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Tcnicas Espectromtricas

Professora Carin von Mhlen

1
Nesse captulo vamos estudar as seguintes tcnicas
espectromtricas:

Fotometria de Chama Flame Photometry - FP

Espectroscopia de Absoro Atmica em Chama Flame


Atomic Absorption Spectroscopy FAAS

Espectroscopia de Absoro Atmica em Forno de Grafite


Graphite Furnace Atomic Absorption Spectroscopy GFAAS.

Espectrometria de Emisso Atmica por Plasma Acoplado


Indutivamente - Inductively Coupled Plasma - Atomic Emission
Spectrometry - ICP-AES

2
Absoro e emisso molecular
As molculas sofrem trs tipos diferentes de transies
quantizadas quando excitadas pela radiao ultravioleta, visvel
e infravermelha.

Ultravioleta e visvel excitao envolve a promoo de eltrons


presentes em um orbital molecular ou atmico de baixa energia
para um orbital de maior energia.

Molculas transies vibracionais e rotacionais


Espectros contnuos
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/comm
ons/4/40/Twisting.gif

3
Espectro de absoro de diversos elementos
4
Absoro e emisso atmica
Espectroscopia atmica
Conjunto de tcnicas fundamentadas na interao entre a
radiao e os tomos no estado livre.

ABSORO
EMISSO
Absoro Emisso
5p 5p
4p 4p
Energia
trmica ou eltrica
sdio
3p 3p

285 330 590 nm


3s 3s

5
Absoro e emisso atmica
Espectroscopia de Absoro Atmica (EAA)

Espectroscopia de Emisso Atmica (EEA)

6
Espectros de absoro e de emisso atmica

Espectros de absoro atmica de alta


resoluo (R = 30.000) da estrela de tipo
solar HR6094. Vrias espcies qumicas
esto identificadas. (Site do Observatrio
nacional, UFRJ)
http://www.on.br/site_edu_dist_2011/site/conteudo/modulo2
7
/3_espectros_estelares/espectro/espectro-geral.html
8
Absoro e Emisso Atmica
A amostra vaporizada entre 2000 K e 10000 K para decompor-se em tomos.

A concentrao dos tomos no estado gasoso determinada pela medida da


absoro ou da emisso de radiao em determinados comprimentos de
onda caractersticos dos elementos.

9
ESPECTROMETRIA DE EMISSO ATMICA (FOTOMETRIA
DE CHAMA)

Tcnica espectroscpica de emisso em que a amostra


introduzida na chama em forma de aerossol.

Na chama:
evaporao do solvente, deixando o resduo slido;

vaporizao do slido;
dissociao em seus tomos componentes (inicialmente no estado
fundamental);

alguns tomos podem ser excitados pela energia da chama a nveis


de energia mais elevados;
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Fotmetro de Chama
Chama Detector

Leitura

Combustvel - gs
Cmara de mistura
Filtro monocromador
Nebulizador

Oxidante - Ar
Dreno Misturadores

Amostra Permite analisar poucos elementos


grupos I e II

11
Fotmetro de Chama

https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedd
www.spectronic.co.uk ed&v=d8hpUtRnsYc

12
Espectrometria de Absoro Atmica
1. Princpios:
P0 P

SELETOR DE COMPRIMENTO DE
FONTE DETECTOR
ONDA (MONOCROMADOR) AMOSTRA
DE LUZ
LUMINOSA

Experimeto espectrofotomtrico de feixe simples. P0 a energia radiante que


atinge uma amostra com a espessura b. P a energia radiante do feixe que sai
do outro lado da amostra.

13
Equipamentos - FAAS

www.kutztown.edu
sirius.mtm.kuleuven.be

14
ESPECTROMETRIA DE ABSORO ATMICA (AAS)

Uma fonte externa de radiao incide sobre o


vapor do analito.

Se a fonte de radiao externa for de frequncia


apropriada (comprimento de onda), poder ser
absorvida pelos tomos dos analitos e promov-
los a estados excitados.

