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PROYECTO
EXTRACCIN DE COLAS Y GELATINAS A PARTIR DE
FUENTES ANIMALES
Fecha : 30 / 05 / 05
La Paz Bolivia
I / 2005
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Colas y gelatinas
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INDICE
I. OBJETIVOS
..4
II. FUNDAMENTO
TEORICO..4
COLGENO...4
ESTRUCTURA DEL COLAGENO.6
REVISION DE LOS DISTINTOS TIPOS DE COLAGENO8
COLAGENO TIPO I.8
COLAGENO TIPO II.......9
COLAGENO TIPO III......9
COLAGENO TIPO IV y V 10
PROPIEDADES GENERALES.10
GELATINA...10
MATERIAS PRIMAS..12
FABRICACION DE LA GELATINA..13
PROCEDIMIENTO ALCALINO (GELATINA TIPO B)..13
PRECURSOR ACIDO (GELATINA TIPO A).18
PROPIEDADES FSICAS DE LA GELATINA....21
VISCOSIDAD..21
RIGIDEZ DE LAS GELES21
LA FUSION DE LOS GELES Y SOLIDIFICACION DE LAS
SOLUCIONES23
PUNTO DE FUSION.23
FORMACION DE GELES. AGREGACION MOLECULAR..24
PROPIEDADES QUIMICAS DE LA GELATINA25
COLAS.25
PRESERVACION DE LA CALIDAD DE LA COLA...25
III. MATERIALES Y
REACTIVOS.27
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Colas y gelatinas
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IV. PROCEDIMIENTO
.28
V. DATOS
EXPERIMENTALES...31
VI. CALCULOS Y
RESULTADOS33
VII. GRAFICOS
..35
VIII. COMPARACION CON DATOS
BIBLIOGRAFICOS36
IX. OBSERVACIONES.
39
X. CONCLUSIONES
40
XI. BIBLIOGRAFIA..
.42
XII. ANEXOS. ..
..43
ESTUDIO DE LA ESTABILIDAD TERMICA DE LA RED DEL
COLAGENO..43
USO COSMETICO DEL COLAGENO..43
USO MEDICO DEL COLAGENO..44
ASPECTOS BASICOS SOBRE ASHESIVOS.45
CONDICIONES GENERALES PARA UNA BUENA ADHESION.45
PEGAMENTOS EN GENERAL..47
OBTENCION DE GELATINA COMESTIBLE SECUENCIA DE
PROCESOS..48
PROCEDIMIENTO...50
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Colas y gelatinas
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I. OBJETIVOS
COLAGENO
El trmino colgeno (del griero kola, que significa cola, y egonomen, equivalente
a producir).
El colgeno es un material extracelular fabricado por los fibroblastos y es una
protena fibrosa que resulta relativamente insoluble en agua, en contraposicin a
otras familias de llamadas globulares,
que s son solubles en agua.
La base molecular del colgeno est
constituida por cadenas de polipptidos
y cada uno de stos es un polmero de
aminocidos. Es decir, son cadenas
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defectos genticos) por los cuales existen dficit en algunos aminocidos que
constituyen la cadena de polipptidos del colgeno, entonces la triple hlice no
se puede formar y en esos casos la molcula de tropocolgeno es defectuosa e
incapaz de reconstituir la fibrilla de colgeno (o sea, no existe o no se forma el
colgeno). Eso se ve en algunas enfermedades, algunas de origen hereditario y
otras producidas por sustancias qumicas, drogas, etc. Cuando se analiza ya la
composicin qumica de estas cadenas de polipptidos que constituyen el
colgeno, se ve que los aminocidos que conforman el colgeno tienen una
distribucin bastante regular, que es lo que caracteriza a las protenas.
Encontramos una estructura que se llama repetitiva en la secuencia de
aminocidos que se simboliza de esta manera:
Gli x y Gli x y Gli x- y - Gli
0 sea, a lo largo de los 1000 aminocidos
que constituyen cada polipptido,
encontramos que cada tres, uno de ellos es
la glicina, el aminocido ms simple de
todos y despus encontramos dos
aminocidos cualquiera y otra vez la glicina
y otra vez dos aminocidos cualquiera y
otra vez la glicina. Pero x e y no son tampoco cualquier aminocido, sino que con
mucha frecuencia en el lugar de la x existe aminocido especfico del colgeno
que es la prolina y en el lugar de la y est la hidroxipolina, que son los que con
ms frecuencia aparecen en el lugar de la x y de la y.
