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Pinto, Ftima Regina Gomes
Caderno de referncia 2: citopatologia no ginecolgica / Ftima Regina Gomes Pinto, Letcia Maria Correia Katz
Braslia: Ministrio da Sade; Rio de Janeiro: CEPESC, 2012.
ISBN 978-85-324-0034-5
1. Citopatologia. 2. Educao em Sade. 3. Ensino Profissional. 4. Ensino Tcnico. I. Ttulo. II. Katz, Letcia Maria Correia.
III. Programa de Formao de Profissionais de Nvel Mdio para a Sade.
CDU 576.385:37
Ttulos para indexao:
Em ingls: Notebook Reference 2: no gynecological cytopathology
Em espanhol: Cuaderno de Referencia 2: no ginecolgica citopatologa
Apresentao............................................................................................................................... 7
1 Tcnicas de coleta em citopatologia geral............................................................................. 9
Historicamente, o primeiro relato da utilizao do exame citolgico foi no ano de 1838, por Johannes
Mller, que descreveu a imagem microscpica de clulas malignas obtidas por raspado superficial de
tumores excisados cirurgicamente. Posteriormente, o patologista francs Lebert avaliou citologicamente
espcimes provenientes de efuses, secrees traqueobrnquicas e urina. Mas foi no incio do sculo
XX, precisamente no ano de 1920, que houve um avano importante no diagnstico citolgico com a
utilizao da citologia esfoliativa e aspirativa pelos patologistas Aurel Babes, George Papanicolaou e
James Ewing. Na dcada de 1930, o exame citolgico passou a ser utilizado no diagnstico de tumores
dos vrios stios anatmicos. Neste perodo, Ewing e seus colaboradores popularizaram o uso da agulha
fina para o diagnstico de leses superficiais e profundas, difundindo ainda mais o uso da citologia geral.
Reconhecidamente, a avaliao citolgica apresenta uma srie de vantagens quando comparada
a outros mtodos diagnsticos como, por exemplo, a bipsia. um procedimento com menor grau
de invaso, dispensa o uso de anestesia na maioria das vezes, possui menores taxas de complicaes,
durante e aps a coleta, e fornece resultados rpidos e de baixo custo. No entanto, temos que levar em
considerao a possibilidade de maior nmero de resultados inconclusivos em amostras escassas ou com
artefatos, m interpretao diagnstica pela ausncia da arquitetura tecidual, dificuldade de acesso a
certos rgos e na obteno de espcimes representativos em algumas leses, alm de obscurecimento dos
elementos celulares pela presena de sangue. A quantidade e qualidade do material citolgico so fatores
determinantes na preciso diagnstica e esto diretamente relacionados ao uso de tcnicas adequadas de
amostragem e ao processamento apropriado dos espcimes.
Podemos dividir os espcimes citopatolgicos em dois grandes grupos, dependendo da tcnica
empregada na coleta das amostras:
Obtidos atravs da puno aspirativa com agulha fina (PAAF) ou por capilaridade.
Obtidos a partir da raspagem de uma leso ou de clulas que descamam naturalmente
compreendem os imprints, raspados, escovados, lavados e tambm as anlises de escarro, urina,
secreo mamilar e lquidos cavitrios.
1.1 Puno
um mtodo simples, rpido e seguro que confere boa preciso diagnstica. Pode ser realizado
ambulatorialmente. Complicaes como sangramento, hematomas, processos inflamatrios e pneumotrax,
so raras.
Algumas etapas preliminares e cuidados especficos so necessrios na realizao do procedimento,
como o preparo fsico e psicolgico do paciente, a antissepsia do local a ser puncionado e um pequeno
curativo oclusivo aps a puno. indicado o uso de anestsico na puno de rgos profundos.
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Figura 1 - Portaseringa.
Instrumento utilizado para
apoiar o conjunto de seringa
e agulha.
Para a realizao da PAAF, devemos colocar o paciente em posio adequada, identificar a leso
por palpao, fazer a antissepsia local, acoplar a agulha seringa e fixar a leso entre o dedo indicador e
o mdio. Em seguida, proceder puno de acordo com a tcnica descrita na figura abaixo.
Figura 2 - Posicionamento do
paciente para a realizao da
PAAF de ndulo da tireoide.
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a b c
d e
Tcnica
Localizar e fixar o ndulo.
Fazer a assepsia do local a ser puncionado.
Introduzir a agulha na leso e efetuar movimentos rpidos e repetidos de vai e vem, em vrias
direes.
Remover a agulha da leso ao perceber a presena de material no bisel.
Acoplar a agulha com o material coletado a uma seringa descartvel de 10 ml, com o mbolo j
deslocado, e eliminar pequenas quantidades da amostra em vrias lminas. Confeccionar os esfre-
gaos e fixar de maneira idntica tcnica anterior.
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Pele
Agulha
Ndulo
1.2 Imprints
Os materiais citolgicos so obtidos a partir de amostras de bipsia, da superfcie de corte de um
rgo ou de leses midas. A tcnica consiste na remoo de clulas superficiais atravs do contato ou toque
direto da lmina sobre o material que se quer examinar. Esta tcnica oferece informaes diagnsticas
complementares nos estudos das leses da mama, de rgos do aparelho digestivo, pele, medula ssea etc.
Os imprints so de grande valia no exame intraoperatrio como mtodo auxiliar da congelao,
podendo, inclusive, substitu-la quando o material escasso ou quando se pretende evitar as alteraes
artefatuais decorrentes do processo de congelamento do tecido. Tambm so utilizados em salas de
necropsia para confirmao diagnstica rpida de suspeitas levantadas na macroscopia.
O esfregao preparado pressionando-se o material direta e suavemente sobre uma lmina limpa
por duas ou trs vezes, em vrios locais, devendo ser imediatamente fixado para evitar o dessecamento.
Para retirar o excesso de sangue e fluido do material, deve-se previamente secar a superfcie de corte com
uma toalha de papel ou gaze.
Esta tcnica possui algumas limitaes, uma delas a obteno de amostras com escassa
celularidade quando realizada em tumores de textura fibrosa, como os fibromas, fibrossarcomas e
inflamaes cicatriciais. Alm disso, quando realizada em leses ulceradas, a amostra pode conter restos
celulares, bactrias e clulas inflamatrias, que podero ocultar a etiologia da leso ou mascarar processos
tumorais. Nesses casos, se houver alguma rea slida, recomenda-se a utilizao concomitante de outros
mtodos, como a citologia aspirativa ou o raspado superficial da leso, para aumentar o nmero de clulas
esfoliadas.
1. 3 Raspados
Obtemos raspados de superfcies cutneas ou mucosas, como pele, boca, uretra, canal anal etc.,
utilizando-se lminas de bisturi, swabs, esptulas ou escovas apropriadas. recomendvel no lavar a leso
previamente nem usar medicaes tpicas, para no prejudicar a qualidade das amostras. Rotineiramente,
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so feitas duas a trs raspagens da leso ou da rea que se pretende examinar, de forma suave para evitar
sangramentos. O material colhido deve ser uniforme e suavemente estendido sobre uma lmina de vidro
limpa, em uma fina camada, e imediatamente fixado em lcool a 95% ou com spray fixador.
Em caso de leses vesiculares, estas devem ser rompidas com uma pequena inciso fazendo a
raspagem de suas margens, pois o material existente na base, por ser mal preservado, dificulta o diagnstico.
Em leses no ulceradas ou no vesiculares, aconselha-se aplicar previamente uma compressa de soluo
fisiolgica por alguns minutos, a fim de propiciar maior descamao e melhor preservao celular.
1.4 Escovados
Atravs de aparelhos endoscpicos que possibilitam a visualizao direta da leso a ser estudada,
os escovados permitem adquirir espcimes brnquicos, esofgicos, gstricos e intestinais, principalmente.
