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2do. Ao de Medicina
LIMA-PER
2016
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HISTOLOGA GENERAL
OBJETIVOS
Conocer la relacin matemtica entre las unidades de medida usadas para
los especmenes histolgicos.
Nombrar los instrumentos y tcnicas usadas para preparar y estudiar los
especmenes histolgicos y conocer sus ventajas y limitaciones.
Conocer y comparar los pasos bsicos para la preparacin de especmenes
para la microscopia de luz y electrnica.
Seleccionar mtodos adecuados para demostrar caractersticas histolgicas
especficas y sustancias presentes en clulas y tejidos.
Describir los principios bsicos de la histoqumica.
Conocer las sustancias de inters biolgico que pueden ser localizadas
mediante tcnicas histoqumicas.
Nombrar las clases de tcnicas histoqumicas y describir las ventajas,
desventajas y limitaciones de cada una.
Nombrar y describir mtodos apropiados para el aislamiento e identificacin
de protenas y secuencias especficas de cidos nucleicos de clulas y
tejidos.
TCNICA HISTOLGICA
Se entiende por tcnica histolgica el conjunto de procedimientos para el estudio
microscpico de las clulas, tejidos u rganos.
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COLORACIN INTRAVITAL.- Consiste en la inyeccin de colorantes vitales en el
animal vivo. Por ejemplo: Para estudiar los histiocitos** se inyecta a un
animal (conejo o rata) por va intraperitoneal o endovenosa una solucin al 1% de
azul de tripn (coloide electronegativo). Luego de la tercera inyeccin (4 cm 3 cada
2 das) se
sacrifica al animal, tomndose muestras de diferentes rganos (hgado, bazo,
mdula sea, ganglios, pulmones, peritoneo, etc.). En los cortes histolgicos se
observan unos elementos de color azul: son los histiocitos que han incorporado a
su citoplasma la sustancia inyectada, cuando el animal estuvo vivo.
Ej.: Coloque una gota de sangre recin extrada y aada una gota de solucin
verde de Jano; cubra con una laminilla (cubreobjetos). Se observar en
el citoplasma de los leucocitos las mitocondrias teidas de color verde.
Este procedimiento de estudio histolgico requiere la muerte previa del ser vivo.
Diversos son los mtodos de estudio, aqu slo se anotar el de mayor uso en los
laboratorios. Comprende:
Fijacin,
Corte
Coloracin.
2.1.- Fijacin:
La fijacin puede durar minutos, horas o das; vara con relacin al fijador usado y
al tamao de las piezas. Transcurrido el tiempo de fijacin, se efecta el
lavado de las piezas en agua1 a fin de eliminar los restos del fijador.
FIJADORES.- Reciben este nombre, diversas sustancias que actuando sobre los
prtidos celulares permiten la estabilizacin de sus estructuras. Por lo general los
fijadores son sustancias qumicas que actan precipitando las grandes molculas
proteicas que constituyen la principal parte de los tejidos.
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Cuando se utiliza el fijador de Bouin, las piezas pasan directamente al alcohol (70).
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Fijadores simples.- Son soluciones acuosas (la mayora) de una sola sustancia.
Se anotar algunos de ellos:
Bicromato de potasio8.5 g
Bicloruro de mercurio...5.0 g SOLUCIN STOCK
Sulfato de sodio..1.0 g ESTABLE
Agua destilada.100 cm3
Los cortes de los rganos que han sido fijados con mezclas que contengan
mercurio deben ser tratados, antes de ser colorados, con una solucin
yodoyodurada y luego por hiposulfito de sodio, con el fin de eliminar el precipitado
de mercurio.
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El Bouin es un excelente fijador que posee un alto grado de penetracin, por lo
cual su uso est muy extendido en los laboratorios de Histologa.
Su composicin es la siguiente:
Alcohol absoluto........................ 60 cm3
Cloroformo.................................. 30 cm3
cido actico glacial.................. 10 cm3
2.2.- Corte:
Los cortes de los rganos a estudiar y deben ser de pocas micras de espesor y
grosor uniforme. Con tal fin se emplean tres mtodos: inclusin en parafina,
inclusin en celoidina y mtodo de congelacin.
