (CD4+) para o desenvolvimento dos linfcitos T
citotxicos de memria funcionais e para impulsionar a proliferao de clulas T funcionais. As
clulas T helper produzem citocinas que activam clulas apresentadoras de antignios e
exprimem CD40 que d um importante sinal coestimulatrio para as mesmas clulas, que
exprimem o receptor CD40L). Quando CD40 se liga, estimula a clula apresentadora de
antignios a expressar ligandos coestimulatrios (CD80/86), quimiocinas e citocinas
aumentando a capacidade de activar a clula T citotxica.

95
As clulas dendrticas podem ser activadas pelas clulas T helper por interaco com produtos
microbianos que activaram o TCR das clulas T helper. Estas retm a capacidade de activar CTL-
P por algum perodo de tempo at a clula T helper se desactivar. Clulas T helper especificas
podem mover-se para activar outras clulas dendrticas amplificando a activao da resposta.
O desenvolvimento de clulas T citotxicas acompanhado por muitas mudanas:
CTL-P no expressa receptores de alta afinidade para IL-2, nem produzem grandes
quantidades de IL-2, nem proliferam e nem apresentam actividade citotxica.
CTL devidamente activados comeam a expressar grazima B e perforina dentro de
grnulos, receptores IL-2 de alta afinidade e sua regulao e IL-2 (principal citocina
requerida para uma proliferecao e diferenciao completas).
Os linfcitos T citotxicos so muito perigosos para o organismo. No entanto, existem formas
de o organismo se proteger delas:
A necessidade das clulas T helper e T citotxicas terem de reconhecer o antignio antes
desta ultima estar funcional;
A no produo de receptores de IL-2 de alta afinidade at as clulas estarem activadas,
assegurando que s os CTL-P sensibilizados para um antignio especifico prolifere e
fique citotxica;
A importncia da apresentao cruzada na activao de linfcitos T citotxicos
A apresentao cruzada a capacidade das clulas dendrticas para processarem e
apresentarem antignios exgenos nas molculas do MHC de classe 1 e 2. Mesmo que no
sejam infectadas por um patgeno, elas conseguem envolver, processar e apresentar antignios
atravs do MHC classe 2 (por via tradicional) e do MHC classe 1 (por apresentao cruzada).
Aquelas que forem infectadas podem apresentar antignios atravs do MHC classe 1 por via
tradicional ou por apresentao cruzada.

96
Existem 2 tipos de linfcitos T citotoxicos, os Tc1 e Tc2
Os linfcitos T citotxicos podem se desenvolver em dois subtipos tendo em conta as citocinas
que produzem e das citocinas que promovem o seu desenvolvimento:
Tc1 - secretam INF-;
Tc2 - desenvolvem-se a partir de IL-4 e secretam mais IL-4 e IL-5 que INF-;
Os dois tipos tm elevada capacidade de matar. O Tc1 usa perforinas e estratgias mediadas por
Fas e o Tc2 s usa perforinas.
Como os CTL matam clulas
Os CTL tm duas grandes formas para matar uma clula, atravs da libertao directa do
contedo dos grnulos ou atravs da interaco entre Fas-FasL. Ambos os processos induzem a
clula a entrar em apoptose.
Para que o CTL possa matar a clula alvo, esta tem de se ligar a ela e formar uma conjugao
clula-clula (beijo da morte). Aps isto, o CTL induz a clula alvo entrar em apoptose e dissocia-
se prosseguindo para outra clula.
O complexo de membrana TCR-CD3 no CTL reconhece
antignios em associao com molculas do MHC classe 1 da
clula alvo desenvolvendo uma sinapse imunolgica
altamente organizada. Nessa sinapse temos um anel central
de molculas de TCR rodeadas por um anel de molculas de
adeso formada por interaces entre LFA-1 na membrana do
CTL e as ICAMs na clula alvo.
Os sinais provenientes de TCR potenciam a adeso entre o CTL
e o alvo convertendo LFA-1 de uma forma de baixa afinidade
para uma forma de alta afinidade ficando assim por algum
tempo ate retornar forma de baixa densidade.

97
Citlise mediada por granzimas e perforinas
Muitos CTL iniciam a apoptose atravs de molculas pro-apoptticas. Uma delas a perforina,
que uma protena formadora de poros, e granzimas (ou fragmentinas), que uma protease de
serinas. Grnulos que contm estas molculas so levados at ao local de interaco entre o CTL
e a clula alvo atravs do organizador de microtbulos que polariza em direco sinapse em
resposta estimulao do TCR.
As perforinas ao contactarem a membrana da clula alvo, inserem-se na membrana, polarizam
na presena de clcio e formam poros.
A granzima B entra na clula alvo atravs de endocitose ao ligarem-se A receptores de manose
6-fosfato. Esta vai iniciar uma cascata de reaces que culminam na fragmentao do DNA da
clula alvo e activam uma via apopttica ao clivar em a pro-caspase 3. A morte mediada por CTL
no s mata clulas infectadas por vrus como tambm destri o DNA viral prevenindo a
continuao da replicao do vrus.
Os CTL tm mecanismos de proteco para no sofrerem aco das molculas que libertam.
Estes so mais resistentes sua actividade e expressam elevada quantidade de inibidores de
proteases de serina (serpinas) que os protegem contra a granzima B.

Citlise mediada por Fas-FasL


Quando os CTL no possuem grnulos com as molculas anteriores, estes induzem a apoptose
das clulas alvo atravs do Fas (CD95). Este vai entregar um sinal de morte celular induzindo a
apoptose quando realiza ligao cruzada com o seu ligando FasL. Este encontrado na
membrana do CTL.
A principal caracterstica da morte celular por apoptose o envolvimento de caspases. Ligao
Fas-FasL induz a activao de uma caspase iniciadora na clula alvo.

98
As clulas NK reconhecem e matam clulas infectadas e clulas tumorais atravs da
ausncia de MHC de classe 1
Apesar da ausncia de receptores especficos para antignios, as clulas NK tm uma grande
importncia na defesa contra clulas infectadas, stressadas e tumorais. Tm tambm um papel
regulador nas respostas imunitrias inata e adaptativa a antignios ao secretarem citocinas que
alteram a sua resposta imune.
As clulas NK so a primeira linha de defesa contra patgenos intracelulares ao matarem as
clulas infectadas. A sua actividade estimulada pelo sistema imunitrio inato pelas citocinas
IFN-, IFN- e IL-12 que aumentam rapidamente no decurso de uma infeco viral. A libertao
de INF- pelas clulas NK vai estimular a fagocitose, as actividades microbicidas dos macrfagos
e influencia a diferenciao das clulas T helper nos seus subtipos.

99
Fentipo das clulas NK
As clulas NK so clulas linfides que derivam de um progenitor linfide comum na medula
ssea. Alguns desenvolvem-se no timo mas este rgo no essencial para a sua maturao.
As clulas NK expressam CD49b (integrina), CD2, FcRIII e IL-2 e distinguem-se dos outros
linfcitos pela expresso de CD56 que varia de intensidade dependendo da maturao e do
estado de activao. Tambm expressam receptores NK activadores e inibidores que
determinam quais os alvos da clula NK devem eliminar atravs de um equilbrio entre os sinais
recebidos por ambos os receptores.
Como que as clulas NK reconhecem as clulas alvo: Modelo Missing Self
Este modelo defende que uma diminuio na expresso de molculas MHC da classe 1 ir levar
a que os receptores inibidores no se liguem a estas molculas levando a que sinais inibitrios
no sejam transmitidos e desta forma a clula NK provocar a morte da clula alvo.

Receptores das clulas NK


Existem dois tipos de receptores: os inibidores e os activadores. Os primeiros ligam-se a
molculas do MHC da classe 1 bloqueando a clula NK de matar a clula alvo. Se nenhum
receptor inibidor estiver ocupado os receptores activadores sinalizam a clula NK para matar a
clula-alvo.
As sequncias intracelulares dos dois receptores so diferentes. Os receptores activadores tm
ITAMs e os inibidores tm ITIMs.
Receptores NK inibidores e seus ligandos
Estes receptores ligam-se a molculas do MHC de classe 1 e so os mais importantes na deciso
da clula NK de matar a clula alvo ou no. So membros da famlia KIR (killer-cell
immunoglobulin-like receptors). Estes so normalmente especficos para regies polimrficas
das molculas do MHC de classe 1 HLA-A, HLA-B e HLA-C.
O receptor CD94-NKG2A consegue reconhecer HLA-E que serve como indicador do nvel de
sntese de molculas do MHC de classe 1 na clula, j que no transportado para a membrana
celular a no ser que esteja ligado a pptidos derivados do HLA-A, HLA-B e HLA-C. Se
expressarem nveis adequados de HMC classe 1 a clula NK no mata a clula alvo.

100
As clulas NK podem exprimir diferentes KIR cada um especfico para uma molcula diferente
do MHC de classe 1 ou para um conjunto de molculas relacionadas. Isto permite aumentar as
hipteses de reconhecer variantes polimrficas de HMC de classe 1 impedindo as clulas NK de
matar clulas saudveis por apresentarem uma variante de KIR que no se ligou variante do
MHC de classe 1 expressa.
Receptores NK activadores e seus ligandos
NKG2D o receptor NK activador mais expresso pelas clulas NK. Os seus ligandos so molculas
semelhantes ao MHC de classe 1 e no so polimrficas. Estes ligandos so expressos em clulas
que esto em stress como acontece quando est infectada ou tem o DNA danificado. Estes
tambm ajudam as clulas NK a concentrar a sua actividade na clula alvo e a adaptar a sua
actividade ltica.
Muitas molculas que no so expressas pelas clulas NK permitem a sua activao. Exemplos
so CD2 (receptor para a molcula de adeso LFA-3), CD244 (receptor para CD48) e receptores
para citocinas inflamatrias. O envolvimento de cada uma destas protenas concentra a ateno
das clulas NK a ambientes inflamatrios.
As clulas NK expressam ainda o receptor FcIII (CD16) que responsvel por grande parte do
reconhecimento de clulas-alvo mediado por anticorpos e consequente destruio. Por
exemplo, clulas infectadas por vrus expressam protenas do involucro do vrus na sua
membrana. Anticorpos produzidos por plasmcitos que respondam a estas protenas vo se ligar
a elas recrutando clulas NK que vo destruir a clula infectada.
Como que as clulas NK induzem a apoptose dos seus alvos
As clulas NK expressam e secretam FasL e induzem a apoptose a todas as clulas-alvo que
expressem Fas. O citoplasma das clulas NK tm no seu interior inmeros grnulos contendo
perforinas e granzimas. As clulas NK desenvolvem uma sinapse imunolgica organizada no stio
de contacto com a clula alvo e posteriormente ocorre a desgranulao com a consequente
libertao do seu contedo.
Activao e regulao da actividade das clulas NK
As clulas NK necessitam de ser testadas antes de poderem usar a maquinaria citotxica na
clula alvo (mesmo que a informao proveniente dos receptores activadores e inibidores seja
a favor de eliminar a clula). O teste da clula NK ocorre atravs da primeira ligao aos
receptores inibidores (que se ligam ao MHC de classe 1). Isto uma forma de testar a clula NK
a restringir a sua actividade e uma importante estratgia para manter a tolerncia s clulas
do hospedeiro. S passam no teste aquelas clulas que tm a capacidade de serem inactivadas
atravs de interaces inibitrias.
Clulas infectadas por vrus ou tumorais tm ligandos activadores que se vo ligar aos receptores
activadores das clulas NK sinalizando-a a matar a clula. Se os receptores inibidores detectarem
nveis normais de MHC de classe 1 estes vo dar sinais inibitrios que vo ultrapassar os sinais
activadores. Isto leva a que a destruio da clula alvo seja inibida e anula a proliferao e
produo de citocinas (TNF- e IFN-) pela clula NK. A consequncia desta estratgia a
poupana de clulas que expressam indicadores crticos de serem clulas self, MHC de classe
1, e eliminar todas as clulas que no expressem ou expressem pouco esses mesmos
indicadores.
Clulas NK de memria
Estudos recentes indicam que as clulas NK podem gerar clulas de memria em resposta a um
antignio permitindo aumentar a longevidade e melhorar o tempo da resposta.

101
Clulas NKT fazem ponte entre os sistemas imunitrios inato e adaptativo
As clulas NKT so um terceiro tipo de clulas citotxicas e partilha caractersticas dos linfcitos
T citotxicos e das clulas NK. Ela desenvolve-se no timo e sofre rearranjos no gene dos
receptores para os antignios e expressa o complexo TCR na superfcie da membrana. Estas so
caractersticas presentes no sistema imunitrio adaptativo. No entanto, tambm apresenta
caractersticas do sistema imunitrio inato, nomeadamente:
O receptor TCR invarivel com duas cadeias (TCR e TCR) codificadas por segmentos
de genes especficos;
O receptor TCR reconhece glicolpidos apresentados pela molcula no polimrfica
CD1d;
As clulas NKT atuam como clulas helper (secretando citocinas que modulam a
resposta imunitria) e como clulas citotxicas (matando clulas);
As clulas NKT incluem subpopulaes CD4+ e CD4- que podem ainda diferir na
produo de citocinas;
As clulas NKT provocam a morte celular predominantemente atravs de interaces
Fas-FasL;
As clulas NKT no formam clulas de memria;
As clulas NKT no expressam um nmero de marcadores que so caractersticos dos
linfcitos T, mas expressam mltiplas protenas das clulas NK;
As clulas NKT so importantes no sentido em que:
Controlam infeces com baixa carga bacteriana por bactrias que expressam
glicolpidos que so reconhecidos pelos seus receptores;
Libertam excessivamente citocinas inflamatrias em condies patolgicas;
Reconhecem antignios lipdicos especficos das clulas tumorais;
Contribuem para a imunidade viral;
Indirectamente, modulam a resposta imunitria a vrus com a produo de citocinas
(TNF-, IL-2, IL-4 e IFN-).

102
MIGRAO LEUCOCITRIA E INFLAMAO (CAP. XV)
Muitos leuccitos migram entre regies do corpo, nomeadamente para tecidos lesados ou
infetados. Os linfcitos em particular esto tambm a circular continuamente no sangue e na
linfa, o que fundamental para o desencadear de uma resposta inflamatria e aumenta a
probabilidade de encontrarem o Ag para o qual so especficos.
A Inflamao uma resposta complexa a uma leso local, caracterizada por rubor, calor, tumor
e dor. Envolve vrias clulas e mediadores, sendo a migrao controlada de leuccitos essencial
para o desenrolar e regulao das respostas inflamatrias.

RECIRCULAO LINFOCITRIA
Os linfcitos tm uma notvel capacidade de recirculao, movendo-se continuamente pelo
sangue e linfa para os vrios rgos linfoides. Aps um breve perodo de trnsito de
aproximadamente 30 min na corrente
sangunea, os linfcitos podem ir para o
Bao, para os vrios rgos linfoides
perifricos, por entre as clulas
endoteliais para tecidos extralinfides
tercirios que normalmente tm poucos
ou nenhum linfcito mas que podem
import-los durante uma inflamao
(principalmente as interfaces com o meio
externo, a pele e as mucosas
gastrointestinais, pulmonares e
genitourinrias). Depois regressam pela
linfa at ao sangue.
Esta recirculao contnua permite
maximizar o nmero de linfcitos
especficos para um Ag que encontram
esse Ag, juntamente com outros fatores
que regulam, organizam e direcionam a
circulao de linfcitos e APCs.

MOLCULAS DE ADESO CELULAR


O endotlio vascular atua como um porteiro, regulando passagem de molculas e linfcitos
no sangue para os tecidos. Para que um linfcito saia de um vaso sanguneo tem de aderir s
suas clulas endoteliais, e passar entre as mesmas extravasamento. Estas expressam CAMs
(Cell Adhesion Molecules) especficas para leuccitos, constitutivamente ou em resposta a
citocinas, que se ligam aos recetores de linfcitos, moncitos e granulcitos, alm de
fortalecerem as interaes entre vrias clulas imunitrias. So selectinas, mucinas, integrinas
e imunoglobulinas (ICAMs).

103
SELECTINAS responsveis pela adeso inicial dos
leuccitos ao endotlio. A lectina liga-se a hidratos de
carbono, como os das mucinas. L-selectina expressa
pela maioria dos leuccitos circulantes, E-selectina e P-
selectina pelas clulas endoteliais.
MUCINAS protenas altamente glicosiladas, expressas
por clulas endoteliais e leuccitos. Ligam-se a
selectinas.
Integrinas heterodmeros expressos apenas por
leuccitos que facilitam a adeso ao endotlio e
interaes com outras clulas. Ligam-se s ICAMs.
Algumas precisam de ser ativadas.
ICAMS apenas expressas no endotlio, contm vrios
domnios Ig-like. Ligam-se a integrinas.
A MAdCAM-1 pertence s Mucinas e s ICAMs, pelo que
se liga tanto a selectinas como a integrinas. expressa no endotlio das mucosas.

EXTRAVASAMENTO DE NEUTRFILOS
Durante uma resposta inflamatria, o endotlio dos vasos locais fica ativado ou inflamado por
citocinas e outros mediadores, sendo estimulado a expressar CAMs. Geralmente, os neutrfilos
so as primeiras clulas a extravasar para os tecidos inflamados, num processo de 4 etapas
sobreponveis, semelhante para moncitos e eosinfilos:
1. Rolamento ligaes fracas por interaes
entre selectinas e mucinas so quebradas
pela fora da corrente sangunea e voltam a
estabelecer-se novamente a jusante,
fazendo o neutrfilo rolar sobre o endotlio
2. Ativao por quimioatrativos expressos
pelas clulas endoteliais ou pelas clulas
inflamatrias, que se ligam a recetores do
neutrfilo aumentando a afinidade das suas
Integrinas por ICAMS atravs de uma
alterao conformacional. Podem ser
quimiocinas (IL-8, MIP-1), PAF, produtos
do Complemento, peptdeos bacterianos
3. Paragem e Adeso graas s ligaes entre Integrinas e ICAMs
4. Migrao transendotelial ainda no bem compreendida, poder ser mediada por
quimioatrativos e Integrinas-ICAMs ou por um mecanismo diferente

EXTRAVASAMENTO DE LINFCITOS
A recirculao de linfcitos cuidadosamente controlada para garantir que so recrutadas
populaes adequadas de clulas B e T para os vrios tecidos, por um processo de
extravasamento dependente de CAMs com as mesmas 4 etapas que o dos neutrfilos. Porm,
diferente na medida em que o extravasamento diferencial entre tecidos.

104
As Vnulas de Endotlio Alto (HEVs) so regies ps-capilares em vrios rgos linfoides com
clulas endoteliais cbicas. Esto presentes em
todos os rgos linfoides secundrios exceto o
Bao. Algumas das suas CAMs, as VA (Vascular
Adressins), apenas so expressas em
determinados tecidos, orientando assim a
sada de populaes de linfcitos especficas
para os mesmos trafficking ou homing,
graas a homing receptors e combinaes de
VA e quimiocinas.
Um linfcito naive no capaz de preparar uma resposta imunitria at ser ativado, tornando-
se numa clula efetora. Isto acontece em qualquer tecido linfoide secundrio, em
microambientes especializados onde Clulas Dendrticas capturam e lhes apresentam Ag. Os
linfcitos naive migram atravs das HEVs graas sua L-selectina (e CD34 ou GlyCAM-1 das
HEV), sendo que o seu padro de homing as mantm em constante recirculao atravs do
tecido linfoide secundrio, que aprisiona Ag. Ao encontrar um destes Ag, linfcitos naive ativam-
se e crescem, tornando-se em Linfoblastos. A ativao demora cerca de 48 h shut-down phase
durante a qual as clulas se mantm no paracrtex, proliferam rapidamente e se diferenciam,
no sendo detetados linfcitos especficos para o Ag em circulao (no recirculam). As clulas
efetoras e de memria assim geradas abandonam o tecido linfoide e entram em recirculao.
Os linfcitos efetores tendem a fazer homing para
regies infetadas atravs do reconhecimento de
endotlio inflamado e quimioatrativos inflamatrios,
enquanto que os de memria o fazem seletivamente
para o tipo de tecido onde contactaram inicialmente o
Ag (e onde ser mais provvel que reencontre um
outro Ag igual). Tanto os linfcitos efetores como os
de memria expressam LFA-1, que interage com
ligandos expressos em tecidos extralinfides (como
pele ou mucosa) e locais de inflamao, ao contrrio
dos naive, juntamente com outras combinaes de CAMs, que permitem a sua migrao para
tecidos especficos em funo das combinaes de CAMs correspondentes nestes. Tm pouca
L-selectina, pelo que migram pouco para tecido linfoide secundrio atravs de HEVs (embora
possam alcan-lo atravs dos vasos linfticos aferentes). O processo de extravasamento
semelhante ao dos neutrfilos, contudo:
O Rolamento menos acentuado
Quimiocinas no endotlio ou secretadas localmente estimulam a ativao de Integrinas
(possivelmente especficas para linfcitos)

105
QUIMIOCINAS MEDIADORES CHAVE NA INFLAMAO
Superfamlia de pequenos peptdeos com 90 130 a.a. Regulam o homing controlando a adeso,
quimiotaxia e ativao de muitos populaes e subpopulaes de leuccitos, de forma seletiva
ou at especfica. Tambm tm efeitos fora do Sistema Imunitrio
Quimiocinas Housekeeping so expressas constitutivamente e participam na
homeostase ou desenvolvimento, orientando o trafficking de linfcitos
(nomeadamente os recm-produzidos na medula ssea)
Quimiocinas Inflamatrias induzidas na inflamao pelo contacto com patognicos
ou por citocinas pr-inflamatrias (como o TNF-), recrutam fagcitos e populaes
de linfcitos efetores para locais inflamados ao induzir os leuccitos a aderir ao
endotlio, migrar at ao tecido e seguir concentraes de quimiocinas altamente
localizadas, sendo por isso essenciais na montagem de uma resposta adequadamente
focada infeo
Tm 4 resduos de Cistena, sendo que 2 deles permitem classificar as quimiocinas:
Subgrupo C-C as Cistenas esto ligadas
Subgrupo C-X-C as Cistenas esto separadas por um a.a.
Os seus recetores tambm se dividem em 2 subgrupos, CCR e CXCR. Tm alta afinidade e
especificidade pela quimiocina, contudo, a maioria pode ligar mais do que uma diferente e
muitas quimiocinas podem ligar-se a vrios recetores diferentes (no ao mesmo tempo).