Muitas vezes, este mtodo mais eficaz em detectar neoplasias malignas do que a biopsia brnquica, por
exemplo. Nesse caso, aplica-se uma escova na superfcie da leso endobrnquica, atravs do broncoscpio
de fibra ptica, espalhando o material colhido numa lmina para a confeco dos esfregaos ou coloca-se
em um meio lquido de coleta para a realizao de cell block.
O procedimento pode ser feito ambulatorialmente sob sedao leve e com anestesia tpica. O
paciente deve estar em jejum de pelo menos quatro a seis horas e com acesso venoso perifrico. Uma
pequena escova introduzida juntamente com a sonda de um fibroscpio pela cavidade oral, nasal ou anal,
dependendo da localizao do tumor, e suavemente deslizada por cima da leso para efetuar a raspagem.
Posteriormente, a escova retrada para o interior da sonda e retirada junto com esta. Recomenda-se
efetuar o escovado antes de biopsiar a leso, para evitar amostras hemorrgicas. O material escovado
deve ser transferido rolando-se a escova sobre uma lmina de vidro limpa, espalhando-o uniformemente e
fixando-o imediatamente em lcool a 95% ou spray, visando preservar os detalhes da morfologia celular.
Aps a realizao dos escovados aconselha-se fazer, ainda, um lavado da escova, agitando-a em soluo
salina a fim de se examinar tambm o sedimento centrifugado.
1.5 Lavados
Consistem na instilao de soluo salina tamponada na rea da leso, preferencialmente sob
viso endoscpica direta, seguida da aspirao do material. Em geral, so realizados ambulatorialmente,
mediante sedao leve. Os lavados so acondicionados em recipientes limpos com a indicao do local
da coleta. Quando provenientes de diferentes localizaes anatmicas, devem ser colocados em frascos
distintos. Para evitar sua deteriorao, o material deve ser enviado imediatamente ao laboratrio para
processamento ou ser devidamente preservado segundo o tipo de lavado.
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a
a
1.7.1 Escarro
Foi um dos espcimes mais utilizados para o diagnstico citolgico das leses do trato respiratrio,
devido relativa facilidade para sua obteno e por provocar pouco desconforto ao paciente. Com o
advento da broncoscopia e da puno aspirativa por agulha fina (PAAF), seu uso tem declinado.
Seus componentes so constitudos por uma mistura de elementos celulares e no celulares. A
adequacidade da amostra estabelecida pela presena de clulas cilndricas ciliadas e de numerosos
macrfagos alveolares, indicativos de que o trato respiratrio inferior foi representado.
Amostras mltiplas, colhidas em dias consecutivos, aumentam a sensibilidade (de 42% com amostra
nica para 91% com cinco amostras), que tambm varia com a localizao do tumor maligno, sendo de 46%
a 77% para leses centrais e de apenas 31% a 47% para as leses perifricas. A especificidade do mtodo
alta, variando de 96% a 99%. Atravs da citologia esfoliativa possvel diagnosticar tumores centrais
da rvore brnquica e, menos frequentemente, tumores perifricos menores ou at mesmo detectar leses
precursoras do carcinoma escamoso. O escarro obtido aps broncoscopia aumenta a acuidade diagnstica.
A coleta deve ser realizada de preferncia pela manh, quando o paciente o acordar, em jejum
matinal, aps rigorosa higiene bucal (escovao dos dentes e da lngua), geralmente em trs dias conse-
cutivos. No intuito de obter material de origem pulmonar, o paciente orientado a tossir vrias vezes,
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eliminando a secreo diretamente em um recipiente de boca larga, seco e limpo. Caso haja dificuldade
em conseguir escarro espontneo, pode-se fazer nebulizao simples ou inalao com indutores da tosse.
O material deve ser levado imediatamente ao laboratrio ou conservado na geladeira por no mximo 12
horas. Os esfregaos devem ser preparados a partir de reas que contm fragmentos teciduais, sangue ou
ambos, e devem ser imediatamente fixados em etanol a 95%. Quando a preparao imediata no pos-
svel, deve-se fazer uma pr-fixao do escarro na diluio de 1:1 com etanol a 50% ou 70%, ou utilizar
soluo de polietilenoglicol a 2% (Carbowax) em etanol a 50%. Uma vez utilizado o polietilenoglicol,
este dever ser removido em banho de lcool, antes da colorao.
1.7.2 Urina
Com este espcime possvel detectar leses pr-cancerosas e patologias da pelve renal, bexiga,
ureter e uretra. Antes da coleta o paciente deve esvaziar a bexiga (a primeira urina da manh no
adequada para o exame) e fazer uma hidratao bebendo um copo de gua a cada 30 minutos, durante
o perdo de uma hora e meia a duas horas. Colher a prxima urina espontnea da manh diretamente no
recipiente coletor, de preferncia no laboratrio que ir processar o material, aps asseio da genitlia com
gua e sabo. Para promover a mobilizao de urina no interior da bexiga e facilitar a descamao celular,
alguns autores aconselham 15 minutos de exerccios fsicos (correr, pular) antes da coleta. Volumes entre
25 e 100 ml de urina espontnea ou cateterizada so suficientes e o processamento deve ser imediato ou
realizado em at seis horas aps a coleta. Durante esse perodo, manter a urina refrigerada ou preservada
em etanol a 50% (em partes iguais) ou a 70% (na proporo de duas partes de urina para uma de lcool).
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2.1 Pr-fixao
Tcnica que garante a preservao de espcimes lquidos (do trato urinrio, gastrointestinal ou res-
piratrio, sobretudo escarro) por dias ou mesmo meses, se necessrio, mantendo a morfologia celular at a
confeco do esfregao. Esta tcnica possui algumas desvantagens, tais como: a coagulao de protenas,
a condensao da cromatina, menor adeso celular e limitao ao uso de certas tcnicas de colorao. As
solues mais comumente utilizadas para este fim so: etanol a 50%, o fixador de Saccomano ou os pre-
parados comerciais especficos.
Dentre eles, o etanol a 50% o melhor e deve ser adicionado coleo lquida em partes iguais,
misturando-se bem. Com exceo do escarro, concentraes maiores no so recomendadas, especialmen-
te em materiais ricos em protenas, porque endurecem a amostra impossibilitando a confeco do esfrega-
o. Para a preservao de escarro, excepcionalmente, utiliza-se o etanol a 70%. O fixador de Saccomano,
inicialmente utilizado na pr-fixao de escarro, teve seu uso estendido para a preservao de lquidos
durante a citocentrifugao, pois evita o colapso celular causado pelo ressecamento do material quando
seco ao ar. constitudo de etanol a 50% com aproximadamente 2% de polietilenoglicol (Carbowax). O
Carbowax slido temperatura ambiente mas pode ser mantido em soluo estoque se adicionarmos
500 ml de etanol a 50% a 500 ml de Carbowax derretido. Para obter um litro de fixador de Saccomano,
misturar 434 ml de gua destilada, 526 ml de etanol a 95% e 40 ml de soluo estoque. Recomenda-se
adicionar quatro gotas do fixador aos fluidos corporais e duas gotas para amostras de urina. Uma vez que
o fixador de Saccomano contm polietilenoglicol, este deve ser removido com um banho de lcool antes
da colorao, para que o material se mantenha adequado avaliao citolgica.
2.2 Centrifugao
O processamento de lquidos de qualquer espcie comea com a centrifugao, visando concentrar
os elementos celulares no sedimento que se forma no fundo do tubo da centrfuga. A centrifugao pode
ser feita com a centrfuga convencional ou com a citocentrfuga, dependendo do tipo de material, ambas
com regulagem de tempo e velocidade de rotao (cronmetro e tacmetro, respectivamente). A quantida-
de do sedimento obtido aps a centrifugao inicial decide a prxima etapa do processamento: sedimentos
escassos ou invisveis devero ser citocentrifugados, enquanto que os de maior volume fornecem material
propcio para a confeco dos esfregaos ou dos cell blocks.
