RESPUESTAS CELULARES POST RECEPTOR.

1.1. Comunicacin Celular

El primer punto importante cuando se aborda
el estudio de la transduccin seales es la
comunicacin celular, la cual es necesaria para
regular y coordinar las distintas funciones
fisiolgicas. Las clulas se comunican por sustancias
qumicas llamadas men-sajeros primarios, los cuales,
de forma general, pueden agruparse en cuatro tipos
principales:
- Neurotransmisores.- Molculas de sealizacin
utilizadas por el Sistema Nervioso para comunicar
entre si sus distintas estructuras o comunicarse con
los rganos perifricos.
- Hormonas.- Molculas de sealizacin, formadas
por las glndulas endocrinas que regulan la casi
totalidad de las funciones fisiolgicas ejercidas por
los distintos rganos.
- Factores de Crecimiento.- Molculas de
sealizacin por lo general asociadas al control de la
proliferacin, diferenciacin y la muerte celular.
- Citoquinas.- Molculas de sealizacin
implicadas en el control de la inmunidad del
organismo frente a agentes extraos (virus,
bacterias, parsitos) o propios (cncer).

1.2. Tipos de Receptores.

Para que una molcula seal sea reconocida
por la clula diana se necesita de la presencia de una
molcula receptora que pueda modificar su actividad
biolgica al interaccionar con la seal. Las molculas
receptoras o Receptores se clasifican en dos tipos
principales, dependiendo de la naturaleza qumica del
ligando o seal. As, si la seal o Ligando es de
naturaleza liposoluble podr atravesar la membrana
plasmtica sin mucha dificultad e interaccionar con
sus receptores intracelulares. La interaccin posibilita
la activacin del receptor y la posterior regulacin de
la expresin gnica de un grupo determinado de
genes. A estos receptores se les denomina Receptores
Nucleares (ya que muchos presentan dicha
localizacin) o Receptores Intracelulares, los
cuales sern objeto de estudio en el tema 2. Por el
contrario, si la seal es de naturaleza hidrosoluble,
dado que no podr atravesar la membrana
plasmtica, necesita de la existencia de receptores
asociados a la membrana plasmtica. La activacin
del receptor por el ligando promueve, en la mayora
de los casos, la formacin de molculas
transductoras de la seal que reciben el nombre de Segundos Mensajeros. Estas
molculas son las
responsables de activar los procesos biolgicos en
las clulas diana mediante la activacin de rutas de
transduccin especficas que, en ltimo trmino,
tambin modificaran la expresin de grupos de
genes. A este tipo de receptores se les denomina
Receptores de Membrana Plasmtica, siendo
objeto de este tema su estudio as como las rutas de
transduccin generadas por ellos.
Los receptores de membrana se han agrupado
en cuatro tipos generales (Figura 1.1):
- Receptores Ionotrpicos.- La unin del
ligando cambia la conformacin del receptor de
modo que permite el flujo de un determinado ion a
travs del receptor. El movimiento inico resultante
altera el potencial elctrico de la membrana celular.
Un ejemplo lo constituye el receptor de acetilcolina
en la placa motora.
- Receptores metabotrpicos.- Tambin conocidos
como receptores asociados a protenas G o
receptores Serpentnicos. Estos receptores estn
asociados a protenas G. La unin del ligando activa
a una protena G, la cual a su vez activa o inhibe a
una determinada enzima que genera un segundo
mensajero, o bien modula la actividad de un canal
inico, causando un cambio en el potencial de
membrana. Ejemplos de seales que actan a travs
de este tipo de receptores son epinefrina, serotonina
y glucagn.
Figura 1.1. Tipos de receptores en la sealizacin celular.

- Receptores con actividad enzimtica

intrnseca.- Como su nombre indica, la activacin
del receptor por el ligando propicia que el receptor
muestre una actividad enzimtica. Este grupo
engloba a receptores con distintas actividades
enzimticas. As por ejemplo, el factor natriurtico
atrial al interaccionar con su receptor activa su actividad guanilato ciclasa, la activacin
del receptor
de leucocitos CD45 activa su actividad tirosina
fosfatasa, la activacin de los receptores de insulina
y de muchos factores de crecimiento provoca la
aparicin de actividades tirosina quinasa (insulina,
factor de crecimiento epidrmico) o serina/treonina
quinasa (factor de crecimiento transformante tipo ).
- Receptores asociados a tirosin-quinasas
citoslicas.- Tambin conocidos como
superfamilia de receptores de citoquinas. Estos
receptores carecen de actividad cataltica pero se
asocian directamente, tras su activacin, con
protenas citoslicas que tienen actividad tirosina
quinasa. Ejemplos de seales que interaccionan con
este tipo de receptores son prolactina y hormona del
crecimiento (hormonas), la mayora de citoquinas e
interferones y ciertos factores de crecimiento
(eritropoyetina).

