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RESUMEN
ABSTRACT
Blood testing is one of the most widely used and most important medical tests in clinical practice
because these tests allow the patient to know the health status of a patient and to detect possible
diseases with a quick and timely analysis of the blood samples obtained by venipuncture. In the
present study, the corresponding protocol for a correct venous blood extraction was performed and
the blood glucose, cholesterol, triglycerides, urea and uric acid levels of two patients were analyzed
using colorimetric kits to perform the respective enzymatic tests and to determine possible health
problems related to the lifestyle of each patient, based on the normal range in which the
concentrations must be found for each analysis.
Los carbohidratos son importantes para el Las muestras se recogieron de dos pacientes
metabolismo, cuando la ingesta de azcares es que se indican en la Tabla 1. Se extrajeron
muy alta se presenta problemas clnicos como 5ml de sangre de cada paciente, en cada
diabetes mellitus que se puede detectar con anlisis realizado. Las muestras fueron
este tipo de anlisis (Martnez, 2012). colocadas en tubos de ensayo de tapa roja,
despus de la extraccin sangunea.
Dentro de la dieta, los triglicridos
representan un 90% de las grasas que se Tabla 1. Datos de pacientes y muestras
ingieren y el resto est formado por Paciente 1 Paciente 2
colesterol. Su metabolismo puede verse Muestra 1 2
Edad 21 aos 23 aos
afectado por factores genticos, ambientales,
Gnero Femenino Masculino
Extraccin Sangunea Una vez identificado el sitio de puncin, se
verific que la aguja est estril, se ajust el
La extraccin de sangre venosa mediante pivote de la jeringa para seguridad, se prob
jeringa, tuvo la referencia del protocolo el mbolo que funcione correctamente.
establecido por la Sociedad Brasilea de Despus se coloc el torniquete 7 a 10 cm
Patologa Clnica y Medicina Laboratorial, sobre el sitio de puncin, se realiz la
para obtener mejores resultados en los anlisis antisepsia con alcohol, en forma circular de
de las muestras en las distintas pruebas adentro hacia afuera, evitando la
bioqumicas. contaminacin, se retir la proteccin de la
Antes de realizar cualquier actividad dentro aguja.
del laboratorio, se tom medidas de Para una correcta extraccin se estira la piel
proteccin personal y previo a la extraccin se con la mano que no sostiene la aguja, lejos del
verific y orden el material a utilizar lugar donde se realiz la antisepsia. La
(jeringa, aguja, torniquete, tubos, torundas, puncin se realiz con un ngulo de 45 con
curitas, etc). Como medida de bioseguridad se el bisel hacia arriba, de manera rpida para
procedi a lavarse las manos y colocarse los evitar hematomas justo debajo de la piel y
guantes, antes de utilizar el material para evitar goteo de sangre. La extraccin de
respectivo. Se tom los datos del paciente y se la sangre debe ser a una velocidad media, para
explic al mismo el procedimiento al cul se evitar la hemlisis y dolor al paciente. Se
lo iba a someter, transmitiendo confianza y procedi a retirar el torniquete, luego la
seguridad, para que la extraccin sea ms jeringa de la vena del paciente con sumo
fcil. cuidado, se coloc una torunda de alcohol y
Cada tubo fue rotulado con los datos del se ejerce presin para acelerar la coagulacin
paciente y fecha. Para seleccionar el sitio de y evitar que salga sangre. Se coloc la
la puncin se ubica el brazo en la fosa proteccin de la aguja y se desech en corto
antecubital (parte anterior del brazo, frente y punzantes, se coloc la muestra en el tubo de
bajo el codo) se identifica la vena apropiada ensayo por las paredes del mismo para evitar
para la puncin, generalmente son la vena hemlisis de la muestra.
mediana y ceflica. Se puede utilizar el dedo Finalmente, se retir la torunda y se coloc
ndice para sentir las pulsaciones de la vena. una curita, se desech en el basurero de
desechos comunes, y la jeringa en corto
punzantes.
