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Bioqumica Fisiolgica I

Disciplina do 1 Semestre do 1 Ano do Mestrado


Integrado em Medicina Dentria

Instituto Superior de
CinciasdaSadeEgas
Moni z

Prof. Doutora
Madalena Oom

Dra. Susana Bandarra

Bruno M Costa 105522


Programa Da Disciplina:
Mdulo 1 Arquitectura Molecular da Vida

A gua
o Estrutura / polaridade, ligaes de hidrognio
o Outras interaces fracas crticas para a estrutura e reactividade das molculas
biolgicas
o Equilbrio cido-base e solues tampo
Aminocidos e pptidos
o Estrutura dos aminocidos
o Ligao peptdica e formao de pptidos
Estrutura e funo das protenas
o Diversidade e funes biolgicas
o Organizao estrutural das protenas e relao com a sua funo
Estrutura e funo dos hidratos de carbono
Estrutura e funo dos lpidos

Mdulo 2 Enzimologia

Catlise enzimtica
o Modo de aco enzimtica
o Estrutura, cofactores e localizao subcelular
o Especificao e classificao
o Cintica enzimtica, inibio enzimtica
o Regulao da actividade enzimtica

Mdulo 3 Metabolismo Intermedirio

Introduo ao metabolismo
o Propsitos do metabolismo
o Ciclo do ATP
o Estratgias gerais de organizao e regulao do metabolismo
Metabolismo dos hidratos de carbono gliclise
o Gliclise, destinos do piruvato, fermentao
o Formao de acetilCoA
Ciclo do cido ctrico
Fosforilao oxidativa
Metabolismo dos hidratos de carbono outras vias
o Interconverso dos hidratos de carbono
o Via das pentoses fosfato
o Metabolismo do glicognio
o Neoglucognese
Metabolismo dos lpidos
o Catabolismo dos cidos gordos, cetognese
o Sntese dos cidos gordos
Catabolismo dos aminocidos e ciclo da ureia
Integrao das vias metablica

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Arquitectura Molecular da Vida
A gua

Matria Viva

Caracteriza-se pela constante renovao da sua estrutura altamente complexa e


ordenada e pela capacidade de duplicao desta ordem para um organismo descendente
capacidade de reproduo.

Para alm disto, tm aptido para retirar energia do meio envolvente e transform-la
em compostos necessrios sua sobrevivncia: os animais dos compostos orgnicos
(alimentos) e as plantas da energia solar. O carbono retirado directamente do meio
ambiente. A complexidade dos organismos vivos pode ser traduzida sumariamente nos
seguintes pontos:

- Existncia de um grande nmero de diferentes macromolculas, aptas a exercer


funes especficas e diferenciadas, como as protenas, os cidos nucleicos, os polissacridos e
os lpidos.

- Recriao destas macromolculas num modo contnuo, embora com diferente


turnover, reflectindo o estado dinmico do organismo.

- Trfego e disposio das macromolculas no local adequado sua funo dentro ou


fora das clulas, nos tecidos.

Os organismos vivos possuem uma constante renovao das prprias clulas e de


salientar a importncia da presena de clulas e compartimentos celulares com composies
qumicas definidas e diferentes da vizinhana, por exemplo, os diferentes valores de pH ou a
diferente concentrao de ies Ca2+, criando gradientes atravs das membranas. ainda
importante salientar a existncia de tecidos diferenciados capazes de actuar sobre o meio
envolvente, como a clula muscular atravs da contraco, o nervo na transmisso do impulso
nervoso ou a produo e libertao de hormonas pelas clulas das glndulas endcrinas, entre
outros.

Tpicos

Renovao da sua estrutura (clulas) e capacidade de reproduo


Retirar energia do meio envolvente
o Plantas, algas e bactrias fotossintticas luz solar
o Animais compostos orgnicos (alimentos)
Existncia de grande nmero de macromolculas
Recriao das macromolculas de modo contnuo, com diferente turnover
Trfego e disposio de macromolculas no local adequado sua funo
Presena de compartimentos celulares com composies qumicas definidas e
preservadas
Existncia de tecidos diferenciados capazes de actuar sobre o meio envolvente

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Distribuio das Biomolculas na Clula

Os organismos vivos tm como constituintes principais os tomos de Carbono,


Oxignio, Hidrognio, Azoto, Fsforo, Enxofre, Clcio, Potssio, entre outros. Estes associam-se
em pequenas molculas, monmeros, como os monossacardeos, aminocidos e nucletidos,
que so as bases de constituio das macromolculas: Polissacridos, Protenas e cidos
Nucleicos. A presena de lpidos e gua constitui cerca de 70% da constituio dos organismos.

O carbono o elemento base das macromolculas porque forma quatro ligaes


covalentes muito estveis, para alm de ligaes simples, duplas e triplas consigo prprio,
aproveitando tambm uma grande versatilidade na formao de compostos com outros
elementos, atravs de cadeias lineares, ramificadas e cclicas, originando diversos grupos
funcionais como lcoois, aldedo, cetonas, cidos e anidridos, steres, aminas e amidas, com
diferentes propriedades qumicas.

Carbono

Elemento estrutural das macromolculas


Forma 4 ligaes covalentes estveis (4 electres de valncia)
Forma ligaes simples, duplas e triplas consigo mesmo
Cadeias lineares, ramificadas e cclicas
Enorme versatilidade na formao de ligaes com outros elementos
lcoois, aldedo e cetonas, steres, aminas e amidas diferentes propriedades
qumicas s cadeias de carbono.

Organizao hierrquica da vida

Biosfera Parte do Universo onde existe vida

Ecossistema Os organismos e o ambiente Tecido Conjunto de clulas semelhantes.


que interactuam numa dada regio.
Clula Unidade bsica da vida.
Comunidade Conjunto de organismos
vivos que fazem parte do mesmo Organitos Estruturas sub-celulares com
ecossistema. funo especfica (mitocndria, ncleo)

Complexos supramoleculares Associaes


Populao Conjunto de organismos da
mesma espcie numa comunidade. organizadas de macromolculas

Organismo um ser vivo. Pode ser uni ou Macromolcula Obtidas pela ligao de
pluricelular. subunidades simples

Sistema Conjunto de rgos com funo Subunidades monomricas Aminocidos,


coordenada. nucletidos, acares

rgo Unidade estrutura do sistema Molcula Qualquer conjunto de tomos


(conjunto de tecidos) com funo iguais ou diferentes interligados.
especializada. tomo A partcula mais pequena de um
elemento.

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Molculas e Ligao Qumica

Ligaes covalentes

Mantm os tomos ligados nas molculas, sendo as mais importantes em


bioqumica as ligaes C C e as C H.
Partilha de dois electres.
Ligaes fortes = estveis.

Ligaes no covalentes

So interaces que ajudam a manter a forma de molculas individuais estrutura


tridimensional ou de grupos de molculas ou ies estruturas supramoleculares
mas que so suficientemente fracas para poderem ser continuamente quebradas e
reformadas conforme necessrio dinmica molecular da vida.
Permitem dinamismo.
Determinam a maior ou menor solubilidade de um composto.
Responsveis pelo reconhecimento do substrato pela enzima.

Pontes de Hidrognio

a ligao mais forte das chamadas ligaes fracas.


Um tomo de H partilhado por dois outros tomos. Aquele a que o H est mais
fortemente ligado o dador de H, enquanto que o outro o receptor de H.
Normalmente, o dador um tomo de oxignio ou azoto ligado de
forma covalente a um H.
O aceitador possui uma carga parcial negativa, devido ao facto de
possuir pares de electres no partilhados, que atrai o H. Pode ser
o azoto ou o oxignio.
Uma das principais caractersticas o facto de serem direccionais,
ou seja, as ligaes mais fortes estabelecem-se quando os tomos do dador, do H e do
aceitador so colineares.
So responsveis pelo ponto de ebulio da gua, pela estabilidade da dupla hlice do
DNA e da estrutura terciria das protenas e, em parte, pela solubilidade na gua de
lcoois e cidos carboxlicos de massa molar mais baixa.

Interaces Inicas

Entre grupos carregados ou carga dipolo.


Atraco elctrica que se rege pela lei de Coulomb.
o Lei de Coulomb ies positivos atraem ies
negativos e vice-versa.
proporcional distncia e no direccional.
Determinam o estado fsico de um composto e permitem a ligao de molculas
polares a ies.
Interaces Van der Walls

Associaes fracas, no especficas, que aparecem quando tomos se aproximam a


determinada distncia.
A base desta ligao so as flutuaes da distribuio de carga electrnica na
molcula.
Estas foras, embora fracas, tm significado no interior empacotado das protenas, na
determinao da sua estrutura tridimensional, ou cidos nucleicos, onde h
oportunidade de fazer um grande nmero de ligaes. So tambm importantes ao
nvel da fluidez das membranas biolgicas (os fosfolpidos ligam-se por este tipo de
interaco).
Estas interaces podem explicar a solubilidade de substncias apolares na gua, por
exemplo, do cloro, que uma molcula simtrica e apolar, mas consegue estabelecer
um relacionamento com as molculas de gua porque estas induzem na gua plos
instantneos, de modo a que se estabeleam interaces que, embora fracas, so
muito numerosas.

(interaces hidrofbicas)

Fora Relativa das Ligaes


Covalentes +
No Covalentes
Pontes de Hidrognio
Interaces inicas
Interaces van der Walls
(Interaces hidrofbicas)

A individualidade de cada composto surge da estrutura covalente, das propriedades


qumicas dos seus grupos funcionais, mas tambm do seu arranjo tridimensional
Configurao e Conformao.

Configurao Molecular arranjo espacial, fixo, dos grupos constituintes numa


molcula. Mantida por ligaes covalentes, que podem ser duplas sem possibilidade de
rotao ou centros quirais (assimtricos, ligados a quatro grupos diferentes) onde os grupos
esto organizados em sequncias especficas. So responsveis pela formao de ismeros.

Conformao Molecular arranjo espacial, interconvertvel, dos grupos substituintes


numa molcula. varivel por rotao em volta das ligaes simples. Nas macromolculas e
nos complexos supramoleculares, a conformao com actividade biolgica estabilizada por
interaces no covalentes entre diferentes grupos na molcula. a mesma molcula. S varia
o facto de estar em novelo ou no.

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Distribuio das vrias macromolculas na clula

Lpidos Protenas cidos Nucleicos Polissacridos Pequenas molculas


Invlucro Nuclear
Peroxissoma
Membrana x X
Plasmtica
REL
Ncleo
Nuclolo x X
Ribossoma
Parede celular x
Vacolo X
Mitocndria
x x X
Cloroplasto
Citoplasma X
Complexo de Golgi x x x

A gua e o seu papel nos Sistemas Biolgicos

As molculas de gua possuem um carcter dipolar e uma grande tendncia para


formarem ligaes por pontes de H, principalmente com outros solventes polares,
promovendo a sua solubilizao, para alm da grande coesividade entre si. Das suas
propriedades fsicas destacam-se ainda os elevados pontos de fuso, ebulio, calor de
vaporizao e tenso superficial. O gelo, gua no estado slido, menos denso do que a gua
no estado lquido.

As interaces hidrfobas acontecem entre grupos no polares em soluo aquosa


(soluo polar). No resultam da atraco dos grupos no polares entre si mas so uma
consequncia da estabilidade termodinmica adquirida pelos agregados gua/molcula no
polar.

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Os solutos afectam as propriedades coligativas da gua: a presso do vapor, os pontos
de fuso e ebulio e a presso osmtica; e das solues, uma vez que diminuem a
concentrao efectiva de gua. Quanto maior o ponto de ebulio, menor o ponto de fuso.

A gua ter tendncia a deslocar-se de uma zona de menor concentrao de soluto


maior concentrao de gua para uma de maior concentrao de soluto menor
concentrao de gua, criando uma presso osmtica. A presso osmtica uma
consequncia da diferente osmolaridade (concentrao de partculas dissolvidas) das solues
em contacto. Quanto maior for a osmolaridade, menor a concentrao de gua, e vai
apresentar consequncias para os seres vivos.

Em meios isotnicos, no existe movimento de gua entre a clula e o meio exterior,


no entanto, se a clula for mergulhada num meio hipertnico, h sada de gua para o espao
extracelular e a clula encolhe. Se o meio onde esta colocada hipotnico (mais gua do que
sais) existe entrada de gua, ocorrendo portanto um aumento do volume da clula.

A homeostase a manuteno do ambiente interno, que essencial para a sade.


Inclui considerao da distribuio de gua no corpo e manuteno do pH apropriado e das
concentraes de electrlitos. Dois teros da gua total do corpo fluido intracelular, o resto
fluido extracelular.

A regulao do balano hdrico depende de mecanismos hipotalmicos de controlo da


sede. Diminuio da gua pode resultar de um decrscimo do influxo (por exemplo no coma)
ou perda aumentada (como sudorese severa ou diarreias). O excesso de gua corporal
tambm pode ocorrer graas ingesto excessiva de gua ou at insuficincias renais.

Tpicos

Substncia mais abundante nos organismos vivos.


2 tomos de Hidrognio e 1 de Oxignio.
Molcula tetradrica ligeiramente distorcida.
Carcter dipolar. O termo dipolo represente molculas que tm a sua carga elctrica
(electres) desigualmente distribuda pela sua estrutura.
simultaneamente bom dador e bom receptor, para formar pontes de hidrognio.
Coesividade ligaes intermoleculares.
o nico composto que mais denso no estado lquido que no estado slido.
Tem elevado ponto de fuso, ebulio, calor de vaporizao e tenso superficial.
Permite a solubilizao forma ligaes de hidrognio com solutos polares (molculas
hidrfilas)
Com molculas hidrfobas (apolares) forma interaces hidrofbicas
o Acontecem entre grupos no polares em solues polares
o Mantm a estabilidade termodinmica entre a gua e a molcula apolar.
o As molculas hidrfobas organizam-se de forma a haver menor superfcie de
contacto.
o Cera

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Cadeias CH sem grupos funcionais. A gua no interfere com as ceras
nem com o grupo funcional. Mesmo que haja um ponto hidrfilo no
faz efeito, pois a fora no suficiente.
o Molculas anfipticas Organizam-se de forma a evitar a gua.
Tm uma cabea hidrfila e uma cauda hidrfoba. A cauda vira-se para
o interior expondo a cabea.
Exemplos de molculas:
o Polares Glicose, glicina, aspartato, lactato, glicerol
o No polares Cera
o Anfipticas Fenilalanina, fosfatodil-colina
Propriedades coligativas da gua
o Presso, vapor
o Ponto de ebulio
o Ponto de fuso
o Presso osmtica
A gua tem maior tendncia a deslocar-se de uma zona de maior
concentrao de gua (menor concentrao de sais hipotnica) para
uma zona de menor concentrao de gua (maior concentrao de
sais hipertnica).
Num meio hipertnico, a clula encolhe.
Num meio hipotnico, a clula incha, podendo inclusive ocorrer lise.
o Os solutos afectam as propriedades coligativas das solues porque diminuem
a concentrao efectiva de gua.

Ionizao da gua

Auto Ionizao da gua:

H2O + H2O <=> H3O+ + OH-

Este equilbrio dado por Kw, produto inico, que a 25C

Kw = [H+][OH-] = 1 x 10-14 M2

A soluo neutra quando [H+] = [OH-], a 25C:

[H+] = [OH-] = 1 x 10-7M

Nos fluidos biolgicos, temperatura de 37C, a concentrao de H+ na gua


ligeiramente maior que 10-7 mol/L.

pH dos fluidos biolgicos

O pH afecta a estrutura e a actividade das macromolculas afectando, por isso, a


maioria dos processos biolgicos.

pH = -log[H+]

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De forma anloga,

pKa = -log[Ka]

O pKa outra medida da fora de um cido, sendo que quanto maior a fora do cido,
menor o valor do pKa e maior o valor de Ka. Um cido mais forte dissocia-se mais
facilmente.

possvel relacionar atravs de uma equao, o valor de Ka de um cido fraco com o


pH da soluo que contm o cido AH e a sua base conjugada.

Os cidos e as bases dissolvidas em gua contribuem para a concentrao de H+ e


alteram o pH. A extenso em que um composto se protolisa na gua medida pela sua
constante de protlise: Ka para cidos e Kb para bases. No cido:

Ka a constante de protlise e de onde se obtm a equao de Henderson


Hasselbalch, de grande importncia para a previso das propriedades das solues tampo,
utilizadas para controlar o pH de misturas reaccionais:

Equao de Henderson Hasselbalch:

cido Substncia que doa protes (transforma-se na sua base conjugada).

cido Fraco No se dissocia totalmente.

cido Forte Dissocia-se completamente.

Base Substncia que aceita protes (transforma-se no seu cido conjugado).

pH < 7 (cido) pH = 7 (neutro) pH > 7 (bsico)


[H+] > [OH-] [H+] = [OH-] [H+] < [OH-]

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Solues Tampo

Uma soluo tampo consiste numa mistura de um cido ou base fracos com os seus
conjugados e tem a capacidade de resistir variao de pH quando lhe adicionada uma
quantidade moderada de cidos ou bases fortes. A capacidade tampo determinada pelo pK
e pela concentrao do cido fraco e da sua base conjugada.