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2.2.2 Citocentrifugao
Recomendada no processamento de lquor, aspirados de leses csticas, lavados das agulhas
utilizadas em PAAF e em outros espcimes lquidos de pequeno volume ou que produzam escasso
sedimento na centrifugao convencional. A citocentrifugao tem a vantagem de processar rapidamente
pores lquidas de apenas 0,5 ml ou menos, alm de promover excelente recuperao celular e conferir
maior rapidez e facilidade na interpretao citolgica. Amostras com sedimento espesso devem ser
cuidadosamente diludas antes do processamento, a fim de produzir material em monocamada e evitar
esfregaos inadequados com superposio celular.
Tcnica
Centrifugar inicialmente o material pelo mtodo convencional e decantar o sobrenadante.
Encaixar a lmina e o papel de filtro no suporte da lmina e colocar na centrfuga previamente
balanceada.
Pipetar uma gota ou 0,5 ml do sedimento e colocar no coletor, adicionando duas a trs gotas do
fixador de Saccomano.
Centrifugar a 1.000 rpm (ou a 1.500 rpm, dependendo do fabricante) por cinco a seis minutos,
removendo as unidades com lmina e papel de filtro logo aps.
Levantar cuidadosamente o papel de filtro para separ-lo da lmina, evitando contato com
o sedimento. Antes de descartar o papel de filtro, ele deve ser inspecionado, pois algumas vezes
apresenta sobrenadante aderido que pode ser processado a fim de fornecer informaes adicionais.
Fixar a lmina imediatamente em lcool ou spray. recomendvel usar spray fixador, deixando-a
secar por 10 a 15 minutos antes de mergulhar em lcool a 95%.
Para evitar a perda e facilitar a aderncia celular em lquidos aquosos como amostras de urina e
lquor, recomenda-se usar lminas albuminizadas ou acrescentar duas a trs gotas de albumina ao lquido
antes da centrifugao. Outra opo utilizar lminas foscas ou pr-tratadas com o adesivo Poli-D-lisina.
Figura 8 - Citocentrfuga.
Tubos acoplados com as lminas.
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Tcnica
Misturar quatro a cinco gotas de gar-formalina em soluo (aquecer em banho-maria a soluo
estocada na geladeira, temperatura de 60 C) ao restante do sedimento do tubo.
Colocar o tubo com a mistura na geladeira para solidificar o gar por cerca de 30 min. Para agilizar
o processo, recomenda-se colocar o tubo em becker com gua gelada (previamente guardado na
geladeira).
Depois de solidificado o bloco, desloc-lo suavemente do fundo do tubo com a ajuda da ala de
platina e colocar em papel de filtro cortando-o em tamanho apropriado ao processamento histolgico.
Colocar todo o material em um cassete histolgico, fixar em formalina a 10% e enviar para o
processamento histolgico habitual.
2.3.2 Mtodo do sedimento fixado
Tem como reagente o formol a 10% que endurece o sedimento, permitindo que a amostra seja
encaminhada ao processamento histolgico de rotina.
Tcnica
Adicionar formalina a 10% ao sedimento ou aos fragmentos teciduais formados aps centrifugao
e deixar descansar por, no mnimo, duas horas. Caso necessrio, centrifugar novamente essa mistura
por dez minutos antes de coloc-la em repouso, desprezando o sobrenadante.
Remover cuidadosamente do interior do tubo o sedimento endurecido.
Envolver a amostra em papel de filtro e colocar no cassete histolgico, encaminhando para o pro-
cessamento histolgico de rotina.
2.3.3 Mtodo do plasma-trombina
Aplicado a lavados brnquicos e plvicos, fluidos serosos e espcimes aspirados, usa a ao
coagulante do plasma e da trombina para obter amostras coesas de clulas dos sedimentos. No
recomendada para espcimes gstricos por conta das enzimas contidas nesses materiais.
Tcnica
Adicionar de duas a trs gotas de plasma ao sedimento remanescente (no fixado) do tubo da
centrfuga, misturando bem. O plasma (obtido em banco de sangue) deve ser estocado no freezer,
podendo ficar na geladeira enquanto estiver sendo usado.
Em seguida, acrescentar duas a trs gotas de soluo de trombina (5.000 unidades de p de trombina
em 5 ml de soluo salina isotnica) e misturar bem.
Aguardar alguns segundos enquanto ocorre a coagulao da mistura (cerca de 30 a 60 segundos).
Depois de formado o cogulo, adicionar lentamente a formalina rosa a 10% e deixar descansar por, no
mnimo, 30 minutos. Cogulos grandes devem ser cortados em pedaos menores antes de serem fixados.
Com uma esptula, remover o cogulo do tubo, envolv-lo com leno de papel e coloc-lo no
cassete e encaminh-lo para o processamento histolgico.
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A fixao pode ser feita a seco ou atravs de substncias fixadoras aplicadas imediatamente aps
a confeco do esfregao. Assim, classificamos as tcnicas de fixao em: mida, de cobertura, mista ou
a seco.
Se, por acaso, ocorrer defeito na fixao e o material ressecar, as clulas escamosas podero ser
recuperadas antes da colorao reidratando-as em soluo de glicerina e gua destilada em partes iguais
por, no mnimo, uma hora. A seguir, mergulham-se as lminas em dois banhos de lcool a 95% deixando-
-as fixar por dez minutos para, ento, encaminh-las colorao.
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A permanncia do fixador sobre o esfregao causa de inadequao da amostra. Assim sendo, antes
de iniciar a colorao fundamental remover o polietilenoglicol para permitir a penetrao apropriada dos
corantes, especialmente a hematoxilina e o EA. Com essa finalidade, as amostras so submetidas a dois
banhos sucessivos, de cinco a dez minutos cada, em etanol a 95%.
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Colocar uma gota de cido actico glacial em 100 ml de etanol a 95% e mergulhar a lmina na
mistura.
Colocar os esfregaos hemorrgicos no fixador de Carnoy (60 ml de metanol a 95%, 30 ml de
clorofrmio e 10 ml de cido actico glacial) por trs a cinco minutos, at que o sedimento se torne
menos vermelho. Depois transferir as amostras para etanol a 95%. O fixador de Carnoy deve ser
preparado no momento do uso e descartado logo aps. Ao empregar esta tcnica no se esquecer
de reduzir o tempo de permanncia na hematoxilina a fim de evitar que os ncleos se tornem
hipercorados, pois geralmente a retrao nuclear mais intensa que a causada pelo etanol a 95%.
Pode-se utilizar o fixador de Carnoy modificado (soluo com sete partes de etanol a 95% para
meia parte de cido actico glacial) seguido de etanol a 95%.
Esfregaos hemorrgicos provenientes de espcimes lquidos, secos ao ar, podem ser reidratados
mergulhando-os em soluo salina por 30 minutos. Em seguida, fixar em etanol a 95% e corar pelo
Papanicolaou.
Figura 14 - Espcime
hemorrgico e com arte-
fatos de dessecamento.
100x.
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Tcnica
gua destilada Lavar
Hematoxilina 1 min e 30s
gua corrente Lavar
Carbonato de ltio 15s
gua corrente Lavar
Etanol absoluto 1 banho
Etanol absoluto 1 banho
Orange 1 mergulho rpido
Etanol absoluto 1 banho
Etanol absoluto 1 banho
EA 3 min
Etanol absoluto 1 banho
Etanol absoluto 1 banho
Xilol 15 a 30 min
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Ncleos plidos so vistos em espcimes dessecados, com restos de fixadores de cobertura, que
passaram tempo excessivo no cido clordrico (ou na gua) ou que no permaneceram o tempo suficiente
na hematoxilina. Fixao em lcool com concentrao superior a indicada, tempo prolongado nos coran-
tes ou uso de corantes muito concentrados ou novos podem deixar os ncleos fortemente corados dando
uma falsa ideia de hipercromasia. Se a hematoxilina no filtrada diariamente, depsitos do corante sobre
o esfregao podem dificultar a leitura.
