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Kasmera 35(2): 118 - 126, 2007

ISSN 00755222 / Depsito legal 196202ZU39

Susceptibilidad de Neisseria gonorrhoeae a los


antibioticos b-lactamicos, tetraciclinas y quinolonas

Neisseria Gonorrhoeae Susceptibility to b-lactamics Antibiotic,


Tetraciclines, and Quinolones

Sandoval Marisol1; Guevara Armando2;


Ward Lumar1; Regina Ramos1,
Suarez Yuraima1 y Salomon Marlly2
1Departamento de Medicina. Hospital Universitario Ruz y Pez.
Escuela de Ciencias de la Salud Dr Francisco Battistini C.
Ciudad Bolvar. Venezuela. 2Laboratorio de Microbiologa.
Hospital Universitario Ruz y Pez. Ciudad Bolvar. Venezuela.
E-mail: dramarisolsandoval@cantv.net

Resumen
Se estudi la susceptibilidad de Neisseria gonorrhoeae a los antibiticos b-lactmicos, tetraci-
clinas y quinolonas, en cepas aisladas de pacientes con cervicitis y/o uretritis gonocccicas que asi-
tieron a la consulta de Infecciones de Transmisin Sexual del Ambulatorio Urbano tipo II, El Per en
Ciudad Bolvar, Julio-Agosto del 2003. Las muestras fueron inoculadas en Agar Sangre, Agar Base
GC con suplemento nutricional al 1% y Agar Thayer Martin; realizando simultneamente coloracin
de Gram. Las colonias sospechosas fueron identificadas mediante el test de oxidasa, y la degradacin
de azcares en medio CTA. Se investig la produccin de b-lactamasa mediante el mtodo acidim-
trico. Las pruebas de susceptibilidad se hicieron en Agar Base GC con suplemento nutricional al 1%
para los siguientes antimicrobianos: penicilina, ceftriaxona, tetracilina, y ciprofloxacina. Se aislaron
50 cepas de N. gonorrhoeae que representaron el 43,85% de pacientes consultantes, de las cuales
82% pertenecan a pacientes del sexo masculino. No se encontr evidencia de la produccin de -lac-
tamasas en las cepas estudiadas. En cuanto a la susceptibilidad a los antimicrobianos se encontr
46% de resistencia a penicilina, 42% a las tetraciclinas, ceftriaxona y ciprofloxacina mostraron bue-
na actividad contra gonococo con 98 y 92% de sensibilidad respectivamente.
Palabras clave: Resistencia, gonorrea, Neisseria gonorrhoeae.

Recibido: 05-04-07 / Aceptado: 17-09-07


Susceptibilidad de Neisseria gonorrhoeae a los antibioticos b-lactamicos, tetraciclinas y quinolonas 119

Abstract
Neisseria gonorrhoeae susceptibility to b-lactamics antibiotic, tetraciclines, and quinolones
was studied in strains isolated from patients with gonococcic cervicitis and/or urethritis that were
to consultation of Infections of Sexual Transmission of The Ambulatory Urban type II, in a
neighborhood of Ciudad Bolvar from July to August - 2003. The samples were seeded in Agar
Blood, GC Agar Base and 1% defined growth supplement, Agar Thayer Martin; making simulta-
neously a Gram stain. Suspicious colonies were identified by means of oxidase test and sugar de-
gradation in CTA medium. The production of b-lactamases was investigated of by means of the aci-
dimetric method. Susceptibility tests were made in GC Agar Base and 1% defined growth supple-
ment. Penicilline, ceftriaxone, tetracicline, and Ciprofloxacin were used. 50 strains were isolated
of Neisseria gonorrhoeae that represented 43.85% of patients with gonococci infections (Urethri-
tis and/or cervicitis) of which 82% belonged to masculine sex. There was no evidence of produc-
tion of -lactamases in the studied strains. As far as the susceptibility to the antimicrobial drugs it
was found 46% strains resistant to penicillin, 42% to tetraciclines. Ceftriaxone and ciprofloxacin
showed a good activity against N. gonorrhoeae with 98 and 92% of sensitivity, respectively.
Key words: Resistance, gonorrhoea, Neisseria gonorrhoeae.

