LA BASE

QUMICA DE LA
HERENCIA:
GENTICA
MOLECULAR
NATURALEZA DEL MATERIAL GENTICO

2
 El estudio de la divisin celular y de
los ciclos biolgicos cromosomas
La gentica son los portadores del material
molecular es la parte gentico
de la Biologa que se Se duplican con precisin y se
ocupa del estudio de dividen con exactitud en la mitosis,
la herencia biolgica, proporcionando un juego completo
intentando explicar los de cromosomas a cada clula.
mecanismos ntimos y Su comportamiento durante la
circunstancias meiosis concuerda con lo que se
mediante los cuales se espera de la herencia
rige la transmisin de El entrecruzamiento y la
los caracteres de distribucin al azar de los
generacin en cromosomas proporciona la
generacin. variabilidad que se observa en los
individuos 3
Quines son los portadores de la informacin gentica, el
ADN o las protenas?
Pruebas directas e indirectas demuestran que es el ac.
nucleico el portador de la informacin gentica

PRUEBAS DIRECTAS

Los experimentos que realiz A. Hershey y M. Chase en 1952

Griffith en 1928 con la bacteria
causante de la pneumona
demuestran que el material
gentico es el ADN. Pero
no fue hasta 1944, cuando
Avery y col. confirmaron la
naturaleza qumica de ese
principio transformante
mediante experimentos con el fago T2,
probaron definitivamente que el
ADN es el portador de la
informacin gentica.
En 1953 Watson y Crick deducen la
estructura secundaria del ADN. es
el nacimiento de la Gentica
Molecular y Bacteriana
EXPLICACIN DE LOS EXPERIMENTOS DE GRIFFITH
EXPERIMENTOS DE AVERY Y COL.

EXPERIMENTOS DE
HERSHEY Y CHASE
 PRUEBAS INDIRECTAS

La cantidad de ADN es constante en todos los

individuos de la especie
Es una molcula estable
Los gametos poseen la mitad
El ADN permanece invariable cuando las clulas no se
dividen
Mutaciones en el ADN se traducen en alteraciones en
el fenotipo de las clulas
 BASE MOLECULAR DE LA HERENCIA.
EL FLUJO DE LA INFORMACIN: DE LOS
CIDOS NUCLEICOS A LAS PROTENAS
 El flujo de la Permite

  conservar

  la

  El

  ADN

  es

  la

  base

 
informacin gentica informacin

  gentica

  a

  molecular

  de

  la

 
va desde el ADN travs

  del

  tiempo herencia
al ARNm y desde
el ARNm a las
protenas,

Nuevo
replanteamiento
!

ADN ARNm Protena

10
REPLICACIN DEL ADN
CMO ES EL PROCESO DE REPLICACIN DEL ADN?

El ADN es una molcula formada por dos cadenas

complementarias y antiparalelas. Una de las primeras
dudas que se plantearon fue la de cmo se lleva a cabo
en la clula la replicacin del ADN.
Surgieron tres hiptesis
REPLICACIN CONSERVATIVA

Cada hebra de ADN

progenitora se replica
produciendo una molcula
con las dos cadenas antiguas
y otra con las dos hebras
modernas
REPLICACIN SEMICONSERVATIVA

Las nuevas dobles hlices

formadas tienen una cadena
antigua y una moderna
REPLICACIN DISPERSIVA

Las cadenas progenitoras se

rompen a intervalos, de manera
que los segmentos nuevos se
combinan con los antiguos para
formar las cadenas hijas.
 Los experimentos de Messelson y Stahl demostraron que
la replicacin es semiconservativa

R.Conservativa
R.Conservativa R. Dispersiva

R.Semiconservativa
CARACTERSTICAS DE LA REPLICACIN ( sucede en la fase S
de la interfase del ciclo celular)

Es semiconservativa: La molcula de ADN una

hebra original y otra recin sintetizada
Es bidireccional: La replicacin avanza en dos sentidos
En virus y bacterias hay un punto de replicacin (ori-C)
en eucariotas hay varios
Los mononucletidos se aaden en direccin 5 3
Es semidiscontinua: en una cadena es continua, pero en la
otra (hebra retardada) es discontinua
La iniciacin de la sntesis de cada fragmento requiere
un extremo hidroxilo libre, este es proporcionado por el
ARN cebador.
PROCARIOTAS EUCARIOTAS
DUPLICACIN EN PROCARIOTAS
 FASE DE INICIACIN

Desenrollamiento y apertura de la doble hlice en el

punto de iniciacin u oriC
Enzimas implicadas
Helicasas
Girasas y topoisomerasas
Protenas SSB

Se forma una burbuja de replicacin replicn, en la que

hay dos zonas en forma de horquilla (Y)
 Reconocen el punto de iniciacin,
rompen los puentes de H

