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PRODUCCIN DE INSULINA A PARTIR DE

ORGANISMOS BACTERIANOS:
ESCHERICHIA COLI
Carlos Alberto Jibaja Snchez
2017
INSULINA
Insulina
La insulina es una
hormona polipeptdica
formada por 51
aminocidos, producida
y secretada por las
clulas beta de los
islotes de Langerhans
de la glndula
denominada pncreas.
Insulina
La insulina ayuda a que
los azcares obtenidos
a partir del alimento que
ingerimos, lleguen a las
clulas del organismo
para suministrar
energa.
Permite disponer a las
clulas de la glucosa
necesaria para que
podamos movernos,
manteniendo su
concentracin regular
en nuestra sangre.
Estructura de la insulina
La insulina es una
hormona de naturaleza
proteica formada por 2
cadenas polipeptdicas
que en total tienen 51
aminocidos: cadenas A
tiene 21 aminocidos y la
cadena B que tiene 30
aminocidos, unidas por
puentes disulfuro
establecidos entre varios
residuos de cistena.
Produccin de insulina en el ser humano
DIABETES
Diabetes
La diabetes es una enfermedad en la que
los niveles de glucosa (azcar) de la sangre
estn muy altos y el cuerpo no puede
regularla y por ello no puede movilizarla
desde la sangre hasta el msculo y a las
clulas de grasa para quemarla o
almacenarla como energa.

Esto se debe a que:

El pncreas no produce suficiente insulina


Las clulas no responden de manera normal a la
insulina
Ambas razones anteriores
Tipos de diabetes
Diabetes tipo 1 Diabetes tipo 2

En esta enfermedad, el Es mucho ms comn. Con


cuerpo no produce o la diabetes tipo 2, el cuerpo
produce poca insulina. Esto es resistente a la insulina y
se debe a que las clulas no la utiliza con la eficacia
que debera.
del pncreas que producen
la insulina dejan de trabajar. La diabetes gestacional es el nivel
Se necesitan inyecciones alto de azcar en la sangre que
diarias de insulina. La causa se presenta en cualquier
exacta se desconoce. momento durante el embarazo en
una mujer que no tiene diabetes.
PRODUCCIN DE
INSULINA ALTERNATIVA
Produccin de Insulina Alternativa
Insulina Animal
Durante muchos aos la insulina
que se ha empleado para el
tratamiento de la diabetes, se
extraa del pncreas de diversos
animales, principalmente del
buey (Insulina bovina), y sobre
todo del cerdo (Insulina porcina).
La insulina porcina es casi
idntica a la insulina humana y
posee el mismo efecto sobre el
azcar en sangre.
Produccin de Insulina Alternativa
Usando Escherichia coli mediante ADN
Recombinante
Produccin
por separado
En el ao 1978, gracias al de la cadena
AyB

desarrollo de la ingeniera
gentica se consigue la
sntesis de la insulina
mediante tcnicas Transferencia y
Clonacin del

biotecnolgicas. gen Insulina


La Escherichia coli
La Escherichia coli (E.
coli) es un bacilo gram-
negativo de la familia de Caractersticas de la Escherichia coli

Tipo de reproduccin Fisin Binaria o Biparticin


las enterobacterias que Temperatura del entorno 35C 43 C

se encuentra en el tracto Tiempo de reproduccin 20 minutos

Temperatura lmite de crecimiento 7C


gastrointestinal de Temperatura de eliminacin 70C

humanos y animales de pH 7.2

Actividad del agua (aw) 0.99


sangre caliente. pH para detener el desarrollo inferiores a 3.8, o superiores a 9.5
Actividad del agua (aw) para detener
inferiores a 0.94
desarrollo
MTODOS PARA OBTENER
INSULINA RECOMBINANTE
1.Produccin por separado de las cadenas A y
B de la Insulina Plsmido pBR322
Consiste en mostrando algunos
producir por sitios de restriccin
tiles para la
separado ambas clonacin.
cadenas para,
posteriormente
asociarlas
qumicamente y Gen A y Gen B
producir insulina de la insulina
dentro de un
activa. plsmido
1.Produccin por separado de las cadenas A y
B de la Insulina
2.Transferencia y Clonacin del gen Insulina
Se basa en la produccin de
pre-proinsulina que es
procesada hasta insulina
madura mediante mtodos
enzimticos.

Si bien estos son los pasos a


seguir para la obtencin de
insulina recombinante, al
insertar en el plsmido
bacteriano el gen entero de la
insulina, se obtendra como
resultado la pre-proinsulina.
Humulin, frmaco obtenido por la accin del
ADN Recombinante
El resultado es una
insulina humana
(denominada
comercialmente Humulin),
ms barata de producir,
potente y segura, ya que
no muestra los problemas
que producan las
homlogas animales.
Otras Alternativas
Cientficos argentinos han
obtenido vacas transgnicas que
producen leche enriquecida en
pro-insulina humana, que evitaran
tener que purificar la protena,
pues nicamente habra que
consumir la leche.
As mismo ocurre con el crtamo
(Carthamus tinctorius L., azafrn
bastardo), que se ha modificado
para que produzca insulina
humana en sus semillas.
Produccin de la insulina recombinante
La produccin de insulina humana en E.
coli a partir de 1980 y su aprobacin para
uso clnico en 1982 revolucionaron la
biotecnologa.
La insulina es el primer caso de protena
producida por ingeniera gentica, esto fue
posible por el desarrollo de tcnicas que
permitieron transferir informacin gentica
de un organismo a otro y expresar esa
informacin en el organismo husped.
CONCLUSIONES
Conclusiones
La insulina ayuda a que los azcares obtenidos a partir
del alimento que ingerimos lleguen a las clulas del
organismo para suministrar energa.
Anteriormente, la insulina que se ha empleado para el
tratamiento de la diabetes, se extraa del pncreas de
diversos animales, principalmente la Insulina bovina, y
sobre todo la Insulina porcina. La insulina porcina es casi
idntica a la insulina humana y posee el mismo efecto
sobre el azcar en sangre.
Conclusiones
Existen dos rutas para la obtencin de insulina humana
utilizando microorganismos modificados por ingeniera
gentica: Produccin por separado de las cadenas A y B de la
Insulina y Transferencia y Clonacin del gen Insulina.
La produccin por separado de las cadenas A y B de la
Insulina, consiste en producir por separado ambas cadenas
para, posteriormente asociarlas qumicamente y producir
insulina activa.
La transferencia y clonacin del gen Insulina, se basa en la
produccin de pre-proinsulina que es procesada hasta insulina
madura mediante mtodos enzimticos.

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