DISCUSIN

2. INHIBICIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA POR EFECTO DE LA TEMPERATURA.

En la grfica n, se encuentran representadas el cambio en las absorbancias asociada a la

concentracin de tetraguayacol en funcin del tiempo para diferentes periodos de incubacin de
solucin de peroxidasa a dilucin 1:50. De esto fue posible encontrar una prdida progresiva de la
actividad enzimtica de la peroxidasa (vase tabla n, la actividad sin efecto de T y a los 0 min de
incubacin), en primer lugar, por efecto de la temperatura (vase tabla n, la actividad sin efecto de
T y a los 0 min de incubacin), la termoestabilidad encontrada en la enzima (no hubo completa
inhibicin de la actividad enzimtica) se debe la alta cantidad de residuos de cistena en las cadenas
polipeptdicas (1), esto es relevante porque estos aminocidos entre ellos pueden formar puentes
disulfuro, son un tipo de interacciones no covalentes que mantienen la estructura nativa de las
protenas (2). En segundo lugar, por el periodo de incubacin (vase grfico 2n y tabla n, la actividad
desde 0 min a 15 min). Tambin, se evidenci la prdida de comportamiento lineal asociado a la
disminucin del coeficiente de correlacin (R2) en funcin del tiempo, asociado a la formacin de
complejos de mayor estabilidad trmica formada a partir de enzima desnaturalizada con grupos de
peroxidasa que permanecen activas (1).

Grfico n. Comportamiento de absorbancia en funcin del tiempo a diferentes tiempos de

incubacin.

0.34
SIN EFECTO DE T y = 0,0009x + 0,0379 15 MIN y = 1E-06x + 0,0506
R = 0,9923 R = 0,1666
0.29
0 MIN y = 0,0002x + 0,0502 30 MIN y = 5E-05x + 0,0576
R = 0,9917 R = 0,9914
0.24
Absorbancia

5 MIN y = 3E-05x + 0,06

R = 0,9864
0.19
10 MIN y = 3E-06x + 0,0641
R = 0,5225
0.14

0.09

0.04
0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300
Tiempo (s)

0 MIN 5 MIN 10 MIN 15 MIN

30 MIN sin T Linear (0 MIN) Linear (5 MIN)
Linear (10 MIN) Linear (15 MIN) Linear (30 MIN) Linear (sin T)

Tabla n2. Ampliacin

 0.10

0.09

0.08
Absorbancia

0.07

0.06

0.05

0.04
0 50 100 150 200 250 300
Tiempo (s)

La excepcin a estos comportamientos fue a un periodo de incubacin mayor a 30 min, en el que se

present un incremento en la actividad enzimtica incluso mayor que la presentada a los 5 min de
incubacin y un restablecimiento de la correlacin de los datos. Lo anterior puede significar que se
restableci la estructura nativa de la enzima.

Tabla n. Actividad enzimtica a diferentes periodos de incubacin.

Tiempo de incubacin Actividad enzimtica (mol/min) Coeficiente de correlacin (R2)

Sin efecto de T 3,22*10-2 0,9923
0 min 7,15*10-3 0,9917
5 min 1,07*10-3 0,9864
-4
10 min 1,07*10 0,5225
15 min 3,58*10-5 0,1666
-3
30 min 1,79*10 0,9914

CONCLUSIONES

REFERENCIAS

1. DEEPA, S.S. and ARUMUGHAN, C. Purification and characterization of soluble peroxidase

from oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) leaf. Phytochemistry. 2002. Vol. 61, no. 5, p. 503
511. DOI 10.1016/S0031-9422(02)00167-X.
2. CAMPBEL, Mary K. and FARRELL, Shawn O. Biochemistry. Sixth Edit. Belmont, CA (USA) :
Thomson Brooks/Cole, 2009. ISBN 9780495390411.