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I. INTRODUCION........................................................................................................2
II. OBJETIVO.................................................................................................................2
III. MARCO TEORICO...................................................................................................3
3.1. ENZIMAS...................................................................................................................3
3.1.1.Clasificacin de enzimas..................................................................................3
3.1.2.Funcin de las enzimas como catalizador......................................................3
3.2. CINETICA ENZIMATICA.......................................................................................4
3.2.1.Cintica de las Reacciones Enzimticas.........................................................4
3.3. FACTORES QUE AFECTAN LA VELOCIDAD DE LAS REACCIONES
ENZIMTICAS.........................................................................................................5
3.3.1.Efecto del pH.....................................................................................................5
3.3.2.Efecto de la temperatura..................................................................................5
3.3.3.Efecto de la concentracin de sustrato...........................................................5
3.4. ENZIMAS PRESENTES EN LOS TEJIDOS VEGETALES...............................6
3.5. PERXIDO DE HIDROGENO...............................................................................8
3.5.1.Descomposicin del Perxido (H2O2)............................................................8
IV. MATERIALES Y MTODOS.................................................................................10
4.1. Materiales..................................................................................................................10
4.1.1.Materia Prima..................................................................................................10
4.1.2.Materiales........................................................................................................10
4.1.3.Reactivos.........................................................................................................10
4.2. Mtodos.....................................................................................................................10
4.2.1.Mtodo qumico..............................................................................................10
4.2.2.Metodologa....................................................................................................11
V. RESULTADOS Y DISCUSIONES..........................................................................14
5.1. RESULTADOS.........................................................................................................14
5.1.1. Clculo de la molaridad inicial del perxido de hidrgeno en la reaccin
qumica............................................................................................................14
5.1.2.Formula de la descomposicin del Perxido de Hidrogeno por enzimas.14
5.1.3.Clculo de la concentracin de los reactivos y productos de la reaccin
qumica, analizando los resultados obtenidos.............................................14
5.2. RESULTADOS Y DISCUSIONES DE LA DESCOMPOSICIN DEL H 2O2
UTILIZANDO CATALIZADORES DE ORIGEN VEGETAL..........................15
5.2.1.Resultados de la Muestra N1.......................................................................15
5.2.2.Resultados de la Muestra N2.......................................................................17
5.2.3.Resultados de la Muestra N3.......................................................................19
5.2.4.Resultados de la Muestra N4.......................................................................20
VI. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES.......................................................23
VII. BIBLIOGRAFA......................................................................................................24
1
PRACTICA N 02
I. INTRODUCION
Sin enzimas, no sera posible la vida que conocemos. Igual que la biocatlisis que
regula la velocidad a la cual tienen lugar los procesos fisiolgicos, las enzimas
llevan a cabo funciones definitivas relacionadas con salud y la
enfermedad[ CITATION Ort05 \l 10250 ].
II. OBJETIVO
2
III. MARCO TEORICO
III.1. ENZIMAS
Una enzima es una protena que acta como catalizador biolgico, llevando a
cabo reacciones bioqumicas a muy altas velocidades, no se consume durante
la reaccin y en general presenta un elevado grado de especificidad
(Badui,2006).
3
reacciones bioqumicas de los sistemas biolgicos requieren de una
cantidad de energa que permita su inicio. La funcin de un catalizador
es la de disminuir el requerimiento de energa inicial necesaria para que
un proceso se lleve a cabo[ CITATION Myr77 \l 10250 ].
Segn Badui (2006), nos menciona que existen varios modelos que
explican el funcionamiento de una enzima como catalizador, siendo uno
de los ms aceptados el desarrollado por Michaelis y Menten en 1913.