Deshidratacin
Impregnacin por un disolvente de la parafina
Penetracin de la parafina
Formacin del bloque
Antes de colocar las piezas en parafina lquida, se les hace pasar por una mezcla
de xilol-parafina.
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INCLUSIN EN CELOIDINA.- Las fases son las mismas que las de las descritas en el
mtodo anterior con la diferencia que en lugar de parafina se emplea celoidina y,
como disolvente de sta, se usa una mezcla de alcohol-ter.
2.3.- Coloracin
e) Viraje.- Se llevan las lminas a un recipiente con agua corriente alcalinizada con
carbonato de litio.
f) Coloracin con Eosina.- Se hace actuar una solucin acuosa de eosina por
espacio de 1 2 minutos; luego se lava con agua para sustraer el exceso de
colorante.
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diferentes elementos acidfilos del preparado, adquieren el tono adecuado.
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PRCTICA: CITOLOGA
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ERGASTOPLASMA
Corte de pncreas.- Preparado N67
Coloracin: H-E
En la zona basal del citoplasma de las clulas que conforman los adenmeros del
pncreas exocrino, se observa el ergastoplasma, teido de color azul oscuro por la
hematoxilina. Qumicamente est constituido por RNA.
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COMPLEJO DE GOLGI
Corte de epiddimo de rata.- Preparado N3
Coloracin: mtodo de Aoyama (impregnacin con nitrato de plata) - hematoxilina
(ncleos).
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Glucgeno
Corte de hgado de rata.- Preparado especial
Coloracin: Carmn de Best - hematoxilina (ncleos).
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MITOSIS
Corte raz (cofia) de cebolla.- Preparado N2
Coloracin: H-E
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OBJETIVOS
Liste los cuatro tipos bsicos de tejido.
Explique las caractersticas que distinguen los tejidos epiteliales de los otros
tipos bsicos de tejido.
Liste los tipos de tejidos epiteliales y de ejemplos de los lugares donde se
pueden encontrar.
Describa las funciones de cada tipo epitelial y relacinelas con su
estructura.
Describa las funciones de los tipos de clulas epiteliales e indique donde se
pueden encontrar.
Reconozca los epitelios en imgenes obtenidas mediante un microscopio e
indique su funcin a partir de su estructura y localizacin.
Liste los criterios que se utilizan para clasificar las glndulas.
Liste las clases de glndulas en los humanos e indique donde se pueden
encontrar.
Reconozca las glndulas en imgenes obtenidas mediante un microscopio e
indique los sitios donde se pueden encontrar.
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Las clulas epiteliales que delimitan los folculos tiroides estn dispuestas en una
sola capa y presentan ncleo redondeado.
Los folculos tiroideos contienen una sustancia llamada coloide, la que aparece
teida de color rojo.
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EPITELIO MONOESTRATIFICADO CILNDRICO
Corte transversal de yeyuno-leon.- Preparado N56
Coloracin: H-E
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EPITELIO PSEUDOESTRATIFICADO
Corte transversal de trquea.- Preparado N71
Coloracin: H-E
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Epitelios poliestratificados
Las clulas que forman este epitelio se encuentran dispuestas en varias capas
superpuestas y ordenadas segn su forma:
Las de la capa media, son cbicas y polidricas, las que van aplanndose a
medida que se acercan a la superficie.
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Localizacin.- El epitelio poliestratificado plano no cornificado se encuentra en: la
porcin supradiafragmtica del tubo digestivo (boca, orofaringe, esfago), vagina,
uretra femenina, fosa navicular de la uretra masculina, laringe (cuerdas vocales
inferiores).
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EPITELIO POLIMORFO
Corte transversal de vejiga. Preparado N77
Coloracin: H-E
Las clulas de este epitelio estn dispuestas en varios estratos superpuestos pero
no guardan esa ordenacin tan manifiesta que se ha visto en el
epitelio poliestratificado plano.
Las clulas del estrato profundo y medio ostentan sus ncleos de forma
redondeada y ovoide; son clulas cbicas, polidricas y "en raqueta".
Las clulas de capa superficial conservan la forma polidrica; sus ncleos tienden
a ser esfricos. La forma de estas clulas depende del estado de distensin o
de retraccin del rgano.