Quando a bateria de colorao checada diariamente fazendo-se as correes necessrias, muitos
problemas podem ser minimizados. Aconselha-se trocar os corantes depois da colorao de aproximada-
mente duas mil lminas ou aps um perodo de seis a oito semanas. Os lcoois devem ser trocados quando
mudarem de cor e o xilol ao tornar-se leitoso.
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Tcnica
Processamento de lquidos
Centrifugar o espcime num tubo a 2.000 rpm por sete a dez minutos, decantar
cuidadosamente o sobrenadante, retirando uma a duas gotas da camada superior (com ala
de platina) para colocar na lmina. Adicionar uma gota de azul de toluidina e misturar.
As lminas coradas com o azul de toluidina podem ser colocadas em cmara mida (por exemplo,
em placa de Petri com gaze umedecida, tampada) e guardadas em geladeira por at 24 horas. Depois de
examinadas, devem ser fixadas em lcool a 95% e posteriormente coradas pelo Papanicolaou.
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2.6.8 Pantico
Tambm uma tcnica rpida aplicada no estudo imediato de amostras obtidas por PAAF e que
estabelece no s um diagnstico de urgncia, mas tambm avalia a celularidade do material. Os esfre-
gaos devem ser secos ao ar antes de serem submetidos colorao. Apesar de utilizar trs solues de
corantes (Instant Prov I, II e III), o tempo de processamento de apenas 15 segundos. As lminas podero
ser arquivadas permanentemente.
Alcian Blue: utilizado para colorao de carboidratos. Auxilia na identificao de coloide, gli-
cognio, mucina e cpsulas de fungos. Cora os ncleos em azul claro.
PAS (cido Peridico de Schiff): tambm cora carboidratos e fungos, conferindo-lhes a cor
magenta. Os ncleos coram-se em preto e o fundo do esfregao em verde.
Prata Metanamina (Mtodo de Grocott): permite identificar fungos e Pneumocystis carinii os
quais se coram em preto. Glicognio e mucina so corados em rosa a cinza e o fundo em verde.
Azul da Prssia (Mtodo de Perls): demonstra depsitos de hemossiderina, corando-os em
azul. O ncleo e outras estruturas se coram em vermelho.
GRAM: permite a especificao da flora bacteriana em Gram positiva ou negativa.
Ziehl-Neelsen: serve para identificar bacilos lcool-cido-resistentes (BAAR).
2.7 Montagem
Tem a finalidade de proteger o material celular contra o dessecamento e a retrao celulares, alm
de prevenir o desbotamento dos corantes nas clulas. Tambm possui a funo adicional de proteger a
amostra para o armazenamento adequado. Por aumentar o ndice de refrao do esfregao, possibilita
melhor visualizao dos detalhes celulares. O material usado na montagem permite a ligao entre a
lmina e a lamnula e representado por uma resina sinttica dissolvida em um solvente, frequentemente
o xilol. Os mais utilizados so o Blsamo do Canad e o Entellan, embora alguns laboratrios usem
tambm o verniz.
Tcnica
Depois de retirar a lmina do xilol, colocar de uma a duas gotas do meio de montagem
sobre a lamnula.
Colocar suavemente a lamnula sobre a lmina exercendo uma leve presso.
Escorrer o excesso do meio de montagem e limpar com xilol.
Afastar as bolhas que se formaram com basto de vidro ou pina.
Deixar secar por alguns minutos antes de iniciar a leitura microscpica.
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Figura 18 - Artefatos de
montagem (cornflakes),
400x. Os artefatos (setas)
ocorrem quando a monta-
gem demorada, surgindo
pigmentos marrons.
Com o passar do tempo o blsamo pode tornar-se espesso, em virtude da evaporao do solvente,
e interferir na adequabilidade da amostra, no devendo portanto ser utilizado nessas condies. O uso de
lamnulas (ou lminas) mofadas tambm dificulta a leitura do esfregao. Para limpar o mofo, dissolver
40 g de bicromato de potssio em um litro de gua corrente at ficar homogneo. Acrescentar 200 ml de
cido sulfrico aos poucos, mantendo o recipiente em uma vasilha com gua durante esse processo para
minimizar o aquecimento que ocorre com a mistura. Deixar as lamnulas nessa soluo por 48 horas,
lavando-as depois com bastante gua e sabo. Recomenda-se um banho de cinco minutos em lcool
absoluto, colocando-as para secar em estufa posteriormente.
Aparelho respiratrio
O processamento varia segundo o tipo de amostra.
Escarro: colocar o material em uma placa de Petri e examinar sob fundo escuro (papel embaixo
da placa) e com iluminao direta para selecionar amostras das reas com sangue ou com
partculas slidas e escuras, acinzentadas ou opacas. Confeccionar os esfregaos pelo mtodo do
esmagamento, fixar com spray ou lcool e corar pelo Papanicolaou. Separar esfregaos extras para
coloraes especiais.
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Lavados: enviar a fresco. Remover qualquer fragmento visvel para processar em cell block.
Centrifugar o lquido e fazer esfregaos com o sedimento pela tcnica do esmagamento, fixando
em lcool ou spray. Corar pelo Papanicolaou. Pode ser necessrio citocentrifug-lo.
Escovados: fazer esfregaos aps a coleta e fixar em lcool ou spray. So corados pelo mtodo
de Papanicolaou. Durante a coleta, proceder s tcnicas de colorao rpida em esfregaos fixados
ao ar para avaliar a satisfatoriedade do material. Mergulhar a escova em suspenso salina, para
retirar as clulas aderidas, centrifugar ou citocentrifugar esse material e preparar cell block .
Aparelho digestivo
As amostras so obtidas de lavados ou escovados e se faz imprints em fragmentos de bipsia. O
processamento tem que ser imediato e semelhante aos de outros lavados e escovados. Processar os cell
blocks em gar para evitar degenerao enzimtica. A adio de fixadores ou preservativos aos espcimes
e a presena de alimentos comprometem a adequabilidade do material.
Aparelho urinrio
Colher urina fresca ou cateterizada, processando-a rapidamente (at seis horas). A primeira
da manh no deve ser utilizada. Se houver demora no processamento, aconselha-se a pr-fixao do
material. Pode-se optar por um dos mtodos a seguir:
Lquor
Devem ser encaminhados a fresco, imediatamente. Centrifugar o material, decantar o sobrenadante
e citocentrifug-lo. Corar em Papanicolaou. Process-lo separadamente para evitar contaminao cruzada.
Os materiais podem ser contaminados com talco tornando-os insatisfatrios. s vezes, os materiais so
contaminados com o talco das luvas utilizadas no processamento de coleta, tornando-os insatisfatrios.
Lquidos csticos
Os materiais geralmente so de pequeno volume (1 ml ou menos) e devem ser enviados a fresco em
recipientes apropriados ou na prpria seringa. O processamento realizado de imediato por centrifugao
e, se necessrio, citocentrifugar. Corar pelo Papanicolaou.
Efuses
Geralmente so recebidas a fresco. Devem ser centrifugadas, removendo-se previamente cogulos
ou grumos presentes na amostra para process-los em cell block. Fazer esfregaos com o sedimento,
separando dois deles para fixao em lcool a 95 %, corando-os em Papanicolaou e em HE. Deixar
outro esfregao secar ar e cor-lo por um dos mtodos de colorao rpida, geralmente o DQ. Espcimes
congelados e dessecados so insatisfatrios para avaliao.
40
PAAF
Os esfregaos geralmente so fixados em lcool a 95% ou a seco, embora o lcool absoluto
tambm possa ser utilizado. Corar pelo Papanicolaou ou HE e os secos ao ar por DQ ou pantico.
