Clulas cloro en peces telesteos

Flores Quintana, C.

Instituto de Ictiologa del Nordeste, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNNE, Sargento Cabral 2139, Corrientes
(3400), Argentina. Email: carolina@vet.unne.edu.ar.

Resumen
Flores Quintana, C.: Clulas cloro en peces telesteos. Rev. vet. 20: 1, 5760, 2009. Las
clulas cloro estn vinculadas a la captacin y excrecin de iones monovalentes, fundamen-
talmente Na y Cl. La adaptacin a diferentes salinidades implica procesos rpidos o lentos de
sntesis y destruccin de componentes moleculares que constituyen sistemas de transporte
que van acompaados por cambios celulares morfolgicos e hiperplsicos. La variabilidad
morfolgica de las clulas cloro determin la clasificacin en diferentes subtipos cuyo predo-
minio depende de las caractersticas del ambiente.

Palabras clave: pez, clulas cloro, morfologa, respuesta osmtica, sitios de transporte.

Abstract
Flores Quintana, C.: Chloride cells in teleosts fish. Rev. vet. 20: 1, 5760, 2009. The chlo-
ride cells are related to the uptake and excretion of monovalent ions. The adaptation to dif-
ferent salinities involves a quick or slow process of synthesis and destruction of molecular
components which form the transport system, accompanied with morphological and hyper-
plastic cellular changes. The morphological variability of the chloride cells has defined the
classification of different subtypes, which predominance depends on the environments char-
acteristics.

Keys words: fish, chloride cells, morphology, osmotic answer, transport sites.

INTRODUCCIN rinos presentan osmolaridad inferior al agua de mar, lo

Los peces son vertebrados acuticos distribuidos
en compleja taxonoma. Los tres grandes grupos exis-
tentes (Agnatha, Condrichthyes y Actinopterygii) usan
las branquias como sitio primario de respiracin acu-
tica. La gran mayora de ellos viven en ambientes con
concentraciones de iones diferentes al de su medio in-
terno, de manera que controlan la osmolaridad interna
y determinados valores inicos a travs de mecanismos
de osmorregulacin y regulacin inica que implican
mantener una determinada cantidad de agua y una
apropiada concentracin de solutos.
Los telesteos constituyen un gran grupo de peces
con esqueleto seo, donde se ubica la mayora de los
peces comunes y donde estn las formas ms evolucio-
nadas. Los de agua dulce tienen fluidos hiperosmticos
con respecto al ambiente y los problemas por intercam-
bios osmticos obligatorios son hinchamiento por en-
trada de agua y prdida de sal hacia el medio. El orga-
nismo del pez trabaja en la produccin de una orina di-
luida para eliminar el exceso de agua e incorpora iones
monovalentes contra gradiente desde el medio externo
diluido a travs de las branquias 20 . Los telesteos ma-
cual le acarrea dos problemas fundamentales: ganancia
pasiva de iones y prdida osmtica de agua 15 por lo que
poseen mecanismos osmorreguladores especializados
en la incorporacin de agua y en la excrecin activa
de sales que involucran estructuras localizadas en epi-
telio gastrointestinal, branquias y rin. El proceso de
regulacin de iones plasmticos puede ser muy rpido
o lento, segn envuelva mecanismos ya existentes o a
travs de procesos de diferenciacin 17 .
Si bien existe marcada diferencia anatmica entre
grupos de peces, los componentes celulares son seme-
jantes. Entre las numerosas funciones que desempean
las branquias, su papel en la osmorregulacin reviste
vital importancia 1, 4 . La complejidad funcional de las
branquias se refleja en su complejidad morfolgica, en-
contrndose al menos seis o siete tipos celulares dife-
rentes, entre ellos las clulas cloro. En principio se con-
sider que el complejo epitelio branquial tena origen
endodrmico, posteriormente fue propuesto el origen
ectodrmico y ms recientemente se reporta el origen
mixto. Se considera que las clulas cloro, por estar aso-
ciadas al estrato ms superficial del epitelio branquial
derivan del ectodermo.