As clulas e os organismos mantm um pH constante no citosol que especfico para a


actividade mxima de todos os processos. O pH extracelular (plasma e fluido intersticial)
tambm mantido constante e especfico. As variaes de pH podem resultar em acidoses
condio em que o pH do plasma sanguneo desce abaixo do valor normal ou alcaloses
condio em que o pH do plasma sanguneo sobe acima do valor normal.

O ponto isoelctrico o valor de pH ao qual o somatrio de todas as cargas dos grupos


ionizveis existentes na molcula zero. Quando o pH = pKa, a concentrao da forma no
protonada igual concentrao da forma protonada.

O principal tampo das clulas o tampo fosfato, sendo que no sangue o mais
importante o tampo bicarbonato.

Uma curva de titulao um grfico que mostra a variao do pH aquando da adio


de um cido ou de uma base.

Uma zona tampo uma zona que resiste variao de pH com a adio de um cido
ou base. definida inferiormente pelo pKa 1 e superiormente pelo pKa + 1.

Muitos metabolitos intermedirios (ex. acares fosforilados da gliclise) so cidos


fracos. Desde que a mudana sbita no pH, na proximidade de um pK de um cido fraco, altera
significativamente as propores relativas das suas formas ionizadas e no ionizadas, reaces
intracelulares so tamponadas para minimizar as mudanas de pH.

O tamponamento tambm necessrio porque o metabolismo resulta na libertao e


incorporao de protes. A libertao do dixido de carbono acidifica drasticamente os fluidos
intracelulares.

Os mecanismos homeostticos que mantm o pH intracelular, incluem tampes


fisiolgicos, principalmente bicarbonato, fosfato e protenas.

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A fora de um cido depende da sua estrutura molecular. O tomo de cloro
fortemente electronegativo e atrai electres. O efeito cresce quando se aumenta o nmero de
tomos de cloro. Alm disso, os pKs dos cidos clorobutricos mostram que o efeito
electronegativo diminui com a distncia do cloro ao grupo que se dissocia.

Principais tampes biolgicos

Sistema Bicarbonato
Sistema Fosfato
Sistema Proteico

Sistema Tampo Bicarbonato

O sistema tampo do bicarbonato um sistema aberto, com ajuda dos sistemas renal
e respiratrio, permitindo a remoo do CO2 pela expirao ou a substituio do CO2 pelo
metabolismo, de especial importncia a nvel extracelular. Neutraliza os cidos do
metabolismo celular e repe as quantidades iniciais de HCO 3- e H 2CO3 . Existem em grande
quantidade no organismo.

O CO2 produzido nos tecidos difunde-se atravs das membranas celulares e dissolve-se
no plasma sanguneo, sendo abundante nos alvolos pulmonares e nas clulas epiteliais dos
tbulos renais. O tampo bicarbonato tem um pH de 6,1.

Desequilbrios na presena de uma base

Desequilbrios na presena de um cido

Tem como cido fraco o H2CO3 e como sal (bicarbonato) NaHCO3.

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Sistema Tampo Fosfato

O tampo fosfato o mais importante fisiologicamente. Tem um pK de 6,9 que se


aproxima do ideal. Existe em grandes quantidades no organismo intracelular, neutralizando os
excessos de cidos e bases provenientes do metabolismo.

Desequilbrios na presena de uma base

Desequilbrios na presena de um cido

Sistema Tampo Proteico

um sistema bastante importante quer a nvel intracelular, quer a nvel extracelular.


Assegura a existncia de um pKa = 7,4. A protena mais abundante no sangue a albumina e a
protena mais abundante no organismo o colagnio.

HProt / Prot-. Os grupos laterais ionizveis de aminocidos que constituem essas


protenas tm um papel fundamental no tamponamento do meio intracelular.

Aminocidos e Pptidos

Biomolculas

As biomolculas presentes na clula so as protenas: aminocidos e pptidos; lpidos


e hidratos de carbono: monossacardeos, oligossacardeos e polissacardeos.

Aminocidos

Os genes so transmitidos para mRNA para posteriormente serem traduzidos para


sequncias de aminocidos que formam protenas. De anlise de um nmero vasto de
protenas, chegou-se concluso que todas as protenas so compostas por 20 aminocidos,
que podem essenciais ou no essenciais e possuem um radical, que varia de aminocido para
aminocido, um grupo amina (-NH2) e um grupo carboxilo (-COOH). Os aminocidos mais
comuns so os conhecidos por -aminocidos, pois encontram-se ligados ao carbono-. A
prolina constitui uma excepo, pois constitui um iminocido, uma vez que o seu grupo amina
secundrio, dado que possui apenas um tomo de hidrognio.

Dois aminocidos contm o grupo funcional amida: a glutamina e a asparagina.

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Aminocidos essenciais so obtidos atravs da dieta, pois no so sintetizados pelo
organismo. Aminocidos no essenciais so sintetizados pelo organismo.

Os aminocidos distinguem-se pela sua cadeia lateral, que pode ser aliftica (ou
acclica ou aberta), na qual os tomos de carbono so ligados em forma recta ou ramificada,
formando cadeias com extremidades livres; hidroxiladas ou contendo enxofre, aromticas,
cadeias carbnicas que apresentam na sua estrutura pelo menos um anel ou ncleo
benznico, cidas, bsicas ou amidas, compostos orgnicos obtidos normalmente a partir da
reaco de um cido carboxlico e uma amina. As propriedades do radical determinam o
carcter hidrfilo ou hidrfobo dos aminocidos.

Quanto nomenclatura, os aminocidos constituem o grupo de compostos onde


permitida maior maleabilidade no uso de nomes triviais e sistemticos. S existem
recomendaes para aminocidos proteicos.

A classificao baseia-se no grupo R (e na sua carga elctrica para valores biolgicos de


pH), o que permite dividi-los em 4 tipos: No polares ou hidrfobos, polares mas no
carregados, carregados negativamente a pH 6-7 e carregados positivamente a pH 6-7.

COO Grupo Carboxilo


H3N+ ou NH3+ Grupo Amina
H Hidrognio
R Radical Grupo Varivel.

Os aminocidos distinguem-se pela cadeia lateral em:


o Alifticos (sem grupos funcionais) Apolares
o Hidroxilados ou contendo enxofre

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o Aromticos
o Bsicos, cidos ou amidas

O aminocido mais abundante nas protenas a leucina e o menos abundante o


triptofano. Aminocidos livres ou no proteicos so biologicamente importantes, mas
no se encontram em protenas. Encontram-se nos vrios tecidos ou em ciclos/ vias
metablicas.

Normalmente, as protenas possuem todos os aminocidos na sua constituio, sendo


que os mais comuns so a alanina, valina, leucina e glicina. Por vezes encontramos nas
protenas aminocidos modificados.

Aminocido derivado Protena / Classe de protenas especficas


Muitas protenas.
Cistina Oxidao de duas cistenas com formao de uma ligao dissulfito,
existindo perda de dois protes e dois electres.
Colagnio.
4 Hidroxiprolina Hidroxilao da prolina por aco da enzima hidroxilase de prolina, na
presena de vitamina C.
5 Hidroxilisina Colagnio.
Protenas de coagulao do sangue e todas as protenas que ligam
Carboxiglutamato Ca2+.
A carboxilao dependente da vitamina K.
6 N metil lisina Constituinte da miosina.
Elastina.
Desmosina
Formado a partir de 4 resduos de lisina.
Muitas protenas, em especial receptores na membrana celular e
O Fosfoserina protenas de regulao.
resultado da fosforilao por cinases de protenas.

Existem outros aminocidos biologicamente importantes que no se encontram nas


protenas, como a ornitina e a citrulina, que so intermedirios no metabolismo da arginina e
no ciclo da ureia. Para alm destes existem a homocistena, homoserina e tiroxina.

Aminocidos essenciais: Leucina, isoleucina, valina, triptofano, metionina,


fenilalanina, treonina e lisina (a histidina um aminocido essencial na infncia).

Aminocidos no essenciais: Alanina, arginina, cido asprtico, aspargina, cido


glutmico, cistina, cistena, glicina, glutamina, hidroxiprolina, prolina, serina, tirosina.

Propriedades dos aminocidos

Isomeria Enantimeros

A isomeria do carbono- o principal responsvel pela isomeria dos aminocidos. A


configurao dos aminocidos em torno do carbono- indicada atravs dos prefixos D- e L-.
Um aminocido L- em projeco de Fisher tem o grupo amina NH2 esquerda.

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Todos os aminocidos das protenas so L. Um enantimero de um composto est
para este como um objecto para a sua imagem no espelho.

Todos os aminocidos tm ismeros, excepto a glicina.

Ionizao

Os aminocidos possuem, pelo menos, dois grupos ionizveis. Molculas como estas,
que possuem grupos com cargas de sinal oposto so chamadas de zwitteries ou ies
dipolares. So anflitos, uma vez que possuem um grupo cido e um grupo bsico. Um
zwitterio uma molcula com carga positiva e negativa.

Em soluo aquosa, os aminocidos apresentam-se na forma zwitterinica, ou seja,


com o grupo -carboxilo dissociado e o grupo -amina protonado. Assim, como o pK1 (pK para
o grupo carboxlico) ronda o valor de 2,2 e o pK2 (pK para o grupo amina9 ronda o valor 9,4,
vai implicar que a pH fisiolgico, o grupo amina esteja protonado e o grupo carboxilo esteja na
forma ionizada COO. A valores de pH baixos, existem na forma catinica e valores de pH
elevados existem na forma aninica.

Conclui-se assim que um aminocido pode comportar-se tanto como cido como base.
Os aminocidos, tal como outros compostos inicos, so mais solveis em solventes polares do
que em solventes apolares. Estas propriedades inicas dos aminocidos vo influenciar as
propriedades qumicas e fsicas de um aminocido livre e dos aminocidos em complexos
proteicos.

Aminocido na forma catinica (valores baixos de pH)

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Aminocido na forma aninica (valores elevados de pH)

Aminocido na forma zwitterinica (pH fisiolgico)

O ponto isoelctrico o valor de pH no qual o somatrio de todas as cargas dos


grupos ionizveis existentes na molcula zero, pelo que sero iguais, nesse ponto, as
concentraes das formas protonada e no-protonada do aminocido. Para anflitos como a
glicina, o valor do ponto isoelctrico pode ser calculado dividindo por dois a soma dos pKs.

Para os aminocidos dicarboxlicos e diaminados, existem dois valores de pK para os


grupos carboxilo e amina, respectivamente.

Quando o pH da soluo inferior ao pH de um dado aminocido, este encontra-se em


meio cido, ficando carregado positivamente. No entanto, se o pH da soluo for superior ao
pH do aminocido, este encontra-se em meio bsico, ficando carregado negativamente.

Os valores e pK1 dos aminocidos so muito menores do que o valor de pK de um


simples cido carboxlico. A grande diferena causada pela influncia electrosttica do grupo
amnia, carregado positivamente. O grupo NH3 + estabiliza mais electrostaticamente o grupo
COO- do que o grupo COOH. Igualmente, o grupo NH3+ possui um pK mais baixo do que uma
amina normal, devido tendncia electrnica negativa do grupo carboxilo. Assim, ambas as
caractersticas electrnicas e electrostticas influenciam o pK do grupo NH3+.

Curva de titulao de um aminocido

uma curva mais complexa, uma vez que o


aminocido apresenta, pelo menos, dois grupos ionizveis (um
cido carboxilo e um bsico amina). Por este motivo, o
grfico apresenta duas zonas tampo.

Curva de titulao da glicina

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Ligao Peptdica

Polmeros compostos por dois, trs, poucos ou vrios aminocidos so chamados


dipptidos, tripptidos, oligopptidos e polipptidos, respectivamente. Depois de estarem
includos num pptido, os aminocidos individuais so designados por resduos aminocidos,
uma vez que depois de includos na cadeia polipeptdica perdem o OH do grupo carboxilo e H
do grupo amina, com excepo do primeiro e do ltimo aminocido da cadeia.

A ligao peptdica liga os aminocidos em cadeias lineares, formando uma estrutura


com um N-terminal (terminal amina) e um C-terminal (terminal carboxilo). A formao da
ligao peptdica envolve gasto de energia, sendo formada por eliminao de uma molcula de
gua entre o grupo OH do carboxilo de um aminocido e um H do grupo amina do aminocido
seguinte. uma ligao do tipo amida e responsvel pela formao da estrutura primria de
um polipptido. A hidrlise favorvel, mas muito lenta. Assim, as proteases so enzimas que
hidrolisam ligaes peptdicas de uma forma muito especfica.

A ligao tem carcter covalente duplo, na qual os tomos de C, H e N so coplanares e


as ligaes entre o carbono e o oxignio e o H so paralelas. A cadeia tem uma configurao
trans, sendo que um dos tomos de hidrognio passa para a posio oposta ao tomo de
carbono, ocorrendo uma rotao livre entre as ligaes simples vizinhas do carbono-. Devido
ao seu carcter duplo, no permite rotao livre.

So pptidos de importncia biolgica, o glutatio (tripptido que impede a


interveno sobre outros compostos de agentes oxidantes, porque ele prprio oxidado,
poupando assim aqueles compostos) e as hormonas hipotalmicas como a Tritrofina releasing
factor (tripptido), ocitocina (nanopptido de estrutura cclica devido a ligaes covalentes por
pontes de enxofre, essencial na gravidez para induzir as contraces do msculo uterino e,
portanto, o parto, e para estimular a secreo de leite pelas glndulas mamrias), vasopressina
(nanopptido que intervm no controlo da presso arterial atravs da regulao da contraco
muscular dos vasos) e titrofina (138 aminocidos): as hormonas peptdicas como a insulina e a
glucagina e os pptidos antibiticos, produzidos pelos microrganismos como a Tirocidina e a
Penicilina.

Nem todos os pptidos so protenas.

18
Protenas

As protenas so o centro de aco dos processos biolgicos. Quase todos os processos


do metabolismo celular so catalisados por protenas. Tambm regulam as condies extra e
intracelulares, assim como so parte essencial da estrutura celular.

Constituem polmeros de L-aminocidos ligados por ligaes peptdicas, apresentam


polaridade e uma conformao prpria que pode ser modificada depois da traduo. O
nmero de aminocidos numa cadeia peptdica pode variar entre 50 e 5000, com um peso
molecular de 6 a 550KDa. Pode ter zonas ou fendas onde se liga algo e enrola-se sobre si
prpria (3) devido presena de resduos de aminocidos.

Quanto organizao, podem ter uma cadeia polipeptdica ou duas cadeias


polipeptdicas semelhantes ou mesmo diferentes. So, portanto, multimricas ou
oligomricas. Podem ser simples [Holoprotenas] (sangue, membranas e matriz extracelular)
ou conjugadas [Heteroprotenas] (ncleo, citoplasma, membranas e matriz extracelular).

Outro tipo de classificao a diviso em protenas globulares (citoplasma,


membranas e fluidos extracelulares), de forma esfrica, compacta e normalmente solveis em
gua; e fibrosas (citoplasma e matriz extracelular), constitudas por fibras ou fibrilhas, sendo
praticamente insolveis.

As heteroprotenas contm uma parte no proteica o grupo prosttico, ligada


covalentemente, formando fosfoprotenas, glicoprotenas, metaloprotenas, flavoprotenas
(associadas a nucletidos de flavina), lipoprotenas ou nucleoprotenas.

Das suas funes destacam-se catlise enzimtica, transporte, nutrio e


armazenamento, contraco e mobilidade, elementos estruturais, defesa, regulao gentica e
hormonal e ainda tamponamento.

Protenas Globulares

Protenas de forma esferide, compacta.


Ocorrem no citoplasma, membranas e fluidos extracelulares
Em maior nmero no organismo
Ocorrem na estrutura terciria ou quaternria, porque embora
a estrutura supersecundria constitua uma contribuio
fundamental para o arranjo globular, a conjugao dos vrios
motivos em associao com sequncias no tpicas em diversas zonas da protena que
permite o enrolamento.
So hidrossolveis

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Protenas Fibrosas (ou escleroprotenas)

Ocorrem no citoplasma e matriz extracelular


Constitudas por fibras e fibrilhas e normalmente insolveis em gua
So alongadas
Tm estrutura quaternria, mas no terciria
So estruturais, uma vez que constituem as clulas e tecidos.
Constitudas maioritariamente por cadeias em hlice .
Queratinas
o A forma mais comum nos mamferos a queratina
o As fibras so enroladas para a esquerda com a tpica conformao em hlice
o As cadeias laterais dos aminocidos ficam alinhadas ao longo da fibra
o Ligadas por pontes dissulfureto.
o Estrutura quaternria
o Entram na constituio da epiderme, cabelo, unhas, conferindo-lhes
elasticidade
o So resistentes, protectoras, duras e com flexibilidade varivel.
Colagneos
o Principal protena dos tecidos conjuntivos (pele, ossos, matriz extracelular)
o A estrutura em tripla hlice rica em glicina, alanina com alguma lisina
o Resistente tenso, sem distender
o O excesso de ligaes cruzadas origina um tecido rgido.
o Estrutura secundria e quaternria
o So glicoprotenas associadas a acares
Elastina
o Estrutura em folhas rica em glicina, alanina, valina e prolina com
interligaes de lisina
o Constitui os vasos sanguneos, ligamentos, pulmes e pele
o Elstica, extensvel em duas dimenses e muito insolvel
o Tem muitas ligaes cruzadas

A conformao tridimensional uma caracterstica das protenas nativas. A aquisio


de uma conformao errada nas protenas pode torn-las no funcionais ou patognicas e ser
a causa de doenas como a BSE ou Alzheimer. A conformao errada nas protenas pode ser
consequncia de mutaes no gene que levam alterao dos aminocidos. As protenas tm
de manter a sua conformao nativa para terem actividade biolgica.