Girasas
Desenrollan

SSB Estabilizan, impiden que se

vuelvan a enrollar
 FASE DE ELONGACIN

La ARN primasa (ARN polimerasa ADN

dependiente) sintetiza el cebador (un pequeo fragmento de
ARN) que aporta el extremo 3libre

La ADN pol. III aade dnucletidos complementarios en

el sentido 5-----> 3 (recorre la hebra molde 3--->5)

Al ser las cadenas antiparalelas, en una hebra la sntesis

es continua (hebra continua) pero en la otra es discontinua
(hebra retardada) y se forman los fragmentos de Okazaki.
Se dice que la sntesis es semidiscontinua

La ADN pol. I: tiene actividad exonucleasa y elimina los

ARN cebadores
 FASE DE TERMINACIN

La ADN ligasa une todos los fragmentos (gasto de

ATP)
Las hebras se vuelven a enrollar

CORRECIN DE ERRORES

ADN pol. II actividad exonucleasa

Los errores son heredables (mutacin puntual o gnica)
variabilidad evolucin de las especies
 DUPLICACIN EN EUCARIOTAS

El ADN es lineal (mayor tamao) distribuido en

cromosomas y se empaqueta con histonas. De forma
coordinada se produce la sntesis de las histonas.
Varios orgenes de replicacin (varios ojos de
replicacin)
Fragmentos de Okazaki ms pequeos
Los nucleosomas ralentizan la actuacin de las
ADN polimerasas
Existen un total de cinco ADN polimerasas
Al ser los cromosomas lineales los extremos
(telmero) se va acortando relacionado procesos de
envejecimiento y muerte celular
TRANSCRIPCIN
 Proceso mediante el cual el
CARACTERSTICAS ARNm copia la informacin
del ADN

Es selectivo: slo se transcriben algunas

regiones del ADN
Es reiterativo: un gen puede transcribirse
muchas veces
Slo se copia una de las cadenas del
ADN. Las enzimas son ARN
polimerasas
 TRANSCRIPCIN EN PROCARIOTAS

ARN pol.: varias subunidades. La subunidad

reconoce el promotor como seal de inicio (una
secuencia especfica de nucletidos)
Precursor: nucletido trisfosfato
ARN pol. : aade ribonucletidos 5 3
Fin de la sntesis: una secuencia especfica
INICIACIN: La subunidad (ARN pol) reconoce una
secuencia de nucletidos , llamada promotor.
La enzima hace que la doble hlice se abra y as dejar
expuesta la secuencia de ADN que se va a transcribir y
coloca el primer nucletido trifosfato complementario con el
dnucletido de la hebra molde del ADN
 ELONGACIN: La subunidad se libera y el resto de las
subunidades recorren la hebra molde que se
transcribe( 3---->5). los nucletidos se unen en 3
mediante enlace ster (El ARNm se forma 5---->3)

En eucariotas despus de 30
nucletidos se le aade al
ARN una cabeza (caperuza)
de metil-GTP en el extremo
5con funcin protectora
 TERMINACIN: La ARN pol llega a la secuencia de
termiancin del gen. Se suelta del ADN y se libera el ARNm
transcrito. En procariotas es una secuencia palindrmica (se
lee de la misma forma de drch. a izq. y viveversa)

En eucariotas una poliA-pol.

aade en el extremo 3 unos
En

  eucariotas

  el

 
200 nucletidos de Adenina ARNm

  sufre

  un

  5ATGCTTAAGCAT3
cola poli A: interviene en la proceso

  de

  3TACGAATTCGTA5
maduracin y transporte del
ARN fuera del ncleo maduracin
 DIFERENCIAS PROCARIOTA
EUCARIOTAS
S

Tiene

  lugar

  en

  el

  ncleo

  (transcripcin

  y

  Citoplasma

  (regin

 
traducin

  separadas

  en

  el

  espacio

  y

  tiempo)

  nucleoide)

  (transcripcin

 
Tres

  ARN

  polimerasas

  y

  traduccin

  a

  la

  vez)

 
ARN

  pol.I:

  transcribe

  ARNr

  Una

  ARN

  polimerasa

 
ARN

  pol.II:

  transcribe

  genes

  estructurales

  ARN

  policistrnico

 
ARN

  pol.III:

  transcribe

  ARNt

  y

  un

  ARNr

  (informacin

  para

 
sntesis

  de

  varias

 
ARN

  monocistrnico

  (

  infomacin

  para

 
protenas)

 
sntesis

  de

  una

  protena)

 
No

  hay

  caperuza

 

  ni

  cola

 
Extremo

  5:

  caperuza

  y

  en

  extremo

  3:

  cola

 
poli-A

 

 
poli-A

 
Genes

 

  estructurales

  discontinuos:

  Procesado

  Genes

  estructurales

 
del

  ARNm

  continuos:

