COCOS GRAM NEGATIVOS AEROBIOS Neisseria spp. Moraxella spp.

En esta clase se habla de Neisseria y Moraxella juntas porque antes estaban en la misma Familia.

CLASIFICACIN BACTERIANA

Dominio: Bacteria, Phylum: Proteobacteria (Es el ms abundante de los aerobios de los que uno identifica), Clase: Beta
proteobacteria, Orden: Neisseiales, Familia: Neisseriaceae, Gnero: Neisseria.

Dominio: Bacteria, Phylum: Proteobacteria, Clase: Gamma proteobacteria, Orden: Pseudomonadales, Familia:
Moraxellaceae, Gnero: Moraxella; antes tena otro nombre que era Branhamella.

En la tincin de Gram se observa: cocos, diplococos o dispuestos en cadenas cortas.

Neisseria spp.

No se movilizan, no tienen flagelos, No producen exotoxinas y producen colonias pigmentadas que no son patgenas: N.
flavescens, N. sicca y N. subflava. Las Fastidiosas estn relacionadas con las infecciones humanos (En cuanto a los
requerimientos que necesitan para crecer): N. meningitidis y N. gonorrhhoeae. Producen citocromo oxidasa y catalasa,
menos N. elongata subsp. Elongata y N. elongata subsp. Nitroreducens. No fermentan los carbohidratos, los oxidan. La
mayora se disponen como diplococos Gram negativos, tiene apariencia en forma de granos de caf, otros son bacilos
cortos (N. elongata, N. weaveri y N. bacilliformis que no son patgenos, son flora normal). Se pueden encontrar solos,
pares o cadenas cortas.

Esta es una imagen en microscopia electrnica.

N. elongata (Bacilos) y N. gonorrhoeae en contacto sobre clulas epiteliales. Ellas primero se

adhieren a las superficies de las clulas epiteliales y luego provocan la endocitosis por receptor.

Hay especies en los seres humanos y en los mamferos y estn ubicados en el tracto respiratorio superior. En los
mamferos la mayora de las Neisseria son flora normal y slo hay una que puede ser patgena (N. weaveri) N. animalis,
N. animaloris, N. zoodegmatis, N. denitrificans, N. dentiae, N. macacae, N. weaveri. Y en el humano patgena (N.
gonorrhoeae) y respecto a N. meningitidis puede ser de flora normal, pues hay gente que es portadora de ella. N.
gonorrhoeae, N. cinrea, N. elongata, N. flavescens, N. lactamica, N. meningitidis, N. mucosa, N. polysacharea, N. sicca,
N. subflava. Los que son portadores de N. meningitidis no causa infeccin pero pueden llegar a transmitir la enfermedad
a otras personas y esas personas llegar a enfermarse y generar algna enfermedad, dependiendo de la condicin del
paciente (Cmo sea su respuesta inmune). Todas las especies mencionadas se encuentran en el tracto respiratorio
superior.
Hay algunas Neisserias que estn relacionadas con animales, en el ejemplo de N. weaveri que se encuentra en la boca de
los perros y al morder a una persona puede infectarla.

Las Neisserias no patgenas pueden llegar hacer patgenas como una endocarditis o bacteriemia solo cuando son
oportunistas.

Neisseria gonorrhoeae.
Este es un Gram. Necesitan ser intracelulares para poder multiplicarse. Lo comn es ver los diplococos dentro de los
neutrfilos, pues son clulas que las han fagocitado. Cuanto ms observemos diplococos intracelularmente se habla de
una infeccin aguda. Unos cuantos estn extracelulares.

CLASIFICACIN DE LAS CEPAS DE N. gonorrhoeae.

Auxotipificacin (condiciones nutricionales, la bacteria me va a crecer si al cultivo le agrego: PAU: Prolina,

Citrulina (Arginina) y Uracilo. AHU: Arginina, Hipoxantina y Uracilo ++, prevalente ++.
Serologa: Ac. Polivalentes: los podemos clasificar por serogrupos A, B y C debido a que las clulas son
capsulados. Coagutiacin: WI, WII++ (mas epidemiolgica), WIII. Anticuerpos monoclonales segn la resistencia
a los antibiticos: Tipos 1, 5, 7-9 ( a venido aumento).

Perfiles plasmdicos: se han clasificado 5 tipos de perfiles que dependen si tienen resistencia a betalactamasas y 2de
conjugacin tetraciclinas)

De los pacientes que se han estudiado del 30-40% tienen de 6-8 clases esas tipificaciones de N. gonorrhoeae.