15
Absoro atmica em chama

16
1955: Walsh (Austrlia), Alkemade (Holanda) AAS
1959: LVov (Russia) desenvolvimento do forno de
grafite

17
Absoro atmica...instrumental
Instrumentao
1. Fonte (EAA)
2. Sistema de modulao de sinal
3. Sistema de atomizao
4. Monocromador
5. Detector

Principais componentes
Fonte, sistema de modulao de sinal,
sistema de atomizao, monocromador, detetor
18
Instrumentao
Absoro atmica...fontes
1. Fonte (EAA)
Fonte: sistema que permite proporcionar a radiao
necessria, na forma de linhas

Lmpada de ctodo oco (LCO)


Bulbo de vidro contendo gs inerte (argnio) e
ctodo elaborado com o elemento de interesse
Emite somente linhas de interesse
Processo de sputtering
Existem lmpadas multi-elementos

19
Lmpada de ctodo co

Krug, F.J.; Nbrega, J.A.; Oliveira, P.V. Espectrometria de Absoro Atmica.

20
Instrumentao
Absoro atmica...fontes
1. Fonte (EAA) - Processo
processo de sputtering
Sputtering

Gs inerte excitado por descarga eltrica, precipitando-se em


direo ao ctodo...A coliso provoca extrao de tomos do metal

Colises secundrias levam o tomo a um estado excitado

No seu retorno ao estado fundamental, o tomo emite a energia


correspondente...especfica do metal.
21
Instrumentao
1. Fonte - Exemplo de lmpada de ctodo oco:
Ctodo feito de Ferro Quando o ctodo
bombardeado com ons Ne+ ou Ar+, com energia
elevada, tomos de Fe excitados vaporizam e
emitem luz com as mesmas frequncias absorvidas
pelo tomo de Fe do analito presente na chama.

22
Instrumentao
Absoro atmica...chopper
2. Sistema de Sistema
modulao de sinal
modulador (Chopper)
de sinal
Permite minimizar rudo do sistema atomizador
Permite minimizar problemas devidos a variao instrumental

23
Instrumentao

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ATOMIZAO

Soluo Nebulizao Spray Dessolvatao Aerosol


Problema Lquido/Gs
Slido/Gs

Volatilizao
Ionizao Dissociao
Molculas
ons tomos
gasosas

ons tomos Molculas


excitados excitados excitadas

25
Atomizadores e temperaturas de atomizao usuais
Atomizao com chama
ar/acetileno 2.250oC
N2O/acetileno 2.850oC

Atomizao eletrotrmica
Forno de grafite 1.400oC 2.600oC

Atomizao com plasma

Gerao de Hidretos
Com chama 1.000oC 1.400oC
Com forno - 800oC 1.000oC

Gerao de mercrio
A frio (reduo Hgo) - temperatura ambiente
A quente - 800oC 1.000oC (anlise de slidos) 26
3. Sistema de atomizao (EAA e EEA)
Absoro atmica...sistema de atomizao
Sistemas fundamentados na chama (Lquidos e gases)

Combustvel mais utilizado: acetileno (C2H2)


Oxidante mais utilizado: ar
Temperatura da chama: 2100-2400 oC
Outros oxidantes: xido nitroso (N2O)
Temperatura da chama: 2600-2800 oC

27
SISTEMA NEBULIZADOR/QUEIMADOR
(ATOMIZAO EM CHAMA)

Eficiente converso da amostra em


gotculas;
Evaporao da maior parte do solvente
antes da chama;
Resistncia a corroso;
Baixo acmulo de resduos;
Limpeza e manuseio fceis;
Respostas rpidas a novas amostras;
Chama estvel;
Longo passo tico.
28
29
CHAMAS

Vaporizar e converter totalmente a


OBJETIVO amostra, o mais rpido possvel, em
tomos gasosos.