Introduccin anualmente en todo el mundo, con un impor-


tante nmero de casos que pasan inadverti-
Las Infecciones de Transmisin Sexual dos y constituyen un reservorio silencioso de
(I.T.S) pueden ser causadas por bacterias, vi- estas infecciones (2). Esta es una infeccin
rus, protozoarios y hongos. Entre las afeccio- bacteriana frecuente, transmitida casi exclu-
nes bacterianas las causadas por Neisseria sivamente por contacto sexual o va perinatal
gonorrhoeae estn muy difundidas en todos y afecta primariamente la membrana mucosa
los estratos, con mayor incidencia en los de de la uretra y crvix y con menor frecuencia la
bajo nivel socioeconmico. Como ocurre en del recto, orofaringe y conjuntivas. La infec-
la mayora de las I.T.S., los grupos de la po- cin genital ascendente en mujeres conduce
blacin ms afectados corresponden a: pros- a salpingitis aguda, la complicacin predomi-
titutas, homosexuales, viajeros, militares, nante y una de las causas mas frecuentes de
trabajadores, inmigrantes, estudiantes y en infertilidad. Otras complicaciones incluyen
general a todas aquellas personas con proble- epididimitis aguda, oftalmitis, infeccin dise-
mas de conducta y/o adaptacin social a la minada con artritis-dermatitis y algunas ve-
comunidad. Estas enfermedades estn au- ces endocarditis (3).
mentando considerablemente como resulta- El tpico organismo del gnero Neisse-
do de la mayor promiscuidad sexual, cambios ria es un diplococo Gram negativo de 0,8 m
en los patrones culturales y de la prctica del de dimetro aproximadamente. Es una bac-
fellatio y cunnilingus, afectando a todas las teria inmvil y no formador de esporas. Los
edades en especial adultos jvenes entre cocos individuales tienen forma de rin, con
quienes la actividad sexual es mayor (1). los lados adyacentes planos o cncavos; en
La gonorrea es un importante problema cultivos viejos, o en aquellos expuestos a an-
de salud pblica en el mbito mundial. Se cal- tibiticos, pueden encontrarse organismos
cula que ocurren 60 millones de infecciones hinchados o distorsionados (4, 5).

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El diagnstico de laboratorio de gono- tibiticos b-lactmicos (3). Ms reciente-