Protenas pries so protenas que podem assumir mais do que uma conformao: a
conformao nativa e outras, que so ricas em configurao de folha e que levam
formao de agregados. Principal componente das fibrilhas amilides extracelulares presentes
em encefalopatias causadas por pries. A propagao da protena prio infecciosa ocorre pela
converso da protena prio normal (PrP) numa forma que causa doena (PrPsc).

As protenas podem sofrer processos de desnaturao alterao na estrutura


tridimensional das protenas, sem que haja ruptura de ligaes peptdicas, e que leva perda
de funo biolgica. So agentes de desnaturao de origem qumica (variaes de pH,

20
solues de ureia, detergentes como o SDS e solventes orgnicos) e fsica (temperatura,
radiaes e agitao mecnica). O papel das ligaes dissulfureto na desnaturao trmica da
protena inibidora da tripsina pancretica de bovino (BPTI) reflecte-se, por exemplo, na
diminuio da temperatura de desnaturao quando existe quebra de uma ligao
dissulfureto.

Estrutura Primria

A composio e a sequncia de aminocidos a base da estrutura primria das


protenas. Esta determinante para as propriedades emergentes das protenas propriedades
qumicas e conformao, essenciais actividade biolgica. As diferenas de funes nas
protenas resultam de diferentes estruturas primrias, no entanto, pequenas alteraes pode
ocorrer sem que haja alterao da funo. Normalmente as estruturas primrias sofrem
alteraes ps-traducionais, que podem ser a modificao dos aminocidos, por fosforilao,
glicozilao, miristoilao, etc., a clivagem proteoltica e a adopo de outro tipo de estruturas.

a) C backbone (espinha C) demonstra como


o polipptido se pode dispor no menor volume
possvel.
b) O modelo ball and stick (bola e vara) revela
a localizao dos tomos
c) Ribbons (Fitas) enfatiza o modo
como as hlices- (vermelho) e os cordes- (azul)
esto organizadas na protena. Note-se que hlices
e os loops estabelecem ligaes entre as hlices e os
cordes.
d) Um modelo com a superfcie em
gua revela os numerosos grumos. As zonas com
carga positiva esto representadas a azul, sendo
representado a vermelho as zonas de carga
negativa.

A conformao de uma dada protena tal como encontrada na clula a realizar as


suas funes, apresentado actividade biolgica mxima, chamada forma nativa.

21
Exemplo: modificaes ps-traducionais da insulina. A insulina sintetizada como pr-
pro-insulina, que tem uma sequncia leader. Uma protease especfica cliva a sequncia leader
originando proinsulina que adquire a sua conformao 3D e forma as ligaes dissulfureto.
Outra protease especfica corta a cadeia originando insulina com duas cadeias polipeptdicas. A
conformao determinante para a actividade biolgica.

Para saber a estrutura primria necessrio avaliar ento a composio em


aminocidos e tambm a sequncia de aminocidos.

Propriedades emergentes so propriedades que resultam do facto de as molculas


estarem organizadas numa molcula s. So diferentes das iniciais. So fundamentais para a
actividade biolgica da protena.

Depois de uma protena ser removida do seu ambiente natural, fica exposta a diversos
factores, tais como pH, temperatura, enzimas degradantes e adsoro a superfcies.

Estrutura Secundria

So as estruturas regulares de enrolamento. estabilizada por ligaes de hidrognio.


H uma correlao entre a sequncia e a conformao, razo pela qual adquirem estruturas.

As rotaes em torno das ligaes adjacentes ligao peptdica e que so


caracterizadas pelos ngulos e originam dois tipos de estrutura secundria: as hlices e
as folhas .

Para a formao de hlices, a rotao d-se no mesmo sentido, para a formao de


folhas, os ngulos formados tm sinais contrrios. Tanto as hlices como as folhas so
estabilizadas por ligaes pontes de hidrognio que se estabelecem entre o oxignio do
carboxilo de umas ligaes e o hidrognio do grupo amina de outras ligaes. Nas hlices,
esses grupos pertencem mesma cadeia, mas nas folhas pertencem a cadeias diferentes.

Na conformao estendida, os ngulos e


so de 180.

As folhas pragueadas podem ser paralelas as cadeias esto dispostas paralelamente


no mesmo sentido; ou antiparalelas se as cadeias apresentarem sentidos opostos. So
tambm estabilizadoras por pontes de hidrognio, mas estas so estabelecidas por segmentos
polipeptdicos adjacentes de cadeias diferentes ou at da mesma cadeia, se esta j se tiver
dobrado.

22
Estrutura Supersecundria

Contm elementos da estrutura secundria. Os motivos mais comuns so o gancho de


cabelo e o loop .Na associao de folhas , um dos lados das folhas est virado para o
exterior e outro para o centro hidrfobo da protena. Os loops esto quase sempre em
contacto com a protena. O loop um motivo que se repete em muitas protenas
globulares.

Podem ter papis especficos na funo da protena como ligar um composto a um


substrato. Uma ou mais unidades da estrutura supersecundria podem fazer parte da
estrutura terciria de uma protena, mas nem todas as protenas tm unidades de estrutura
supersecundria.

Estas estruturas ocorrem porque permitem uma compactao da protena, o que


tende a minimizar o contacto das cadeias laterais hidrfobas com a gua. Normalmente as
hlices encaixam-se umas nas outras pelas suas convexidades, contribuindo assim para a
compactao da protena. As ligaes por pontes de hidrognio que se estabelecem ente os
grupos polares (CO e NH) das cadeias principais compensam a energia gasta para desvi-los da
interaco com a gua. Assim,as protenas s beneficiam destas conformaes se as hlices e
as folhas estiverem associadas entre si.

A formao de uma hlice um fenmeno cooperativo uma vez formado um passo


da hlice, os seguintes j tm molde para a sua orientao. Devido composio exclusiva em
L-aminocidos, existe uma tendncia para se enrolarem para a direita. Na conformao
helicoidal, todas as cadeias laterais dos aminocidos ficam no exterior da hlice, uma vez que
no cabem no seu interior devido ao facto de algumas se repelirem electrostaticamente e por
repulso esfrica, que acontece principalmente em cadeias muito compactadas. No que
respeita s folhas , um empacotamento antiparalelo favorecido, porque uma reverso de
180 tem menos custos energticos do que um loop de 360.

Estrutura Terciria

a estrutura que confere aspecto globular protena, a conformao tridimensional


fundamental para a actividade biolgica. o arranjo de todos os elementos no espao sem
considerar as relaes com molculas vizinhas.

Resduos de aminocidos muito distantes na sequncia podem encontrar-se muito


prximos devido a enrolamentos e formar, desse modo, regies indispensveis ao
funcionamento da protena, por exemplo, o centro activo das enzimas. As estruturas
supersecundrias contribuem para o enrolamento, mas no so, por si s, suficientes para
determinar o nvel tercirio da estrutura da protena. Assim, a este nvel de estrutura intervm
sequncias com estruturas secundrias no tipificadas sequncias random, que so
sequncias que se mantm mesmo se a protena for desnaturada, reconstituindo-se assim com
preciso.

So as interaces entre as cadeias laterais e entre elas e meio aquoso que


determinam um arranjo de tal forma que as cadeias hidrfobas se recolham no interior da

23
estrutura, enquanto que as hidrfilas se expem em contacto com o meio aquoso. A estrutura
terciria estabilizada por ligaes de diversos tipos: inicas, electroestticas, pontes de
hidrognio, interaces hidrfobas, covalentes, interaces Van der Walls e pontes de enxofre.

Os resduos polares que se encontram no interior esto envolvidos em pontes de H


com outros resduos. Os resduos com carga, geralmente, encontram-se na superfcie da
protena.

A classificao das estruturas secundrias baseia-se na sequncia de hlices e folhas


ao longo da cadeia polipeptdica.

Classificao dos diferentes tipos de estruturas tercirias


Estruturas Essencialmente hlices e poucas ou nenhumas Mioglobina
/ folhas Hemoglobina
Estruturas Principalmente ou exclusivamente folhas Imunoglobinas
/
Estruturas Alternncia entre hlices e folhas . Enzimas
/ Frequentemente as folhas formam um leque
rodeado por hlices .
Estruturas Hlices e folhas tm tendncia a ocupar regies Ribonuclease,
+ diferentes da cadeia polipeptdica Insulina e Lisozima.

Estrutura Quaternria

A estrutura quaternria corresponde a associaes quase sempre reversveis, por


ligaes fracas, entre as vrias cadeias polipeptdicas. Essas ligaes so ligaes de
hidrognio, inicas e Van der Walls.

A hemoglobina uma protena com estrutura quaternria, formada por quatro


subunidades, duas e duas , cada uma contendo um tomo de ferro na sua poro
profirnica. essencial para o transporte de gases como o oxignio e o dixido de carbono. Na
presena de concentraes elevadas de oxignio a hemoglobina pode ligar-se reversivelmente
a 4 molculas de oxignio; na presena de altas quantidades de H+ e dixido de carbono, o
oxignio libertado.

A estrutura quaternria frequente nas enzimas que regulam reaces-chave de


sequncias metablicas fundamentais, confere s clulas um nvel suplementar na regulao
de determinadas protenas funcionais, pois a associao destas estruturas permite clula
retardar ou parar, portanto, controlar a actividade dessas protenas.

24
Glcidos ou Hidratos de Carbono

Os glcidos so a principal fonte de energia nos organismos vivos, sintetizados pelas


plantas a partir de dixido de carbono, gua e energia solar. Constituem a estrutura e base dos
tecidos, lubrificantes e elementos de suporte do tecido conjuntivo e componentes dos cidos
nucleicos. Conferem especificidade e so elementos de reconhecimento presentes nas
membranas celulares.

A glucose a fonte universal de energia e tambm a preferida pelas clulas


humanas.

Oses

Podem ser classificadas em trioses, tetroses, pentoses, hexoses conforme o nmero de


tomos de carbono, bem como em aldoses e cetoses, dependendo da presena de um grupo
aldedo ou cetona.

Estrutura

As oses ou monossacridos possuem vrias funes lcool e


uma funo redutora: aldedo ou cetona, formando portanto, aldedo
ou cetonas. Consoante o nmero de carbonos so trioses, tetroses,
pentoses, hexoses e heptuloses.

Isomeria

Ismeros pticos ou enantimeros. Formas D e L, com um carbono C assimtrico. O


grupo OH encontra-se direita na forma D e esquerda na forma L. Todas as oses que
intervm no metabolismo apresentam configurao D. Nos polissacridos estruturais dos
vegetais intervm, por vezes, oses L.

Regra geral, a inverso da configurao em todos os carbonos assimtricos origina


uma relao de enantiometria, mas se a inverso ocorrer em apenas um carbono assimtrico
teremos uma relao de diasteroisomeria ou diasteromeria.

25
Estrutura Cclica

Em soluo aquosa, as molculas de oses encontram-se ciclizadas. Esta


ciclizao ocorre por eliminao de uma molcula de gua entre o OH que ficou
ligado ao carbono das aldoses ou cetoses (carbono 1 das aldoses ou carbono 2
das cetoses) e o OH ligado ao penltimo ou antepenltimo carbono da
estrutura, aparecendo um novo carbono assimtrico. Consoante a posio do
segundo OH envolvido, tratar-se- de uma forma piranose em forma de
hexgono, ou furanose em forma de pentgono. Resultam deste processo
estruturas designadas anmeros.

Reaco de Aldedos e Cetonas com lcoois

A juno de um aldedo com um lcool origina uma hemiacetal que d origem,


posteriormente, a um acetal e uma molcula de gua.

Por outro lado, a juno de uma cetona e um lcool formam um hemiacetal, que por
sua vez, d origem a um cetal e uma molcula de gua.

Diferentes tipos de oses

cidos e lactonas, alditis, desoxioses, osaminas, steres fosfricos

Ligao Glicosdica

As ligaes glicosdicas vo estar dependentes


do nmero de carbonos, o seja, podem existir tantas
ligaes quanto o nmero de carbonos. A ligao
glicosdica estabelece-se entre os grupos OH das oses,
com libertao de uma molcula de gua. O lcool
interage com o grupo hemiacetal, havendo eliminao
da molcula de gua e formao de uma ponte osdica.

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Dissacridos / Diholsidos

Constituem o produto da condensao de duas oses. So exemplos a maltose, a


sacarose e a lactose.

Os sidos podem ser holsidos (glicanas) cuja hidrlise origina apenas oses, ou
hetersidos (glicsidos) cuja hidrlise origina oses ou ligao de uma ose com um composto
de natureza no glucdica (aglcona).

Glucose + Galactose = Lactose

Glucose + Frutose = Sacarose

Glucose + Glucose = Maltose

Polissacridos / Polisidos

So oses ou derivados das oses que os constituem ligadas por uma ligao glicosdica e
que podem apresentar ramificaes. exemplo o amido e as dextrinas.

Homopolisidos Cadeias ramificadas ou no, constitudas apenas por um tipo de


monmeros. Celulose e glicognio.

Heteropolisidos Cadeias ramificadas ou no, constitudas por vrios tipos de


monmeros. Peptidoglicanos e glicosaminoglicanos (estruturais).

Os proteoglicanos so estruturas complexas constitudas por um ncleo proteico onde


se encontram ligados GAG (glcidos). So os componentes maioritrios no tecido conjuntivo
participando com o colagnio e a elastina na organizao da matriz extracelular. Contm
sempre uma osamina e um cido urnico. A ligao pode ser do tipo ou e o seu carcter
cido resulta dos grupos carboxlicos (cido hialurnico) ou sulfricos. Encontram-se
associados a uma cadeia peptdica.

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Estrutura Secundria

Celulose Cadeias muito longas de unidades de D-glucose ligado por ligaes


glicosdicas -1,4.

Glicognio Cadeias formadas apenas por molculas de glucose ligadas por ligaes -
1,4 e -1,6, predominando as ltimas e como consequncia h muitas ramificaes.

Homopolissacridos / Homoglicanos

Amido e glicognio. Cadeias com ligaes -1,4 ou -1,6.

Amido Constitudo por amilose e amilopectina, unidas por ligaes -1,4 ou -1,6.

Glicognio Polissacardeo de reserva animal. Tem uma estrutura altamente


ramificada com ligaes -1,4 ou -1,6, mas tambm ligaes -1,4 que s so digerveis pelos
microrganismos do intestino.

Hetersidos

Ligao de uma ose com um composto de natureza no glucdica (aglcona). Existem


em drogas, especiarias e tecidos animais. A aglcona pode ser um lcool como o metanol,
glicerol, esterol ou uma base como por exemplo a adenina.

As glicoprotenas resultam da associao por ligaes covalentes de uma protena com


um grupo glucdico que se designa glicano, atravs de uma ligao n-glicosdica. So
importantes como determinantes antignicos pores da molcula antignica que os
anticorpos reconhecem e qual se ligam .

Os oligossacridos so importantes marcadores celulares e resultam da formao de


pequenas cadeias com uma grande variedade de estruturas que diferem no tipo de ligao, em
diferentes oses e ramificaes. Estes reconhecem resduos aos quais se podem ligar, sendo
portanto fundamentais nos processos de reconhecimento celular, sendo reconhecidos por
vrus, toxinas, bactrias, etc.

Os glicolpidos (gangliosidos) so glicanos com ligao do tipo O-glicosdica. Exemplo:


antignios dos grupos sanguneos ABO, importantes em processos imunitrios.

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Lpidos

Compostos com uma cadeia aliftica (CH2) com pelo menos oito tomos de carbono.
Classe heterognea de molculas, que tm em comum o facto de serem relativamente
insolveis em solues aquosas, mas solveis em solventes apolares.

So importantes constituintes da dieta e so armazenados no tecido adiposo, onde


tambm servem como isolante trmico nos tecidos subcutneos e em redor de determinados
rgos. Os lpidos no polares servem tambm como isolantes elctricos permitindo a
passagem do impulso nervoso pelos circuitos mielinizados.

No so polmeros, na medida em que no so constitudos por unidades mais simples.

Constituem steres de cidos gordos com lcoois, que podem conter grupos
adicionais. Constituem uma fonte de energia Gorduras e leos, sendo elementos estruturais
das membranas biolgicas. Existem fosfolpidos, glicolpidos e colesterol e podem actuar como
cofactores enzimticos, transportadores e electres, ncoras na membrana, agentes de
emulsificao, hormonas, mensageiros intracelulares ou pigmentos.