  No

  se

  procesa

 
ARNm

 
Los

  nucleosomas

  intervienen

  en

  el

  proceso
No

  hay

  nucleosomas
EUCARIOTAS

PROCARIOTA
S

36
 Slo

  eucariotas
E I E I E

MADURACIN:Proceso mediante el
cual en los genes estructurales se
eliminan los intrones (secuencias sin
informacin) y permanecen los
exones ( secuencias codificantes).
Unas protenas hacen que los intrones
adopten forma de bucle. Unas
enzimas sompen los bucles y otras
sueldan los exones. Posteriormente
se aade la caperuza (5)

Poli A
5 3
CDIGO GENTICO
 cmo

  el

  ARNm

 
DESCIFRADO DE LA CLAVE GENTICA traduce

  la

 
secuencia

  de

 
aminocidos?
lenguaje del ADN: un alfabeto de
Mediante el cdigo
gentico

4 letras (A, T, C, G)

Palabras (aminocidos)
 Cuntas letras
debe constar cada Si cada palabra: 1 letra. Se formarn 41
palabra del lenguaje = 4 palabras
gentico si Si cada palabra : 2 letras. Se formarn
necesitamos como 42 = 16 palabras
mnimo 20 palabras Si cada palabra : 3 letras. Se
(aminocidos)? 43 = 64 palabras

Conclusin:
- Cada triplete de bases del ADN codifica la
informacin correspondiente a un aminocido
- El conjunto de los 64 tripletes: CDIGO GENTICO
CARACTERSTICAS

Es un cdigo de tripletes
No es ambiguo: ningn triplete codifica ms de un
aminocido
No tiene superposiciones. La mutacin de un
nucletido afecta slo a ese aminocido
Es degenerado. Sobra informacin pues hay 64
tripletes para 20 aminocidos
Es universal: el mismo para todos los seres vivos
Existen 3 tripletes sin sentido: UAA, UAG y UGA.
Indican el fin de la sntesis
La secuencia de bases se lee secuencialmente
CDIGO GENTICO
Ejemplo de codificacin de un pptido con seis aminocidos

H 2N COOH
TRADUCCIN
Proceso mediante el cual se sintetizan
protenas a partir del ARNm.
En eucariotas tiene lugar en los
ribosomas e interviene adems el Brazo aceptor
ARNr y el ARNt.

Reconocimiento de la aminoacil-
ARNt-sintetasa Lugar de
reconocimiento
del ribosoma
 Activacin del aminocido

aa + ATP
Aminoacil-ARNt-
sintetasa

aa-AMP + PPi

ARNt
Aminoacil-ARNt-
sintetasa

aa-ARNt + AMP
 Iniciacin

Se forma el complejo de iniciacin, constitudo por la subunidad

menor que se une al ARNm, luego se une el primer ARNt que
lleva el aametionina que se ancla en el codn AUG

Hacen falta factores de

iniciacin (protenas)
FI-1, FI-2 y FI3

Posteriormente se une la
subunidad mayor que presenta
las zonas: A (aminoacil) , la P
(peptidil) y E
Elongacin
Entra el 2 ARNt en el centro
A de la subunidad mayor que
porta por ejemplo el aagln
Se forma el enlace peptdico (enzima:peptidil transferasa) entre el
grupo carboxilo de la met. y el grupo amino del 2 aminocido (gln)

Elongacin
El ARNt del primer amincido, met, se libera
 El ARNm junto con las dos subunidades del ribosoma se
desplaza un triplete, (TRANSLOCACIN) en la direccin 5 3,
dejando libre la regin A (aminoacil) para la entrada de otro
complejo aa-ARNt

Intervienen factores de
elongacin
Entrada en la regin A (amianoacil) del complejo Cys- ARNt,
correspondiente al tercer aa, la cystena
Unin del pptido gln-met a la cys
Se libera el ARNt anterior
 El ribosoma se desplaza otro triplete (5---> 3), quedando el
complejo ARNt Cys-Gln-Met en la regin P (peptidil) del
ribosoma
Entrada del complejo ARNt-leu correspondiente al 4
aminocido, la leu.
ste se sita en la regin A (aminoacil)
Unin del pptido met-Gln-Cys con el 4 aa leu. Liberacin
del ARNt-del centro P. El ribosoma y el ARNm se
desplaza a la 5 posicin
Entra el 5 aa la Arginin, ARNt-arg
Unin del pptido Met-Gln-Cys-Leu con eon 5 aa (Arg).
Liberacin del ARNt del centro P. El ribosoma se
desplaza un triplete, es el codn de finalizacin (sin sentido)

UAA, UGA,
UAG.
 Se producen unos factores de liberacin que
interpretan la seal de fin de sntesis.
Liberacin del pptido o protena
Finalizacin

Codn sin sentido

H 2N COOH
Despus de unos minutos los ARNm son digeridos por las
enzimas del hialoplasma
Una

  molcula

  de

  ARNm

  leda

  siultaneamente

 
por

  varios

  ribosomas
 PROCARIOTA
EUCARIOTAS
S

La

  traduccin

  es

  post-transcripcional,

 
Traduccin

  simultnea

  a

  la

 
tiene

  lugar

  despues

  de

  que

  el

  ARNm

  ha

 
trasncripcin

  y

  en

  el

  mismo

 
abandonado

  el

  ncleo.

  transcripcin

  y

 
lugar

  (citoplasma).

 
traduccin

  :

  procesos

  separados

  (tiempo

  y

 
Ribosomas

  de

  70s.

