UNIVERSIDADE FEDERAL DOS VALES DO JEQUITINHONHA E

MUCURI
UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLNDIA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM BIOCOMBUSTVEIS

A NOVEL ALPHAPROTEOBACTERIAL ECTOSYMBIONT PROMOTES THE

GROWTH OF THE HYDROCARBON-RICH GREEN ALGA BOTRYOCOCCUS
BRAUNII
Uma nova alfaproteobactria ectosimbionte promove o crescimento da alga verde
botryococcus braunii rica em hidrocarbonetos

Yuuhiko Tanabe, Yusuke Okazaki, Masaki Yoshida, Hiroshi Matsuura, Atsushi Kai,
Takashi Shiratori, Ken-ichiro Ishida, Shin-ichi Nakano & Makoto M. Watanabe

Revista Scientific Reports, abril 2015. Qualis A1 em Biotecnologia. Fator de impacto

4.847

RESENHA
Botryococcus braunii uma alga verde considerada uma matria-prima
promissora para a produo comercial de biocombustveis devido sua capacidade em
acumular uma grande quantidade de hidrocarbonetos lquidos (at 75% do peso de suas
clulas secas) dentro da matriz da colnia. No entanto, esta microalga possui uma baixa
produtividade de biomassa, o que inviabiliza seu uso para produo de biocombustveis.
Do ponto de vista biolgico, dois grandes desafios devem ser superados antes que a
produo comercial de biocombustveis de algas se torne vivel. Primeiro, a
produtividade do leo de B. braunii menor que a de outras espcies de microalgas, e em
segundo lugar, o cultivo em grande escala de B. braunii no foi bem-sucedido. Estudos
envolvendo a microalga B. braunii mostraram que estes micro-organismos so
encontrados na natureza em associaes com bactrias, que contribuem substancialmente
para o crescimento de B. braunii. As bactrias podem hospedar o interior das clulas ou
ento ligar-se s paredes celulares das microalgas. A relao entre estes diferentes micro-
organismos simbitica, onde as algas servem como fonte de carbono para as bactrias
heterotrficas e em troca, estas fornecem micronutrientes essenciais como a vitamina B12
(cobalamina) que nenhuma espcie de algas capaz de sintetizar. No presente artigo, foi
descrita uma nova alfaproteobactria ectosimbionte (BOTRYCO-2) isolada de um cultivo
no axnico de B. braunii. A microalga foi isolada de uma pequena lagoa em Myanmar,
sia. A caracterstica marcante desta cepa a presena de numerosas bactrias
epibioticas. A identificao da bactria BOTRYCO-2 foi realizada atravs de PCR e
sequenciamento de rDNA 16S. Esta bactria pertence classe de bactrias gram-
negativas Alphaproteobacteria do filo Proteobacteria, mas nenhuma espcie mencionada
com identidade de sequncia > 90% de BOTRYCO-2 foi encontrada. As anlises
tambm sugeriram uma baixa afinidade filogentica de BOTRYCO-2 s famlias
Hyphomonadaceae e Caulobacterales. Morfolgicamente, BOTRYCO-2 uma bactria
em forma de haste que normalmente de 1,5-2 m de comprimento. Com base na sua
estreita associao com a forma de algas e por possuir forma de haste, foi sugerido pelos
autores o nome 'Candidatus Phycosocius bacilliformis' para BOTRYCO-2 [do Latin
Phyco (Algae), socius (associado) e bacilliformis (em forma de haste)]. Por meio da
observao microscpica e da experincia de CARD-FISH para a co-cultura de B. braunii
e BOTRYCO-2 (Ba10- / BOTRYCO-2) foi possvel verificar que a bactria ou est associada
matriz extracelular de B. braunii ou possui vida livre no meio lquido. A hiptese de
que BOTRYCO-2 se alimenta de componentes da matriz extracelular de B. braunii.
provvel que estes sejam polissacardeos, hidrocarbonetos de cadeia longa
(botryococcenos) ou seus derivados. Uma vez que BOTRYCO-2 encontrado no-ligado
e ligado ao seu hospedeiro, pode-se dizer que o BOTRYCO-2 capaz de utilizar carbonos
difundidos e associados a clulas. A foto TEM de uma seo ultrafina da colnia de algas
de Ba10- / BOTRYCO-2 mostrou que o BOTRYCO-2 associado colnia estava ligado
superfcie externa da matriz extracelular de B. braunii. Tambm foi possvel notar a
presena de um nico flagelo (aproximadamente 4 m) na regio posterior da clula
bacteriana. Para investigar a possvel influncia de BOTRYCO-2 sobre o crescimento de
B. braunii Ba10-, realizaram-se experimentos de crescimento comparativo. Para tanto,
foram avaliados o crescimento de Ba10-, Ba10- / BOTRYCO-2 e BOTRYCO-2. As culturas
foram analisadas durante 35 dias de crescimento e a avaliao celular foi realizado atravs
de microscopia ptica. As culturas de Ba10-/BOTRYCO-2 apresentaram o mesmo
comportamento do que as culturas de Ba10- , porm com o crescimento mais elevado
(aumento aproximadamente de 1,8 vezes na biomassa), indicando o efeito positivo de
BOTRYCO-2 no crescimento de Ba10-. Uma experincia de inoculao usando a estirpe
axnica B. braunii (BOT-22), uma cepa estreitamente relacionada com Ba10,
apresentaram efeito diferente. Neste experimento, a concentrao final de biomassa de
BOT-22 com BOTRYCO-2 foi aproximadamente 1,4 vezes maior que a de sem
BOTRYCO-2. O teor de hidrocarbonetos de Ba10- com BOTRYCO-2 foi
aproximadamente 1,5 vezes maior que o sem, enquanto que o teor de hidrocarbonetos de
BOT-22 era semelhante, independentemente da presena de BOTRYCO-2. A obteno
de uma cultura axnica de algas muitas vezes dispendiosa e onerosa, uma vez que h a
necessidade da aplicao de mtodos fsicos ou qumicos como coquetis de antibiticos
para a purificao. Neste sentido, a relao simbitica entre algas e bactrias seria uma
alternativa para a diminuio nos gastos de purificao dos cultivos alm do aumento da
quantidade de biomassa para a produo de biocombustveis. Contudo, ainda so
necessrios mais estudos com o intuito de isolar e caracterizar novos micro-organismos
que possuam relao simbitica com microalgas.

Discente: Marina Lemos Sartori

Disciplina: Seminrios II
Data de entrega: 18/10/2017
Professores: Llian de Arajo Pantoja e Ronnie Von dos Santos Veloso