Centrifugar o material e citocentrifugar o lavado da agulha e da seringa com soluo salina para fazer cell
block. Amostras insatisfatrias podem resultar de falhas tcnicas como suco reduzida ou excessiva na
coleta, esfregaos espessos, fixao inadequada ou colorao defeituosa. Abscessos e leses fibrticas,
calcificadas, necrticas ou com degenerao cstica podem dificultar a obteno de material adequado
por escassez ou ausncia de clulas. Materiais puncionados de reas fora da leso originam diagnsticos
falso-negativos por erro de amostragem.
41
Citologia definida como o estudo das clulas, suas estruturas e funes. O ncleo, o citoplasma,
a membrana e a matriz extracelular constituem os quatro elementos bsicos para o estudo do diagnstico
citolgico.
3.1 Clula
O princpio geral do diagnstico citolgico que o ncleo reflete o estado de sade da clula
(normal, inflamao, degenerao, bem como hiperplasia, metaplasia ou neoplasia), enquanto o citoplasma
reflete a origem e a sua diferenciao funcional (exemplo: clulas glandulares produtoras de muco,
clula escamosa protetora). Quando devidamente analisados, o ncleo e o citoplasma revelam riqueza de
informaes sobre a clula.
3.1.1 Ncleo
As informaes contidas no ncleo das clulas no apenas determinam a atividade celular atual,
bem como repassam essas informaes s clulas futuras atravs da reproduo celular. A informao
gentica da clula encontra-se no cido desoxirribonucleico (DNA), presente preferencialmente no ncleo
e, em menor parte, nas mitocndrias.
No ncleo ocorre:
45
Classificao da cromatina
Eucromatina Fios delgados (parte ativa)
Heterocromatina Fios condensados (parte inativa)
As protenas nucleares podem ser classificadas em histonas e no histonas. Histonas so protenas
cilndricas que protegem o DNA e participam da condensao da cromatina formando a heterocromatina.
A heterocromatina e as protenas no histonas so cidas, por isso coram-se basofilicamente na colorao
de Papanicolaou visto que cido tem predileo por base. Juntas so as responsveis pelas caractersticas
tpicas da colorao nuclear. Os cromocentros so partculas de heterocromatina relativamente largas
tendo como exemplo o Corpsculo de Baar que um cromossomo X inativo. Algumas doenas so co-
nhecidas pela ausncia de corpsculos de Barr, como a Sndrome de Turner (XO), e outras com corpscu-
los de Baar extras, a exemplo da Sndrome de Klinefelter (47XXY). Estes corpsculos podem ser vistos
ocasionalmente em clulas malignas sendo indicativos de cromatina anormal.
A eucromatina se encontra ativa na sntese de RNA correspondendo aos espaos vazios, sendo
conhecida como paracromatina. Portanto, no ncleo hipercromtico encontra-se mais heterocromatina
(inativa) e no ncleo hipocromtico mais eucromatina (ativa).
A intensidade da basofilia do ncleo proporcional a quantidade de DNA presente, no entanto
a hiper ou a hipocromasia dependem de trs fatores: quantidade do corante, tamanho do ncleo (quanto
maior o volume, maior a atividade celular) e da lei de Beer, que relaciona a absoro de luz com as pro-
priedades do material atravessado por esta.
A condensao da cromatina um achado citolgico importante podendo ser fina ou grosseira,
regular ou irregularmente distribuda.
a b
Figura 20 -
a - Clulas apcrinas,
400x. Cromatina fina e
regularmente distribu-
da (seta).
b - Carcinoma escamo-
so do colo, 400x. Cro-
matina finamente gra-
c d nular e irregularmente
distribuda (seta).
c - Carcinoma lobular
da mama, 200x. Cro-
matina grosseira e re-
gularmente distribuda
(seta).
d - Carcinoma ductal
da mama, 400x. Cro-
matina grosseira e irre-
gularmente distribuda
(seta).
46
As alteraes nucleares tambm variam de clula para clula e esta, quando intensa, fortemente
sugestiva de malignidade. Outra caracterstica peculiar e frequente a colorao da paracromatina. A
hipercromasia e a cor azulada associadas ao aumento nuclear, so sugestivos de malignidade, enquanto a
cor avermelhada sugere processos infecciosos. Particularmente comum aps radioterapia, a vacuolizao
nuclear pode ser pequena, redonda, nica ou mltipla, s vezes comprimindo a cromatina.
Nos processos degenerativos o aumento nuclear pequeno e sem hipercromasia diferentemente
dos processos malignos. Nos casos de radiao e m fixao do material (dessecamento) tambm ocorre
aumento do ncleo, mas a cromatina plida, homognea, difusa e sem partculas distintas.
47
3.1.2 Nuclolo
Os nuclolos podem ser a principal estrutura nuclear proeminente em muitas clulas. Eles variam
em tamanho, nmero e forma, mas usualmente so pequenos, escassos, redondos ou ovais. So compostos
de protenas (em sua maioria), RNA e DNA (em menor quantidade). Podemos diferenciar cromocentro de
nuclolo utilizando como parmetro a colorao dos cidos nucleicos, que mostra nuclolo acidoflico e
cromocentro basoflico.
A funo do nuclolo a sntese do RNA ribossomal. Os ribossomos esto envolvidos com a
sntese de protenas numa relao direta entre o tamanho do nuclolo e a quantidade de protena produzida
pela clula. Nuclolos grandes, mltiplos e irregulares so indicativos de cncer, mas tambm podem ser
observados em condies benignas a exemplo dos processos reparativos. Em geral, mais de seis nuclolos
por ncleo so considerados anormais. Quando o aumento celular atinge um determinado tamanho, em
geral duas vezes o tamanho normal, sinal de que a clula ir se dividir, ou seja, ocorrer mitose de acordo
com os passos abaixo:
48
a b
49
3.1.3 Citoplasma
O citoplasma de uma clula corresponde ao contedo que est fora do ncleo e dentro dos limites
da membrana celular, incluindo as organelas e a matriz citoplasmtica (ou citosol). Esta ltima que
corresponde ao maior volume celular, composta por um gel coloidal constitudo principalmente por gua,
no qual as organelas e as incluses esto suspensas. Muitas reaes celulares como a gliclise anaerbica
so catalisadas por enzimas suspensas na matriz citoplasmtica. O citosol altamente organizado, mas
suas estruturas no podem ser observadas ao microscpio ptico.
As organelas, tais como retculo endoplasmtico, mitocndrias e rea de Golgi, no so visveis
nos preparados citolgicos, exceto em certas circunstncias. Por exemplo, as mitocndrias, essenciais
para a respirao celular, so abundantes nos hepatcitos, em clulas apcrinas e tambm em tumores
oncocticos acarretando um aumento da eosinofilia. Produtos de secreo como mucina, em clulas
endocervicais ou em clulas tumorais e glicognio em clulas escamosas intermedirias da crvice podem
ser evidenciados pelo cido peridico de Schiff (periodic-acid Schiff PAS).
Pigmentos e outros materiais intracelulares podem ser facilmente detectados no material citolgico,
a exemplo da melanina no melanoma maligno, da hemosiderina em macrfagos nas reas de hemorragia
e da queratina no carcinoma escamoso queratinizante.
O citoesqueleto o maior componente estrutural da matriz celular, visvel apenas microscopia
eletrnica, sendo o responsvel pela manuteno da forma e pelo movimento celular.
50
51
52
53
4.1 Mama
A mama humana normalmente localizada na parede anterior do trax apresentando na sua regio
central uma arola e uma papila. Ela dividida em 15 a 20 lobos mamrios independentes, separados por
tecido fibroso. Cada lobo tem a sua via de drenagem, que converge para a papila, atravs do sistema duc-
tal. Portanto, a mama formada de um lbulo (ou unidade lobular ductal terminal) e de um grande sistema
ductal. Tm como funo principal a produo do leite para a amamentao.
c
d
e
Figura 26 - Representao Esquemtica da Mama
f a - Gradil costal.
b - Msculo peitoral.
g c - Unidades lobulares.
h d - Mamilo.
e - Arola.
f - Ductos lactferos.
g - Tecido adiposo.
h - Pele.