De modo que en sntesis lo que caracteriza al colgeno es esa secuencia
repetitiva y la gran proporcin que tiene de glicina, prolina e hidroxiprolina. La
prolina y la hidroxiprolina constituyan juntas 22 % de todos los aminocidos del
colgeno. Se sabe que la hidroxiprolina desempea un papel fundamental y
especial como elemento que estabiliza esta triple hlice. Cuando hay defectos de
la hidroxiprolina se traduce en la
desorganizacin de la triple hlice y
por lo tanto de todo el colgeno.
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0 sea, una molcula que tiene 300 mm de longitud y que adems est polarizada
con dos extremidades diferentes. En un primer sentido, las molculas de
tropocolgeno se ordenan a lo largo unas de otras, pero en la segunda hilera de
molculas, en el colgeno nativo, hay una hilera que vendr ms de atrs y as
sucesivamente se colocan desfasadas.
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Colgeno tipo II
Aparece en el cartlago y otras estructuras, como por ejemplo el liquido que
rellena el globo ocular llamado humor vtreo. Son fibras, por el contrario, muy
finas, que no se ven o se ven con dificultad en el microscopio ptico, pero s se
ven con el microcopio electrnico.
Son fibras que no presentan este bandeado caracterstico que presenta las
fibrillas del tipo I y estn constituidas por tres cadenas denominadas alfa 1 (II).
Son tres cadenas iguales, entrelazadas, donde lo caracterstico es que hay ms,
hidroxilisina y lisina que en el colgeno ordinario de tipo I.
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denominadas alfa 1 (III). O sea, tiene tres cadenas iguales, con una disposicin
de aminocidos propia, donde predomina la hidroxiprolina y donde adems
aparece un aminocido que no es muy comn en otros colgenos, que es la
cistina.
Colgeno tipos IV y V
Aparecen especficamente localizados en las membranas basales, o sea, en
aquellas estructuras que separan generalmente los epitelios de los tejidos
conjuntivos. El colgeno IV es muy frecuente en todas las membranas basales.
El colgeno V se ha descrito especficamente en la membrana basal de la
placenta (rgano muy especial, transitorio), que citamos solo para dar un ejemplo
de cmo esta protena se adapta a distintas funciones biolgicas que van
apareciendo a lo largo do la evolucin de las especies.
Propiedades generales
El colgeno nativo posee propiedades muy particulares que no se encuentran en
los productos de degradacin, es decir, en la gelatina.
La reactividad bioqumica del colgeno nativo proviene, sustancialmente, de los
telopptidos de las extremidades de la cadena polipeptdica, ello de una parte y,
de otra, de su propia estructura.
Las pelculas preparadas a partir de soluciones de colgeno nativo son muy
resistentes.
Las soluciones de gelatina por evaporacin, tienden, en general, a la
pulverizacin y algunas veces proporcionan pelculas muy frgiles.
