MEDIO DE CULTIVO

Bacteriologa General
__ Catlogo 1305

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AGAR ECD
(Escherichia coli directo)
USO Medio de cultivo selectivo para aislamiento de enterobacterias y en especial para la deteccin rpida de Escherichia coli por
fluorescencia con lmpara de luz ultravioleta y su confirmacin con la prueba del indol, a partir de diversas muestras.

PRINCIPIO
La peptona de casena proporciona los nutrientes necesarios para el crecimiento. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio
osmtico y los fosfatos ayudan a controlar el pH. Las sales biliares inhiben la flora Gram positiva. Escherichia coli tiene la capacidad de
utilizar el triptofano, formando como producto final el indol y su deteccin es una prueba adicional. El sustrato 4-metilumbeliferil--D-
glucornido (MUG), es separado por la enzima -D-glucuronidasa de Escherichia coli dando lugar a la formacin de 4-
metilumbeliferona, que se caracteriza por ser fluorescente al irradiar con lmpara de luz UV de 366 de 366 nm. Las cepas de
Escherichia coli tienen como caracterstica especfica producir la enzima Beta-D-glucuronidasa, contrariamente a esto, Escherichia coli
O157 : H7 no puede formar esta enzima y al iluminar con una lmpara de luz UV de 366 nm, lo que permite su identificacin con
facilidad.
Sembrar la muestra en estudio en la superficie del medio de cultivo por estra cruzada. Incubar 18 - 24 h a 35C. De las
colonias desarrolladas, las de Escherichia coli se detectan por la fluorescencia azul claro que se produce al iluminarlas con una lmpara
de luz ultravioleta de 366 nm. Para confirmar realizar la prueba del indol, agregando sobre las colonias 1 o 2 gotas de reactivo de
Kovacs, una coloracin roja del reactivo despus de 2 a 10 segundos se interpreta como reaccin positiva.

FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA

Agar
Cloruro de sodio
Fosfato dipotsico
Fosfato monopotsico
Lactosa
pH 7.0 0.2

PREPARACION
Rehidratar 53.1 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el
punto de ebullicin durante 1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121C (15 lbs de presin) durante 15
minutos. Enfriar aproximadamente a 45C. Vaciar en cajas de Petri estriles. Conservar en refrigeracin de 2 a 8C.

CONTROL DE ACTIVIDAD
MICROORGANISMO
Escherichia coli
Escherichia coli O157 : H7
Enterobacter cloacae
Proteus vulgaris
Staphylococcus aureus

BIBLIOGRAFIA
Joseph Md State. Dept. Health. Procedures, 1960
Quality Assurance for Commercially prepared microbiological culture media-second edition; approved Standard. NCCLS M-22 A2 Vol.
16 No. 16 pp 8; 1996
Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Sexta Edicin pp 192; 1994

PRESENTACION
No. Cat. 1305
1305-E
1305-A

DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3