LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

METODOS DE SIEMBRA

Introduccin

El estudio de los microorganismos requiere considerar el origen y caractersticas de las muestras con el fin de
permitir recuperar de la forma ms fiable los microorganismos presentes. En otros casos se deben considerar
los requerimientos del estudio que puede ir desde la conservacin de microorganismos de inters, la
ampliacin del nmero o la evaluacin morfolgica y fisiolgica de los microorganismos, entre otros. La
siembra es entonces un procedimiento de rutina en microbiologa que emplea medios de cultivos para permitir
el crecimiento selectivo o no de microorganismos. Los mtodos de siembra pueden variar considerando el
propsito de la siembra, usando medios slidos, lquidos o semislidos y mtodos de siembra en estra, por
agotamiento, en profundidad, en superficie, masivos o con suspensiones diluidas. En cada caso se pretende
colocar un material microbiolgico para promover el crecimiento y subsiguiente multiplicacin para obtener
un cultivo.

EN este contexto tambin se puede identificar un cultivo primario que busca recuperar microorganismos
sembrndolos por primera vez en medios de cultivo o secundarios cuando la seilla microbiolgica o inoculo
proviene de un cultivo primario.

Metodologa
Siembra por dilucin:
1. Pese un gramo de suelo y suspndalo en 9 mL de agua peptonada y homogenice la muestra.
2. Tome 0,1 mL de la suspensin anterior y pngalos en una cada de agar ntritivo.
3. Homogenice la muestra usando un rastrillo de drigalsky estril

Siembra en medio lquido

Finalidad: poner la bacteria en suspensin
Tomar el tubo de ensayo con medio lquido (caldo nutritivo)
Con el asa redonda y previamente esterilizada, tomar una muestra diluida y siembra en el caldo nutritivo.

Siembra en pico de flauta.

Tomar el tubo de ensayo con el agar inclinado (agar nutritivo)
Con el asa recta y previamente esterilizada, tomar una muestra diluida y siembra en la superficie del agar
inclinado, haciendo estras y ano muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia por la parte ms
profunda de la superficie inclinada y se termina la estra en la parte ms cerca de la boca del tubo.

2) Siembra por estras por agotamiento en superficie:

Con ste procedimiento se puede conseguir una buena separacin de las colonias y aislarlas fcilmente.
Con el asa redonda previamente esterilizada, tomar una gota de la muestra diluida y sembrar en la superficie
del agar haciendo estras. Esto puede realizarse de varias formas:
a- Al comienzo se coloca el inoculo, luego se contina con las estras. Cuando se quiere obtener colonias muy
separadas se puede utilizar dos o tres placas de Petri, para lo cual se repite la operacin sin tomar con el asa
nuevo material.
b- Se puede dividir la placa de Petri en cuatro cuadrantes; una vez depositado el material en el primero,
siguiendo el sentido de las agujas del reloj, se hace una estra luego en el segundo, tercero y cuarto cuadrante
sin cargar nuevamente el asa; en el ltimo cuadrante aparecern las colonias aisladas
c- El inculo se extiende sobre una pequea zona de la placa, prxima al borde, se esteriliza el asa y se traza
otra estra a partir del depsito y as sucesivamente.

Finalidad. Obtener colonias aisladas

Siembra por sedimentacin.

Es muy til para evaluar calidad microbiolgica del aire.
1. Tome una caja de petri y djela abierta durante 15-30 minutos en un lugar a analizar.
2. Cierre la caja e incube.

Cuestionario
1. Cul es la utilidad de los medios de cultivo semislidos
2. Cul es la composicin del agar nutritivo
Bibliografa
Society for General Microbiology. 2006. Basic Practical Microbiology. ISBN 0 95368 383 4