FACTORES DE VIRULENCIA: Tiene poco peptidoglicano en comparacin con un Gram positivo. Tiene una membrana
citoplasmtica, peptidoglicano, espacio periplsmico, membrana externa, tiene protenas transmembranales, tiene
porinas (importantes para la entrada y salida de metabolitos y antibiticos que entran fcilmente por este sistema), tiene
fimbrias, tiene Pili. Tiene un Lipooligosacrido que es muy importante y es muy semejante al de los bacilos Gram
negativos, pero Qu es lo diferente, qu tiene un lipopolisacrido? Tiene el Antgeno O, tiene cadenas ramificadas de
sacridos y hacia el interior tiene lpido A, Cord; se diferencia del de los bacilos Gram negativos en que ste es sencillo,
no es ramificado. La importancia clnica del Lpido A es que tiene el poder de endotoxina, pues se libera, activa todo el
complemento y genera toda una respuesta. Tiene unas protenas que captan hierro cuando lo necesita, se unen a
Lactoferrina, Transferrina o a la Hemoglobina. Tambin tiene un Pili (Factor ms importante, cepas virulentas, tiene alta
capacidad de cambio mutagnico, por eso para N. gonorrhoeae no se ha podido crear una vacuna) Para qu sirven los
Pili? Conjugacin, intercambio gentico, y adhesin cuando se encuentra con las clulas epiteliales; est compuesto
de Pilina que es la protena que es muy variable y esa variabilidad es la que le da la virulencia o no a determinadas cepas,
pues no todas las cepas son iguales de virulentas y alta capacidad de cambio mutagnico.Tiene Fimbrias que le ayudan
en la adhesin. Otras importantes son las Protenas de la membrana citoplasmtica externa que son las OMP. Plasmidos
ayudan: la posibilidad de producir -lactamasa, pues son enzimas que rompen los anillos -lactmicos de los antibiticos
(Las Penicilinas tienen anillos -lactmicos y resistencia a tetraciclinas); las cepas virulentas producen unas proteasas
contra la IgA (est en mucosas, defensa natural) para establecerse y formar la inflamacin. SIN CAPSULA.
 Tambin se ha visto que hay un tipo de cepa que est ms relacionadas con virulencia que son las cepas auxotipo
Arginina-Hipoxantina-Uracilo. Las cepas auxotipo son aquellas que crecen bajo determinadas condiciones del medio, baja
tensin de oxgeno y supervivencia en condiciones anaerbicas.

Entonces diferentes protenas de la membrana externa, las OMP se clasifican a su vez en: PorB (I), OPA (II), Rmp (III).

PorB (I): PIA y PIB: Porinas. Clasificacin de 16 serotipos. Resistencia a la actividad bactericida srica, resistencia
a antibiticos, expresin de proteasas IgA 1, invasin hematgena, permite auxotipificacin. Previene unin
fagolisosoma.
OPA (II): Adherencia a las clulas eucariotas de los cultivos y a los polimorfonucleares.
Rmp (III): Se asocia con los lipooligosacridos y a las PI (Pe uno), provoca variacin antignica, causan dao en
mucosas y libra enzimas como fosfolipasas y proteasas y estimula produccin de TNF.

Estas Neisseria tienen plsmidos de conjugacin (portadores de resistencia) que se han involucrado con resistencia a
antibiticos: sintetizan betalactamasas, genes de resistencia a tetraciclina (Tn tetM). DNA puede realizar mutaciones
cromosomales relacionadas con resistencia a betalactmicos. Lo ms importante de estos plsmidos es que se pueden
conjugar y transmiten la virulencia.

Las OMP (Proteinas de sistema de membranas) son importantes para que la bacteria llegue y se adhiera a las clulas
epiteliales o a las neutrfilos. Las Neisserias pueden viajar adheridas a neutrfilos o a diferentes monocitos) .

LOS PLASMIDOS PASAN POR EL PILIN, TENER EN CUENTA.

EPIDEMIOLOGA Y TRANSMISIN: N. gonorrhoeae Es patgeno, nico hospedero es el hombre. Si hubiera conciencia

de promocin y prevencin se acabara la gonorrea.

Transmisin: Puede ser:

Sexual: Infecta mucosa de uretra, crvix, recto y faringe.

Vertical: Infecta mucosa del ojo del recin nacido en el momento del parto.

Cuando se encuentra en menores se asocia con abuso., se debe tener mucho cuidado al realizar el Dx

Est ligeramente aumentado en hombres y en adolescentes y adultos jvenes entre 15 y 24 aos.

MECANISMOS DE INFECCIN DE N. gonorrhoeae. Lo ms involucrado es la parte de la respuesta inmune celular.

Muchos signos clnicos de la infeccin se deben al aumento de la respuesta inflamatoria por: Migracin leucocitaria,
Activacin del complemento en el sitio de la infeccin, Efectos citotxicos directos a nivel celular. Se puede hallar en
Macrfagos, Clulas dendrticas y Clulas T CD4. En los macrfagos ella puede activar la respuesta innata, activando la
quimiotaxis de los polimorfonucleares, internalizndose y multiplicndose dentro de ellas.

Esta bacteria llega principalmente a uretra masculina y en la mujer en la parte endocervical, aqu tenemos un epitelio no
ciliado sino mucoso, se adhiere y se multiplica en la clula y posteriormente produce la endocitisis pos receptor y pasa a
la parte subepitelia, una vez en este lugar empieza a multiplicarse y a producir la endotoxina que es el ligopolisacarido.
Para que se creen los signos clnicos de la infeccin es importante la recuperacin leucocitaria (la respuesta innata).

