Uso de las micropipetas

Introduccin
En las reacciones bioqumicas se necesitan volmenes pequeos y precisos, estos volmenes se
miden con un instrumento llamado micropipeta.

En la imagen anterior se muestran las partes de la micropipeta.

P1000 es til para volmenes de 200 hasta 1000 L

P200 es til para volmenes de 20 hasta 200 L.
P20 es til para volmenes de 0.5 hasta 20 L.

Para poder utilizar las micropipetas se deben tomar en cuenta ciertas medidas de seguridad

1. No se debe tratar de tomar un volumen mayor para el cual la micropipeta est hecha.
2. Para utilizar la micropipeta se deben tener puntas desechables, y estas puntas deben
ser las apropiadas para el tipo de micropipeta que se est utilizando; por lo general las
puntas azules son para P1000, las puntas amarillas para P200 y para las P20 pueden ser
las amarillas o blancas.
3. Al momento de poner la punta se debe asegurar que esta est bien colocada, de lo
contrario la medicin ser erronea
4. No se deben utilizar lquidos que ataquen al polipropileno
5. No se deben utilizar lquidos que emitan vapores al momento de hacer la medicin
6. La temperatura de los lquidos debe estar entre los 15 y 40 C.
Manejo de la micropipeta

Llenado de la micropipeta

Colocar el pulgar sobre el mando o mbolo de pipeteado.

Oprimir el mbolo. Cuando el mbolo se presiona sentir un punto de resistencia. ste es el

primer alto o "tope". Si contina presionando encontrar un punto donde el mbolo ya no
se mueve hacia abajo, este corresponde al segundo alto o "tope".

Oprimir el mbolo hasta el primer tope y colocar la punta dentro del lquido hasta una
profundidad de 2 a 3 mm. De una manera lenta y controlada, disminuya la presin del mbolo
para permitir que se desplace hacia arriba. No suelte el mbolo abruptamente, al permitirlo
causar que el lquido pueda salpicar dentro de la punta produciendo volmenes inexactos y
generando contaminacin de la pipeta. Una vez el mbolo se haya desplazado hasta arriba
mantenga la micropipeta en el lquido durante un segundo, esto evita que se aspire aire en la
parte final.

Expulsin de la muestra

Llevar la micropipeta al envase en el cul quiere aadir el lquido. Se apoya la punta en la pared
del recipiente sin evitar la salida de la muestra. Oprima el mbolo hasta el primer tope y luego
hasta el segundo tope. Haga este procedimiento a una velocidad moderada, hacerlo muy rpido
har que queden gotas de muestra en la punta. Si observa cuidadosamente, entonces notar
que al oprimir hasta el segundo alto se expele todo el lquido de la punta.

Lo anterior es cierto para la mayora de soluciones acuosas, excepto para las soluciones de alta
viscosidad. Para solventes orgnicos o para soluciones conteniendo grandes cantidades de
protena (plasma y suero), es difcil sacar todo el lquido de la punta. En estos casos, es mejor
pipetear una vez la solucin expelindola y luego llevando hacia arriba el lquido a medir en un
segundo tiempo. Para soluciones de alta viscosidad el llenado y la expulsin deben ser ms
lentas.

Si es usada inadecuadamente, la micropipeta transferir volmenes inexactos.

La micropipeta puede perder su calibracin. Comprobar la calibracin de la pipeta es un

procedimiento simple que puede ahorrar tiempo considerable, energa, y reactivos. En esta
prctica aprender a usar la micropipeta de tamaos diversos medir su exactitud, precisin y
calibracin.

Tipos de micropipetas
En esta prctica se utilizaron tres tipos de micropipeta, P100, P200, P20

Objetivo
Conocer las partes y el funcionamiento de las micropipetas; adquirir destreza en la utilizacin
de pipetas para la medicin de volmenes entre 10 y 1000 L.
Materiales
3 juegos de micropipetas P1000, P200 y P20
Puntas de micropipeta
Balanza
Portamuestra