  Los

  ARNr

 
espacio).

 
menores.

 
Ribosomas

  de

  80s.

  Lor

  ARNr

  mayores.

 
El

  ARNm

  tinen

  varios

  puntos

 
El

  ARNm

  solo

  tiene

  un

  punto

  de

  inicio.

 
de

  iniciaicn.

 
El

  primer

  aminocido

  que

  se

  incorpora

 
El

  primer

  aminocido

  que

  se

 
es

  la

  metionina.

 
incorpora

  es

  la

  formil-
La

  caperuza

  es

  la

  seal

  reconocida

  por

  la

 
metionina.

 
subunidad

  menor.

 
El

  ARNm

  no

  tiene

  caperuza.

 
Los

  factores

  de

  iniciacin,

  elongacin

  y

 
termiancin

  son

  diferentes
64
 MUTACIONES

Son cambios que se producen en el material gentico.

Aparecen de manera natural (espontneas) o son
inducidas por agentes mutagnicos (qumicos, fsicos,)
Pueden afectar a las clulas germinales o gametos
(heredables) a las clulas somticas (slo afectan al
individuo)
 MUTACIONES COMO FUENTE PRIMARIA
DE LA VARIABILIDAD GENTICA

Si en un determinado ambiente las mutaciones provocan

cambios beneficiosos en una parte de la poblacin. Este
cambio se mantendr de generacin en generacion , produciendo
la adaptacin de la poblacin a dicho medio. Si no se reproduce
con otras poblaciones de la misma especie ---> otra especie

La evolucin biolgica es el proceso de transformacin de unas

especies en otras mediante una serie de variaciones que se han ido
sucediendo, generacin tras generacin, a lo largo del tiempo.
 CONCEP`TOS CLAVE DE Todos los individuos presentan
LA TEORA DE DARWIN variacin. Algunas son heredables

Todas las especies producen

ms descendientes de los que
Pueden sobrevivir

Existe entre los individuos una

lucha por la supervivencia

Algunos individuos tienen ms

probabilidades de sobrevivir
que otros

La

  supervivencia

  del

  ms

  apto
 Entre 1938 y 1940 surge la Teora Sinttica o Neodarwinismo. En esta
teora se aceptan los principios Darwinistas de la variabilidad de
la descendencia y de la seleccin natural, y se aporta la explicacin
de dicha variabilidad. Adems, se establece el concepto de
poblacin gentica como unidad de evolucin y el concepto gentico
de especie, que sustituy al basado simplemente en las simples
diferencias morfolgicas.
Reproduccin
Reproduccin VARIABILIDAD asexual y sexual
sexual

RECOMBINACIN
Reordenacin de genes,
aparecen nuevos genotipos,
pero no nuevo material
hereditario
MUTACIN
Aparecen nuevos genes. La
mayora son perjudiciales y se
mantienen con una frecuencia
baja dentro de la poblacin,
MUTACIN se produce al azar. Es la base de la
variabilidad y la aparicin de nuevas especies. Es
responsable de que surjan alelos distintos para un
mismo carcter.
Varios alelos/carcter y numerosos caracteres --->
imposible que dos individuos tengan la misma
constitucin gentica ---> gran variabilidad gentica
(poblaciones).
El medio seleccionar aquellos alelos que presenten
ventajas adaptativas ( + sobrevivir---> + reproducirse---
> + descendientes) y de esta manera aumentar su
frecuencia en la poblacin las poblaciones (importante
cuando colonizan nuevas zonas cuando se produce un
cambio medioambiental importante)
La accin progresiva y conjunta de mutacin y seleccin
constituye la base del mecanismo que conduce a la
diferenciacin de las especies

70
71
 TIPOS DE MUTACIONES

MUTACIONES
MUTACIONE
CROMOSMICAS
S GNICAS

NUMRICAS O
GENMICAS ESTRUCTURA
LES

EUPLOIDA ANEUPLOID
A
 MUTACIONES GNICAS: Son aquellas que producen alteraciones
en la secuencia de nucletidos de un gen.

PERJUDICIALES!!!!

