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EL ADN COMO MATERIAL GENETICO

El cido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado ADN constituye el principal


componente del material gentico de la inmensa mayora de los organismos, junto con el
ARN, siendo el componente qumico primario de los cromosomas y el material con el que
los genes estn codificados.

La funcin principal del ADN es mantener a travs del cdigo gentico, la informacin
gentica necesaria para crear un ser vivo idntico a aquel del que proviene (o casi similar,
en el caso de mezclarse con otra cadena como es el caso de la reproduccin sexual o de
sufrir mutaciones). Las cadenas de polipeptdicas codificadas por el ADN pueden ser
estructurales como las protenas de los msculos, cartlagos, pelo, etc., bien funcionales
como las de la hemoglobina o las innumerables enzimas del organismo. La funcin
principal de la herencia es la especificacin de las protenas, siendo el ADN una especie de
plano o receta para nuestras protenas.

Cada nucletido del ADN est compuesto de tres subunidades:

o cido fosfrico

De frmula H3PO4. Cada nucletido puede contener uno (monofosfato:


AMP), dos (difosfato: ADP) tres (trifosfato: ATP) grupos de acido fosfrico

o Desoxirribosa

Es un monosacrido de 5 tomos de carbono (pentosa) derivado de la ribosa,


que forma parte de la estructura de nucletidos del ADN Su frmula es C5
H10 O4 y contiene toda la informacin gentica que ser transferida as de
generacin en generacin.

o Bases nitrogenadas

Hay cuatro tipo de bases nitrogenadas en los nucletidos del ADN: timina
(T), citosina (C), guanina (G) y adenina (A).

Timina

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La timina es una de las cinco bases nitrogenadas que forman parte de los cidos
nucleicos y en el cdigo gentico se representa con la letra T. La timina es una base
orgnica nitrogenada de frmula C5 H6 N2 O2 y es un compuesto cclico derivado
de la pirimidina (es una base pirimidnica)

Adenina

Es un compuesto orgnico nitrogenado de frmula C5 H5 N5. Es un derivado de la


purina (es una base prica) en la que un hidrgeno ha sido sustituido por un grupo
amino (N H2) La adenina, junto con la
timina, fue descubierta en 1885 por el
bioqumico alemn Albrecht Kossel.

Guanina

La guanina es una de las cinco bases


nitrogenadas que forman parte de los
cidos nucleicos y en el cdigo gentico
se representa con la letra G. En el ADN la
guanina siempre se empareja con la
citosina mediante tres enlaces de
hidrgeno.

citosina

la citosina siempre se empareja con la


guanina mediante tres enlace de
hidrgeno. Es un derivado pirimidnico,
con un anillo aromtico y un grupo amino
en posicin 4 y un grupo cetnico en
posicin 2.

Principios principales
o las bacterias se multiplican por divisin.
o el ADN se duplica: cada una de las clulas hijas recibe una copia de la molcula; es
decir se forman clones de bacterias con la misma dotacin gentica.
o las bacterias cambian sus caractersticas, es decir su fenotipo, de forma que
adquieren resistencia frente a los antibiticos.

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CROMOSOMA PROCARIOTICO

Aunque en las bacterias no se observan estructuras con las distintas caractersticas


morfolgicas de los cromosomas eucariticos, su genoma se encuentra organizado en
cuerpos definidos.

El cromosoma procariota es una sola


molcula circular de ADN contenida en una
regin definida del citoplasma, denominada
nucleoide que ocupa aproximadamente un
tercio del volumen de la clula, sin estar
separado del mismo por una membrana.
Este cromosoma es el elemento obligatorio
del genoma, aunque es frecuente encontrar
unidades de replicacin autnomas
llamadas plsmidos, que si se pierden, la
bacteria sigue siendo viable.

Tambin podemos referirnos como


cromosoma bacteriano. Muchas bacterias,
poseen adems ADN extra cromosmico, tambin circular cerrado, denominado ADN
plasmdico, por estar contenido en estructuras llamadas plsmidos, que portan
informacin gnica para una variedad de funciones no esenciales para la clula en
condiciones normales de crecimiento. En trminos bioqumicos, la composicin y
estructura de los cidos nuclecos bacterianos, es la misma que para cualquier clula.