Quando um recetor se liga a uma quimiocina apropriada ativa protenas G, que iro sinalizar
atravs de cAMP, IP3, Ca2+ e/ou outras protenas G pequenas. Os efeitos no leuccito so
dramticos alterao profunda e abrupta da forma, maior adeso a clulas endoteliais,
desgranulao e em fagcitos produo de ROS microbicidas.
Uma clula s pode responder a uma quimiocina se tiver um recetor que a reconhea. Assim, a
expresso de diferentes recetores em leuccitos permite regular a resposta destes produo
de quimiocinas pelos diferentes tecidos, como acontece com TH1 e TH2.
Os linfcitos T ativados so quem expressa maior diversidade de recetores de quimiocinas.

106
OUTROS MEDIADORES DA INFLAMAO
Alm das quimiocinas h ainda produtos libertados por plaquetas, neutrfilos,
moncitos/macrfagos, eosinfilos, basfilos, linfcitos, e 4 sistemas plasmticos:
Sistema Cinina
Sistema Coagulante
Sistema Fibrinoltico
Sistema Complemento
So todos ativados quando ocorre dano tecidular para formar uma rede de sistemas
interconectados que produza vrios mediadores da inflamao. Os trs primeiros incluem o
Fator Hageman = Fator XII da Coagulao.
Sistema Cinina:
Dano tecidular ativa o Fator XII, que vai ativar uma cascata enzimtica que leva produo de
Bradicinina. Este peptdeo causa vasodilatao, dor e contrao do msculo liso. A Kallikrena
atua diretamente no Sistema Complemento, produzindo C5a que induz a desgranulao de
mastcitos, libertando assim muitos outros mediadores inflamatrios.
Sistema Coagulante
Dano nos vasos sanguneos ativa uma cascata enzimtica que gera grandes quantidades de
Trombina, que transforma Fibrinognio solvel do plasma e fluidos extracelulares em
Fibrinopeptdeos e Fibrina insolveis. A ltima forma ligaes cruzadas e cria um cogulo, que
serve de barreira ao alastrar da infeo, os primeiros aumentam a permeabilidade vascular e a
quimiotaxia de neutrfilos.
Sistema Fibrinoltico
A partir de Plasminognio origina Plasmina, que degrada cogulos em produtos quimiotticos
para neutrfilos e ainda ativa a via clssica do Complemento.
Sistema Complemento
Tanto a via clssica como a alternativa resultam na formao de vrios produtos do
Complemento que so mediadores inflamatrios. As Anafilatoxinas (C3a, C4a e C5a) induzem a
desgranulao de mastcitos. C3a, C5a e C5b67 induzem moncitos e neutrfilos a aderir a
clulas endoteliais, extravasar e migrar para os locais onde o Complemento est a ser ativado.
Em suma, resulta em influxos de fluidos com Ac e clulas fagocitrias para o local da entrada de
Ag.
Alguns lpidos tambm atuam como
mediadores inflamatrios. Aps
perturbaes na membrana celular,
principalmente em leuccitos,
fosfolpidos so degradados em lyso-
PAF, que convertido em PAF (Platelet-
Activating Factor) que induz induz a
ativao de plaquetas e vrios efeitos
inflamatrios, e cido Araquidnico,
que pode ser metabolizado pela COX
em diferentes Prostaglandinas e
Tromboxanos consoante o tipo de
clula. Causam aumento da
permeabilidade vascular, vasodilatao,

107
quimiotaxia de neutrfilos e agregao plaquetar, vasoconstrio, respetivamente. O cido
Araquidnico tambm pode ser metabolizado pela lipoxigenase nos quatro Leucotrienos: LTB4
(quimioatrativo de neutrfilos) e LTC4, LTD4 e LTE4 (antiga SRS-A, indutores da contrao do
msculo liso).

H ainda muitas citocinas com efeitos inflamatrios redundantes e pleiotrpicos, como INF-,
IL-12, IL-1, IL-6 e TNF-.

INFLAMAO
Resposta fisiolgica no especfica a uma variedade de estmulos como infees ou danos
tecidulares com o objetivo de os conter no local. Uma resposta inflamatria aguda, geralmente,
tem um comeo rpido, curta durao e acompanhada da Resposta da Fase Aguda reao e
sistmica com alteraes rpidas dos nveis de vrias protenas plasmticas. Em algumas
doenas a ativao persistente do sistema imunitrio pode causar inflamao crnica,
geralmente com consequncias patolgicas.
Infiltrao predominantemente de neutrfilos no tecido, havendo para isso um grande
aumento da sua produo na Medula ssea. Mediadores de inflamao aguda
(Trombina e Histamina; Citocinas como IL-1 ou TNF-) estimulam as clulas endoteliais
a expressar E- e P-selectina (respetivamente), s quais se ligam as mucinas PSGL-1 dos
neutrfilos. A alterao conformacional induzida por IL-8 ou outro quimioatrativo
No tecido os neutrfilos ativados exibem quimiotaxia devido a uma maior expresso
de recetores de quimioatrativos como quimiocinas, produtos do complemento (C3a,
C5a e C5b67), fibrinopeptdeos, prostaglandinas, leucotrienos ou molculas libertadas
por microrganismos. Apresentam tambm uma maior expresso de recetores de Fc,
para Ac ou complemento, aumentando assim a fagocitose.
O sinal ativador tambm estimula as vias metablicas no sentido de um burst
respiratrio, que produz ROS e RNS. Estas so libertadas juntamente com o contedo
dos seus Grnulos Primrios e Secundrios (protases, fosfolipases, elastases e
colagenases) para matar vrios microrganismos, porm, contribuem para o dano
tecidual que pode resultar de uma resposta inflamatria. A acumulao de fluido,
protenas, clulas e microrganismos mortos constitui o pus.

108
Resposta Inflamatria localizada tumor, rubor, calor, dor e perda de funo
Minutos aps uma leso tecidular, devido a enzimas plasmticas, prostaglandinas e aos efeitos
indiretos do complemento (C3a, C4a e C5a) que induzem a desgranulao de Histamina de
mastcitos, ocorre:
Vasodilatao aumentando o volume de sangue local e diminuindo o fluxo
sanguneo, o que vai gerar o calor e rubor
Aumento da permeabilidade vascular particularmente nas veias ps-capilares, leva
ao edema (tumor) por sada de fluido (por vezes com leuccitos) e ativao dos
sistemas cinina, coagulante e fibrinoltico
Horas aps o incio das alteraes vasculares, os neutrfilos aderem s clulas endoteliais,
extravasam, fagocitam invasores e libertam mediadores inflamatrios, nomeadamente MIP-1
e MIP-1 (Macrophage Inflammatory Proteins) que atraem macrfagos.
5 a 6 horas aps o incio da resposta inflamatria
chegam macrfagos, que maiores capacidades
de fagocitose e libertao de mediadores
inflamatrios, nomeadamente IL-1, IL-6 e TNF-,
que geram muitas das alteraes locais e
sistmicas de uma resposta inflamatria aguda.
TNF- e IFN- estimulam os macrfagos e
neutrfilos. A libertao de citocinas estimula a
adeso de clulas imunitrias ao endotlio e o
seu extravasamento, resultando num influxo de
linfcitos, neutrfilos, moncitos, eosinfilos,
basfilos e mastcitos para eliminarem o Ag e
repararem o tecido. IL-12 induz a diferenciao
da subpopulao TH1 pr-inflamatria.

109
Para controlar o dano tecidual e facilitar a reparao (atravs da acumulao e proliferao de
fibroblastos), a durao e intensidade da resposta aguda local tm de ser cuidadosamente
reguladas, em particular por TGF-.

Resposta Sistmica de
Fase Aguda febre,
sntese hormonal (como
ACTH e Hidrocortisona),
leucocitose e sntese de
protenas de fase aguda no
fgado
O aumento da
temperatura inibe o
crescimento de muitos
microrganismos e parece
melhorar a resposta
imunitria. A protena C-
reativa um prottipo de
protena de fase aguda que
se liga a uma variedade de
microrganismos e ativa o
complemento a depositar C3b na superfcie de microrganismos. IL-1, IL-6 e TNF- levam o
hipotlamo a gerar febre, induzem a produo de protenas de fase aguda em hepatcitos (e a
diminuio de outras protenas sintetizadas no fgado por um fator de transcrio semelhante,
como a Albumina) aps 12 a 24 horas e de colony-stimulating factors (M-CSF, G-CSF, GM-CSF).

Inflamao Crnica
Causas:
Persistncia do Ag por evaso ao sistema imunitrio
Doenas Autoimunes com ativao crnica de linfcitos T por Ag self
Alguns tipos de Cancro
Resulta em danos tecidulares significativos, sendo marcada pela acumulao e ativao de
macrfagos, que produzem citocinas que podem estimular fibroblastos a gerar fibrose. Duas so
particularmente importantes, que atuam sinergicamente para iniciar uma inflamao crnica:
IFN- produzido por linfcitos TH1, TC e NKC, tem muitos efeitos inflamatrios
pleiotrpicos, nomeadamente ativar macrfagos que ficam mais eficazes a apresentar
Ag, eliminar microrganismos e libertar ROS e RNS. bastante diferente de IFN- e IFN-
, produzidos por clulas infetadas por vrus consoante o tipo da clula
TNF- produzido por macrfagos, tem um efeito citotxico direto em clulas tumorais
e causa danos tecidulares
Em doenas como Artrite Reumatoide, Doena de Crohn, Doena de Graves, Tiroidite de
Hashimoto surgem regies HEV-like nos vasos em locais de infeo crnica, por onde os
leuccitos podem extravasar e contribuir para a inflamao crnica.
Uma resposta inflamatria aguda pode ocorrer sem o envolvimento evidente do sistema
imunitrio.

110
AGENTES ANTI-INFLAMATRIOS
Apesar de importante para a defesa do organismo, uma resposta inflamatria pode ser
prejudicial para organismo e at tornar-se crnica, como em casos de alergias, doenas
autoimunes, infees, transplantes ou queimaduras. Assim, desenvolveram-se teraputicas que
reduzir respostas inflamatrias duradouras e respetivas complicaes:
Bloqueio das CAMs por Ac teraputicos reduo do extravasamento de leuccitos
Corticoesterides reduzem o n e a atividade de clulas imunitrias atravs de
alteraes da recirculao e de vrios processos celulares
Anti-inflamatrios no esteroides (NSAIDs) os mais comuns, reduzem a inflamao e
a dor por inibio da cicloxigenase
Notas da 7 edio de Kuby Immunology
Decidiu-se incluir as seguintes seces da 7 edio pois foram abordadas na aula.

FAGOCITOSE
As clulas fagocticas formam na maioria dos tecidos uma linha de defesa inata a seguir
barreira da pele. Incluem
as Clulas Dendrticas.
Reconhecem micrbios
atravs de recetores
membranares PRRs
(Pattern Recognition
Receptors) para padres
ou motivos de molculas
conservados na superfcie
dos mesmos PAMPs
(Pathogen-Associated
Molecular Patterns, apesar
de serem independentes
da patogenicidade ou no
destes) = MAMPs (de
Microbe), como o LPS.
Alternativamente, pode
ser desencadeada pelo
reconhecimento de uma
protena solvel que se liga
a motivos conservados
Opsonina, como a Protena
C Reativa por um Recetor
de Opsoninas.
Os microrganismos internalizados so conduzidos para um fagolisossoma, onde so atacados
por defensinas, catelicidinas, baixo pH, enzimas e ROS e RNS gerados pela NADPH oxidase
durante o burst respiratrio (processo metablico onde se consome muito O2 para produzir
espcies oxidativas).
A fagocitose tambm usada para eliminar clulas mortas, envelhecidas, infetadas, tumorais
ou detritos celulares, graas aos DAMPs (de Damage ou de Danger consoante os autores, como

111
Fosfatidilserina ou Lisofosfatidilcolina) ou opsoninas, reconhecidos por PRRs. A CD47 em clulas
saudveis inibe a sua fagocitose.
Os PRRs aps reconhecerem PAMPs ou DAMPs vo desencadear vrias respostas inatas
possveis, benficas ou prejudiciais fagocitose, sntese de protenas, interferes, citocinas,
quimiocinas, enzimas.
Os PRRs so expressos em todas os leuccitos, clulas dendrticas, clulas da pele, mucosas,
glndulas, endotlio e estroma. Alguns localizam-se em endossomas, lisossomas ou at no
citosol, para que poderem reconhecer PAMPs e DAMPs intracelulares (particularmente cidos
nucleicos). Formam 4 famlias principais:
TLRs (Toll-Like Receptors): CLRs (C-type Lectin Receptors):
Em membranas Apenas na membrana plasmtica.
Com um domnio extramembranar em Reconhecem geralmente glcidos
ferradura com vrias LRRs (Leucine-Rich Induzem fagocitose, ativao de NF-kB e a
Repeats), dimerizam quando ligam um expresso de vrias protenas
PAMP ou DAMP
Ativam NF-kB e a expresso de IFN- e
IFN-, citocinas, quimiocinas e
antimicrobianos, mas no fagocitose
RLRs (Retinoic acid-inducible gene-I-Like NLRs (Nod-Like Receptors):
Receptors): No citosol
No citosol, solveis As suas funes ainda no foram bem
So RNA helicases que detetam caracterizadas
infees virais Alguns ativam NF-kB, outros formam
Ativam o NF-kB, expresso de IFN e Inflamossomas
IFN , citocinas, quimiocinas e
antimicrobianos

112
INTERAES ENTRE IMUNIDADE INATA E ADAPTATIVA
A Imunidade Inata ajuda a ativar e regular a Imunidade Adaptativa. No incio da infeo, as
clulas da imunidade inata reconhecem PAMPs atravs dos seus PRRs e respondem,
abrandando a infeo, enquanto ajudam a iniciar uma resposta adaptativa por Ac ou
citotoxicidade.
Primeiro, clulas da imunidade inata, como as clulas dendrticas, so ativadas ao ligarem-se a
micrbios atravs de PRRs e levam-nos (ou superfcie ou num fagossoma) pelos linfticos at
um tecido linfoide secundrio (como um gnglio). A, expressam CD80 ou CD86 e transferem ou
apresentam o microrganismo ou fragmentos dele a linfcitos TH (via MHC II), TC (via MHC I e
apresentao cruzada numa clula licenciada) ou B.
A ligao de certos PAMPs a certos PRRs induz as clulas da imunidade inata a secretar citocinas
especficas que influenciam as citocinas que um linfcito naive TC ou TH vai produzir depois de
ser ativado, logo, determinando o seu fentipo e resposta imunitria.
Os linfcitos B tm TLRs, cuja ativao pode substituir a ativao por linfcitos TH e ser mais
rpida. Os linfcitos T tambm tm TLRs, que atuam como recetores co-estimulatrios que
diminuem a sua necessidade de clulas dendrticas. NKC tambm tm TLRs.
Algumas vacinas contm Adjuvantes PAMPs de vrus ou bactrias mortos ou inativados, ou
materiais isolados, que aumentam a resposta imunitria por se ligarem a TLRs. Assim, tm-se
investigado novos adjuvantes que possam ser includos em novas e mais eficazes vacinas.
As respostas adaptativas adotaram e modificaram algumas respostas inatas, como a ativao
por Ac ligados a Ag. H ainda o exemplo do complemento, que pode ser ativado por mecanismos
inatos ou Ac.

113
REACES DE HIPERSENSIBILIDADE (Cap. XVI)
Geralmente, uma resposta imunitria usa respostas efectoras que induzem respostas
inflamatrias e removem o antignio sem danificar o tecido. No entanto, podem surgir respostas
inadequadas, quer no decurso da resposta humoral, quer na mediada por clulas.
Reaces de hipersensibilidade so reaces inflamatrias dentro dos ramos humoral e
mediado por clulas do sistema imunitrio que levam a extenso dano tecidual ou mesmo morte.
Os 4 tipos de hipersensibilidade geram molculas efectoras e manifestaes clnicas
caractersticas.
Na hipersensibilidade imediata os sintomas so manifestados minutos ou horas aps o contacto
de um receptor sensibilizado com o antignio. So exemplo as reaces anafilticas iniciadas
por anticorpos ou complexos antignio-anticorpo. Na hipersensibilidade tardia (DHT: delayed-
type hypersensivity) constata-se um atraso dos sintomas at dias aps a exposio.

CLASSIFICAO DE GELL E COOMBS


As reaces de hipersensibilidade podem distinguir-se pelo tipo de resposta imunitria e
diferenas nas molculas efectoras geradas no curso da reaco.

Em reaces de hipersensibilidade imediata, diferentes isotipos de anticorpos induzem


molculas efectoras imunes especficas. Anticorpos IgE, por exemplo, induzem a desgranulao
de mastcitos com libertao de histamina e outras molculas biologicamente activas. Em
contraste, anticorpos IgG e IgM induzem reaces de hipersensibilidade atravs da activao do
complemento. As molculas efectoras nas reaces do complemento so os complexos de

115
ataque membrana e os produtos divididos do complemento anafiltico C3a e C5a. Em reaces
de DTH, as molculas efectoras so diversas citocinas secretadas por clulas TH e TC activadas.
Assim, as reaces de hipersensibilidade so divididas em 4 tipos. Trs tipos de
hipersensibilidade ocorrem dentro do ramo humoral e so mediados por anticorpos ou
complexos antignio-anticorpo: hipersensibilidade mediada por IgE (tipo I), mediada por
anticorpo (tipo II) e mediada pelo complemento (tipo III). Um quarto tipo de hipersensibilidade
depende da activao de clulas T dentro do ramo mediado por clulas e designada DTH ou
tipo IV.

Hipersensibilidade Mediada por IgE (Tipo I)


Uma reaco de hipersensibilidade tipo I induzida por determinados tipos de antignios
(alergnios) e possui todas as caractersticas de uma resposta humoral normal, ou seja, um
antignio induz uma resposta humoral de anticorpos pelos mesmos mecanismos descritos para
outros antignios solveis, resultando na gerao de clulas plasmticas e clulas de memria.

O que distingue uma resposta de hipersensibilidade de tipo I de uma resposta humoral normal
so as clulas plasmticas que secretam IgE em resposta activao de clulas T H2 alrgico-
especficas. Essa classe de anticorpos liga-se com alta afinidade a receptores Fc na superfcie de
mastcitos teciduais e basfilos sanguneos; mastcitos e basfilos ligados pela IgE so
considerados sensibilizados. Uma exposio posterior (2 exposio) ao mesmo alergnio
resulta na ligao cruzada da IgE fixa membrana dos mastcitos e basfilos com desgranulao
destas clulas. Os mediadores farmacologicamente activos libertados pelos grnulos actuam
nos tecidos circundantes. Os principais efeitos - vasodilatao e contraco do msculo liso
podem ser sistmicos ou localizados consoante a extenso da libertao do mediador.
Actualmente, o termo alergia tem sido utilizado como sinnimo de hipersensibilidade tipo I.

