INSTITUTO TECNOLGICO DE ZACATECAS

Departamento: Metal Mecnica

INGENIERA EN MATERIALES

TECNICAS DE ANALISIS

Reporte Espectrometra de Masas

Asesor: Aurora Hernndez Quintero

Alumnos: Jenny Fernanda Hernndez Villa,

Jorge de Jesus Torres Reyes
Zahara Suhey Alejandra Gurrola Luna
Manuel Serrano Cruz

Zacatecas. Zac. 21 de Septiembre 2017.

ndice
..................................................................................................................................... 1
Introduccin .......................................................................................................................... 3
Investigacin ......................................................................................................................... 4
Espectrmetro de masas ........................................................................................... 6
Proceso de la espectrometra de masas .................................................................... 7
Entrada de la muestra ..................................................................................................... 7
Mtodos de ionizacin .................................................................................................... 8
Analizadores de masas.................................................................................................... 9
Detector ........................................................................................................................ 11
Sistemas de vaco ......................................................................................................... 12
Anlisis de datos ........................................................................................................... 13
Resultados ........................................................................................................................... 14
Aplicaciones......................................................................................................................... 15
Conclusin ........................................................................................................................... 15
Referencias .......................................................................................................................... 15
Introduccin
La Espectrometra de Masas es una poderosa tcnica microanaltica usada para identificar
compuestos desconocidos, para cuantificar compuestos conocidos, y para elucidar la
estructura y propiedades qumicas de molculas. La deteccin de compuestos puede ser
llevada a cabo con cantidades realmente pequeas (algunos moles) de muestra y obtener
informacin caracterstica como el peso y algunas veces la estructura de la muestra.

El proceso de anlisis por espectrometra de masas comienza en llevar el compuesto a

analizar a fase gaseosa, la muestra debe tener una presin de vapor de que 10-2 mmHg,
debido a que las molculas deben migrar por difusin desde el sistema de entrada hacia la
cmara de ionizacin. Las muestras pueden ser introducidas al espectrmetro de masas
usando una sonda directa o por entrada, para slidos puros o lquidos voltiles. El proceso de
ionizacin ms comn en anlisis en fase gaseosa es el de ionizacin electrnica (EI), en el
cual se transfiere energa a la molcula neutra en estado de vapor, dndole suficiente energa
para expulsar uno de sus electrones y de ese modo tener una carga residual positiva. Este
proceso produce un ion con carga positiva y un electrn suelto. La molcula ionizada puede
tener energa excesiva que puede ser disipada a travs de la fragmentacin de ciertos enlaces
qumicos. El rompimiento de varios enlaces qumicos permite la produccin de fragmentos
de ion cuya masa es igual a la suma de las masas atmicas de un grupo de tomos que retienen
la carga positiva durante el proceso de fragmentacin. Para compuestos no voltiles, iones
de la molcula intacta son producidos al pasar la solucin por un campo elctrico o por
bombardeo de partculas o por interaccin con especies fotoexcitadas .

Despus de producir los iones, el siguiente paso es su anlisis en el analizador de iones de

acuerdo a su relacin masa/carga (m/z). Los iones tienen una carga elctrica que les permite
ser controlados por campos elctricos; son separados por su valor m/z en el analizador de
masas. Existen diferentes tipos de analizadores de masas: magnticos, de cuadrupolo, trampa
de iones cuadrupolo, trampa de iones magntica, o tiempo de vuelo.

Los iones son analizados de acuerdo a su abundancia a lo largo de la escala m/z. Durante el
proceso de adquisicin de datos provenientes del detector, los datos pueden ser organizados
en forma tabular o en formato de grfica de barras para dar finalmente el espectro de masas
de la muestra analizada.
Investigacin
La Espectrometra de masas es una tcnica analtica que permite estudiar compuestos de
naturaleza diversa: orgnica, inorgnica o biolgica (incluyendo biopolmeros y
macromolculas naturales o artificiales) y obtener informacin cualitativa o cuantitativa.