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EPITELIO POLIESTRATIFICADO CILNDRICO
Corte de pene. Preparado N84
Coloracin: H-E
Las clulas superficiales son cilndricas, pueden o no presentar cilios, las dems
clulas son cbicas.
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TRANSICIN DE EPITELIOS
Corte longitudinal de cardias.- Preparado N52
Coloracin: H-E
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PRCTICA: TEJIDO CONJUNTIVO
OBJETIVOS
Liste las caractersticas del tejido conjuntivo que le distinguen de los otros
tejidos bsicos
Conozca la composicin bioqumica y los sitios de sntesis de los
componente de la matriz extracelular y cmo se asocian entre s.
Conozca la estructura y funcin de los tipos celulares encontrados en el
tejido conjuntivo.
Compare los tipos de tejido conjuntivo en trminos de tipos, cantidades y
disposicin de sus componentes.
Relacione la composicin de cada tipo de tejido conjuntivo a su funcin
especfica.
Mencione los sitios del cuerpo donde se encuentra cada tipo de tejido
conjuntivo y relacinelo a su funcin.
reconozca los tipos de clulas y tejidos del tejido conjuntivo en imgenes
obtenidas mediante un microscopio e indique su funcin
1.2.- Histiocitos o macrfagos.- Son tan numerosos como los fibroblastos. Sus
ncleos aparecen teidos un poco ms oscuros que el de los fibroblastos.
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La grasa se colorea con Sudan III, Sudan IV o Rojo Escarlata, Sudan negro B y
otros.
El cido perydico es un oxidante enrgico que al actuar sobre las uniones 1,2
glicol (-CHOH-CHOH) y alfa aminoalcohol (-CHOH-CHNH2) de algunos
carbohidratos, forman grupos aldehdos los que son evidenciados en las secciones
de los tejidos, mediante el reactivo de Schiff (reactivo que identifica grupos
reductores).
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CLULAS Y FIBRAS DEL TEJIDO CONJUNTIVO
CLULAS Y FIBRAS
Extensin de mesenterio de rana.- Preparado N9
Coloracin: Fucsina-resorcina, fucsina cida y hematoxilina.
Clulas cebadas. Destacan por su gran tamao y por los grnulos gruesos, que
llenan el citoplasma.
Las fibras colgenas aparecen formando haces, tindose de color rojo por la
fucsina cida.
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HISTIOCITOS O MACRFAGOS
Corte de hgado y bazo. Preparado N65
Coloracin intravital con azul de trypan.
Una rata recibi una inyeccin interdiaria de una solucin de azul de trypan (1%)
por va intraperitoneal, durante 6 das. Luego fue sacrificada.
Los cortes se colorearon con Kernechtrot (Nuclear Fast Red) que tie al ncleo de
color rojo.
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MACRFAGOS
Corte de ganglio mediastinal antractico
Coloracin: H-E
Los macrfagos se ven de color negro debido a que stos han fagocitado las
partculas de carbn que el sujeto inhal en vida.
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CLULAS PLASMTICAS
Corte de cuello uterino.- Preparado especial
Coloracin con Gallocianina
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FIBRAS RETICULARES
Corte de hgado humano. Preparado N64
Impregnacin argntica.
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TEJIDO MESENQUIMAL
Corte de embrin de cerdo. Preparado N27
Coloracin: H-E
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Tipos de tejidos conjuntivos
TEJIDO MUCOIDE
Corte de cordn umbilical.- Preparado N10
Coloracin: H-E
El nmero y grosor de las fibras colgenas del cordn umbilical varan segn el
tiempo de gestacin.
Localizacin.- Cordn umbilical, humor vtreo del ojo. En el diente adulto (pulpa),
se encuentra un tejido similar al tejido conjuntivo mucoso.
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Se observan gran nmero de vasos sanguneos; stos estn revestidos por una
capa de clulas planas (endotelio); en su luz se ven hemates.
TEJIDO CONJUNTIVO DENSO.- Los elementos son los mismos que en el tejido
conjuntivo laxo, pero las fibras colgenas predominan ostensiblemente sobre los
dems elementos.