Componentes comuns de reaces do tipo I


1 Alergnios
A maioria dos seres humanos desenvolve respostas de IgE significativas somente como defesa
contra Infeces parasitrias. Contudo, algumas pessoas apresentam atopia: predisposio
hereditria ao desenvolvimento de reaces de hipersensibilidade imediatas contra antignios
ambientais comuns pelo que antignios no parasitrios (alergnios) estimulam a produo

116
inapropriada de IgE. Estes indivduos apresentam nveis anormalmente elevados de IgE
circulante e elevados nmeros de eosinfilos circulantes sendo susceptveis a alergias, eczemas
e asma. A maioria das reaces alrgicas mediadas por IgE ocorre nas mucosas, em resposta a
Ag que encontram no organismo por inalao ou ingesto.

2 Anticorpo IgE
Quando injectado em indivduos sensibilizados, ocorre reaco P-K.
Em indivduos normais, o nvel de IgE no soro o mais baixo entre todas as classes de anticorpos.
composta por duas cadeias pesadas e duas cadeias leves com um domnio adicional, CH4, que
contribui para a ligao da poro Fc a receptores, FcR, na superfcie dos mastcitos e basfilos.
A vida mdia da IgE de 2,5 dias, mas quando ligada a receptores, estvel durante vrias
semanas.

3 Mastcitos e Basfilos
Contm grnulos com substncias farmacologicamente activas (histamina e aminas
tensoactivas).

4 Receptores Fc ligadores de IgE (IgE-binding FcR)


A actividade reactiva de IgE depende da sua
capacidade de se ligar a receptores
especficos para a poro Fc das cadeias
(pesadas). Foram identificadas 2 classes de
receptores: FcRI e FcRII.
Os mastcitos e os basfilos expressam
FcRI que se liga a IgE com maior afinidade,
permitindo a ligao a IgE mesmo em baixa
concentrao srica. Eosinfilos, clulas de
Langerhans, moncitos e plaquetas
tambm expressam FcRI, mas em nveis
muito menores.

Efeitos que desencadeiam a desgranulao dos mastcitos:

1. Ligao cruzada do alergnio IgE ligada ao receptor Fc na superfcie do mastcito.

117
2. PTK (protena tirosina cinase) fosforila fosfolipase C que converte PIP-2 (fosfatidil
inosiol-4,5-bifosfato) em DAG (1,2-diacilglicerol) e IP3 (inositol trifosfato). DAG activa
PKC que, juntamente com clcio, necessria para a montagem microtubular e fuso
dos grnulos com a membrana plasmtica. IP3 um potente mobilizador de reservas de
clcio intracelular.
3. A ligao cruzada de FcRI tambm activa uma enzima de converte PS (fosfatidilserina)
em PE (fosfatidiletanolamina). PE metilada para formar fosfatidilcolina por PMT I e II
(fosfolpido metil transferases I e II).
4. O cmulo de Pc na superfcie exterior da membrana plasmtica gera aumento da fluidez
e facilita a formao de canais de clcio. O influxo de clcio resultante e a MAPK-PKT-
activada activam a fosfolipase A2 que promove a quebra de PC em fosfatidilcolina e
cido araquidnico.
5. O cido araquidnico convertido em leucotrienos e prostaglandina D2.
6. A MAPK (mitogen-activated protein kinase) induz a secreo de citocinas por aumento
da transcrio de genes.
7. A ligao cruzada de FcRI tambm activa adenilato ciclase na membrana com aumento
transitrio de AMPc.
8. Protenas cinases dependentes de AMPc fosforilam as protenas granulares de
membrana alterando a permeabilidade dos grnulos gua e ao clcio com dilatao,
fuso com a membrana e libertao dos mediadores.

5 Agentes farmacolgicos que medeiam as reaces


As manifestaes clnicas das reaces de hipersensibilidade do tipo I esto relacionadas com
os efeitos biolgicos dos mediadores libertados durante a desgranulao de mastcitos e
basfilos. Esses mediadores farmacologicamente activos actuam tanto em tecidos localizados
como em populaes de clulas efectoras secundrias, incluindo eosinfilos, neutrfilos,
linfcitos T, moncitos e plaquetas.
Os mediadores podem ser classificados em primrios e secundrios. Os mediadores primrios,
pr-produzidos antes da desgranulao so armazenados nos grnulos, so a histamina,
protases, factor quimiotrfico eosinoflico, factor quimiotrfico neutroflico e heparina. Os
mediadores secundrios so sintetizados aps a activao da clula-alvo ou libertados pelo
colapso de fosfolpidos da membrana durante o processo de desgranulao; incluem: factor
activador de plaquetas, leucotrienos, prostaglandinas, bradicininas e diversas citocinas e
quimiocinas.
HISTAMINA: a actividade biolgica s observada alguns minutos aps a activao dos
mastcitos. Liga-se a 3 tipos de receptores:
H1: constrio do msculo liso intestinal e brnquico, aumento da permeabilidade das
vnulas e secreo de muco pelas clulas caliciformes.
H2: vasopermeabilidade (contraco de clulas endoteliais), vasodilatao
(relaxamento do msculo liso de vasos sanguneos), estimulao de glndulas excrinas
e aumento da libertao de cido no estmago. A ligao de histamina a receptores H2
inibe a desgranulao por um mecanismo de feedback negativo.
H3
LEUCOTRIENOS: broncocronstrio, aumento da permeabilidade vascular e produo de muco.
PROSTAGLANDINAS: broncoconstrio.

118
CITOCINAS: mastcitos humanos secretam IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, GM-CSF e TNF- que
alteram o microambiente local, levando ao recrutamento de clulas inflamatrias como
neutrfilos e eosinfilos. IL-4 e IL-13 estimulam a resposta TH2 e aumentam a produo de IgE
por clulas B. IL-5 particularmente importante no recrutamento e activao dos eosinfilos.
Altas concentraes de TNF- secretadas por mastcitos podem contribuir para o choque na
anafilaxia sistmica.

Anafilaxia Sistmica
Estado semelhante a choque com falha dos sistemas respiratrio, circulatrio e gastrointestinal,
frequentemente fatal que ocorre em minutos aps uma reaco de hipersensibilidade tipo I,
geralmente induzida por um alergnio (veneno de abelha, vespa, picada de formiga, frutos-do-
mar, nozes, frmacos: penicilina, insulina, antitoxinas, ) introduzido directamente na corrente
sangunea ou absorvido pelo intestino ou pele.
O tratamento consiste na administrao de epinefrina que neutraliza os efeitos de mediadores
como a histamina e os leucotrienos com relaxamento do msculo liso, reduo da
permeabilidade vascular e aumento do dbito cardaco. Aumenta ainda os nveis de AMPc nos
mastcitos, bloqueando a desgranulao.

Atopia
Reao de hipersensibilidade limitada a um tecido ou rgo, no local de entrada do alrgeno.
Incluem rinite alrgica, dermatite tpica e alergias alimentares.

Regulao da resposta de Hipersensibilidade tipo I


Nveis de IgE influenciados por:
Constituio gentica
Dose de antignio: doses pequenas induzem resposta contnua de IgE enquanto doses
grande geram produo transitria de IgE, com mudana para IgG
Modo de apresentao do antignio: a Th1 inibe a resposta devido secreo de INF-
(indivduos normais) enquanto a Th2 aumenta a resposta por IL-4, que induz a
mudana de classe para IgE e regula a expanso clonal do linfcito B (indivduos
atpicos).

Mtodos Clnicos para deteco de hipersensibilidade tipo I


A hipersensibilidade tipo I comumente identificada e estimada atravs de testes cutneos.
Pequenas quantidades de alergnios em potencial so introduzidas em locais cutneos
especficos por meio de injeco intradrmica ou picada/raspagem superficial. Um nmero de
alergnios pode ser aplicado em vrios locais do antebrao de um indivduo de cada vez. Se a
pessoa alrgia, mastcitos locais desgranulam e a libertao de histamina e outros mediadores
induz inchao e calor em 30 minutos.
Apresentam como vantagens o baixo custo e a possibilidade de estudar um grande nmero de
alergnios. Como desvantagens contam-se o risco de sensibilizao do indivduo a novos
alergnios e o risco de choque anafiltico sistmico.
Outro mtodo para estudar a hipersensibilidade do tipo I determinar o nvel srico de
anticorpo IgE por RIST (radioimmunosorbent). O teste RAST (radioallergosorbent) detecta o nvel
srico de IgE especfica para um dado alrgeno.

119
Controlo mdico da Hipersensibilidade tipo I
A imunoterapia com repetidas injeces de doses aumentadas de alergnios
(hipossensibilizao) pode reduzir a gravidade de reaces tipo I ou mesmo elimin-las
completamente. A introduo repetida de alergnio parece causar uma transferncia para a
produo de IgG (anticorpo bloqueador, pois compete pelo alergnio lingando-se a este e
permitindo a sua remoo por fagocitose) ou induzir supresso mediada por clulas.
Outra forma de imunoterapia consiste no uso de anticorpo monoclonal humanizado anti-IgE.
Estes anticorpos ligam-se IgE apenas se esta no estiver ligada a FcRI. Quando injectados em
indivduos com hipersensibilidade, os anticorpos ligam-se IgE livre, desregulando a produo
de IgE pelas clulas B e a expresso de FcRI nos mastcitos e basfilos.

Hipersensibilidade Citotxica Mediada por Anticorpo (Tipo II)


As reaces de hipersensibilidade do tipo II envolvem a destruio de clulas mediada por
anticorpo. Um anticorpo ligado ao antignio de superfcie de uma clula pode activar o sistema
do complemento, criando poros na membrana de uma clula estranha ou mediar a destruio
celular atravs da citotoxicidade mediada por clula dependente de anticorpo (ADCC).
Neste processo, clulas citotxicas com receptores Fc ligam-se regio Fc de anticorpos em
clulas-alvo e promovem a morte das clulas. O anticorpo ligado a uma clula estranha tambm
pode actuar como opsonina, capacitando clulas fagocticas com receptores Fc ou C3b a ligarem-
se e fagocitarem a clula revestida por anticorpo.
Determinadas doenas auto-imunes envolvem destruio celular mediada por autoanticorpo
atravs de mecanismos do tipo II.

Reaces de Transfuso
Um grande nmero de protenas e glicoprotenas da membrana dos eritrcitos codificada por
diferentes genes, cada um dos quais apresenta um nmero de alelos alternativos. Um indivduo
que possui uma forma allica de um antignio de grupo sanguneo pode reconhecer outras
formas allicas como estranhas em sangue transfundido e gerar uma resposta imunitria
mediada por anticorpos. Alguns destes anticorpos j foram introduzidos por exposio natural
a determinantes antignios similares de uma variedade de microrganismos presentes na flora
normal do intestino. o caso dos antignios do grupo sanguneo ABO.
Os anticorpos dos antignios A, B e O, chamados isohemaglutininas, geralmente so da classe
M. Um indivduo com sangue do tipo A, por exemplo, reconhece eptopos semelhantes a B de
microrganismos intestinais e produz isoemaglutininas contra esses epitopos. Esse mesmo
indivduo no responde a epitopos semelhantes ao grupo A dos mesmos microrganismos
intestinais porque so muito similares aos seus prprios, ou seja, verifica-se um estado de
autotolerncia.

120
Se um indivduo do tipo A transfundido com sangue contendo clulas do tipo B, as
isoemaglutininas anti-B ligam-se s clulas sanguneas B e medeiam a destruio destas por
meio de lise mediada pelo complemento. Anticorpos a outros antignios de grupos sanguneos
podem resultam de repetidas transfuses, pois pequenas diferenas allicas nesses antignios
podem estimular a produo de anticorpo, geralmente IgG.
As manifestaes clnicas de reaces de transfuso resultam de hemlise intravascular massiva
dos eritrcitos transfundidos e podem ser imediatas ou tardias. As reaces imediatas esto
mais associadas com incompatibilidades de grupos sanguneos ABO, que levam lise mediada
pelo complemento desencadeada por isoemaglutininas IgM. Aps algumas horas, a
hemoglobina livre pode ser detectada no plasma, esta filtrada pelos rins gerando
hemaglobinria, parte da hemoglunina convertida em bilirrubina. Os sintomas tpicos incluem
febre, resfriado, nasea, coagulao em vasos sanguneos, dores no dorso inferior e
hemoglobina na urina. O tratamento envolve o trmino da transfuso e a manuteno do fluxo
urinrio com diurticos.
As reaces de transfuso hemoltica tardias geralmente ocorrem em indivduos que receberam
repetidas transfuses de sangue ABO compatvel que incompatvel para outros antignios de
grupo sanguneo. As reaces desenvolvem-se entre 2 e 6 dias aps a transfuso. O sangue
transfundido induz a seleco clonal e produo de IgG contra diversos antignios de membrana
de grupos sanguneos, mais comumente Rh, Kidd, Kell e Duffy.
O isotipo predominante envolvido nestas reaces IgG que menos efectivo do que IgM na
activao do complemente. Assim, a lise dos eritrcitos transfundidos mediada pelo
complemento incompleta e muitas das clulas so destrudas em locais extravasculares
atravs de aglutinao, opsonizao e subsequente fagocitose por macrfagos. Os sintomas
incluem febre, baixa hemoglobina, aumento da biliorrubina, ictercia moderada e anemia. A
hemoglobina livre geralmente no geralmente detectada no plasma ou urina porque a
destruio de clulas sanguneas ocorre em locais extravasculares.

Doena hemoltica do recm-nascido


Esta patologia desenvolvida quando anticorpos IgG maternos especficos para antignios fetais
de grupo sanguneo atravessam a placenta e destroem os eritrcitos fetais.
A eritroblastose fetal comumente desenvolvida quando um feto Rh+ expressa um antignio
Rh, no expresso pela me Rh-. Durante a gravidez, os eritrcitos do feto so separados da
circulao materna por uma camda de clulas na placenta trofoblasto. Durante a primeira
gravidezs com um feto Rh+, uma mulher Rh- geralmente no exposta a eritrcitos fetais
suficientes para actiovar clulas B Rh-especficas. No nascimento, a separao da placenta da
parede uterina permite que grandes quantidades de sangue do cordo umbilical entrem na
circulao da me. Estes eritrcitos activam clulas B Rh-especficas e clulas B de memria na
me que numa gravidez posterior resultam na formao de anticorpos IgG anti-Rh que
atravessam a placenta e danificam as clulas sanguneas do feto. Pode desenvolver-se uma
anemia moderada a grave no feto, por vezes com consequncias fatais. A converso de
hemoglobina em bilirrubina pode representar um risco acrescido para o recm-nascido, pois a
bilirrubina lipossolvel pode ser acumulada no crebro, gerando dano cerebral.
A doena hemoltica do recm-nascido gerada pela incompatibilidade de Rh em gravidez
subsequente pode ser quase inteiramente prevenida pela administrao de anticorpos contra o
antignio Rh s 28 semanas de gestao e 24-48h aps o primeiro parto. Estes anticorpos

121
(Rhogam) ligam-se a qualquer eritrcito fetal que entre na circulao sangunea materna e
facilita a sua eliminao antes da activao da clula B.

Anemia Hemoltica induzida por frmacos


Determinados antibiticos (penicilina, cefalosporina e estreptomicina) podem adsorver
inespecificamente a protenas na membrana dos eritrcitos, formando um complexo similar ao
complexo carregador de hapteno. Em alguns pacientes, estes complexos induzem a formao
de anticorpos que se ligam ao frmaco absorvido membrana do eritrcito induzindo lise
mediada pelo complemento e anemia progressiva. Quando o frmaco retirado, a anemia
hemoltia desaparece.

Hipersensibilidade Mediada pelo Complexo Imune (Tipo III)


A reaco anticorpo-antignio gera complexos imunes que geralmente facilitam a eliminao do
antignio pelas clulas fagocitrias. Contudo, grandes quantidades destes complexos levam a
reaces de hipersensibilidade do tipo III danificadoras de tecidos.
A magnitude da reaco depende da quantidade de complexos imunes e da sua distribuio no
organismo. Quando os complexos so depositados em tecidos muito prximos do local de
entrada do antignio desenvolve-se uma reaco local, mas quando os complexos so formados
no sangue a reaco pode desenvolver-se no local onde estes se depositam, geralmente nas
paredes de vasos sanguneos, membrana sinovial, membrana basal glomerular do rim e plexo
coride. A deposio destes complexos activa o recrutamento de neutrfilos ao local. O tecido
danificado como consequncia da libertao granular de neutrfilos.
As reaces de hipersensibilidade desenvolvem-se quando complexos imunes activam o arranjo
de molculas efectoras imunes do sistema complemento os produtos activos do complemento
C3a e C5a so anafilatoxinas que geram desgranulao localizada dos mastcitos e consequente
aumento da permeabilidade vascular local. C3a, C5a e C5b tambm so factores quimiotxicos
para neutrfilos que podem ser acumulados em grande nmero no local de depsito do
complexo imune. Complexos imunes maiores so depositados na membrana basal de paredes
de vasos sanguneos ou glomrulos renais enquanto pequenos complexos so depositados no
subepitlio.
A ligao dos complexos imunes a Fc e receptores do complemento em leuccitos leva
activao de uma resposta inflamatria. Grande parte do dano tecidual originado pela
libertao de enzimas lticas pelos neutrfilos ao tentar fagocitar os complexos imunes. O

122
componente C3b actua como opsonina, revestindo complexos imunes ao qual um neutrfilo se
liga atravs do receptor de complemento tipo 1, especfico para C3b. A activao do
complemento pode levar agregao plaquetar, libertao de factores de coagulao e
formao de microtrombos.

Reaces localizadas Exemplo: Picada de insecto


Aps a picada de um insecto, um indivduo sensvel pode ter uma reaco do tipo I
rpida e localizada. Frequentemente, aps 4 a 8 horas, desenvolve-se no local uma
reaco de Arthus com eritema (presena de eritrcitos) e edema (cmulo de fluido)
pronunciados.

Reaces generalizadas Exemplo: Doena do Soro


So frequentemente observadas aps administrao de antitoxinas contendo soro estranho
como soro antitetnico ou antidiftrico.
Neste caso, o indivduo receptor desenvolve anticorpos especficos para as protenas sricas
estranhas que formam complexos imunes com os antignios estranhos. Sete a vinte e um dias
aps a administrao do soro, o indviduo manifesta febre, fraqueza, vasculite generalizada
(erupes) com edema e eritema, linfoadenopatia, artrite e glomerulonefrite. Os sintomas
podem desenvolver-se 1 a 3 dias aps uma exposio subsequente ao mesmo antignio.

Hipersensibilidade do Tipo IV ou Tipo Tardia (DTH)


Quando algumas subpopulaes de clulas TH
encontram determinados tipos de antignios,
secretam citocinas que induzem uma resposta
inflamatria localizada caracterizada por um grande
influxo de clulas inflamatrias inespecficas,
particularmente macrfagos.
Embora em alguns casos uma reaco DTH gere
intenso dano tecidual e seja patolgica, em muitos
casos o dano tecidual limitado e a resposta exerce
um papel importante na defesa contra petognios
intracelulares e antignios de contacto.
O desenvolvimento da resposta DTH comea com uma
fase de sensibilizao inicial de 1 a 2 semanas aps o
contacto primrio com o antignio. Durante este
perodo, as clulas TH so activadas e expandidas
clonalmente pelo antignio apresentado em conjunto
com a molcula do MHC de classe II numa clula
apresentadora de antignios apropriada, como as
clulas de Langerhans ou os macrfagos. Geralmente
as clulas T activadas durante a fase de sensibilizao
so CD4+, mas em alguns casos podem intervir clulas
CD8+.
Uma exposio subsequente ao antignio induz a fase efectora da resposta de DTH, na qual as
clulas TH1 secretam citocinas que recrutam e activam macrfagos e outras clulas inflamatrias

123
inespecficas. Uma resposta DTH surge habitualmente 24 horas aps o segundo contacto com o
antignio, com um pico s 48 a 72 horas.
Os macrfagos so as principais clulas efectoras da resposta DTH: as citocinas libertadas por
clulas TH1 induzem moncitos sanguneos a aderirem a clulas endoteliais vasculares e
migrarem do sangue para o local da resposta DTH atrados por quimiocinas como a protena
quimiottica de moncito (MCP-1/CCL2), onde se diferenciam em macrfagos activados.
Pode formar-se um granuloma quando a activao contnua de macrfagos induz a adeso de
um macrfago a outro com formao de clulas gigantes multinucleadas formam ndulos
palpveis com libertao de elevadas concentraes de enzimas lticas podendo conduzir a
extensa necrose tecidual.
De entre as citocinas produzidas pelas clulas TH1 diversas atraem e activas macrfagos ao local
da infeco. IL-3 e GM-CSF induzem hematopoiese localizada da linhagem de granulcitos
moncitos. O IFN- e o TNF- (juntamente com o TNF- derivado de macrfagos e a IL-1) actuam
nas clulas endoteliais, facilitando o extravasamento de moncitos e outras clulas
inflamatrias inespecficas.
Os macrfagos activados podem mediar a activao de mais clulas TH1 por libertao de IL-12.
IL-18 e IL-12 estimulam a sntese de IFN- por clulas TH1. A IL-17 aumenta a produo de
quimiocinas para o recrutamento de moncitos e neutrfilos ao local da reaco.

