Solubilidad de protenas

Los mltiples grupos acido-base de una protena determinan que sus propiedades
de solubilidad dependen de la concentracin de las ales disueltas, de la polaridad
de disolvente, del PH y de la temperatura. Las diferentes protenas varan mucho
en su solubilidad bajo un conjunto dado de condiciones. Ciertas protenas
precipitan de su disolucin en condiciones en la que otras permanecen
completamente soluble. Este efecto se emplea rutinariamente como base de la
purificacin de una protena.

Parmetro para dar cuenta de los efectos de las cargas inicas es consecuencia
de las consideraciones tericas acerca de las disoluciones inicas. Sin embargo,
la solubilidad de una protena a una fuerza inica determinada varia con el tipo de
iones que se hallan en la disolucin. El orden de eficacia de estos diversos iones
para influir sobre la solubilidad de la protena es muy semejante para las diferentes
protenas y se debe principalmente, al menos de modo aparente, al tamao de los
iones y a la hidratacin.

La explicacin de este fenmeno de de disolucin por salado es que a medida

que aumenta la concentracin de sal en la disolucin de protena los contraiones
recubren con mas eficacia a las mltiples cargas inicas de las molculas de
protena incrementndose, por ello, la solubilidad de la protena.

Cuando las fuerzas inicas son elevadas, las solubilidades de las protinas
disminuyen, como ocurre con otras muchas sustancias. Este efecto, conocido
como precipitacin por salado, es una consecuencia primaria de la competencia
entre los iones de la sal que se han aadido y los dems solutos disueltos por las
molculas de solvatacin.

Cuando las concentraciones de sal con altas, se hallan solado tantos iones que se
han aadido que la cantidad del grueso de disolvente de que se dispone llega a
ser insuficiente para disolver otros solutos.

La precipitacin por salado es la base de los procedimientos de purificacin de

protenas empleados mas corrientemente.

Por el ajuste de la concentracin de sal en una disolucin que contenga una

mezcla de protenas, justo por debajo del punto de precipitacin de la protena que
se va a purificar, puede eliminarse de la disolucin muchas protenas indeseables.
A continuacin , despus de que se ha eliminado el precipitado por filtracin o
por centrifugacin , se aumenta la concentracin de sal de la disolucin remanente
de modo que precipite la protena deseada. De esta manera puede efectuarse
convenientemente una purificacin y concentracin de cantidades grandes de
protena. En consecuencia, la precipitacin por salado constituye, con frecuencia,
la etapa inicial de los procedimientos de purificacin de las protenas. El sulfato de
amonio es el reactivo utilizado mas corrientemente, debido a su solubilidad
elevada , que permite conseguir disoluciones con fuerzas inicas elevadas .

Inversamente, los iones que disminuyen la solubilidad de las protenas estabilizan

sus estructuras nativas, de modo que las protenas que han precipitado por salado
no son desnaturalizadas.

Efectos del PH

Las protenas son portadoras, en general, de numerosos grupos ionizables que

exhiben una variedad de valores de pk. Cada protena muestra un valor de PH
caracterstico en el que las cargas positivas de la molcula se contrarrestaran
exactamente con las cargas negativas. A este valor de PH, que es el pinto
isoelctrico de la protena, Pi, la molcula de la protena no es portadora de carga
neta y permanece, por tanto, inmvil en un campo elctrico.

Por el contrario, a medida que caria el pH desde el Pi de una protena , es decir, a

medida que aumenta la carga neta de la protena, debera estar sometida de modo
creciente al fenmeno de disolucin por salado, debido a que las interacciones
electrostticas entre las molculas vecinas que promueven la agregacin y la
precipitacin deberan aumentar de modo analgico.

Las protenas varan en su composicin de aminocidos y esta es la razn. Este

fenmeno en la base de un procedimiento de purificacin de una protena
conocido como precipitacin isoelctrica. En este procedimiento se ajusta el PH de
una mezcla de protenas al PI de la protena que se desea aislar, de modo que se
disminuye selectivamente su solubilidad. En la prctica, esta tcnica se combina
con la precipitacin por salado u as la protena que se purifica se precipita
mediante sal en la proximidad de su PI.