Vasos sanguneos.
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Localizacin.- dermis reticular o profunda. Corion de la mucosa de la regin
dorsal de la lengua; periostio, pericondrio, cpsula de algunos rganos (bazo,
testculo).
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TEJIDO CONJUNTIVO DENSO, DISPUESTO REGULARMENTE.
Corte longitudinal de tendn.- Preparado N11
Coloracin: H-E
Las clulas son una variedad de fibroblastos pero su forma es tan diferente que se
les da el nombre de clulas tendinosas, se disponen en series lineales entre los
haces de fibras colgenas.
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TEJIDO RETICULAR
Corte de ganglio linftico.- Preparado N 34
Impregnacin argntica
Las clulas reticulares (no se distinguen muy bien), son de forma estrellada con
finas prolongaciones que se enlazan entre s, formando una malla con las
fibras argirfilas.
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TEJIDO CONJUNTIVO ADIPOSO
Corte de piel delgada.- Preparado N 12
Coloracin: Hematoxilina- Sudn IV
Observe como la grasa que est ocupando casi la totalidad del citoplasma,
aparece de color rojo.
Localizacin.- Debajo de la piel con excepcin de la del pene y prpados;
alrededor de los riones y suprarrenales; epipln, mesenterio, mama, en la planta
del pie, en las manos y en las nalgas; en la cavidad orbitaria, en la mejilla.
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PRCTICA: TEJIDO CARTILAGINOSO Y SEO
OBJETIVOS
Conozca la similitudes y diferencias entre los tres tipo de tejido cartilaginoso
y relacinelos a su funcin.
Conozca los pasos de la histognesis y del crecimiento del tejido
cartilaginoso.
Relacione la ultraestructura del condrocito a la sntesis y mantenimiento de
la matriz extracelular.
Reconozca los tipos de cartlago en imgenes obtenidas mediante un
microscopio e identifique sus componentes.
CARTLAGO HIALINO
Corte de trquea de adulto.- Preparado N71
Coloracin: H-E
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CARTLAGO ELSTICO
Corte pabelln de oreja de perro.- Preparado N13
Coloracin: fucsina-resorcina-picrofucsina.
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CARTLAGO FIBROSO.
Corte de menisco intraarticular de rodilla.- Preparado N31
Coloracin: H-E
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TEJIDO SEO
OBJETIVOS
Describa el tejido seo como un tipo de tejido conjuntivo, en trminos de sus
clulas, fibras y matriz extracelular.
Compare las clulas del tejido seo en trminos de su origen, estructura y
funciones principales.
Relacione las propiedades fsicas del tejido seo con sus componentes
tisulares especficos.
Liste los tipos de tejido seo y nombre los sitios donde se le puede
encontrar.
Compare los dos procesos de histognesis en trminos de origen del tejido
embrionario, pasos intermedios, estructura del tejido maduro, y localizacin
en el cuerpo.
Compare los pasos de la histognesis sea con los de la reparacin de una
fractura.
Conozca las alteraciones de la estructura tisular que ocurren durante el
crecimiento y la remodelacin sea.
Identifique los tipos de huesos, los tipos celulares y las estructuras del tejido
seo en imgenes obtenidas mediante un microscopio.
Liste los tipos de articulaciones y comprelas en trminos de estructura,
movilidad y localizacin.
HUESO COMPACTO
Corte transversal de difisis de fmur.- Preparado N14
(Las secciones fueron depositadas en un Petri conteniendo violeta de Dalia).
Cada osten est limitado por una lnea de cemento (estrato no fibrilar).
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HUESO COMPACTO
Corte longitudinal de difisis de fmur.- Preparado N15
Las secciones fueron depositadas en un Petri contenido violeta de Dalia.
Los osteoplastos, siguen una orientacin paralela a los conductos de Havers. Los
conductos calcforos parten de estas cavidades y tienen un trayecto
ondulado, anastomosndose con los conductos vecino, pertenecientes a un mismo
sistema de Havers.
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los osteocitos. La sustancia fundamental orgnica se presenta homognea y teida
de color rojo.