1.4. Receptores ligados a Protenas G

Muchos receptores en su ruta de transduccin
activan a protenas transductoras denominadas
protenas G, las cuales a su vez modulan positiva o
negativamente la actividad de enzimas capaces de
originar segundos mensajeros. Si bien estos
receptores unen diferentes hormonas y median
diferentes respuestas celulares, tienen una serie de
caractersticas estructurales y funcionales comunes:
a- La secuencia aminoacdica del receptor contiene
siete segmentos en a-hlice formados por 22-24
residuos hidrofbicos que estn integrados en la
membrana plasmtica (figura 3).
b- El lazo de residuos aminoacdicos entre las a-
hlices 5 y 6 y el extremo C-terminal del receptor,
ambos en la parte citoslica del mismo, son
importantes para las interacciones con las protenas G.
Figura 1.3. Esquema de receptor acoplado a protenas G.

c- La protena G transductora asociada con el

receptor funciona como un interruptor molecular,
presentando su estado inactivo cuando se encuentra
unida a GDP. La unin del ligando al receptor causa
la liberacin del GDP de la protena G y su
intercambio por GTP, presentando ahora su estado
activo.
d- La protena G activada (unida a GTP) interacciona
y modula (activa o inhibe) a una enzima efectora,
la cual cataliza la formacin de un segundo
mensajero, o bien modula la actividad de canales
inicos.
f- La hidrlisis del GTP unido a la protena G
revierte a la protena G a su estado inactivo.
Se han caracterizado distintos tipos de
enzimas efectoras capaces de ser activadas por
protenas G (figura 1.4):
- Adenilato Ciclasa (AC).- enzima generadora de
AMPciclico (AMPc), el cual es capaz de activar a la

protena quinasa A (PKA) en su ruta de

transduccin.
- Fosfolipasa C (PLC).- enzima generadora de
Inositol trifosfato (IP3) y Diacilglicerol (DAG), los
cuales son capaces de activar, respectivamente, a las
protena quinasa Ca-calmodulina (PK Ca-CaM) y a
la protena quinasa C (PKC) en su ruta de
transduccin.
- Fosfolipasa A2 (PLA2).- enzima generadora de
Acido araquidnico (AA), el cual es capaz de activar
a la protena quinasa C (PKC) en su ruta de
transduccin.
Por otra parte, con respecto a la modulacin
de canales inicos se ha visto que median la apertura
de canales de K+ y de Ca2+.

1.5.3. Ruta de transduccin del AMPc.

El objetivo de este apartado es resaltar algunas
de las caractersticas ms sobresalientes de las
protenas implicadas en esta ruta de transduccin; as
como poner de relieve la importancia del fenmeno de
amplificacin de seal a travs de sucesivas etapas.
La adenilato ciclasa (AC) fue la primera
enzima caracterizada capaz de ser activada por
protenas G. La AC cataliza el ciclamiento del ATP
(substrato) para originar AMP cclico (AMPc), que es
la molcula con actividad de segundo mensajero. En
la clula existen enzimas (fosfodiesterasas)

capaces de catabolizar el AMPc, transformndolo en

5-AMP. Experimentos realizados midiendo las
concentraciones de AMPc intracelulares tras la
exposicin de las clulas a una hormona , como
glucagn o adrenalina, demuestran que se alcanza un
pico de concentracin a los 2 minutos, el cual
desciende rpidamente de tal manera que a los 5-7
minutos las concentraciones han vuelto a sus valores
basales. Este dato nos demuestra que para la
transmisin de la seal no se necesita mantener
elevadas las concentraciones por tiempos largos. La
ventaja de este mecanismo radica en que la clula
puede responder a un nuevo impulso hormonal en un
periodo relativamente corto de tiempo y, por otra
parte, puede integrar al mismo tiempo las seales
recibidas por otras rutas de transduccin, las cuales
pueden ser de signo contrario.
La AC presenta dos dominios hidrofbicos
por los cuales permanece anclada a la membrana
citoplasmtica, separados por un dominio citoslico
que es donde radica su actividad enzimtica.
Finalmente existe un cuarto dominio citoslico que es
donde reside la capacidad de interaccin con las
protenas G especficas.