Doenas fibrocsticas, fibroadenomas, cistos e a maioria dos cnceres se originam frequentemente
dos lbulos. Os grandes ductos podem ser os stios de origem dos papilomas solitrios, carcinoma papilar,
ectasia ductal e possivelmente Doena de Paget.
Embriologicamente, a mama uma glndula sudorpara apcrina modificada, derivada do ecto-
derma e suspensa pelos ligamentos suspensores de Cooper. Quando esses ligamentos so acometidos por
fibrose (nos casos de cncer) d origem imagem de casca de laranja. Durante a primeira fase do ciclo
menstrual os lbulos tornam-se proliferativos em virtude da presena do efeito estrognico. Nesta fase
pr-ovulatria, as clulas ductais aspiradas se apresentam em monocamada e com citoplasma distinto. Os
ncleos so pequenos, compactos e com nuclolos discretos. J na segunda fase do ciclo (ps ovulatria
ou ltea) o lbulo continua a se proliferar e o estroma, em resposta ao do hormnio progesterona,
torna-se edemaciado. Sendo assim, as clulas se apresentam em vrias camadas com citoplasma indis-
tinto, marginao da cromatina levando ao aparecimento de uma rea clara ao redor do nuclolo, agora
proeminente. Na mama, em contraste com o endomtrio, o maior nmero de mitoses encontrado na
segunda fase do ciclo. Durante a menstruao, em decorrncia da diminuio dos hormnios estrognio
e progesterona, os lbulos voltam s caractersticas normais. Na ps-menopausa o tecido conjuntivo e o
tecido glandular atrofiam e ocorre a substituio gordurosa (liposubstituio).
As doenas que afetam a mama podem ser divididas em trs grupos: inflamao (incluindo aguda,
crnica e mastite granulomatosa), hiperplasia (incluindo doena fibrocstica, alteraes da gestao e a
maioria das neoplasias benignas) e cncer.
55
Clulas ductais
Clulas epiteliais ductais benignas so usualmente vistas em aspirados da mama como clulas
pequenas e altamente coesas. So vistas em arranjos bidimensionais planos, mas podem apresentar leve
sobreposio refletindo uma hiperplasia benigna. Estruturas microacinares so relativamente raras e es-
parsas, mas podem aparecer em algumas condies benignas como: adenose esclerosante, fibroadenoma e
na lactao. Entretanto, quando microcinos so numerosos e bem formados, a malignidade deve ser con-
siderada, particularmente quando as clulas esto aumentadas. Nas condies benignas essas clulas so
uniformes, o ncleo redondo a oval, variando de uma vez a uma vez e meia o dimetro de uma hemcia,
ou seja, raramente grande. A membrana nuclear delicada, a cromatina fina, por vezes hipercromtica
e o nuclolo nico e discreto. Quando o tamanho nuclear das clulas ductais de trs a quatro vezes
o dimetro de uma hemcia, a membrana nuclear irregular, o nuclolo proeminente, particularmente
macronuclolo, o diagnstico de malignidade deve ser sugerido. Invaginaes citoplasmticas intranucle-
ares podem estar presentes tanto nas condies benignas como nas malignas. O citoplasma varivel e
usualmente delicado e escasso, mas pode ser mais definido com bordas celulares proeminentes, dando um
aspecto de favo de mel. A presena de vacolos secretores de mucina anormal e indicativo de cncer.
Figura 27 - Fibroadenoma,
200x. Clulas ductais.
56
Clulas mioepiteliais
A presena de clulas mioepiteliais ou de ncleos desnudos bipolares indicativa de benignida-
de. Esses so ovais ou alongados, escuros, suaves e desprovidos de citoplasma. Em geral tm tamanho
equivalente ao dimetro de uma hemcia e podem ser encontrados espalhados no fundo do esfregao ou
sobrepostos a grupos de clulas ductais. Devemos ser extremamente cautelosos com o diagnstico de ma-
lignidade na presena desses ncleos desnudos, pois sua presena no patognomnica de benignidade,
apenas refora o cuidado que se deve ter ao sugerir malignidade. Grupamentos de clulas benignas podem
ser identificados em meio a grupamentos de clulas malignas. A presena das clulas ductais e mioepite-
liais um forte indicativo de benignidade em contraste com as neoplasias malignas que se caracterizam
pela ausncia de clulas mioepiteliais.
Figura 28 - Fibroadenoma,
100x. Ao fundo h clulas
mioepiteliais soltas (setas).
Clulas Espumosas
A origem dessas clulas incerta podendo ser originrias dos ductos (clulas ductais), de monci-
tos da medula ssea (histicitos ou macrfagos) ou de ambos. So encontradas isoladamente ou em gru-
pos, tm citoplasma abundante, multivacuolado e bordos celulares relativamente distintos. O citoplasma
muitas vezes contm vrios pigmentos ou incluses. Os ncleos so brandos ou reativos, redondos ou
ovais. Clulas espumosas gigantes multinucleadas podem estar associadas a leses benignas e aos cistos
bem como aos casos de cncer.
57
Clulas apcrinas
Representam metaplasia das clulas do epitlio lobular. So frequentemente encontradas em aspi-
rados benignos tais como: doena fibrocstica, fibroadenomas e cistos. Elas se apresentam de forma coesa,
regular, plana, porm diferentemente das clulas ductais, essas clulas podem se apresentar tanto isola-
damente como em grupos papilares. Sua principal caracterstica o citoplasma abundante e ligeiramente
granular, decorrente da presena de numerosas mitocndrias (semelhantes aos onccitos). Algumas vezes
o citoplasma pode ser denso e com bordos celulares distintos conferindo-lhes aparncia escamoide. Os
ncleos so excntricos e podem variar em tamanho e forma, mas so usualmente uniformes. A membrana
nuclear suave, a cromatina finamente granular e uniformemente distribuda. Nuclolos nicos, redondos
e proeminentes so comuns. A sua presena sugere benignidade estando frequentemente associadas a cis-
tos. Nos processos inflamatrios estas clulas podem ser confundidas com clulas malignas.
Os resultados citopatolgicos de materiais obtidos atravs de Puno Aspirativa por Agulha Fina
(PAAF) da mama ou por descarga mamilar so descritos de acordo com a probabilidade de malignidade
indo at o diagnstico especfico. A reprodutibilidade entre observadores excelente para a categoria po-
sitiva para malignidade, pobre para os casos atpicos e bons para as demais categorias.
Uma amostra de PAAF de mama considerada satisfatria quando encontramos de cinco a seis
grupamentos de clulas bem preservadas e para um diagnstico negativo (benigno) necessrio que essa
amostra seja satisfatria. O mdico deve sempre correlacionar o resultado citopatolgico com os achados
clnicos e radiolgicos (triplo teste). importante ressaltar que um resultado citolgico negativo no
garantia de que o ndulo benigno, em especial nos casos em que os achados clnicos e a mamografia
suspeitam de malignidade. A categoria atpica utilizada nas amostras com pouca probabilidade para
malignidade sendo comum quando se tem uma mistura de achados citolgicos de entidades benignas e
malignas numa mesma amostra. Em geral, a bipsia est indicada. J a categoria suspeita se aplica aos
casos em que os achados so provavelmente de malignidade. Exemplificamos os casos em que as clulas
atpicas so pouco numerosas, mal preservadas, a amostra hemorrgica ou inflamatria impedindo o
58
diagnstico definitivo de maligno, ou ainda quando os achados sugerem um cncer de atipias mnimas
como o carcinoma lobular, tubular ou papilar. A bipsia ento se impe. Diagnsticos positivos para ma-
lignidade esto reservados para os casos com caractersticas inequvocas de malignidade.