Deteco atravs de testes cutneos


A presena da reaco de DTH pode ser medida experimentalmente atravs da injeco
intradrmica de antignio e observao da leso cutnea caracterstica que se desenvolve no
local da infeco. Uma reaco positiva no teste cutneo incida que o indivduo possui uma
populao de clulas TH1 sensibilizadas especficas para o antignio testado.
Por exemplo, para determinar se um indivduo foi exposto a M. tuberculosis, PPD, uma protena
derivada da parece celular da microbactria, injectada intradermicamente. O
desenvolvimento de uma leso slida no local, levemente inchada e vermelha, 48 a 72h aps a
injeco indica exposio prvia.

Dermatite de contacto
Muitas dermatites de contacto so mediadas por clulas TH1. As substncias que geram a
reaco (formaldedo, nquel, agentes activos em cosmticos e tinta para cabelo, veneno de
carvalho e hera, ) so na sua maioria pequenas molculas que podem complexar com
protenas da pele. Este complexo internalizado por clulas apresentadoras de antignios na
pele e processadas e apresentadas junto com molculas de MHC da classe II, causando activao
de clulas TH1 sensibilizadas.

124
RESPOSTA IMUNE S DOENAS INFECCIOSAS (CAP. XVII)
Caso um agente patognico tente iniciar uma infeco num hospedeiro susceptvel, devem
ocorrer uma srie de eventos envolvendo uma resposta imunitria inata e adaptativa.
Uma das primeiras e mais importantes caractersticas da resposta inata do hospedeiro a
barreia formada pela superfcie de clulas epiteliais da pele e do intestino. A dificuldade de
penetrar essa barreira epitelial assegura que a maioria dos agentes patognios no tenha acesso
fcil ao hospedeiro. Para alm de promover uma barreira fsica, produz substncias qumicas
teis para prevenir a infeco: a secreo de enzimas gstricas por clulas epiteliais
especializadas diminui o pH do estmago e do trato gastrointestinal superior enquanto clulas
do intestino produzem pptidos antibacterianos.
Outra caracterstica importante da imunidade inata a presena da flora comensal nos tractos
gastrointestinal, genitourinrio e respiratrio que inibe por competio a ligao do patognico
s clulas do hospedeiro.
Muitos agentes patognicos procuram escapar destruio pelo sistema imunitrio reduzindo
a sua antigenicidade quando crescem dentro da clula hospedeira, variando os antignios de
superfcie, abrigando os seus antignios de membrana, camuflando-se por mimetizar a
superfcie das clulas do hospedeiro, expressando molculas com sequncia de aminocidos
similar s molculas da membrana da clula do hospedeiro ou adquirindo um revestimento com
molculas da membrana do hospedeiro. Alguns agentes so ainda capazes de suprimir
selectivamente a resposta imune ou regul-la, permitindo que um ramo ineficaz do sistema
imunitrio seja activado.

1 - INFECES VIRAIS
Uma srie de mecanismos imunitrios efectores especficos associada a defesas no especficas
recrutada para prevenir ou eliminar a infeco viral.

A passagem atravs da mucosa do trato respiratrio, genitourinrio e gastrointestinal


responsvel pelo maior nmero de casos de transmisso. A entrada do vrus tambm pode
ocorrer atravs de rupturas na pele causadas por picadas de insectos ou microcortes.
A resposta imunitria inata infeco viral primria consiste na induo de interferes tipo I
(IFN- e IFN-) e na activao de clulas NK. Molculas de RNA de cadeia dupla produzidas
durante o ciclo de vida viral so detectadas por receptores semelhantes ao Toll (Toll-like
receptors - TLRs) que induzem a expresso de IFN- e IFN- pela clula infectada.
Estas citocinas tambm podem ser produzidas por moncitos, macrfagos e fibroblastos. IFN-
e IFN- podem induzir uma resposta antiviral ou resistncia replicao viral pela ligao no

125
receptor IFN-/ e activao da via de sinalizao JAK/STAT que induz a transcrio de diversos
genes. Um destes genes codifica a enzima 2-5-oligo-adenilato sintase que activa a ribonuclease
e degrada o RNA viral.
Outros genes activados pela ligao do IFN-/
tambm contribuem para inibir a replicao
viral. Por exemplo, a ligao do IFN-/ induz
uma protena cinase especfica (protena cinase
dsRNA-dependente) a inactivar a sntese
proteica e bloquear a replicao viral na clula
infectada.
A ligao do IFN- e IFN- clula NK induz
actividade ltica. A actividade das clulas NK
bastante aumentada pela IL-12, produzida nas
fases iniciais da resposta infeco viral.
Anticorpos especficos para antignios da
superfcie viral so frequentemente cruciais
para conter a disseminao do vrus durante a
infeco aguda ou na proteco contra a
reinfeco. Estes so particularmente efetivos
se localizados no local de entrada do vrus no organismo.
A neutralizao viral por anticorpos por vezes envolve mecanismos que operam depois da sua
ligao clula do hospedeiro. Por exemplo, anticorpos podem bloquear a penetrao viral
atravs da ligao a epitopos necessrios para mediar a fuso do envelope viral com a
membrana plasmtica.
Anticorpos ou complemento podem tambm aglutinar as partculas virais e funcionar como
agente de opsonizao para facilitar fagocitose de partculas virais mediada por receptores Fc
ou C3b.
Embora os anticorpos tenham um papel importante na conteno da disseminao de um vrus
na fase aguda da infeco, no so capazes de eliminar os vrus se estes estiverem em estado
latente no qual o seu DNA integrado no DNA cromossmico do hospedeiro. Quando a infeco
est estabelecida, os mecanismos imunitrios mediados por clulas so responsveis pela
defesa do hospedeiro, em particular as clulas TCCD8+ e THCD4+, principais componentes da
defesa antiviral. As clulas TH1 activadas produzem vrias citocinas, incluindo IL-2, INF- e TNF
que promovem a defesa contra os vrus de forma directa e indirecta. O INF- age de forma
directa pela induo de um estado anti-viral nas clulas. A IL-2 age indirectamente auxiliando o
recrutamento de percursores dos linfcitos T citotxicos numa populao efectora. Tanto IL-2
como INF- activam clulas NK que desempenham um papel importante na defesa do
hospedeiro durante os primeiros dias da infeco viral, at que uma resposta especfica se
desenvolva.
Na maioria das Infeces virais, a actividade dos CTLs especficos inicia-se dentro de 3 a 4 dias
aps a infeco, atingindo o pico em 7 a 10 dias, depois declina. Em 7 a 10 dias aps a infeco
primria, a maioria dos viries foi eliminada paralelamente ao desenvolvimento de CTLs. Os CTLs
especficos para o vrus eliminam as clulas prprias infectadas com o vrus, eliminando assim
fontes potenciais de novos vrus.

126
Apesar do seu genoma de tamanho restrito, foram descobertos vrus que codificam protenas
que interferem em vrios nveis das defesas especficas e no especficas do hospedeiro. Como
foi referido anteriormente, a induo de IFN- e IFN- o principal mecanismo de defesa contra
a infeco viral, mas alguns vrus desenvolveram estratgias para evadir a aco do IFN-/. Por
exemplo, o vrus da hepatite C bloqueia ou inibe a aco da PKR enquanto o HSV inibe a
apresentao de antignios pelas clulas hospedeiras infectadas atravs da inibio da
conjugao do antignio com MHC de classe I.
O adenovrus e o citomegalovrus utilizam mecanismos moleculares distintos para reduzir a
expresso de molculas do MHC de classe I na superfcie, inibindo novamente a apresentao
de antignios para as clulas T CD8+.
Vrios vrus possuem estratgias para evadirem a destruio mediada pelo complemento: o
vrus da vaccinia secreta uma protena que se liga ao componente C4b do complemento,
inibindo a via clssica de activao. O HSV tem um componente glicoproteico que se liga ao
componente C3b do complemento, inibindo tanto a via clssica como a via alternativa.
Em alguns vrus como o vrus influenza, a variao antignica contnua tem como resultado o
aparecimento frequente de novas linhagens infeciosas para as quais no existe imunidade
protectora. Mecanismos semelhantes observam-se no rinovrus e HIV.

2 INFECES BACTERIANAS
A imunidade s infeces bacterianas obtida por meio de anticorpos a menos que a bactria
seja capaz de crescer intracelularmente; nesse cado, a reao de hipersensibilidade tardia possui
um papel fundamental.
As bactrias entram no organismo pelas vrias vias naturais ou atravs de vias no naturais
abertas por fissuras nas membranas da mucosa ou da pele. Consoante o nmero de
microrganismos que entram e os seus factores de virulncia, diversos nveis de defesa do
organismo so recrutados. Se o tamanho do inculo e a virulncia forem baixos, os fagcitos dos
tecidos so capazes de eliminar a bactria atravs da imunidade inata e defesa inespecfica.
Inculos maiores ou organismos com maior virulncia tendem a induzir uma resposta imune
adaptativa especfica.
A infeco por bactrias extracelulares faz com que ocorra uma induo na produo de
anticorpos humorais, que so ordinariamente secretados pelas clulas plasmticas nos ndulos
linfticos regionais e na submucosa dos tratos respiratrio e gastrointestinal. A resposta imune
humoral a principal resposta protectora contra bactrias extracelulares.
As bactrias extracelulares podem ser patognicas porque induzem uma resposta inflamatria
localizada ou produzem toxinas (endotoxinas ou exotoxinas) que podem ser citotxicas.
O anticorpo que se liga aos antignios acessveis na superfcie de uma bactria pode, juntamente
com o componente C3b do complemento, agir como uma opsonina que aumenta a fagocitose e
assim ajuda a eliminar a bactria. No caso de algumas bactrias, principalmente organismos
gram-negativos, a activao do complemento pode levar directamente lise do organismo. A
activao do sistema do complemento mediada por anticorpo tambm pode induzir a produo
localizada de molculas imunes efectoras que auxiliam no desenvolvimento de uma resposta
inflamatria ampliada e mais eficaz. Por exemplo, os produtos de clivagem do complemento
C3a, C4a e C5a agem como anafilatoxinas.

127
Outros produtos de clivagem do complemento servem como factores quimiotrficos para
macrfagos e neutrfilos, contribuindo para o recrutamento de clulas fagocitrias para o stio
da infeco. O anticorpo para a toxina bacteriana pode ligar-se a ela e neutraliz-la; os
complexos anticorpo-toxina so ento eliminados pelas clulas fagocticas da mesma forma que
qualquer outro complexo antignio-anticorpo.
Embora a imunidade inata no seja muito eficaz contra patognios bacterianos intracelulares,
as bactrias intracelulares podem activar as clulas NK que, por sua vez, exercem uma defesa
precoce contra estas bactrias. As infeces pelas bactrias intracelulares tendem a induzir uma
resposta imune mediada por clulas; especificamente, a reaco de hipersensibilidade do tipo

128
tardia. Nesta resposta, as citocinas que so secretadas pelas clulas T CD4+ so importantes,
particularmente o IFN- que activa os macrfagos para matar os patognios ingeridos de
maneira mais eficaz.
Existem quatro etapas primrias nas Infeces bacterianas:
- Ligao s clulas do hospedeiro;
- Proliferao;
- Invaso do tecido do hospedeiro;
- Dano induzido pela toxina s clulas do hospedeiro.
Os mecanismos de defesa do hospedeiro agem em cada etapa e diversas bactrias
desenvolveram formas de enganar alguns destes mecanismos.

Algumas bactrias apresentam estruturas ou molculas de superfcie que aumentam a sua


capacidade de se ligar a clulas do hospedeiro: vrias bactrias gram-negativas possuem pili,
outras secretam molculas de adeso (ex: Bordetella pertussis) que se ligam tanto s bactrias
como s clulas epiteliais ciliadas do trato respiratrio superior.
Anticorpos do tipo IgA especficos podem bloquear a ligao nas clulas epiteliais da mucosa e
so o principal mecanismo de defesa do hospedeiro contra a infeco bacteriana. No entanto,
algumas bactrias (ex: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae e Neisseria meningitidis)
conseguem escapar resposta da IgA pela secreo de protases que clivam esse anticorpo na
regio da dobradia: os fragmentos Fab e Fc resultantes da clivagem tm uma meia-vida
diminuda nas secrees das mucosas, no sendo tambm capazes de aglutinar microrganismos.
Os microrganismos podem ainda escapar resposta IgA alterando os seus antignios de
superfcie (ex: Neisseria gonorrhoeae) ou apresentando estruturas de superfcie que inibam a
fagocitose como a cpsula polissacardea do Streptococcus pneumoniae, a protena M de
Streptococcus pyogenes ou a secreo de coagulase que precipita um revestimento de fibrina
por alguns estafilococos patognicos.
Algumas bactrias podem apresentar mecanismos que interfiram com o sistema do
complemento como as gram-negativas que sintetizam cadeias longas laterais de peptdeo A que
evitam a lise ou Pseudomonas que secretam elastase que inactiva anafilotoxinas C3a e C5a,
diminuindo a reaco inflamatria localizada.
Vrias bactrias possuem ainda a capacidade de sobreviver dentro de clulas fagocticas como
a Listeria monocytogenes que escapa do fagolisossoma para o citoplasma e a Mycobacterium

129
avium que bloqueia a fuso lisossomal com o fagolisossoma. Algumas micobactrias so
resistentes ao ataque oxidativo que ocorre dentro do fagolisossoma.
Contudo, a resposta imunitria tambm pode contribuir para a patognese bacteriana, ou seja,
a doena no causada apenas pelo agente, mas tambm pela resposta imunitria: a
superproduo de citocinas estimulada pelo patognico leva aos sintomas do choque sptico
bacteriano, intoxicao alimentar e sndrome do
choque txico.
A capacidade para algumas bactrias sobreviverem
intracelularmente dentro das clulas infectadas,
pode activar cronicamente clulas T CD4+, levando
destruio tecidual por uma resposta mediada
por clulas com as caractersticas de uma resposta
de hipersensibilidade do tipo tardia. As citocinas
secretadas por estas clulas T CD4+ activadas
podem induzir um cmulo excessivo e activao
dos macrfagos, resultando na formao de um
granuloma. As concentraes localizadas das
enzimas lisossomais nestes granulomas
conseguem causar extensiva necrose tecidual.

3 DOENAS PARASITRIAS
A maioria das Infeces parasitrias resulta em doenas crnicas, preferencialmente, ao invs
das agudas, embora existam algumas excepes como a malria aguda.
O tipo de resposta imunitria que se desenvolve aps infeco por um protozorio e a eficcia
da resposta dependem em parte da localizao do parasita dentro do hospedeiro. Muitos
protozorios tm fases no ciclo de vida nas quais esto livres na corrente sangunea e durante
estas fases que a resposta humoral mais eficaz. Muitos destes agentes so capazes de
crescimento intracelular pelo que durante esta fase as respostas imunes mediadas por clulas
so eficazes na defesa do hospedeiro.
Os helmintas so parasitas grandes que normalmente no se multiplicam dentro das clulas.
Apesar de serem mais acessveis ao sistema imunitrio, devido ao baixo nmero de organismos
que infecta o hospedeiro, a exposio ao parasita limitada, induzindo baixos nveis de
imunidade. Helmintas geralmente so atacados por mecanismos mediados por anticorpos.

4 DOENAS FNGICAS
As doenas fngicas raramente so graves em indivduos normais e saudveis, mas constituem
um grave problema em indivduos imunocomprometidos. Tanto a imunidade inata como a
adaptativa controlam a infeco por fungos ubiquitrios.
As barreias da imunidade inata controlam a maioria dos fungos. Os organismos comensais
tambm controlam o crescimento de certos patognios potenciais e a fagocitose por neutrfilos
uma forte defesa contra a maioria dos fungos.
A alternativa de lecitina e o caminho da activao do complemento so disparados por
componentes presentes na maioria das clulas da parede dos fungos e a soluo da infeco
normal por indivduos saudveis rpida. Protenas com ligaes com manose reconhecem
alguns dos principais fungos patognicos (C. albicans, C. neoformans e A. fumigatus).

130
A activao do complemento por qualquer via alternativa ou da lecitina permite ligao aos
componentes do organismo e consequente fagocitose e destruio intracelular por mecanismos
de morte oxignio-dependentes ou oxignio-independentes. No caso de Infeces pulmonares,
protenas surfactantes presentes no pulmo ligam-se a patognios e aumentam a fagocitose.
Receptores ligados s clulas, incluindo receptores do complemento CR1, CR3 e CR4 e cercas
PRRs ligam-se a protenas dos fungos e medeiam a fagocitose ou iniciam a expresso de citocinas
que carregam molculas imunitrias para o local.

DOENAS INFECCIOSAS EMERGENTES


Patognios emergentes (ex: bola, Leggionella pneumophilia) e reemergente (ex: tuberculose,
difteria, ) incluem novos patognios e alguns que j tinham sido controlados por prticas de
sade pblica. Os factores que levam emergncia desses agentes incluem a capacidade
adaptativa dos microrganismos, o aumento no nmero de viagens e o intenso crescimento de
algumas populaes.

NOTA: No manual so abordados exemplos da resposta imunitria infeco por diversos microrganismos (vrus
influenza, C. diphtheriae, M. tuberculosis, Plasmodium, ). Optei por no integrar os referidos exemplos no resumo,
mas considero que podero ser uma leitura interessante .

131
VACINAS (CAP. XVIII)
IMUNIZAO ACTIVA E PASSIVA
O estado de imunizao pode ser induzido por imunizao activa ou passiva. Em ambos os casos
a imunidade pode ser adquirida por um processo natural (geralmente transferncia da me para
o feto ou infeco prvia) ou por meios artificiais como a injeco de anticorpos ou vacina.
A imunizao passiva pode ser induzida pela transferncia de anticorpos pr-formandos, mas
no se verifica activao do sistema imunitrio no gerada resposta de memria e esta eficaz
por um curto perodo de tempo. Infeco ou vacinao geram longo perodo de imunidade j
que o sistema imunitrio desempenha um papel activo com proliferao das clulas B e T
reactivas ao antignio e formao de clulas de memria.
A vacinao activa no 100% eficaz uma vez que existe uma pequena percentagem dos
indivduos que responde de forma insuficiente e no adequadamente protegida. As crianas
necessitam tipicamente de inoculaes repetidas em intervalos de tempo apropriados para
obter uma imunidade eficaz. Nos primeiros meses de vida, a causa pode ser a persistncia de
anticorpos maternos circulantes.
Os agentes utilizados para a induo da imunidade passiva so anticorpos obtidos de seres
humanos ou animais, enquanto a imunidade activa obtida pela inoculao de patognicos
microbianos que induzem imunidade sem causar doena ou componentes antignicos dos
patognicos.
No passado, antes das vacinas e anticorpos se tornarem disponveis, a imunizao passiva era
a que fornecia a principal defesa contra as doenas infeciosas. Actualmente, existem vrias
condies nas quais a imunizao passiva ainda utilizada:
deficincia na sntese de anticorpo como resultado de anomalia congnita ou adquirida
das clulas B;
indivduo exposto a uma patologia que poder gerar complicaes e no existe tempo
para uma proteco adequada por imunizao activa (p.e. botulismo, ttano, difteria,
hepatite, sarampo e raiva);
infeco por agentes patognios cujos efeitos podem ser neutralizados por anticorpos.
Contudo, existem riscos associados injeco do anticorpo pr-formado: se o anticorpo for
produzido por outra espcie, o receptor pode produzir uma resposta intensa para os
determinantes idiotpicos do anticorpo estranho. Acresce que alguns indivduos produzem IgE
especfico para um anticorpo especfico com induo de desgranulao sistmica enquanto a
produo de IgM ou IgG pode motivar reaces de hipersensibilidade tipo III.

PLANEAMENTO DE VACINAS PARA A IMUNIZAO ACTIVA


A maioria das doenas infeciosas combatida atravs de mecanismos no-especficos da
imunidade inata como sistema do complemento, interferes, clulas NK, fagcitos activados e
compostos antimicrobianos, entre outros.
O sistema imunitrio adaptativo proporciona uma resposta mais flexvel aos agentes
patognicos pelo que a vacinao prepara o sistema imunitrio para lidar rpida e efectiva
contra os patognios no eliminados pela imunidade inata. Contudo, o desenvolvimento de uma
resposta imunitria no implica o alcance de um estado de imunidade protectora: necessrio
o desenvolvimento de memria imunolgica.
O papel das clulas de memria na imunidade dependem, em parte, do perodo de incubao
do patognico: para vrus com curto perodo de incubao (ex: Influenza) a proteco eficaz

133
depende da manuteno de nveis elevados de anticorpos neutralizantes por reimunizaes
repetidas. Um perodo de incubao mais longo (ex: poliovrus) permite que as clulas B de
memria respondam produzindo elevados nveis de anticorpos sricos pelo que a vacina visa
induzir resposta imunolgica.
A vacina comum normalmente aplicada consiste em organismos vivos atenuados, clulas
bacterianas inactivadas ou partculas virais, protenas ou carbohidratos (subunidades)
provenientes do microrganismo.