Recibido: 10 marzo 2009 / Aceptado: 12 mayo 2009

58 Flores Quintana, C. et al.: Citologa en peces. Rev. vet. 20: 1, 5760, 2009

CLULAS CLORO lio branquial de telesteos de agua dulce, sugirindose

cambios en relacin directa con la entrada de diversos
Las clulas cloro o clulas ricas en mitocondrias re- iones como Na, Cl y Ca 18 , en relacin a la posicin 24
cuerdan a las secretoras de cido clorhdrico en el est- as como en la regulacin cidobase 12, 19 .
mago 24 . Estudios morfolgicos y citoqumicos sugieren Estn netamente polarizadas, con membranas
su funcin en estrecha asociacin con la entrada de io- apical y basolateral morfolgicamente diferentes. La
nes. El trmino de clulas cloro fue, por mucho tiempo, superficie lateral presenta complejos de unin y des-
restricto a peces marinos porque no existan evidencias mosomas con las epiteliales adyacentes y la membrana
de participacin en el transporte inico en peces de apical hace protrusin sobre las clulas pavimentosas
agua dulce y se describieron como clulas rudimenta- y presenta microvellosidades o microondulaciones en
rias 26 . Existe el consenso general que son numerosas y peces de agua dulce 24 . Muestran grandes mitocon-
secretan iones en peces marinos, en tanto que en peces drias, extenso sistema tubular membranoso, pequeo
de agua dulce absorben iones y son escasas. Sin embar- REL, pocos ribosomas libres y cuerpos multivesicu-
go, en situaciones de estrs osmtico pueden proliferar lares, todas caractersticas ultraestructurales de clu-
y ocupar el epitelio branquial laminar 20 . las envueltas en el transporte inico. La formacin de
Estn presentes en branquias, tegumento, pseudo- complejos multicelulares sugiere el camino paracelular
branquias y sistema olfativo 1, 11, 20 . En embriones y larvas de secrecin de Na. La presencia de uniones celulares
se detectaron en el epitelio del saco vitelino y el cuerpo, posibilita el contacto del retculo con el medio externo.
siendo consideradas sitios de regulacin inica durante Las clulas cloro de los telesteos de agua dulce son
la fase ontognica, en ausencia de branquias funciona- ms pequeas, menos columnares, tienen menos pro-
les 10 . Las primeras clulas cloro aparecen a pocas horas nunciado el sistema tubular y la va paracelular para el
de la fertilizacin y poco despus de la eclosin ya son Na est ausente.
totalmente funcionales. En ese momento la regulacin Durante el crecimiento se detectan cambios estruc-
principal pasa por las branquias, sugiriendo que en el turales que consisten en notorio aumento de mitocon-
inicio del desarrollo las branquias privilegian la funcin drias, oscurecimiento paulatino del citoplasma, anasto-
de osmorregulacin a la respiratoria. Modelos experi- mosis complejas del sistema tubular relacionado 11 y a
mentales in vitro, demuestran mecanismos autnomos su vez, aumento de Na K ATPasa. En la transferencia a
de diferenciacin celular, independientes de los siste- aguas salinas la superficie del ncleo se hace irregular,
mas endocrino y nervioso 8 . La participacin de corti- aumenta la electrodensidad de la matriz mitocondrial y
sol y prolactina en este proceso y en la estimulacin de se destaca el avanzado desarrollo del Golgi que mues-
la actividad Na K ATPasa en el epitelio opercular fue tra abundantes y largos sacos con extremos dilatados,
demostrada en peces adultos 6, 17 . desorganizados y desplazados a la regin lateral y ba-
Para algunos autores, las clulas cloro no estn in- sal 2 .
corporadas en el epitelio de las lminas secundarias, Se describe la presencia de criptas apicales, men-
aunque el estrato ms profundo retendra la capacidad cionadas como caracterstica distintiva de especies
potencial para diferenciarse en las mismas. La rpida re- marinas 11 . Acipenser sp. presenta clulas cloro que
novacin celular durante la aclimatacin al agua salada no muestran criptas pero aparecen cuando los peces
parece estar vinculada a este estrato. En algunas espe- son transferidos a agua salada 2, 17 . Las criptas apicales
cies se observan distribuidas en ambos epitelios 1, 3, 24 . constituyen focos de alta conductividad para cationes
Experimentalmente se encontraron significativas altera- como el Na que las atraviesan en su pasaje al medio a
ciones en el posicionamiento de las clulas cloro con la travs de la ruta paracelular y se reporta en este sitio la
incorporacin de sustancias al medio acutico, determi- presencia de mucosustancias polianinicas que desem-
nando que las clulas invadan el rea respiratoria en la pearan un rol esencial en la concentracin de cationes
regin intermedia del filamento, con engrosamiento epi- y en el mantenimiento del gradiente de concentracin
telial constituyendo una barrera para que las sustancias inica.
del medio no lleguen al lecho vascular. Tambin fueron
descriptas en la membrana opercular 1 , en la superficie TIPOS
del oprculo y en el epitelio de las aletas pectorales 7 .
En algunos adultos tambin son observadas en el rea En peces adultos, numerosos trabajos hacen refe-
labial, mandbula y abdomen 27 . Aparecen cuando los rencia a distintos tipos de clulas cloro con diferencias
animales son expuestos a aguas con cadmio, conside- morfolgicas dependiendo de su localizacin 24 , sus ca-
rndose una respuesta general a diversos estresores. ractersticas apicales 14, 22 , por las diferentes densidades
elctricas de su citoplasma 26 o por la distribucin de
ESTRUCTURA Y ULTRAESTRUCTURA las protenas transportadoras de iones 9 . Al parecer, la
abundancia relativa de cada tipo celular est relacio-
Las clulas cloro son grandes, eosinfilas, ovoides, nada con la composicin inica del medio y la entrada
con citoplasma abundante, ncleo nico, ligeramente particular de iones.
basfilo y nuclolo evidente 21 . Sin embargo, el poli- Asimismo, aumentando el grado de complejidad
morfismo de las clulas cloro fue demostrado en epite- tambin se identificaron cambios cronolgicos en los
Flores Quintana, C. et al.: Citologa en peces. Rev. vet. 20: 1, 5760, 2009 59

