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Profa.

Cristiane Matt

EXTRAO DE LECITINA E IDENTIFICAO DOS SEUS PRODUTOS DE


HIDRLISE
A lecitina (fosfatidilcolina) um glicerofosfolipdeo que contm duas molculas de cido graxo, um
saturado e um insaturado, as quais esterificam as hidroxilas dos C1 e C2 do glicerol, respectivamente. A
hidroxila do C3 esterificada com uma molcula de cido fosfrico ao qual est unido um lcool aminado, a
colina.

A fosfatidilcolina faz parte da composio molecular das membranas biolgicas e encontra-se presente
no plasma sanguneo como constituinte de lipoprotenas. A lecitina, assim como a lisolecitina, tem ao
detergente devido a sua estrutura qumica.
Nos mamferos, as necessidades de fosfatidilcolina so supridas apenas 20% pela "biossntese de novo".
A biossntese ocorre no fgado, a partir de fosfatidiletanolamina e de trs molculas de S-adenosilmetionina,
doadoras cada uma de um radical metila (-CH3). Os demais 80% so obtidos pela "via de salvao", na qual a
colina, proveniente da dieta, fosforilada por ao da colina quinase, formando fosfocolina. Esta ltima
precursora da fosfatidilcolina. O elevado percentual de necessidade de colina obtida por fonte diettica faz
com que a mesma seja considerada um micronutriente essencial.
Uma dieta deficiente em colina e com baixo teor de protena faz com que haja o aparecimento do
chamado "fgado graxo", por deficincia na formao de lipoprotenas, responsveis pelo transporte de
lipdeos do fgado para os tecidos extra-hepticos. Ocorrendo uma diminuio na sntese de fosfatidilcolina, a
velocidade com que os cidos graxos so transportados para fora do fgado sob esta forma tambm diminui,
com consequente acmulo de triglicerdeos no fgado.
Uma das grandes fontes de lecitina da nossa alimentao a gema de ovo. Atualmente, existem no
comrcio, cpsulas de lecitina extrada de soja, assim como medicamentos que contm colina e metionina na
sua composio e que auxiliam na preveno do "fgado graxo".

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2. EXTRAO DA LECITINA DA GEMA DE OVO

2.1. PRINCPIO:

A lecitina isolada da gema de ovo atravs de tratamentos sucessivos com acetona e


clorofrmio. A acetona desidrata as protenas, desnaturando-as, extrai pigmentos e a maioria dos
lipdeos da gema, com exceo dos fosfolipdeos (lecitina). O tratamento com clorofrmio, do
resduo cetnico obtido, permite a extrao dos fosfolipdeos (lecitina).

2.2. TCNICA

Colocar 1/3 de uma gema de ovo em um copo de bquer de 100 mL;


Adicionar 15 mL de acetona, misturar bem com o basto de vidro e deixar em repouso por alguns
minutos;
Transferir o sobrenadante para um frasco erlenmeyer com o auxlio de um basto de vidro,
procurando reter o resduo no copo;
Adicionar 10 mL de acetona ao resduo. Misturar bem e decantar, repetindo esta operao mais
quatro ou cinco vezes, at que o precipitado se torne esbranquiado. Adicionar, finalmente, 5 mL de
acetona e filtrar atravs de papel filtro (dobrado no formato de filtro de pregas). Os sucessivos
sobrenadantes de acetona devero ser desprezados;
Abrir o papel filtro, contendo o resduo cetnico, sobre uma placa impermevel (azulejo);
Secar o resduo, espalhando-o sobre o papel filtro, com o auxlio de basto de vidro. A secagem pode
ser acelerada pressionando o resduo com outros pedaos de papel filtro;
Passar o resduo seco para o copo de bquer usado anteriormente e adicionar, aproximadamente, 10
mL de clorofrmio. Misturar bem com basto de vidro;
Filtrar atravs de papel filtro, recebendo o extrato clorofrmico em um tubo de ensaio grande
(dimetro de 2 cm). Para uma filtrao rpida, utilizar filtro de pregas.
Retornar o resduo para o copo de bquer e adicionar ao mesmo, mais 5 mL de clorofrmio. Misturar
e filtrar para o mesmo tubo de ensaio usado anteriormente. Desprezar o precipitado remanescente;
Reduzir o filtrado clorofrmico ao menor volume possvel (aproximadamente 1/5 do volume inicial)
por evaporao em banho-maria fervente (em capela com exaustor);
O resduo lquido resultante contm a lecitina parcialmente purificada.