GELATINA
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Materias primas
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Fabricacin de gelatina
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Las cortezas bien recortadas (si hay un exceso de grasa el producto final es
turbio) se descongelan, se lavan en agua fra y se remojan en una solucin
diluida (alrededor del 5%; 1N en el caso de las sinovias) de un cido inorgnico
como el clorhdrico, sulfuroso (dixido de azufre en agua), fosfrico o sulfrico, de
forma que el valor del pH sea alrededor de 4. Los cidos sulfrico y sulfuroso se
utilizan con una normalidad de 1 1.5, requiriendo periodos ms prolongados de
remojo. A este pH cido el colgeno se hincha y se produce una considerable
solubilizacin. El remojo en cido se mantiene de 10 72 horas (24 48 horas
en el caso de las sinovias, 48 72 horas para los cartlagos de las escpulas),
renovando el cido a las 24 36 horas. Si el periodo de remojo en cido se
prolonga, aumenta el rendimiento de colgeno extrado, pero se reduce la
resistencia de los geles y la viscosidad. Finalmente, se quita el cido y se
procede a un lavado para elevar el pH de la materia prima a 4.5. A veces se hace
un enjuague con hidrxido sdico al 5 8 % para elevar el pH a 6 6.5. El
lavado se contina para eliminar las sales formadas. Si se emplean los cidos
sulfrico o sulfuroso, las sales formadas son menos solubles y es necesario
prolongar los lavados. La mayora de las protenas que acompaan al colgeno
en la materia prima tienen un punto isoelctrico de 4 5 y en consecuencia son
menos solubles y se coagulan rpidamente durante la extraccin. A este valor del
pH el colgeno nativo se encuentra hinchado. El proceso cido da una gelatina
con un punto isoelctrico de 8.9 (margen 8.5 9.4). El proceso cido parece que
solo produce una reorganizacin fsica de las estructuras del colgeno, con un
mnimo de cambios hidrolticos. En consecuencia hay solo un incremento ligero
de los grupos amino-primarios y de los grupos carboxilo libres. El peso molecular
medio de los productos obtenidos en el proceso cido es de 70.000 90.000,
excepto en el caso de las vejigas natatorias del esturin, en que se han dado
pesos moleculares del orden de 250.000.
La gelatina obtenida a partir de las cortezas de cerdo tiene una mayor resistencia
de los geles y ms transparencia y mejor color que la obtenida de las pieles de
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Las gelatinas obtenidas en los procesos cido y alcalino son distintas y por lo
tanto los productos no son sustituibles sin ms el uno por el otro en una misma
aplicacin comercial.
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que corresponde a las 24h se alcanza en una hora. La rigidez sigue aumentando
lentamente durante un largo periodo.
La rigidez de los geles depende del ph de una manera no totalmente predecible.
Con las gelatinas de bajo punto isoelctrico, la rigidez cambia poco entre ph 5 y
ph 9, pero decrece bruscamente por debajo de ph 5. Estos efectos son mas
pronunciados con geles de poca consistencia. La rigidez depende mucho de la
temperatura, pero la relacin es compleja y varia de una concentracin a otra. As
con geles preparados a partir de dos gelatinas diferentes, uno puede tener la
rigidez mas alta a 100C y el otro a 200C. Tales efectos son mas pronunciados
cuando los puntos de fusin de los geles son muy diferentes, puesto que en
general, la velocidad de cambio de la rigidez con la temperatura aumenta cuando
se esta prximo al punto de fusin. El punto de fusin puede definirse como la
temperatura a la cual la rigidez se hace cero.
Por encima de un cierto peso molecular, la rigidez de un gel madurado a 0 0C es
independiente del peso molecular de la gelatina. Por debajo del valor critico del
peso molecular, la rigidez cae bruscamente a cero. Con la gelatinas normalmente
que tienen una amplia distribucin de pesos moleculares, la rigidez depende del
peso molecular solo en cuanto concierne a la proporcin de molculas que
tienen pesos moleculares por debajo del valor critico. Este valor critico se eleva
cuando la temperatura a la cual se mide la rigidez, de modo que cuando al
temperatura se aproxima al punto de fusin de la gelatina, la rigidez se hace cada
vez mas dependiente del peso molecular. Estos efectos se muestran claramente
fraccionando una gelatina mediante precipitacin con alcohol. Todas las
fracciones excepto las de peso molecular mas bajo, tienen la misma rigidez a
00C. Esta rigidez da una medida de las caractersticas de gelificacin intrnsecas
de la gelatina considerada. La caracterstica estructural determinante de este
factor de gelificacin no se conoce, pero puede modificarse durante la
fabricacin. En general las condiciones de degradacin durante la fabricacin son
tales que el peso molecular y el factor de gelificacin disminuyen de forma que
en las gelatinas comerciales se observa frecuentemente cierta relacin entre
rigidez y viscosidad. Esto se hace ms marcado con productos de calidad inferior,
en lo que puede haber un gran proporcin de molculas con pesos moleculares
por debajo del valor critico de formacin de gel. La degradacin en medio cido
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Punto de fusin
Cuando un gel se calienta muy lentamente cerca del punto de fusin, tienen lugar
variaciones en la estructura del gel que afecta la fusin, se ha demostrado que el
punto de fusin de los geles es mximo cuando han sido madurados durante
largos periodos a una temperatura prxima al punto de fusin. Despus de este
periodo de maduracin, enfriando el gel hasta una temperatura baja, lo cual
aumenta en gran manera la rigidez, no varia el punto de fusin. La estructura
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que se forman los geles. Otra medida que se hace con frecuencia es el tiempo de
solidificacin de las soluciones a temperatura inferior al punto de solidificacin.
