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Replicacin del DNA

La replicacin del DNA es un proceso en el que la cadena original o tambin


llamada parental del DNA al separarse crea dos nuevas cadenas hijas; un claro
ejemplo de esto es cuando abrimos un zipper. 6

Hablamos de que es una replicacin semiconservadora


porque cada una de estas cadenas hijas contiene una
cadena completa heredada de la cadena parental, por lo
que ellas mismas al tener la informacin de la cadena
original tendrn que sintetizar la nueva cadena
complementaria. De manera que las dos nuevas cadenas
de DNA contienen una cadena molde de la cadena
parental y una cadena nueva que ellas mismas Replicacin
semiconservativa.
sintetizaron.

Todo esto ocurre durante en la parte de la interfase llamada fase de sntesis o fase
S del ciclo celular y en el ncleo de la clula que es en donde se encuentra la
cromatina (cromosomas).

La replicacin comienza cuando las cadenas del DNA comienzan a desenrollarse y


aqu es donde la enzima helicasa interviene y los puentes de hidrogeno que unen
a las dos cadenas de sus bases nitrogenadas se van rompiendo poco a poco gracias
a ella. Ya que las cadenas se van separando llegan unas protenas llamadas SSBs
que evitan que las cadenas se vuelvan renaturalizar y entonces se mantienen
separadas. Y as por toda la cadena separada se van formando las burbujas de
replicacin que ayudan muchsimo en la velocidad de replicacin.
Viendo ms a detalle la burbuja de replicacin podemos apreciar una horquilla de
replicacin donde aparece la famosa y muy importante DNA polimerasa que se
encargar de construir la cadena complementaria. Esta nueva cadena que la DNA
polimerasa construir se llamar hebra conductora y es la que crece en tira
continua hacia la horquilla de replicacin, o sea, en direccin 5 a 3, y es aqu
donde comienzan los problemas, ya que la DNA polimerasa no puede crear una
nueva cadena, lo que hace es prolongar una cadena que ya existe y que va en
direccin 5 a 3.

Aqu es donde aparece la RNA primasa que es


encargada de agregar los primeros nucletidos que
inician la nueva cadena complementaria de la
cadena original, a este pequeo fragmento se le
RNA cebador.
conoce como RNA cebador y a partir de aqu la

Las palabras marcadas con negrita se resaltan pues son las palabras gua que el profesor dio en clase.
DNA polimerasa ya puede comenzar a colocar los nucletidos que se necesitan en
la cadena molde.

Y as la hlice del DNA contina desenrollndose poco


a poco y abrindose, dejando que la hebra conductora
crezca en tira contina hacia la direccin de la horquilla
de replicacin.

Despus llega una variacin de DNA polimerasa a La hebra conductora crece en


modo contino hacia la horquilla
cambiar el RNA cebador por DNA. de replicacin.

La construccin de la nueva cadena de DNA se forma


cuando la DNA polimerasa III se encarga de unir el nucletido trifosfato, pero al
unirse con la cadena original se rompe el enlace trifosfato y se libera energa que
es usada para polimerizar la nueva cadena de DNA y adems se forman los puentes
de hidrogeno entre los nucletidos. As que la polimerizacin es muy importante y
es la forma por la que se forman las nuevas cadenas.
La tira rezagada es la que se sintetiza en direccin
opuesta a la del avance de la horquilla y crece en tira
discontinua, o sea, se sintetiza yendo al lado contrario
de la tira continua. Ahora, se sintetiza comenzando
La tira rezagada se sintetiza de cuando la RNA primasa pone un fragmento de RNA
manera discontinua yendo haca cebador y la DNA polimerasa comienza a sintetizar la
la horquilla.
nueva cadena de DNA. Y as de nuevo, desenrollando
y abriendo y sintetizando de manera descontinua.

Los tramos discontinuos de los que se habl anteriormente se llaman fragmentos


de Okazaki. Igual que la hebra conductora un diferente tipo de DNA polimerasa
cambia al RNA cebador y se convierte en DNA. Al final una ligasa es la que sella y
une los fragmentos de Okazaki.

Y as es como se hace la rplica de la cadena de DNA, puesto que hay muchas


burbujas de replicacin a lo largo del DNA y stas continan sintetizndose hasta
llegan a unirse; y as es como se logran dos cadenas completas de DNA.1

As se van formando las cadenas


complementarias del DNA.

Las palabras marcadas con negrita se resaltan pues son las palabras gua que el profesor dio en clase.
Transcripcin del DNA

La transcripcin es el proceso que sigue de la replicacin y bsicamente es que se


transfiere el ADN al ARNA para que se lleve a cabo el copiado de un gen y despus
sea traducido a una protena. Se lleva a cabo en la fase G1 del ciclo celular y en el
ncleo de la clula en las eucariontes y en los procariontes ocurre en el citoplasma

Entonces la las hebras de la alfa hlice comienza a abrirse para poder copiarla y
con ayuda de la helicasa se abren las cadenas.