Classificao

Os lpidos podem ser classificados em simples, que por hidrlise originam um lcool e
um ou mais cidos gordos ou complexos, que por hidrlise originam um lcool, cidos gordos,
cido fosfrico, oses

Dos simples fazem parte as gorduras steres dos cidos gordos com glicerol -, os
leos gorduras lquidas e as ceras steres de cidos gordos com lcoois monodricos com
peso molecular mais elevado.

Dos complexos fazem parte os fosfolpidos lpidos que contm, alm dos cidos
gordos e do lcool, um grupo fosfrico glicolpidos lpidos com cido gordo, esfingosina e
glcidos lipoprotenas, etc.

Ainda h os lpidos precursores e derivados, onde se incluem os corpos cetnicos,


hormonas e vitaminas lipossolveis.

O colesterol e os steres de colesterol so considerados lpidos neutros por no


possurem carga.

cidos Gordos

A expresso cido gordo designa qualquer cido


monocarboxlico aliftico que possa libertar-se por hidrlise a partir
de leos ou gorduras naturais. Os mais importantes e frequentes so
monocarboxlicos de cadeia linear no ramificada, com nmero par
de tomos de carbono, entre 4 a 30. Podem ser saturados (sem
ligaes duplas), insaturados (com ligaes duplas) e por vezes
hidroxilados, existindo em pequenas quantidades no estado livre.

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Constitudos por um grupo carboxil e uma cadeia hidrocarbonatada, possuem uma
parte hidrfila (carboxil) e outra hidrfoba (cadeia hidrocarbonatada). So compostos com um
elevado estado de reduo que libertam muita energia por oxidao a CO2 e H2O, constituindo,
portanto, uma importante fonte de energia.

As suas propriedades fsicas so dependentes do comprimento da cadeia e do grau de


insaturao. A solubilidade dada pelo grupo carboxlico, sendo tanto maior quanto mais
curta for a cadeia dos cidos gordos. Quanto maior a cadeia, maior o ponto de fuso.

Classificao

Classifica famlias de cidos gordos quanto posio da ltima ligao dupla em


relao do carbono terminal (metil). So -x, sendo x a posio da dupla ligao.

Nmero total de carbonos

x Algarismo da posio da dupla ligao.

x Posio da dupla ligao

Ex. 18:2 (9, 12) Tem 18 carbonos e duas ligaes duplas, entre C9 e C10 e C12 e C13.

Ex2. cido linoleico 18 : 3 (9, 12) e = 6

O 6 porque a distncia que vai desde a ltima ligao dupla (12) at ao


final da cadeia (18) ou grupo metil.

cidos gordos saturados terminam em anico e os insaturados com ligaes duplas


em enico.

cidos Gordos Insaturados

Os cidos gordos insaturados podem ser divididos em cidos monoinsaturados,


contendo apenas uma dupla ligao, cidos poliinsaturados, contendo duas ou mais duplas
ligaes. Os eicosanides so compostos derivados dos cidos gordos eicosa (carbono 20)
compreendendo os prostanides (prostaglandinas, prostaciclinas e tromboxanos),
leucotrienos, lipoxinas. Os eicosanides tm funo de sinalizao.

Triglicerol ou triglicrido

So compostos simples em que o glicerol (lcool) possui trs ligaes


ster a cidos gordos. Molculas no polares, hidrfobas e portanto
insolveis em gua. Formam reservas metablicas, existindo como gotculas
no citoplasma de clulas especializadas (adipcitos). O tecido adiposo serve
tambm como isolador trmico e elctrico. Possuem, portanto, uma funo
principal de fonte de energia.

30
Elementos estruturais das membranas biolgicas

As membranas biolgicas so constitudas por uma dupla camada lipdica, que separa e
individualiza as clulas e organitos celulares e contm glicerofosfolpidos, esfingolpidos e
esteris. A dupla camada devida ao carcter anfiptico destes lpidos: as cabeas hidrfilas
polares, por serem solveis na gua encontram-se na poro exterior da membrana, enquanto
que as caudas apolares ou hidrfobas se encontram no seu interior, em relao umas s
outras.

Glicerofosfolpidos / Fosfoglicridos

Os glicerofosfolpidos podem ter vrios substituintes em R3 que trazem molcula


cargas adicionais que contribuem para as propriedades da superfcie membranar.

Para alm de constituintes das membranas celulares so agentes de emulsificao e


molculas sinalizadoras.

Alguns fosfolpidos podem ter ligaes ster ao glicerol. So exemplos os


plasmalogeneos, abundantes na mielina, tecido cardaco e algumas bactrias, e o factor de
activao das plaquetas.

Esfingolpidos

Os mais vulgares so o glicerol e a esfingosina. Constitui elementos


estruturais das membranas biolgicas. A ceramida (verde na figura) a molcula base
de todos os esfingolpidos: esfingomielinas, gangliosidos e glicolpidos.

Vitaminas Lipossolveis

As vitaminas lipossolveis so a vitamina A, D, E e K.

So terpenos (sintetizados pela condensao de unidades de isopreno). O colesterol


sintetizado a partir do esqualeno que um terpeno linear de seis unidades. So cofactores,
molculas sinalizadoras e pigmentos.

Esteris e esterides

Os esterides so compostos que apresentam na sua estrutura o ncleo ciclopentano-


fenantrena ou um ncleo dele derivado.

31
Os esterides so esterides hidroxilados.

O esterol vegetal o ergostenol e o animal o colesterol.

O colesterol importante na medida em que precursor dos cidos biliares,


hormonas, vitaminas

Acetil CoA cido mevalnico Isopentil pirofosfato Esqualeno Colesterol

- Quilomicra / VLDL / LDL / HDL

As lipoprotenas so transportadoras de colesterol.

32
Enzimologia
Enzimas

Enzimas so biocatalisadores presentes nas clulas e tecidos, que tm como funo a


acelerao das reaces qumicas que a se processam, providenciando uma via alternativa
para a reaco dos mesmos reagentes, produtos e equilbrio. A clula est organizada em
estruturas subcelulares individualizadas que esto complementadas com o conjunto de
enzimas relacionadas com a funo que exercem.

Praticamente todas as enzimas so protenas globulares. Podem ter pesos moleculares


muito diversos, serem monomricas ou oligomricas. As enzimas podem ser inteiramente
proteicas ou possurem uma parte proteica (apoenzima) e outra no proteica (cofactor).

Isoenzimas so enzimas fisicamente distintas mas com funes catalticas idnticas.


Diferentes tecidos podem ter isoenzimas e estas terem afinidades diferentes para o substrato.
Variam ao nvel da estrutura quaternria. exemplo a amilase salivar e a amilase pancretica.

Cofactores e Coenzimas

A parte proteica da enzima incapaz de catalisar reaces sozinha.

As coenzimas, pequenas molculas osmticas, actuam de duas formas: atravs de


reaces redox, por transferncia de protes e electres (NAD, NADP, FAD, FMN) e por
transferncia de grupos, como o ATP, coenzima A, tiamina difosfato, piridoxal fosfato, biotina,
tetrahidrofolato, cobalamida e lipoamida. Algumas coenzimas fazem parte do centro activo da
enzima, outras, encarregam-se da transferncia de hidrognio e electres, grupos funcionais e
radicais. So ajudantes da reaco. Tm papel na estabilizao da enzima-substrato.

Os co-factores podem ser ies metlicos ajudam a estabilizar as cargas nas


molculas, sendo tambm transportadores de electres, atravs da alterao do estado de
oxidao e reduo; grupos prostticos ou co-enzimas. O substrato e o co-factor tm de ficar
prximos e rigorosamente posicionados.

NAD (Nicotinamida-Adenina-Dinucletido) e NADP (Nicotinamida-Adenina-Dinucletido-Fosfato)

So coenzimas de numerosas desidrogenases. Filtram o hidrognio proveniente de um


substrato AH2 originando, respectivamente, NADH + H ou NADPH + H. Porm, podem no
decurso de outra reaco catalisada por uma segunda desidrogenase ceder o H a um substrato
B que ento reduzido a BH2, enquanto que a coenzima reoxidada ao estado NAD ou NADP.

As designaes NAD e NADP destas coenzimas decorrem das suas estruturas serem
constitudas a partir de dois nucletidos que possuem como bases azotadas a nicotidamida e a
adenina, respectivamente. O NADP apenas se diferencia do NAD por possuir mais um grupo
fosfato na sua extremidade. Derivam do cido nicotnico ou da vitamina PP.

FMN (Flavina Mononucletido) e FAD (Flavina-Adenosina-Dinucletido)

33
Derivam da riboflavina ou da vitamina B12. Rigorosamente, o FAD no integra na sua
estrutura dois nucletidos, j que associado base azotada flavina no temos um acar como
a ribose, mas um lcool derivado daquela ose o ribitol. Quando reduzidos originam FMNH2.

Classificao das enzimas

Classificao das enzimas


Oxiredutases Transferncia de electres
Transferases Transferncia de grupos funcionais (grupos amina ou fosfato, por exemplo)
Hidrolases Clivagem de ligaes por transferncia de uma molcula de gua
Liases Reaces de adio ou remoo de gua, amnia ou dixido de carbono
Isomerases Catalisam alteraes numa molcula
Ligases Catalisam a ligao de duas molculas, com gasto de ATP

Enzimas vs Catalisadores enzimticos

Os catalisadores so molculas que aumentam a velocidade das reaces, por


diminuio da energia mnima de activao, mas no modificam as propriedades do sistema
reaccional, ou seja, no alteram a constante de equilbrio e no permitem que ocorra uma
reaco que no seja possvel do ponto de vista termodinmico, a menos que seja fornecida a
energia necessria. Para alm destas propriedades, outra caracterstica muito importante
que se mantm ntegros no final da reaco que catalisaram.

As reaces catalisadas por enzimas so aceleradas por factores que podem ir de 106 a
1012. Estes factores so algumas ordens de grandeza superiores aos de outro catalisador
qumico. As reaces enzimticas ocorrem em condies moderadas, compatveis com a vida
celular e possuem alta especificidade em relao aos substratos e aos produtos, sendo dotadas
de uma capacidade de regulao.

Cintica enzimtica

Reaco de primeira ordem

A velocidade aumenta com o aumento da concentrao.

Reaco de segunda ordem

Dois substratos do origem ao produto. A velocidade de transformao o resultado


da multiplicao da constante de velocidade com as concentraes dos substratos.

34
O que determina a velocidade da reaco?

As molculas precisam de ocasionalmente atingir um certo estado energtico que lhes


permita atingir o estado de transio.

O estado de transio um estado pelo qual os reagentes


tm que passar para reagir e representa os reagentes no seu
estado activado. Embora temperatura ambiente, as molculas
possuam energia e possam colidir, a maioria no tem energia
suficiente para ultrapassar a barreira energtica, pelo que, a
reaco lenta.

A velocidade da reaco est relacionada com a energia de activao energia


necessria para que reagentes e produtos sejam interconvertveis.

Velocidade da reaco

possvel alterar a velocidade da reaco variando a concentrao dos reagentes ou a


temperatura. Esta constante no corpo humano e estados patolgicos como a febre ou
hipotermia causam alteraes indesejveis no metabolismo. A variao da temperatura
utilizada em casos particulares como a manuteno de rgos para transplante. Outra maneira
de alterar a velocidade da reaco utilizando um catalisador enzimas.

O catalisador baixa a barreira de energia para a reaco permitindo que uma fraco
maior de molculas tenha energia suficiente para atingir o estado de transio e
consequentemente aumenta a velocidade da reaco, em ambos os sentidos.

Temperatura

O aumento da temperatura implica o aumento da energia,


aumentando, por sua vez, a probabilidade das molculas passarem a
barreira, mas este aumento no pode ser exagerado seno ocorre a
desnaturao das protenas.

As enzimas possuem temperaturas ptimas de actuao.


Normalmente, as enzimas humanas possuem uma temperatura ptima de 37C, a
temperatura do corpo humano, na qual o rendimento da reaco que a enzima catalisa
mximo. Normalmente, a velocidade da reaco aumenta com o aumento da temperatura,
mas s at um determinado valor, a partir do qual existe risco de desnaturao da protena.

35
pH

Valores de pH extremos modificam irreversivelmente a


estrutura da enzima devido a desnaturao da protena ou
modificao da ligao entre a apoenzima e a coenzima, ou at mesmo
alterando o estado de ionizao do substrato.

O pH tem influncia na reaco enzima-substrato e na catlise,


em particular devido a modificaes da dissociao (ionizao) dos
aminocidos do centro activo.

Concentrao do Substrato

Em muitas reaces catalisadas por enzimas, a


velocidade da reaco varia com a concentrao de substrato
presente, da forma representada, ou seja, a velocidade
mxima no incio, mas tende a estabilizar, tornando-se
independente da concentrao de substrato (cintica de
Michaelis-Menten).

A saturao corresponde ao momento em que todos os centros activos se encontram


ocupados.

Medio das velocidades de reaco

Paragem das reaces a tempo fixo (ensaios com dois pontos) e medio da
concentrao do substrato ou produto em dois tempos diferentes.
Ensaios em contnuo onde h medio das velocidades em funo do tempo
(cinticas).

Pode-se aumentar o nmero de enzimas numa clula?

Sim, basta aumentar RNA e a transcrio aumenta. As enzimas so, na sua maioria,
protenas. um mecanismo fisiolgico de adaptao da clula.

Catlise Enzimtica

A catlise enzimtica a sequncia dos eventos na catlise, considerando apenas um


substrato e um produto. As enzimas no se alteram como resultado da reaco nem alteram
as propriedades termodinmicas do sistema. So fases da catlise:

- Ligao da enzima e do substrato (reagente da reaco), formando um complexo


enzima-substrato

- Catlise (formao do produto)

- Libertao do produto ou produtos e retorno da enzima sua conformao inicial.

36
A reaco inicia-se com a ligao da enzima ao substrato formando o complexo
enzima-substrato. O centro activo a regio da enzima que liga os substratos e contm os
resduos de aminocidos e outros grupos qumicos que participam directamente na catlise.
uma pequena parte da molcula, normalmente uma fenda, que contm um micro-ambiente
prprio. O arranjo espacial do centro activo, contendo todos os grupos qumicos importantes
para a ligao do substrato confere especificidade enzima, que possui uma forma
complementar com o substrato. Os substratos ligam-se enzima por mltiplas ligaes no
covalentes s cadeias laterais dos aminocidos que formam o centro da ligao.

O centro activo tem normalmente uma tolerncia muito pequena que determina a sua
especificidade, podendo mesmo aceitar apenas um dos ismeros do substrato
estereoespecificidade. Compreende o local de fixao, que se combina com o substrato por
ligaes fracas, e o centro cataltico, que actua sobre o substrato levando-o a sofrer a reaco
qumica. Nas enzimas que actuam atravs de um cofactor que a estrutura responsvel pela
transformao estrutural do substrato, este encontra-se ligado enzima num local muito
prximo do centro cataltico. Molculas que diferem do substrato pelo formato ou grupos
funcionais no conseguem ligar-se enzima de uma forma produtiva.

Assim, a enzima pode possuir diversos tipos de ligao:

- Absolutamente especfica: reage apenas com o substrato

- Especfica para molculas com o mesmo grupo funcional

- Especfica para determinadas ligaes

- Estereoespecfica.

Modelo do encaixe induzido

Alterao da conformao induzida na hexocinase, pela ligao da glucose (aceita


hexoses como substrato).

O modelo chave-fechadura no aceite.

Actividade Enzimtica

Turnover nmero de moles de substrato transformado (ou produto formado) por


mole de enzima e por unidade de tempo.

Unidade Enzimtica quantidade de enzima que catalisa a transformao de 1


micromole de substrato num minuto, a uma temperatura de 25, nas condies ptimas de pH
e concentrao de substrato.

37
Cintica das reaces catalisadas por enzimas Modelo de Michaelis-Menten

Neste modelo assumido que:

- So consideradas apenas velocidades iniciais e praticamente no varia a concentrao de


substrato valido apenas para o incio da reaco.

- O complexo enzima-substrato est em estado estacionrio,


ou seja, reagiu com o substrato, que ainda existe em
concentraes maiores que a da enzima e k2 > k-1.

- Em condies de saturao (excesso de substrato) toda a


enzima se encontra na forma do complexo enzima-substrato
e nestas condies a velocidade de formao dos produtos
mxima.

- A velocidade da reaco proporcional concentrao de enzima, sendo mxima quando


toda a enzima se encontrar ligada ao substrato.

Determinao do Kw

Equao de Michaelis-Menten

38
O KM uma medida da afinidade da enzima para o substrato, sendo que o valor de K M
igual concentrao de substrato para a qual a velocidade metade da velocidade mxima.
Se o KM for elevado, a afinidade da enzima para o substrato baixa, uma vez que precisa
grande quantidade de substrato para atingir uma velocidade igual velocidade mxima. O KM
mede o valor de concentrao de substrato que corresponde ao momento em que se atinge
metade da velocidade mxima.

O valor de KM caracterstico de uma reaco entre uma dada enzima e um dado


substrato. Este e a velocidade mxima podem ser influenciados por factores como o pH e a
temperatura.