En el borde interno del canal medular (en algunos preparados) se notan unas
excavaciones o depresiones en las cuales se encuentran unas clulas
multinucleadas de gran tamao; corresponden a las lagunas de Howship y a los
osteoclastos, respectivamente. Rodeando al hueso, y slo en una pequea zona,
se ve el periostio.
NOTA.- Todos los huesos del organismo (largos, planos y cortos) contienen tejido
seo compacto y esponjoso.
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PRCTICA: OSIFICACIN
OSIFICACIN INTRAMEMBRANOSA
Corte de hueso plano de crneo de feto humano.- Preparado N18
Coloracin: H-E
Algunas clulas del tejido mesenquimal se han diferenciado transformndose en
osteoblastos. Estas clulas son identificadas fcilmente por la gran basfila de su
citoplasma (rico en RNA). Las trabculas seas representan la sustancia
osteoide calcificada. Se les observan de color azul oscuro teidas por la
hematoxilina. La sustancia osteoide, aparece como una fina formacin acidfila
adyacente a la superficie de las trabculas seas. En algunos preparados puede
observarse lagunas de Howship y osteoclastos. Las lagunas de Howship
aparecen como excavaciones en los bordes de las trabculas seas. Los
osteoclastos son clulas multinucleadas que se les encuentra en las lagunas de
Howship.
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OSIFICACIN ENDOCONDRAL
Corte longitudinal de fmur de feto humano.- Preparado N17
Coloracin: H-E
En este preparado, adems de la osificacin endocondral, observaremos
nuevamente la osificacin intramembranosa a nivel de la futura difisis. Recuerde
que la mayor parte de los huesos del esqueleto se forman mediante ambos tipos
de osificacin.
Osificacin endocondral
Recorriendo el preparado desde un extremo hacia el centro, se observa las
siguientes zonas.
Zona del cartlago ordinario.- Presenta los caracteres del cartlago normal,
notndose gran aumento del nmero de condrocitos.
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Zona del cartlago seriado.- Los condrocitos se agrupan y se disponen formando
hileras en series lineales, paralelas entre s.
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Zona del cartlago hipertrfico o vesiculoso.- Los condroplastos se han
ensanchado, formndose verdaderas vesculas.
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Trabculas directrices de osificacin.- Representan restos de la sustancia
fundamental calcificada. Aparecen teidas de color azul-violeta oscuro
caracterstico. Los osteoblastos provenientes del brote conjuntivo-vascular, se
adosan a los bordes de estas trabculas que comienzan a depositar
sustancia fundamental orgnica sea (osteoide). La sustancia osteoide se
impregna de sales de calcio, formndose as las trabculas seas. En algunos
preparados se observa lagunas de Howship y osteoclastos. Entre las trabculas
directrices se distinguen los vasos osificantes numerosas clulas jvenes
hematopoyticas constituyentes de la mdula sea primitiva.
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Osificacin intramembranosa
La sustancia osteoide aparece como una capa fina y poco teida (rosa plido) que
se observa en los bordes de las trabculas seas.
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PRCTICA: TEJIDO MUSCULAR
OBJETIVOS
Conozca los tres tipos principales de tejido muscular y comprelos con su
estructura, funcin y localizacin.
Conozca las relaciones existentes entre los fascculos, fibras, miofibrillas y
miofilamentos.
Explique el rol de los tbulos T y del retculo sarcoplsmico en la funcin del
msculo estriado.
Describa la estimulacin muscular, contraccin y relajacin a nivel
molecular, celular y tisular.
Reconozca los tipos de tejido muscular presentes en imgenes obtenidas
mediante un microscopio y describa su funcin.
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El escaso tejido conjuntivo situado entre las fibras musculares, a las que separa y
une, para formar los haces musculares, recibe el nombre de endomisio.
Rodeando a los haces musculares est el perimisio, constituido tambin por tejido
conjuntivo.
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TEJIDO MUSCULAR CARDACO
Corte de corazn.- Preparado N20
Coloracin: H-E
En las secciones longitudinales se observa que las sarcmeras con sus discos I y
A, no aparecen claramente delimitadas, como en las fibras musculares
esquelticas.
Los ncleos son grandes, ovalados, tendiendo a adoptar la forma cuadrangular; su
posicin es central.