rrea depende de la identificacin de N. gono- mente han surgido las tetraciclinas y las
rrhoeae en un sitio infectado. El aislamiento fluoroquinolonas como alternativas tera-
por cultivo es el estndar diagnstico y debe puticas, y al igual que con las penicilinas,
utilizarse siempre que sea posible. La tincin tambin se han generado mecanismos de re-
de Gram es muy sensible (ms de 90%) y es sistencia. En el caso de las tetraciclinas se
especfica (98%) para la deteccin de infec- produce una mutacin cromosomal que al-
cin gonocccica en varones con uretritis pu- tera la afinidad del ribosoma por la droga,
rulenta. Sin embargo, la sensibilidad de la mientras que para las fluoroquinolonas ocu-
prueba es de un 60% o menos en pacientes rre una mutacin en el gen que codifica la
asintomticos. As pues, la tincin de Gram ADN girasa o una disminucin de la per-
es fiable para diagnosticar las infecciones en meabilidad a la droga o ambas (7).
hombres con uretritis purulenta, pero todos El problema representado por esta enfer-
los resultados negativos en mujeres y en medad, se agrava al surgir la resistencia a los
hombres sin sntomas se deben confirmar antimicrobianos usados comnmente en el
mediante cultivo (3, 5). Para el aislamiento tratamiento de esta patologa. As para la peni-
de N. gonorrhoeae se toman muestras de cilina, frmaco otrora muy eficaz, la resistencia
reas genitales como uretra, crvix, canal en nuestro pas oscila entre 30 y 45%, segn las
anal y de otras localizaciones de infecciones series publicadas, siendo mediada principal-
extragenitales: Infecciones cutneas, articu- mente por b-lactamasas (1, 3). La resistencia a
laciones, faringe, procesos inflamatorios pl- tetraciclinas es elevada, registrndose en mas
vicos (5). de 60% en algunas regiones (4, 5). Por el con-
Se ha recomendado que todos los aisla- trario, existe excelente sensibilidad a la ceftria-
mientos gonocccicos sean evaluados para xona y a las fluoroquinolonas, siendo ambas el
produccin de b-lactamasa. La actividad en- tratamiento de eleccin hoy da (2, 3). Sin em-
zimtica puede ser demostrada mediante va- bargo el abuso y mal uso de estos antimicrobia-
rias tcnicas, de las cuales tres han reiterado nos, aunado a la naturaleza verstil del gonoco-
su valor, en el transcurso de los aos: iodo- co y a su capacidad para adaptarse a las condi-
mtrico, acidomtrico y cefalosporina cro- ciones adversas en el microambiente pueden
mgena (nitrocefn), en las cuales se utilizan llevar rpidamente a la adquisicin de resisten-
cultivos puros de gonococo (6). cia, eliminando las escasas alternativas tera-
Se probaron muchos tratamientos, peticas econmicas y accesibles para tratar
pero no fue hasta el advenimiento de las sul- enfermos con gonorrea en pases del tercer
famidas, en la dcada de 1930, y la penicili- mundo.
na, en 1943, que se cont con un tratamiento El estado del fenmeno de la resistencia
verdaderamente eficaz. Las penicilinas inhi- de N. gonorrhoeae a los antimicrobianos en
ben a las bacterias unindose en forma cova- el estado Bolvar no se conoce, por tal motivo
lente a las protenas ligadoras de penicilina el principal objetivo de este estudio es eva-
(PBP) en la membrana citoplasmtica. Estas luar la susceptibilidad a los antibiticos
protenas blanco catalizan la sntesis de b-lactmicos, Tetraciclinas y Quinolonas en
peptidoglucano que forma la pared celular cepas de N. gonorrhoeae aisladas de pacien-
de la bacteria. Las alteraciones en estas pro- tes con uretritis aguda o cervicitis purulenta
tenas pueden producir resistencia a los an- que asistieron a la consulta de Infecciones de

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Transmisin Sexual en el ambulatorio urba- gn las recomendaciones del NCCLS 2003.


no tipo II El Per en Ciudad Bolvar, estado Todas las cepas aisladas fueron sometidas a
Bolvar, Venezuela y detectar la presencia de la deteccin de produccin de b-lactamasa
-lactamasa de los aislamientos clnicos. por el mtodo acidimtrico (8).
Para la recoleccin de los datos se elabo-
Metodologa r una ficha, que nos permiti reunir infor-
macin de la clnica y epidemiologa del pa-
Se evaluaron un total de 114 muestras ciente; se obtuvieron datos sobre: Identifica-
provenientes del mismo nmero de pacientes cin, edad, sexo, ocupacin, sntomas, auto-
de ambos sexos con clnica de uretritis o cer- medicacin y tipo de muestra.
vicitis purulenta que acudieron a la consulta
de Infecciones de Transmisin Sexual del Resultados
Ambulatorio Urbano Tipo II, El Per, en
Ciudad Bolvar, durante los meses de Julio y De los 114 pacientes que asistieron a la
Agosto del ao 2003. A todas las muestras se consulta de Infecciones de Transmisin Se-
les realiz coloracin de Gram y fueron ino- xual, 43,85% (50) presentaron uretritis o cer-
culadas en Agar Sangre Humana al 5% (Hi- vicitis gonocccica, predominando el sexo
Media), Agar Base GC con suplemento nutri- masculino con el 82% (41 casos), mientras
cional al 1% (HiMedia) y Agar Thayer Martin que el 18% (9) estaban representadas por el
(HiMedia) e incubadas entre 35C a 37C en femenino. En las 50 cepas estudiadas se
microaerofilia. Las colonias sospechosas fue- aprecia que 54% (27) fueron sensibles a la
ron identificadas mediante las pruebas de penicilina y 46% (23) resultaron resistentes;
oxidasa, catalasa y la utilizacin de glucosa, por otra parte el comportamiento de las ce-
lactosa, maltosa y sacarosa en Agar CTA (Hi- pas ante la tetraciclina demuestra un 58%
Media). Todos los cocos Gram negativo aisla- (29) de sensibilidad y el 42% (21) de resisten-
dos, oxidasa y catalasa positivos y que slo cia. La ceftriaxona y la ciprofloxacina revela-
fermentaron la glucosa fueron identificados ron una sensibilidad de 98% (49) y 92% (46)
como N. gonorrhoeae (8). Se determin la respectivamente (Tabla 1). El 53,85% (14)
susceptibilidad a penicilina, ceftriaxona, te- fueron resistentes a dos de los antibiticos
traciclina y ciprofloxacina mediante la tcni- probados, 30,76% (8) a un antibitico,
ca de difusin con discos (Kirby-Bauer) se-