El mtodo ms satisfactorio es determinar el tiempo de solidificacin de una gota
que se ha enfriado rpidamente, hasta la temperatura a la que ha de medirse el
tiempo de solidificacin.
Colas
Preservacin de la calidad de la cola
La viscosidad y la resistencia de gelatina de la cola no son propiedades
completamente estables y pueden empeorarse si las soluciones se manejan
indebidamente. Se dice que la cola se degrada, lo que tomado en sentido literal
significa que se reduce de una calidad mas alta a otra mas baja. La degradacin
se origina por calentamiento prolongado o por accin de bacterias y
microorganismos. Por lo tanto se debe evitar todo calentamiento innecesario. Por
lo general es tan indeseable como innecesario calentar las soluciones de cola por
encima de 600C, a esta temperatura la viscosidad y la resistencia de la gelatina
pueden decrecer en un 0,2-1,0% por hora, dependiendo de la calidad y de las
enzimas bacterianas presentes. A 800C la velocidad de degradacin es
aproximadamente es aproximadamente cuatro veces mayor que a 60 0C. En
soluciones en ebullicin la degradacin es muy rpida. A temperaturas prximas
a 400C la degradacin trmica es muy lenta, pero la degradacin puede ser
todava rpida si existen bacterias. Las colas modernas contienen generalmente
preservativos que impiden el crecimiento de bacterias, aunque puede haber
todava variaciones en la velocidad de degradacin entre las colas de la misma
calidad, debidas a la presencia de enzimas bacterianas, las cuales pueden
causar degradacin incluso cuando se inhiba el posterior crecimiento
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IV. PROCEDIMIENTO
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2. DESENCALADO: Consiste en la
eliminacin de la cal en la muestra mediante baos con abundante agua,
especficamente se quiere eliminar la cal adherida o absorbida por la piel en
su exterior, la cal en los espacios interfibrilares y como parte final la cal que
se hubiera combinado con el colgeno.
Colgeno Gelatina
Se realiz el proceso de coccin durante 6 horas aproximadamente a
temperatura de ebullicin del agua a presin atmosfrica de 495mmHg, bajo
una temperatura ambiental de 11C a 13C. El caldo obtenido tiene
consistencia viscosa y color blanquecino turbio, adems de grasa insoluble
en su superficie. El volumen de caldo obtenido fue de 300ml.
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9. EVAPORACION: Se evapor el
hexano en bao mara, hasta alcanzar un volumen mnimo, obtenindose una
solucin viscosa y transparente.
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Agua Desencalado
Tratamiento
HCl diluido cido
Agua Lavado
Colgeno
Coccin
H2O2 Blanqueado
Filtrado
Hexano Extraccin
Evaporacin
Secado
Molido
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V. DATOS EXPERIMENTALES
COCCIN
Primer ensayo
# hora / T(C) M (g) V (ml) (g/ml) pH
1 / 88 43.23 44.00 0.98 7.42
2 / 85 42.38 43.00 0.99 10.01
3 / 86 42.35 43.50 0.97 9.02
4 / 88 42.74 44.00 0.97 9.03
5 / 88 42.40 43.00 0.99 8.64
Segundo ensayo
# hora / T(C) M (g) V (ml) (g/ml) pH
1 / 88 50.81 50.00 1.02 4.33
2 / 88 50.90 50.00 1.02 5.40
3 / 88 50.59 50.00 1.01 5.92
4 / 88 28.75 30.00 0.96 5.84
5 / 88 30.59 30.00 1.02 7.23
6 / 88 30.93 31.00 1.06 6.93
FILTRACIN
Volumen inicial del caldo : 300ml
Volumen del filtrado : 255ml
Temperatura de filtracin : 64C
EXTRACCION
Volumen de la muestra a extraer : 255ml
Volumen del solvente (hexano) : 6 ml
Nmero de extracciones : 2
Masa del extracto 1 : 4.58g
Masa del extracto 2 : 5.93g
SECADO
Masa de la gelatina seca . 0.81g
PROPIEDADES QUIMICAS
Ensayo con hidrxido de sodio: Al disolver 0.65g de hidrxido de sodio en 10
ml de agua, y agregar polvo de gelatina, no se observa ningn cambio o reaccin
aparente.