Trate de localizar los discos intercalares, que son estructuras tpicas del
miocardio.
En las fibras musculares se observa tejido conjuntivo laxo intersticial escaso y con
numerosos capilares sanguneos.
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Coloraciones especiales
Se proyectaran microfotografas de preparados teidos con coloraciones
especiales, tales como Mallory, Van Gieson y otras.
Coloracin de Van Gieson.- Se utiliza para teir el colgeno. Las soluciones que
se emplean son:
El verde metilo tie de color verde el DNA y la pironina de color ladrillo el RNA.
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OBJETIVOS
Liste las funciones de la piel y relacinelas a su estructura.
Nombre las dos capas principales de la piel. Para cada una indique el tipo
bsico de tejido que predomina, describa la disposicin y caractersticas
distintivas de las capas que las constituyen.
Nombre cuatro los cuatro tipos principales de la epidermis, y describa su
estructura, funcin y localizacin.
Indique los pasos de la renovacin celular y de queratinizacin de la
epidermis.
Compare y contraste la piel delgada y la piel gruesa.
Describa la sntesis y recambio de los grnulos de melanina.
Identifique y describa los componentes del folculo piloso y de la ua.
Brevemente describa el crecimiento de la ua y el pelo.
Describa la circulacin sangunea y la inervacin de la piel en trminos de
estructura, funcin y localizacin.
Nombre y compare los tres tipos de glndulas de la piel en trminos de
estructura, funcin y localizacin.
Identifique los tipos de piel, tipos de clulas y glndulas en imgenes
obtenidas mediante un microscopio ,
Piel gruesa
Corte de pulpejo de dedo. Preparado N41
Coloracin: H-E
Estrato basal.- Formado por una sola capa de clulas cilndricas que se
implantan perpendicularmente en la membrana basal. Se observan
frecuentemente figuras mitticas y finos grnulos de melanina.
Estrato espinoso.- Formado por varias capas de clulas polidricas; las que
presentan los llamados "puentes intercelulares" que le dan a estas clulas un
aspecto espinoso. Algunas veces se incluye al estrato basal y al espinoso en
uno solo con el nombre de estrato de Malpighi.
Estrato granuloso.- Formado por las dos o tres capas de clulas romboidales o
fusiformes; su citoplasma contiene grnulos de queratohialina.
Estrato lcido.- Constituido por clulas aplanadas. Aparece como una banda
homognea de color rojo; los ncleos han degenerado.
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Estrato crneo.- Consta de varias capas de clulas que han perdido sus ncleos
(clulas muertas) y que estn cargadas de queratina. Los espacios vacos de
forma lenticular que se observan en este estrato corresponden al lugar que
ocupaban los ncleos. Las clulas ms superficiales se descaman
constantemente, constituyendo la capa descamante.
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PIEL DELGADA
Corte de piel de abdomen. Preparado N42
Coloracin: H-E
Hipodermis
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PIEL DELGADA
Corte de cuero cabelludo. Preparado N43
Las vainas de la raz del pelo son dependencia de la epidermis y son en nmero
de dos: una interna y otra externa.
Glndulas sebceas.- Se distinguen por su color rosa claro con que se tien. El
citoplasma de las clulas granulares aparece vaco debido a que la grasa
contenida ha sido disuelta por el xilol.
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UA
Corte longitudinal de la tercera falange de un feto humano. Preparado N45
Coloracin: H-E
El lecho ungueal.- Est constituido por epitelio y corion. El epitelio est formado
por los estratos basal y espinoso de la epidermis. El corion est ricamente
vascularizado.
La matriz ungueal es la parte del lecho ungueal sobre la cual reposa la raz de la
ua. En esta zona el estrato espinoso alcanza gran desarrollo (es ms grueso).
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NDICE
Pgina
Histologa General
Tcnica histolgica 2
Citologa 7
Epitelios monoestratificados 14
Epitelios poliestratificados 19
Clulas y fibras del Tejido Conjuntivo 25
Tejidos Conjuntivos 33
Tejido Cartilaginoso 39
Tejido seo 44
Osificacin 49
Tejido muscular 58
Piel y anexos 64
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