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Ensemencement
10 ml 10 ml
Bouillon nutritif Bouillon nutritif
(Extrait de viande (Extrait de viande
+Peptone+NaCl ou +Peptone+NaCl ou
KCL) KCL)
Incubation
Etuve
0,1 ml 0,1 ml
Solution mre Solution mre
Incubation
37C/24 heures
Culture bactrienne
1
Etude des effets antimicrobiens des extraits de thym
2 -Mthode de contact direct (Bourgeois et Leveau, 1980).
10 ml 10 ml
Bouillon nutritif Bouillon nutritif
(Extrait de viande (Extrait de viande
+Peptone+NaCl ou +Peptone+NaCl ou
KCL) KCL)
Incubation
37C/24 heures
Etuve
1ml 1ml
1ml 1ml
A jeter A jeter
Eau
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
physiologique
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5
Aprs extraction si on obtient 50 ml dextrait pur, les dilutions leau distille raison
de 0, 20, 40, 60, 80 et 100% doivent tres ralises comme suit :
3
Lactobacillus bulgaricus Streptococcus thermophilus
Ferments
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
lactiques dans
leau
physiologique
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5
1ml 1ml
Eau distill
Eau distill
Extrait pur
Extrait pur
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
9 ml
Incubation/37C Incubation/37C
Strilisation lautoclave
120 C /20mn
b-Test de diffusion
1ml 1ml
15 15
MRS M17
5
Trois disques sont imbibs dans Trois disques sont imbibs dans
Lextrait pur, 20%,40%,60%,80%. Lextrait pur, 20%,40%,60%,80%.
Pendant 5mn Pendant 5mn
40%
60%
80%
Pnicilline
15 boites
La lecture des diamtres dinhibition se fera aprs incubation des boites de Ptri 37C
pendant 24, 48 72 heures laide dun pied colis (Guignar, 1998).
6
Etude des effets antimicrobiens des extraits de thym
Ensemencement
10 ml 10 ml
Bouillon nutritif Bouillon nutritif
(Extrait de viande (Extrait de viande
+Peptone+NaCl ou +Peptone+NaCl ou
KCL) KCL)
Incubation
Etuve
0,2 ml 0,2 ml
Solution mre Solution mre
Ensemencement en tube
Contenant 2 ml (Muller-
Hinton
Extrait pur
Muller-Hinton
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
Chaque tube 3
Ferments
9 ml
9 ml
lactiques dans
leau
physiologique
10-4 10-4
Ensemencement
Par strie
Incubation
37C/18-24 heures
Dnombrement
8
Le nombre de colonies de bactries obtenu sur la strie de la dilution 10-4 est compar celui de chaque
tube exprimental contenant linoculum, galement ensemenc sur le mme milieu de culture en strie de 5cm
et incub 37 C durant 18 24 heures. Ainsi, le premier tube exprimental dont le nombre de colonies
prsent sur sa strie est infrieur ou gal celui de la dilution 10-4 correspondra la CMB.