En los macrfagos la N. gonorrhoeae se internaliza y provoca una respuesta de citoquinas en la cual,la primera respuesta
es de inflacin activando la IL-1beta y tambin permite que se active la catepsina b para suprimir la inmunidad innata.
Por medio de las citoquinas permite que se activen unas celular TH17 que provocan como respuesta Il-17 y 22 que como
respuesta a nivel del tejido lo que hacen es llamar ms neutrfilos y pptidos antimicrobianos. Las clulas dendrticas a
su vez suprimen la respuesta Th1 y Th2 inhibiendo la proliferacin y activacin de clulas T. Las clulas T CD4 lo que
hacen es suprimir tambin la respuesta Th1 y Th2 activando la IL-17 : suprimiendo la proliferacin de inmunidad innata
haciendo que se acumulen ms neutrfilos, clulas monociticas

Hay factores que pueden prevenir, pues hay algunas personas que les puede o no dar la enfermedad, pues hay factores
que pueden proteger. Cules son los factores protectores? A nivel humoral: Anticuerpos en mucosa y suero:
Especificidad, actividad bactericida; Factores celulares: Th1, polimorfonucleares y macrfagos. Polimorfismos del
receptor: Adherencia, receptores de invasin: CR3, CEACAMs, ASGPR, Receptores inmunes: TLR, PRR, Lectinas; pues no
hay receptores para los Pili. Tambin en las etapas del ciclo menstrual, por los cambios en el epitelio y por los niveles de
estrgeno (Mujeres en estado frtil). Hay diferentes factores solubles en el suero: Complemento, pptidos
antimicrobianos y la microbiota vaginal.

Cules son las principales afecciones que causa N. gonorrhoeae? En las mujeres lo ms comn es la cervicitis, pues
una vez la mujer se infecta, se localiza en la crvix, pues no se localiza en la vagina porque ella necesita ese tipo de
epitelio. Cuando la enfermedad es crnica puede llegar a producir vulvo-vaginitis y en los hombres produce uretritis y
como complicaciones se puede ser la epididimitis y en la mujer ser endometritis, salpingitis. En algunos por sus
prcticas sexuales se habla de proctitis; y la bacteria ms que todo en complicaciones en mujeres puede llegar a
extenderse al peritoneo y causar peritonitis e incluso llegar a hgado y causar una perihepatitis, lo que causa un sndrome
de Fitz-Hugh-Curtis. En muy pocas ocasiones se puede ver en faringe, pero no por diseminacin sino por prcticas
sexuales. A nivel de diseminacin puede causar Meningitis, Endocarditis, Dermatitis, Artritis sptica.

De la parte de la infeccin vaginal un 10% son asintomticos, pero los sintomticos son los hombres, porque
tienen disuria y secrecin muy purulenta.
Si es infeccin rectal el 80% de hombres son asintomticos. Si no se trata esta puede diseminarse y se relaciona
con la deficiencia de C7, C8 y C9 del complemento. El principal sitio de diseminacin es en articulaciones,
produce unas polialtrialgias, codos, tobillos y tambin producir una dermatitis (El paciente llega con una
ppula, pstula y ser una neisseria diseminada.
Tiene un periodo de incubacin de 2-5 das. En las mujeres en la endo-crvix que puede concomitar con la
cervicitis y Vulvovaginitis.
Otra entrada de Neisseria Gonorreae es en faringe, pero lo diferente es que ac puede ser asintomtico. Si llega
con infeccin en faringe hay que buscar inmediatamente en tracto genital.
Infeccin ano-rectal: Asintomtica.
Complicacin en hombres: epididimitis
En hombres podemos tener alta supuracin porque se suprime la respuesta inmune y hay una gran cantidad de
neutrfilos se produce la purulencia. Tenemos que llegar a endocervix y observar la lesin.

Complicaciones en el hombre cuando no se trara: epididimitis aguda, edema peneano o a nivel de glndulas accesorias
se producen inflamaciones

Otra complicacin en las mujeres es la EPI que da entre 8-10%. Ella se encuentra a nivel del cuello y empieza a
multiplicarse, a invadir y a producir la vulvo-vaginitis diseminacinandose por todo el aparato genital. Algunas pacientes
pueden llegar con inflamacin de las glndulas de Bartolino. (Embarazos ectpicos) . La diseminacin empieza de la
mitad hacia abajo (vaginal) , una vez se completa, empieza nuevamente hacia arriba, hasta llegar a trompas, endometrio
y se relaciona con los embarazos ectpicos.

En mujeres que son de edad madura o nias que tienen el epitelio cornificado no se pueden adherir al endocervix y
buscan las glndulas accesorias, por eso podemos encontrar las glndulas anexas con inflamacin y abscesos.

La infeccin diseminada se ha visto relacionada con problemas en el complemento, aquellos que tienen deficiencias en
C7, C8 y C9; sntomas: Artritis difusa en pies, manos y tobillos, dermatitis maculopapulosa, eritematosa y lo menos
comn endocarditis y meningitis. En esas lesiones se pueden aislar Neisseria.

En los casos de hemocultivo, no colocar mucho anticoagulante porque eso puede llegar a inhibir al microorganismo.
Puede llegar al ojo, pero es por un auto inoculacin por exposicin orogenital. En los bebs causa una Oftalmia
neonatorum, que es una conjuntivitis purulenta y de ah se asla al microorganismo. Si no es detectado de manera
oportuna, el neonato puede presentar problemas respiratorios e incluso meningitis.

Lo que se busca es controlar la conjuntivitis.