Historia de espectrometra de masas

La espectrometra de masas tiene su origen en los experimentos desarrollados en el

Cavendish Laboratory de la Universidad de Cambridge en Inglaterra en 1897 por Joseph John
Thomson, l descubri que descargas elctricas en gases producan iones y que estos rayos
de iones podan adoptar diferentes trayectorias parablicas de acuerdo a su masa cuando
pasaban a travs de campos electromagnticos. Thomson realiz la construccin del primer
espectrmetro de masas, llamado parbola espectrogrfica (Figura 1), para la determinacin
de la relacin masa/carga de iones.

Fig .1 Parbola espectrogrfica construida por J.J. Thomson

Uno de los estudiantes de Thomson, Francis William Aston fue quien diseo varios
espectrmetros de masas en los cuales los iones eran dispersados por sus masas y enfocados
de acuerdo a su velocidad. Esto permiti mejorar el poder de resolucin de masas y el
posterior descubrimiento de istopos de diferentes elementos que estn presentes en la
naturaleza. Thomson recibi el Premio Nobel de Fsica en 1906 y Aston el Premio Nobel de
Qumica en 1922. En la dcada de los 20s, Arthur J. Dempster de la Universidad de Chicago,
desarroll un analizador magntico que enfocaba iones formados por impacto electrnico
(electron impact) sobre un colector elctrico. Este diseo fue adaptado por Josef Mattauch,
Richard Herzog, Kenneth Bainbridge, Alfred Nier y otros, permitiendo importantes
descubrimientos en fsica atmica y nuclear en los 30s. Pero fue hasta la dcada de los 40s
que los primeros espectrmetros de masas comerciales aparecieron. Durante los 30s y 40s,
Nier y algunos otros incorporaron las tecnologas de vaco y electrnica para mejorar el
desempeo de los primeros diseos de espectrmetros. Instrumentos de doble enfoque, que
combinan analizadores magnticos y electrostticos fueron introducidos permitiendo
incrementar la precisin. Estos instrumentos fueron originalmente desarrollados con el
propsito de determinar en forma precisa los pesos atmicos de los elementos y sus istopos.
En la dcada de los 40s se construyeron los primeros espectrmetros de masas disponibles
comercialmente por medio de diferentes compaas de Europa y Estados Unidos. En esta
dcada tambin se desarroll el espectrmetro de masas de tiempo de vuelo (time-of-flight,
TOF), un concepto propuesto como un analizador mas barato y simple en el cual los iones
son separados en base a sus diferencias en velocidad cuando son acelerados en un tubo de
vuelo lineal. A principios de los 50s, los patrones de fragmentacin de los iones comenzaron
a ser entendidos, aunque los aparatos disponibles estaban limitados en el rango de masas.
Otro tipo de instrumento desarrollado para el propsito de acoplar el espectrmetro de masas
a un cromatgrafo de gases fue el filtro de masas cuadrupolo, el cual usa un campo elctrico
cuadrupolar conteniendo componentes de radiofrecuencia y corriente directa para separar
iones. En 1953 el analizador de masas cuadrupolo fue patentado. Este analizador fue
reportado por Wolfgang Paul de la Universidad de Bonn, quien despus gan el Premio
Nobel de Fsica en 1989 por su trabajo de trampa de iones (ion trapping). En 1956 las
primeras muestras biolgicas (esteroides) fueron exitosamente analizadas. En los 60s la
espectrometra de masas se estableci como una tcnica para caracterizar compuestos
orgnicos. Este fue asistido con la introduccin de una fuente de ionizacin qumica. Otros
mtodos de ionizacin surgieron incluyendo desorcin de campo, ionizacin secundaria
(secondary ionization MS o SIMS), desorcin de plasma y desorcin lser. Aparecieron las
primeras publicaciones cientficas especializadas incluyendo Organic Mass Spectrometry. La
espectrometra de masas en tndem (MS/MS) surgi con el desarrollo de procedimientos de
disociacin por induccin de colisin, permitiendo obtener informacin estructural de
componente de una mezcla usando dos etapas de anlisis de masas. Figura 1. Parbola
espectrogrfica construida por J.J. Thomson Espectrometra de Masas 5 En 1974 se
desarrollo la espectrometra de masas Fourier ICR (FT-ICR MS). Una importante ventaja de
este sistema es que permite detectar simultneamente varios iones y estos espectrmetros de
masas tambin logran tener muy alta resolucin de masas. En los 80s se desarrollaron las
tcnicas de ionizacin capaces de ionizar eficientemente molculas biolgicas. Michael
Barber en Manchester desarrollo la tcnica FAB (Fast Atom Bombardment) la cual utiliza
una fuente de tomos pesados neutrales para ionizar compuestos de una superficie de una
matriz lquida. John Fenn de la Universidad Yale refin la fuente de iones originalmente
reportada por Malcolm Dole de la Universidad Northwertern casi dos dcadas antes de la
tcnica de ionizacin de electrospray (ESI). Matrix-assisted laser desorption ionization
(MALDI) fue tambin desarrollada en los 80s por Franz Hillenkamp y Michael Karas. En
esta tcnica, las molculas son desorbidas por un lser de una superficie slida o lquida
conteniendo una matriz de compuesto orgnico. Las tcnicas ESI y MALDI han permitido la
introduccin de molculas biolgicas de ms de 1 milln de Daltons en los espectrmetros
de masas como iones estables en fase gaseosa. Actualmente, los espectrmetros de masas
son utilizados para el estudio de un amplio rango de sustancias y materiales con alta precisin
y sensibilidad. Los campos de aplicacin son desde estudios astronmicos del sistema solar,
geofsica y geoqumica, hasta anlisis qumicos y en forma fundamental en investigaciones
de qumica, toxicologa, ciencias ambientales, y en forma creciente en ciencias biolgicas y
biomdicas.