O K2 ou Kcat mede a velocidade do processo cataltico turnover.

Expresso Linear da equao de Michaelis-Menten Equao de Lineweaver-Burk

Invertendo ambos os membros da equao de Michaelis-Menten e isolando 1/v no


primeiro membro podemos transformar a equao em:

Se na equao fizermos y=0, ou seja, 1/v = 0, obtemos o


valor de -1/KM; se fizermos 1/[S] = 0, obtemos o valor
correspondente intercepo com a ordenada: 1/Vmax.

Inibio Enzimtica

Inibidores so compostos que afectam as reaces enzimticas por se associarem


enzima influenciando a ligao com o substrato ou o desempenho da enzima.

Inibidores Reversveis

Formam ligaes fracas, no covalentes, e dissociam-se facilmente. A enzima s est


inibida quando h inibidor presente.

39
Inibidores Competitivos

Anlogos estruturais do substrato que competem com este para ligao ao centro
activo. possvel superar a inibio aumentando a concentrao de substrato. Qualquer
anlogo estrutural do substrato pode intervir como inibidor competitivo.

As sulfonamidas so um exemplo. Todos os microrganismos que sintetizam o seu


prprio cido flico e no tm forma de o absorver a partir do hospedeiro. A sntese de cido
flico (coenzima) dependente do cido p-aminobenzico (PABA). As sulfonamidas inibem por
competio um dos passos da via de sntese. Outro tipo de inibio competitiva a inibio
pelo produto.

O inibidor promove a dissociao de E-S, aumentando o KM, uma vez que preciso
maior quantidade de substrato para que metade da velocidade mxima seja atingida. Na
presena de excesso de S (substrato), o equilbrio deslocado tambm para E-S, mas como a
inibio anulada pelo excesso de substrato, a Vmx no modificada.

Inibidores No Competitivos

Inibidores que se ligam enzima em locais distintos do centro activo, no competindo


com o substrato, no diminuindo a sua aco por adio de um excesso de substrato. Assim, a
enzima pode ligar-se ao mesmo tempo ao substrato e ao inibidor no-competitivo e dado que
o inibidor se liga num local diferente do centro activo, a enzima pode continuar a ligar a si o
substrato. No entanto, como a conformao do centro activo de algum modo afectada pela
presena do inibidor, essa ligao efectua-se com menor facilidade, pelo que a velocidade da
reaco e em particular a velocidade mxima diminui. Em termos dos equilbrios que se
estabelecem, o inibidor no modifica o equilbrio de formao do complexo E-S, pelo que o KM
no varia. Na presena de excesso de S, uma parte de substrato fica bloqueada na forma E-S-I,
pelo que a velocidade da reaco diminui. Quanto maior a quantidade de inibidor, maior ser a
diminuio da velocidade da reaco.

O io fluoreto (F-) um exemplo de inibidor no competitivo. Esta reaco da via


glicoltica catalisada por uma enolase que requer ies Mg2+ para estar activa. Na presena de
ies F- este forma complexos com os fosfatos (ies fosfofluoratos FPO32-) que se ligam aos ies
magnsio inibindo a reaco.

Inibidores Irreversveis

Ligam-se covalentemente enzima, perto do centro activo ou modificam


covalentemente o centro activo.

Exemplos:

- Aco de compostos organofosfatos nos grupos hidroxilserina.

- O DPF inibe a acetilcolinesterase, impedindo a hidrlise da acetilcolina e levando


paralisia muscular.

40
Inibidores Suicidas

So compostos inactivos que aps modificao pela enzima, no processo normal de


catlise, se tornam inibidores formando um complexo estvel com a enzima. A penicilina (e
derivados) alterada pela transpeptidase que forma uma ligao a um carbono do anel -
lactmico, abrindo-o e formando um complexo peniciloil-enzima, estvel, que inactiva a
enzima.

O fluorouracilo (usado em quimioterapia) convertido na clula em desoxinucleosido


monofosfato (FdUMP), que se liga e inactiva a sintetase do dTMP, impedindo a biossntese de
nucletidos.

Enzimas Alostricas

So enzimas cuja actividade pode ser modulada pela ligao reversvel de efectores
alostricos funcionando como enzimas reguladoras das vias metablicas. Contm um local
alostrico especfico para a ligao de efectores. Estruturalmente, so enzimas com duas ou
mais subunidades idnticas (protmeros), formadas por vrias cadeias polipeptdicas, numa
estrutura quaternria, que por induo dos efectores (ou do prprio substrato) podem
alternar em mais do que uma conformao. Cada protmero possui trs locais de fixao para
o inibidor, para o activador e outro para o substrato.

41
Existem dois estados conformacionais para as enzimas que esto em equilbrio: um
estado cataltico (activo), no qual a conformao da enzima permite-lhe combinar-se ao
substrato e ao activador, e um estado inibido, onde apenas o inibidor se consegue ligar
enzima. A transio entre os dois estados designada transio
alostrica.

Os efectores so molculas que se ligam ao local alostrico


promovendo alteraes conformacionais na enzima, podem ser
activadores ou inibidores. A regulao alostrica de uma sequncia
metablica pode ser efectuada por um inibidor ou activador alostrico
de outra sequncia. Trata-se, porm, de um tipo de regulao especfico
de algumas vias.

As enzimas alostricas no seguem a cintica de Michaelis-Menten.

Regulao da actividade enzimtica

A eficincia com que cada enzima deve operar deve ser controlada em funo da
disponibilidade de substrato, da utilizao dos produtos e das necessidades gerais da clula e
do organismo. A regulao da actividade enzimtica essencial para a coordenao e
integrao dos processos metablicos em resposta a alteraes ambientais, para o
crescimento e diferenciao.

O controlo de cada via metablica feito regulando a actividade de enzimas que so


exclusivas da via e que catalisam os passos limitantes (< Vmax) ou comprometedores
(irreversveis) da via. Essas enzimas so reguladas de forma a que cada via funciona apenas em
funo das necessidades fisiolgicas. Esta regulao pode ser feita a vrios nveis:

- Compartimentao. Controlo sobre o acesso ao substrato.

- Controlo sobre a actividade enzimtica por enzimas reguladoras, atravs de


moduladores alostricos (regulao feedback), modificao covalente ou clivagem proteoltica
(zimognios activados por protelise).

- Controlo sobre a quantidade de enzima, numa regulao a longo prazo, ou o controlo


sobre a expresso dos genes. Tempo de vida curto. Sntese de novo.

42
A regulao da actividade enzimtica muito importante para que possa haver
poupana de energia, mas tambm como forma de segurana, regulando a quantidade de
produtos que em excesso se podem tornar txicos (actuando como inibidores noutros locais,
por exemplo).

Inibio Retroactiva

Permite suspender a sntese de um composto que j no utilizado pela clula, o que


se traduz numa economia para o organismo, especialmente por se tratar de processos que
requerem energia.

Modificao Covalente

A estratgia geral consiste no reconhecimento de uma hormona por parte de um


receptor da clula-alvo que envia um sinal intracelular atravs de um segundo mensageiro,
activando protenas cinases sensveis ao sinal, promovendo a modificao covalente da
enzima-alvo.

A actividade da enzima regulada por modificaes de natureza covalente que se


conjugam com as interaces alostricas (no covalentes) e as ampliam. Tambm o controlo
do transporte atravs de canais membranrios e o das protenas-alvo frequentemente
realizado por alteraes deste tipo.

A situao mais frequente de regulao covalente ocorre em enzimas que podem ser
fosforiladas, reversivelmente a partir do ATP sobre um ou mais resduos de serina (e tambm
tirosina, embora com menor frequncia). Assim, algumas enzimas so activadas sob a forma
fosforilada, enquanto que outras so inactivadas sob esta forma. As fosforilaes so
catalisadas por protenas cinases e a remoo, por hidrlise do grupo fosfato por protena-
fosfatases.

Clivagem Proteoltica

Muitas molculas so sintetizadas na forma biologicamente inactiva (proenzima ou


zimogneo) enzimas proteolticas da digesto, que sofrem posteriormente uma hidrlise
limitada ruptura de um ou mais fragmentos peptdicos que modificam a estrutura da
molcula e a tornam activa.

A razo pela qual a eliminao de pptidos a partir de zimognios transforma a


protena numa enzima activa decorre de se verificar uma modificao da conformao da
molcula e determinados aminocidos que se encontravam distanciados podem aproximar-se
de modo a constituir o centro activo da protena enzimtica.

Estas enzimas so inactivadas por inibidores proteicos especficos.

43
Activao por Proteco da Enzima

Existem compostos que protegem as enzimas contra agresses qumicas, como as


oxidaes nas enzimas que contm cistena, comportam-se como activadores. o caso da
cistena e o glutatio, os quais protegem os grupos-SH actuando como antioxidantes,
oxidando-se a eles prprios em vez das cadeias laterais dos resduos de aminocidos.

Inibio por Excesso de Substrato

Se o substrato estiver presente em concentraes elevadas pode ocupar


anormalmente partes do centro activo da enzima, impedindo ou retardando a reaco. A curva
de Michaelis-Menten deslocada para valores elevados de concentrao de substrato.

44
Metabolismo Intermedirio
Metabolismo

Os seres vivos tm a capacidade de dirigir reaces qumicas e organizar molculas em


estruturas especficas, altamente organizadas. So capazes de promover o crescimento,
manuteno e duplicao. Necessitam, para tal, de obter energia a partir de molculas
precursoras. As fontes de energia disponveis so a energia luminosa radiao solar e a
energia qumica oxidao de compostos orgnicos. Os produtos da fotossntese so usados
como substrato na respirao celular.

Organismos heterotrficos, como os animais, usam compostos orgnicos como fonte


de carbono e energia, que canalizam para todos os processos necessrios manuteno da
vida.

Metabolismo o conjunto de todas as reaces qumicas que se processam num


organismo, que se encontram organizadas de forma coordenada em vias metablicas.

Catabolismo Conjunto das vias metablicas que levam degradao de


molculas complexas, libertando energia e molculas mais simples.

Anabolismo Conjunto das vias metablicas que levam degradao das


molculas complexas, libertando energia e molculas mais simples.

Vias Metablicas

A expresso via metablica refere-se a um conjunto definido de reaces qumicas,


sequenciais no tempo, que levam transformao de uma substncia noutra, implicando a
formao intercalar de um ou mais intermedirios.

45
As vias metablicas so reversveis

Tm um passo irreversvel no incio da via termodinmicamente muito favorvel


(G0), que serve para comprometer a direco do fluxo e assegurar a irreversibilidade. As
vias anablicas e catablicas usadas na interconverso de metabolitos so distintas. Diferem
pelo menos numa enzima (enzimas reguladoras). Permite regular de forma independente cada
uma das vias. A maioria das reaces esto prximas do equilbrio. Pode ser comum s vias
catablicas e anablicas. O fluxo depende da lei da aco das massas (concentrao do
substrato/produto).

As vias metablicas so compartimentadas

O que permite maior controlo dos processos nos organitos e em diferentes tecidos.

As vias metablicas so reguladas

O controlo do fluxo na via passa por controlar a actividade das vias reguladoras por um
dos vrios mecanismos, que fazem com que o estado metablico celular esteja
profundamente relacionado com o estado metablico do organismo.

- Regulao cintica atravs da disponibilidade do substrato;

- Alterao da actividade da enzima;

- Regulao alostrica por um intermedirio ou coenzima;

- Modificao covalente;

- Regulao gentica que regula o nvel de enzimas alterando a sua velocidade de


sntese ou degradao mecanismo adaptativo (lento).

Termodinmica

Os sistemas vivos necessitam constantemente de obter energia. A energia contida nos


nutrientes obtidos na dieta libertada de forma controlada atravs de reaces de oxidao-
reduo, sendo que a energia livre contida nos nutrientes libertada atravs das reaces
redox, e conservada como ATP, e a energia livre contida nos nutrientes que foi libertada
atravs de reaces redox e conservada como ATP pode ser utilizada para levar a cabo
biosstneses ou outros processos endergnicos.

A Primeira Lei da Termodinmica diz que a energia total do universo permanece


constante. Assim, os sistemas biolgicos podem interconverter as vrias formas de energia,
trocar energia com o exterior, mas no a podem criar nem destruir. As trocas de energia
podem ser efectuadas sob a forma de trabalho (W) ou calor (Q).

As reaces qumicas so acompanhadas por variaes de energia, existindo ganho ou


perda de energia durante a reaco. A entalpia da reaco a variao da energia interna em
condies de presso constante (condies usuais das reaces nos seres vivos). Uma variao
negativa da entalpia (H<0) favorece a reaco, pois diminui a energia interna. exotrmica.
No d indicao se a reaco ocorre espontaneamente.

46
A Segunda Lei da Termodinmica enuncia que todos os processos tendem a
prosseguir no sentido do aumento da entropia do universo. A entropia (S) uma medida do
grau de desordem do sistema. Uma variao positiva da entropia (S<0) favorece a reaco.

Os organismos funcionam a temperaturas e presso constantes e, por isso, a energia


resultante das reaces qumicas a energia livre de Gibbs, G.

G a variao de energia livre durante a reaco e corresponde parte da energia


total libertada que est disponvel para realizar trabalho.

- Se a transformao que ocorre liberta energia livre (G<0), exergnica.

- Se a transformao que consome liberta energia livre (G>0), endergnica.

Processos favorveis (espontneos) so aqueles onde ocorre um decrscimo da


energia livre (G<0). O valor de G d informao sobre se uma reaco em dadas condies
se realiza, mas no d qualquer informao sobre a velocidade da reaco.

G Caracterizao do Processo
Negativo Favorvel Irreversvel
Zero Equilbrio Reversvel
Positivo Desfavorvel O processo inverso favorvel

Durante os processos metablicos, os organismos vivos mantm ou aumentam a sua


complexidade e organizao (S<0). So sistemas abertos que trocam energia e matria com a
vizinhana. A ordem e a organizao possvel por haver extraco de energia dos nutrientes
(ou energia solar) e libertao de calor e entropia para a vizinhana.

A G (variao da energia livre) nas reaces bioqumicas depende da concentrao


relativa dos substratos e produtos e ocorre quando a reaco procede do incio at ao
equilbrio.

No equilbrio, a reaco no espontnea em nenhum dos sentidos e o


G=0, ou seja, no existe variao da energia livre.

47
A energia contida nos nutrientes, contidos na dieta, libertada de forma controlada
atravs de reaces redox.

Nestas reaces h transferncia de electres ou de tomos de H de uma molcula


para outra. A tendncia de dada substncia para aceitar electres e ficar reduzida ou perder
electres e oxidar-se expressa como potencial redox (Eo). O potencial redox uma medida
da facilidade de remover electres de uma dada substncia quando comparada com a
facilidade de remover electres H2 (Eo = 0).

O2 + 2H+ + 2e- H20

NAD+ + H+ + 2e- NADH

NADP+ + H+ + 2e- NADPH

Compostos vidos de electres reduzem-se facilmente, havendo outros compostos


com forte tendncia a oxidarem-se.

O fluxo de electres ser do par redox com o potencial mais negativo par ao par com o
potencial mais positivo. A energia livre da reaco redox pode ser calculada pela equao:

Uma reaco de redox onde haja transferncia de electres para um composto de


potencial mais positivo liberta energia livre.

Coenzimas utilizadas no Metabolismo

No metabolismo, muitas reaces redox esto acopladas s coenzimas NAD, NADP e


FAD. Os electres obtidos dos nutrientes e dos intermedirios metablicos so transferidos
para o NAD+, FAD e NADP+, que iro ceder os seus electres ao aceptor final oxignio. As
enzimas envolvidas neste processo so desidrogenases.

48
As coenzimas so muitas vezes utilizadas, no laboratrio, para seguir as reaces e
determinar actividades enzimticas. O NAD+ e o FAD existem em quantidade limitada e tm de
ser recicladas. Tm um papel de intermedirios redox. A energia das coenzimas reduzidas
recuperada usando o O2 como aceitador final de electres.

A transferncia das coenzimas para o O2 indirecta, feita atravs de uma srie de


protenas transportadoras de electres que existem organizadas por afinidade electrnica
crescente, na membrana interna da mitocndria.

ATP e o Ciclo do ATP

A energia livre contida nos nutrientes libertada atravs das reaces redox que
ocorrem na cadeia de transporte de electres e conservada como ATP.

A energia necessria s reaces endergnicas favorecida pelas reaces de


degradao exergnicas, porm, a transferncia de energia no directa, sendo portanto
necessria a interveno de um composto intermedirio formado custa da energia libertada
pelas reaces exergnicas e que, sempre que for necessrio, se hidrolise ruptura de ligao
entre dois grupos fosfato, de modo a fornecer energia necessria s reaces endergnicas.

Formao do ATP

O ATP formado nos organismos vivos por fosforilao do ADP conjugada com
reaces de oxidao-reduo que fornecem a energia necessria. Essas fosforilaes ocorrem
nas transferncias de electres pela cadeia respiratria das clulas aerbias, onde o oxignio
o aceitador final de electres, isto , o oxidante. A fosforilao do ADP em ATP ocorre tambm
nas clulas em anaerobiose, embora com muito menor rendimento.