Este modelo considera que cuando el reactivo o sustrato (S) est en
contacto con la enzima (E), rpidamente se combinan para formar un
complejo enzima-sustrato (E.S). Posteriormente, de este complejo se
liberan tanto el producto como la enzima, dejndola disponible para
combinarse con una nueva molcula de sustrato. Lo anterior se
representa en la siguiente ecuacin general para una reaccin en la que
participa un solo sustrato:
E+ S k 1 ES k 2 E+ P
4
III.3. FACTORES QUE AFECTAN LA VELOCIDAD DE LAS
REACCIONES ENZIMTICAS
Segn Badui, (2006) nos dice que la velocidad a la que las reacciones
enzimticas proceden depende de varios factores como:
5
encuentre activa. En estas condiciones, el producto se obtiene a la
mxima velocidad posible para la cantidad de enzima presente. En caso
de que la concentracin de sustrato sea menor, la velocidad de reaccin
disminuye generalmente. Este aspecto es muy importante en la
caracterizacin cintica de una enzima, como se ver ms adelante. Por
otra parte, la accin de una enzima a nivel industrial debe ser ptima
tanto en trminos de costo como de eficiencia cataltica, por lo que la
reaccin se debe llevar a cabo en la medida de lo posible a la mxima
velocidad (Badui, 2006).
6
Cuadro N 2: Enzimas presentes en los vegetales
7
III.5. PERXIDO DE HIDROGENO
El agua oxigenada o perxido de hidrgeno es el nico agente germicida
compuesta slo de agua y oxgeno. Al igual que la capa de ozono, mata
organismos patgenos por oxidacin. El perxido de hidrgeno est
considerado el desinfectante natural ms seguro[CITATION Pon10 \l
10250 ].
2H2O2 2H2O + O2
8
En la industria, se tambin se utiliza la enzima catalasa, para
diferentes fines. Por ejemplo, se usa en la industria textil, para
eliminar residuos de perxido de hidrgeno[ CITATION Due14 \l
10250 ].
9
Fuente: [ CITATION Due14 \l 10250 ]
IV.1.2. Materiales
Pipeta 25ml
Fiola 25ml
Equipo para medir la descomposicin del H 2 O2
Probeta 10ml
Balanza Analtica
IV.1.3. Reactivos
H 2 O 2 (Agua oxigenada) de 10 volmenes.
IV.2. MTODOS
Catalasa
2H2O2 2H2O + O2
IV.2.2. Metodologa
Primera Paso:
10
Se pes 0.7344g (Muestra N 1), 1.0765g (Muestra N 2) de papa y
2.2338g (Muestra N3 ) , 1.9534 g (Muestra N4) de manzana.
Se pes las cuatro muestras, siendo dos de manzana y dos de papa.
PAPA
0.7344g 1.0765g
Muestra
MANZANA4
2.2338 g 1.9534 g
Segundo Paso:
11
Se incorpor a una fiola 25ml en diferentes tiempos por separado
luego de realizar la muestra N1 se realiz la muestra N3 y as
consecutivamente y posteriormente se agreg 10ml de perxido de
hidrogeno.
Tercera Paso:
12
Tubo centrfuga de vidrio
en forma de pera
Manguera
Unin o conexin de la
manguera y fiola
V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
V.1. RESULTADOS
13
V.1.1.Clculo de la molaridad inicial del perxido de hidrgeno en la
reaccin qumica.