VACINAS COM ORGANISMOS VIVOS ATENUADOS


Os organismos podem ser atenuados, perdendo a patogenicidade mas mantendo a sua
capacidade de crescimento transitrio num hospedeiro inoculado.
A atenuao pode ser obtida por crescimento da bactria ou vrus durante um perodo
prolongado sob condies de cultura anormal. Este procedimento seleciona os mutantes que
so mais apropriados para o crescimento em condies de cultura anormal e portanto menos
capazes de crescer num hospedeiro normal. Esta tcnica aplicada na vacina BCG contra
Mycobacterium bovis.
As vacinas atenuadas apresentam diversas vantagens - a capacidade de crescimento transitrio,
permitem uma exposio prolongada do sistema imunitrio aos epitopos individuais dos
organismos atenuados com imunogenicidade aumentada e produo de clulas de memria.
Assim, muitas vezes exigem uma nica imunizao, eliminando a necessidade de reforos
repetidos.

134
A capacidade de em muitas vacinas o patognico atenuado se replicar dentro das clulas do
hospedeiro torna estas vacinas particularmente apropriadas para induo de resposta mediada
por clulas.
Como desvantagens contam-se a possibilidade da reverso do agente para a forma virulenta
(ex: vacina Sabin - poliomielite) e o facto de poderem ser associadas a complicaes similares s
observadas na doena natural (ex: sarampo).
Actualmente, as tcnicas de engenharia gentica fornecem tcnicas de atenuar
irreversivelmente os vrus pela remoo selectiva de genes necessrios virulncia.

VACINAS COM ORGANISMOS INACTIVADOS OU MORTOS


Uma das formas comuns de produo de vacinas a inactivao do agente patognico por calor
ou meios qumicos, tornando-o incapaz de se replicar no hospedeiro. essencial manter a
estrutura dos epitopos nos antignios de superfcie durante a inactivao. A inactivao pelo
calor geralmente insatisfatria ao induzir desnaturao proteica com alterao de epitopos de
dependam de estrutura proteica terceria ou quaternria. A inactivao qumica com
formaldedo ou outros agentes alquilantes revelou-se eficaz.
Estas vacinas apresentam algumas desvantagens: requerem geralmente mais do que uma dose
para induzir uma imunidade duradoura e induzem predominantemente uma resposta humoral
revelando-se menos eficazes do que as vacinas atenuadas em induzir uma resposta mediada por
clulas e provocar uma resposta de IgA secretora.
Apesar da segurana ser maior do que a vacina atenuada, serem estveis e de fcil transporte,
a administrao intramuscular torna-as menos atractivas para o uso em campanhas de
imunizao em massa.

VACINAS DE SUBUNIDADE
Alguns riscos associados s vacinas de patognios atenuados ou inactivados podem ser evitados
atravs do recurso a vacinas que possuem macromolculas especficas e purificadas derivadas
de patognios. Trs formas gerais destas vacinas so utilizadas actualmente: exotoxinas
inactivadas, polissacardeos capsulares e antignios recombinantes de superfcie.
As exotoxinas produzidas por algumas bactrias induzem muitos dos sintomas que resultam da
infeco. As vacinas para a difteria e ttano podem ser produzidas pela purificao da exotoxina
bacteriana e inactivao com formaldedo para formar o toxoide. A vacinao com toxoide induz
anticorpos antitoxide capazes de se ligar toxina e neutralizar os seus efeitos. A imunidade
passiva toxina pode ser obtida pela transferncia de soro contendo anticorpos antitoxide.
A virulncia de algumas bactrias depende das propriedades antifagocticas da cpsula de
polissacardeo hidroflica. O revestimento da cpsula com anticorpos e/ou complemento
aumenta muito a capacidade dos neutrfilos e macrfagos fagocitarem os patognios. Esta
tcnica utilizada na produo de vacinas contra Streptococcus pneumoniae e Neisseria
meningitidis.
Algumas subunidades de glicoprotenas virais foram testadas como vacinas com pouco sucesso.
So contudo candidatas para a produo de vacinas contra HIV-1 e HSV.
Acresce que as protenas dos agentes patognicos podem ser produzidos por tcnicas de DNA
recombinante atravs da clonagem e expresso da protena em bactrias, leveduras ou clulas
de mamferos. Primeira vacina aprovada: Hepatite B.

135
Por fim, podem ser identificados os epitopos mais reactivos e criar pptidos sintticos que
mimetizem aqueles epitopos usando-os como vacinas. As vantagens seriam a facilidade de
sntese sobre condies de controlo e completa segurana, contudo os peptdeos no so to
imunognicos como as protenas e difcil obter imunizao celular e humoral ao mesmo
tempo.

VACINAS CONJUGADAS
Uma limitao das vacinas de polissacardeos a sua
incapacidade de activar clulas T helper: activam
clulas B de forma timo-independente tipo 2 com
produo de IgM, mas com pouca troca de classes,
sem afinidade de maturao e com pouco
envolvimento de clulas de memria.
Uma forma de envolver directamente as clulas TH na
resposta a antignios polissacardeos conjuga-los
com protenas carregadoras (vacina Haemophilus
influenzae tipo b). O conjugado toxoide-protena considerado mais imunognico do que o
polissacardeo sozinho, activando clulas TH e possibilitando a troca de classe de IgM para IgG.
Embora este tipo de vacina possa induzir clulas B de
memria, incapaz de induzir clulas T especficas
para o antignio.
Vacinas multivalentes de subunidades com mltiplas
cpias de um dado pptido ou uma mistura de
pptidos conferem imunidade humoral e celular ao
preservar os epitopos imunodominantes para clulas
B e T.
Uma alternativa preparar um complexo matriz
slida + anticorpo-antignio (SMAA) pela ligao de
anticorpos monoclonais a uma matriz antignica
slida e saturao do anticorpo com o antignio
desejado. Estes complexos multivalentes induzem
fortes respostas humorais e celulares e a sua natureza
particulada aumenta a imunogenicidade por facilitar a
fagocitose.
Outra tcnica consiste na utilizao de detergentes
para incorporar antignios proteicos (p.e. protenas
de membrana de patognios) em lipossomas, micelas
ou complexos imunoestimulantes (ISCOMs).

VACINAS DE DNA
DNA de plasmdeo codificando protenas antignicas injectado directamente no msculo do
receptor. O DNA internalizado em clulas musculares e a protena antignica codificada
expressa levando induo da resposta humoral e mediada por clulas. Acresce que o DNA

136
internalizado e expresso pelas clulas musculares hospedeiras e o antignio viral expresso nas
clulas dendrticas presentes na rea injetada.
Apresenta como vantagens a expresso da protena codificada no hospedeiro de forma natural
sem desnaturao ou modificao, a induo de resposta imunitria humoral e mediada por
clulas e a expresso prolongada do antignio com memria imunolgica.

VACINAS DE VECTORES RECOMBINANTES


Genes que codificam grandes antignios de patognios virulentos podem ser introduzidos
dentro de vrus ou bactrias atenuadas que actuam como vector replicando-se dentro do
hospedeiro e expressando o produto gnico do patognico.
Estas vacinas podem ser testadas mais rapidamente, economizando tempo.
Verifica-se ainda que a imunidade efectiva contra um grande nmero de doenas (ex: clera,
gonorreia) depende do aumento da produo de IgA secretora na superfcie das mucosas. A
introduo de genes codificando antignios de organismos patognicos em linhagens
bacterianas da flora comensal induz imunidade na superfcie mucosa.

137
SIDA E OUTRAS IMUNODEFICINCIAS (CAP. XIX)
IMUNODEFICINCIAS PRIMRIAS
Uma imunodeficincia primria resulta de uma
herana gentica ou de um defeito que se
desenvolve no sistema imunitrio.
As consequncias celulares de um defeito
gentico particular dependem do componente
do sistema imunitrio envolvido e a gravidade
do defeito. Defeitos que levem interrupo
precoce do desenvolvimento das clulas
hematopoiticas afectaro todas as clulas que
derivariam delas. Defeitos em clulas mais
diferenciadas tm consequncias que tendem a
ser mais especficas e, normalmente, menos
severas.
Defeitos que afectem componentes dos linfcitos T tendem a ter um impacto geral maior na
resposta imune do que defeitos que afectem s as clulas B ou respostas inatas. Clulas T
disfuncionais levam a, por exemplo, diminuio da expresso de anticorpos, desregulao
da produo de citocinas ou debilitao da citotoxicidade celular. Isto acontece devido
funo essencial que as clulas T tm em direccionar a resposta imunitria e porque vo afectar
as imunidades humoral e mediada por clulas.
Defeitos nas clulas B resultam na diminuio da expresso de uma ou mais classes de
anticorpos e so tipicamente caracterizadas por infeces bacterianas recorrentes. Estes
sintomas so similares queles que tm defeitos nos genes que codificam os componentes do
sistema complemento. Os fagcitos so tambm importantes na remoo de bactrias e fungos
e indivduos que tenham fagcitos disfuncionais sofrem de um aumento da recorrncia de
infeces por estes patgenos.

Imunodeficincias combinadas afectam a imunidade adaptativa


As imunodeficincias combinadas (CID) so caracterizadas pela ausncia ou disfuno severa de
clulas T combinada com alguma disfuno na resposta com anticorpos. Defeitos das clulas T
normalmente afectam a imunidade humoral, porque os linfcitos T helper so necessrios para
uma completa activao dos linfcitos B e consequentemente para a produo e mudana de
classe de anticorpos, e a imunidade mediada por clulas, porque temos uma reduo nas
respostas de hipersensibilidade do tipo retardado e da citotoxicidade celular. Devido a isto,
muito frequente nos doentes com CID um aumento da susceptibilidade a infeces a todo o tipo
de infeces, especialmente vrus, fungos e parasitas.

139
Imunodeficincia combinada severa (SCID)
das formas mais graves de imunodeficincia combinada. Esta resulta de defeitos genticos que
culminam na ausncia quase total ou mesmo total de linfcitos T funcionais. Normalmente estes
defeitos genticos ocorrem ou nas clulas estaminais que do origem linhagem linfide ou nas
clulas iniciais do desenvolvimento dos linfcitos T.
Quatro observaes so frequentemente encontradas em doentes com SCID:
o Deficiente sinalizao das citocinas nos percursores de clulas T;
o Morte prematura das clulas da linhagem linfide devido acumulao de substncias
txicas;

140
o Defeitos nos arranjos V(D)J nos linfcitos em desenvolvimento;
o Defeitos na sinalizao pr-TCR e TCR durante o desenvolvimento;
Dependendo da mutao em causa os doentes com SCID podem ter uma perda apenas nas
clulas T ou ento perda das clulas T e B.
Clinicamente, a SCID caracterizada por um
nmero muito baixo de linfcitos
circulantes e uma falha na montagem de
uma resposta imune mediada pelas clulas
T. Na maioria dos casos o timo no est
completamente desenvolvido. A linhagem
eritride e mielide encontra-se normal.
Os genes normalmente envolvidos a SCID
so o IL2RG, RAG1 e RAG2 e deficincia na
cinase JAK-3.
Outras causas de SCID podero ser:
o Deficincia na deaminase de
adenosina (ADA)
A deaminase de adenosina cataliza a
converso de adenosina ou
desoxiadenosina a inosina ou desoxiinosina,
respectivamente. A deficincia desta
enzima resulta na acumulao intracelular
de metabolitos txicos de adenosina que
interfere com o metabolismo das purinas e
na sntese de DNA, levando morte celular.
o Disgenesia Reticular (RD)
Os estgios iniciais do desenvolvimento das clulas hematopoiticas so bloqueados por
defeitos no gene da adenilato cinase 2 (AK2) favorecendo a apoptose dos percursores linfides
e mielides o que leva uma elevada reduo de leuccitos circulantes.
Defeitos no MHC podem se assemelhar a SCID Sndrome do linfcito nu
A falha na expresso de molculas de MHC pode levar a uma falha geral do sistema imunitrio
que se assemelha com SCID sem ter impacto directo nos linfcitos circulantes. Por exemplo, sem
as molculas de MHC de classe 2, a seleco positiva de linfcitos CD4+ no timo prejudicada e
consequentemente as respostas mediadas por linfcitos T helper.
Mutaes nos genes TAP podem levar no expresso de molculas de MHC de classe 1.
Defeitos no desenvolvimento do timo
Algumas sndromes que afectam as clulas T advm da falha do desenvolvimento do timo. A
sndrome de DiGeorge um exemplo. Esta sndrome resulta de vrias delees numa regio do
cromossoma 22 que apanham um dos genes mais influentes, o TBX1. Este codifica um factor de
transcrio essencial para o desenvolvimento correcto das estruturas da terceira e quarta bolsas
farngeas, o que engloba o timo.
Sndrome de Wiskott-Aldrich (WAS)
O gene WASP codifica a protena WAS necessria para a montagem e reorganizao dos
filamentos de actina nas clulas da linhagem hematopoitica, importante para a formao de
sinapses imunitrias e para a sinalizao intracelular. Mutaes neste gene causam WAS. As

141
manifestaes clnicas mais comuns so eczemas, trombocitopenia, defeitos na imunidade
humoral e na imunidade mediada por clulas e infeces recorrentes.
Sndrome de Hiper IgM
Resulta de uma deficincia no ligando CD40 (CD40L ou CD154) que leva a uma deficiente
comunicao entre as clulas T e as clulas apresentadoras de antignios. As clulas T helper
no expressam o ligando CD40L funcional na sua membrana plasmtica, que normalmente
interage com a molcula CD40 presente na superfcie das clulas B e das clulas dendrticas. Esta
ligao essencial para a activao das clulas apresentadoras de antignios e a ausncia da sua
expresso nas clulas B interfere na mudana de classe de anticorpo, na resposta a antignios
dependentes de clulas T e na produo de clulas de memria. Contudo, as clulas B
respondem a antignios independentes de clulas T como demonstram os nveis normais a
elevados de IgM. Pessoas com esta patologia tm infeces recorrentes, predominantemente
no tracto respiratrio.
Sndrome de Hiper IgE (Sndrome de Job)
Resulta frequentemente da mutao do gene STAT3 que est envolvido na cascata de
sinalizao induzido por IL-6 e TGF-, importante para a diferenciao de linfcitos T helper tipo
17. A sua ausncia leva desregulao da via de desenvolvimento dos linfcitos T helper e pode
ser a razo de sobreproduo de IgE. Doentes com esta sndrome tm nveis baixos de linfcitos
T helper tipo 17 circulantes (importantes na clearance de infeces fngicas e bacterianas
extracelulares) e as clulas naive no so capazes de produzir IL-17 e IL-22 em resposta a
estimulao antignica. Defeitos neste gene levam tambm inibio da sinalizao
desencadeada pela IL-10 e do desenvolvimento de linfcitos T reguladores, da que o seu
nmero seja baixo.

Imunodeficincias que envolvam clulas B exibem uma produo baixa de uma ou


mais classes de anticorpos
Imunodeficincias que envolvam clulas B exibem-se de diversas formas desde a ausncia total
de linfcitos B, plasmcitos e imunoglobulinas at ausncia selectiva de uma classe de
anticorpos. Doentes com destas imunodeficincias sofrem de infeces bacterianas recorrentes
e mostram uma imunidade normal contra a maioria dos vrus e fungos, j que a sua imunidade
mediada pelos linfcitos T no est afectada.
Agamaglobulinemia ligada ao X (X-LA)
A X-LA ou a hipogamaglobuninemia de Brutons caracterizada por uma grande baixa de IgG e
a ausncia das restantes classes de imunoglobulinas. Normalmente no existem clulas B
perifricas e sofrem de infeces bacterianas recorrentes. Esta patologia causada por defeitos
na tirosina cinase de Brutons (Btk) que necessria para a transduo de sinais atravs dos
receptores BCR. Sem esta enzima funcional, no desenvolvimento dos linfcitos B estes ficam na
fase pr-linfcito B com as cadeias pesadas reorganizadas, mas com as cadeias leves na sua
forma germinativa.
Imunodeficincias variveis comuns (CVIDs)
Pessoas com doenas deste grupo tm em comum as infeces recorrentes (especialmente
causadas pelas estirpes bacterianas mais frequentes nas infeces respiratrias) resultantes da
imunodeficincia marcada pela reduo nos nveis de uma ou mais classes de anticorpos e pela
deficiente resposta das clulas B aos antignios.
As causas destas doenas so muito variveis.

142
Deficincia selectiva de IgA
Pessoas com esta deficincia apresentam nveis normais de todas as classes de anticorpos e com
baixa na classe de anticorpos IgA. Os sintomas mais frequentes so infeces do tracto
respiratrio e genitourinrio, locais primrios de secreo de IgA. A causa desta patologia est
relacionada com a incapacidade dos linfcitos B sofrerem uma normal diferenciao em
plasmcitos secretores de IgA.

Disfunes dos componentes da imunidade inata podem ter impacto nas respostas
adaptativas
Muitos dos defeitos do sistema imune inato ocorrem na linhagem mielide ou no sistema
complemento. Muitos destes defeitos resultam num nmero baixo de fagcitos ou num defeitos
na fagocitose que so manifestados por infeces recorrentes. A fagocitose pode falhar em
vrias fases incluindo na motilidade dos fagcitos, a aderncia destes aos microorganismos ou
na morte intracelular por macrfagos.
Deficincia da adeso leucocitria (LAD)
Uma deficincia relacionada com a disfuno das molculas de adeso tem origem num defeito
localizado nas cadeias comuns e afecta a expresso das trs molculas que usam esta cadeia
(CD11a ou LFA-1; CD11b ou Mac-1; CD11c ou gp150/95). Esta deficincia leva ao aumento da
susceptibilidade a infeces bacterianas e a vrias fngicas, j que o recrutamento de leuccitos
aos locais de inflamao est comprometido. A imunidade vrica tambm afectada dado a uma
deficiente interaco entre clulas B e T.
Doena granulomatosa crnica (CGD)
Esta doena tem impacto na fagocitose e tem duas formas distintas, uma ligada ao X e uma
autossmica recessiva. Este grupo de doenas tem origem num defeito na via oxidativa do
fosfato dinucletido adenina nicotinamida (NADPH) (ausncia ou defeitos na protena
fagossoma oxidase (phox)) pela qual os fagcitos geram radicais superxido e outros compostos
reactivos que matam patgenos fagocitados. Estes doentes sofrem de infeces bacterianas e
fngicas recorrentes e uma resposta inflamatria excessiva que leva formao de granulomas
(pequena massa de tecido inflamado).
Sndrome de Chediak-Higashi (CHS)
Esta sndrome caracterizada por infeces bacterianas recorrentes e defeitos na coagulao,
pigmentao e funo neurolgica. Os sinais que caracterizam esta sndrome so a baixa de
neutrfilos e um comprometimento das clulas T, NK e granulcitos. Esta sndrome tem origem
numa mutao do gene regulador de trfico lisossomal (LYST) que causa defeitos na protena
LYST que importante para o transporte de protenas para os lisossomas e para controlar o seu
tamanho, funo e movimento.

Deficincias do sistema complemento so relativamente comuns


Estas imunodeficincias podem se manifestar de variadssimas formas dependendo do
componente do sistema complemento que est afectado. A maioria das deficincias esto
associadas a um aumento da susceptibilidade a infeces bacterianas e/ou a doenas causadas
por imunocomplexos.

143
Imunodeficincias que levem disfuno da regulao imunitria podem
manifestar-se como doenas auto-imunes
Poliendocrinopatia auto-imune e distrofia ectodrmica
Resulta da mutao do gene regulador AIRE que expressa a protena AIRE. Esta protena
expressa nas clulas epiteliais tmicas, onde actua como um factor de transcrio que controla
a expresso de todos os antignios restritos a tecidos do hospedeiro facilitando a seleco
negativa. Uma reduo dos nveis desta protena leva a uma reduo dos nveis dos antignios
especficos dos tecidos nas clulas epiteliais tmicas permitindo que clulas T autoreactivas
escapem e vo para a periferia.
Pacientes com esta patologia tm uma inibio da funo endcrina, dada a autoreactividade
de linfcitos T aos rgos endcrinos, e candidase crnica. Autoanticorpos tambm podem ser
observados.
Sndrome da Desregulao imunitria, Poliendocrinopatia e Enteropatia ligada ao X
(IPEX)
Doentes com IPEX tm uma mutao no gene FoxP3 que expressa a protena foxP3 que controla
o desenvolvimento e funo de linfcitos T reguladores que destroem as clulas T que forem
autoreactivas. A falta de expresso desta protena leva ausncia dos linfcitos T reguladores
permitindo a passagem de linfcitos T autoreactivos para a periferia levando a uma doena auto-
imune sistmica que leva destruio da bexiga, pncreas, tiride e pele.