Trs aspectos no diagnstico so importantes:
A celularidade;
Os arranjos celulares;
O fundo do esfregao (background).
Aspirados hipocelulares podem ser encontrados nos casos de fibroadenoma, alteraes fibrocsti-
cas, necrose gordurosa, alteraes secundrias a radiao, gravidez, lactao e carcinomas in situ ou inva-
sivos (particularmente os tipos tubulares e lobulares). A celularidade moderada comum na gravidez ou
na lactao e nas alteraes fibrocsticas. Nos fibroadenomas, Tumor Phyllodes e carcinomas, incluindo
os invasivos, a celularidade varia de moderada a acentuada. Os arranjos celulares podem ser planos, frou-
xos, coesos, tridimensionais, ramificados, papilares ou ainda constitudos predominantemente por clulas
isoladas. Dentre os elementos que podemos encontrar no fundo do esfregao destacamos: clulas inflama-
trias, detritos amorfos, sangue e mucina. As clulas inflamatrias agudas so comuns nas mastites e nos
carcinomas necrotizantes; as clulas inflamatrias crnicas nas hiperplasias, nas desordens proliferativas
e no carcinoma medular; o sangue pode ser um indicativo de papiloma, carcinoma papilar ou outros car-
cinomas; mucina ou material mixoide nos fibroadenomas, carcinoma mucinoso ou mucocele.
Figura 31 - Fibroadenoma,
100x. Clulas ductais e mio-
epiteliais coesas.
59
a b
c d
60
Quadro comparativo dos padres de benignidade e malignidade dos aspirados (PAAF) da mama
Benignidade Malignidade
Pobre a moderada (fibroadeno- Elevada
Celularidade mas so celulares)
61
62
63
a b
a b
Figura 37 - Fibroadenoma,
100x. direita (seta verde)
o componente estromal e
a esquerda (seta preta) o
componente epitelial.
64
a b
4.2 Tireoide
A funo da glndula tireoide produzir e armazenar hormnios tireoideanos responsveis pelo
metabolismo do organismo. Ela constituda por dois lobos laterais ligados por um istmo e a sua unidade
funcional o folculo que composto centralmente por coloide e circundado por um epitlio folicular. Os
folculos variam de tamanho tendo em mdia 200 de dimetro.
cartilagem
tireoidea
tireoide
traqueia
esterno
clavcula
Figura 39 - Topografia
da tireoide.
65
Clulas foliculares
O folculo normal constitudo por clulas foliculares que produzem os hormnios tireoideanos.
Essas clulas variam de acordo com a funcionalidade da glndula, quanto mais ativas mais abundante
o citoplasma. Elas se apresentam em arranjos de favo de mel ou em arranjos esfricos, constituindo
caracterstica importante do epitlio folicular no neoplsico. Clulas foliculares intactas, esparsas e iso-
ladas tambm so caractersticas de benignidade. No entanto, quando amontoadas formando numerosos
microfolculos (rosetas ou estruturas microacinares) ou papilas, o diagnstico de neoplasia deve ser suge-
rido. O ncleo redondo ou oval, em geral do tamanho de um linfcito, podendo variar de acordo com a
idade da paciente, com o estado funcional da clula ou com a fixao do material. O amoldamento nuclear
no comum. O contorno nuclear suave e a sua irregularidade sugere carcinoma em especial quando
esta alterao est presente na maioria das clulas. Ncleos aumentados, hipercromticos ou desnudos
ocasionais podem ser vistos em esfregaos benignos. A cromatina finamente granular e moderadamente
hipercromtica variando tambm de acordo com o estado funcional da clula. Quando densa, picntica
e mais aberta sugestiva de hiperatividade. Os nuclolos so infrequentes, contudo podem ser vistos em
clulas reativas ou regenerativas. Quando proeminentes ou mltiplos sugerem malignidade. O citoplasma
das clulas foliculares normais plido e delicado, quando denso e escamoide sugere carcinoma papilar.
Na degenerao as clulas foliculares se dissociam e o citoplasma torna-se espumoso ou granular sendo
indistinguvel dos histicitos. Grnulos de hemossiderina so indicativos de sangramento antigo.
Alteraes regenerativas se assemelhando a reparo tpico so encontradas nas clulas folicula-
res frequentemente associadas a leses benignas. Nos processos reparativos, semelhante aos observados
em outros tipos de epitlios, encontramos grupamento de clulas coesas, sem sobreposio, citoplasma
denso, abundante, ncleo aumentado de volume, cromatina fina, nuclolo proeminente e manuteno da
relao nucleocitoplasmtica.
66
Clulas da paratireoide
Essas clulas e os tumores relacionados a elas so indistinguveis das clulas foliculares sem a
utilizao de tcnicas especiais.
Clulas ciliadas
No so vistas normalmente nos aspirados da tireoide. Sua presena pode indicar aspirao de
clulas do epitlio respiratrio, do ducto tireoglosso e de cistos branquiais clivados.
Gordura
Tecido adiposo maduro pode excepcionalmente ser visto advindo da puno inadvertida do tecido
adiposo subcutneo do pescoo. Mais raramente, lipomas e liposarcomas tambm tm sido descritos.
67
Pigmentos/ cristais
Hemossiderina - associada a sangramento corando-se de dourado na colorao de Papanicolaou
e azul escuro em Diff-Quick.
Melanina - relacionada ao uso de medicamentos como a tetraciclina. O carcinoma medular tam-
bm pode produzir melanina.
Cristais de oxalato - podem ser identificados em tecido tireoideano normal, inflamatrio ou ne-
oplsico.
Amiloide
Pode ocorrer no carcinoma medular, no bcio amiloide, na amiloidose e tambm no plasmocitoma
da tireoide. Na colorao de Papanicolaou o amiloide assemelha-se a um coloide denso.
Coloide
Representa os hormnios tireoideanos. uma glicoprotena PAS + que se cora com mucicarmim.
Est presente em muitas patologias particularmente nas leses foliculares (bcios e neoplasias folicu-
lares). A sua quantidade varia de acordo com o estado funcional da glndula, quando abundante est
relacionado a folculos grandes ou macrofolculos, quando escasso relaciona-se a folculos pequenos ou
microfolculos. Em relao a atividade da glndula quanto mais fino e plido, maior a sua atividade e
quanto mais denso, menor a atividade glandular. Microscopicamente o coloide tem ampla variedade de
aparncias, mas na essncia apenas duas: aquoso ou fluido (difuso) e denso (slido).
Em 2007 na cidade de Bethesda, Maryland, EUA, ocorreu a conferncia para discusso e con-
cluses sobre a terminologia e critrios morfolgicos a serem utilizados nos diagnsticos de PAAF da
tireoide e baseado nesses critrios, descreveremos um pouco sobre os achados mais comuns.
68
69
Benignos
Dentre os diagnsticos benignos os mais comuns so os ndulos foliculares. A maioria dos ndulos
foliculares encontrados so proliferaes das clulas foliculares, ou seja, bcio multinodular ou adenoma
folicular. Com menor frequncia, encontram-se ndulos benignos ou pseudondulos em pacientes com
doenas inflamatrias como Tireoidite de Hashimoto e Tireoidite sub aguda. Muitas condies benignas
no causam ndulos, mas produzem alteraes celulares benignas (alteraes por radiao) que podem ser
confundidas com malignidade. Ndulos foliculares benignos so caracterizados por quantidade varivel
de coloide, clulas foliculares com aparncia de benignidade, clulas de Hrtle e macrfagos.
a b
a b
70
Ndulo maligno
Esfregaos com elementos citolgicos definitivos que caracterizam malignidade. Deve-se especi-
ficar o tipo de neoplasia, que pode ser:
a b
c d
Figura 45 - Carcinoma
papilfero.
a - Grupamentos celu-
lares em arranjo papi-
lar (setas), 100x.
b - Micronuclolo (seta
verde) e fenda (seta
preta), 400x.
c - Pseudoincluses
intranucleares (setas),
200x.
d - Corpo de psmamo-
ma (seta), 400x.
