Guia Laboratorio Infectologia

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE TECNOLOGA MDICA

CONCEPCIN
GUA DE LABORATORIOS
INFECTOLOGA GENERAL
Profesora: Tecnlogo Mdico Cintia Avendao

UNIVERSIDAD SAN SEBASTIN
ESCUELA DE TECNOLOGIA MDICA
CONSIDERACIONES GENERALES DE BIOSEGURIDAD

EN EL LABORATORIO
Es muy importante para su seguridad y la de sus compaeros observar siempre las

siguientes medidas mnimas de seguridad.
Es obligatorio concurrir al laboratorio con delantal blanco, lpiz demogrfico o

plumn de tinta permanente.
Todo el material que use en el laboratorio debe considerarse como

CONTAMINADO y, por lo tanto, debe manejarse con cuidado, procurando no
dejarlos en los mesones sino eliminarlos slo en los recipientes dispuestos para
ello.
En la eventualidad de cualquier accidente, por pequeo que parezca, debe

comunicarse inmediatamente al profesor a cargo de la actividad.
Respete siempre las indicaciones que se darn durante las primeras

actividades prcticas respecto al uso del mechero para la esterilizacin de asas,
tubos u otros materiales.
Est estrictamente prohibido ingerir cualquier tipo de alimento o bebida en el

laboratorio. Jams debe sacar material contaminado o cultivos bacterianos fuera
del laboratorio.
No haga bromas, ni permita que sus compaeros las hagan, con cultivos
bacterianos o material contaminado.
Al terminar su trabajo prctico debe limpiar su rea de trabajo con la solucin

desinfectante que se le proporcionar. Su microscopio debe quedar igualmente
limpio y debidamente guardado.
Antes de abandonar el laboratorio lave cuidadosamente sus manos.
Recuerde!!
El principal responsable de su seguridad es usted
2
LABORATORIO N 1
REACCION ANTIGENO ANTICUERPO
Se denomina antgeno a cualquier sustancia extraa que, introducida en el

interior de un organismo, provoque una respuesta inmunitaria, estimulando la
produccin de anticuerpos.
Los anticuerpos son

protenas pertenecientes al
grupo de las gamma-
globulinas o
inmunoglobulinas,
constituidas por la asociacin
de cuatro cadenas
polipeptdicas unidas entre s
mediante puentes disulfuro,
dos cadenas se denominan
pesadas y las otras dos
ligeras. A su vez, cada una
de las cadenas ligeras y
pesadas, incluye una regin
variable, cuya secuencia de
aminocidos es peculiar de
cada anticuerpo, y una regin
constante, con la misma
secuencia en todos los
anticuerpos.
REACCION ANTIGENO-ANTICUERPO
La unin antgeno-anticuerpo es especfica, cada anticuerpo reconoce y se

une a un determinado antgeno. Esta unin se realiza por medio de uniones
intermoleculares entre el antgeno y la zona del anticuerpo, y da lugar al complejo
antgeno-anticuerpo segn el modelo llave-cerradura.
La respuesta inmune puede ser estudiada por el laboratorio mediante
reacciones antgeno-anticuerpo in vitro.
Existen varios tipos, entre las que se encuentran:
Aglutinacin
3
En estas reacciones un anticuerpo puede unirse a la vez a dos antgenos,
asimismo cada antgeno puede unirse a varios anticuerpos y formar un entramado
de complejos antgeno-anticuerpo
Neutralizacin
Si el antgeno es una sustancia txica, la unin con el anticuerpo provoca su
neutralizacin, de modo que no puede ejercer su efecto txico.
Precipitacin
En este caso el antgeno se encuentra disuelto, y al unirse los anticuerpos a los
antgenos se forman unos macro complejos moleculares, formndose como una red
tridimensional que debido a su tamao precipita.
Opsonizacin
El anticuerpo puede recubrir al antgeno para que sea reconocido por los
fagocitos, esta reaccin se llama opsonizacin, y es como si los antgenos fueran
ms "atractivos" para ser fagocitados.
APLICACIONES DE LAS REACCION ANTIGENO-ANTICUERPO EN EL

