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UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JULIO DE MESQUITA FILHO

INSTITUTO DE QUMICA

DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA E TECNOLOGIA QUMICA

Bioqumica experimental II

Relatrio VI

Metabolismo de Carboidratos: Ciclo de Krebs

Profa. Dra.Denise Bevilaqua

Guilherme Arroyos

Jaqueline Maria Felipe

Jonatas Erick Maimoni Campanella

Ra Bueno

Araraquara

2015
QUESTES

1. Determine a viabilidade da levedura em cada condio testada, de acordo com a frmula:

Para a determinao da viabilidade da levedura, necessrio contar as clulas viveis


(incolor) e as clulas viveis (colorao azul) atravs da cmara de Neubauer. A cmara de
Neubauer consiste em 25 quadrados grandes milimetrados. A contagem feita nos quatro
quadrados do canto e no centro de um dos quadrados grande.

Ttulo

Com Aquecimento (n Sem Aquecimento (n de


clulas) clulas)
Q1 42 20
Q2 23 23
Q3 22 29
Q4 28 14
Q5 33 28
Mdia 29,6 22,8
Ttulo (nde
7,40 x 106 5,70 x 106
clulas/mL)

Nmero de clulas viveis

Clulas N de clulas
Clulas coradas Clulas no coradas
totais viveis (%)
Com
148 0 148 0
Aquecimento
Sem
88 26 114 22,8
Aquecimento
3. Como voc explica os resultados obtidos em cada tubo em relao atividade da
enzima?
O tubo 1 no contm leveduras, por isso a enzima succinato desidrogenase no esta
presente e no haver a passagem do succinato para fumarato. Logo, no ocorre a reduo do
azul de metileno leucoforma.
Como o tubo 2 foi aquecido, as leveduras morreram e as enzimas presentes
desnaturaram, ento no ocorre tambm essa etapa da passagem de succinato para fumarato e
tambm no h a reduo do azul de metileno.
J no tubo 3, que foi deixado em banho de gelo, a enzima no desnaturou, portanto h
atividade enzimtica capaz de fazer a passagem do succinato para fumarato, liberando os
eltrons que reduzem o azul de metileno.

4. Por que o azul de metileno pode ser usado para determinar a viabilidade de uma
suspenso de clulas de levedura? Justifique sua resposta.

O azul de metileno oxidado possui colorao azul quando oxidado e incolor quando reduzido,
segundo a reao indicada abaixo:

As clulas vivas esto realizando o ciclo de Krebs normalmente, e portanto liberando os H+


necessrios para reduzir o azul de metileno a leucometileno (incolor). J as clulas mortas no
esto realizando esse processo, mantendo o azul de metileno oxidado. Sendo assim, clulas
mortas apresentam cor azul e as clulas vivas incolores.

BIBLIOGRAFIA
Nelson, David L.(David Lee), 1942- Lehninger princpios de bioqumica /David L. Nelson,
Michael M. Cox ; So Paulo : Sarvier, 2006