SUSTITUCIONES
Transiciones: Se
sustituye una base del
mismo tipo (A->G o
C->T)
Transversin: Sustitucin
de una base por otra
distinta (A->C)
CORRIMIENTO DE LECTURA
Adicciones: insercin de
nucletidos en la secuencia del gen
Delecciones: prdida de
nucletidos
CONSECUENCIAS DE LAS MUTACIONES GNICAS:
Las sustituciones provocan la alteracin de un triplete y salvo
que indique parada o sea un aadel centro activo de una enzima,
no suelen ser perjudiciales. Sin embargo, las adicciones o
delecciones pueden alterar la secuencia de aade la protena y sus
consecuencias suelen ser graves.
 El albinismo es
producido por una
mutacin gnica, que
afecta a la enzima
responsable de la
activacin de la
melanina

La anemia falciforme o
drepanocitosis, se debe al
cambio de un aa(ac.
glutmico por valina) en
una de las cadenas beta.
Esto hace que los glbulos
rojos adopten una forma de
hoz, obstruyendo los
capilares sanguneos
 MUTACIONES CROMOSMICAS ESTRUCTURALES: Son los
cambios en la estructura interna de los cromosomas. Afectan a la
secuencia de los genes.

INVERSIN: un segmento del cromosoma

DELECCIN: cambia de sentido. S separa, gira 180 y se
la prdida de un ensambla. Si incluye el centrmero pericntrica,
segmento del si no lo incluye: paracntrica.
cromosoma. TRANSLOCACIN RECPROCA: el
DUPLICACIN: intercambio de segmentos se produce entre
la repeticin de cromosomas no homlogos.
un fragmento del TRANSPOSICIN: traslacin de un segmento
cromosoma. a otro lugar (mismo cromosoma) o a otro
cromosoma, sin reciprocidad.
 77
!
 CONSECUENCIAS DE LAS MUTACIONES CROMOSMICAS
ESTRUCTURALES:

Puede afectar a la meiosis ( el cambio en la estructura del cromosoma

entropece el emparejamiento)
Los efectos de las delecciones y duplicaciones suelen ser deletreos
(mortales).
Inversiones y translocaciones no suelen tener efecto fenotpico marcado
( tienen el nmero adecuado de genes).
La duplicacin , inversion y translocacin son importantes desde el

Deleccin en el cromosoma 5 provoca el sndrome cri du chat

que se caracteriza por llanto muy agudo, microcefalia, retraso
mental profundo , problemas del lenguaje y retraso del
crecimiento.
Translocacin de un fragmento del cromosoma 21 provoca
sndrome de Dwon familiar.
 MUTACIONES Cromosoma 2
CROMOSMICAS NUMRICAS O
GENMICAS:

  Son

  alteraciones

  en

  el

  nmero

  de

 
(metacntrico)
cromosomas

  propios

  de

  una

  especie.

  humano--->
Causas:

  segragacin

  anormal

  de

  cromosomas

  o

  fusin de dos
cromtidas

  durante

  la

  meiosis.

  Fusin

  o

  cromosomas
fisin

  de

  cromosomas. acrocntricos.
Especie
humana 23
pares y
EUPLOIDA: afecta al nmero completo de juegos orangutanes y
de cromosomas (dotacin cromosmica) chimpancs 24
Monoploida: Si las clulas presentan un juego n de
pares
cromosomas ( los gametos son n , no se considera
mutacin)
Polipoloida: si presentan ms de dos juegos de
cromosomas, triploides (3n), tetraploides (4n),...
 i Triploid
Diploid Triploid Tetraploid e

 
e

  e

  e

 
 ANEUPLOIDA: slo afecta a una parte del juego cromosmico
y el zigoto presenta cromosomas de ms o de menos.
Puede afectar a los autosomas o heterocromosomas
Monosoma: Si falta uno de los cromosomas de una pareja de
homlogos (2n-1)
Trisoma: si tienen tres cromosomas en lugar de dos (2n+1)
Tetrasoma: si tiene cuatro (2n+2)

CONSECUENCIAS DE LAS MUTACIONES GENMICAS (CROMOSMICAS

NUMRICAS):

Individuos no viables o enfermedades importantes.

AUTOSOMAS

Retraso

 
mental

 
Rostro

  con

 
aspecto

  oriental

 
Enfermedad

 
cardiaca

 
congnita.

 
Retraso

  en

  el

 
cricimiento

Trisoma

  en

  el

  par

  21
AUTOSOMAS

Retraso

  mental

  Trisoma

  en

  el

  par

  18
Retraso

  en

  el

  desarrollo.

 
Hipertensin
 HETEROCROMOSOMA

Aspecto eunicoide, escaso desarrollo de las

gnadas
HETEROCROMOSOMAS

Aspecto hombruno, atrofia de ovarios,

enanismo
Estudios genticos
para detectar
anomalas
cromosmicas:
Amniocentesis
87
 AGENTES
MUTAGNICOS

MUTGENOS: agentes fisicos (temperatura, radiacin...),

qumicos (gas mostaza, cido nitroso,...)o biolgicos
(transposones, virus,...) que causan mutaciones (alteraciones en el
ADN).