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TEb 88.00C
Ql
T0 13.07C
Qs
0C
K D 733.87
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me
V1
KD
m0 me
V2
K D V1 m0
me
V2 ( K D V )1
773.87 6ml 270.3g
me
255ml (733.87 6ml )
me 255.51g
VII. GRAFICOS
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Constante Temperatura de
Disolvente Densidad (g/ml)
dielctrica ebullicin (C)
Hexano 1.9 0.66 89
ter de petrleo 2.0 - 45
Ciclohexano 2.0 0.78 81.4
Benceno 2.3 0.88 81.8
Tolueno 2.4 0.86 110.6
Tricloroetileno 3.4 - -
ter dietlico 4.3 - 36
Cloroformo 4.8 - -
Acetato de etilo 6.0 - -
2-propanona 10.3 0.87 56
Acetona 20.7 0.90 56
Etanol 24.3 0.79 78
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Propiedades qumicas
La gelatina en solucin, tericamente, no debera ser precipitada ni por los
cidos, bases, sulfato de cobre. La experimentacin con el hidrxido de sodio
concentrado no ha mostrado alguna contradiccin. La agregacin del cido
clorhdrico concentrado demostr un desprendimiento de vapores blancos,
probablemente producidos por la reaccin de los grupos amino de los
aminocidos con el cido clorhdrico, mediante la formacin del cloruro de
amonio gaseoso. La adicin de una solucin de gelatina a una solucin
concentrada de sulfato de cobre, trae la precipitacin de los cristales de sulfato
de cobre, adems, la mezcla adquiere inmediatamente una consistencia viscosa.
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IX. OBSERVACIONES
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La duracin de la coccin
determina la cantidad de colgeno que se hidroliza, para muestras grandes,
se recomienda una coccin de ms de 8 horas con temperaturas entre 70 y
80C. Nuestra muestra ha sido sometida a coccin durante 6 horas a
temperatura de ebullicin del agua (88C), la influencia de esta temperatura
puede haber modificado la gelatina volvindola cola y bajando en
rendimiento.
El nmero de extracciones
realizadas al caldo filtrado han sido 2, debido sobretodo al no malgastar
reactivos de alta pureza (hexano con 99% de pureza). Segn el laboratorio de
extraccin se recomiendan 5 extracciones para extraer casi la totalidad del
soluto.
X. CONCLUSIONES
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XI. BIBLIOGRAFIA
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XII. ANEXOS
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Por otra parte, el cabello tratado con colgeno nativo soluble puede elongarse en
un 6% superior a un cabello no tratado.
Actividad como vehculo
El colgeno ocupa un lugar privilegiado como biomaterial, al poseer la capacidad
de reticularse obteniendo matrices colagnicas con grado de solubilidad variable.
J. Cotte y H. Dumas, aplican la tcnica de Prilling para conseguir micro esferas
que aprisionan activos insolubles o lipfilos y que dependiendo del grado de
reticulacin pueden fundirse y romperse al aplicarlas sobre la piel cediendo
dichas sustancias. Tambin se consiguen esferas resistentes para su uso en
peelings.
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Pegamentos en general
La mayora de los pegamentos posibilitan la unin al rellenar los huecos y fisuras
diminutos que existen normalmente en cualquier superficie, aunque sea muy lisa.
Los pegamentos son econmicos, distribuyen la tensin en el punto de unin,
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Tratamiento Alcalino: Se realiza ya sea con cal o con soda para preparar otros
contenidos (no protenicos y protenicos no colagnicos presentes) para su
separacin en la prxima etapa.
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PROCEDIMIEMTO
ENCALADO
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DESENCALADO
COCCIN
BLANQUEADO
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FILTRADO
SECADO
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MUESTRA FINAL
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