Nios recin nacidos: neunonia por Neisseria gonorrea y lo principal conjuntivitis

Es una enfermedad Cosmopolita. Las tasas ms altas de gonorrea se presentan en frica. Hay pocos datos
epidemiolgicos. En Colombia en 2006 se hizo un estudio en Montera donde se present un porcentaje alto de N.
gonorrhoeae. Lo que ms se observ es la infeccin gonoccica del tracto genitourinario inferior sin absceso periuretral o
de glndula accesoria.

Se realiz un estudio en Bogot de las infecciones ms comunes: es ms prevalente en mujeres no trabajadoras sexuales.
Las muestras ms comunes son crvix, uretra, liquido articular, vaginal, muestra rectal ms comn en 13 aos. De esto
los grupos de edades ms prevalentes de 15 a 25 aos y mayores de 25 aos. Tambien hay menores de 1 aos por
infeccin vertical. Los de 1 a 15 aos lo ms probable es que hay abuso sexual, por lo que hay que guardar la lmina.

En la N gonorrhoaeae : distribucin de los aislamientos por procedencia y produccin de beta lactamasa: la produccin
de beta lactamasa est en un 50% en Colombia, de estos donde hay ms alto es en Boyac, Valle

TOMA Y TRANSPORTE DE MUESTRAS:

MUESTRAS: Tracto genital, orina, orofaringe, rectal, conjuntiva, glndula de Bartolino, sangre, articulaciones,
secrecin de piel, trompas de Falopio, endometrio
TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO: De muestras biolgicas. Escobillones de dracn o rayn; Alginato de calcio:
txico, Algodn y lubricantes oleosos: Inhiben N. gonorrhoeae. Con los cidos grasos, ella se inhibe.

Lo ideal es tomar la muestra y cultivarla, en caso de requerir transporte lo ideal es Amies con carbono, 6 horas (mximo
24 horas, despus de eso muere la bacteria.) y agregar chocolate, No refrigerar, entonces a temperatura ambiente.

En mujeres se requiere utilizar un espculo para llegar a endo-crvix ( con

un especulo fijo el cuello y tomo la muestra, si no la tomo no voy a poder encontrar a la bacteria porque ese es el lugar
de ella) y en el hombre, se debe hacer orinar al paciente, unas dos horas antes de tomar la muestra, se introduce la parte
algodonosa del escobilln y de ah se obtiene la muestra.

En cuanto al Examen directo, lo ms utilizado es el Gram y ah se observan los diplococos intracelulares y extracelulares,
pero los ms significativos son los intracelulares. No es til un Gram a partir de faringe o a partir del recto, porque en
faringe ya hay Neisseria no patgenas, entonces no sera significativo lo de la infeccin y se pasa a hacer el cultivo y una
inmunofluorescencia directa; por ELISA tiene la misma sensibilidad del Gram y se miran los anticuerpos y por PCR hay
diferentes genes que se estn amplificando para determinar si hay N. gonorrhoeae. Lo que da una sensibilidad y
especificidad alta contra el gen gyrA y el mismo 16S; hay uno que est contra la protena B (cppB) que tiene una
sensibilidad mayor al 70%. Si viene la muestra que no sea de orofaringe ni rectal, ni de pacientes peditricos.

En la imagen se observa una muestra a partir de endo-crvix, donde se ven los polimorfonucleares fagocitando los
diplococos. Se habla que la sensibilidad, cuando se hace un Gram a partir de la uretritis del hombre tiene una
sensibilidad ms alta que en endo-crvix, porque en las mujeres hay Neisseria no patgenas; entonces si yo veo una
coloracin de Gram a partir de una endo-crvix por la morfologa no puedo decir que es N. gonorrhoeae y debo llevar al
cultivo y en hombre a partir de una uretritis puedo decir que est muy relacionado con N. gonorrhoeae, porque no hay
microorganismos que tengan similar o igual morfologa.

El tto: primero penicilina, tetraciclina y luego ciprofloxacino y ya se ha encontraro resistencia por eso como ltima opcin
se usa azitromicina porque casi no hay resitencia.

Esta imagen es a partir de lquido sinovial, caso de artritis purulenta. Para saber que es Neisseria es necesario tomar la
muestra.

En un hombre el gram tiene alta sensibilidad porque el hombre no tiene Neisserias no patgenas en uretra. En mujeres
hay morfotipos muy similares a los de Neisseria, por lo que si observamos en placa los diplococos no se puede darle tto
porque puede ser otro tipo de Nisseria u otro microorganismo anaerobios.
El ms usado es el Gram pero tambien podemos hacer inmunoflorescencia directa y PCR.

En el Gram puedo ver los diplococos intra y extracelulares. El lquido sinovia hay que descartar el tipo de Neisseria.

Tambin podemos hacer el Dx por inmunoflorescencia : Ac monoclonales contra eptopes de la protena clase I.

PROCEDIMIENTO DE AISLAMIENTO: Una vez tenga el gram pasamos al cultivo. Puedo utilizar Agar no selectivo como el
Agar chocolate y Hemocultivo, pues el Agar sangre no sirve. Como Agar selectivo, todos tienen algo en comn y es que
emplean una base para inhibir Gram positivos, otra base para inhibir Gram negativos y para inhibir hongos y levaduras; el
ms utilizado es el Thayer Martin (ACS + VCNT [Vancomicina, Colistina, Nistatina y Trimetropin sulfa]) que tiene la misma
base de agar chocolate slo que se le agrega VCNT, Martin Lewis (Anisomicina x N), Agar GC-Lect (Lincomisina, <Va), New
York City (Agar almidn-plasma y glbulos rojos de caballo). Crecen en incubacin 35-37C, 3-7% de CO 2, atmsfera
hmeda, vela blanca no perfumada, porque en caso de ser perfumada se puede inhibir. Se revisan diariamente y se
dejan hasta 72 horas.