Tabla 1. Susceptibilidad de cepas de Neisseria gonorrhoeae aisladas en pacientes sintomticos.

Antimicrobiano Susceptibilidad

Sensible % Resistente %

Penicilina 27 54 23 46
Ceftriaxona 49 98 1 2
Tetraciclina 29 58 21 42

Ciprofloxacina 46 92 4 8

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Tabla 2. Pacientes con uretritis o cervicitis gonococcica segn ocupacin.


Ocupacin N de Cepas %
Estudiantes 8 16
Mineros 10 20
Obreros 7 14
Militares 5 10
Otros 20 40
Total 50 100
* Otros: Ama de Casa, vigilantes, comerciantes.

11,54% (3) a tres antibiticos y slo 3,84% (1) tos, todos aquellos que en la tincin de Gram
a todos los antibiticos probados. se observaron como diplococos gramnegati-
Se observ que el 20% (10) de las cepas vos extra e intracelulares y confirmando el
aisladas correspondan a pacientes cuya ocu- diagnstico mediante el cultivo del germen,
pacin era mineros, seguidos de los estudian- otros estudios demuestran mayor proporcin
tes con 16% (8) (Tabla 2). de Uretritis No gonocccica (1, 2, 9).
Por ltimo, una vez aisladas las 50 cepas Por lo general la mayor incidencia de in-
se procedi a determinar la produccin de feccin gonocccica se presenta en el sexo
b-lactamasa mediante el uso del Mtodo Aci- masculino, como lo reportan algunos autores
dimtrico, no encontrndose evidencia de la (3, 4) lo que coincide con los resultados obte-
produccin de esta enzima. nidos en este estudio, donde el 82% de las in-
fecciones se registraron en el sexo masculino,
Discusin en comparacin con el sexo femenino con
18%, que corresponde a nueve mujeres las
Segn la Organizacin Mundial de la Sa- cuales asistieron al examen mdico a travs
lud, la gonorrea es un importante problema de de las actividades de investigacin de contac-
salud pblica en el mbito mundial. Se calcu- tos y que constituan cnyuges regulares de
lan que ocurren 60 millones de infecciones los casos ndice. Esto se debe a que en los pa-
anualmente en todo el mundo. Adems, un cientes masculinos la uretritis gonocccica se
nmero desconocido de casos pasan inadver- manifiesta en forma aguda con abundante
tidos y constituyen el reservorio de estas infec- secrecin purulenta, a diferencia de las muje-
ciones. En un estudio realizado por vila y res que manifiestan en algunas oportunida-
cols., el ao 1995-1999, se demostr un ascen- des signos de cervicitis mucopurulenta, o
so significativo en las Infecciones de Transmi- pueden permanecer asintomticas (4).
sin Sexual. Al determinar el tipo de infeccin Una vez determinada la presencia de
ms frecuente, gonorrea ocup un mayor por- este microorganismo en las muestras clni-
centaje 20,65% seguido de infecciones no go- cas analizadas, se investig la produccin de
nocccicas con un 12,34%. En el presente es- b-lactamasa con el uso del mtodo acidim-
tudio se determin que 43,85% de los pacien- trico el cual se basa fundamentalmente en
tes que consultaron presentaron uretritis o medir la aparicin de grupo acdico cuando
cervicitis gonocccica, considerndose a es- el anillo b-lactmico es hidrolizado; no en-

