UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA MATAZA

Departamento de Ciencias de la Salud-MEDICINA

UA 08- Agentes, Mecanismos de Defensa y Nutricin [ADN]

Hemocultivo
Jaime Kovensky

Las infecciones son procesos patolgicos donde la presencia de microorganismos en una

localizacin anatmica (que se conoce como foco de infeccin) de la economa provoca un
dao a nivel local considerable. Este dao por diversos mecanismos puede quedar restringido
al foco o transformarse en un evento con repercusin en otros sitios del cuerpo o en forma
generalizada.
Uno de los mecanismos por los cuales una infeccin focalizada se extiende al resto de los
rganos o sistemas es el pasaje de microorganismos del foco a la sangre y por su circulacin en
esta, la llegada a otros rganos o sistemas.
La presencia de microorganismos en sangre toma diferentes acepciones segn cual es el tipo
de microorganismo involucrado:

Microorganismo Denominacin

Bacterias Bacteriemia
Hongos Fungemia
Virus Viremia
Parsitos Parasitemia

El diagnstico microbiolgico clnico de una bacteriemia o fungemia comprende la

objetivacin de la presencia de la bacteria o el hongo, la determinacin de su identidad
taxonmica con el mximo grado alcanzable (por lo menos hasta gnero y especie) y
diferentes pruebas que permitan predecir el comportamiento de estas bacterias u hongos
frente a las drogas antimicrobianas a utilizar en el tratamiento.

La resolucin de cada uno estos objetivos involucra diferentes procesos y cada proceso a su
vez se compone de diferentes procedimientos. Se muestran en el siguiente esquema.

Objetivo Proceso Procedimiento Resultado

Objetivar la presencia de Aislamiento microbiano Cultivo Presencia o ausencia
microorganismos
Determinar su identidad Tipificacin o -Pruebas bioqumicas Gnero, especie,
taxonmica identificacin -Tcnicas moleculares subespecie, serotipo,
microbiana -Protemica etc.
Predecir el comportamiento -Prueba de sensibilidad -Antibiograma Sensibilidad o
de las bacterias u hongos a a los antimicrobianos -Concentracin inhibitoria resistencia cada droga
los antimicrobianos -Determinar mnima antimicrobiana en
mecanismos de -Tcnicas moleculares que particular
resistencia determinan genes de
resistencia
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Aislamiento microbiano mediante cultivo: Consiste en poner en contacto una muestra

representativa del foco presumido con medios de cultivo a fin de favorecer la multiplicacin de
las bacterias. Los medios de cultivo son formulaciones que poseen nutrientes y agua que
permiten el crecimiento de los grmenes. Pueden ser lquidos o slidos, cubrir los
requerimientos nutricionales mnimos o tambin aquellos de los microorganismos ms
exigentes. La eleccin del medio de cultivo a utilizar en el aislamiento de los microorganismos
de cada foco en particular se sustenta en el conocimiento sobre las etiologas ms probables
en cada foco. Como regla general los medios lquidos solo se utilizan cuando la muestra
proviene de un foco que se ubica en rgano o cavidad naturalmente estril, en cambio cuando
la muestra proviene de un foco normalmente colonizado por bateras y hongos se utilizan
medios slidos.
As es que para el aislamiento de bacterias u hongos a partir de la sangre se utilizan medios de
cultivo lquidos. Como las bacteriemias pueden provenir de focos primarios muy diversos con
etiologas muy disimiles se utilizan formulaciones muy enriquecidas. Otro componente
esencial de los medios de cultivo para la sangre (llamado hemocultivo) es un anticoagulante ya
que los cogulos sanguneos atrapan a las bacterias u hongos y no permiten que entren en
contacto con los nutrientes. Para la realizacin de los hemocultivos existen en la actualidad
diferentes alternativas metodolgicas:

a) metodologa manual
b) metodologa automatizada
c) medios bifsicos
d) metodologa de lisis centrifugacin.

En el trabajo prctico utilizaremos frascos de hemocultivo de metodologa automatizada. Los

mismos poseen un caldo de cultivo enriquecido y polianetol sulfonato de sodio (SPS) como
anticoagulante. La deteccin del crecimiento de las bacterias y hongos se realiza por el cambio
de color de una resina cromognica sensible al cambio de CO2 dentro del frasco. El aumento
de CO2 se produce solo si se multiplican microorganismos que como resultado final de su
metabolismo producen CO2 que vuelcan al exterior de su soma.
Una vez que se multiplicaron los microorganismos que estaban presentes en la muestra de
sangre deben realizarse coloraciones a fin de poder comenzar a clasificar a los
microorganismos y transferirlas a medios slidos para as obtener colonias bacterianas que
permiten realizar los posteriores procesos del diagnstico.
La coloracin elegida es la de Gram y la transferencia a medios slidos se realiza por siembra
en placas de Agar Sangre y Agar CLED.