Ter energia suficiente para atomizar rapidamente a


amostra;
Oferecer diferentes ambientes qumicos;
Pr-
Ser transparente radiao e emitir pouco;
requisitos
Baixo fluxo de gs;
No apresentar turbulncia;
Segura e econmica.
30
31
CHAMAS LAMINARES

a) Zona de combusto primria (base da chama)

Chama de cone azul; luz azul-esverdeada


(ar - C2H2) e azul-claro (N2O - C2H2)
b) Regio interzonal ou regio central
Zona adequada para medidas espectroscpicas
Relativamente homognea - equilbrio trmico
Zona adequada para medidas espectroscpicas
Emisso menos intensa que no cone primrio

c) Zona de combusto secundria (zona externa)


Ocorre lenta oxidao (CO CO2)
Libera calor e fraca emisso de radiao
32
QUEIMADOR

Combustvel mais utilizado: acetileno (C2H2)


Oxidante mais utilizado: ar
Temperatura da chama: 2100-2400 oC
Outros oxidantes: xido nitroso (N2O)
Temperatura da chama: 2600-2800 oC 33
34
3. Sistema de atomizao atomizao com forno de
Absoro atmica...sistema de atomizao
grafite
Sistemas eletrotrmicos (Lquidos e slidos)

Forno de grafite
Amostra inserida em um tubo
de grafite, aquecido
eletricamente
Maior tempo de residncia do
vapor atmico
Maior sensibilidade
Pequenos volumes de amostra
Amostras slidas

35
36
3. Sistema de atomizao atomizao com forno de
grafite

37
3. Sistema de atomizao atomizao com forno
de grafite
Absoro atmica...forno de grafite

Programa de temperatura do forno


Secagem (50-200 oC)
Eliminao do solvente

Temperatura
Calcinao (200-800 oC)
Eliminao da matriz (mineralizao)
Atomizao (2000-3000 oC)
Produo de vapor atmico
Tempo
Utilizao de gases de purga (argnio)
Remoo de gases produzidos na secagem e calcinao
Reduzir a oxidao do tubo
Evita a produo de gases txicos durante a atomizao

38
Metal voltil necessita modificadores

Efeitos esperados de um modificador

Promover estabilizao trmica de analitos volteis

Aumentar a volatilidade da matriz

Estabilizao trmica de algumas espcies interferentes

Deve ser aplicvel a um maior nmero de elementos possvel

Deve ser de fcil obteno em elevado estado de pureza

No deve reduzir a vida til do tubo e plataforma

Apresentar mnima contribuio no fundo


39
3. Sistema de atomizao

Plasma acoplado indutivamente (ICP)


Duas vezes mais quente do que a
chama de combusto.
A temperatura mais elevada e o
ambiente quimicamente inerte da
atmosfera de Ar eliminam a maioria
dos interferentes.
Permite anlise simultnea de vrios
elementos, pois no necessita da
lmpada de ctodo oco.

40
Gerao de vapor frio de Hg

41
3. Sistema de atomizao

Chama Forno de Plasma


grafite
Quantidade de amostra 1-2mL 1-100L intermedirio

Tempo de residncia Frao de Alguns


segundo segundos
Deteco simultnea ~70
elementos
Faixa linear 102 102 105

Limites de deteco (ng/g) 10-1000 0,01-1 0,1-10

42
Instrumentao
4. Monocromador

43
Instrumentao
5. DetectorAbsoro atmica...detetores
Sistema eletrnico que permite detectar a luz transmitida atravs do
sistema e transform-la em um sinal capaz de ser medido (eltrico).

Depende da radiao
a ser medida ().

44
Instrumentao
5. DetectorAbsoro atmica...detetores
Fototubo Fotomultiplicadora
Ctodo de material fotosensvel Similar ao anterior
Fluxo de ftons provoca emisso Sinal multiplicado pela
de eltrons presena de dinodos
Gerao de corrente proporcional
ao nmero de ftons

45
Instrumentao
Absoro atmica...detetores
5. Detector
Fotodiodos

Cristal de silicio dopado, com A situao eletrnica


semicondutores perturbada por exposio luz
Quando aplica-se potencial Gerao de corrente eltrica
gerao de pares e- / h+ proporcional quantidade de luz
Situao eletrnica particular
46
SISTEMA DE GERAO DE HIDRETOS

Ga, As, Se, Sn, Sb, Te, Pb Bi MH3 (volteis)

NaBH4
Hidreto...metal detector

queimador
M+3

Sistema de vapor frio


Hg (voltil)
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Exemplos de anlise por FAAS
1) Doseamento de Ca e Mg em soluo para hemodilise
Curva padro:
-Soluo padro: Ca = 107 g/mL e Mg = 114 g/mL
-Diluio: 10,0 mL de cada soluo para b.v. de 100 mL.
-Curva padro: volumes (tab.1) transferidos para b.v. de 100 mL.