71
a b c
Figura 46 Carcinomas, 200x.
a - Carcinoma papilfero.
b - Carcinoma medular.
c - Carcinoma indiferenciado (Anaplsico).
72
4.3 Pulmo
73
Clulas serosas
Juntamente com as clulas mucosas so responsveis pela maior parte dos componentes orgnicos
do fluido que reveste internamente as vias respiratrias e pela secreo de componentes importantes para
a defesa pulmonar tais como a lizosima, lactoferrina e imunoglobulina A (IgA). Elas so encontradas na
superfcie epitelial e nas glndulas da lmina prpria.
Pneumcitos Tipo I
Revestem cerca de 95% da superfcie interna alveolar, so mais numerosas que os pneumcitos II,
so planas, pobres em organelas e com citoplasma extenso. So clulas que no se dividem.
Pneumcitos Tipo II
Encontram-se na superfcie interna alveolar, so clulas redondas com citoplasma vacuolado, di-
fceis de serem distinguidas dos macrfagos alveolares nos preparados citolgicos. So responsveis pela
produo do surfactante, substncia que controla a tenso superficial da interface ar-lquido pulmonar
e que facilita a fagocitose de microorganismos pelos macrfagos alveolares. Quando h leso alveolar,
funcionam como clulas de reserva para os pneumcitos tipo I.
74
Macrfagos alveolares
Originam-se dos prprios pulmes ou dos moncitos circulantes, sendo tambm conhecidos como
pneumcitos tipo III. Cada alvolo possui de dois a trs macrfagos residentes livres que representam a
primeira linha de defesa alveolar e so frequentemente identificados contendo pigmento de carbono no
seu citoplasma. A presena de hemossiderina no seu citoplasma indicativa de sangramento antigo que
pode estar associado s leses benignas como infartos, ou s neoplasias malignas. Sua forma depende do
tipo e da quantidade do material fagocitado. Geralmente apresentam um ou mais ncleos redondos ou
ovais e o citoplasma vacuolado.
Clulas mesoteliais
So frequentemente vistas nas bipsias aspirativas, particularmente nas leses da pleura. Em ge-
ral formam lenis planos com espaos ou janelas entre elas ou podem ser vistas isoladamente. Seus
ncleos so redondos ou ovalados, podendo apresentar fendas, a cromatina fina e uniforme, o nuclolo
pequeno e o citoplasma delicado. Quando reativas, podem ser confundidas com clulas malignas, pois
apresentam citoplasma denso, pleomorfismo nuclear e nuclolo proeminente.
Espirais de Cushmann
So filamentos enrolados de muco que se coram em prpura pelo Papanicolaou. So achados ines-
pecficos e no devem ser relatados no laudo.
Cristais de Charcot-Leyden
So derivados da degenerao dos eosinfilos em pacientes com doenas alrgicas graves como a
asma. Sua estrutura romboide e eosinoflica.
Corpos de Psamoma
Estruturas constitudas de calcificao concentricamente laminadas, vistas tanto em tumores ma-
lignos com arquitetura papilar (carcinoma papilfero da tireide e carcinoma do ovrio entre outros) como
em leses benignas como a tuberculose pulmonar e a microlitase alveolar.
75
Ditese hemorrgica.
Terapia com anticoagulante.
Hipertenso pulmonar severa.
Tosse incontrolvel.
Enfisema avanado.
Suspeita de malformao arteriovenosa.
Paciente no cooperativo.
Suspeita de cisto hidtico pulmonar.
76
principais sintomas. Em alguns pacientes assintomticos, no entanto, os carcinomas podem ser diagnosti-
cados incidentalmente em exames de imagem
Histologicamente, os carcinomas pulmonares podem ser agrupados nos seguintes tipos: carcino-
ma escamoso, adenocarcinoma, carcinoma de grandes clulas e carcinoma de pequenas clulas
Estes carcinomas frequentemente apresentam heterogeneidade histolgica, ou seja, em uma leso,
podem ser identificados mais de um tipo histolgico.
a b
Figura 48 -
a - Adenocarcinoma bem diferenciado do pulmo, 200x. Lavado brnquico. Ncleo grande (seta preta) e nuclolo
proeminente (seta vermelha).
b - Adenocarcinoma bronquolo alveolar, 200x. Discreta atipia nuclear (seta preta) e citoplasma delicado (seta verde).
a b
77
a b
Aumento nuclear De quatro a seis vezes menor Em geral, seis vezes maior
78
Clulas mesoteliais
muito importante saber reconhecer as clulas mesoteliais benignas, pois elas podem ser
confundidas com malignidade (particularmente adenocarcinoma), especialmente quando so reativas ou
aparentemente atpicas, como frequentemente se apresentam. As clulas mesoteliais so clulas epiteliais
derivadas do mesoderma. Quando normais ou no reativas, so vistas na PAAF como arranjos planos e
ordenados, apresentando citoplasma e bordos celulares definidos com espaos ou janelas proeminentes
entre elas. Os ncleos no reativos so paracentrais, usualmente uniformes, redondos a ovais, com
cromatina fina e delicada e nuclolos infrequentes. Alteraes reativas das clulas mesoteliais so comuns.
Alm dos arranjos planos e clulas isoladas, grupos tridimensionais com contornos em rosetas ou grupos
papilares podem ser vistos. As clulas reativas apresentam variaes pleomrficas (forma e tamanho). O
citoplasma dessas clulas denso na parte central e delicado e claro na borda. Os ncleos so centrais ou
paracentrais com contorno irregular e nuclolo proeminente. As doenas mais frequentes do mesotlio so
infeces e neoplasias.
Mesoteliomas benignos
So raros na pleura e mais comuns no peritnio. Em geral o tumor cresce como um processo papi-
lar recoberto por uma ou mais camadas de clulas mesoteliais. Na PAAF a celularidade abundante com
arranjos de clulas mesoteliais reativas ou atpicas. Os mesoteliomas benignos fibrosos so mais comuns
na pleura (visceral) que no peritnio e uma das principais caractersticas o predomnio dos fibroblastos
em relao s clulas mesoteliais. A celularidade varivel. Algumas leses so muito vascularizadas
resultando num aspirado hemorrgico. As clulas so fusiformes, lembrando fibroblastos e ncleos des-
nudos podem ser vistos. Fragmentos de estroma metacromtico frequentemente esto presentes. Mitoses
no so vistas. Em alguns casos a celularidade pode ser maior, com clulas moderadamente pleomrficas
e com cromatina grosseira.
Mesoteliomas malignos
A pleura o local mais frequente dos mesoteliomas malignos, mas estes tambm podem ocorrer
no pericrdio e peritnio. Na PAAF as amostras so usualmente celulares, e os achados citolgicos po-
dem mostrar alteraes puramente epiteliais, bifsicas (epiteliais e clulas fusiformes) at anaplsicas.
O padro bifsico muito caracterstico, mas nem sempre est presente. Alta celularidade com papilas
abundantes e achados clnicos favorveis ajudam no diagnstico. O tipo mais comum do mesotelioma
maligno o carcinomatoso. Os aspectos celulares podem ser mnimos ou inequvocos de malignidade. As
clulas formam agrupamentos planos ou tridimensionais, papilares ou do tipo tbulo acinares, mas podem
ser pouco coesas sob a forma de clulas isoladas. O contorno celular varia de redondo a poligonal ou an-
gular e pequeno componente de clulas fusiformes comum. O citoplasma abundante com bordos bem
definidos. Vacuolizao pode estar presente e ser decorrente de natureza degenerativa ou conter mucina
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