El cromosoma bacteriano, es suficientemente largo como para formar varios lazos


circulares, que como tales pueden a su vez superenrollarse, formando de esta manera una
serie de dominios topolgicos independientes. Esta organizacin en dominios, colabora al
estado de compactacin general del genoma bacteriano, e impide que con la ruptura de una
hebra en un punto cualquiera del cromosoma, se pierda el total del superenrollamiento,
manteniendo de esta forma la energa almacenada.Las bacterias poseen enzimas capaces de
alterar la estructura del ADN modificando su superenrollamiento.

Estas enzimas que se denominan genricamente "topoisomerasas", actan introduciendo o


eliminando vueltas superhelicoidales, cumpliendo un importante rol en los procesos de
replicacin y transcripcin del ADN. Por otra parte, es interesante mencionar que algunas
de estas topoisomerasas, como la ADN girasa, son blanco de accin para los antibiticos
del grupo de las quinolonas, como el cido nalidxico.

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MUTACION

En el ADN

Una mutacin es un cambio heredable en la secuencia de bases de los cidos nuclecos que
constituyen el genoma de un organismo, que ocurren en condiciones naturales con una muy
baja frecuencia y se deben fundamentalmente a errores en los procesos de replicacin del
ADN.

Segn el mecanismo que ha provocado el cambio en el material gentico, se suele hablar de


de varios tipos de mutaciones. Hay una tendencia actual a considerar como mutaciones en
sentido estricto solamente las gnicas, mientras que los otros tipos entraran en el trmino
de aberraciones cromosmicas.

Mutaciones puntuales

Son aquellas que implican un cambio en una nica base, y pueden provocar que se cambie
un aminocido por otro en el producto proteico (mutacin por cambio de sentido). Otras
veces no se traducen en ningn cambio (mutacin silenciosa), ya que como sabemos existe
ms de un codn para cada aminocido. Tambin puede suceder que el codn se convierta
en una seal de terminacin (mutacin sin sentido) y en ese caso se traducir una protena
incompleta no funcional.

Mutaciones gnicas o moleculares

Son las mutaciones que alteran la secuencia de nucletidos del ADN. Entre las mutaciones
puntuales podemos distinguir:

Mutacin por sustitucin de bases: Se producen al cambiar en una posicin un par de


bases por otro (son las bases nitrogenadas las que distinguen los nucletidos de una
cadena). Distinguimos dos tipos que se producen por diferentes mecanismos bioqumicos:

o Mutaciones transicionales, cuando un par de bases es sustituido por su alternativa


del mismo tipo. Las dos bases pricas son adenina (A) y guanina (G), y las dos
pirimdicas son citosina (C) y timina (T). La sustitucin de un par AT, por ejemplo,
por un par GC, sera una transicin.
o Mutaciones transversionales, cuando un par de bases es sustituida por otra del
otro tipo. Por ejemplo, la sustitucin del par AT por TA o por CG.

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Mutaciones de corrimiento
estructural, cuando se aaden o se
quitan pares de nucletidos alterndose la
longitud de la cadena. Si se aaden o
quitan pares en un nmero que no sea
mltiplo de tres (es decir si no se trata de
un nmero exacto de codones), las
consecuencias son especialmente graves,
porque a partir de ese punto, y no slo en
l, toda la informacin queda alterada.
Hay dos casos:
o Mutacin por prdida o
delecin de nucletidos: En la secuencia
de nucletidos se pierde uno y la cadena
se acorta en una unidad.
o Mutacin por insercin
de nuevos nucletidos: Dentro de la
secuencia del ADN se introducen
nucletidos adicionales, interpuestos
entre los que ya haba, alargndose
correspondientemente la cadena.

Mutaciones cromosmicas
La sustitucin de un nucletido por otro no es el nico tipo posible de mutacin. Algunas veces se
puede ganar o perder por completo un nucletido. Adems, es posible que se produzcan
modificaciones ms obvias o graves, o que se altere la propia forma y el nmero de los
cromosomas. Una parte del cromosoma se puede separar, invertir y despus unirse de nuevo al
cromosoma en el mismo lugar. A esto se le llama inversin. Si el fragmento separado se une a un
cromosoma distinto, o a un fragmento diferente del cromosoma original, el fenmeno se denomina
translocacin. Algunas veces se pierde un fragmento de un cromosoma que forma parte de una
pareja de cromosomas homlogos, y este fragmento es adquirido por el otro. Entonces, se dice que
uno presenta una delecin o deficiencia (dependiendo si el fragmento que se pierde es intersticial o
terminal, respectivamente) y el otro una duplicacin. Por lo general, las deficiencias son letales en
la condicin homocigtica, y con frecuencia las duplicaciones tambin lo son. Las inversiones y las
translocaciones suelen ser ms viables, aunque pueden asociarse con mutaciones en los genes cerca
de los puntos donde los cromosomas se han roto. Es probable que la mayora de estos
reordenamientos cromosmicos sean la consecuencia de errores en el proceso de sobre cruzamiento.
Mutaciones espontneas o inducidas