Glucosa
Amuestra
C = 100 x [mg/dl] Las muestras se incubaron a 37C por 5
ASTD
minutos en bao mara. Despus de midi la
Colesterol absorbancia a 546nm de longitud en el
La determinacin de colesterol se realiz espectrofotmetro, el cual se calibr con agua
mediante el mtodo CHOD-PAP una prueba destilada y con el blanco de reactivo para para
eliminar cualquier medida del RGT en las Blanco Estndar M1 M2
muestras. RGT 1000 l 1000 l 1000 l 1000 l
cido rico
RGT-R1 (Reactivo enzimtico 1):
Buffer fosfato (pH 7) [120 mmol/L]; salicilato La determinacin de cido rico se realiz
sdico [60 mmol/L]; nitroprusiato sdico [3,4
mediante el mtodo PAP, un anlisis
mmol/L]; EDTA [1 mmol/L]
enzimtico colorimtrico por cido rico con
RGT-R2 (Reactivo enzimtico 2): factor aclarante de lpidos (LCF) que permite
Buffer fosfato (pH<13) [120 mmol/L]; minimizar las interferencias debidas a la
Hipoclorito [0,6 g/L] lipemia. Se determin el cido ric por
reaccin con uricasa. El perxido de
STD-CAL (Reactivo estndar): Urea [80 hidrgeno formado reacciona por la accin
mg/dl o 13,3 mmol/L].
cataltica de la peroxidasa con cido 3,5-
dicloro-2-hiroxibenzenesulfnico (DCHBS) y
Tabla 5. Urea- Cantidad de reactivos y suero 4-aminofenazona (PAP) para producir un
Blanco Estndar M1 M2
complejo rojo-violeta de quinoneimina como
RGT1/ indicador.
1000 l 1000 l 1000 l 1000 l
Enz
Se extrajeron 5 ml de sangre de cada paciente.
RGT2 1000 l 1000 l 1000 l 1000 l
Para la obtencin del suero de la muestra se
STD - 10 l - - centrifug a 5000 rpm por 5 minutos.
Suero 1 - - 10 l -
De acuerdo al inserto proporcionado para el
Suero 2 - - - 10 l anlisis de glucosa, se emplearon 4 tubos de
ensayo (blanco, reactivo, M1, M2) para los
correspondientes anlisis (Tabla 6).
Las muestras se incubaron a 37C por 5
minutos en bao mara, despus de esto se El KIT utilizado contiene los siguientes
coloc a cada uno de los tubos el RGT2 y se reactivos:
incub por 3 minutos.
RGT (Reactivo de trabajo): Buffer
Despus de midi la absorbancia a 578 nm de fosfato (pH 7) [50 mmol/L], 4-aminofenazona
longitud en el espectrofotmetro, el cual se [0.3 mmol/L], DCHBS [4 mmol/L], uricasa
calibr con agua destilada y con el blanco de [>200U/L], peroxidasa [>1KU/L].
reactivo para para eliminar cualquier medida STD (Reactivo estndar): rido rico [8
del RGT en las muestras. mg/dL o 476 mmol/L].
Se calibr con otro blanco debido, a que el Tabla 6. cido rico - Cantidad de reactivos y suero
Blanco Estndar M1 M2
tubo con el que realizo el pipeteo, pudo haber
contenido otra sustancia desconocida lo cual RGT 1000 l 1000 l 1000 l 1000 l
alter la solucin enzimtica y alter la STD - 20 l - -
calibracin con el blanco, pero los resultados
Suero
se mantuvieron en los rangos como se 1
- - 20 l -
indicar en la siguiente seccin.
Suero
- - - 20 l
Se calcul la concentracin de urea mediante 2
la siguiente frmula:
Las muestras se incubaron a 37C por 5 Tabla 8. Absorbancia y concentracin de colesterol en
sangre.
minutos en bao mara. Despus de midi la
absorbancia a 546nm de longitud en el Absorbancia Concentracin
espectrofotmetro, el cual se calibr con agua [mg/dL]
STD 0,185 -
destilada y con el blanco de reactivo para para
Muestra 1 0,126 136,21
eliminar cualquier medida del RGT en las
muestras. Muestra 2 0,497 537,30
Anlisis de Colesterol
Valores normales: 10-50 mg/dl