Cmo se ven las colonias? Las colonias se ven convexas, el tamao puede diferir dependiendo de las protenas y se
habla de 0.5-1mm de dimetro. La sensibilidad del cultivo en un agar chocolate del 90% en endo-crvix y en uretra
masculina ms del 96%. Las ms pequeas se hablan que son de borde claro, arrugadas y las ms virulentas, entonces se
ha relacionado que las ms grandes no cuentan con Pili y OMP ; las ms grandes son menos brillantes, el borde ms
difuso y avirulentas. A las 48 horas se ven ms grandes las colonias tiene 1-5m de dimetro.

Agar chocolate es un agar enriquecido donde crecen mltiples microorganismo a diferencia del Thayer-Martin que es un
medio selectivo que nos permite identificar a Neisseria. Las cepas tienen una resistencia natural a los antibiticos.

En 24 horas las colonias son pequeas y en 48 horas se ponen mucho ms grande, convexas y grisceas.

IDENTIFICACIN DE ESPECIES: Se emplea la oxidacin de los carbohidratos. Son oxidasa positiva y catalasa positivo. Y
otra prueba que las va a diferenciar es la fermentacin de carbohidratos. N. gonorrhoeae oxida la glucosa. Utilizacin de
diferentes carbohidratos de 24-48 horas sin CO 2.
MTODOS INMUNOLGICOS PARA CONFRMAR EL CULTIVO: Reconocer la protena I (WI, WII, WIII) con anticuerpos
monoclonales. Otras pruebas altamente sensibles y especficas son:

Gonogen II
Inmunofluorescencia
Co-aglutinacin
Accuprobe

Tambin hay pruebas cromognicas que identifican unas enzimas, pero no son tan sensibles. Enzimas: B galactosidasa,
N. lactamica, -glutamil aminopeptidasa, N. meningitidis, Proliaminopeptidasa, N. gonorrhoeae. Sustratos: Bromo-
cloro-indolyl--galactosidasa (o galactopyranoside), (azul), -glutamil- nitroanalide, (amarillo), proline
methoxynapthlamide, (rojo).

IDENTIFICACIN POR SISTEMAS COMERCIALES: Adems de los azcares utilizan otros sustratos para identificar.

API NH
Vitek
RapID NH

Pero depende de la casa comercial.

Incubacin de 35-37C de 2-4 horas.

Neisseria meningitidis:
Diplococos Gram negativos, arrionados. La diferencia es la cpsula, pues ste es capsulado que le ayuda a clasificarla en
diferentes serotipos: la A hasta la Z, A, B, C, E-29, H, I, K, L, M, W-135, X, Y, Z (mas importantes_). Se relacionan con
epidemias el A y el C. A nivel de la membrana citoplasmtica tambin tiene las protenas OPA. El Lipooligosacrido es de
cido silico que le ayuda a activar o no el complemento.

MECANISMOS DE INTERACCIN: N. meningitidis. Depende mucho de la respuesta celular, pues ella es la que le permite
diseminarse y actuar. Tiene que ver mucho con la activacin de la va del complemento. Muchos signos clnicos de la
infeccin se deben al aumento de la respuesta inflamatoria por:

Migracin Leucocitaria
Activacin del complemento en el sitio de la infeccin (los grupos A y B activan la va clsica, grupo A activa la va
alterna, el polmero capsular del grupo B tiene cido silico)
Efectos citotxicos directos.

EPIDEMIOLOGA Y TRANSMISIN: Es patgeno, en cuant uo a la colonizacin, 10% (Orofaringe-nasofaringe), depende

de la edad, adolescentes y adultos jvenes (Aproximadamente el 30%) y mayor al 50% en lugares hacinados, ejemplo:
Militares, crceles. Y dependiendo de la respuesta inmune ella pude o no puede causar la enfermedad.

TRANSMISIN: Gotas de saliva a partir de orofaringe, se favorece por contacto cerca y no por fmites.

FISIOPATOLOGA:
 Mucosa de nasofaringe. Puede darse el caso de que uno siendo portador, se pueda diseminar la bacteria (Por
contigidad, cambios en el sistema inmune), entonces se debe hacer control en los portadores tambin. Puede
llegar a causar meningitis. Cuando la bacteria llega, se internaliza, gracias a los Pili y a las protenas OPA se
internaliza en clulas epiteliales, se multiplica y despus pasa a la lmina subepitelial. Receptores para fimbrias
bacterianas (ganglisido GD1) sobre las clulas columnares epiteliales no ciliadas en la nasofaringe del
hospedero. Tiene un periodo de incubacin de 3-10 das.
Sangre: En sangre ella permanece, la cpsula la protege de la actividad fagoctica y empieza a alimentarse al
unirse a la Transferrina, Lactoferrina para adquirir el hierro. A su vez ella tiene endotoxina y el Lipooligosacrido,
activando la produccin de citoquinas, citoquinas inflamatorias (TNF , IL-1, 6, 8) y citoquinas antiinflamatorias
como IL-10 y tambin activando la va alterna del complemento.

