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Enterobacterias
I . INTRODUCCIN :
Como todos sabemos las enfermedades infecciosas han influido de forma
determinante en la evolucin de la historia del hombre y son actualmente la principal
causa de morbimortalidad en el mundo a pesar del descubrimiento de cientos de
agentes antimicrobianos cada vez ms potentes y efectivo sestudios recientes llegan a
la conclusin de que en infecciones respiratorias o bacteriemias por echerichia coli
productor de betalactamasa . las enterobacterias son una familia heterognea y
amplia de bacilos gram negativos que residen en el colon del hombre sin causar
enfermedad aunque con frecuencia son causantes de un nmero considerable de
infecciones. en los ltimos aos un porcentaje cada vez mayor de estas bacterias,
especialmente klebsiella spp. y enterobacter spp. se han hecho resistentes incluso a las
cefalosporinas de tercera generacin debido al desarrollo de betalactamasas de
espectro ampliado adems del desarrollo de resistencia a quinolonas es cada vez ms
preocupante y est relacionado con el consumo indiscriminado de estos antibiticos
en el mbito extrahospitalario. el tratamiento emprico de la bacteriemia por bacilos
gram negativos depender de mltiples factores. en sentido general, las cefalosporinas
son antibiticos bactericidas frente a las enterobacterias.

II . OBJETIVO:
Familiarizarse con las caractersticas microscpicas y las propiedades culturales
de este importante grupo bacteriano
Elegir los medios de cultivo involucrados en el aislamiento y la diferenciacin
presuntiva de estas bacterias,sealando los componentes que los hacen
selectivos y diferenciales

III . FUNDAMENTO:
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes
adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos
de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la
produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones
Fe3+ , los cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de
color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el
balance osmtico.
Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del
indicador rojo de fenol,el cual vira al color amarillo en medio cido. El tiosulfato de
sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno el que reacciona luego con una sal de hierro
proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro

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IV . MATERIALES :
Esptula
agitador de vidrio
tubos de ensaye chicos con tapa de rosca
3 matraz erlenmeyer 500Ml
Papel craft
Gradilla
1 pipeta 5ml
30 cajas petri estriles
Mechero
asas y portasas
portaobjetos
1 probeta 250ml
vaso de pp. de 250ml
Algodn
Gasa
Papel filtro
Torundas con alcohol
Hisopos estriles

REACTIVOS

Medio Mac Conkey

Base de Caldo Rojo Fenol
Base de Agar Salmonella y shigella
V. PROCEDIMIENTOS
AGAR MAC CONKEY

Una vez recibida la muestra en el laboratorio, extenderla tan pronto como sea
posible.

Laplaca para extender las muestras se utiliza principalmente para aislar cultivos
puros de lasmuestras con flora mixta.
Otra opcin es, si el material se cultiva directamente de una torunda, hacerla
rodar sobre una pequea seccin del borde, extendiendo luego a partir de esta
rea inoculada. Asimismo, es preciso inocular un medio no selectivo tal como el

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agar Columbia con sangre de carnero al 5% para proporcionar una indicacin

de otros organismos presentes en la muestra.
Incubar las placas, protegidas de la luz, a 35 2 C (no utilizar atmsfera
enriquecida con CO2con agar MacConkey II) durante 18 - 24 h o ms si es
necesario

AGAR TSI
Frmula (en gramos por
Instrucciones
litro)
Extracto de carne 3.0 Suspender 62,5 g del
Pluripeptona 20.0 polvo por litro de agua
destilada. Mezclar bien y
Cloruro de sodio 5.0 calentar con agitacin
Lactosa 10.0 frecuente, hervir 1 o 2
minutos hasta disolucin
Sacarosa 10.0
total. Llenar hasta la
Glucosa 1.0 tercera parte de los tubos
Sulfato de hierro y de ensayo. Esterilizar a
0.2
amonio 121C por 15 minutos.
Tiosulfato de sodio 0.2 Enfriar en pico de flauta
profundo.
Rojo de fenol 0.025
Agar 13.0
pH final: 7.3 0.2

Siembra

A partir de un cultivo puro, sembrar en TSI, picando el fondo y

extendiendo sobre la superficie del medio.

Incubacin

A 35-37C durante 24 horas, en aerobiosis

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VI . RESULTADOS:
AGAR TSI

Pico alcalino/fondo cido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo

solamente fermenta la glucosa.
Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo
fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa.
Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no
fermentador de azcares.
La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el
microorganismo produce gas.
El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce cido
sulfhdrico.

ENTEROBACTER SALMONELLA

KLESIELLA SHIGELLA

CITERBACTER PROTEUS

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Vll. DISCUSIN :
si fermenta glucosa cambia a amarillo en todo el tubo, lo que pasa
que en el pico de flauta los productos cidos de la fermentacin de
la glucosa se oxidaron y tambin se oxidaron las peptonas a aminas
alcalinas, quedando el pico de color rojo. Ahora si ademas fermenta
lactosa y o sacarosa esto hace que en el pico de flauta se
neutralicen las aminas y el exceso de cido hace virar el indicador al
color amarillo
Vlll . CONCLUSIN :
En esta prctica se identificaron algunas de las bacterias
pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae como fueron en este
caso: Proteus, E.coli, Salmonella
Determinando y afirmando
sus caractersticas microscpicas, culturales y bioqumicas de cada
una de ellas, diferencindolas unas de las otras.La familia de
Enterobacteriaceae tiene como caractersticas generales ser bacilos
Gram Negativos, sin agrupacin,miden de 0.6 0.8 de ancho por
2 a 4 largo, son mviles o inmviles, no esporulados, catalasa
positivo, oxidasanegativos, reducen el nitrato a nitrito, son
fermentadores de glucosa .

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lX . BIBLIOGRAFIAS :

Cue B.M, Morejon S.M: Antibacterianos de accin sistmica Rev.

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