Imunodeficincias so tratadas por terapia de reposio


Apesar de no haver cura para estas patologias existem alguns tratamentos possveis. Estes
tratamentos incluem-se em trs grupos:
Reposio de uma protena em falta;
Reposio de um tipo celular ou linhagem;
Reposio de em gene defeituoso ou em falta;
Estas reposies podem ser feitas atravs da ingesto ou via intravenosa, utilizao de
clones, transplantao de medula ssea ou terapia gnica.

IMUNODEFICINCIAS SECUNDRIAS
Estas imunodeficincias tm vrias causas possveis desde a infeces virais como o vrus HIV
como o tratamento por medicamentos, doenas metablicas ou m nutrio. Os sintomas mais
frequentes incluem aumentos da susceptibilidade a agentes infecciosos comuns e, por vezes,
algumas infeces oportunistas. Tudo depende do grau de imunossupresso e os factores de
susceptibilidade inerentes ao hospedeiro.

Hipogamaglobulinemia
Doentes com esta patologia manifestam infeces recorrentes e normalmente surge em adultos
jovens que tm nveis muito baixos de imunoglobulina total com normal funo e nmero dos
linfcitos T. Geralmente tratada com terapia de reposio de imunoglobulinas.

Imunodeficincia induzida por agentes


Resulta de uma exposio de agentes ambientais que induzem um estado de imunodeficincia.
Pode resultar de drogas imunossupressoras usadas no combate a doenas auto-imunes, drogas
citotxicas ou radioterapia dado a doentes com cancro.
Idades extremas (muito novo/muito velho) tambm so factores que induzem uma
imunodeficincia secundria fisiolgica. Nos bebs, pois os sistemas de imunidade inata e

144
adquirida necessitam de mais algum tempo de maturao. Nos idosos, j que a imunidade
mediada por clulas est geralmente mais diminuda e a variabilidade do reportrio de clulas
B diminui.
Outras causas comuns de imunodeficincia secundria so a m nutrio que afecta a
imunidade inata e adquirida:
o Hipoproteinmia est associada depresso no nmero e funo das clulas T;
o Insuficincia nos micronutrientes (zinco e vitamina C, por exemplo) contribui para uma
imunodeficincia geral e um aumento da susceptibilidade de infeces oportunsticas;
o Deficincia de vitamina D est ligada inibio da abilidade dos macrfagos agirem
contra patgenos intracelulares

HIV / AIDS
O Vrus da Imunodeficincia Humana Adquirida (HIV-1) o causador do Sndrome de
Imunodeficincia Adquirida (AIDS). Foi descoberto em 1981, em doentes com infeces
oportunistas raras e com uma grande diminuio dos nveis de linfcitos CD4. Desde a sua
descoberta, a incidncia tem vindo a aumentar de forma epidmica, atingindo os 35,3 milhes
de infectados e 36 milhes de mortos no final de 2012 (WHO). Inicialmente afectava sobretudo
homens, mas a incidncia no sexo feminino est a aumentar drasticamente.
A transmisso do HIV feita por trs tipos de vias principais, sobretudo atravs da transmisso
de clulas infectadas com o HIV; estes mecanismos no esto ainda totalmente conhecidos
o Contacto sexual: por ordem decrescente de probabilidade de transmisso, sexo anal,
sexo vaginal (75% de todas as inoculaes), contacto dos fluidos sexuais com a mucosa
oral;
o Sangue infectado;
o De me para filho: atravs do sangue no parto ou do leite na amamentao.

Caractersticas bsicas do vrus HIV-1


O HIV um retrovrus, tendo a informao gentica na forma de RNA que convertida pela
Transcriptase Reversa em DNA. O DNA integra-se no genoma celular e expresso. Quando os
viries montados no citoplasma saem da clula provocam lise celular, incorporam parte da
membrana do hospedeiro formando o seu invlucro lipdico, onde se localizam as protenas de
adeso e invaso.
O HIV praticamente restrito a humanos, devido especificidade dos receptores celulares e
dependncia de factores essenciais sua replicao. As protenas de membrana do HIV
interagem fortemente com os receptores CD4, sendo as clulas com este receptor as infectadas
pelo vrus. Assim, o HIV infecta predominantemente linfcitos T helper, moncitos e
macrfagos.

Ciclo de replicao viral


1. Adeso: ligao do gp120 ao CD4 da clula alvo;
2. Fuso do invlucro viral com a membrana plasmtica mediada pela ligao da gp41
do vrus ao receptor de quimiocinas CXCR4 dos linfcitos T ou ao CCR5 dos moncitos.
O aumento de algumas quimiocinas pr-inflamatrias aumenta a expresso de CXCR4,
susceptibilizando a clula ao vrus, enquanto outras vo competir com o vrus pela
ligao a este receptor, diminuindo a susceptibilidade ao vrus.
3. Retrotranscrio do RNA do vrus em cDNA graas TR viral. Incorporao do pr-vrus
(DNA) no genoma pela integrasse viral.

145
4. Expresso do DNA viral (factores de transcrio necessrios) e maturao das protenas
virais por clivagem no citoplasma.
5. Libertao das muitas partculas virais, com lise celular.
Frequentemente, os gp120 expressos na membrana plasmtica de uma clula infectada vo
interagir com os CD4s de clulas adjacentes. Isto e a co interaco com outras protenas provoca
a fuso das duas membranas, provocando a formao de sinccios, que constituem grandes
massas multinucleadas. Os vrus HIV podem assim ser classificados em:
o Indutores de sinccios infectam sobretudo Linfcitos T helper;
o No indutores de sinccios infectam sobretudo macrfagos e moncitos.
Tambm se pode classificar de forma equivalente o HIV pela sua afinidade para os receptores
CXCR4 e CCR5.

146
Evoluo da infeco de HIV a AIDS
1. Evento de infeco inicial e captura
por clulas dendrticas;
2. Clulas dendrticas transportam vrus
at rgos linfides e apresentam-no
a linfcitos T helper;
3. O vrus e as clulas dendrticas
activam os linfcitos T, que se podem
ento tornar hospedeiros do HIV. O
tempo de semi-vida de linfcitos
infectados ser de apenas 1,5 dias,
dificultando a sua identificao;
4. O HIV infecta rapidamente as
grandes populaes de linfcitos T
CD4 nos rgos linfides, a virmia
aumenta e a contagem linfcitria
diminui fase aguda;
5. Incio da resposta imunitria, muito
forte e envolvendo linfcitos
citotxicos (resposta celular) e
anticorpos anti-HIV (resposta
humoral). Esta resposta estabiliza a
diminuio populao CD4 e a
virmia cai seroconverso;
6. A infeco entra na sua fase crnica, com uma durao de anos, em que o
sistema imunitrio limita parcialmente a progresso da infeco. No entanto,
de destacar que embora a virmia permanea baixa, a multiplicao activa do
vrus nos rgos linfides continua e vai acelerando ao longo da fase crnica,
como demonstram os nveis de linfcitos CD4. Os grficos indicam ainda que
possvel prever o prognstico da doena e a durao da fase crnica
(maioritariamente assintomtica) pela medio destes 2 indicadores.
7. Sndrome da Imunodeficincia Adquirida, caracterizada por alteraes
profundas na resposta imunitria, caracterizadas pela tabela 19-4;
8. Infeces oportunistas que iro causar a morte do organismo hospedeiro.

147
Diagnstico
O diagnstico da infeco de HIV tem essencialmente duas vertentes: o diagnstico serolgico,
que pode ser feito aps a fase de seroconverso, uma vez que detecta a presena de anti-corpos
HIV pelo mtodo ELISA, e o diagnstico clnico, que divide o estgio da doena nas categorias
A, B e C, listadas na tabela 20-3. Estas categorias tm em conta o tipo e quantidade de infeces
oportunistas e a contagem de clulas T

Tratamento
O tratamento farmacolgico do HIV diverso e permite hoje em dia travar a progresso da
doena e melhorar a quantidade e qualidade de vida, apesar dos seus extensos efeitos
secundrios. Os frmacos mais utilizados incluem
o Inibidores da Transcriptase reversa - anlogos nucleosdicos e no nucleosdicos;
o Inibidores da protease;
o Inibidores da fuso.

148
Desenvolvimento de uma vacina
Esto em desenvolvimento vrias vacinas que procuram imunizar contra o HIV, mas as
caractersticas do vrus dificultam esta tarefa por vrios motivos, nomeadamente
o Elevada taxa de mutao do vrus;
o Dificuldade em criar uma forma atenuada do vrus que mantenha a antigenicidade;
o Dificuldade em proteger contra a transmisso pelo trato genitlal;
o Ausncia de modelos animais adequados;
o Escassez de casos de recuperao natural de doentes, essenciais para o
desenvolvimento de outras vacinas.

149
TOLERNCIA E AUTO-IMUNIDADE (CAP. XX)
TOLERNCIA
Um linfcito diz-se tolerante a um a antignio quando no desencadeia uma resposta imunitria
perante a sua apresentao.
Os antignios capazes de induzir tolerncia em linfcitos so designados tolergenos, por
oposio aos antignios que desencadeiam resposta imunitria, que se dizem Imungenos. No
entanto, a resposta ou no-resposta que um antignio induz depende:
Do Ag: natureza e concentrao (maiores doses de Ag induzem tolerncia);
Da especificidade do linfcito;
Da forma de apresentao e do microambiente: presena de co-estimuladores e
adjuvantes resposta imunitria (p.e. citosinas inflamatrias), forma de apresentao e
porta de entrada no organismo.
Os mecanismos de tolerncia protegem-nos assim de linfcitos auto-reactivos, e dividem-se em
dois grandes grupos:
Tolerncia central deleco selectiva de clones T e B imaturos que reagem com alta
afinidade contra antignios prprios, i.e., que so especficos para antignios do
organismo. Ocorre nos rgos linfides primrios (medula ssea para Linfcitos-B e timo
para T). Este processo no elimina todos os linfcitos auto-reactivos, porque (1) nem
todos os antignios prprios so apresentados nos rgos primrios e (2) linfcitos com
afinidade fraca para Ags self completam o seu processo de maturao, podendo dar-
lhes futuramente uma resposta imunitria em determinadas condies e ambientes.
Tolerncia perifrica inactivao (induo de anergia) ou deleco de linfcitos que
reagem com antignios prprios aps maturao. caracterstica dos linfcitos T, uma
vez que os linfcitos B, mesmo reconhecendo um antignio prprio, no produzem
resposta na ausncia de estmulo por parte das clulas Thelper. Mecanismos de
tolerncia perifrica incluem:
o Supresso: inactivao de clulas T por clulas T reguladoras, com afinidade
mdia para auto-antignios. Regulada por citosinas, como IL-10 e TGF-Beta;
o Inibio: inactivao de clulas T por ligao ao CD80 da APC (antigen-
presenting cell) atravs do CD152 e no do CD28 como na resposta imunitria
normal;
o Deleco: deleco do linfcito T por ligao clula APC atravs do Fas/Faz-
ligando, indutora da apoptose;
o Ignorncia imunolgica: no apresentao de alguns antignios s clulas T, que
assim no conseguem produzir qualquer resposta. Muito importante no
organismo, sendo as barreiras hemato-enceflica e a hemato-testicular algumas
das mais importantes barreiras que permitem a ignorncia imunolgica de
antignios self.

151
AUTO-IMUNIDADE
Resposta inadequada do sistema imunitrio contra antignios prprios. Caracteriza-se pela falha
dos sistemas de tolerncia, conduzindo a uma resposta aberrante a um antignio ou a alteraes
da seleco e maturao linfocitria. Pode estar, ou no, associada a imunodeficincia.
As doenas auto-imunes podem classificar-se em rgo-Especficas Sistmicas, consoante a
localizao do antignio alvo est restrita a um local ou generalizada no organismo.

Mecanismos propostos para a auto-imunidade


A sequncia de eventos que conduz doena auto-imune muito variada e no ainda clara.
Sabe-se que que na base das doenas auto-imunes esto contribuies genticas (por exemplo,
ao nvel dos genes do HLA e do sistema do complemento) assim como factores ambientais. A
incidncia de modo geral maior nas mulheres de idade frtil, devido ao efeito estimulador dos
estrognios sobre o Sistema Imunitrio.
Alguns dos triggers ambientais mais comuns para a doena auto-imune so: (1) a exposio
de linfcitos a antignios dos quais esto normalmente isolados por barreiras, i.e., falha da
Ignorncia Imunolgica e (2) mimetismo molecular de antignios humanos por parte de vrus ou
outros micrbios, e (3) expresso inapropriada de molculas de MHC II em clulas no-
apresentadoras de antignios.
Os mecanismos de activao e mobilizao do Sistema Imunitrio contra os antignios Self
que caracterizam a doena auto-imune so essencialmente trs, e iniciam-se quase sempre com
a apresentao de antignios pelas clulas APC aos linfcitos T CD4 (T helper). Uma vez
activadas, estas podem:
Activar macrfagos, produzindo uma reaco inflamatria contra as clulas com o Ag;
Activar clulas T citotxicas, produzindo dano celular directo;
Activar Linfcitos B, que vo produzir auto-anticorpos contra o Ag self.

152
Doenas auto-imunes rgo-especficas
Envolve manifestaes associadas ao dano ou disfuno de um rgo-especfico. Este dano pode
ser directo, por ligao de linfcitos ou anticorpos a antignios de membrana e consequente lise
da clula, ou indirecto, por ligao de anticorpos a receptores e estimulao consequente de
uma funo celular indevida ou do crescimento celular exacerbado. Aqui ficam alguns exemplos
destas doenas.
A Diabetes Mellitus Insulino-dependente caracteriza-se pelo ataque auto-imune s
clulas Beta-pancretticas e sua destruio. Esta mediada inicialmente pelas clulas T
citotxicas, que vo libertar citosinas e activar macrfagos, responsveis pela destruio
celular. Os auto-anticorpos produzidos por linfcitos B auto-reactivos activados vo
facilitar tambm fenmenos de lise celular mediada pelo complemento. Tudo isto
resulta num dfice permanente de insulina;
A Sndrome de GoodPasture caracteriza-se pela presena de auto-anticorpos anti-
membrana basal que se ligam e acumulam no glomrulo renal e nos alvolos
pulmonares. Estes levam activao do complemento e consequente dano celular,
provocando uma reaco inflamatria que ir provocar hemorragias e danos
pulmonares e renais permanentes, provocando a morte em meses;
A Doena de Graves no , ao contrrio das anteriores, provocada por dano celular
directo por parte do S.I.. Caracteriza-se pela produo de auto-anticorpos que se ligam
ao receptor de TSH das clulas tiroideias e estimulam a produo de hormonas
tiroideias. Esta sobreestimulao da tiride leva ao hipertiroidismo.

153
Doenas auto-imunes sistmicas
Nas doenas auto-imunes sistmicas, a resposta direccionada contra antignios presentes
num elevado nmero de tecidos e rgos, reflectindo geralmente um defeito subjacente da
regulao imune que resulta em linfcitos B e T hper-reactivos. Aqui ficam alguns exemplos
destas doenas, de mecanismos variados e subtis.
O Lpus Eritematoso Sistmico caracteriza-se por um aumento da actividade
linfocitria e, paralelamente, a um dfice na limpeza de resduos celulares apoptticos;
isto leva exposio de antignios intra-celulares e sobretudo nucleares, normalmente
protegidos pela ignorncia imunolgica. A apresentao por clulas APC a Linfcitos T
helper leva activao de Linfcitos B e produo de uma panplia de auto-anticorpos
especfico, que vo levar deposio de imunocomplexos nos vasos e destruio
celular mediada pelo complemento. Isto provoca vasculite, glomerulonefrite, erupes
cutneas e ocluso dos vasos que resulta em dano tecidual
generalizado;
A Artrite Reumatide uma doena auto-imune comum que se caracteriza pela
produo de um grupo de auto-anticorpos factores reumatides que podem activar
a cascata do sistema do complemento e provocar inflamao crnica das articulaes e
sintomas cardiovasculares e hematolgicos.

Tratamento das doenas auto-imunes


As terapias actuais centram-se no combate aos sintomas, mas podem frequentemente incluir
plasmaferese e imunossupressores. A administrao oral do antignio pode aumentar a
tolerncia a este. Os antagonistas do TNF-alfa tm mostrado bons resultados no controlo da
artrite reumatide, psorase e doena de Crohn.

154
IMUNOLOGIA DA TRANSPLANTAO (CAP. XXI)
Transplantao (em imunologia): acto de transferir clulas, tecidos ou rgos de um local para
outro, entre dador e receptor.
A transplantao surge da ideia de que implantar um tecido saudvel (enxerto) de um indivduo
(dador) em um outro que dele necessite (receptor) a cura. Isto s foi possvel com o
desenvolvimento da cirurgia, mas tem vrios problemas, nomeadamente ao nvel da falta de
rgos para transplante. Os problemas relacionados com a imunologia so tambm muito
srios, fazendo com que o conhecimento dos mecanismos envolvidos esteja na base do sucesso
desta prtica. Esses mecanismos esto envolvidos no s na proteco do ataque por agentes
estranhos, como tambm na rejeio dos enxertos provenientes de um qualquer dador que no
seja geneticamente idntico ao receptor.
O primeiro transplante com sucesso em humanos, realizado em Boston em 1954, foi um
transplante de rim entre irmos gmeos monozigticos. Actualmente fazem-se transplantes de
rim, pncreas, corao, pulmo, fgado, medula ssea e crnea, alguns entre indivduos no-
idnticos e com taxas crescentes de sucesso. Grande parte deste sucesso deve-se aos
imunossupressores, frmacos e anticorpos especficos que ajudam a prolongar a vida do
enxerto; tm no entanto uma aco imunossupressora deletria quando usados a longo prazo.
Novos mtodos incluem a induo de tolerncia ao enxerto sem causar a imunossupresso de
outras respostas do indivduo, aumentando a eficcia do transplante sem comprometer o SI do
receptor.

BASES IMUNOLGICAS DA REJEIO DE ENXERTOS


Tipos de enxertos:
Autlogo/Autoenxerto provm do indivduo que o recebe, transplante de uma para
outra parte do corpo.
Singnico/Isoenxerto transferncia entre indivduos geneticamente idnticos (p. ex.
gmeos monozigticos)
Alognico/Aloenxerto entre indivduos geneticamente diferentes, mas pertencentes
mesma espcie.
Xenognico/Xenoenxerto entre indivduos de espcies diferentes. Como existe
grande escassez de rgos para transplante, a criao de animais para doao de
rgos comea a ser uma hiptese a considerar.
Os autoenxertos e isoenxertos costumam ter sucesso junto do receptor, devido proximidade
gentica; os aloenxertos facilmente so reconhecidos como estranhos e rejeitados pelo sistema
imunitrio; os xenoenxertos tm ainda menor semelhana gentica, o que causa uma rejeio
ainda mais rpida e exacerbada.

A rejeio de Aloenxertos tem ESPECIFICIDADE e MEMRIA


Cada tecido tem uma taxa de rejeio de aloenxertos essa rejeio mais rpida na pele que
em outros tecidos, como o rim ou corao. Apesar disso, a rejeio apresenta sempre
especificidade e memria (exemplo):
1. Transplante de enxerto tipo A em rato tipo B REJEIO PRIMRIA revascularizao
da rea, infiltrao de linfcitos, moncitos, neutrfilos, (dias 3-7); da
vascularizao (dias 7-10); necrose (dia 10); rejeio completa (dias 12-14).

155
2. MEMRIA novo transplante do mesmo tipo de tecido provoca rejeio mais rpida (5-
7 dias) REJEIO SECUNDRIA.
ESPECIFICIDADE se um enxerto tipo C for transplantado ao mesmo tempo que o A
(pela segunda vez), a rejeio ser secundria para o A e primria para o C a rejeio
apresenta especificidade de tecido.

Linfcitos T: Papel central na rejeio de Aloenxertos


Sabe-se que so os linfcitos T, no os anticorpos e linfcitos B, que esto implicados na rejeio
de enxertos. Apenas os linfcitos T e no os anticorpos podem transferir a imunidade a
aloenxertos, ou seja, so os linfcitos T os responsveis pela memria e especificidade.
Tanto as subpopulaes TCD4+ como as CD8+ esto envolvidas no processo. Os linfcitos T CD8+
parecem estar menos implicados (a sua remoo no afecta a sobrevivncia do enxerto) que os
CD4+ (a sua remoo prolonga o tempo de sobrevivncia do enxerto antes da rejeio); se os
linfcitos CD4+ e CD8+ forem removidos, o tempo de sobrevivncia do enxerto aumenta muito.
A presena de ambas as subpopulaes, CD4+ e CD8+, resulta numa rejeio mais rpida.