El perxido de hidrgeno con un volumen de 10mL, peso molecular de
34.0146g/mol y una densidad molar de 1.45g/mL, donde se hizo la
reaccin, entonces la [M] molaridad sera:
g
[ H 2 O2 ]=1.45 mL H 2 O2 10 mL H 2 O2 =14.5 g
14.5 g H 2 O2
g
34.0146 H O
mol 2 2
[ H 2 O2 ]= 1 L solucin
mol H O
2 2
[ H 2 O2 ]=0.426 1 Lde solucin
2Enzima
H 2 O2 2 H 2 O+O2
2Catalasa
H 2 O2 2 H 2 O+O2
14
2 H 2 O2(l) Catalasa O2(g) +2 H 2 O(l )
Muestra N1
Especificaciones
Muestra: papa Perxido de Hidrogeno H2O2
Peso: 0.7344g volumen 10ml
Resultados Obtenidos
Volumen Volumen Volumen Tiempo N=Pv/Rt O2 N/V
2H2O 2H2O2
(Ml) De O2 (L) Total (L) (S) (Mol) (Mol/L)
0 0 0.025 0 0 0 0 0.426
1 0.001 0.026 11.13 3.41293e-05 0.001312664 0.00262533 0.42468734
2 0.002 0.027 26.9 6.82586e-05 0.002528095 0.00505619 0.42215924
3 0.003 0.028 59.6 0.000102388 0.003656708 0.00731342 0.41850253
4 0.004 0.029 100.2 0.000136517 0.004707486 0.00941497 0.41379505
5 0.005 0.03 148.9 0.000170646 0.005688213 0.01137643 0.40810683
6 0.006 0.031 216.1 0.000204776 0.006605666 0.01321133 0.40150117
7 0.007 0.032 300.7 0.000238905 0.007465779 0.01493156 0.39403539
8 0.008 0.033 450 0.000273034 0.008273764 0.01654753 0.38576162
9 0.009 0.034 780.1 0.000307163 0.00903422 0.01806844 0.3767274
Fuente: Elaboracin Propia
Ejemplo:
Considerando:
PV =nRT ecuacin (1) P 0.84 atm
300.1
15 T 5 k
n mol
V 0.001 litros
R 0.082 atm L/molK
PV
n=
RT
n mol
[O2]= ( )
V l
; n= 3 .41293x 105 ; V= 0.026l
[ 2 H 2 O2 ]=2*[O2]
mol
2 H 2 O2 ]= 2 X 0.001312664
l
mol
2 H 2 O2 ]= 0.002625329
l
Disminucin de la Concentracin Perxido de Hidrogeno ( 2 H 2 O2 .
generado por la enzima presente en la papa (Solanum tuberosum)
mol
Sabiendo que la concentracin inicial es: 0.426
l
mol mol
[2H2O2]= 0.426 - 0.001312664
l l
mol
[2H2O2]= 0.42468734
l
16
V.2.2.Resultados de la Muestra N2
17
0
0
Oxigeno (mol)
0
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900
papa al 0.7344 papa
Ti empo (s ) al 1.0765
18
V.2.3.Resultados de la Muestra N3
Cuadro N 6: Resultado de la muestra N3 (Manzana)
Muestra N 3
Especificaciones
Muestra: Manzana Perxido de Hidrogeno H2O2
Peso:2.2338g Volumen: 10ml
Resultados Obtenidos
Volumen Volumen Volumen Tiempo N=Pv/Rt O2 N/V
2H2O 2H2O2
(Ml) (L) Total O2 (S) (Mol) (Mol/L)
0 0 0.025 0 0 0 0 0.426
0.0026253
1 0.001 0.026 66.7 3.41293E-05 0.00131266 0.42468734
3
0.0050561
2 0.002 0.027 145.9 6.82586E-05 0.00252809 0.42215924
9
0.00010238 0.0073134
3 0.003 0.028 226.7 0.00365671 0.41850253
8 2
0.00013651 0.0094149
4 0.004 0.029 345.4 0.00470749 0.41379505
7 7
0.00017064
5 0.005 0.03 504.5 0.00568821 0.01137643 0.40810683
6
0.00020477
6 0.006 0.031 727.8 0.00660567 0.01321133 0.40150117
6
Fuente: Elaboracin Propia
En el Cuadro N06 se muestran los resultados de la Muestra N3 (2.2338g), que
corresponde a la manzana (Malus domestica). Se convirti la unidad de medida ml a litros
(ml/1000), para poder usar en la frmula de los gases ideales (n=PV/RT), considerando
P=0.84, T=300.15, R=0.082 atm L/molK y V=volumen (L). Se realiza la misma operacin
del ejemplo anterior mostrado en el cuadro N4. Observndose tambin en el Grafico N3 la
cada de la concentracin de Perxido de Hidrogeno de la Muestra N3 (2.2338g).