Espontaneas:

Son aquellas que surgen normalmente como consecuencia de errores durante el proceso de
replicacin del ADN. Tales errores ocurren con una probabilidad de 10 ^ -7 en clulas
haploides y 10 ^ -14 en diploides.

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Inducidas:

Surgen como consecuencia de la exposicin a mutgenos qumicos o biolgicos o a


radiaciones.

Agentes mutagnicos fsicos


L.U.V.
Radiaciones

Agentes mutagnicos qumicos

1. Anlogos de bases nitrogenadas:


5 bromo uracilo Timina
2 amino purina Adenina

2. Agentes que reaccionan con el ADN:

Agentes alquilantes: mostaza nitrogenada,


oxido de etileno o nitroso de guanidina

Acido Nitroso: Amino Hidroxilo


Hidroxilamina: GC AT

Agentes mutagnicos biolgicos


Plasmidos
Bacterifagos
Elementos transponibles

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Plsmidos

Pequeas molculas de ADN circular


Autorreplicativas
No contienen genes esenciales
Confieren habilidades tiles en circunstancias muy especificas (ej. Resistencia a
antibiticos)

Los plsmidos pueden clasificarse segn distintos criterios, por ejemplo por su tamao en
pb, su nmero de copias en la bacteria o por el tipo de genes que porta (plsmidos de
virulencia, plsmidos de resistencia a antibiticos, etc.) Tambin pueden clasificarse en
grupos de incompatibilidad. Se dice que dos plsmidos pertenecen al mismo grupo de
incompatibilidad si son incapaces de coexistir en la misma clula bacteriana. Muchos
plsmidos, en general los de mayor tamao (que pueden portar hasta 50 o 100 genes),
suelen ser capaces de transferirse de una bacteria a otra mediante un proceso llamado
conjugacin.

Por ltimo, algunos plsmidos no se transfieren en absoluto. La adquisicin de ADN


plasmdico por una cepa bacteriana, puede realizarse por medios distintos a la conjugacin,
como transformacin, transduccin mediada por fagos o incorporacin en el cromosoma,
segn veremos mas adelante.

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Bacterifagos

Son pequeas molculas de ADN o RNA, cpside protenica en la forma libre, sin cpside
dentro de las bacterias y se multiplica dentro de estas mismas.
Fagos virulentos:
Solo se propagan por ciclo ltico
Fagos temperados:
Pueden propagarse por ciclo ltico o ciclo lisognico

Bacteriofago

Elementos transponibles

Son segmentos de ADN, de cientos o miles de pb, nunca dependientes saltan dentro de la
clula y con mucha frecuencia eligen el sitio al azar. Tienen extremos repetidos invertidos.
contienen genes extra, que pueden codificar para muy distintas propiedades fenotpicas,
encontrndose entre las mas importantes desde el punto de vista clnico, la resistencia a
antimicrobianos como ser el caso de la resistencia de alto nivel a la gentamicina encontrada
en algunas cepas de Enterococcus sp. Son responsables tambin de mutaciones en el ADN.

Los elementos transponibles estn ampliamente distribuidos en la naturaleza, tanto en virus,


clulas procariotas y eucariotas. Existen 2 variedades de elementos transponibles:

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RECOMBINACIN GENTICA

Es el proceso mediante el cual elementos genticos contenidos en genomas de diferentes


individuos se combinan, lo que permite que el individuo lleve a cabo alguna nueva funcin
y que pueda dar como resultado una adaptacin a los cambios en el medio ambiente. Este
es un evento evolutivo importante y las clulas tienen mecanismos especficos que
aseguran que dicha recombinacin se efecte. A diferencia de los eucariotas donde la
recombinacin gentica ocurre en asociacin a la reproduccin sexual, en los procariotas
comprende una serie de mecanismos independientes del evento de reproduccin clula,
mas adelantes se reanudara el tema, en la recombinacin en bacterifagos.