HISTOCOMPATIBILIDADE: semelhana antignica entre tecidos no leva a rejeio. (


histoincompatibilidade h induo da resposta imunitria e rejeio). Antignios implicados
MHC (Complexo major de histocompatibilidade).
Os genes do MHC so herdados dos progenitores em bloco, constituindo hapltipos. Existe
histocompatibilidade se o receptor partilhar pelo menos um hapltipo com o dador e se no
tiverem qualquer hapltipo diferente. Ou seja, mesmo que o receptor seja heterozigtico,
poder aceitar transplantes de outro indivduo que seja homozigtico para todos os loci do

156
hapltipo partilhado situao que no acontece devido elevada quantidade de
polimorfismos nestes genes. Assim, a semelhana entre pai e filho ser de apenas 50%, uma vez
que o outro hapltipo (herdado da me pelo filho) difere entre eles; entre 2 irmos ser de
apenas 25%.
Maiores reaces de rejeio Associadas a incompatibilidade de grupo sanguneo e de

antignios HLA (MHC). Assim, vrias tcnicas so usadas para analisar possveis
correspondncias compatveis dador-receptor.
Primeiro, testa-se a compatibilidade ABO; estes Ag so expressos nas hemcias, clulas
endoteliais e epiteliais. Os anticorpos do receptor, ao contactarem com Ag incompatveis deste
tipo, provocam lise mediada por anticorpos e pelo complemento nas clulas do dador.
Em segundo lugar, a caracterizao do HLA dos dadores
potenciais e do receptor pode fazer-se por teste de
microcitotoxicidade. (Neste teste, clulas de ambos os
indivduos so colocadas em vrios poos, e so
acrescentados Ac anti-molculas de alelos especficos do
MHC I e do MHC II nos diferentes poos. Depois de incubar,
adicionam-se protenas do complemento e a cititoxicidade
medida pela colorao ou no das clulas por azul-trip
ou eosina (viabilidade celular). Se uma clula possuir a
molcula do alelo contra a qual actua o Ac, ocorre lise e a
clula invivel cora. Assim, podem analisar-se os diferentes
alelos dos indivduos).
O transplante pode ser bem-sucedido sem compatibilidade
HLA completa (que extremamente difcil de encontrar, s
entre gmeos monozigticos Singnicos). usada uma
MLR (mixed lymphocyte reaction) para quantificar o grau
de compatibilidade entre indivduos. Os linfcitos do dador
foram irradiados por rX ou tratados com mitomicina C e
servem como clulas de ESTIMULAO. Os linfcitos do receptor so clulas de resposta.
A proliferao dos linf. T do receptor, o que indica activao T, medida pela ligao de timidina
radioactiva para o DNA:
Maior diferena no MHC II entre dador e receptor maior ligao de timidina
radioactiva no MLR.
activao indica sobrevivncia do enxerto.

157
A compatibilidade dos Ag do MHC II mais
importante que a dos MHC I, que revela maiores
efeitos se houver incompatibilidade dos MHC II.
Transplantes de rim e medula ssea exigem
compatibilidade HLA mais rigorosa que os
transplantes de fgado e corao.

KIR killer-inhibitory receptors, na superfcie das


clulas NK, parece estar envolvido na rejeio; se
nenhum antignio MHC I do dador for
reconhecido pelos KIR, a clula destruda. Os
efeitos nos transplantes de rgos slidos so
menores que no transplante de medula ssea.

A compatibilidade MHC no critrio para o


sucesso do transplante mesmo com Ags MHC
idnticos, incompatibilidades dos Antignios
Minor de Histocomp. (MICA, antignios menos
imunognicos presentes no HLA) podem levar
rejeio. O MHC reconhecido directamente
pelos linf. Th e Tc (alorreactividade); no entanto,
os Ag minor de histocomp. so reconhecidos
apenas quando apresentados no contexto de molculas MHC-self. A resposta de rejeio criada
por estes Ag menor mas pode resultar na destruio do enxerto, criando a necessidade de
alguma imunossupresso mesmo em transplantes entre indivduos HLA compatveis.
Antes da Transplantao: estudar compatibilidade AB0, HLA/MHC, cross-match dador-receptor,
pesquisa de sensibilizao prvia, determinao do hapltipo (para transplante de medula).

A rejeio de enxertos mediada por clulas ocorre em duas fases: Sensibilizao e


Efectora
A rejeio causada, em primeiro lugar, por imunidade mediada por clulas em resposta a
aloantignios (molculas MHC) nas clulas do enxerto. Esto implicadas tanto reaces de
hipersensibilidade tipo IV como de citotoxicidade mediada por clulas. Pode ser dividida em
duas fases:
Fase de Sensibilizao (via aferente) os linfcitos do receptor reconhecem e reagem
contra os antignios do dador; sensibilizao de Linf. T nave;
Fase Efectora (via eferente) destruio, por mecanismos imunolgicos, do enxerto.
Fase de Sensibilizao: Os linfcitos CD4+ e CD8+ reconhecem (directamente) os aloantignios
e proliferam em resposta. H envolvimento dos antignios dos complexos de
histocompatibilidade major e minor. Quanto ao minor, a resposta fraca, mas a combinao de
todas as respostas a Ag minor pode ser consideravelmente forte. A resposta a antignios MHC
implica o reconhecimento da molcula MHC do dador e do ligando peptdico presente na fenda
da molcula MHC (tipo I) do dador, peptdeo que provm de protenas sintetizadas com a clula
alognica. No caso dos peptdeos na fenda da molcula MHC tipo II, provm geralmente de
protenas processadas pela via de endocitose da APC (Antigen-presenting cell) alognica.

158
Uma clula Th do receptor fica activada quando interage com uma APC que expressa
simultaneamente o complexo antignio-molcula MHC e envia o sinal co-estimulatrio.
Diferentes clulas funcionam como APC, em diferentes tecidos. As clulas dendrticas existem
na maioria dos tecidos e expressam altos nveis de MHC II superfcie; so, por isso, as APC mais
frequentes nos enxertos. As APC do hospedeiro podem tambm migrar para o enxerto e
endocitar aloantignios (do MHC e minor) e apresent-los com molculas MHC-self.

Estimulao imunitria - Em alguns rgos e enxertos (p. ex. rim, timo, ilhus pancreticos)
existe evidncia de que uma populao de APC do dador passenger leukocytes migra do
enxerto para os ndulos linfticos regionais. Estes passenger leukocytes so clulas
dendrticas, com nveis de MHC II e Normais de MHC I superfcie. So clulas disseminadas
por todos os tecidos de mamferos excepto o crebro; h evidncias de que, como expressam
os Ag MHC do dador, so reconhecidos como non self e induzem resposta, activando linf. T do
ndulo para onde migram; podem tambm induzir tolerncia aos seus Ag de superfcie por
deleco, no timo, dos linf. T com receptores especficos para eles. CONCLUSO: h indcios
de que exposio prvia a clulas do dador pode induzir tolerncia, o que de algum modo
confirmado com resultados que mostram aumento da tolerncia ao enxerto em transplantados
sujeitos, previamente, a uma transfuso de sangue do dador).

(No entanto, de salientar que a exposio prvia a Ag histoincompatveis do dador


desencadeia a sensibilizao, o que no segundo contacto leva a rejeio secundria, mais rpida
e eficaz).

Os passenger leukocytes (clulas dendrticas) no so as nicas clulas envolvidas na


estimulao imunitria, alm de que no actuam em enxertos de pele. As clulas de Langerhans
e as clulas endoteliais, ambas com expresso de MHC I e II, esto tambm envolvidas no
processo.
O reconhecimento de aloantignios nas clulas do enxerto induz uma grande proliferao de
linf. T no receptor, principalmente Th (CD4+) os linf Th tm assim um papel central na fase
efectora da rejeio. Os linfcitos T reconhecem directamente os Ag do MHC II e os peptdeos
expressos superfcie das APC do dador, as APC do dador so reconhecidas SEM
PROCESSAMENTO resposta mais rpida.
Portanto, esto envolvidos na sensibilizao:
Molculas HLA/MHC classe I e II do dador (reconhecimento directo) e do receptor
(apresentao de outras molculas);
Protenas e peptdeos do dador;
APC do dador (reconhecidas directamente) e do receptor (apresentao de outras
molculas); clulas parenquimatosas do enxerto activao dos linf. T nave;
Linf. T do receptor (CD4 e CD8) (sensibilizao, activao e passagem para a fase
seguinte).
Fase Efectora: ocorre por vrios mecanismos:
Mais frequente a resposta mediada por clulas, nomeadamente Hipersensibilidade
tipo IV (retardada, celular) e citotoxicidade mediada por CTL (cytotoxic T lymphocyte,
CD8+).

159
Menos frequente a lise por anticorpos e sistema complemento e a ADCC
citotoxicidade mediada por clulas e anticorpos.
Existe grande infiltrao de linfcitos T e macrfagos para o enxerto, semelhante
histologicamente observada em reaces de hipersensibilidade retardada (tipo IV DTH,
delayed type hypersensitive response). Na DTH as citocinas produzidas pelos linf. T promovem
a infiltrao de macrfagos. O reconhecimento de Ag do MHC I pelas TCD8+ do receptor leva a
citotoxicidade mediada por CTL. (Por vezes, algumas TCD4+ que funcionam como clulas
citotxicas restritas ao MHC II medeiam a rejeio tambm). Em cada um destes mecanismos,
as citocinas libertadas pelos linf. T tm um papel central IL-2, IFN- e TNF-, particularmente.
IL-2 proliferao T; criao de CTL efectoras;
IFN- desenvolvimento da DTH; infiltrao de macrfagos para o enxerto e activao
em clulas mais destrutivas;
TNF- efeito citotxico directo nas clulas do enxerto.
Vrias citocinas promovem a rejeio levam expresso de MHC I ou MHC II em vrios tipos
de clulas do enxerto:
IFN-, , ; TNF-, MHC I superfcie celular.
IFN- MHC I e II superfcie celular.
Durante a rejeio os nveis destas citocinas
P. ex, antes da reaco apenas as clulas dendrticas expressam MHC II nos transplantes
cardacos de rato, enquanto aps a libertao de IFN- os micitos e clulas endoteliais
passam a expressar tambm, marcando-as para ataque por CTL.

Manifestaes Clnicas da
rejeio (imunolgica! )
O tempo em que a rejeio
ocorre depende do tipo de
tecido ou rgo em causa e
da reaco que ocorre.
Hiperaguda nas 24
h aps transplante;
Aguda comea nas
primeiras semanas
aps transplante;
Crnica ocorre
meses a anos aps
transplante.
Anticorpos pr-existentes no
receptor Rejeio
hiperaguda: em situaes
pontuais, um transplante
rejeitado to rpido que o
enxerto no chega a criar
vascularizao. Isto ocorre pela presena de Acs no soro do receptor, especficos contra os Ags
do enxerto. Os complexos Ag-Ac formados activam o sistema do complemento, levando

160
infiltrao de neutrfilos no enxerto. Esta reaco inflamatria leva formao de cogulos nos
capilares, evitando a vascularizao do enxerto.
H vrios mecanismos para a formao destes anticorpos pr-existentes contra os Ag MHC
alognicos receptores de transfuses sanguneas repetidas, p. ex, tm no soro quantidades
significativas de anticorpos contra os Ag MHC nos leuccitos do sangue transfundido. Se o MHC
do enxerto for igual ao das clulas sanguneas, os Ac reconhecem e atacam mais rapidamente o
tecido estranho; mulheres com mltiplas gestaes esto expostas a clulas fetais, com Ag
paternos, produzindo Ac contra eles; indivduos que receberam um primeiro transplante e
recebem de novo, do mesmo dador ou de outro semelhante, tm tambm uma sensibilizao
prvia.
Por vezes, os Ac pr-existentes so especficos para os Ag sanguneos do enxerto; assim,
necessria a caracterizao do grupo sanguneo e do tecido antes do transplante, evitando
enxertos que resultariam em rejeio hiperaguda. Para evitar esta reaco inesperada faz-se o
Cross-Match dador-receptor, pesquisando Ac pr-formados. (Os Xenotransplantes so
frequentemente rejeitados por este mecanismo).
Alm da rejeio hiperaguda mediada por Ac pr-existentes, h a accelerated rejection, levada
a cabo por Ac produzidos imediatamente aps o transplante.
Rejeio Aguda mediada por respostas dos linfcitos T: comea cerca de 10 dias aps
transplante; infiltrao massiva de linfcitos e macrfagos no local de destruio activao Th
e proliferao. Efectuada pelos mecanismos descritos anteriormente.
Rejeio Crnica ocorre meses a anos aps o transplante: surge depois de uma rejeio aguda
diminuir de intensidade; efectuada por mecanismos humorais e celulares. Enquanto o uso de
imunossupressores aumenta bastante a sobrevivncia a curto prazo do enxerto (at ao primeiro
ano), pouco ou nada faz com a sobrevivncia a longo prazo no previne a rejeio crnica. Este
tipo de rejeio no prevenido com imunossupressores e pode levar necessidade de outro
transplante a longo prazo.

Terapia Imunossupressora (No Geral)


Transplantes alognicos normalmente requerem imunossupresso. A imunossupresso no
especifica para os antignios do enxerto, causando uma susceptibilidade sistmica
(particularmente dos tecidos e rgos de maior risco) a infeces e descontrolo da proliferao
celular. Alguns destes frmacos causam diminuio da proliferao de linfcitos activados. No
entanto algumas clulas de diviso rpida, no pertencentes ao SI (p. ex. clulas do epitlio do
tubo digestivo ou clulas hematopoiticas da medula ssea), podem ser tambm afectadas,
levando a complicaes mais ou menos graves. Os indivduos sujeitos a esta terapia tm risco
aumentado de cancro, hipertenso e problemas no metabolismo sseo.
Inibidores mitticos diminuem proliferao T: por exemplo a azatioprina (dada antes
do transplante, essencialmente), que diminui a proliferao T por inibio, na fase S do
ciclo celular, de um passo da formao de bases purnicas; diminui a proliferao B
tambm; ciclofosfamida, um agente alquilante que se insere na dupla cadeia de DNA,
forma ligaes cruzadas e leva disrupo muito activa contra clulas de diviso
rpida e dada na altura do transplante; metotrexatoactua como antagonista do c.
Flico, inibindo a sntese de purinas.

161
o A inibio mittica no especfica, actua em vrias clulas de diviso rpida,
logo estes frmacos podem levar a diminuio ou impedimento da maturao
de outras clulas.
Corticosterides suprimem inflamao: por exemplo a prednisona e a dexametasona,
potentes anti-inflamatrios, actuam em vrios nveis da resposta imunitria; so dados
com inibidores mitticos para diminuir episdios de rejeio aguda.
Metabolitos fngicos como imunossupressores: Ciclosporina A; FK506 (tacrolimus);
Rapamicina ligam-se os trs a protenas imunofilinas no citoplasma, inibem a via da
calcineurina e NFAT. A Ciclosporina A e FK506 bloqueiam a activao de linf. T inibindo
a transcrio dos genes da IL-2 e os receptores IL-2 de alta afinidade (que so
essencialmente activadores); a Rapamicina inibe a proliferao e diferenciao de linf.
Th activados, na fase G1. Pela inibio dos linf. Th e suas citocinas, todos estes
metabolitos reduzem a activao de clulas efectoras como as Tc, NK, macrfagos e linf.
B. So potentes imunossupressores, com alguns efeitos secundrios, como a toxicidade
para o rim; a FK506 e Rapamicina so mais potentes, logo podem administrar-se em
doses menores, com menor risco.
A Irradiao dos tecidos linfides elimina os linfcitos: porque os linfcitos tm uma
extrema sensibilidade aos raios-x, a irradiao por raios-x pode ser usada para eliminar
os linf. do receptor antes do transplante. O timo, bao e gnglios linfticos so irradiados
por raios-x, destruindo os linfcitos; o transplante feito neste estado de
imunossupresso; como a medula ssea no irradiada, produz linfcitos para repor as
populaes estes linfcitos parecem ser mais tolerantes para os Ag do dador.

TERAPIA IMUNOSSUPRESSORA ESPECFICA pretende evitar a imunossupresso (mais ou


menos) generalizada do receptor e diminuir o risco de infeco, uma vez que os outros mtodos
de imunossupresso so inespecficos. A imunossupresso especfica consistir em criar um
imunossupressor especfico de antignio, que reduza a resposta contra esse aloantignio sem
alterar a capacidade do receptor para responder a outros antignios. No foi conseguida ainda
em humanos, mas j em experimentao animal, usando Ac ou ligandos solveis reactivos com
molculas de superfcie.
Anticorpos Monoclonais podem ser usados para retirar do receptor uma populao celular ou
para bloquear sinais co-estimulatrios, induzindo anergia nos linf. T que reconhecem os Ag.
Ainda no usada como terapia especfica em humanos, mas a estratgia passa por atacar a
CD3 (todos os linf. T) ou o receptor IL-2 de alta afinidade (portanto, todos os linfcitos T
activados, anti-TAC) ou a CD25 (linf. Treg). Os Ac Monoclonais so usados tambm para tratar o
tecido a transplantar, evitando GVHD1. Os Ac mais eficazes para depleco de clulas so os que

1
GVHD Graft versus host disease a rejeio do enxerto sobre o receptor, ou seja, as
clulas do tecido transplantado rejeitam o receptor. Tem grande frequncia nos transplantes de
medula ssea, em que o receptor est imunodeprimido (irradiao total) e no consegue fazer
qualquer reaco, mas continua a possuir antignios contra os quais o dador reage. Caracteriza-
se por activao das cl. T do dador, produo de citocinas, reaces inflamatrias da pele, sist.
GI, fgado. As complicaes incluem hemorragia GI, falncia heptica. A preveno passa por

162
activam o complemento. Podem criar-se Ac contra bastantes molculas (de adeso, citocinas,
) mas, muitas vezes, preciso administrar Ac contra todas as molculas de funo redundante
(com a mesma funo), como as molculas de adeso; por outro lado, a maior parte do Ac
monoclonais so provenientes de ratos, levando sua eliminao no humano.
Induo da Anergia por bloqueio de sinais co-estimuladores O bloqueio do receptor B7 por
CTLA-4Ig solvel (livre) permite BLOQUEAR a co-estimulao, induzindo ANERGIA nos linf. T
direccionados contra o enxerto; o uso de Ac monoclonais contra o CD40L tem o mesmo efeito;
a combinao de ambos, um efeito mais prolongado ainda. Estes mecanismos, em modelos
experimentais, aumentam a sobrevivncia do enxerto a longo termo, sem comprometer a
eficcia das outras subpopulaes de linf. T.

TOLERNCIA IMUNITRIA A ALOENXERTOS


H circunstncias em que o aloenxerto aceite sem a necessidade de imunossupresso:
Quando o tecido no tem aloAg (ex. cartilagem e vlvulas cardacas);
Quando o local que recebe o enxerto est livre de vigilncia imunitria (ex. crnea);
Quando a tolerncia imunitria foi biologicamente induzida, normalmente por
exposio prvia s clulas do dador (sem a reaco de sensibilizao).
Alguns locais aceitam incompatibilidade antignica quando o local de destino do enxerto
no tem linfticos nem vasos, no ocorre contacto dos Ag com linfcitos, no h sensibilizao
e, portanto, no h resposta. So exemplos a cmara anterior do olho, a crnea, o tero,
testculo, crebro. H indcios de que o timo pode ser um destes locais tambm. Assim, foi
lanada uma nova rea de investigao transplantar clulas (ex. ilhus de Langerhans) para
locais livres de vigilncia imunitria, obtendo a sua funo sem o risco de rejeio.
Exposio precoce a aloantignios pode induzir tolerncia especfica partindo da noo de
que a tolerncia surge da exposio precoce aos Ag, h indcios de que a exposio neonatal a
Ag non-self pode induzir essa mesma tolerncia, por meios naturais. O mesmo acontece para
clulas com um locus HLA incompatvel entre me e filho, se houver contacto das clulas
maternas e fetais no desenvolvimento o contacto estimula a tolerncia se a incompatibilidade

eliminar total ou parcialmente as cl. T do dador no enxerto, criando uma GVHD atenuada, que
pode ser benfica para o sucesso do transplante.

163
for baixa; o problema ser que esta passagem pela placenta na gestao rara e, portanto, a
tolerncia a alelos maternos no herdados ocorre apenas esporadicamente.
Mecanismos de tolerncia:
Deleco clonal (diminuio do nmero de linfcitos);
Anergia clonal (ex. CTLA-4Ig);
Desvio da resposta imune (Th1 vs Th2) ou predomnio de citocinas supressoras;
Clulas Treg se Th fosse polarizado para Treg, haveria mais tolerncia.