A molcula apresenta trs ligaes P-O:

49
- Uma ligao ster, cuja hidrlise acompanhada de uma variao de energia livre
padro de Go -2,5 kcal/mol, correspondente reaco AMP + H2O Adenosina + Pi

- Duas ligaes fosfoanidrido ou pirofosfato, cuja hidrlise acompanhada por uma


grande diminuio da energia livre, cerca de -7,5 kcal/mol para cada uma das reaces: ATP +
H2O ADP + Pi e ADP + H2O AMP + Pi

Em clulas normais, a concentrao de ATP mantida em valores relativamente


constantes. Quando o ATP hidrolisado em ADP + Pi os processos de re-fosforilao do ATP,
como por exemplo a respirao celular, repem-no. Se os valores de concentrao de ATP no
forem repostos, a clula perde a capacidade de realizar as suas funes e de se manter viva.

Outros Compostos com Elevado Potencial de Transferncia de Fosfato

Fosfocreatina, Acetil-CoA, entre outros

A energia livre contida nos nutrientes que foi libertada atravs das reaces redox e
conservada como ATP, pode ser utilizada para levar a cabo biossnteses ou outros processos
endergnicos.

Acoplamento Energtico: reaces com ATP como um intermedirio comum,


catalisadas por enzimas espeficas. A energia livre libertada pela hidrlise do ATP tem de ser
suficiente para conduzir a segunda reaco. O valor de G das reaces acopladas a soma
dos G das reaces individuais.

50
Modelo Mecnico do Acoplamento Energtico

Etapas do Catabolismo

Etapa 1 Hidrlise dos nutrientes em pequenas subunidades

No h produo de ATP e realizada pelo aparelho digestivo.

Glndulas Salivares: amilase digesto do amido

Estmago HCl e Pepsina protenas

Pncreas Enzimas proteolticas e lipases protenas e lpidos

Fgado e Vescula Sais biliares emulso de gorduras

Intestino Delgado Continuao da degradao das macromolculas com produo de


aminocidos, hexoses, cidos gordos e glicerol que sero ento transportados para o sangue.

Etapa 2 Catabolismo de pequenas subunidades at formao de Acetil-CoA

H um pequeno aproveitamento de energia com produo de ATP (fermentao)


maioritariamente realizada no citoplasma das clulas.

51
Etapa 3 Oxidao completa de Acetil-CoA at formao de CO2 e H2O

Libertao de grande quantidade de energia que usada para produo de ATP


(respirao celular). Realizada na mitocndria. Aerbia.

Gliclise

52
Entrada de Glucose nas Clulas

Aps contacto entre a insulina e os seus receptores na membrana, estes enviam um


sinal aos receptores GLUT4 que promovem a entrada de glucose na clula, onde ir entrar em
processos como a sntese de glicognio, lpidos e sntese de protenas.

Gliclise

A gliclise uma via metablica central do metabolismo da glucose e outros acares.


Ocorre no citoplasma de todas as clulas e a nica via para obter energia em alguns tecidos e
tipos de clulas animais como eritrcitos, medula renal, crebro e espermatozides. Pode
ocorrer em anaerobiose (fermentao) ou aerobiose (independente da presena de O2).
Reaco global (aps 10 reaces sucessivas):

Glucose + 2ADP + 2NAD+ 2 Piruvato + 2 ATP + 2 NADH

A gliclise requer um investimento em ATP (energia) antes de ser produzido mais ATP
e NADH, o que divide a gliclise em duas fases a fase de investimento e a fase de gerao de
energia. Para se dar incio gliclise necessrio o consumo de 2 ATP.

Fase Preparatria ou de Investimento Energtico

Fosforilao da glicose e sua converso em gliceraldedo 3-fosfato.

53
1 Transformao de glucose a glucose 6-fosfato por aco da hexocinase numa
reaco praticamente irreversvel.

2 Reaco de isomerao com transformao de glucose 6-fosfato a frutose 6-


fosfato.

3 Reaco de fosforilao de frutose 6-fosfato a frutose 1,6-difosfato, pela enzima


fosfo-frutocinase-1

4 Ciso da frutose 1,6-difosfato a gliceraldedo 3-fosfato e di-hidroxiacetona fosfato


atravs de uma aldolase. O gliceraldedo 3-fosfato e di-hidroxiacetona fosfato so ismeros,
pelo que a enzima responsvel pela aco uma isomerase. Trata-se de um equilbrio qumico
que se vai deslocando gradualmente no sentido de formao de gliceraldedo 3-fosfato.

5 Interconverso de gliceraldedo 3-fosfato e di-hidroxiacetona fosfato. Note-se que


so formadas duas molculas de gliceraldedo 3-fosfato, pelo que na segunda fase da gliclise,
o produto das reaces sempre duas molculas, culminando na formao de duas molculas
de cido pirvico.

Fase de Gerao de Energia (ATP e NADH)

Converso oxidativa de gliceraldedo 3-fosfato a piruvato e formao de ATP e NADH.

54
6 O gliceraldedo 3-fosfato oxidado a 3-fosfoglicerato, que por sua vez fosforilado
a 1,3-bifosfoglicerato pelo fosfato inorgnico pela enzima gliceraldedo 3-fosfato
desidrogenase.

Ocorre a nica reaco de oxidao-reduo da gliclise, na qual o NADH formado ser


reoxidado no sistema transportador de electres com a consequente produo de ATP.

7 Transformao de 1,3-bifosfoglicerato a 3-fosfoglicerato por aco da enzima


fosfoglicerato cinase. Na gliclise ocorrem duas fosforilaes de ADP a ATP ao nvel do
substrato (reaco catalisada por enzimas cinases na qual um composto de alta energia
transfere um fosfato ao ADP, formando-se ATP), sendo esta uma delas j que a energia
libertada pela hidrlise da ligao acilfosfato do 1,3-fosfoglicerato utilizada imediatamente
na sntese de uma molcula de ATP. O io Mg2+ actua como cofactor.

Fosforilao a nvel do substrato

8 Converso de 3-fosfoglicerato a 2-fosfoglicerato pela enzima fosfoglicerato mutase.

9 Converso de 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato, atravs da aco da enzima


enolase, atravs da remoo reversvel de duas molculas de gua (uma por cada reaco)

10 Converso do fosfoenolpiruvato a piruvato atravs da enzima piruvato cinase,


existindo uma nova fosforilao ao nvel do substrato. Neste caso, tambm o io Mg2+ actua
como cofactor.

Fosforilao ao nvel do substrato

Balano energtico da gliclise

Formam-se 4 molculas de ATP na gliclise, 2 na reaco de transformao do 1,3-


bifosfoglicerato a 3-fosfoglicerato e outras 2 na converso de fosfoenolpiruvato a piruvato. No
entanto, duas so usadas logo no incio: na converso de glicose a glicose 6-fosfato, e de
frutose 6-fosfato a frutose 1,6-difosfato. Assim, o rendimento da gliclise de 2 molculas de
ATP.

55
Reciclagem do NAD+

Na presena de oxignio, o NADH produzido na gliclise regenerado a NAD+ pela


respirao (transporte electrnico e fosforilao oxidativa) que ocorre na mitocndria.
atravs da reoxidao do NADH que em aerobiose obtido praticamente metade do
rendimento.

Na presena de quantidade limitante de oxignio (hipoxia) ou em anaerobiose, a


respirao no ocorre e a recuperao do NADH feita pela reduo de piruvato a lactato,
reaco catalisada pela enzima lactato desidrogenase fermentao lctica.

Fermentao Lctica

Ocorre em situaes de hipoxia, como no msculo-esqueltico muito activo, ou em


clulas de tecido canceroso, ou em bactrias lcticas. Tambm pode ocorrer em aerobiose em
tecidos como a retina, eritrcitos e crebro. Permite a prossecuo da gliclise.

O piruvato reduzido a lactato pela enzima lactato desidrogenase, numa reaco


reversvel, existindo oxidao de NADH a NAD+. O lactato formado nos msculos activos pode
ser reciclado no fgado pela via da gluconeognese.

Outros Glcidos Catabolisados pela Gliclise

Podem existir outros glcidos que so catabolisados pela gliclise, dando origem a
produtos que posteriormente vo entrar nessa via. Como exemplos so a sacarose, a lactose
ou o glicognio.

Metabolismo da Frutose

Fosforilao da frutose
Fgado
pela enzima frutocinase

Fosforilao da frutose
pela enzima hexocinase,
Msculo
sendo necessria a
e Rins
interveno do Mg2+
como cofactor

56
Metabolismo da Galactose (Lactose)

A galactose tem origem na dieta, como produto da hidrlise da lactose. fosforilada


pela enzima galactocinase, e por outras enzimas que vo transformando o substrato em
produtos que so utilizados na gliclise, por exemplo, glucose-6-fosfato.

A Galactosemia uma doena gentica que impede a converso de galactose a


glucose.

Metabolismo do Glicognio

O glicognio degradado por fosforlise (glicogenlise) atravs da enzima glicognio-


fosforilase em glicose-1-fosfato. A glicose-1-fosfato convertida em glicose-6-fosfato pela
fosfoglicomutase.

A converso da glicose 6-fosfato para a glicose, que ocorre no fgado, rim e intestinos,
pela aco da glicose 6-fosfatase, no ocorre no msculo-esqueltico devido falta desta
enzima. No fgado, a aco desta enzima conduz a glicogenlise para a gerao de glicose livre
e a manuteno da concentrao desta no sangue.

57
Regulao da Gliclise

A regulao necessria para manter constantes os nveis de ATP e o fornecimento de


precursores para as vias biossintticas. A regulao do fluxo catablico envolve a regulao da
actividade de enzimas chave atravs de mecanismos como regulao alostrica, controlo
hormonal (via cascatas de cinases), controlo pela disponibilidade de substrato ou modificao
covalente.

As enzimas reguladoras da gliclise so as que catalisam reaces irreversveis, tais


como a hexocinase, fosfofrutocinase e piruvato cinase.

Regulao pela Hexocinase

A hexocinase inibida pelo seu produto, a glucose-6-fosfato, que se acumula quando a


actividade da gliclise reduzida (razo ATP/ADP elevada). A glucocinase a isoenzima
heptica (e das clulas do pncreas) da hexocinase, com baixa afinidade para a glucose
(Km=10mM), ao contrrio da glucocinase que possui elevada afinidade para a glucose
(Km=0,1mM).

Regulao pela Fosfofrutocinase

A fosfofrutocinase regulada por efectores alostricos que traduzem:

- Estado energtico da clula (ATP e AMP) a fosfofrutocinase activada pelo AMP e


Pi quando estes se encontram em concentraes elevadas, o que sucede em aerobiose em
qualquer caso quando o nvel da reserva de ATP baixo, sendo inibida pelo ATP. Para alm
disto, a enzima frutose 1,6-difosfatase, que actua ao mesmo nvel da fosfofrutocinase, mas no
sentido da neoglucognese, tambm inibida pelo AMP.

- Condies intracelulares (pH)

- Disponibilidade de intermedirios para biossnteses assim como disponibilidade de


combustveis alternativos como cidos gordos e corpos cetnicos (citrato)

- Razo insulina / glucagina no sangue (F2, 6P) a glucagina um inibidor da gliclise


por diminuio da concentrao da enzima frutose 2,6-difosfato.

Regulao pela Piruvato-cinase

A enzima piruvato cinase regulada por efectores alostricos que traduzem:

- Estado energtico da clula (ATP e ADP)

- Actividade da enzima fosfofrutocinase (frutose 1,6 bifosfato) (feed-forward)

- Razo insulina / glucagina no sangue (modulao covalente).

58
Destinos do Piruvato

- Transaminado a alanina

- Carboxilado a oxaloacetato

- Reduzido a lactato

- Descarboxilado a Acetil-CoA

Oxidao Anaerbia

A oxidao anerbia da glucose rende apenas 7% da energia potencial da glucose.


Utilizando vias metablicas adicionais possvel recuperar muito mais energia. Essas vias
podem ser o ciclo do cido ctrico (ciclo de Krebs ou ciclo dos cidos tricarboxlicos),
transferncia electrnica (ou cadeia respiratria) e/ ou fosforilao oxidativa.

Oxidao do Piruvato

Por cada molcula de glicose oxidada a duas molculas de piruvato formam-se, em


aerobiose, 2 Acetil-CoA e 2 NADH. A reoxidao deste NADH na cadeia transportadora de
electres conduz formao de 5 ATP.

59
Ocorre na matriz mitocondrial. Antes de entrar no ciclo de Krebs, o piruvato sofre uma
srie de reaces:

- Descarboxilao (perda de CO2) do piruvato a acetaldedo numa reaco catalisada


pela enzima piruvato desidrogenase. A coenzima desta reaco a pirofosfato de tiamina,
sendo o Mg2+ cofactor desta reaco.

- Oxidao do acetaldedo pela coenzima cido lipico na forma oxidada, havendo


formao de um tioster por reduo do cido lipico.

- Activao, por ligao CoA transferncia do grupo acetilo para CoA, com
formao de Acetil coenzima-A.

- Reoxidao do cido lipico pelo FAD e NAD+. O NADH formado reoxidado pela
cadeia transportadora de electres.

Todas estas reaces ocorrem no complexo multienzimtico piruvato desidrogenase


que se localiza na mitocndria. uma reaco irreversvel que utiliza como coenzimas a
lipoamida, FAD, NAD, CoA e tiamina PP (derivadas de vitaminas do complexo B).

Regulao do Complexo Piruvato Desidrogenase

A regulao deste complexo feita por mecanismos alostricos, mas tambm :

- Inibido por ATP, Acetil-CoA e NADH. Reflecte um estado energtico favorvel e


disponibilidade de cidos gordos como combustvel alternativo

- Estimulado pelas condies opostas (AMP, CoA, NAD+)

- Modificao covalente reversvel Inibido por fosforilao reversvel na subunidade


E1. A cinase, responsvel por esta inibio alostericamente estimulada por concentraes de
ATP elevadas.

Ciclo de Krebs

Etapa final do metabolismo dos glcidos, cidos gordos e aminocidos, constituindo


um ciclo oxidativo que requer oxignio. uma fase intermdia no processo de respirao
celular que se inicia com a entrada de acetil-CoA, que liberta 2 carbonos na forma de CO2 e
armazena, temporariamente, na forma de NADH e FADH2, a energia libertada pelas oxidaes.

60
1 Reaco de condensao catalisada pela citrato sintetase, onde h transferncia do
grupo acetil da acetil-CoA para o cido oxaloactico, formando cido ctrico.

2 Transferncia de grupos OH formando-se isocitrato, que ser desidrogenado para


formar -cetaglutarato. A enzima mais importante a isocitrato desidrogenase, que pode usar
como coenzima o NAD+ ou NADP+. Existe reduo do NAD+ a NADH + H+.

3 Descarboxilao oxidante do -cetaglutarato pela enzima -cetaglutarato


desidrogenase, formando succinil-CoA. Existe reduo do NAD+ a NADH + H+.

4 Sntese de ATP por fosforilao do succinil CoA a succinato, pela succinil CoA
sintetase.

5 Oxidao do succinato a fumarato, pela succinato desidrogenase, cuja coenzima


o FAD. O FADH ceder os seus electres cadeia transportadora.

6 Converso do fumarato a L-malato pela enzima fumarase.

7 Oxidao do malato a oxaloacetato pela enzima malato desidrogenase,


encerrando-se o ciclo. Existe reduo do NAD+ a NADH + H+.

61
Reaces anaplerticas

As reaces anaplerticas tm como funo repor intermedirios no ciclo de Krebs,


utilizados em vias biossintticas. Todas utilizam biotina como coenzima e catalisam reaces
de carboxilao.

Regulao do Ciclo de Krebs

A regulao necessria para manter constantes os nveis energticos na clula e


assegurar a produo de intermedirios. A regulao feita atravs dos seguintes
mecanismos:

- Disponibilidade de substratos (variam com o estado metablico da clula, sendo o


ciclo activado na presena de ADP e NAD+ e inibido pelo ATP e NADH).

- Inibio enzimtica por acumulao de produtos

- Regulao alostrica

Estes mecanismos actuam ao nvel de 3 enzimas, a citrato sintase, isocitrato


desidrogenase e -cetaglutarato desidrognease.

Fosforilao Oxidativa

A fosforilao oxidativa a etapa final do processo de respirao celular onde a


energia obtida nas oxidaes fora motriz para a sntese de ATP. Neste processo h reduo
de O2 a H2O com os electres doados pelo NADH e FADH2, e sntese de ATP.

Envolve o fluxo de electres atravs de uma cadeia de protenas transportadoras, e a


energia livre libertada neste fluxo acoplada ao transporte de H+ sendo conservada com um
gradiente electroqumico transmembranar (teoria quimiosmtica). O fluxo de protes, a favor
do gradiente, favorece a energia necessria sntese de ATP pela ATP sintetase.