Espectrmetro de masas
Un Espectrmetro de Masas es un instrumento que mide las masas de molculas individuales
que han sido convertidas en iones. Un espectrmetro de masas no mide la masa molecular
directamente, pero mide la relacin masa/carga de los iones formados de las molculas. Los
espectrmetros de masas tienen siete componentes mayores: un sistema de entrada, una
fuente de iones, un analizador de masas, un detector, un sistema de vaco, un sistema de
control y un sistema de datos. El sistema de entrada, junto con la fuente de iones y el tipo de
analizador de masas definen el tipo de espectrmetro y las capacidades del sistema.
 Fig.2
Esencialmente, el espectrmetro de masas debe ser capaz de desempear cuatro funciones:
1) El espectrmetro de masas debe ser capaz de vaporizar substancias de volatilidades muy
diferentes.

2) Una vez volatilizada la muestra, el espectrmetro debe ser capaz de originar iones a partir
de las moleculas neutras en fase gaseosa.

3) Una vez generados los iones, el espectrmetro debe ser capaz de separarlos en funcin de
su relacin masa/carga.

4) Una vez separados los iones, el espectrmetro debe ser capaz de detectar los iones
formados y registrar la informacin adecuadamente.

Proceso de la espectrometra de masas

Entrada de la muestra
Para slidos razonablemente puros, la muestra es colocada sobre la punta de una barra que
es introducida dentro del espectrmetro a travs de un sistema de vaco. La muestra es
entonces evaporada o sublimada en una fase gaseosa, usualmente por medio de calor. Gases
y lquidos pueden ser introducidos a travs de sistemas de entrada diseados especialmente
con un control de flujo, llamados sondas directas (direct probes), estos dispositivos
transfieren la muestra desde el exterior a travs de un sistema de vaco hacia la fuente de
ionizacin que esta a alta presin (Figura 3). Estas sondas pueden ser diseadas para soportar
muestras para ser ionizadas por distintos mtodos. Una vez que la muestra est es fase
gaseosa es ionizada y frecuentemente acompaado de fragmentacin para proceder al anlisis
de masas. En algunas tcnicas especializadas, la volatilizacin y la ionizacin de la muestra
ocurren al mismo tiempo.

