O USO DOS PLASMAS DE OXIGNIO, METANO E ARGNIO

PARA A ESTERELIZAO DE MEMBRANAS DE QUITOSANA

Marina de Oliveira Cardoso Macdo1, Haroldo Reis Alves de Macdo2, Dayanne Lopes
Gomes3, Natlia de Freitas Daudt1, Hugo Alexandre Oliveira Rocha5, Clodomiro Alves
Jnior6
1
Programa de Ps-Graduao em Cincia e Engenharia de Materiais, Universidade Federal do Rio Grande
do Norte, Natal (RN), Brasil
2
Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia do Piau, Campus Picos (PI), Brasil
3
Programa de Ps-Graduao em Cincias Biolgicas, Universidade Federal do Rio Grande do Norte,
Natal (RN), Brasil
4
Departamento de Bioqumica, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal (RN), Brasil
5
Departamento de Mecnica, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal (RN), Brasil
E-mail: marinalabplasma@gmail.com

Resumo. Uma das etapas importantes no processamento de biomateriais a esterilizao. A eficincia de

funcionalidade de qualquer sistema de esterilizao so constatadas pela eliminao de organismos e
por sua capacidade de no alterar negativamente as propriedades funcionais dos dispositivos
biomdicos. Vapor seco e mido, radiao e xido de etileno so as principais tcnicas utilizadas para a
esterilizao de biomateriais. A escolha inadequada do agente de esterilizao pode prejudicar o
desempenho do biomaterial por afetar suas propriedades fsicas, qumicas e/ou biolgicas
comprometendo os resultados almejados. Neste trabalho utilizou-se a tcnica de plasma para a
esterilizao de membranas de quitosana. As membranas foram tratadas por plasma de oxignio, metano
e argnio em diferentes tempos. Atravs do teste de esterilidade foi possvel verificar a eficincia destes
tratamentos em tempos especficos.

Palavras-chave: Quitosana, Membranas, Esterilidade, Plasma.

1. INTRODUO

A modificao de superfcie por plasma uma tcnica de tratamento de

superfcie efetiva e econmica para muitos materiais e crescente seu interesse na
engenharia biomdica. Entretanto atualmente estuda-se a tcnica de tratamento por
plasma como agente esterilizante para biomateriais.
O tratamento por plasma eficaz contra uma gama de bactrias, esporos de
bactrias e fungos, matando estes microrganismos atravs da gerao de oxignio,
radicais livres hidroxil e outras espcies ativas. Porm estes mecanismos ainda esto
sendo investigados (GADRI, 2000). Os sistemas de esterilizao por plasma j foram
aprovados pela administrao de drogas e alimentos dos Estados Unidos e est
disponvel comercialmente desde o inicio dos anos de 1990 (VASSAL, 1998).
 A esterilizao por plasma tem vrias vantagens, um procedimento no txico,
rpido e sem os inconvenientes graves sofridos por outras tcnicas tradicionais, como
alterao do volume e da composio qumica do material (BIALASIEWICZ, 1995).
Em comparao com outros mtodos de esterilizao, tais como formaldedo, a
esterilizao por plasma no s mata bactrias e vrus, mas tambm remove as bactrias
mortas (THE, 1996). Por ltimo, mas no menos importante a esterilizao por plasma
rpida e segura.
Os gases mais utilizados na esterilizao por plasma so o perxido de
hidrognio e o xido de etileno, mas aps o tratamento com esses gases necessrio a
remoo de alguns resduos dos materiais. Neste trabalho utilizou-se de gases que no
geram resduos para verificar a eficincia do tratamento na esterilizao de membranas
de quitosana.
As membranas de quitosana tm sido utilizadas como curativos para auxiliar na
regenerao da pele. A quitosana um polmero natural, de baixa toxicidade obtida da
desacetilao alcalina da quitina. Este ltimo oriundo da carapaa de crustceos e
fungos e o segundo polmero mais abundante na natureza.

2. MATERIAIS E MTODOS

2.1 Preparao das membranas

A quitosana em ps foi dissolvida em cido actico a 2% com agitao constante

durante 24h. Aps este perodo a soluo de quitosana passou por duas filtraes. A
primeira em um filtro com Tela de nylon e a segunda em um filtro Mille Millipore.
Depois um volume de 30 ml de soluo foi vertido sobre as placas de petri e as mesmas
acondicionadas em estufa por 24 h em temperatura de 50C. Posteriormente neutralizou-
se as membranas com NaOH, seguindo de estiramento e secagem das mesmas a
temperatura ambiente por 24h.