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contrndose evidencia de la produccin de actividad contra el gonococo con una sensi-


esta enzima. bilidad del 98%. Slo se encontr resistencia
En Venezuela, diferentes investigadores en un 2%, siempre asociado a resistencia a
han reportado hallazgos de N. gonorrhoeae otros antibiticos: penicilina y tetraciclinas.
resistentes a la penicilina, productoras y no Otros investigadores han reportado total
productoras de b-lactamasa. As, en 1992 se sensibilidad (10, 12, 14) o escaso nivel de re-
encontr produccin de b-lactamasa en 19% sistencia a este antimicrobiano (11).
de 100 cepas estudiadas (1) mientras que en Por su parte, las tetraciclinas al igual
593 cepas aisladas entre 1991 y 1994, no se que las penicilinas, por largo tiempo consti-
encontr produccin de esta enzima (10). tuyeron opciones teraputicas de primera
Posteriormente se reporta una importante eleccin, hoy en da no del todo efectivas por-
presencia de este mecanismo de resistencia que el gonococo se ha hecho resistente a estos
al encontrarse 77,2% de produccin de antibiticos. Casi todos los autores en el m-
b-lactamasa en 22 cepas resistentes a la peni- bito mundial reportan resistencia a la tetraci-
cilina (11), mientras que en otro estudio se re- clina, encontrndose variaciones entre las di-
port produccin de b-lactamasa en todas las ferentes regiones; en Brasil se han reportado
cepas resistentes a la penicilina (12). Durante cifras de resistencia que oscilan entre el 2 y
la presente investigacin no se logr demos- 40% (15, 16), mientras que en Cuba se ha en-
trar la produccin de b-lactamasa. La resis- contrado hasta 60% de resistencia (14). En
tencia a la penicilina en las cepas aisladas Venezuela, la frecuencia de resistencia a la te-
puede ser explicada por modificaciones en traciclina oscila entre 48% y 63% segn los
las PBPs o resistencia mediada cromosmi- diferentes autores (1, 10, 11), siendo estas ci-
camente, asociados a cambios en el rgimen fras mas elevadas que las encontradas en el
de tratamiento (13, 14). presente estudio.
La frecuencia de resistencia a la penicili- Desde hace varios aos, han sido descri-
na encontrada en este estudio coincide con lo tas cepas productoras y no productoras de -
reportado por investigaciones realizadas en lactamasa resistentes simultneamente a la
Maracaibo, donde encontraron 31,25% y 44% tetraciclina. Los resultados obtenidos en la
de resistencia a la Penicilina (11,12), cifras su- presente investigacin revelan 42% de resis-
periores a lo reportado en Sao Paulo, Brasil, tencia a la tetraciclina, y en 30% las cepas ais-
donde se encontr 23% de resistencia a la pe- ladas presentaron resistencia tanto a la peni-
nicilina entre 65 aislamientos (15). cilina como a la tetraciclina. La resistencia si-
El CDC, en 1985 incluy a la ceftriaxona multnea a estos antimicrobianos es alarman-
como alternativa en el tratamiento de la gono- te en algunos pases como en Cuba donde se
rrea no complicada y en publicaciones poste- ha encontrado 59,3% de resistencia (14).
riores la eleva a un rgimen de primera elec- Debido a la emergencia de la resistencia
cin. No obstante, en algunos sitios de EEUU, a la penicilina y a la tetraciclina, las fluoro-
frica y Asia se han detectado cepas de N. go- quinolonas pasaron a jugar un papel impor-
norrhoeae con susceptibilidad disminuida a tante en el tratamiento de la gonorrea, lo que
la ceftriaxona, asociado en cierto grado con re- a su vez ha llevado a producir resistencia a
sistencia cromosmica de bajo nivel a la peni- este grupo de antimicrobianos de manera
cilina (10, 14). La ceftriaxona demostr du- alarmante ya que en algunas regiones del
rante la presente investigacin una excelente mundo como el sur este de Asia, Australia y