El DNA est dividido en muchas regiones, una de las ms grandes es la que abarca
el DNA que ser transcrito y que es el gen, tambin llamada regin de
transcripcin. Haca arriba del DNA que ser transcrito se encuentra el regin del
promotor que marca el inicio de la transcripcin y que dentro del promotor hay una
secuencia llamada TATA y es la que permite que se unan los factores de
transcripcin que son protenas que ayudan a iniciar el proceso de transcripcin.
Hacia debajo de la regin de transcripcin se encuentra la regin de terminacin
que tambin es una secuencia. 3

Ya que las protenas estn unidas la enzima de


la transcripcin, que es la ARN polimerasa II,
se puede unir y comienza a transcribir el
ARNmensajero.

La RNA polimerasa lee las secuencias de la


hebra molde, en el sentido 3-5, por lo que las Direccin de la transcripcin.
cadenas se sintetizan y crecen en sentido 5-
3, por la misma explicacin por la que sucede
en replicacin. Y es as cmo diferentes nucletidos se van a ir incorporando en la
nueva cadena de ARN.

Cuando se llega a la regin de terminacin la ARN polimerasa se despega del ADN


y el ARN que se form tambin se despega y se queda como una cadena nica que
comenzar a ser independiente.

Algo que considero importante es sealar que


los genes no son unidades continuas, que
aunque en los procariontes es imposible
identificar las secuencias gnicas discretas
Gen.
que podran corresponder a un cdigo de una
protena, en un eucarionte los genes estn

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fragmentados y son llamados exones (transcribibles y traducibles) e intrones
(transcribibles pero sin poder traducirse a protena) que son eliminados durante la
maduracin del RNAm por algunas formas de RNA intranucleares. Esto es un
proceso previo a la traduccin.

Adems, al proceso de maduracin de transcrito primario para poder originar un


RNA mensajero se le conoce como splicing, que tambin incluye la eliminacin de
intrones.

Pero antes de que el ARN salga del ncleo es


modificado y se le agrega una caperuza de metil-
guanosina en el extremo 5y una cola de hasta 200
ribonucletidos de adenosina, adems de que se le
eliminan intrones que no intervienen en la sntesis
proteica. Las modificaciones siempre son ms
usuales en el ARN mensajero (ARNm), que
Splicing. proporciona el cdigo exacto para sntesis proteica.
Al final ambos extremos quedan protegidos contra
las exonucleasas y evitan la degradacin antes de la lectura.

El ARN de transferencia (ARNt) y junto con el ARN ribosomal (ARNr) son los que
arman la maquinaria celular para que se pueda dar la sntesis proteica. 2

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Tcnicas de estudio del DNA

Polymerase Chain Reaction (PCR)

Esta tcnica de estudio in vitro que tambin es conocida como reaccin en


cadena de la polimerasa y el fin es tener la reduplicacin de una hebra doble de
DNA.
El procedimiento de esta tcnica se lleva a cabo en los siguientes pasos:

1. Hay una desnaturalizacin a una temperatura de 95 y es aqu donde se


separan las dos cadenas del DNA molde.
2. Se procede por hibridacin un cebador de RNA a todas las hebras simples
desnaturalizadas.
3. Se lleva a cabo una reaccin de DNA-Polimerasa de la cual su fin es
conseguir la elongacin de los dos cebadores. Todo esto se debe considerar
teniendo la temperatura de 72, as al final el resultado sern dos hebras
dobles que son resultantes del primer ciclo, o sea, 4 hebras dobles. As que
si se repite una vez ms se obtienen 8 hebras dobles. Como ya se sabe todas
las hebras hijas son idnticas a la hebra madre.

Con esta tcnica el resultado ser una amplificacin de la cantidad de la hebra de


DNA que elijamos.

De todas las aplicaciones que tiene esta tcnica se encuentra (muy importante) la
deteccin prenatal de enfermedades gnicas, de infecciones virales latentes o la
produccin de gigantes cantidades de fragmentos de DNA. Tambin se aplica para
estudiar la identidad y filiacin. 4

PCR.

Las palabras marcadas con negrita se resaltan pues son las palabras gua que el profesor dio en clase.
Enzimas de restriccin.

Las enzimas de restriccin o tambin llamadas endonucleasas son unas protenas


que permiten que el DNA se pueda cortar en una doble cadena por medio de un
sitio especfico. Estas cadenas de DNA que ya fueron cortadas con enzimas
presentan en cada uno de sus extremos unas cadenas sencillas que pueden ligarse
a otros fragmentos del mismo tipo.
Tenemos dos tipos de cortes:

Cortes abruptos: Son hechos en ls dos hebras del DNA por el mismo
sitio especfico, de esta manera las dos hebras quedan alineadas en
el extremo de donde fueron cortadas. A las enzimas que participan en
este tipo de cortes se les llama endonucleasas no especficas.