TRANSPLANTAO CLNICA
O transplante de tecidos ou rgos o melhor ou at nico tratamento para algumas
patologias;
Os rgos mais transplantados so, por ordem decrescente, o rim, medula ssea,
fgado, corao, pulmo, pncreas; por vezes, transplantes simultneos (ex. corao e
pulmo).
O maior problema da transplantao bem-sucedida est relacionado com a terapia
imunossupressora: aumenta a sobrevivncia do rgo a curto prazo mas vulnerabiliza
o doente a longo prazo e no evita a rejeio crnica;
A rejeio crnica uma grande causa de fracasso a longo prazo do transplante, uma
vez que o doente passa a necessitar de um novo rgo passados alguns anos do
transplante, aumentando a procura por rgos compatveis, tendo ainda a
desvantagem de estarem muitas vezes j sensibilizados; alm disso, enquanto para
alguns transplantes (rim) possvel prolongar o tempo de espera (dilise), para outros
(ex. corao) no possvel.

XENOTRANSPLANTAO se for conseguida uma xenotransplantao eficaz, poder ser o fim


da escassez de rgos para transplante. No entanto, apesar de algumas tentativas com rgos
de primatas e de porco, nenhuma foi eficaz at ao momento. A reaco de rejeio
hiperaguda. Alm disto, poder ser uma forma de transmisso de zoonoses, principalmente
entre espcies filogeneticamente prximas.

164
CANCRO E SISTEMA IMUNITRIO (CAP. XXII)
TRANSFORMAO MALIGNA DAS CLULAS
Alteraes do DNA pode induzir transformao maligna de clulas
A transformao maligna de clulas pode ser induzida por vrias substncias qumicas e radiao
ionizante. Todas esto ligadas a mutaes no DNA e so no seu todo designadas por
carcinogneos. A infeco por alguns vrus, nomeadamente aqueles que integram os seus genes
no DNA do hospedeiro, necessitando de provocar a ruptura do DNA, podem tambm levar
transformao celular.
Graas a uma variedade de mecanismos de reparao de DNA presente nas clulas, a exposio
a carcinogneos nem sempre leva a cancro. Uma confluncia de vrios factores deve ocorrer
antes que suficientes alteraes do DNA induzam a clula a malignizar-se.
A descoberta dos oncogenes mudou a forma de compreenso da induo de cancro
Proto-oncogenes so genes cuja sua
expresso normal essencial para o
controlo da produo de protenas que
promovem o crescimento celular. A
ocorrncia de mutaes ou rearranjos
genticos induzidos por carcinognicos ou
vrus podem alterar a sua normal funo
reguladora, convertendo-os em indutores
de cancro, os oncogenes.

Genes associados ao cancro


controlam a proliferao e
sobrevivncia celular
Os tecidos normais mantm a homeostasia
atravs de processos altamente regulados
de proliferao celular equilibrados com
morte celular. Os genes envolvidos nestes
processos homeostticos produzem
protenas que encorajam e
desencorajam a proliferao e sobrevivncia celular. Mutaes nestes genes esto presentes
numa grande maioria dos cancros.
Genes celulares que esto associados com a formao de cancro agrupam-se em trs categorias
baseadas na sua actividade: (1) oncogenes, (2) genes supressores tumorais e (3) genes
envolvidos na programao da morte celular ou apoptose.
Vrias caractersticas existem na transio de uma clula normal para uma celular maligna. Estas
incluem proliferao sustentada, subverso a sinais negativos vindos de reguladores do
crescimento celular e resistncia morte celular (controlados respectivamente por oncogenes,
genes supressores tumorais e genes reguladores da apoptose. Outras caractersticas so a
imortalidade, o crescimento de novos vasos e o potencial para invadir tecidos. Factores que
potenciam o desenvolvimento destas caractersticas so a inflamao e a instabilidade gentica.
A actividade promotora de cancro dos oncogenes
Uma categoria de proto-oncogenes e os seus homlogos virais codificam factores de
crescimento ou os seus receptores. Em clulas normais, a expresso de factores de

165
crescimento e os seus receptores cuidadosamente regulada. Normalmente, uma
populao de clulas secretam factores de crescimento que actuam noutra populao
de clulas que tm o respectivo receptor. A expresso inapropriada de receptor ou de
factor de crescimento pode resultar em proliferao incontrolada.
Outros proto-oncogenes codificam factores de transcrio ou molculas que participam
na transduo de sinal. Uma expresso exagerada pode levar a uma proliferao
incontrolada.
Genes supressores tumorais
Os genes supressores tumorais (ou anti-oncogenes) codificam protenas que inibem a
proliferao celular excessiva. A libertao desta inibio pode levar ocorrncia de
cancro. Ao contrrio dos oncogenes que uma mutao num dos alelos suficiente para
induzir cancro, os genes supressores tumorais necessitam de mutao nos dois alelos
para isso poder acontecer.
A importncia dos genes apoptticos
Os genes apoptticos codificam protenas que induzem ou bloqueiam a apoptose.
Genes pro-apoptticos actuam como supressores tumorais inibindo a sobrevivncia
celular e genes anti-apoptticos actuam como oncogenes promovendo a sobrevivncia
celular. Uma falha nos primeiros genes ou uma actividade exagerada dos segundos pode
levar transformao neoplsica das clulas.

A malignizao de uma clula envolve mltiplas etapas


O desenvolvimento de uma clula cancergena a partir de uma clula normal normalmente um
processo que envolve mltiplas etapas que envolve uma serie de mutaes somticas no DNA
da clula. O nmero destas mutaes vo convertendo progressivamente uma clula normal em
clula pr-cancergena e, finalmente, numa clula cancergena onde as barreiras desenhadas
para conter o crescimento celular foram transpostas.
Existem duas fases distintas: a iniciao e a promoo. A primeira envolve mudanas no genoma
mas que por si s no levam a clula a malignizar-se. Como o acumular de alteraes no DNA,
afectando tipicamente os proto-oncogenes, genes supressores tumorais e genes apoptticos, a
clula entra na segunda fase, levando ao crescimento celular descontrolado.
Num tumor em crescimento nem todas as clulas tm igual potencial de crescimento ilimitado.
As clulas no interior do tumor podem ser o verdadeiro estimulador do crescimento tumoral.
Estas clulas, designadas por clulas estaminais cancergenas, tm um verdadeiro potencial
ilimitado de regenerao e so os maiores produtores das restantes clulas do tumor que
partilham o potencial para se dividirem sem limitaes.

ANTIGNIOS TUMORAIS
As clulas neoplsicas so clulas do hospedeiro e muitos dos antignios associados tm como
objectivo induzir a tolerncia mantendo a homeostasia e inibindo o desenvolvimento de auto-
imunidade. Contudo, antignios nicos ou inapropriadamente expressos podem ser
encontrados em muitos tumores e so frequentemente encontrados pelo sistema imunitrio.
A maioria dos antignios tumorais do origem a peptdeos que so reconhecidos pelo sistema
imunitrio seguido de apresentao pelas molculas do complexo major de
histocompatibilidade, induzindo a proliferao de linfcitos T citotxicos especficos para aquele
antignio ou de clulas T helper. Os antignios tumorais reconhecidos pelas clulas T
enquadram-se, para j, em quatro grupos baseados na sua fonte:

166
Antignios codificados por genes exclusivamente codificados pelo tumor;
Antignios codificados por variantes de genes normais que se alteraram por mutaes;
Antignios normalmente expressos s numa certa fase do desenvolvimento;
Antignios que so sob expressados num tumor em particular.
Existem dois tipos principais de antignios tumorais categorizados pela sua singularidade: os
antignios tumorais especficos (tumor-specific antigens - TSAs) e os antignios associados a
tumores (tumor-associated antigens TAAs).

Os antignios tumorais especficos so exclusivos de clulas tumorais


Os TSAs so protenas nicas que resultam de mutaes nas clulas tumorais que criam
protenas alteradas e, desta forma, novos antignios. O processamento citoslico dessas
protenas d origem a novos peptdeos que so apresentados pelas molculas de MHC de classe
1 induzindo uma resposta mediada por clulas por linfcitos T citotxicos especficos que
normalmente elimina todas as clulas tumorais.
Tumores induzidos por vrus expressam antignios tumorais partilhados por todas as clulas
tumorais induzidas pelo mesmo vrus.

Os antignios associados a tumores so protenas celulares normais com um padro


de expresso caracterstico
Ao contrrio das TSAs,
as TAAs no so
nicos no cancro. Eles
representam
protenas celulares
normais que so
expressas
tipicamente durante
uma certa fase do
desenvolvimento,
mas que esto
expressas nas clulas
tumorais. Esta
expresso deriva de
mutaes que levaram reactivao de certos genes fetais ou embriolgicos, os chamados
antignios tumorais oncofetais, que normalmente aparecem cedo no desenvolvimento
embrionrio antes que o sistema imunitrio adquira imunocompetncia. Quando a
transformao celular causa o seu aparecimento em clulas neoplsicas do adulto, elas so
reconhecidas como non-self e induzem uma resposta imunolgica.
Os TAAs incluem tambm os produtos de alguns oncogenes. Estas protenas, embora produzidas
no adulto, so altamente reguladas e expressas em quantidades muito reduzidas. Uma clula
tumoral pode alterar a expresso destas protenas para quantidades mais elevadas levando
induo de uma resposta imunitria.

A RESPOSTA IMUNITRIA AO CANCRO


As clulas tm mltiplos mecanismos intrnsecos para prevenir o aparecimento de cancro.
Contudo. Se estes mecanismos falharem, mecanismos de controlo extrnsecos podem eliminar

167
a clula. Estes mecanismos extrnsecos envolvem sinais ambientais que induzam a clula a
activar vias internas que levem paragem do seu crescimento ou apoptose para prevenir que
as clulas cancergenas se propaguem. Se estes mecanismos mesmo assim no forem suficientes
e o crescimento descontrolado do tumor continuar, a identificao e rejeio das clulas
tumorais por componentes do sistema imunitrio podem ajudar a manter a homeostasia.
Existem trs mecanismos pelos quais o sistema imunitrio controla as clulas tumorais:
Atravs da destruio de vrus que so conhecidos por transformarem as clulas;
Atravs da eliminao de patgenos e reduzir a inflamao pro-tumoral;
Atravs da identificao activa e eliminao de clulas cancergenas imunovigilncia.
Estudos recentes mostram que as respostas do sistema imunitrio s clulas tumorais tm
potencial pro-tumoral. Inflamao crnica e seleco mediada pelo sistema imunitrio de
clulas malignas podem contribuir para a sobrevivncia e progresso de um cancro.
Imunoedio o termo que engloba os processos de inibio e promoo tumoral mediados
pelo sistema imunitrio.

A imunoedio protege-nos contra o crescimento tumoral e ao mesmo tempo que


promove-o
A hiptese de imunoedio envolve trs fases:
Eliminao O sistema imunitrio tem uma funo crucial na identificao e destruio
de todas as novas formas de cancro que surgem;
Equilbrio estado de equilbrio entre a destruio e sobrevivncia de um pequeno
nmero de clulas neoplsicas;
Fuga clulas tumorais muito agressivas e pouco imunognicas prosperam e comeam
a propagar-se.

A via imunolgica chave que medeia a erradicao tumoral


Existem duas formas de inflamao na resposta ao cancro, a boa ou anti-tumoral e a m ou pro-
tumoral. No lado anti-tumoral esto as respostas inatas dominadas por macrfagos
imunoactivadores (M1), as clulas dendrticas e as clulas natural killer. Estas clulas e as
citocinas que produzem ajudam na obteno de respostas fortes de linfcitos T helper tipo 1 e
linfcitos T citotxicos, que esto associados a um bom prognstico e regresso tumoral. No
lado pro-tumoral esto respostas inatas dominadas por macrfagos anti-inflamatrios (M2) e
clulas supressoras derivadas da linha mielide. Estas vo induzir fortes respostas de linfcitos
T helper tipo 2 ou 17 que esto associados a um mau prognstico e a tempos de sobrevivncia
reduzidos.
Inibidores inatos de cancro
As clulas natural killer foram as primeiras clulas reconhecidas com habilidade de destruir
clulas tumorais. Os mecanismos que a clula NK usa para o reconhecimento incluem uma
srie de receptores de membrana que respondem a um balano entre sinais inibitrios e
activadores dados pelas clulas do hospedeiro.

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Detectar clulas missing self uma das maneiras atravs da qual as clulas NK
participam na identificao e erradicao de clulas tumorais. Outra forma a
transmisso de sinais atravs da expresso molecular que leva ao aumento de expresso
de receptores activadores de clulas NK.
Indirectamente, as clulas NK podem tambm participar na erradicao de cancro
atravs da secreo de IFN-, uma potente citocina anticancro que estimula as clulas
dendrticas a estimular fortes respostas por linfcitos T citotxicos.
Macrfagos activados tambm tm uma importante funo na resposta imunitria a
tumores. Estes fazem aglomerados volta de tumores e a presena de macrfagos pr-
inflamatrios, como os M1, esto correlacionados com a regresso tumoral. Os
macrfagos tambm expressam receptores Fc que lhes permitem ligar a anticorpos
ligados s clulas tumorais intervindo, desta forma, na citotoxicidade mediada por
clulas dependente de anticorpos. A actividade anti-tumoral de macrfagos activados
provavelmente mediada por enzimas lticas e intermedirios de espcies reactivas de

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oxignio e azoto. Estes secretam uma citocina designada por factor de necrose tumoral
(TNF-) que tem uma potente actividade anti-tumoral.
Tipos de clulas adaptativas envolvidas na erradicao de cancro
A actividade mais forte dos linfcitos T citotxicos anti-tumorais est correlacionada
com a regresso tumoral e importante na manuteno da fase de equilbrio da
deteco do cancro ou de um estado de dormncia das clulas neoplsicas.
Na fase de equilbrio as clulas T citotxicas ou o INF- tm uma importncia extrema
para impedir o desenvolvimento de cancro ao contrrio das clulas NK que so mais
importantes na fase de eliminao. A presso que o sistema imunitrio adaptativo
exerce nas clulas cancergenas durante esta fase permite que elas sofram uma espcie
de seleco natural em que as clulas neoplsicas menos imunognicas vo sobreviver
e vo acumulando mutaes mais favorveis evaso imunolgica.
As clulas B tambm respondem a antignios tumorais especficos ao criarem
anticorpos anti-tumorais que promovam o reconhecimento e lise de clulas tumorais.
Usando os seus receptores Fc, as clulas NK e macrfagos podem participar na resposta
imunitria a tumores mediando a citotoxicidade mediada por clulas dependente de
anticorpos. Alguns anticorpos anti-tumorais tm uma aco mais prejudicial ao
bloquearem o acesso dos linfcitos T citotxicos aos antignios tumorais permitindo a
sobrevivncia das clulas cancergenas.
A importncia das citocinas na imunidade contra o cancro
IFN- e os componentes reguladores desta via so importantes na erradicao de
cancros. Esta citocina pode exercer efeitos anti-tumorais directos nas clulas tumorais,
incluindo um aumento da expresso de molculas do MHC de classe 1, tornam as clulas
tumorais em alvos melhores para os linfcitos T citotxicos. Os interferes do tipo I (/)
e tipo II () tm uma actividade de potenciao sobre as clulas do sistema imunitrio
permitindo que estas clulas se tornem mais eficientes na remoo de tumores.
IL-12 tm a habilidade de potenciar a imunidade anti-tumoral. Isto acontece pois a IL-12
influencia as clulas dendrticas a activar fortes respostas por parte dos linfcitos T
helper tipo 1 e linfcitos T citotxicos.
TNF- induz hemorragia e necrose do tumor. Contudo, esta citocina tem efeitos
inibitrios e de promoo tumoral.

Algumas respostas inflamatrias podem promover o desenvolvimento de cancro


A actividade descontrolada do sistema imunitrio pode levar a inflamao patolgica ou a auto-
imunidade. Na resposta imunitria ao cancro, a resposta inflamatria tanto pode ajudar na
eliminao de clulas tumorais como pode potenciar o seu desenvolvimento ao criar
microambientes pro-tumorais.
Inflamao crnica
A inflamao crnica pode criar microambientes pro-tumorais de vrias formas:
o As respostas inflamatrias aumentam os sinais de stress celular e podem levar a
stress genotxico, aumentando a frequncia de ocorrncia de mutaes
fomentando a gnese tumoral;
o Os factores de crescimento e citocinas libertadas por leuccitos induzem a
proliferao celular e, decorrente de mutaes, as clulas tumorais no

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imunognicas podem adquirir habilidade de responder a estes estimuladores do
crescimento;
o A inflamao pro-angiognica, aumentando o crescimento de vasos sanguneos
e potenciando a invaso tumoral nos tecidos circundantes ou o transporte atravs
de vasos linfticos;
A actividade imunossupressora nos microambientes tumorais
Factores solveis libertados por clulas tumorais ou clulas do sistema imunitrio que
se infiltram no tumor podem potenciar o desenvolvimento local de um microambiente
imunossupressor. TGF- e IDO inibem as respostas por parte dos linfcitos T helper de
tipo 1 e nas fases mais avanadas o TGF- bloqueia a activao local de clulas
dendrticas e inibe a funo das clulas T. IL-10 promotora de tumores e induz
propriedades que tornam as clulas tumorais tolerantes, mas tambm pode encorajar
a resposta anti-tumoral por parte do sistema imunitrio inato.
A abundncia de linfcitos T reguladores, de clulas supressoras derivadas da linha
mielide, macrfagos M2 e linfcitos T helper tipo 2 permite que haja um estado de
imunossupresso local ou dirigida aos linfcitos T helper do tipo 2 permitindo a evaso
das clulas tumorais.

Algumas clulas tumorais escapam ao reconhecimento e activao do sistema


imunitrio
A expresso de MHC nas clulas tumorais est reduzida
Mutaes que levem reduo da expresso de MHC, secreo de TSAs, ao transporte
defeituoso associado apresentao antignica ou microglobulina-2 e
insensibilidade ao
INF- levam
diminuio da
apresentao de
antignios
tumorais pelas
molculas do MHC
de classe 1 e a
uma profunda
inibio do
reconhecimento
por parte dos
linfcitos T
citotxicos.
A subverso das clulas tumorais aos sinais apoptticos
A elevada regulao dos mediadores anti-apoptticos e a expresso de receptores de
morte celular mutados ou meus ausentes pode levar a que as clulas tumorais fiquem
resistentes aos sinais de morte celular programada. Uma falha nos mecanismos de
reparao do DNA nas clulas transformadas combinado com a presso mediada pelo
sistema imunitrio potencia a acumulao de clulas tumorais com este tipo de
mutaes.

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As clulas tumorais tm fracos sinais coestimulatrios
Uma completa activao de um linfcito T requer dois sinais: um sinal activador, dado
pelo reconhecimento de um complexo peptdio-molcula do MHC por um TCR, e um
sinal coestimulatrio, dado pela interaco entre CD80/86 numa clula apresentadora
de antignios com molculas coestimulatrias, como a CD28, num linfcito T. Os dois
sinais so necessrios para induzir a produo de IL-2 e a proliferao de linfcitos T.
As clulas tumorais tm muito pouca imunogenicidade e tendem a terem muito poucas
molculas coestimulatrias. Sem um nmero suficiente de clulas apresentadores de
antignios na vizinhana de um tumor e com poucos estmulos para levar sua
activao, as poucas clulas T que responderem recebem apenas parte dos sinais
activadores, levando tolerncia imunitria.

IMUNOTERAPIA CONTRA O CANCRO


A terapia contra o cancro divide-se em 4 categorias:
Quimioterapia bloqueia a sntese de DNA e a diviso celular;
Terapia hormonal interfere com o crescimento do tumor;
Terapia dirigida pequenas molculas inibidoras do cancro;
Imunoterapias esto desenhadas para ajudar a eliminar o tumor reactivando,
iniciando ou suplementando a resposta imunitria anti-tumoral ou por neutralizando as vias
inibitrias.

Dentro das imunoterapias podemos incluir:


Anticorpos monoclonais podem ser conjugados com agentes que aumentem a sua
eficcia;
Citocinas Interferes-, -, -, TNF-, -, GM-CSF e muitas interleucinas (IL-2, IL-4, IL-
6 e IL-12);
Activao de clulas T ex-vivo As clulas T so recolhidas do doente com cancro, so
activadas com antignios tumorais e reintroduzidos no doente para que possam ter actividade
anti-tumoral;
Vacinas potenciam ou redirigem uma resposta imunitria existente;
Manipulao de sinais coestimulatrios
Estudos indicam que a combinao de quimioterapia citotxica com algumas imunoterapias
pode ser benfica no sentido em que o primeiro ao matar as clulas faz com que antignios
tumorais possam ser libertados potenciando, com a ajuda da imunoterapia, a resposta
imunitria contra esses antignios.

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