diferentes estadios de desarrollo. Las denominadas c- La proliferacin de las clulas cloro durante la
lulas maduras estn en contacto con el agua va cripta transferencia al agua marina fue referenciado en varios
apical, no as las clulas inmaduras sin cripta 13 . En trabajos 5, 20 . Algunas veces, el ambiente altera en forma
algunas larvas, el nico tipo celular presente tiene baja especfica a un tipo celular, encontrndose incrementos
reactividad al osmio y criptas apicales apenas definidas, de la densidad estrechamente ligados a las mejoras de
en tanto que en juveniles aparecen unas dbilmente co- influjo de Cl y Ca 14, 16 . En ocasiones, las diferencias
loreadas y con dbil reaccin al osmio, y otras oscuras significativas solo aparecen varios das despus. Pero
con fuerte reactividad al osmio. algunos hallazgos son contradictorios 2, 3 porque descri-
En Carassius sp. se describen tres tipos de clu- ben la reduccin del nmero total, representando una
las ricas en mitocondrias, de acuerdo al tamao de las respuesta atpica. En otros telesteos, si bien el nmero
criptas apicales 4 . La comparacin de la relativa abun- aumenta durante los primeros das de adaptacin, su
dancia de los diferentes tipos celulares en las diversas apariencia es la de clulas inmaduras 1 . Por el contrario,
especies sugieren que cada tipo podra llevar a cabo la transferencia al agua dulce provoca reduccin del n-
funciones distintas, aunque el concepto es cuestionado mero y tamao celular 1 .
por diversos autores 4 . Hay clulas cloro denominadas
alfa y otras beta con caractersticas opuestas 22 . Se su- CLULAS ACCESORIAS
giri que la gran variabilidad en la estructura podra
representar diferentes momentos del ciclo celular, don- El cambio estructural ms especfico del epitelio
de las clulas oscuras estn en un proceso de degenera- branquial durante la aclimatacin al agua salada es la
cin apopttica, pierden contacto con el agua, son ms aparicin de las clulas accesorias 11 . Concordando con
electrodensas y redondeadas, siendo finalmente fago- esto, las clulas accesorias nunca fueron reportadas en
citadas por macrfagos 25 . Durante la permanencia en peces de agua dulce. Durante el desarrollo ya se pue-
aguas cidas, los estadios de clulas maduras, inmadu- den formar complejos multicelulares en la membrana
ras, accesorias y apoptticas varan considerablemente. del saco vitelino cuando los embriones son transferidos
de agua dulce a salada. Cada complejo es considerado
TAMAO Y DENSIDAD como caracterstico de ambientes salinos con funcin
de secrecin de iones, principalmente excesos de Na
La mayora de los trabajos coincide en que las clu- del fluido corporal que ocurre bajo gradiente electro-
las cloro son ms grandes en peces marinos que en los qumico va paracelular 23 . Se postula que representan
de agua dulce en todas las etapas, pero se menciona a una poblacin de las clulas cloro parcialmente dife-
Fundulus heteroclitus como una excepcin. renciada 21, un tipo celular especfico para peces de
El aumento de tamao de las clulas cloro despus agua salada 12 .
del pasaje a agua salada fue reportado en el saco vite-
lino de embriones y larvas y en branquias de adultos CONCLUSIONES
de varias especies. En embriones y larvas que perma-
necen en agua dulce se mantienen hasta la completa Las clulas cloro son importantes en la regulacin
reabsorcin del saco vitelino, disminuyendo de tamao inica y osmtica no solo en el principio de la vida