Lquido cefalorraqudeo: Llegan al LCR al traspasar la barrera hemato-enceflica y el LCR se considera un ultra
conjugado de plasma que est desprotegido, y una vez la bacteria llega all como es rico en nutrientes, ella se
reproduce con mayor facilidad y causa una meningitis. En ayuda con las fimbrias y asociada a los monocitos. Se
empieza a multiplicar en el espacio subaracnoideo y la cpsula le ayuda a que no haga autolisis la bacteria.

FACTORES DE RIESGO PARA LA PRODUCCIN DE UNA ENFERMEDAD INVASIVA:

Polimorfismos genticos
Dao en bazo
Inmunidad del husped (Properdina)
No produccin de anticuerpos bactericidas
Exposicin a fumadores y besos
Enfermedad invasiva es escasa en pases industrializados.

Puede llegar a producir La enfermedad meningococica invasiva; puede ser una bacteriemia transitoria pero puede llegar
a ser una sepsis crnica, con produccin de neumona, relacionada con el serogrupo Y, y artritis sptica, endocarditis
en menor proporcin. En caso no ser tratado es 100% letal, a diferencia de N. gonorrhoeae que hace complicacin y
cronicidad. Las secuelas de una Neisseria son prdida de la audicin neurosensorial, retraso en el desarrollo y defectos
en el habla. Es ms propenso que les d a los nios despus de los 6 meses, porque antes de los 6 meses estn
protegidos por los anticuerpos maternos.

La bacteria llega a los vasos y causa un colapso circulatorio y Cmo se manifiesta? Con petequias en tronco y en
extremidades y se favorece que se den infecciones concomitantes con virus. Las lesiones petequiales son signo de sepsis
meningococica, la cual puede llegar a ser equimtica.

Si el tipo de colapso vascular aumenta puede llegar a ocasionar una coagulacin intravascular diseminada y si eso llega a
las glndulas suprarrenales puede llegar a dar el Sndrome de Waterhouse-Fiderichsen, que es una enfermedad de tipo
fulminante, caracterizado por CID, hemorragia dentro de la piel, glndulas adrenales y otros rganos. Muerte rpida por
la toxemia generalizada y el shock. La mayora de los sntomas son debidos a la actividad de endotoxina.

EPIDEMIOLOGA: Hay unos serogrupos ms relacionados con epidemias que otros. Se habla del cinturn subsahariano,
donde se encuentra el serogrupo A y es el ms relacionado con las meningococemias, y hay otros que son endmicos. En
Colombia se ha visto que es epidmico los serogrupos B (92%), C (6.7%) y A (1.3%).

Lesiones petequiales

Como el microorganimos empieza a diseminarse por va hematgena puede llegar a piel y formar petequias. La sepsis
llega a glndulas adrenales sndrome de waterhoude friderichsen, causa CID, hemorragia dentro de la piel
 Esto se puede llegar a complicar con una CID (Coagulacin intravascular diseminada) y fcilmente produce la muerte

Hay un tipo de complicacin, que cuando producen la sepsis puede llegar a glandular adrenales y este tipo de
hemorragia causada por CID puede crear un tipo de complicacin: Sndrome de Waterhouse esto es debido a que
cuando se est diseminado a nivel de sngrela clula se empieza a dividir y empieza a eliminar lipoligosacarido, este es el
que empieza a diseminarse por todo el organismo
A nivel epidemiolgico se habla de los serogrupos ms prevalentes en el mundo, el serogrupo B es el ms prevalente en
el mundo el C y el Y. Se habla tambin se una correa de meningitis en frica donde se encuentra el serogrupo mas
epidmico y patognico que es el serogrupo A. En Colombia se ha visto que los ms frecuentes son el B,C y A. Esto es
importante en la parte epidemiolgica por la vacunacin, si una vacuna tiene serogrupos A, Y pero si en Colombia lo ms
prevalente es la B, no se sabe de qu se est protegiendo y si funciona.

TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS: se encuentra en Sangre, LCR, sangre, aspirado de petequias,

especmenes de Biopsia, aspirado de lquido articular, secreciones de conjuntiva, esputo, LBA (No s qu es), aspirado
traqueal y nasofaringe. Faringe: Bsqueda de portadores. Medio de Transporte: Ames, mximo por 5 horas. Llevar
rpidamente al laboratorio porque no sobrevive al almacenamiento, ni a cambios de temperatura. No refrigerar. Se
recomienda que en el sitio donde se toma la muestra, ah mismo se cultiva.

EXAMEN DIRECTO: Con Gram, con PCR y con Deteccin del antgeno y tiene una sensibilidad baja (50-95%) con una
especificidad alta. Si me diera negativa la deteccin de antgeno necesariamente tengo que pasar al cultivo, pero si me
da positiva se est confirmando; si da positivo ya puede empezar el tratamiento; hay uno que evala el A, C, Y, W135 y
otro evala el B. En el PCR hay sondas de DNA y RNA, ctrA que son blanco del DNA, genes de polysialytransferasa (siaD o
mynA en un serogrupo A) para tipificacin porA, porB, feta. Y el ms utilizado es el Gram. Deteccin 0.02-0.05 g/mL de
antgeno. Aglutinacin en ltex, coaglutinacin y contrainmunoelectroforesis.