En la actualidad, se han caracterizado distintas

protenas con actividad adenilato ciclasa pero que
difieren en sus propiedades, ya que pueden ser
reguladas por distintas protenas G, presentar
localizaciones tisulares diferentes, y pueden ser
reguladas positivamente por Ca2+ o por subunidades
b-g. Atendiendo a que puedan o no puedan ser
activadas por el ion Ca2+ se clasifican como de Tipo I
(ACI y ACIII) o de Tipo II (ACII y ACIV),
respectivamente. A su vez, las AC de tipo I pueden
ser reguladas o no de forma negativa por las
subunidades b-g. As , la AC1, que presenta este tipo
de regulacin negativa, se diferencia de la AC3, que
no lo presenta. La potencia de inhibicin de las
subunidades b-g es unas 20 veces menor que la
potencia de activacin de la subunidad as. Si
imaginamos un sistema ideal celular con un nico tipo
de receptor acoplado a protenas G y con una
actividad ACI; en este sistema, dado que la relacin
as/b-g es de 1, la clula, tras la activacin del
receptor activara la AC1 sin el menor problema. Sin
embargo, en los sistemas celulares reales, coexisten
distintos tipos de protenas G, algunas de las cuales
(Gqo G12) si bien no interaccionan de forma directa a
travs de su subunidades a con AC1 si pueden
incrementar las concentraciones de las subunidades
b-g intracelu-lares, pudiendo llegar a compensar por
este aumento de concentracin su menor potencia
para la inhibicin.
Enlazando con lo anterior, es conocido que
los receptores que activan a protenas Gi son capaces
de inhibir la actividad AC. Sin embargo, no se ha
podido demostrar la asociacin directa AC-subunidad
ai, por lo cual se ha postulado que este tipo de
protenas G actuara inhibiendo a la AC mediante el
aumento de las concentraciones de subunidades b-g,
las cuales secuestraran rpidamente a las
subunidades as

Finalmente, las AC de tipo II comparten dos

caractersticas: la ya mencionada de no ser reguladas
por calcio y la se ser positivamente moduladas por
subunidades bg. Hay que destacar en este punto que
si bien tradicionalmente (los ltimos 15 aos) se
pensaba que las subunidades bg presentaban un nico
papel en el anclaje a la membrana, en los ltimos aos
se estn caracterizando diversos subtipos para ambas
subunidades, lo cual puede afectar a las AC de
diferentes maneras, todava no identificadas.
El incremento en los niveles de AMPc, como
consecuencia de la activacin de AC, pone en marcha
el siguiente paso en la transduccin de seal, que
consiste en la activacin de la protein-quinasa A
(PKA). La PKA consta de cuatro subunidades: dos
reguladoras y dos catalticas. En el proceso de
activacin se requiere la unin de dos molculas de
AMPc por molcula reguladora. Dicha unin desplaza
el equilibrio de interaccin entre ambos tipos de
subunidades de tal forma que las subunidades
catalticas se liberan de las reguladoras y quedan
activadas pudiendo realizar la fosforilacin de
protenas especficas en residuos Ser o Tre, utilizando
como cosusbtrato el ATP (fig. 1.8). La identificacin
de protenas substrato de la PKA ha permitido
conocer que dichos substratos son protenas
modulables por fosforilacin y que stas presentan un
amplio rango de actividades biolgicas, ya que se han
identificado protenas del tipo de canales inicos
(protenas de membranas), como canales de K+ que
ven disminuida su actividad en la salida al exterior de
dicho ion, enzimas citoslicas relacionadas con el
metabolismo general (glucgeno fosforilasa, piruvato
quinasa, etc) o factores transcripcionales nucleares,
como es el caso de la protena CREB (protena de
unin al elemento de respuesta activado por AMPc;
ver tema 4), la cual puede modificar la expresin
gnica de determinados genes.
Dado que existe una enzima especfica
(fosfodiesterasa), capaz de inactivar al AMPc, a
medida que las concentraciones de AMPc vayan
disminuyendo, las subunidades reguladoras de la
PKA dejaran de interaccionar con el segundo
mensajero y empezaran a desplazar el equilibrio hacia
la forma inactiva. Si midiramos las concentraciones
de PKA activa en sistemas ideales (cultivo de clulas)
observaramos que la PKA empezara a activarse a los
2 minutos, alcanzara un pico mximo haca los 5
minutos y prcticamente estara en estado basal (no
activo) a los 15 minutos.
De igual forma existen enzimas fosfatasas
especficas para las distintas protenas substratos de la
PKA (Serin-treonin-fosfatasas). La medicin de las
formas activas de estas protenas substratos en
nuestro sistema ideal nos dara curvas de activacin
similares pero retrasadas ligeramente en el tiempo.
As, considerando el caso del factor de transcripcin
CREB, veramos una activacin mxima a los 10-15