LABORATORIO
1. DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO
Una de las aplicaciones importantes en el laboratorio de las reacciones

antgeno-anticuerpo es la clasificacin de grupo sanguneo, mediante aglutinacin.
Los grupos sanguneos A, B, AB y O, fueron descubiertos por Landsteiner en
el ao 1900. Los diversos grupos sanguneos se definen por la presencia de
determinados Antgenos (Ag) sobre la superficie celular de los eritrocitos o glbulos
rojos. Dichos Ag son el producto directo o indirecto de la actividad de los genes y se
transmiten hereditariamente.
Estas molculas se llaman antgenos, porque si se hiciera una transfusin de
sangre del grupo A a un receptor del grupo B, se producira un rechazo, ya que para
el receptor la sustancia A es extraa, y su sistema inmunolgico la detecta y la
intenta eliminar.
Grupo A
La sangre tiene el antgeno A en los glbulos rojos, y el anticuerpo anti-B en el
plasma.
Grupo B
La sangre tiene el antgeno B en los glbulos rojos, y el anticuerpo anti-A en el
plasma.
4
Grupo AB
La sangre tiene ambos antgenos A y B en los glbulos rojos, pero no tiene ni el
anticuerpo anti-A ni el anti-B en el plasma.
Grupo 0
La sangre no tiene ni antgenos A ni B en los glbulos rojos, pero s tiene el
anticuerpo anti-A y el anti-B en el plasma.
Existe, adems, otro antgeno que tambin puede presentar problemas en las
transfusiones, se trata del factor Rh., que puede encontrarse en la sangre en cuyo
caso es Rh +, o no, y pertenecer a los que tienen el Rh-. Hay igualmente rechazo, si
se realiza una transfusin de sangre con Rh+ a un receptor Rh-.
2. EVALUACION DE TEST SEROLOGICOS
Las reacciones de aglutinacin por interaccin antgeno-anticuerpo tienen

una gran variedad de aplicaciones. Es as como se pueden utilizar en el laboratorio,
no slo para la determinacin de grupos sanguneos, sino tambin para la
deteccin de mltiples enfermedades o procesos infecciosos.
En nuestro organismo existen muchas protenas que comparten la propiedad

de mostrar elevaciones en sus concentraciones en respuestas a estados
inflamatorios producidos por infecciones, heridas, cirugas, traumatismos u otras
necrosis de los tejidos. Incluyen la 1-antitripsina, glucoprotena cida,
haptoglobina, ceruloplasmina, fibringeno y protena C reactiva. Es as como
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podemos utilizar estas protenas presentes en el suero de pacientes como
antgenos que puedan ser reconocidos por anticuerpos.
Por ejemplo:
Para determinar la elevacin o presencia de la protena C reactiva (PCR) en
el suero de los pacientes, pondremos en contacto una gota de suero de ste y
aadiremos una gota de reactivo que contenga una molcula especfica anti-
protena C reactiva. El suero del paciente contiene el antgeno y el reactivo los
Anticuerpos anti PCR especficos. Si la protena C reactiva est presente ocurrir

la unin antgeno-anticuerpo y se podr visualizar mediante una aglutinacin similar
a la ocurrida con los grupos sanguneos.
Existen otros casos en que se busca la presencia de anticuerpos en el suero
de pacientes para detectar la presencia de una enfermedad especfica. En estos
casos el suero del paciente proporciona los anticuerpos y los reactivos contienen
los antgenos especficos para una enfermedad. Un ejemplo es la deteccin de
enfermedades venreas por medio de un test de aglutinacin denominado RPR.
Al conjunto de este tipo de pruebas se denomina test serolgicos o pruebas

de serologa, ya que tanto como para buscar antgenos o anticuerpos en el
organismo de una paciente se utiliza suero.
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TRABAJO DE LABORATORIO
1. DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO MEDIANTE CLASIFICACION EN

LMINA
Materiales
Lancetas desechables Suero Anti A

Algodn Suero Anti B
Alcohol yodado Suero Anti AB
Lmina de vidrio Cmara de luz
Tachos de desechos Gradillas
Cloro al 0.5%
1. Coloque una gota de reactivo

o antisuero en un portaobjeto.
Repita el procedimiento con
cada uno de los otros
reactivos.
2. Limpie la zona pulpar del

dedo ndice con una trula
impregnada en alcohol
yodado.
3. Realice una puncin capilar

con una lanceta desechable.
4. Ponga en contacto una gota

de sangre con cada uno de
los sueros dispensados y
luego mezcle cada uno en
forma circular con una pipeta
plstica.
5. Agite la reaccin en forma

circular por unos segundos.
6. Visualice la reaccin e
interprete los resultados. 7
INTERPRETACIN
Suero anti-A Suero anti-B Suero anti-AB