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en algunas regiones de Estados Unidos la re- den a: prostitutas, homosexuales, viajeros,


sistencia llega al 90% (2). La resistencia a militares, trabajadores inmigrantes, estu-
este grupo de antibiticos es mediada cromo- diantes y en general todas aquellas personas
somalmente, por mutaciones en varios loci con problemas de conducta y/o adaptacin
(17). Pases como China, India y Francia re- social a la comunidad. En relacin a la pobla-
portan cifras de resistencia a ciprofloxacina cin mas afectada los resultados obtenidos
de 98%, 77,8% y 14,8% respectivamente (17, en esta investigacin demuestran que corres-
18, 19), mientras que en Venezuela, el nivel ponde a los pacientes que se desempean
de resistencia es bajo, encontrndose una como mineros con 20%, seguido de estudian-
sensibilidad que oscil entre 92 y 98% a tes con 16%. Probablemente este hecho se
ciprofloxacina, levofloxacina, trovafloxacina, deba a un incremento de la promiscuidad se-
lomefloxacina y enoxacina en 50 cepas de N. xual, cambios en los patrones culturales (4).
gonorrhoeae (11). En la presente investiga- Finalmente, en base a los resultados
cin la ciprofloxacina demostr buena activi- obtenidos en este estudio, se puede aseve-
dad contra este microorganismo con 92% de rar que la penicilina no puede seguir utili-
sensibilidad. Es necesario mencionar que se zndose como droga de primera lnea en
encontraron 3 cepas resistentes a ciprofloxa- este tipo de infecciones debido a los altos
cina con resistencia asociada a penicilina y en niveles de resistencia encontrados. Es
un caso asociada tambin a ceftriaxona. Esto quizs, por esta razn, que el CDC en 1985,
pudiera explicarse debido ha que se ha en- incluy a la ceftriaxona como terapia de pri-
contrado asociacin entre resistencia cromo- mera eleccin en el tratamiento de las in-
smica y susceptibilidad disminuida a fluo- fecciones gonocccicas en los Estados Uni-
roquinolonas y antibiticos b-lactmicos. De dos. No obstante, en los Servicios de Vene-
hecho ya se han descrito en algunos sitios de reologa de Venezuela la ceftriaxona es
EEUU, frica y Asia, cepas de N. gono- poco utilizada, primariamente por que no
rrhoeae con susceptibilidad disminuida a es suministrada por el Estado y adems
ceftriaxona y a ciprofloxacina asociada a cier- porque no hay disponibles en el mercado
to grado con mutaciones puntuales en los ge- presentaciones que contengan slo 125
nes que codifican las PBPs (Resistencia cro- 250 miligramos del antibitico, que son las
mosmica a la penicilina) (7, 11, 19). dosis recomendadas para el tratamiento de
De las 26 cepas de N. gonorrhoeae re- la gonorrea, y las presentaciones existentes
sistentes se pudo observar que el 30,77% fue tienen un elevado precio, que rebasa la ca-
resistente a un solo antibitico, 53,85% a dos pacidad adquisitiva de la mayora de los pa-
antibiticos, 11,54% a tres antibiticos y solo cientes; por lo tanto, en nuestro pas la
un 3,85 % a cuatro antibiticos; desafortuna- penicilina es el frmaco que clsicamente
damente investigaciones anteriores no han se utiliza hasta ahora para estas infeccio-
suministrado informacin en relacin al n- nes. Sin embargo es importante y necesario
mero de antibiticos a los que las cepas aisla- resaltar que N. gonorrhoeae puede generar
das presentaron resistencia, aspecto que con- o adquirir, en el transcurso del tiempo, di-
sideramos importante, ya que la multi-resis- ferentes formas de resistencia antimicro-
tencia no es un fenmeno raro. biana, que nos llevara a la necesidad de in-
Como ocurre en la mayora de las ITS los troducir modificaciones en los esque-
grupos de poblacin ms afectados correspon- mas teraputicos sobre todo en aquellos pa-

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cientes automedicados, utilizndose en ellos en el Programa de Enfermedades de Trans-


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que durante largo tiempo constituy una drguez A. Susceptibilidad antimicrobiana
buena opcin teraputica, hoy en da no es de Neisseria gonorrhoeae aislada de paci-
efectiva, debido a que el gonococo se ha he- entes con uretritis aguda atendidos durante
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