88
MUTGENOS ENDGENOS: producen mutaciones espontneas

METABOLITOS REACTIVOS:
- Radicales libres
- Productos finales de la
glucosilacin avanzada
(AGE).
FLUCTUACIONES TRMICAS:
- Despurinacin (prdida de
bases pricas)
- Desaminacin (transformacin
del grupo amino de una base, en
grupo ceto)

ERRORES DE APAREAMIENTO:
TRANSPOSICIONES: - Frecuencia baja, un error por
genes saltarines cada 1010 pares de bases
89
 MUTGENOS EXGENOS: producen mutaciones inducidas

BIOLGICOS:
Oncovirus (virus animales) capaces de desarrollar
cncer.
Virus de la hepatitis B y C: cncer hgado
Papilomavirus, virus del herpes genital: cncer de
cuello de tero.
Virus de Epstein-Barr (causante de la
mononucleosis infecciosa) predispone al linfoma
de Burkitt y carcinomas nasofarngeos.
La bacteria Helicobacter pilori (causante de lceras
gstricas) relacionada con cncer de estmago.
90
FSICOS:
Radiciones ionizantes:
energticas, ionizan los atomos de las sustancias
( longitud de onda corta)
Rompen anillos nitrogenados, enlaces fosfodiester
( ruptura del ADN)
Rayos X, gamma partculas alfa, beta, neutrones.
Radiaciones no ionizantes: muy energticas. Los
electrones saltan a niveles energticos superiores,
facilitando la formacin de enlaces covalentes: dmeros
de timina.
Favorecen las formas tautmeras que dan lugar a
transiciones (mutacin gnica)

91
QUMICOS: reaccionan con el ADN
Modificaciones de bases nitrogenadas: cido
nitroso (desaminacin), gas mostaza (aade
grupos metilo, etilo,...), hidroxilamina (aade
grupos hidroxilo).
Sustitucin de una base por otra (anlogos): 5-
bromouracilo, sustituye a la timina.
Intercalacin de molculas: sustancias que se
intercalan entre dos bases, como los colorantes
(proflavina, naranja de acridina)o entre dos
cadenas de ADN, como los benzopirenos
( humo del tabac, carne a la brasa, caf
torrefacto,..)
OTros: asbesto (asilante construcin), cromo y
cadmio (pinturas), dioxinas (combustin de
PVC y plsticos) V. Yushchenko, rostro
desfigurado por el acn clrico.
BIOTECNOLOGA

93
 Es un conjunto de tcnicas que utilizan las
potencialidades de los organismos vivos o de
compuestos procedentes de ellos (enzimas), para la
obtencin de productos, bienes y servicios.

La biotecnologa empez hace aos

con los procesos de fermentacin
bacteriana para obtener alcohol, pan
queso, yogures...Actualmente las
tcnicas son ms complicadas como
la reprogramacin nuclear, clonacin,
aotecnologa..
Las aplicaciones son
diversas en el campo de
la medicina,
agricultura, ganadera,
procesos industriales,...
94
95

INGENIERA
GENTICA
Los organismos transgnicos:
ADN recombinante: formado
por la unin de fragmentos de
ADN de diferentes
organismos (in vitro)
Los mtodos de trabajo de la
ingeniera gentica son
conocidos como tcnicas del
ADN-recombinante.
Tcnicas que manipulan el ADN de los
organismos. Consisten en
introducir nuevos genes en el
genoma de un individuo que
careca de ellos. Se obtiene un
organismo genticamente
modificado (OMG)
aquellos a los que se les ha
insertado algn gen (transgen) de
otro organismo
96
 LAS TIJERAS Y EL PEGAMENTO MOLECULARES

Endonucleasas de restriccin: son enzimas Las ADN ligasas

(obtenidas de bacterias )que cortan el son enzimas-
ADN en puntos concretos y en secuencias pegamento que
determinadas (secuencias de reconocimiento),
unen los extremos
son autnticas tijeras biolgicas. Dan lugar
cohesivos de
a extremos cohesivos (pegajosos). La
mayora de sitios de restriccin son fragmentos de
simtricos ( la secuencia de nucletidos es la ADN generados
misma en ambos sentidos) es decir secuencias por las
palindrmicas. endonucleasas de
Los extremos cohesivos posibilitan la restriccin mediante
formacin de ADN-recombinante pues
la formacin de
se pueden unir a otros fragmentos de
ADN cortados por la misma enzima de enlaces covalentes
97
restriccin.
LA CONSTRUCCIN DE UN ADN
RECOMBINANTE

98
 TCNICA DE LA - Averiguar el grado de parentesco
HIBRIDACIN entre especies.
- Detectar secuencias complementarias.
- Localizar genes (enfermedades)