2.2 Tratamento por plasma

Na Fig. 1 observa-se o esquema do reator utilizado no trabalho, que consistiu de

um tubo de vidro de borossilicato, fechado por dois flanges de ao inox. Pelo flange
superior foram inseridos os gases de trabalho. Pelo flange inferior, passa o termopar e
nesse mesmo flange encontra-se uma bomba de vcuo mecnica e um manmetro.
 Figura 1: Esquema do reator de plasma

A amostra foi colocada sobre o porta amostra dentro do reator a 5,0 cm de

distncia do ctodo (Figura 1). Durante os tratamentos das membranas de quitosana
utilizou-se os seguintes gases de cada vez: oxignio, metano e argnio (White
Martins, Brasil) alguns parmetros foram mantidos constantes como presso (4,5 mbar),
corrente (0,14 A), fluxo de gs (10 cm3/min). O tempo variou para todos os gases.
Foram feitos tratamentos de 15, 30, 45 e 60 min.

2.3 Teste de Esterilidade

O ensaio de esterilidade consistiu em colocar as membranas tratadas, no tratada

e esterilizadas com lcool 70% em poos contendo meio DMEM a 37C com 5% de
CO2 durante 7 dias. Todos os dias os poos com as membranas eram observados ao
microscpio tico (Marca) para verificar o surgimento de microrganismos sobre as
membranas. O ensaio foi realizado em sextuplicata.

3 RESULTADOS

Os tratamentos por plasma de argnio foram eficazes na esterilizao das

membranas de quitosana em todos os tempos de tratamento (15, 30, 45 e 60 min). Nos
tratamentos com metano os tempos eficazes na esterilizao das membranas foram de
30, 45 e 60 min. Enquanto nos tratamentos com plasma de oxignio, apenas os
tratamentos de 60 min foi eficaz. As amostras tratadas nestas condies no
apresentaram nenhum microrganismos durante os 7 dias em que ficaram em observao
(Fig. 2).
 Figura 2: Amostra esterilizada aps 7 dias em meio DMEM.

Nas amostras no tratadas, tratadas com lcool 70% e tratadas em plasma de

oxignio (15, 30 e 45 min) e metano 15 min aps 24 h de incubao apresentaram
microrganismos contaminantes, demonstrando assim que tanto o lcool 70% como o
tratamento por plasma de oxignio nos tempos referidos anteriormente no foram
eficazes na esterilizao das membranas de quitosana (Fig. 3).

Figura 3: microrganismos encontrados nas amostras contaminadas

AGRADECIMENTOS

CNPq, CAPES, UFRN, BIOPOL, IFPI PICOS

REFERNCIAS

Gadri, R.B. et. al. (2000), UTK plasma sterilization team, Surf. Coatings Technol
Vassal, S. et al. (1998), Infect. Control , Vol 26
Bialasiewicz et. al. (1995), Ophthal, Vol 27
The, T. C. et. al. (1996), Biomaterials, Vol 17

THE USE OF OXYGEN, METHANE AND ARGO PLASMAS FOR

STERILIZATION OF CHITOSAN MEMBRANES
Marina de Oliveira Cardoso Macdo1, Haroldo Reis Alves de Macdo2, Dayanne Lopes
Gomes3, Natlia de Freitas Daudt1, Hugo Alexandre Oliveira Rocha5, Clodomiro Alves
Jnior6
1
Program Pos-graduation materials science and engineering, Federal University of Rio Grande of Norte,
Natal (RN), Brazil
2
Federal Institute of Education, Science and Technology of Piau, Picos (PI), Brazil
3
Program Pos-graduation in biology
4
Department of Biochemistry, Federal University of Rio Grande of Norte, Natal (RN), Brazil
5
Department of Mechanical, Federal University of Rio Grande of Norte, Natal (RN), Brazil
E-mail: marinalabplasma@gmail.com

Abstract. One of the important steps in the processing of biomaterials is sterilization. The efficiency of the
functionality of any sterilization system are found by the elimination of organisms and their ability to not
negatively alter the functional properties of biomedical devices. Dry and wet steam, radiation and
ethylene oxide are the main techniques used for the sterilization of biomaterials. The inappropriate
choice of sterilizing agent can affect the performance of the biomaterial to affect their physical, chemical
and / or biological compromising the desired results. This work used the technique of plasma to sterilize
chitosan membranes. The membranes were treated by oxygen plasma, methane and argon at different
times.

Keywords: Chitosan, Membranes, sterility, Plasma.