0.42
0.42
0.41
0.41
0.4
0.4
0.39
0.39
0 1 2 3 4 5 6 7
Volumen (ml)
Manzana 2.2338 g
19
V.2.4.Resultados de la Muestra N4
Fuente: Elaboracin Propia
Cuadro N 7: Resultados de la muestra N4 (Manzana)
MUESTRA N4
Especificaciones
Muestra: Manzana Perxido De Hidrogeno H2O2
Peso: 1.9534g Volumen: 10ml
Resultados Obtenidos
Volume
Volumen Volumen Tiempo n=PV/RT O2 n/V
n Total 2H2O 2H2O2
(ml) (L) (s) (mol) (mol/L)
O2
0 0 0.025 0 0 0 0 0.426
1 0.001 0.026 13.2 3.41293E-05 0.00131266 0.00262533 0.42468734
2 0.002 0.027 69 6.82586E-05 0.00252809 0.00505619 0.42215924
3 0.003 0.028 130.2 0.000102388 0.00365671 0.00731342 0.41850253
4 0.004 0.029 196.2 0.000136517 0.00470749 0.00941497 0.41379505
5 0.005 0.03 300.6 0.000170646 0.00568821 0.01137643 0.40810683
6 0.006 0.031 423.6 0.000204776 0.00660567 0.01321133 0.40150117
7 0.007 0.032 570 0.000238905 0.00746578 0.01493156 0.39403539
Fuente: Elaboracin Propia
En el Cuadro N07 se muestran los resultados de la Muestra N4 (1.9534g), que
corresponde a la manzana (Malus domestica). Se convirti la unidad de medida ml a litros
(ml/1000), para poder usar en la frmula de los gases ideales (n=PV/RT), considerando
P=0.84, T=300.15, R=0.082 atm L/molK y V=volumen (L). Se realiza la misma operacin
del ejemplo anterior mostrado para el Cuadro N4.
20
0.43
0.42
[] Peroxido de Hidrogeno
0.41
Manza n
0.4 a
1.9534 g
0.39
0.38
0.37
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Volumen (ml)
21
Fuente: Elaboracin Propia
Grafico N 7 se realiza una comparacin entre las dos muestras de los dos
productos Muestra N1 y Muestra N 4, donde se puede observar que la ms
eficiente es la Muestra N1(papa) como catalizador que la Muestra N4
(Manzana)
0.02
0.01
0.01
0.01
Agua (mol)
0.01
0.01
0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
Tiempo(s)
Manza na 1.9534 g Manza na 2.2338 g
22
0
0
Oxigeno (mol)
0
0 100 200 300 400 500 600
Tiempo (s)
papa 1.0765 g manza na 1.9534 g
RECOMENDACIONES
Verificar si la pipeta est marcando un valor cero, para tener un mejor
resultado.
utilice ms de tres cronmetros, para promediarlos o elegir el que presente
un mejor resultado.
verificar el estado del reactivo y la materia prima (papa y manzana), siendo
aspectos importantes para los resultados finales de la prctica.
23
Utilizar materiales limpios y realizar correctamente las mediciones del
H
reactivo ( 2 O2) y materiales primas (papa y manzana).
Anotar y verificar que la presin, temperatura, entre otros cumplan un
standard, ya que esto afecta directamente a la enzima y en su manera de
acelerar la reaccin.
VII. BIBLIOGRAFA
24
Pea, D. A., Arroyo, B. A., Gomez, P. A., & Tapia, L. R. (1988). Bioqumica.
Mexico: Editorial Limusa.
Pontificia Universidad Javeriana. (2010). FICHA DE DATOS . Obtenido de
http://portales.puj.edu.co/doc-quimica/fds-labqca-dianahermith/k.pdf
Stanier, Y. S., & Villanueva, R. J. (1996). Microbiologa. Barcelona: Reverte.
Teijn, J. M. ( 2006). Fundamentos de bioqumica estructural. Madrid: Editorial
Tebar.
UNAD. (2014). Leccin 9: Enzimas. Obtenido de
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/202015/202015/leccin_9_enzimas.html
25