Grupo A + - +
Grupo B - + +
Grupo AB + + +
Grupo O - - -
CONTRAPRUEBA
Aglutinacin positiva
8
INFORME:
Nombre ___________________________________________________________
Grupo ABO ________________
LABORATORIO N 2
ACCIN DE AGENTES EXTERNOS SOBRE LAS BACTERIAS
Ya que existen microorganismos que son perjudiciales para el ser humano,

se han utilizado diferentes mtodos fsicos para eliminarlos o destruirlos y de esta
forma evitar enfermedades, alteracin de elementos y cualquier efecto indeseable
que puedan producir en el medio donde se encuentran.
La esterilizacin comprende los procesos empleados con el fin de destruir
toda forma de vida (virus, bacterias, hongos, parsitos, etc.) que pueda existir en
instrumentos, sustancias u otro tipo de materiales.
El empleo de estos mtodos de esterilizacin es fundamental en la clnica
mdica y hospitalaria , ya que permiten el control de posibles fuentes de infeccin
para el hombre.
CLASIFICACION DE LOS METODOS DE ESTERILIZACION
METODOS FISICOS METODOS QUIMICOS METODOS MECANICOS

Calor Desinfectantes Filtracin
Radiaciones Antispticos Centrifugacin
Ultrasonido
1. METODOS FISICOS
Llameado: Se realiza por exposicin directa a la llama por lo menos por unos 10
segundos.
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Calor seco: Se realiza por la accin de aire caliente circulante en Hornos Pasteur.
La esterilizacin se produce en todo material vivo debido al aumento exagerado de
los procesos oxidativos.
Para jeringas, agujas y material de vidrio que se desee dejar exento de
pirgenos se utiliza una temperatura de 200 C durante 30 a 60 minutos.
Para material de vidrio como tubos de ensayo, placas petri, frascos para toma
de muestras, se utiliza una temperatura de 180 C por 60 minutos.
Calor hmedo: Se realiza por la accin de vapor saturado a baja presin. Tiene un
mayor poder de penetracin que el calor seco y produce la muerte de los
microorganismos por la coagulacin de las protenas del protoplasma.
Se realiza en equipos denominados "Autoclave". Se utiliza principalmente para la
esterilizacin de medios de cultivo a temperaturas entre 105 a 120 C.
10
Radiaciones: Se utiliza para materiales que no resisten altas temperaturas o

sustancias qumicas, principalmente material de plstico.
Radiaciones ultravioletas: Se utilizan para descontaminacin principalmente de

aire y algunos equipos.
2. METODOS QUMICOS
Desinfectantes: Son generalmente de accin bactericida y se aplican sobre

objetos inanimados. Ejemplo: Formaldhedo, Glutaraldhedo, Cloro, Alcohol.
Antispticos: Son sustancias de accin menos txica para los tejidos y pueden
utilizarse para desinfectar tejido humano. Ejemplo: Povidona yodada, Agua
oxigenada, Alcohol.
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1. ACCION DE AGENTES QUIMICOS SOBRE LAS BACTERIAS
Materiales:
Placas de Agar Mac Conkey Solucin de cloro 0.5%

Placas de Agar sangre Etanol al 70%
1 ml de suspensin bacteriana en caldo nutritivo. Alcohol yodado
Agua jabonosa Agua oxigenada
PROCEDIMIENTO N 1
1. Usted tiene una batera de 6 tubos conteniendo cada uno 1 ml de suspensin

bacteriana. Trabaje cada tubo de la manera que a continuacin se seala,
dispensando con una pipeta pasteur plstica la solucin que se indica:
TUBO AGUA CLORO AL ETANOL AL ALCOHOL AGUA

JABONOSA 0.5% 70% YODADO OXIGENADA
- - - -
1 1 ml
- - - -
2 1 ml
- - - -
3 1 ml
- - - -
4 1 ml
- - - -
5 1 ml
- - - - -
6
** El tubo 6 corresponde a un tubo control
12
ESTERILIZACIN DEL ASA MICROBIOLGICA
2. Luego de preparar cada tubo realice una siembra de la suspensin en una placa
de Agar Mac Conkey. No olvide marcar la placa con el nmero de la suspensin
respectiva.
2
1 3
4 6
5
Sembrar cada
solucin en un Estra
espacio de la placa
Sembrar en forma de
estra
13
3. Las placas sembradas se incubarn durante 24 horas en una estufa a 37 C.
4. Luego de transcurrido este tiempo evale el crecimiento bacteriano y compare el

grado de desarrollo entre las diferentes placas.
5. Compare el crecimiento de cada espacio de la placa con el crecimiento

bacteriano del tubo N 6 y registre sus resultados en la siguiente tabla
TUBO SOLUCION ESTERILIZANTE CRECIMIENTO BACTERIANO