Inmunohistoquimica coloracin Brown, esto se usa mucho, porque ellas se dirigen en sangre podemos encontrar en
tejidos, en aorta, capilares cerebrales vemos los acumulos de la bacteria.

PROCEDIMIENTO DE AISLAMIENTO: Puedo utilizar Agar no selectivo como el Agar sangre, Agar chocolate y
Hemocultivo. Como Agar selectivo, todos tienen algo en comn y es que emplean una base para inhibir Gram positivos,
otra base para inhibir Gram negativos y para inhibir hongos y levaduras; el ms utilizado es el Thayer Martin (ACS + VCNT
[Vancomicina, Colistina, Nistatina y Trimetropin sulfa]) que tiene la misma base de agar chocolate slo que se le agrega
VCNT, Martin Lewis (Anisomicina x N), Agar GC-Lect (Lincomisina, >Va), New York City (Agar almidn-plasma y glbulos
rojos de caballo). Aerobios, de 35-37C, CO 2, atmsfera hmeda, vela blanca no perfumada, se revisan diariamente y se
dejan hasta 72 horas.

Despus de 48 horas se observan colonias de 1-5 mm de dimetro. Colonias transparentes, no pigmentadas, sin
hemlisis, lisas, bordes enteros, cepas encapsuladas son mucosas. Si producen ms cpsula, son ms grandes.

IDENTIFICACIN DE ESPECIES: Oxidasa positivo. Utilizacin de diferentes carbohidratos 24-48 horas sin CO 2, oxida
glucosa y maltosa.

Moraxella catarrhalis.
Es el mismo morfo-tipo, diplococo Gram negativo. Su principal factor de virulencia son las Adhesinas que le permiten
unirse a las clulas respiratorias, estn ms que todo en tracto respiratorio superior y algunos tipos de protenas que le
permiten captar hierro del suero; los lipooligosacridos que actan como endotoxinas y la mayora de las bacterias son
capsuladas.

UspA1: Clulas epiteliales respiratorias, OMP CD: Clulas epiteliales respiratorias, McmA: Tipo metalopeptidasa,
MID/Hag: Hemaglutinina, MchA1: Hemaglutinina, MchA2: Hemaglutinina, McaP: Fosfolipasa C, OlpA: Homologa
protena OPA, OMP J: Homologa protena OPA, Pili tipo IV: Transformacin biopelculas. LOS diferente enterobacterias,
estimula la respuesta inflamatoria.

Colonizan el tracto respiratorio superior (1-5%) y ocasionalmente el tracto genital femenino (ocasionalmente). Cmo se
transmite? De forma endgena. A nivel de nasofaringe uno puede llegar a infectarse por diseminacin, tambin como
portador, o por gotitas de saliva de persona a persona.
FACTORES PREDISPONENTES PARA LA COLONIZACIN: Condiciones de vida, higiene, factores ambientales,
caractersticas genticas y factores del husped. Uso de vacuna antineumoccicas: Sustitucin S. pneumoniae por un
serotipo no relacionados con la vacuna, H. influenzae no tipificable y M. catarrhalis.

Se encuentra ms que todo en tracto respiratorio superior.

Si se tiene un aislamiento de otitis media lo que ms se busca es Moraxella catarrhalis, y ella vive en simbiosis con H.
influenzae, e incluso hacen biopelculas. A partir de la nasofaringe puede producir sinusitis y est relacionada con adultos
mayores que tienen propensin o que tengan una enfermedad pulmonar crnica, una bronquitis o una neumona. Y en
muy pocas ocasiones hay endocarditis y meningitis.
Principalmente enfermedades respiratorias, ella aprovecha alguna condicin, sea una condicin vrica o algo y por
continuidad va a odo, senos paranasales o a pulmn. Otras infecciones menos comunes: endocardio y meningitis.

TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS: Secrecin de odo medio, aspirados sinusales, aspirado traqueal,
LBA y esputo. Medio de transporte Amies mximo 5 horas.

Estas colonias se deslizan sobre el agar. Se puede encontrar como flora normal. No son pigmentadas, blanco grisceo,
pequeas, la colonia puede moverse intacta a lo largo de la superficie del agar con el asa. Varan de tamao: condiciones
de oxgeno y temperaturas de incubacin subptimas, pueden llegar a variar de tamao, crece en agar Sangre (no
selectivo) , crece en agar chocolate y en agar selectivo, colonias similares a Neisseria spp. Incubacin 35-37C, 3-7% de
CO2. Crece a temperatura ambiente y es importante en muestras respiratorias.

Se le debe mirar la produccin de betalactamasas.

IDENTIFICACIN: En cuanto a la identificacin, no utiliza ninguno de los azcares (no oxida ninguno de los
carbohidratos). Lo que se debe mirar es la produccin de betalactamasas y se hace con unas cefalosporinas
cromognicas, a partir del cultivo, se coloca la bacteria en contacto con el cromgeno.

Este es identificacin por sistemas comerciales

IDENTIFICACIN POR PRUEBA CROMOGNICA: Enzimas: B galactosidasa, N. lactamica, -glutamil aminopeptidasa, N.
meningitidis, Proliaminopeptidasa, N. gonorrhoeae. Sustratos: Bromo-cloro-indolyl--galactosidasa (o
galactopyranoside), (azul), -glutamil- nitroanalide, (amarillo), proline methoxynapthlamide, (rojo).