Tabela 1. Curva padro de Ca e Mg

Volume da [Ca] Leitura para Ca [Mg] g/mL Leitura para Mg


diluio g/mL
5 mL 0,154 0,168
10 mL 0,310 0,341
15 mL 0,379 0,519
20 mL 0,619 0,685
25 mL 0,772 0,835
48
Exemplos de anlise por FAAS
1) Doseamento de Ca e Mg em soluo para hemodilise

CURVA PADRO
Equao da reta obtida: y = Ax +B

AMOSTRA
Ca: diluio 5,0 mL para b.v. 250 mL leitura = 0,343
Mg: diluio 5,0 mL para b.v. 50 mL leitura = 0,554

Calcule a concentrao de Ca e Mg na amostra em mg/mL.


Dados: MACa= 40 u; MAMg= 24 u

49
Exemplo 1 - Soluo
10,7 g 1mL
Ca = 107 g 1mL
x 5 mL
x 10 mL
X = 53,3 g de soluo estoque Ca
adicionada em 100 mL.
X = 1070 g adicionados em 100 mL:
Logo, [Ca] da primeira soluo da curva
1070 g = 10,7 g/mL
ser 53,3 g = 0,535 g /mL
100 mL
100mL

10,7 g 1mL 10,7 g 1mL


x 10 mL x 15 mL
X = 107 g de soluo estoque Ca X = 160,5 g de soluo estoque Ca
adicionada em 100 mL. adicionada em 100 mL.
Logo, [Ca] da primeira soluo da curva Logo, [Ca] da primeira soluo da curva
ser 107 g = 1,07 g /mL ser 160,5 g = 1,605 g /mL
100mL 100mL

50
Curvas de calibrao
Volume da diluio [Ca] g/mL Leitura para Ca [Mg] g/mL Leitura para Mg

5 mL 0.535 0.154 0.168

10 mL 1.07 0.31 0.341

15 mL 1.605 0.379 0.519

20 mL 2.14 0.619 0.685

25 mL 2.675 0.772 0.835

y = 3.3814x + 0.0942 [Ca]


R2 = 0.9765
3

2.5
[Ca] ug/mL

1.5

0.5

0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
Leitura para Ca 51
Amostra
Usar a equao da reta para calcular a concentrao da amostra:
Ca: y = 3,3814x + 0,0942
X = leitura e Y = concentrao
Y = 3,3814 x (0,343) + 0,0942
Y = 1,254 g/mL 1mg = 1.000 g
Concentrao de Ca na X 62,5 g
soluo 0,0625 mg/mL de Ca na
amostra
Concentrao de Ca na amostra:
1,254 g 1mL
X - 250 mL
X = 313,5 g de Ca em 5 mL de amostra, ou seja:
313,5 g /5mL = 62,5 g/mL de Ca na amostra
52
Efeito da Temperatura na Absoro e na Emisso
Absoro tomos no estado fundamental

Emisso tomos no estado excitado

A intensidade da
A populao no estado excitado aumenta 4% quando a
emisso depende da
temperatura aumenta em 10K, e a intensidade da
populao no estado
emisso aumenta em 4%.
excitado.

A absoro atmica no to sensvel


temperatura quanto a emisso atmica, que
apresenta uma relao exponencial em
relao temperatura.
53
Absoro atmica...interferncias
Interferncias
Tipo: Espectrais (pouco freqente)
Problema: Superposio de linhas espectrais
Exemplo: V (308,211 nm) em Al (308,215 nm)
Soluo: Escolha de linhas no interferidas (Al: 309,27 nm),
separao prvia do interferente

Problema: Presena de absoro molecular


Exemplo: CaOH em Ca
Soluo: Mudanas na estequiometria e temperatura da
chama.
54
InterfernciasAbsoro atmica...interferncias
Tipo: Qumicas
Problema: Formao (na chama) de compostos refratrios
que dificultam a atomizao
Exemplo:Presena de fosfato ou sulfato na determinao de
Ca (formao de sais pouco volteis)
Soluo:Aumentar temperatura da chama, adio de agentes
liberadores (Sr, La), adio de agentes protetores
(EDTA).