Fig. 3 Sondas directas (direct probes)

Mtodos de ionizacin
Principalmente, existen dos mtodos para producir la ionizacin de la muestra en estado
gaseoso; la ionizacin por impacto o bombardeo electrnico, que es con mucho el ms
utilizado, y la ionizacin qumica.

Impacto Electrnico (Electron Impact EI) El Impacto Electrnico (Electron Impact EI) o
comnmente llamado Ionizacin Electrnica (Electron Ionization EI) es un mtodo clsico
de generacin de iones en espectrometra de masas utilizado an en muchas aplicaciones. El
analito es introducido dentro de la fuente de ionizacin que esta al vaco.

Ionizacin Qumica (Chemical Ionization CI) La Ionizacin Qumica (Chemical Ionization

CI) es un mtodo de ionizacin relativamente suave, y es el primer mtodo de ionizacin
suave introducido a la espectrometra de masas. La ionizacin es afectada por reacciones
sobre la molcula con iones de un reactivo gaseoso generados por medio de ionizacin de
impacto electrnico (EI) con molculas del analito neutras.

Ionizacin de Campo (Field Ionization FI) La Ionizacin de Campo (Field Ionization FI) es
un mtodo de ionizacin suave. La muestra es introducida por las mismas tcnicas que en EI
y CI. La ionizacin de campo lleva el riesgo de descomposicin trmica de la muestra. Las
molculas son ionizadas por medio de ionizacin de campo (FI) en los bordes del campo del
nodo emisor. El emisor consiste de un alambre de tungsteno de 10-13mm de dimetro que
es activado por un procedimiento especial creando miles de microagujas en su superficie.
Desorcin de Campo (Field Desorption FD) La Desorcin de Campo (Field Desorption FD)
es un mtodo de ionizacin muy suave utilizado en espectrometra de masas. Este mtodo
esta basado en el de Ionizacin de Campo (Field Ionization FI), FD ha sido desarrollado al
combinar la desorcin y la ionizacin del analito, pero no hay necesidad de evaporacin antes
de la ionizacin, generando iones con muy baja energa interna y casi nula fragmentacin.
En la Figura 6 se muestra un equipo de espectrometra de masas con una fuente de FD.

Bombardeo con tomos Rpidos (Fast-Atom Bombardment FAB) Los mtodos de desorcin
de partculas fueron desarrollados en los 70s y 80s, y a diferencia del mtodo de desorcin
de campo (field desorption), evito complicaciones en diseo de equipo y preparacin de la
muestra. FAB es un mtodo de ionizacin suave, resulta de la combinacin de desorcin del
analito desde una fase condensada (mezcla de analito slido+matriz) con su subsecuente
ionizacin. La matriz esta formada de molculas orgnicas (glicerol o 3-nitrobencil alcohol)
que mantienen una superficie homognea para el bombardeo.