Se basa en la propiedad del ADN de

desnaturalizarse a T o pH elevados,
debido a que los puentes de hidrgeno
de las dos cadenas se rompen,
quedando las dos hlices
desenrolladlas y separadas. Como
sabemos este proceso es reversible
renaturalizacin. En el laboratorio se
pueden hibridar ADN de diferentes
orgenes 99
En ingeniera gentica esta tcnica se usa para detectar
genes relacionados con enfermedades genticas

100
 OBTENCIN DE VARIAS COPIAS DE ADN

Introducir el fragmento de ADN en un organismo u hospedador

(bacterias, levaduras). Al reproducirse el organismo ( asexual) se
multiplicara tambin el ADN introducido ---> clonacin

Tcnica de la PCR (reaccin en cadena de la polimerasa): a partir

de poca cantidad de ADN obtener en un tubo de ensayo y en poco
tiempo muchas copias del fragmento. (en una tarde a partir de una
molcula de ADN---> 100.000 millones de molculas idnticas)

- En estudios evolutivos.
- obtener huellas dactilares genticas.
- Medicina forense
- Investigaciones policiales 101
 TCNICA DE LA CLONACIN

Vectores de clonacin
Caractersticas del hospedador:
Caractersticas:
- Llevar su propio origen - Crecimiento rpido
de replicacin. - No debe ser patgeno
- Debe favorecer la entrada del transgn.
Llevar genes marcadores - Facilmente manipulable
(de resistencia a
antibiticos, o
productores de
bioluminiscencia).
Pueden ser: Mediante la clonacin se obtienen
plsmidos, csmidos, colecciones de clones que forman
fagos. las genotecas de ADN.
Referido al ADN,
102
 TCNICA DE LA CLONACIN

Son los medios

VECTORES DE CLONACIN
Deben llevar su propio origen de
replicacin y unos marcadores (genes
de resistencia a antibiticos o genes
que produzcan bioluminiscencia)
biolgicos que se emplean
para introducir material
gentico en una clula
Los vectores ms
frecuentes son plsmidos,
csmidos y bacterifagos

Plsmidos: pequeas molculasde circulares de ADN bicatenario ,

fuera del cromosoma bacteriano que se duplica autnomamente y de
manera independiente del ADN bacteriano.
103
 ETAPAS DE
LA CLONACIN
1 Seleccin del fragmento de
ADN.
2 Obtencin del plsmido
recombinante
3 Transformacin de las
bacterias
4 Seleccin de las bacterias
transformadas
5 Crecimiento en un cultivo de
las bacterias transformadas
5 Aislamiento de los
plsmidos y las copias del
gen

Genoteca:

  conjunto

  de

  todos

 
los

  fragmentos

  de

  ADN

  104
clonados

  a

  partir

  de

  un

  genoma
 OBTECIN DEL PLSMIDO
RECOMBINANTE

1.- Obtenemos el gen(color rojo)

que interesa insertar en un
plsmido (color turquesa)
2 2.- Con una enzima de restriccin
se corta el gen y el plsmido,
quedando unos bordes cohesivos o
pegajosos.

3.- Mediante las enzimas ADN ligasas se une el fragmento que contiene el
gen que nos interesa y el plsmido
4.- El resultado es una molcula de ADN recombinante, ya que contiene
fragmentos de ADN de distinta procedencia. 105
 APLICACIONES DE LA
INGENIERA GENTICA

106
 EN AGRICULTURA
OMG: Organismos a los
cuales se les ha introducido
genes extraos.
En una planta se puede
introducir ADN procedente de
otra especie (planta, animal,
bacteri), obteniendo plantas
transgnicas con diferentes
caractersticas
Qu se pretende?
Plantas resistentes a
herbicidas.
Conseguir una mayor
productividad en los cultivos
Plantas resistentes a
insectos
Plantas que resistan
condiciones ambientales
adversas (heladas, sequas,...)
Mejorar las caractersticas
nutritivas del producto
107
 Cmo


 se


 introducen


 genes


 en


 clulas


 veget
ales?
Se utiliza una bacteria del suelo el plsmido Ti de Agrobacterium
tumefaciens, que es capaz de infectar clulas vegetales y
trasnferirles sus genes. Produce tumores agalla de la corona.
Esta bacteria presenta un plsmido Ti (vector de clonacin).
La bacteria trasnfiere un fragmento del plsmido Ti y lo integra en
el cromosoma de la clula. Se denomina ADN-T

Produccin

  de

  plantas

  trasngnicas
TRANSFORMACIN: Proceso de insercin en la clula vegetal del
gen o genes que interesan.