Son unas pruebas en tubos, en las cuales se adicionan unos sustratos con unos colores, la bacteria tiene ciertas enzimas
que al adicionar los sustratos van a metabolizar cada una de las especies y se va o no a consumir el sustrato y
observamos colores.

IDENTIFICACIN POR SISTEMAS COMERCIALES: Sistema semiautomatizado donde estn todos los carbohidratos, urea,
Beta galactosidasa, con los diferentes tipos de sustratos podemos observar la especie. Incubacin 35-37C de 2-4 horas.

API NH
Vitek
RapID NH

MTODOS INMUNOLGICOS PARA CONFIRMAR EL CULTIVO: Co-aglutinacin para reconocer la Protena I con
anticuerpos monoclonales. Phadebact CSF test, S. pneumoniae, H. influenza (Tipo B), Streptococcus del grupo B, N.
meningitidis, grupos A, B, C, Y, W135. Altamente sensible y especfica.
 Esto me identifica las 2 especies.

Es un disquito que tiene la cefalosporina y se ve o no la produccin de betalactamasas, que es importante en Moraxella

mirarlo. (lo rosadito es lo positivo)

Pruebas cromognicas

Mtodos inmunolgicos para confirmar cultivo: gonogen, MeritecGC, phadebact

TRATAMIENTO: AMC, SXT, Tetraciclina, Cefalosporina orales, Macrlidos (Ejemplo: Azitromicina, Claritromicina),
Fluoroquinolonas.

Se reporta un aumento de las cepas productoras de B-lactamasas (90%). Resistencia a penicilina, ampicilina,
amoxacilina.
Vancomicina y Clindamicina.

Moraxella no oxida ningn carbohidrato. Para su identificacin es necesario utilizar DNasa, reduccin de nitratos y una
prueba con cidos grasos Tributyrin.
PRUEBAS SEROLGICAS: ELISA: Determinacin de concentraciones de IgG contra serogrupos A, C, W135, Y. til en
estudios seroepidemiolgicos.

SUSCEPTIBILIDAD: Son diferentes para N. gonorrhoeae y N. meningitidis.

N. gonorrhoeae N. meningitis
MTODO Difusin en disco Difusin en disco
MEDIO Agar GC + 1% suplemento Agar Mueller sangre
INCULO Recomendaciones para el mtodo Recomendaciones para el mtodo de
de difusin en disco difusin en disco
INCUBACIN 361C, aerobiosis, 5% de CO 2, de 352C, 5% de CO2, de 20-24 horas
20-24 horas
SUSCEPTIBILIDAD Tetraciclina, Ceftriaxona, Penicilina, Ampicilina
Ciprofloxacina, Cefixime.
Se requiere cabina de bioseguridad (Para N. meningitidis). N. gonorrhoeae en caso de fallo de tratamiento.

Susceptibilidad de N. gonorrhoeae: en caso de fallo de tto..Tetraciclina, Ceftriaxona, Ciprofloxacina, Cefixime. Enoxacina,

Gatifloxacina, Cefepime, Cefmetazole, Cefotetan, Ceftazidima, Cefetamet, Grepafloxacina, Lomefloxacina, Trovafloxacina,
Fleroxacina, Spectinomicina.

Para N. meningitidis son cepas sensibles a penicilina y ampicilina.

Si en el laboratorio tenemos como resultado algn tipo de este perfil se debe volver hacer el procedimiento porque
usted es el primero que est reportando eso o es muy infrecuente.

VIGILANCIA NACIONAL-INS:

Para N. meningitidis: Vigilancia por el laboratorio de los patgenos causantes de meningitis bacteriana aguda e
infeccin respiratoria: S. pneumoniae, H. influenzae, y N. meningitidis.
Para N. gonorrhoeae: Vigilancia de la susceptibilidad antimicrobiana y debe ser remitida la muestra al INS.

CLASIFICACIN DE LAS VACUNAS PARA N. meningitidis.

NOMBRE SEROTIPO COMPOSICIN

Menomune A,C, Y, W135 Conjugado cpsula
 Menactra A, C, Y, W135 Conjugado cpsula
PorA B OMV
MeNZB B PorA, PorB, LOS
VA-MENGO-BC B, C OMV, capsula serogrupo C
Bexsaro B Protenas recombinantes , PorA
LP2086 B 2 protenas recombinantes fHbp desde OMV

Estn diferentes tipos de vacunas, algunas tienen varios serotipos y otros unos solos. Hay que identificar la virulencia y lo
que tengamos. El serogrupos B es no capsulado por eso la dificultad de encontrar la vacuna, se dice que con las PorA y un
conjugado se trata de prevenir el serogrupo B.

Para N. gonorrhoeae no hay vacuna.

TRATAMIENTO:

N. gonorrhoeae: Cefalosporinas de amplio espectro. Ceftriaxona es ms activo contra N. gonorrhoeae, Cefixime,

Ceftibuten, Cefozopran, Cefdinir y Cefpodoxime.
N. meningitis: Penicilina, Ampicilina, Cloramfenicol, Amoxicilina, Ceftriaxona, Cefotaxima.

PORTADORES: Minociclina y Rifampicina. Fluoroquinolonas.