Fig. 4

Analizadores de masas
Todos los espectrmetros de masas combinan la formacin de iones, el anlisis de masas, y
la deteccin de iones. Los analizadores de masas llevan a cabo la separacin de los iones
producidos por diferentes mtodos en una fuente de iones, de acuerdo a su relacin
masa/carga (m/z) para que puedan llegar al detector. La unidad para m/z es el Thomson (Th).
En los experimentos de espectrometra de masas aparecen dos clases principales de iones, el
ion molecular, que es la molcula completa del analito, y fragmentos inicos, los cuales
contienen solo una parte de la estructura. El peso molecular de una molcula puede ser
calculado de la m/z del ion molecular, si la carga (z) es conocida, la informacin estructural
se obtiene a partir de las m/z de los fragmentos del ion. Una variedad de analizadores de
masas estn disponibles para realizar estas mediciones, incluyendo cuadrupolo (quadrupole),
trampa de iones (ion-trap), tiempo de vuelo (time-of-flight), sector magntico (magnetic
sector), ciclotrn (ion cyclotron resonance) y otros. Cada tipo de analizador posee
caractersticas y aplicaciones especiales, as como beneficios y limitaciones. La seleccin del
tipo de analizador a utilizar es en base a que aplicacin se le dar, el costo y el rendimiento
deseado, ya que el analizador determina varias caractersticas del resultado del experimento,
entre estas la resolucin y el rango de m/z de los iones que pueden ser medidos.

Analizador de trampa de iones (Ion-Trap) El espectrmetro de masas de trampa de iones

cuadrupolo (quadrupole ion-trap), as como el filtro cuadrupolo, utilizan campos elctricos
oscilantes para atrapar los iones en forma controlada. En la trampa de iones cuadrupolo, los
iones son atrapados en un espacio tridimensional, mientras que en el filtro de masas
cuadrupolo solo es en un espacio bidimensional.

Analizador de Tiempo de Vuelo (Time-of-flight TOF) El principio de operacin del

analizador de tiempo de vuelo (time-of-flight TOF) involucra la medicin del tiempo
requerido por un ion para viajar desde la fuente de iones hasta el detector localizado a 1-2m
de la fuente.

Fig. 5
Detector
Sensibilidad, precisin, y tiempo de respuesta son criterios importantes que distinguen los
diferentes sistemas de deteccin de iones. Alta precisin y rpido tiempo de respuesta son
caractersticas mutuamente excluyentes. Idealmente, la sensibilidad debe definir
explcitamente la corriente de ion recibida por el detector. La definicin debe incluir: (1) el
nombre del compuesto de calibracin, (2) el valor m/z del ion medido, (3) el poder de
resolucin del instrumento, (4) la cantidad de compuesto de calibracin consumido por
minuto, (5) la intensidad de la corriente de electrones y presin de la fuente de iones (para
CI), (6) la corriente del ion que llego al detector. Estas unidades de sensibilidad permiten
comparar instrumentos, que en ocasiones es difcil ya que las diferentes compaas usan
diferentes criterios.

Copa Faraday Este es un detector elctrico convencional, iones positivos que impactan sobre
el colector son neutralizados por electrones despus de pasar a travs de una resistencia.

Multiplicador de Electrones (Electron Multiplier) El multiplicador de electrones (electron

multiplier) utiliza el principio de emisin secundaria de electrones para afectar la
amplificacin. En el dinodo discreto (discrete-dynode) los iones provenientes del analizador
de masas son enfocados sobre un dinodo que emite electrones en proporcin directa al
nmero de iones bombardeados hacia l.

Fig.6
Sistemas de vaco
Para que los procesos que tienen lugar en el interior del espectrmetro puedan llevarse a
cabo con xito, debe existir en el interior del espectrmetro un ambiente de alto vaco (del
orden de 10-5 torr), de forma que el recorrido libre medio de los iones formados, sin
colisiones en su camino, sea acorde con la longitud de la trayectoria que deben recorrer
hasta el detector.

Fig.7

Interfase de divisin de flujo. Este tipo de interfase (ms conocida como interfase "open
split") se utiliza con columnas capilares de dimetro elevado (hasta 0,75 mm); la interfase
(figura 15) consiste en un divisor de flujo para reducir el caudal de gas que penetra al
espectrmetro hasta un nivel suficiente como para que las bombas del espectrmetro puedan
mantener el nivel de vaco.

