CITRATO Y MALONATO

El malonato de sodio, es una sal orgnica que es utilizada por las bacterias como nica fuente de
carbono con formacin de productos alcalinos que se evidencia por un viraje de verde a azul del
indicador del medio, azul de Bromotimol. Si un microorganismo es capaz de utilizar el malonato de
sodio como nica fuente de carbono, al mismo tiempo que utilizar el sulfato de amonio como
fuente de nitrgeno, se produce un aumento de la alcalinidad, que se debe a la formacin de
Hidrxido de sodio (NaOH).

El cambio de color de verde a azul indica una prueba positiva.

El citrato de sodio es una sal del acido ctrico, un compuesto orgnico simple que constituye uno
de los metabolitos del ciclo de los cidos tricarboxilicos. Generalmente los microorganismos que
emplean el citrato como nica fuente de carbono, utilizan sales de amonio como nica fuente de
nitrgeno. El metabolismo del citrato realizado, por algunas bacterias se realiza por el ciclo de
krebs y requiere el desdoblamiento del citrato por la enzima citritasa (citrato-oxalacetato-liasa o
citrato desmolasa) en presencia de magnesio o manganeso y de transportadores como citrato
permeasas.

La citritasa acta sobre el citrato produciendo cido oxalacetico y acetato; productos que son
convertidos enzimaticamente a piruvato y dixido de carbono. Durante esta reaccin el medio
comienza a alcalinizarse por el CO2 que se genera, el cual se combina con el agua y el sodio para
formar Carbonato un producto alcalino, este carbonato da la alcalinidad que produce el cambio de
color del indicador de pH del medio de verde a azul Prusia oscuro (indicador: azul de bromotimol,
amarillo a pH< de 6.0 y azul a pH > de 7.6). El medio incluye citrato como nica fuente de carbono
y fosfato de amonio como nica fuente de nitrgeno.

El desarrollo de un color azul intenso en 24-48 horas indica una prueba positiva y revela que el
microorganismo en estudio ha sido capaz de utilizar el citrato en el medio con la formacin de
productos alcalinos. La prueba tambin es positiva en ausencia de color azul si existe crecimiento
del microorganismo a lo largo de la estra de inoculacin.

Citrato de Simons:
Fundamento: Determina la capacidad de un microorganismo de utilizar el citrato
como nica fuente de carbono.
Lectura e interpretacin: Un viraje de color verde al azul marino y crecimiento en la
superficie da una reaccin positiva, de lo contrario es negativa

Malonato (caldo malonato fenilalanina):

Fundamento: Evala la capacidad del microorganismo de utilizar el malonato como

nica fuente de carbono y la desaminacin de la fenilalanina, en forma combinada. Las
Enterobacterias no tienen la capacidad enzimtica de realizar las dos reacciones
simultneamente, por lo que, o se observa la utilizacin del malonato o la desaminacin de
la lisina.
Lectura e interpretacin: Un viraje de color verde al azul, da una reaccin positiva,
de lo contrario es negativa.
Utilizacin de citrato: Esta prueba determina la capacidad de un microorganismo de utilizar el
citrato de sodio como nica fuente de carbono para el metabolismo y crecimiento.

1% de positividad para cepas de E. coli.

Utilizacin de malonato: Esta prueba determina la capacidad de algunas bacterias de utilizar el

malonato como fuente de carbono y energa.

95% de positividad para cepas de E. coli.