62
A transferncia de electres processa-se por etapas sucessivas atravs de uma srie de
transportadores, o que se revela muito mais favorvel do ponto de vista energtico. Um
sistema deste tipo compreende, de uma forma geral, complexos proteicos de ferro e enxofre,
desidrogenases, tendo como coenzima um nucletido piridnico como o NAD ou o NADP,
flavoprotenas, coenzima Q e vrios citocromos, que funcionam do lado do espao
intermembranrio, com um certo grau de liberdade no que respeita sua ligao com a
membrana. So estes os transportadores de electres. Estes transportadores so grupos
prostticos de protenas e encontram-se, partida, no seu estado oxidado, sendo reduzidos
pelo hidrognio ou pelos electres provenientes do substrato ou do transportador precedente
para serem re-oxidados pelo transportador seguinte. A sua funo , portanto, promover a
oxidao de diferentes compostos com reduo do oxignio a gua e produo de ATP.

Os transportadores esto organizados em complexos, o que aumenta a eficcia da


cadeia de oxidao. Para alm disto, os componentes da cadeia respiratria esto organizados
na membrana por potenciais redox crescentes, garantindo assim um fluxo unidireccional de
electres.

O complexo succinato desidrogenase no funciona como bomba de protes, por isso,


quando o substrato oxidado o succinato, s funcionam as duas ltimas bombas, enquanto
que se ocorrer oxidao do NADH tambm o sistema NADH-coenzima Q-redutase bombeia
electres para o espao intermembranrio.

Teoria Quimiosmtica

O transporte de electres provoca um movimento unidireccional de H+ para o espao


intermembranar, gerando um potencial de membrana. Os protes so bombeados pelos
complexos enzimticos e a sntese de ATP ocorre quando os protes fluem novamente para a
matriz mitocondrial atravs de um complexo, a ATPase, responsvel pela sntese. O gradiente
(potencial qumico e potencial elctrico) a fora motriz para a sntese de ATP.

63
Agentes que intervm na fosforilao oxidativa

Estes agentes podem exercer uma inibio ao nvel da transferncia de electres, da


sntese de ATP ou da troca entre ADP e ATP.

Nalguns casos pode haver desacoplamento entre o transporte de electres e a reaco


de fosforilao. Assim, so consumidas grandes quantidades de oxignio sem que haja
produo de ATP. Ocorre no tecido adiposo castanho, devido presena da termogenina
uma protena desacopladora, sendo um processo utilizado pelos recm-nascidos e animais de
hibernao.

A regulao ao nvel da Fosforilao Oxidativa feita com base nos nveis de ADP que
reflectem a razo ATP/ADP da clula.

Metabolismo dos Glcidos Outras vias de produo de energia

No existe apenas o catabolismo da glucose para obteno de energia. Outros meios


so a utilizao de outros monossacridos, a obteno de ribose como precursor biossinttico,
a utilizao e formao de reservas glucdicas Glicogenlise e Glicognese; e / ou
manuteno da glicemia Glicogenlise e Neoglicognese.

Via das Pentoses Obteno de Ribose como Precursor Biossinttico

Processo de oxidao da glucose por uma via biossinttica. Produz NADPH necessrio
nas vias anablicas, sntese de cidos gordos e esterides, e pentoses para a sntese de
nucletidos, ocorrendo no citosol. Permite o metabolismo dos acares (pentoses)
provenientes da dieta.

Ocorre em duas fases, uma oxidativa com formao de NADPH; e outra no


oxidativa com formao de vrios acares fosforilados. A oxidao no necessita de ATP e
trata-se de um processo exclusivamente aerbio, pois a reoxidao das coenzimas reduzidas
s possvel atravs dos sistemas transportadores de electres.

64
Fase Oxidativa

uma via irreversvel de oxidao da glucose 6-fosfato a ribulose 6-fosfato com


formao de NADPH.

Ocorrem, nesta transformao, duas oxidaes, com formao de NADPH, cujos


electres podero ser transferidos para o sistema transportador de electres cadeia
respiratria, formando-se 3 a 5 ATP. No , no entanto, o principal objectivo desta via a
obteno de energia, que em geral s ocorre quando os nveis de ATP so muito baixos
(relembrar que a gliclise consome ATP e esta via no).

1 A reaco catalisada pela enzima glicose 6-fosfato desidrogenase e produz 6-


fosfogluconato;

2 O 6-fosfogluconato sofrer um descarboxilao oxidante a ribulose 5-fosfato pela


enzima 6-fosfogluconato-desidrogenase.

Fase No-Oxidativa

65
Ocorrem transferncias de grupos com trs tomos de carbono transaldolisao e com
dois tomos de carbono transcetolizao.

A reaco desencadeada aps ligao do substrato ao grupo -amina de um resduo


de lisina da enzima. Ocorre ento, como com a transcetolase, uma ruptura seguida de uma
condensao, designadas aldlicas.

A transcetolase requer Mg2+ e pirofosfato de tiamina.

O funcionamento da via faz-se em funo das necessidades especficas. Assim, quando


necessria a sntese de nucletidos, o principal produto a ribose 5-fosfato, mas quando
necessrio poder redutor na forma de NADPH favorecida a reciclagem de frutose e glucose.
Para obteno de energia so favorecidos os intermedirios da via glicoltica.

Utilizao do NADPH

Em reaces biossintticas (oxidativas), como a sntese de cidos gordos ou esterides,


ou a reduo do perxido de hidrognio pela formao de intermedirios reactivos formados a
partir de oxignio. A glutationa ou glutatio um pptido antioxidante com elevada
importncia na metabolizao de H2O2 e outros hidroperxidos como cofactor da glutationa-
peroxidase.

Gluconeognese

Via biossinttica de glucose que utiliza como precursores compostos no glucdicos


como o piruvato, alguns aminocidos, glicerol e lactato. Ocorre no citoplasma, no fgado e em
menor extenso nos rins, de forma a providenciar glucose para os tecidos extra-hepticos.

Tecidos como crebro e tecido nervoso, medula renal, testculos e eritrcitos usam
glucose como principal ou nica fonte de energia, sendo esta uma fonte de energia universal e
o principal precursor de todos os glcidos, incluindo acares aminados, polissacridos e os
glcidos componentes das glicoprotenas e glicolpidos.

Sendo uma via biossinttica, sai cara clula, gastando na formao de uma molcula
de glucose livre 4 ATP, 2 GTP e 2 NADH.

A gluconeognese no simplesmente o reverso da gliclise, uma vez que existem


reaces que, do ponto de vista termodinmico, no so reversveis nas condies fisiolgicas.

H, ento, 3 passos da gliclise que so substitudos por 4 passos na gluconeognese: a


transformao do cido fosfoenolpirvico em cido pirvico pela piruvato cinase, a

66
fosforilao da frutose 6-fosfato a frutose 1,6-difosfato pela fosfofrutocinase e a fosforilao
da glucose a glucose 6-fosfato pela hexocinase. Assim, a estes nveis a gluconeognese utiliza
reaces catalisadas por enzimas diferentes.

Gliclise Gluconeognese
Hexocinase Glucose 6-fosfatase
Fosfofrutocinase Frutose 1,6-difosfatase
Piruvato cinase Piruvato carboxilase/ Fosfoenolpiruvato-carboxicinase

Transformao do cido Pirvico em cido Fosfoenolpirvico

1 Carboxilao do piruvato a cido oxaloactico pela piruvato carboxilase, uma


enzima que contm biotina, que uma coenzima transportadora de CO2, o qual retira ao CO3-
em soluo. O Mg2+ cofactor da reaco, a qual se realiza custa de ATP.

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A piruvato carboxilase uma enzima mitocondrial, ao passo que as restantes enzimas
so citoplasmticas. Sendo a membrana mitocondrial impermevel ao oxaloacetato, esta
reaco s ocorre porque o oxaloacetato atravessa a membrana mitocondrial na forma de
malato a que foi reduzido pela enzima malato-desidrogenase de NADH ligado enzima.

Depois de transportado, o malato reoxidado a oxaloacetato no citosol pela malato-


desidrogenase de NAD+. A descarboxilao e fosforilao do oxaloacetato pela
fosfoenolpiruvato-carboxicinase j ocorre no citosol.

2 Descarboxilao fosforilante do cido oxaloactico a cido fosfoenolpirvico pela


enzima fosfoenolpiruvato-carboxicinase na presena de iosina-tri-fosfato (ITP) ou guanosina-
tri-fosfato (GTP).

Da Frutose 1,6-Difosfato Frutose 6-Fosfato

Esta hidrlise catalisada pela frutose 1,6-difosfatase. A este nvel manifestam-se


fenmenos de regulao, dado que esta enzima alostrica fortemente inibida pelo AMP e
activada pelo ATP.

Hidrlise da Glucose 6-Fosfato

As oses s podem passar atravs da membrana celular para o meio exterior depois de
fosforiladas. No caso da glucose-6-fosfato a hidrlise da ligao ster catalisada pela enzima
glucose 6-fosfatase, presente nas clulas hepticas.

Precursores

Lactato Ciclo de Cori

A ausncia de glucose 6-fosfato no msculo impede a a formao de glucose livre.


Porm, o metabolismo muscular pode contribuir para o aumento do teor da glucose no
sangue, porque a glucose sintetizada no fgado a partir de cido pirvico fornecida ao
msculo, o qual entrando em actividade, retira ATP da converso da glucose em lactato pela
via da gliclise. Assim, quando o msculo est em actividade, ocorre um fornecimento
contnuo de glucose ao fgado.

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Glicerol

1 Os triglicridos sofrem hidrlise pelas lipases, dando origem ao glicerol.

2 Fosforilao do glicerol por enzimas glicerol-cinases, formando glicerol-3-fosfato.

3 O glicerol-3-fosfato origina di-hidroxiacetona, por reduo do NAD+ a NADH sob


aco da enzima glicerol-3-fosfato-desidrogenase.

Aminocidos Glucognicos

Entram no ciclo de Krebs, especialmente na formao de piruvato, succinil-CoA, -


cetaglutarato, fumarato e oxaloacetato.

69
Regulao da neoglucognese

A regulao da neoglucognese e da gliclise feita de forma recproca e coordenada,


uma vez que possuem vrias reaces comuns. As enzimas reguladoras da gluconeognese so
a piruvato carboxilase, que coordena a disponibilidade de ATP e Acetil-CoA e a frutose 1,6-
bifosfatase, que responde s necessidades de glucose no organismo (glucagina).

Em anaerobiose ou sempre que predominam as formas desfosforiladas, o aumento da


concentrao de AMP tem um efeito activador sobre a gliclise e inibidor sobre a
neoglucognese, enquanto que em aerobiose o aumento da concentrao de ATP inibe a
gliclise e favorece a neoglucognese.

O piruvato mitocondrial tem dois destinos possveis, regulados pelos nveis de acetil-
CoA pode ser carboxilado a oxaloacetato ou descarboxilado a acetil-CoA.

A gluconeognese favorecida quando o estado energtico da clula heptica


favorvel e existe acetil-CoA suficiente, proveniente do catabolismo dos lpidos.

Regulao Hormonal da Gliclise e da Gluconeognese

Regulao pelo ATP

O cido ctrico tem um efeito inibidor sobre a fosfofrutocinase. Temos de atender que
a gliclise fornece cadeias carbonatadas para as biossnteses, logo, a enzima fosfofrutocinase
recebe informaes sobre o teor de macromolculas. Um teor elevado de citrato significa que
abundamos compostos precursores para estas biossnteses e no vale a pena degradar mais

70
glicose. Por isso, este composto, quando existe em elevadas concentraes vai inibir a
fosfofrutocinase, ampliando o efeito inibidor do ATP.

Regulao pela Acetil-CoA

A regulao da gluconeognese comea a exercer-se ao nvel das reaces que


conduzem ao oxaloacetato e ao fosfoenolpiruvato, sendo que as concentraes elevadas de
Acetil-CoA estimulam a piruvato-carboxilase em situaes que requerem a sntese de glucose,
os nveis de piruvato-carboxilase e de fosfoenolpiruvato-carboxicinase aumentam.

Regulao por Protena-cinases

Tanto a piruvato-cinase como a fosfofrutocinase esto sujeitas a controlo covalente


por protena-cinases. Em ambos os casos, a interveno de protena-cinases uma para cada
enzima, converte a enzima activa em inactiva, sendo essas cinases activadas pelo AMP cclico
que, portanto, vai inibir a gliclise. Por outro lado, a desfosforilao das enzimas por fosfatases
torna-as activas e a gliclise activada.

Regulao por Frutose 1,6-Difosfato

O aumento da concentrao de frutose 2,6-bifosfato estimula a gliclise e inibe a


gluconeognese; a diminuio de frutose 1,6-difosfato inibe a gliclise e estimula a
gluconeognese.

Esta enzima possui um domnio cinase e um domnio fosfatase que so


reciprocamente regulados, sendo que a fosforilao activa o domnio fosfatase, que degrada a
frutose 2,6-difosfato, enquanto que a desfosforilao activa o domnio cinase, que produz este
composto.

Nos mamferos, quando o nvel de glucose baixo, um aumento do teor de glucagina


activa a sntese de cAMP, o que conduz fosforilao da enzima frutose 2,6-bifosfato que
degradada, reduzindo a sua concentrao. A neoglucognese estimulada porque em baixos
teores, a frutose 2,6-difosfato activa a enzima da neoglucognese, a frutose 1,6-difosfatase.

Quando o nvel de glucose elevado, a enzima desfosforilada e a frutose 2,6-


difosfato sintetizada, e como este composto em teores elevados um potente activador da
fosfofrutocinase, a gliclise estimulada, embora em concentraes elevadas possa inibir a
frutose 1,6-difosfato.

71
Metabolismo dos Lpidos

Digesto, Mobilizao e Transporte

Os cidos gordos tm origem nos triacilgliceris obtidos na dieta, ou armazenados nos


adipcitos (clulas do tecido adiposo). Os triacilgliceris com origem na dieta so
emulsionados pelos sais biliares no intestino, formando micelas mistas, permitindo aumentar a
acessibilidade das lipases intestinais.

Os mono- e diacilgliceris, cidos gordos e glicerol resultantes da aco das lipases so


absorvidos pela mucosa intestinal. Nas clulas epiteliais so reconvertidos a triacilgliceris e
empacotados com colesterol e apolipoprotenas em lipoprotenas quilomicra. No msculo e
tecido adiposo, por aco da lipoprotena lipase, os triacilgliceris so hidrolisados a glicerol e
cidos gordos, que so transportados para o interior das clulas onde so usados
respectivamente para obter energia ou serem re-esterificados para serem armazenados.

Quando necessria energia, sinais hormonais despoletam a mobilizao dos


triacilgliceris, armazenados nos adipcitos. Os cidos gordos assim libertados so
transportados para os tecidos, associados albumina srica, e a transportados para o interior
das clulas.

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Destino do Glicerol

1 Fosforilao do glicerol por enzima glicerol-cinases, formando glicerol-3-fosfato.


Para esta reaco h necessidade de energia, pelo que se consome uma molcula de ATP.

2 O glicerol 3-fosfato origina di-hidroxiacetona fosfato por reduo do NAD+ a NADH


sob aco da enzima glicerol-3-fosfato-desidrogenase.

3 Atravs de uma isomerase, a hi-hidroxiacetona fosfato convertida em D-


gliceraldedo-3-fosfato, que entra numa das etapas da gliclise.

Oxidao dos cidos Gordos

Activao

Antes de serem oxidados, os cidos gordos tm de ser activados, o que requer energia
fornecida pelo ATP e ocorre na membrana mitocondrial por aco da acetilCoA-sintetase.

Transporte Mitocondrial

As molculas mais longas de acilCoA no atravessam com facilidade a membrana


interna, pelo que se torna necessrio um mecanismo de transporte. Nos mamferos, os cidos
gordos de cadeia longa so transportados atravs da membrana por aco da carnitina e de
enzimas carnitina-aciltransferases.

Oxidao

O acilCoA pode entrar na via da -oxidao que conduz a um novo acilCoA com menos
dois carbonos que o anterior.

A oxidao dos cidos gordos ocorre em ciclos de 4 reaces. Cada ciclo produz 1
NADH, FADH2, 1 acetilCoA e 1 acilCoA com uma cadeia encurtada em 2C. No ltimo ciclo
formam-se 2 acetilCoA.

No ltimo ciclo da oxidao de cidos gordos com um nmero mpar de C forma-se


propionilCoA que posteriormente convertido a succinilCoA que posteriormente entra no
ciclo de Krebs.

Os cidos gordos, por se encontrarem num estado de reduo muito elevado, podem
ser sujeitos a um maior nmero de etapas de oxidao que os glcidos. De facto, a oxidao de
uma molcula de palmitol-CoA gera, no total, 108 ATP.

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A designao -oxidao decorre da entrada de oxignio, introduzido pela molcula de
gua, na segunda oxidao, que ocorre ao nvel do carbono .

A oxidao completa dos cidos gordos seguida depois em trs fases:

- PR-FASES de activao e transporte

- FASE I -oxidao, com produo de acetilCoA, NADH e FADH2

- FASE II Ciclo de Krebs com produo de NADH, FADH2 e ATP

- FASE III Fosforilao Oxidativa, com produo de ATP.

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O crebro no efectua -oxidao porque os cidos gordos no conseguem atravessar
a barreira hemato-enceflica. No entanto, as molculas de acetilCoA so muito solveis e j
so utilizadas por aquele rgo.