paulatinamente con el crecimiento. de los telesteos sin branquias funcionales, sino que
No est totalmente claro si las clulas cloro que muestran tambin gran plasticidad para adaptarse al
existen en agua dulce desaparecen y son reemplazadas ambiente favoreciendo la supervivencia del pez. Los
con nuevas clulas cloro diferenciadas al ser transfe- cambios morfolgicos pueden ser rpidos por transfor-
ridos a agua salada o si las clulas sobreviven e incre- maciones de las clulas preexistentes o ms lentos por
mentan de tamao en este medio. Hay trabajos que pro- reemplazo de nuevas clulas diferenciadas. El rol en la
veen evidencias directas del turn over, que si bien se excrecin de Na y Cl es indiscutido, sin embargo su rol
observa en clulas de peces de agua dulce y salada, es en la absorcin de estos iones continua siendo contro-
aproximadamente tres veces mayor en agua salada 26 . vertido pues se estn reuniendo evidencias que el sitio
En el proceso de hipertrofia celular se registra in- de ingreso de Na son las clulas pavimentosas, antes
cremento de pliegues en la superficie basolateral coin- que las clulas cloro.
cidente con el aumento del sistema tubular basolateral y
el incremento de actividad de la enzima de traslocacin REFERENCIAS
protena Na K ATPasa 2, 24 . Tanto la actividad enzim-
tica como las modificaciones morfolgicas son consi- 1. Altinok I, Galli S, Chapman F. 1998. Ionic and osmotic
deradas ndices de adaptacin al agua salada. Llama la regulation capabilities of juvenile Gulf of Mexico stur-
atencin el efecto del cortisol sobre el tamao de las c- geon, Acipenser oxyrinchus de sotoi. Comp Biochem Phys
lulas cloro, pero a veces solo se incrementa la densidad A 120: 609616.
celular sin modificarse el tamao de las mismas. Otras 2. Carmona R, GarcaGallego M, Sanz A, Domezain
hormonas como la del crecimiento (GH) y el factor de A, Ostos Garrido M. 2004. Chloride cells and pavement
crecimiento insulnico (IGF1) estimulan el tamao y cells in gill epithelia of Acipenser naccarii: ultrastructural
nmero de clulas cloro.
60 Flores Quintana, C. et al.: Citologa en peces. Rev. vet. 20: 1, 5760, 2009
modifications in seawateraclimated specimens. J Fish
Biol 64: 553566.
3. Cataldi E, Ciccotti E, Di Marco P, Di Santo O, Bronzi P,
Cataudella S. 1995. Acclimation trials of juvenile italian
sturgeon to different salinites: morphophysiological de-
scriptor. J Fish Biol 47: 609618.
4. Chang I, Lee T, Wu H, Hwang P. 2002. Effects of envi-
ronmental Cl levels on Cl uptake and mitochondriarich
cell morphology in gills of the stenohaline goldfish, Car-
assius auratus. Zool St 41: 236246.
5. Cioni C, De Merich D, Cataldi E, Cataudella S. 1991.
Fine structure of chloride cells in freshwater and seawater
adapted Oreochromis niloticus (Linnaeus) and Oreochro-
mis mossambicus (Peters) J Fish Biol 39: 197209.
6. Evans D. 2002. Cell signaling and ion transport across the
fish gill epithelium. J Exp Zool 293: 336347.
7. Henderson V. 1995. Relationship of the tubular system
with other organelles in chloride cells of the channel cat-
fish, Ictalurus punctatus. J Morphol 224: 3145.
8. Hiroi J, McCormick S, OhtaniKaneko R, Kaneko T.
2005. Functional classification of mitochondrionrich cells
in euryhaline Mozambique tilapia (Oreochromis mossam-
bicus) embryos, by means of triple immunofluorescence
staining for Na/ KATPase, Na/K/2Cl cotransporter and
CFTR anion channel. J Exp Biol 208: 20232036.
9. Hiroi J, Miyazaki H, Kataoh F, OhtaniKaneko R,
Kaneko T. 2005. Chloride turnover and iontransporting