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3. CARACTERIZAO QUMICA DA LECITINA

3.1. HIDRLISE ALCALINA DA LECITINA

3.1.1. PRINCPIO
Os glicerofosfolipdeos, por hidrlise cida, produzem: cido fosfrico, compostos
nitrogenados de carter bsico, cidos graxos e glicerol. Em presena do hidrxido de sdio, o
grupamento fosfato formar fosfato de sdio e os cidos graxos formaro sais alcalinos (sabes).

3.1.2. TCNICA
Adicionar 5 mL de etanol ao resduo de lecitina obtido no processo de extrao, aquecendo o tubo de
ensaio em banho-maria fervente para auxiliar a emulsificao (CUIDADO COM O FOGO!);
Adicionar 5 mL de NaOH 10 M e mais 15 mL de gua destilada;
Misturar bem e levar ao banho-maria fervente por 15 minutos, agitando ocasional e cuidadosamente,
com basto de vidro (CUIDADO PARA NO DERRAMAR).

3.2. DETECO DOS CIDOS GRAXOS E IDENTIFICAO DE COLINA E DO


FOSFATO INORGNICO LIVRE
3.2.1. DETECO DOS CIDOS GRAXOS
Resfriar o hidrolisado em gua corrente, e aps, acrescentar, com pipeta, cido actico glacial at
franca reao cida ao papel de tornassol. importante evitar o excesso de cido, pois poder ser
prejudicial s reaes de caracterizao. Verificar a reao ao papel de tornassol aps a adio de
cada 0,5 mL de cido (aproximadamente 2,5 mL so necessrios);
Reaquecer a soluo acidificada, em banho-maria por um minuto e filtrar, usando papel de filtro
umedecido com gua destilada. Desta forma, os cidos graxos, obtidos pela saponificao da lecitina
e liberados pela acidificao, ficam retidos no papel filtro, podendo ser observados a olho nu;
Usar o filtrado para as reaes de identificao da colina e fosfato a seguir.
3.2.2. DETECO DE COLINA
Colocar uma gota do filtrado sobre uma lmina;
Adicionar uma gota de Lugol (KI + I2) concentrado;
Cobrir com uma lamnula e levar ao congelador por 10 minutos;
Examinar ao microscpio o produto da reao entre o iodo e a colina, o qual precipita sob forma
cristalina (cristais de Florence), em temperaturas inferiores a 15 oC.

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3.2.3. DETECO DE FOSFATO: MTODO DE FISKE-SUBBAROW
Colocar 2 mL de filtrado em um tubo de ensaio;
Adicionar 0,5 mL da soluo de molibdato de amnio a 2,5 g % em cido sulfrico 2,5 M;
Aquecer suavemente, em banho-maria, durante alguns minutos. O produto formado ser
fosfomolibdato de amnio (amarelado);
Adicionar 0,4 mL de reagente redutor (cido amino-naftol sulfnico + NaHSO3 + Na2SO3);
Observar a colorao azul, devido formao de "xidos de molibdnio", produtos da reao com
fosfomolibdato de amnio. A cor azul evidencia, indiretamente, a presena de fosfato inorgnico.

4. REFERNCIAS

VOET, D.; VOET, J.D. Bioqumica. 4 edio. Captulos 12 e 25. Porto Alegre: ArtMed, 2013.

NELSON, D. L.; COX, M. M. Lehninger Princpios de Bioqumica. 6a edio. Captulos 10 e 21.


Porto Alegre: ArtMed, 2011.

DICK, Tuiskon. Introduo Bioqumica Praticas I. Editora Meridional EMMA, 2 edio,


1971.

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Profa. Cristiane Matt

RELATRIO N0 1

Nome:__________________________________No. Carto:______________Data:_________

EXTRAO DE LECITINA E IDENTIFICAO DOS SEUS PRODUTOS DE


HIDRLISE
1.OBJETIVO DA AULA:
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2.RESULTADOS:
2.1. Esquematize, atravs de frmulas qumicas, a reao de hidrlise alcalina da Lecitina.

2.2. Explique o princpio do mtodo e descreva os resultados da identificao dos produtos de


hidrlise
2.2.1. cidos Graxos
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2.2.2. Colina
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2.2.3. Fosfato Inorgnico


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3. CONCLUSO:
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