Los mecanismos de recombinacin son llamados:

Transformacin
Transduccin
Conjugacin.

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Recombinacin Homloga:
Intercambio gentico entre secuencias homologa de ADN de dos orgenes distintos. Las
secuencias homologa de ADN tienen la misma secuencia o casi la misma, por lo tanto
puede ocurrir
apareamiento
de bases en una
longitud
extensa de las
dos molculas
de ADN.

TRANSFORMACION

La transformacin es el proceso por el cual ciertas bacterias llamadas competentes son


capaces de incorporar ADN exgeno o extrao, proveniente de otras bacterias, que se
encuentra libre en el medio. La virulencia del Streptococcus pneumoniae guarda relacin
con la presencia de cpsula polisacardica a su alrededor.
Las colonias con bordes rugosos (R) de S. pneumoniae, carecen de cpsula y no son letales
al infectar ratones. La capacidad de captar el ADN exgeno, conservarlo en forma estable
e interaccionar con l se denomina competencia. La competencia depende de la presencia
de un sistema de captacin de ADN especfico asociado a membrana.

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Si bien la mayora de las bacterias no presentan


capacidad natural para captar ADN, es posible
inducir en el laboratorio la competencia,
generando por distintos medios distorsiones en la
membrana celular, por ejemplo mediante pulsos
elctricos (electroporacin) o mediante cambios
osmticos y trmicos. Estos procedimientos son
muy utilizados para introducir experimentalmente
ADN extrao, por ejemplo un plsmido, en una
bacteria y as transformarla para que adquiera un
fenotipo de inters. Las bacterias tambin pueden
ser transformadas con ADN viral, en cuyo caso el
proceso se llama transfeccin.

TRANSFORMACION Y TRANSDUCCION

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TRANSDUCCION

La transduccin es la transferencia de ADN de una bacteria a otra por intermedio de un


bacterifago.

No todos los ciclos virales son iguales, pudiendo destacar dos ciclos principales, el
lisognico y el ltico.

I. Respuesta ltica: el virus se va replicando, formando una serie de nuevos fagos a la


vez, que usan a la bacteria como elemento parasitado, hasta que son capaces de
parasitar ya por ellos mismos.

II. Respuesta lisognica: en la que el genoma del fago se integra en el de la bacteria,


de forma que puede permanecer en este estado estacionario bastante tiempo hasta
que se produzca el ciclo ltico.

Este proceso es similar a la integracin o desintegracin


del factor F, aunque la diferencia es que en la
transduccin, la integracin del profago siempre es en el
mismo punto del cromosoma bacteriano, mientras que el
factor F poda integrarse en ms de un punto
determinado.

Transduccin

Existen dos formas de transduccin la especializada y la generalizada.

Transduccin generalizada
Cuando se va a replicar un fago, se produce la lisis de la bacteria para que los fagos puedan
abandonar la bacteria. Esto provoca que pueda existir el intercambio de material gentico
entre bacterias sin que haya contacto celular. La formacin de bacterias recombinantes a

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partir de las originales, puede darse gracias a la accin de un agente filtrable que deba
transportar los marcadores entre bacterias.
Este agente es un fago, y podemos destacar el fago P22. La degradacin del cromosoma
bacteriano durante el ciclo ltico, posibilita el que algunos trozos de este cromosoma
(siempre que sean de la longitud correcta), sean empaquetados por error dentro de cpsidas
vricas, lo que provocar que cuando este fago vuelva a infectar una bacteria, introduzca el
fragmento errneo de cromosoma. As es como se produce la transduccin. Este tipo de
fagos se denomina fagos transductantes y los cuales, aunque son minoritarios (1/100000),
cuando infectan nuevas bacterias, pueden producir la integracin de los marcadores
genticos que llevan en el cromosoma bacteriano receptor y generar bacterias
transductantes. Como en la conjugacin, estas bacterias recombinantes se producen por
doble entrecruzamiento entre el segmento de DNA dador y la regin homloga del
cromosoma receptor.

Hablamos de transduccin generalizada porque tericamente puede transducirse cualquier


fragmento del cromosoma bacteriano. Podemos seleccionar bacterias transductantes para
uno de los marcadores utilizados y luego, analizarlos para la presencia o no de los otros
marcadores de la bacteria donadora. Teniendo en cuenta que slo puede transducirse un
22,5% del genoma bacteriano, los genes slo podrn ser introducidos conjuntamente en la
partcula transductante si se encuentran prximos en el cromosoma, de forma que podrn
generarse bacterias cotranductantes, o bacterias transductantes para los dos caracteres en
cuestin.