minutos (CREB-P) y su vuelta al estado basal (no

fosforilado, CREB, y por lo tanto inactivo)

aproximadamente a los 30 minutos

A la vista de los datos anteriores podran

plantearse algunas preguntas: Cmo una ruta de
sealizacin con un tiempo de actuacin tan
relativamente corto puede generar cambios tan
profundos en las clulas? Qu ventaja evolutiva
supone tener vas de sealizacin de corta duracin?
La respuesta a la primera pregunta se centra en el
fenmeno de amplificacin en cascada, el cual lo
explicaremos con el ejemplo de una ruta activada por
AMPc, la hidrlisis del glucgeno heptico para
producir glucosa plasmtica. El organismo responde
a la bajada de concentracin de glucosa en plasma
(tras un periodo de ayuno, por ejemplo)
incrementando las concentraciones de glucagn,
hormona del pncreas endocrino, sintetizada por las
clulas a, que al interaccionar con su receptor en la
clula heptica, pondr en marcha la ruta de
activacin de la PKA. Esta enzima es capaz de
fosforilar, y en consecuencia activar, a la enzima
citoslica Fosforilasa b quinasa, la cual a su vez
fosforila y activa a la Glucgeno fosforilasa b,
enzima que acta sobre el glucgeno realizando la
hidrlisis de enlaces a 1-4 y rindiendo restos de
glucosa 1-fosfato, la cual tras sucesivos pasos, se
transforma en glucosa que podr abandonar la clula
heptica con el fin de mantener la homeostasis de
glucosa en plasma. Si suponemos que la clula
heptica presenta 10 receptores de glucagn en su
superficie, lo cual es un nmero muy conservador (se
conocen ejemplos de tipos celulares con 20.000

receptores/clula), y que en cada paso de la ruta cada

enzima es capaz de activar 10 molculas del paso
siguiente por minuto (nmero todava ms
conservador ya que la actividad enzimtica para estas
enzimas est en el rango de nmoles-moles/min, el
resultado sera la liberacin de 1milln de molculas
de glucosa por clula y por minuto!!
Para contestar a la segunda pregunta, y
utilizando el ejemplo del ayuno, el glucagn tambin
induce, a travs de CREB, la expresin del gen de la
fosfoenol-piruvato carboxiquinasa (PEPCK), enzima
de la ruta gluconeognica implicada en la sntesis de
glucosa a partir de substratos no glucdicos. Mientras
el organismo siga en ayuno, el hgado podr
responder a las nuevas molculas de glucagn que,
por va sangunea, lleguen procedentes del pncreas.
Si en un momento dado el organismo ingiere alimento
rico en carbohidratos, el pncreas dejara de liberar
glucagn y empezar a liberar insulina (hormona con
efectos metablicos opuestos que estudiaremos ms
adelante en este tema). En este caso, cuando las
concentraciones crecientes de insulina lleguen al
hgado, encontraremos una clula adaptada a un
metabolismo de ayuno (por las anteriores seales de
glucagn) que empieza a recibir seales contrarias.
En un tiempo de actuacin similar al anterior la
insulina revierte el metabolismo del glucgeno
(inactivando a la glucgeno fosforilasa b y activando
al mismo tiempo a la glucgeno sintasa, para
completamente la transcripcin del gen de la PEPCK
(inhibe la funcionalidad de CREB), reduce la vida
media de los RNAm de este gen y desestabiliza la
protena ya formada para que sea degradada
rpidamente. As, el organismo, en tiempos inferiores
a 1 hora a cambiado su comportamiento metablico
con respecto a la glucosa. Otro ejemplo de adaptacin
todava ms corto en el tiempo lo constituye la
preparacin a una situacin de peligro para el
organismo (descarga de adrenalina, que acta de
forma muy similar al glucagn con respecto al
sistema AC). Por tanto, la existencia de mltiples
pasos en las rutas de seali-zacin supone una mejor
amplificacin de respuesta, la posibilidad de que una
misma ruta module muchos procesos moleculares
distintos y tambin disponer de ms puntos de
regulacin o control, lo cual proporciona un ajuste
mucho mas fino o preciso.