REGENERACIN: Obtencin de una planta completa a partir de una

clula vegetal trasnformada
108
 e c h aun

  herbicida no selectivo queOBmata
TENCIa las plantas
El glifosato
a

  c o s es
N

  DE

  PL
e

 


  d unaorenzima u n

  ANTde
porquel

  1 0 %
inhibe p

  las (EPSP sintasa) implicada enRel
E S I S T
metabolismo
E AS

 
E i e r d e

  NT ES

  AL

 
se

  p e rb as GLIFOS
los aminocidos.

  hi ATO
malas
Las plantas tolerantes a este herbicida tienen una variante de gen
de la cepa CP4 de Agrobacterium

  tumefaciens, resistente al glifosato.
Mediante la tcnica de clonacin se ha aislado el gen y se ha
introducido en el genoma de las plantas, volvindose estas resisitentes a
este herbicida.

1 Introduccin del gen en regin T del plsmido de Agrobacterium.

2 Introduccin en las clulas vegetales.
3 Seleccin de las clulas resistentes al herbicida(clulas
trasnformadas)
4 Obtencin de plasntas transgnicas completas (regeneracin)
109
 EN MEDIO AMBIENTE

La accin descomponedora y la
capacidad de transformacin de
L as

  bacterias

  son

  los

 
la materia por los
microorganismos es utilizada
organismos

  con

  mayor

 
en la lucha contra la capacidad

  metablica

  .

 
contaminacin del medio Degradan

  prcicamente

  todo

 
ambiente. Esta aplicacin recibe (

  aerobiosis

  y

  anaerobiosis):

 
el nombre de biorremediacin. y -Mineralizacin

 
consiste en utilizar la actividad -Biotorasnformacin

 
biolgica de los - S u s t a n c i a s

 
microorganismos para restaurar recalcitrantes
ambientes contaminados 110
 EN MEDIO AMBIENTE BIORREMEDACIN

 
-

  In

  situ

 
-

  Ex

  situ

  (biorreactores)

1- Biodegradacin del petrleo : bacterias , mohos y levaduras son

capaces de oxidar los hidrocarburos y hacer desaparecer las manchas
de petrleo en el mar o en las costas.
2- Biodegradacin de los compuestos y sustancias qumicas de
origen industrial que no han existido en la naturaleza: plsticos y
similares usados en embalajes, como poliuretano, poliestireno .o de
plaguicidas, herbicidas, fungicidas usados en agricultura.
3- Metales pesados ( bioacumulativos) son difciles de
biorremediar por m.o. Se utiliza la fitorremedacin (plantas
trasngnicas) que concentran estasa toxinas en las partes areas
(eliminar o reciclar en usos industriales)
111
 EN MEDICINA
Terapia genica: eliminar el
gen anmalo, o introducir
mediante virus el gen no
anmalo (manipulacin Actualmente gracias a la
gentica).
Tratamiento: enfermedades,
como la distrofia muscular o
la fibrosis qustica.
Obtencin de productos
far macticos: algunas
hormonas (insulina,
hormona del crecimiento) y
protenas de la sangre
tienen un inters mdico y
comercial extraordinario.
tecnologa del ADN
recombinante, se clonan los
genes de estas protenas en
microorganismos adecuados
para su fabricacin
112
comercial
 PRODUCCIN DE INSULINA
HUMANA

Produccin de un
precursor de la
hormona , la
proinsulina, que
mediante mtodos
qumicos se transforma
en insulina.
Produccin de las
cadenas A y B por
separado y su unin
posterior para formar
la insulina

113
 Se fabrica ADN sinttico (63 bases) que codifica la cadena
Produccin
A y el fragmento (90 bases) de insulina
de la cadena B humana
+ triplete de met +
fragmentos especficos
La forma activa de enzimas
de la insulina constade
derestriccin.
dos polipptidos (A y B), que estn
codificados por partes separadas de un mismo gen. Estos se pueden obtener
Cada bacterianos
en cultivos polinucletido se inserta por separado en un plsmido de
separados.

E.coli que contiene el genProtena

de la de fusin con subunidad A
B-galactosidasa.
Promotor del gen de la insulina
Se insertan por separado en cultivos de E.coli
Al expresarse se obtienen protenas de fusin (ms estables):
Subunidad
cadena A del
de insulina A o B unidas a una cadena de B-galactosidasa
gen de la insulina
Extraccin de
por un resto de met.
Transformacin
las protenas de
Separacin de
en E. coli los polipptidos
fusin A y B la met
Se tratan
Promotor con bromuro ciangeno (BrCN) que destruye
Quedan libres las cadenas A y B
Se purifican Formacin
Protena de fusin
de insulina
Se unen qumicamente con subunidad
(oxidacin) B del
y se establecen los puentes de
Subunidad B del activa
gen de la insulina 114
gen de la insulina
disulfuro. Se obtiene la insulina activa.
 ENLACE

  DE

  INTERS

  SOBRE

  CLONACIN

 
HUMANA

http://recursostic.educacion.es/ciencias/biosfera/web/alumno/
2bachillerato/biotec/actividades/presentaclon/clonhumano.htm

115