Transduccin especializada

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Se da gracias a la accin de algunos fagos que se insertan en regiones concretas del cromosoma
bacteriano, de forma que solamente pueden transducir genes que se encuentran alrededor de estos.
Un ejemplo es el fago _, que se integra por recombinacin en una regin denominada att del fago y
otra homloga perteneciente al cromosoma
bacteriano y situada entre los genes gal y
bio.

En un momento determinado, una cepa


bacteriana gal+ y bio+ puede verse
lisogenizada por el fago lambda, e
integrase en su cromosoma como un
profago. Cuando se inicia el ciclo ltico, el
fago se libera del cromosoma por
entrecruzamiento entre las regiones
att_/att. Esta escisin suele ser precisa, de
forma que suele reconstruirse el fago, pero
puede ocurrir que el punto de
entrecruzamiento no se de entre las
regiones comentadas, sino entre otras,
originndose un DNA circular anormal.
Puede entonces perderse una parte del
cromosoma del fago, pero en cambio se
gane un trozo del cromosoma bacteriano
con gal+. As obtendremos una progenie
de fagos transductantes, que reciben el
nombre de _dgal+, los cuales han perdido
una parte de los genes esenciales para el
establecimiento del ciclo ltico. Estos fagos
necesitarn la ayuda de fagos no
defectuosos ayudantes, gracias a los cuales
suplirn las funciones requeridas para
replicarse activamente.

CONJUGACION

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La conjugacin bacteriana es un proceso de transferencia de informacin gentica desde


una clula donadora a otra receptora, promovido por determinados tipos de plsmidos, que
portan un conjunto de genes cuyos productos participan en el proceso, y que requiere
contactos directos entre ambas, con intervencin de estructuras superficiales especializadas
y de funciones especficas (pili sexuales en los Gram negativos, y contacto ntimo en los
Gram positivos). La capacidad de conjugacin depende de la presencia en la bacteria de
plsmidos conjugativos que contienen los genes necesarios para tal proceso.
Algunos de estos plsmidos se comportan como episomas, es decir, que pueden integrarse
en el cromosoma; en este caso, si se produce la conjugacin, se puede transferir el propio
plsmido ms un segmento adyacente del cromosoma, que a su vez podr recombinarse con
secuencias homlogas del cromosoma del receptor, dando lugar a un cromosoma hbrido.
Proceso
podemos usar los datos de la conjugacin interrumpida para realizar un mapa con
frecuencias de recombinacin, usando la conjugacin, primero tenemos que asegurarnos de
que los marcadores han pasado al cromosoma receptor, teniendo en cuenta que gracias al
gradiente de transferencia natural, pasan con mayor frecuencia y facilidad, aquellos
marcadores que se encuentran ms cerca del punto de entrada. Esto es debido a que el
apareamiento entre las bacterias suele interrumpirse espontneamente, de forma que la
transferencia de los marcadores suele ocurrir en el orden en que estos estn presentes en el
DNA a partir del punto de inicio de la transferencia del mismo factor F.

Nosotros seleccionamos para un determinado marcador, teniendo que controlar qu


marcadores pasan, pudiendo estimar que se produce un punto de entrecruzamiento hacia el
ltimo marcador. Podemos deducir el orden de los genes que entran gracias a las
frecuencias relativas de recombinantes en cruzamientos recprocos entre los genotipos
parentales. Podemos encontrar procesos relacionados con la conjugacin, tales como la
sexduccin, en el que se usan elementos F para crear diploides parciales. El F es un caso
de factor F modificado, encontrndose en algunas cepas Hfr. Podemos obtener estirpes F
con fragmentos muy grandes del cromosoma bacteriano.

Los factores F son ms fciles de recombinar porque poseen ms puntos para recombinar.

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RECOMBINACIN EN BACTERIFAGOS

Si dos fagos infectan a una misma bacteria, se dan las condiciones propicias para poder
obtener entrecruzamientos y recombinacin en el genoma vrico. Este fenmeno suele
denominarse coinfeccin.