Cortes cohesivos: Estos cortes dividen cada una de las hebras del
DNA por un sitio diferente, as quedan de manera escalonada y es as
como se crean diversos escalones derivados de la accin de la misma
enzima. A los escalones tambin se les conoce como extremos
pegajosos.

Este fue uno de los avances ms importantes en la biologa molecular y fueron


descubiertas en experimentos de bacterias en la dcada de los 70s. 4

Enzimas de restriccin.

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Clonacin

Esta probable es la tcnica ms conocida y su fin es obtener copias de un


determinado gen o de un sitio especfico del DNA.

Al emplearse en plsmidos, que son molculas de DNA pequeas, circulares y que


estn afuera en las bacterias del DNA cromosmico, se adaptan a albergar un
nuevo segmento corto de DNA y ahora cabe la posibilidad de poner un gen
determinado en un plsmido circular para generar un DNA recombinante.

El plsmido, como ya dije, est en las bacterias, as que vuelve a las bacterias para
crecer con ellas, aunque tambin se pueden trasformar bacterias con plsmidos que
dentro de ellas llevan el inserto de DNA.

Ya que est dentro de la bacteria, el plsmido se replica y as es como logra que el


segmento de DNA sea amplificado y as pueda obtener con ms facilidad y rapidez
muchas copias que adems son idnticas. 4

Clonacin.

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DNA Fingerprinting

Este proceso permite que se pueda hacer una comparacin de muestras de DNA
que tienen diferente origen.
En esta tcnica los cientficos utilizan enzimas de restriccin para poder cortar una
molcula de DNA en varios fragmentos que son separados en un gel al que le dan
una carga de corriente elctrica, as que los fragmentos se ordenan segn su
tamao. De esta manera se obtiene un patrn de bandas de cada uno de los
organismos de los que hay presente DNA. Despus se utiliza un fragmento de DNA
marcado o sonda que se encargar de que se una con los fragmentos resultantes
del rompimiento de la molcula de DNA y despus de ser pasados a travs de rayos
X se obtendr una huella de DNA.

Esta tcnica se utiliza para saber a ciencia cierta cundo es que una muestra de
DNA pertenece o no a una persona y como todos sabemos el genoma de cada
persona, al igual que la huella digital, es nico en cada persona, as que este mtodo
e capaz de identificar a una persona nicamente por el ordenamiento de pares de
bases de su DNA. 4

DNA fingerprinting.

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Electroforesis.

En este proceso el fin es separar las hebras de DNA de acuerdo a su peso y la


movilidad que tengan en un campo magntico.

1. El DNA entra al interior del pozo de una cmara de electroforesis que


contiene el gel de agar. Dato: para que las bases del DNA se radien el gel
debe contener bromuro de etidio.
2. Se aplica en un extremo de la cmara un polo negativo y en el contrario uno
negativo, por lo que se magnetizar y comenzar la vibracin de los tomos
de DNA.
3. Las hebras se desplazan fcilmente al lado positivo debido a que son ms
ligeras.
4. Despus de un rato de estar en el campo elctrico se forman diferentes
grupos denotando en cada uno la distancia recorrida por las hebras.
5. Para visualizar el resultado, todo entra a una cmara de rayos ultravioleta lo
que ayudar a visualizar la diferencia de resultados gracias a la fluorescencia
del DNA radiado. 5

Electroforesis.

Las palabras marcadas con negrita se resaltan pues son las palabras gua que el profesor dio en clase.
Referencias

1. Replicacin del DNA. https://www.youtube.com/watch?v=YqjbmrQcyfM


[Consultada el 03 de marzo del 2014].

2. Transcripcin del ADN. https://www.youtube.com/watch?v=h6LRbI4XNrc


[Consultada el 03 de marzo del 2014].

3. Transcripcin del DNA. https://www.youtube.com/watch?v=ksnqacN4z7w


[Consultada el 02 de marzo del 2014].

4. La gentica y yo. http://geneticasebasrubio.blogspot.mx/2010/08/tecnicas-


de-estudio-del-adn.html [Consultada el 03 de marzo del 2014].

5. Electroforesis de protenas. http://biomodel.uah.es/tecnicas/elfo/inicio.htm


[Consultada el 03 de marzo del 2014].

6. ALBERTS B, JOHNSON A, LEWIS J, RAFF M, ROBERTS K, WALKER P.


Introduccin a la Biologa de la celular. 4 reimpresin. Madrid: Mdica
panamericana, 2010.

7. KARP, G. Biologa Celular y Molecular. 6 ed. McGraw-Hill. Interamericana.


2011.

La bibliografas 6 y 7 fueron usadas para corroborar la informacin de los vdeos y


las pginas de internet, por lo que no se especifica dnde fueron usadas en el texto.

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