Problema: Ionizao
Exemplo: Elementos alcalino terrosos
Soluo:Utilizao de um tampo de ionizao (Na, K),
espcies que criam uma atmosfera redutora).
55
Absoro
Interferncias atmica...interferncias

Tipo: Fsicas (de matriz)


Problema: Qualquer diferena (fsica: ponto de ebulio,
viscosidade, tenso superficial) entre amostras e
padres analticos que alterem o processo de
nebulizao
Soluo: Fazer com que estas caractersticas sejam o mais
parecidas possveis
Ex: determinao do teor de cobre em cachaa. Os padres
devero conter a mesma quantidade de lcool
etlico que a amostra.
56
APLICAES

57
APLICAES

Chama: aproximadamente 64 elementos


Forno: aproximadamente 55 elementos
Gerao de hidretos: 8 elementos
Vapor frio: 1 elemento (Hg)

Ambiental: solos, guas, plantas, sedimentos, carvo...


Clnica: urina, cabelo, outros fluidos, frmacos...
Alimentos: enlatados, bebidas...
Industrial: fertilizantes, lubrificantes, minrios, tintas...

58
AMOSTRAS

Para anlises por FAAS

Amostras no estado lquido


Isentas de slidos suspensos

Etapas de preservao, preparao,


estocagem adequadas matriz e aos
analitos que sero quantificados.

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AMOSTRAS

Para anlises por GFAAS

Amostras no estado lquido


Emulses
Suspenses
Slidos (SS- GFAAS)

Etapas de preservao,
preparao, estocagem adequadas
matriz e aos analitos que sero
quantificados.
60
AMOSTRAS
Diluio
Digesto convencional

Preparao Digesto assistida por microondas


Digesto assistida por ultra-som
Emulses, suspenses
Pr-concentrao
Por remoo de solvente
Em linha
Por ponto nuvem
Resinas
Outras...

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TERMOS RECOMENDADOS PELA IUPAC

Com um nebulizador pneumtico operando pela


ao de um fluxo de ar comprimido, a soluo
aspirada e nebulizada na forma de um aerosol
em uma cmara de nebulizao;

Dessolvatao evaporao do solvente das


gotculas (forma aerosol seco);

Volatilizao etapa que segue a


dessolvatao. Ocorre no ambiente da chama;
62
Atomizao converso da espcie
volatilizada em tomos livres;

Analito elemento a ser determinado;

Branco soluo que no contm o analito,


mas possui, sempre que possvel, a mesma
composio da soluo de amostra;

Sinal quantidade fsica que carrega a


informao sobre a concentrao do analito;

63
Concentrao caracterstica concentrao que
corresponde a uma leitura de 0,0044 unidades de
absorbncia;

Sensibilidade variao na resposta devido a uma


pequena variao na quantidade sendo determinada;

Limite de deteco concentrao de analito que


gere um sinal significativamente diferente do sinal de
um branco ou do background.

64
CHAMAS LAMINARES

Influncia da estequiometria da chama na determinao do


teor de cromo em amostra de efluente.

0,25

y = 0,0416x + 0,0066
0,2 R2 = 0,9934

ESTEQUIOMETRICA
0,15
SINAL

REDUTORA

0,1
y = 0,009x + 0,0002 Linear
R2 = 0,9993 (ESTEQUIOMETRICA)
0,05

0
0 1 2 3 4 5 6
CONCENTRAO (mg/L)

65
Anlise Quantitativa
Curvas de calibrao: Vrias solues de concentrao
conhecida do analito so preparadas (padres) e introduzidas
no instrumento. A resposta registrada e plotada em uma
curva com o resultado da medida versus a concentrao do
analito. Tambm chamadas de curvas de trabalho ou curvas
analticas.