Obtendremos en la progenie virus que poseern el fenotipo parental y otros individuos que
sern recombinantes. Cuando ocurre la coinfeccin, si los genomas no mantienen contacto,
entonces no podr darse entrecruzamiento. Podremos hacer mapas segn los datos de
recombinantes que obtengamos. Usaremos la relacin de siempre, fagos
recombinantes/nmero total de fagos. Para determinar esta frecuencia de recombinacin
debemos introducir las bacterias en un medio lquido, para aumentar la probabilidad de que
los fagos entren en la bacteria. Una vez se produce la recombinacin, debemos detectarlos,
cosa que haremos cogiendo el lisado y ponindolo en placas slidas, para observar el
fenotipo de la progenie. Observaremos placas de lisis o calvas (que es la zona donde el fago
lisa). Cabe destacar una diferencia entre procariota y eucariota con el fago, que es que a
veces encontramos coeficientes de coincidencia mayores de 1, porque tenemos
interferencia negativa. Esto implica que el que se produzca un entrecruzamiento favorece el
establecimiento de otro en otro lugar.

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TECNOLOGIA DEL DNA RECOMBINANTE

A principios de 1970 el DNA era la molcula mas difcil de analizar, era


enormemente larga y qumicamente montona.
Actualmente el DNA es ms fcil de estudiar, es posible separar regiones
determinadas y obtenerlas en cantidades prcticamente ilimitadas. Se puede
determinar su secuencia de nucletidos a una velocidad de varios cientos de
nucletidos al da.

Las tcnicas utilizadas en el ADN recombinante

Utilizacin de nucleasas de restriccin:


Ruptura especifica de ADN, facilita enormemente los aislamientos y la
manipulacin de los genes individuales.

Secuenciacin:
La secuenciacin rpida de todos los nucletidos de fragmento purificado de
ADN, hace posible determinar los lmites precisos de un gen y la secuencia de
aminocidos que codifica

Hibridacin de los cidos nucledos:


Hace posible localizar secuencias determinadas de ADN o de RNA, con una gran
exactitud y sensibilidad, utilizando la capacidad que tiene estas molculas de
unirse a secuencias complementarias de otros cidos nucledos.

Clonacin de ADN:
Se puede conseguir que un fragmento de ADN se integre en un elemento gnico
autoreplicante (plsmidos, virus) que habita en una bacteria de tal manera que de
una molcula de ADN puede ser reproducida generando muchos miles de
millones de copias idnticas.

Ingeniera gnica:
Se pueden alterar secuencias de ADN produciendo versiones modificadas de los
genes, los cuales pueden reinsertar en clulas u organismos.

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Endonucleasas de restriccin

Las endonucleasas de restriccin son unos enzimas bacterianos que cortan


internamente las molculas de DNA de una forma especfica que viene
determinada por la secuencia de los pares de bases. Una de las primeras
endonucleasas de restriccin que se caracteriz fue de la bacteria Escherichia
coli y se design EcoRI

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Enzimas utilizadas en la tecnologa de ADN recombinante

Endonucleasa de restriccin de tipo II


ADN ligasa
ADN polimerasa I
Transcriptasa inversa
Polinucleotido quinasa
Transferasa terminal
Exonucleasa III
Exonucleasa de bacterifago delta
Fosfatasa alcalina

Algunos productos de la tecnologa de ADN recombinante

Expresin de los genes clonados


Mutagnesis dirigida.- alterando la secuencia de ADN
Clonacin en plantas mediada por parsitos bacterianos.- enorme potencia en
agricultura.
Clonacin en clulas animales
Animales transgnicos

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BIBLIOGRAFIA

Microbiologa medica, Zinsser. Ed. Panamericana


Microbiologa medica, Murray, Kobayashi, Pfuller, Rosenthal. Ed. Harcourt
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http://webdelprofesor.ula.ve/odontologia/lurdanet/Genetica%20Bacteriana.pdf
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http://www.fagro.edu.uy/~microbiologia/docs/Gen%E9tica.pdf
http://fbio.uh.cu/genmol2/temas/cromosomas.htm
http://apuntes.rincondelvago.com/conjugacion-bacteriana.html
http://html.rincondelvago.com/acidos-nucleicos.html
http://es.wikipedia.org/wiki/ADN
http://es.wikipedia.org/wiki/Conjugacin_bacteriana
http://es.wikipedia.org/wiki/Mutaci%C3%B3n
http://www.monografias.com/trabajos10/muta/muta.shtml
http://www.personales.ulpgc.es/ecastro.dbbf/Descargas/Transparencias/DNA%20re
combinante.pdf

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