activities of yolk sac preparations (yolk balls) separated
from Mozambique tilapia embryos and incubated in fres-
hwater and seawater. J Exp Biol 8: 38513858.
10. Kaneko T, Shiraishi K., Katoh F, Hasegawa S. 2002.
Chloride cells in early life stages of fish and their func-
tional differentiation. Fish Sci 68: 19.
11. Laurent P. 1984. Gill internal morphology. In: Fish Physi-
ology (Hoar W, Randall D. Eds.), Academic Press, Orlan-
do (USA), p. 7384.
12. Laurent P, Perry S. 1990. The effects of cortisol in gill
chloride cell morphology and ionic uptake on the freshwa-
ter trout, Salmo gairdneri. Cell Tissue Res 259: 429442.
13. Li L, Eygensteyn J, Lock R, Verbost P, Van Der Hei-
jden A, Wendelaar Bonga S, Flick G. 1995. Branchial
chloride cells in larvae and juveniles of freshwater tilapia
Oreochromis mossambicus. J Exp Biol 198: 21772184.
14. Lin L; Hwang P. 2004. Mitochondriarich cell activity in
the yolksac membrane of tilapia (Oreochromis mossam-
bicus) larvae acclimatized to different ambient chloride
levels. J Exp Biol 207: 13351344.
15. Marshall W. 1995. Transport processes in isolated teleost
epithelio: opercular epithelium and urinary bladder. In:
Fish Physiology (Woods S. Ed.), Academic Press, San
Diego (USA), p. 123.
16. McCormick S, Hasegawa S; Hirano T. 1992. Calcium up-
take in the skin of a freshwater teleost. Proc Natl Acad Sci
89: 36353638.
17. Mc Cormick S. 2001. Endocrine control of osmoregulation
in teleost fish. Am Zool 41: 781794.
18. Morgan I, Potts W. 1995. The effects of the adrenoreceptor
agonist phenylephrine and isoproterenol on the intracellu-
lar ion concentration of branchial ephitelial cells of brown
trout (Salmo trutta L). J Comp Physiol 165: 458463.
19. Perry S, Goss G, Laurent P. 1992. The interrelationships
between gill chloride cell morphology and ionic uptake in
four freshwater teleost. Can J Zool 70: 17751786.
20. Perry S. 1997. The chloride cell structure and function in
the gill of freshwater fishes. Ann Rev Physiol 59: 325347.
21. Pisam M. 1981. Membranous systems in the chloride cell
of teleostean fish gill, their modifications in response to
the salinity of the environment. Anat Rec 200: 401414.
22. Pisam M, Caroff A, Rambourg A. 1987. Two types of
chloride cells in the gill epithelium of a freshwateradapt-
ed euryhaline fish: Lebistes reticulatus, their modifications
during adaptation to saltwater. Am J Anat 179: 4050.
23. Silva P, Solomon R, Spokes K, Epstein F. 1977. Ouabain
inhibition of gill NaKATPase: relationship to active
chloride transport. J Exp Zool 199: 419426.
24. Uchida K, Kaneko T, Yamauchi K, Hirano T. 1996.
Morphometrical analysis of chloride activity in the gill
filaments and lamellae and changes in Na, K, ATPase acti-
vity during seawater adaptation in chum salmon fry. J Exp
Zool 276: 193200.
25. Wendeelar Bonga S, Van der Meij J. 1989. Degeneration
and death, by apoptosis and necrosis, of the pavement and
chloride cells in the gills of the teleost Orechromis mos-
sambicus . Cell Tissue Res 255: 235243.
26. Wendeelar Bonga S, Flick G, Balm P, Van der Meij J.
1990. The ultrastructure of chloride cells in the gills of
the teleost Oreochromis mossambicus during exposure to
acidified water. Cell Tissue Res 259: 575585.
27. Zaccone G, Licata A. 1981. Histochemistry and fine struc-
ture of the flamecone cells in the skin epidermis of the sea
horse fish Hippocampus ramulosus Leach 1814 (Teleostei:
Syngnathidae). Arch Biol (Bruxelles) 93: 249266.