0,22

Curva analtica plotada em 0,20

regresso linear para a 0,18

0,16
determinao de Cd em

Absorbncia
0,14
amostra de carvo mineral por A 4.26667E-4 0.00177
0,12 B 0.00299 3.67644E-5
Espectrometria de Absoro ------------------------------------------------------------
0,10
Atmica com Forno de Grafite. R SD N P
0,08 ------------------------------------------------------------
0.9997 0.00154 6 <0.0001
0,06 ------------------------------------------------------------

0,04
20 30 40 50 60 70
pg Cd

66
A varivel independente (concentrao) corresponde ao eixo das abscissas.
O Coeficiente de correlao (r) indica quo linearmente os valores de x e y
esto correlacionados. Assume valores -1 r 1. Valores prximos da
unidade indicam forte correlao (direta quando + e inversa quando -).

Regresso linear:

y = a + bx
Onde a = intercepto e b = inclinao

67
Exemplos de curvas de regresso linear e seus coeficientes de
correlao.

68
Mtodos de quantificao

Mtodos de calibrao externa: As curvas analticas so


obtidas com solues de padres analticos, e a amostra
analisada sob as mesmas condies. Esse mtodo mais
utilizado quando os efeitos de matriz e a presena de
interferentes no so significativos.
0,22

Curva analtica plotada em 0,20

regresso linear para a 0,18

0,16
determinao de Cd em

Absorbncia
0,14
amostra de carvo mineral por A 4.26667E-4 0.00177
0,12 B 0.00299 3.67644E-5
Espectrometria de Absoro ------------------------------------------------------------
0,10
Atmica com Forno de Grafite. R SD N P
0,08 ------------------------------------------------------------
0.9997 0.00154 6 <0.0001
0,06 ------------------------------------------------------------

0,04
20 30 40 50 60 70
pg Cd

69
Mtodos de adio de padro: Particularmente til quando a
amostra complexa, nas quais a probabilidade de efeito de matriz
alta. Consiste na adio crescente de quantidades conhecidas do
analito em pores de amostra. O sinal medido antes e aps a
adio o padro. A Fig. 8 apresenta exemplo de curva de calibrao
para o mtodo de adio de padro. Muito importante: a resposta
deve ser LINEAR.

Exemplo de curva de calibrao para o mtodo de adio de padro.


(adaptado de RIBANI, 2004) 70
Mtodo do padro interno: Padro interno (PI) um composto,
geralmente com caractersticas estruturais similares ao analito,
adicionado aos padres de calibrao e amostras em
concentraes conhecidas e constantes, para facilitar a
determinao do analito. Muito usado em cromatografia, pode
tambm ser aplicado a outras tcnicas. A padronizao interna
pode ser empregada em espectrometria de absoro atmica,
espectrometria de emisso tica com fonte de plasma
indutivamente acoplado (ICP-OES) e espectrometria de massas
com fonte de plasma indutivamente acoplado (ICP-MS) para
compensar vrios tipos de erros sistemticos e randmicos. O
princpio desse mtodo baseia-se na comparao de um ou mais
sinais analticos (analito) com um ou mais sinais de referncia de
elementos previamente selecionados (padro interno).

71
Um padro interno deve ser adicionado aos brancos, solues de
referncia e s amostras, ou quando presente na amostra, deve-
se adicionar uma quantidade elevada desse elemento amostra
para anular o efeito da concentrao original da amostra.
Quando a padronizao interna usada, todos os clculos so
baseados na suposio de que tanto o analito como o padro
interno sofrem influncias similares da matriz da amostra e de
que ambos so perturbados igualmente pelas alteraes nas
condies instrumentais ou operacionais. (Fernandes et al.,
2003). Para os clculos de concentrao, divide-se a resposta
analtica do analito de interesse pela resposta analtica do
padro interno utilizado.

72
Resposta do analito / Resposta do PI
R5/PI5

R4/PI4
RX/PIX
R3/PI3

R2/PI2
R1/PI1

C1 C2 C3 CX C4 C5
Concentrao

Exemplo de curva de calibrao obtida por padronizao interna.

73