Fig.8
Anlisis de datos
Debido a las grandes cantidades de informacin que son generadas y la gran cantidad de
parmetros que cambian en un periodo de tiempo, las computadoras son una herramienta
esencial en espectrometra de masas, tanto para control del equipo, adquisicin,
almacenamiento y presentacin de datos. Los sistemas de procesamiento de datos
generalmente incluyen programas tiles en cuantificacin, interpretacin de los espectros de
masas y comparacin de compuestos a travs de consulta de bases de datos va internet. La
estrategia es utilizar un sistema de procesamiento datos que permita adquirir datos
constantemente, y obtener los datos tan rpido como sea posible teniendo una buena relacin
seal-ruido sin abusar de los principios de operacin del espectrmetro de masas. Esto
usualmente es completado en un ciclo de examen del orden de 1 segundo, adquiriendo un
nuevo espectro de masas cada segundo, esto tiene la ventaja de no perder datos importantes
pero tiene la desventaja de que se deben adquirir grandes cantidades de datos. El anlisis ser
realizado con el problema de tener que determinar cuales datos son tiles y necesarios para
tener el resultado final. Los sistemas de procesamiento de datos emplean procedimientos de
bsqueda hacia adelante o de bsqueda reversa. En la bsqueda hacia adelante, un espectro
no definido es comparado con cada miembro de una biblioteca de espectros de referencia.
Un resultado siempre ser alcanzado, al calificar son cierta clase de parecido respecto a las
referencias, esto tiene la ventaja de sugerir el tipo de compuestos presentes en la muestra si
el grado de parecido no es aceptable o suficiente. En la bsqueda reversa, un banco de datos
es comparado con el espectro no definido para determinar si algunos picos de referencia estn
presentes en el espectro analizado. Un resultado puede lograrse si el espectro no definido
tiene algunos picos extras que pueden ser comparables a los espectros de referencia. No se
podr identificar un compuesto si no se tiene un espectro de referencia que corresponda en
la base de datos.

Fig.9
Resultados
Como consecuencia del bombardeo electrnico en la cmara de ionizacin, las molculas se
rompen en una serie de fragmentos, siempre que una misma molcula se rompa en las mismas
condiciones nos dar el mismo tipo y nmero de fragmentos y constituyen la fragmentacin
patrn. Gracias a esto se pueden determinar que es la muestra por comparacin y por otra
parte, la intensidad relativa de los distintos picos, permite deducir la proporcin en que cada
componente se encuentra en la muestra. El pico del espectrograma que aparece con valor ms
elevado de m/e corresponde a la molcula ionizada sin fragmentar y recibe el nombre de
masa patrn. Esta masa patrn nos permite determinar con rapidez y precisin la masa
molecular, siempre que se opere con una tensin de ionizacin no excesivamente elevada, la
cual producira la fragmentacin total de la molcula (Rouessac, Rouessac, 2003, 312) El
pico mayor del espectrograma de masa se llama pico base. Normalmente la altura de este
pico se toma como valor cien. Las intensidades de los dems picos se expresan en porcentajes
de la intensidad del pico base.

Fig.10
Aplicaciones

Detectar e identificar el uso de frmacos de abuso en atletas (antidoping)

Monitorear los gases de la respiracin en pacientes durante ciruga

Determinar la composicin de materiales provenientes del espacio exterior

Determinar adulteracin en la miel de abeja

Localizar depsitos petroleros (midiendo

precursores del petrleo en rocas)

Monitorear fermentaciones en lnea (industria biotecnolgica)

Detectar contaminantes orgnicos en aire,

agua, suelo y alimentos

Determinar algunos tipos de envenenamiento (criminalstica)

Conclusin
La espectrometra de masa es una tcnica basada en la obtencin de iones a partir de una
muestra la cual deber trasformase en un estado gaseoso, una vez obtenidos los iones, entran
en un campo magntico donde se separaran de acuerdo con su masa/carga, y finalmente se
detecta por un dispositivo adecuado.

Referencias

http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/Spec_Masas.pdf

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/masas_10832.pdf

http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/espectrometri
a_de_masas.pdf