Cetognese

Se predominar a oxidao dos lpidos sobre o catabolismo glucdico, a concentrao de


oxaloacetato baixa e o acetilCoA, no podendo entrar no ciclo de Krebs, ter outro destino:
convertido a acetoacetato, -hidroxibutirato e acetona, os designados corpos cetnicos. A
acetona, formada em menor quantidade libertada, mas o acetoacetato e o -hidroxibutirato
so indispensveis para o ser humano. Uma vez transportados atravs do sangue para outros
tecidos, so oxidados pelo Ciclo de Krebs para fornecerem energia ao crtex renal, msculo
cardaco e crebro, que em condies de falta de glucose se adaptam utilizao do
acetoacetato como fonte de energia.

No fgado, o acetilCoA pode ser canalizado para a sntese de compostos cetnicos.


Estas molculas so utilizadas pelo msculo-esqueltico e cardaco para a produo de ATP.
Em jejum, o tecido nervoso fica dependente destas molculas. A acumulao de corpos
cetnicos d-se no sangue ou na urina.

1 Duas molculas de acetilCoA so convertidas a acetoacetil-CoA atravs da enzima


tiolase

2 O acetilacetil-CoA sofre 2 reaces e origina acetoacetato, que por duas reaces


origina acetona (pela acetoacetato descarboxilase) e D--hidroxibutirato (pela D--
hidroxibutirato desidrogenase).

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Utilizao de Corpos Cetnicos pelos tecidos Extra-Hepticos

O acetoacetato combina-se com o succinil CoA, formando acetoacetil CoA e succinato,


numa reaco catalisada pela enzima succinil CoA transferase, que est ausente no tecido
heptico.

Sntese de cidos Gordos

Permite sobretudo o alongamento dos cidos gordos de cadeia mdia pr-existentes


conduzindo aos cidos gordos de cadeia longa. O organismo obtm grande parte dos cidos
gordos que necessita na dieta. Outra fonte de cidos gordos a sua biossntese a partir de
acares, aminocidos e outros cidos gordos. Os excessos de hidratos de carbono e protena
obtidos na dieta podem ser convertidos a cidos gordos e armazenados como triacilgliceris.

A sntese de cidos gordos ocorre principalmente no fgado e glndulas mamrias, mas


tambm no tecido adiposo e rins. Ocorre no citoplasma e usa como precursor o acetilCoA,
como energia metablica o ATP e como redutor o NADPH.

Nos animais, o cido palmtico o precursor de todos os outros cidos gordos atravs
de reaces de elongao, dessaturao e hidroxilao.

Sntese de cido Palmtico

Para a sntese de novo necessrio:

- Transporte do acetilCoA para o citoplasma

- Activao do acetilCoA, com formao de malonilCoA

- Elongao sequencial da cadeia de cido gordo com um complexo multienzimtico: a


sintetase de cidos gordos

Produo de AcetilCoA no Citoplasma

O acetilCoA tem de passar das mitocndrias para o citosol, mas como a mitocndria
no lhe permevel, o transporte de grupos acetilo atravs da membrana mitocondrial
interna realizado pelo citrato, custa de ATP, e no citosol por aco de uma lipase de acordo
com a reaco:

Citrato Oxaloacetato + AcetilCoA

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Activao do AcetilCoA com formao de MalonilCoA

Interveno do Acetil-CoA-carboxilase na carboxilao do AcetilCoA a malonilCoA. A


coenzima a biotina, que est ligada cadeia lateral de um resduo de lisina da protena
enzimtica e serve como transportador temporrio de CO2.

Elongao Sequencial da Cadeia de cido Gordo por um Complexo Multienzimtico:


a Sintetase de cidos Gordos

Os grupos acilo do acetilCoA e do malonil-CoA so transferidos por uma acetil-


transferase e uma malonil-transferase, respectivamente, para uma protena transportadora de
acilo ACP. Tem um grupo SH que forma uma ligao tioster com o grupo acil, formando
acetoacetil-ACP numa reaco de condensao catalisada por uma enzima condensadora
acetil-malonil-ACP. Contm tambm actividade hidroltica que separa o palmitato no final da
sntese. O principal cido gordo formado o cido palmtico. A elongao feita por repetio
da sequncia de 4 reaces da cadeia de cido gordo at formao de cido palmtico. A
tiosterase intervm novamente, promovendo uma hidrlise e a libertao do cido palmtico.

O cido palmtico sintetizado pela sintetase de cidos gordos convertido em palmitil-


CoA no retculo endoplasmtico e elongado por sistemas enzimticos microssomais que
adicionam grupos de dois carbonos atravs do acetil-CoA.

Sntetase de cidos Gordos nos Mamferos

A associao de diferentes enzimas ligadas de forma covalente a constituir uma nica


protena multifuncional sucede em muitos complexos multienzimticos dos eucariotas e tem a
vantagem de permitir a coordenao mais rpida e mais eficaz das vrias sintetases
enzimticas. Estes complexos so mais estveis.

A sintase de cidos gordos dos mamferos contm duas subunidades iguais, estando
cada unidade desdobrada em trs domnios que, no seu conjunto, apresentam sete centros
catalticos.

O domnio 1 a unidade de ligao ao substrato e de condensao. Contm a acetil-


transferase, a malonil-transferase e a -cetoacil-sintase (enzima condensadora). O domnio 2

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a unidade de reduo que contm a ACP, a -cetoacil-redutase, a -hidroxiacil-desidratase e a
enoil-redutase. O domnio 3 a unidade de libertao do palmitato e contm a tioesterase.

A biossntese de cidos gordos necessita de grande quantidade de poder redutor


promovido pelo NADPH. No citoplasma, as concentraes de NADPH/NADP+ so elevadas,
sendo o resultado da via das pentoses fosfato e da enzima mlica.

Outros cidos gordos podem ser obtidos a partir do palmitato. Os cidos gordos de
cadeia mais curta podem ser obtidos por aco de tioesterases adicionais.

Relao do metabolismo da Glucose com o dos Aminocidos

A gliclise produz piruvato, que a principal fonte de acetilCoA e oxaloacetato


mitocondrial para a sntese de palmitato. Os NADH produzidos na gliclise podem ser
utilizados para a obteno de NADPH no citoplasma (enzima mlica).

Regulao do metabolismo dos cidos Gordos

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Responde a diferentes necessidades energticas e dietas alimentares. A acetilCoA
carboxilase a enzima reguladora.

Regulao Alostrica

- PalmitoilCoA inibio feedback

- Citrato no citoplasma significa elevadas concentraes de acetilCoA e ATP


mitocondrial.

Modificao Covalente

- Pela traduo de sinais hormonais

Pela regulao da expresso de genes

- Adaptao dieta (longo prazo)

A biossntese e a oxidao de cidos gordos so reguladas de forma coordenada.


Funcionam em compartimentos celulares distintos, e em condies de excesso de glucose
activada a biossntese que produz grande quantidade de malonilCoA no citoplasma O
malonilCoA inibe a carnitina aciltransferase I, impedindo a entrada de acilCoA na mitocndria.
Os acilCoA formados no citoplasma so convertidos a triacilgliceris ou fosfolpidos.

Quando h excessos de glcidos na alimentao, a oxidao da glucose permite que os


nveis de ATP, NADH, NADPH sejam elevados, favorecendo a sntese de glicognio e a
biossntese de cidos gordos e de glicerol, o que leva sntese de triacilgliceris para reserva.

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Metabolismo dos Aminocidos

Os aminocidos no so armazenados no organismo. Para alm da sntese proteica,


so utilizados como precursores de aminocidos derivados, nucletidos, hormonas, coenzimas
ou porfirinas, neurotransmissores

Os animais oxidam os aminocidos (utilizam como combustvel), que so excedentes


do processo natural de turnover proteico ou de uma dieta alimentar rica em protenas,
oxidando-os durante o jejum, quando no h disponvel glucose, ou em qualquer situao
metablica que impea a normal utilizao de glucose.

Digesto de Protenas

A degradao das protenas da dieta alimentar realizada no tracto gastrointestinal


pela aco sequencial do HCl, da pepsina, proteases pancreticas com diferentes
especificidades e peptidases intestinais. Os aminocidos livres libertados no intestino so
transportados para as clulas epiteliais, passando para o plasma e seguindo para o fgado.

Catabolismo dos aminocidos

O catabolismo dos aminocidos distingue-se do catabolismo dos acares e cidos


gordos pelo facto destas molculas terem grupos amina.

A estratgia comum para remoo dos grupos amina a transaminao


transferncia do grupo amina para um -cetocido catalizada por uma aminotransferase
(transaminase). O -cetocido normalmente o -cetoglutarato que canaliza os grupos amina
para a forma de glutamato. O glutamato ser dador de grupos amina para as vias
biossintticas ou para a sua eliminao na forma de ureia. Alguns aminocidos podem ser
directamente desaminados produzindo amnia.

Os aminocidos em excesso so utilizados para produo de energia nos tecidos


hepticos, ou para a converso em glicose, que vai ser armazenada sob a forma de glicognio,
tambm no figado.

Aminotransferases

Estas enzimas diferem na sua especificidade para o aminocido dador mas aceitam
apenas o -cetoglutarato, ou em menor extenso, o oxaloacetato. Tm como grupo prosttico
o piridoxal fosfato (derivado da vitamina B6) que funciona como transportador temporrio de
grupos amina.

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Libertao de Amnia

O glutamato liberta amnia (NH +) no


4 fgado. A glutamato desidrogenase uma
enzima mitocondrial que catalisa a desaminao oxiativa do glutamato.

- Transformao de glutamato a -cetoglutarato e amnia pela enzima glutamato


desidrogenase. O -cetoglutarato formado vai ser integrado no ciclo de Krebs ou na
neoglucognese.

A amnia produzida nos tecidos extra-hepticos transportada pela glutamina.

No fgado ou rins, a amnia libertada pela aco da glutaminase enzima heptica


mitocondrial.

A amnia produzida no msculo pode ser transportada pela alanina (ciclo glucose-
alanina).

Destino do grupo amina

O grupo -amina de muitos aminocidos transferido para o cido -cetoglutarato,


originando cido glutmico. Este pode sofrer uma desaminao oxidante, libertando NH3.

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Ciclo da Ureia

O amonaco resultante da degradao dos aminocidos, que no utilizado na sntese


de compostos azotados vai ser excretado pelos organismos. A amnia canalizada para o fgado
convertida em ureia, que recolhida nos rins e excretada na urina. O custo energtico da
sntese de ureia pode ser menor se houver regenerao do oxaloacetato no Ciclo de Krebs. A
ornitina o transportador de azoto e carbono no ciclo. A arginina o precursor imediato da
ureia, sendo hidrolisada pela arginas.

Os tomos de carbono, hidrognio e azoto tm origem, respectivamente, no dixido


de carbono, amonaco e aspartato.

1 Transferncia de um grupo carbamilo (carbamoilo) a partir do carbamil fosfato


para a ornitina, para formao de citrulina. Esta reaco catalisada pela enzima ornitina-
transcarbamilase.

2 Condensao da citrulina com o aspartato, catalisada pela arginosuccinato-


sintetase, com interveno de ATP.

3 Hidrlise do pirofosfato

4 O cido argininosuccnico divide-se em arginina e fumarato, por aco da


arginosuccinato.

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Regulao do Ciclo da Ureia

Responde ao tipo de dieta alimentar. A carbamoil fosfato sintetase I regulada


alostericamente por N-acetilglutamato.

Outra forma de regulao a expresso dos genes das 4 enzimas do ciclo adaptao
a longo prazo dieta.

Destinos dos esqueletos carbonatados dos aminocidos

A degradao dos aminocidos vai conduzir formao de importantes intermedirios


metablicos que podem ser convertidos em glucose ou oxidados pelo ciclo de Krebs. Assim, as
converses metablicas que afectam o esqueleto carbonatado dos aminocidos comuns das
protenas vo conduzi-los a piruvato, acetilCoA, acetoacetilCoA, fumarato e cido oxaloactico.

O ciclo da ureia liga-se ao ciclo de Krebs. O oxaloacetato pode seguir trs vias: pode ser
transaminado a aspartato, convertido em glucose na neoglucognese ou condensar-se com o
acetilCoA para formar citrato.

- Gluconeognese

- Cetognese

- Oxidao completa a CO2 e H2O

Consoante os compostos que originam, por degradao, os aminocidos so


classificados em cetognicos se origam corpos cetnicos, ou glucognicos se originam
piruvato ou intermedirios do Ciclo de Krebs.

Os aminocidos glucognicos podem ser convertidos em fosfoenolpiruvato e por fim


glicose ou glicognio. O nico aminocido com carcter puramente cetognico a leucina,

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visto que os tomos de carbono de isoleucina, lisina, fenilalanina, triptofano e tirosina vo
surgir como precursores da glucose.

Doenas Metablicas

Leucinose

A leucinose uma doena hereditria com transmisso autossmica recessiva, no


metabolismo dos aminocidos ramificados: leucina, isoleucina e valina.

Devido deficincia no complexo multienzimtico das desidrogenases dos cidos -


cetnicos de cadeia ramificada, estes aminocidos e alguns compostos deles derivados
acumulam-se em quantidades txicas para o organismo. Ocorre acumulao de aminocidos,
no se forma acetilCoA e no h ciclo de Krebs.

H vrias formas, a mais grave manifesta-se nos primeiros 3 a 5 dias de vida, com
alterao do estado de conscincia, recusa alimentar e sinais neurolgicos de intoxicao. O
desenvolvimento da doena caracterizado por um agravamento progressivo at ao coma
profundo. A urina toma um cheiro caramelizado caracterstico. A forma sub-aguda, com incio
mais tardio, apresenta-se como uma encefalopatia com atraso metal, hipotonia grave,
posicionamento da cabea para trs (em opisttono) e atrofia cerebral de evoluo muito
grave.

O tratamento desta doena consiste numa dieta hipoproteica restrita nos aminocidos
leucina, isoleucina e valina, suplementada com carnitina.

Citrulinemia

A citrulinmia uma doena hereditria do metabolismo, com transmisso


autossmica recessiva, e que se deve deficincia na enzima argininosuccinato sintetase (AS).
Esta enzima actua no ciclo da ureia, um importante mecanismo celular de eliminao da
amnia. Este composto forma-se durante o catabolismo celular normal dos aminocidos, mas
em elevadas concentraes txico para as clulas.

A citrulinmia caracteriza-se pelo aumento da concentrao plasmtica de amnia e


citrulina, que se verifica depois na urina.

O tratamento consiste numa dieta hipoproteica suplementada com arginina e carnitina


e na administrao de fenilbutirato / benzoato de sdio para facilitar a eliminao de amnia.

Fenilcetonria

A fenilcetonria uma doena gentica caracteriza pela ausncia ou defeito na enzima


fenilalanina hidroxilase.

Esta enzima catalisa o processo de converso (hidroxilao) da fenilalanina em tirosina.


A tirosina est envolvida na sntese de melanina. A aco da enzima transferir um tomo de
oxignio para o anel aromtico da fenilalanina. Posteriormente, um io de hidrognio liga-se
ao oxignio completando a transformao em tirosina.

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Acumula-se fenilalanina em todos os fluidos corporais.

A doena autossmica recessiva. Pode ser detectada nascena atravs da triagem


neonatal teste do pezinho.

So sintomas da doena no tratada: oligofrenia, atraso do desenvolvimento


psicomotor (andar e falar), convulses, hiperactividade, tremor e microcefalia. Identiicam-se
as alteraes com cerca de um ano de vida.

O tratamento consiste numa dieta pobre em fenilalanina. O tempo mdio de vida


baixo, volta dos 30 anos.

Carnitina palmitoil transferase I

A enzima carnitina palmitoil transferase I responsvel pela entrada dos cidos gordos
na mitocndria. Quando esta enzima est deficiente, os cidos gordos no entram e no vo
sofrer -oxidao. Como consequncia h menor produo de acetilCoA e menos
disponibilidade energtica.

A -oxidao dos cidos gordos uma importante fonte de energia celular,


principalmente em situaes de jejum, e por essa razo, o tratamento destes doentes consiste
fundamentalmente em evitar o jejum prolongado para que o organismo no tenha que
recorrer oxidao de cidos gordos para obter energia. Deve tambm ser efectuada uma
dieta restrita em cidos gordos.

Galactosemia

A galactosemia caracteriza pela deficincia no metabolismo da galactose e tem


transmisso autossmica recessiva. As enzimas no degradam a galactose (obtida no leite
atravs da lactose) e esta no segue a sua via normal, acumulando-se. A galactose txica
para o organismo.

O paciente galactosmico pode apresentar hepatomegalia (acumulao galactitol nas


clulas hepticas), falhas renais, catarata, danos cerebrais, galactosria, deficincias na
aprendizagem, falhas nos ovrios, defeitos oculares causados pela acumulao de substncias
txicas.

O tratamento passa por restringir a dieta para a galactose e lactose, o que no grave
pois h um mecanismo metablico para converso da glicose em galactose. H que ter em
conta um contnuo acompanhamento mdico para a evoluo dos sintomas.

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