APLICADA
** Registre el crecimiento bacteriano bajo los siguientes criterios:
Sin crecimiento
Escaso
Moderado
Abundante
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PROCEDIMIENTO N 2
1. Divida una placa de cultivo de Agar sangre en tres secciones.

2. En la primera seccin de la placa deposite su dedo, tal como si fuese a marcar
su huella digital.
3. Luego lave sus manos con jabn y repita el procedimiento anterior en la
segunda seccin de la placa.
4. Posteriormente limpie su dedo con alcohol yodado y repita el mismo
procedimiento ya descrito pero en la seccin tres.
Seccin N1: Dedo solo
2 Seccin N2: Dedo con jabn

1
Seccin N3: Dedo con alcohol yodado
3
5. Incube la placa en una estufa a 37C durante 24 horas.
6. Luego del tiempo de incubacin registre sus observaciones, en cuanto al

crecimiento bacteriano, en la siguiente tabla:
SECCION DE LA
PLACA CRECIMIENTO BACTERIANO
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** Registre el crecimiento bacteriano bajo los siguientes criterios:

Sin crecimiento
Escaso
Moderado
Abundante
LABORATORIO N 3
MORFOLOGA BACTERIANA
Las bacterias segn su morfologa se pueden clasificar en:
1. Cocos (esfricas). Presentan forma esfrica o casi esfrica ya que sus

dimetros (largo y ancho) son casi iguales. Los cocos se pueden clasificar segn
su agrupacin en:
Clulas agrupadas en Pares (Diplococos)
Clulas agrupadas en cadenas cortas y largas (estreptococos)
Clulas agrupadas en forma de racimo (estafilococos)
2. Bacilos o Bastones (cilndricas). Estas clulas se caracterizan porque uno de

los ejes o dimetro es notablemente mayor que el otro, de tal manera que se
observan como bastoncitos de diferente ancho y longitud. De acuerdo a su
agrupacin se pueden presentar:
Sin agrupacin o agrupacin irregular
Clulas aisladas en parejas
Clulas en cadenas
Disposicin celular, una al lado de la otra
3. Helicoidales o curvas (Espirales). Generalmente de presentacin aislada; las

clulas son muy largas en relacin a su ancho y se observa una torcin alrededor
de su eje (espiras).
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La observacin de la morfologa bacteriana se realiza utilizando colorantes

biolgicos que permiten aumentar el contraste entre la clula bacteriana y el medio
que las contiene. La tcnica ms utilizada para el estudio de la morfologa
bacteriana es la tincin de Gram.
TINCION DE GRAM
Esta tincin fue desarrollada por Christian Gram en 1884. A pesar del tiempo
transcurrido la tincin apenas se ha modificado y es uno de los primeros pasos que
se realiza para cualquier identificacin bacteriana, permitiendo con esto la
orientacin adecuada de un diagnstico clnico.
La tcnica es capaz de diferenciar las bacterias en dos grandes grupos:

Gram (+) y Gram () (gram positivas y gram negativas).
La diferenciacin entre gram positivas y gram negativas se basa en el componente

estructural de la pared celular de las bacterias.
GRAM NEGATIVA
Se caracterizan por presentar una membrana
interna rodeada por una pared celular delgada
de peptidoglucano. Hacia el lado externo
tienen una membrana que recubre la pared
celular. Entre la membrana interna y externa
se encuentra el espacio periplsmico que
contiene enzimas importantes para la
nutricin. La membrana externa presenta una
estructura llamada lipopolisacrido (LPS) El
LPS est formado por tres regiones: el
polisacrido O (antgeno O), una estructura
polisacrida central (KDO) y el lpido A
(endotoxina).
GRAM POSITIVA
La pared externa de la envoltura celular de
una bacteria Gram positiva tiene como base
qumica fundamental el peptidoglucano, que
es un polmero de N-acetil-2-D-glucosamina,
con n-acetilmurmico. Esta molcula se
polimeriza gran cantidad de veces, de modo
que se forma una malla especial, llamada
sculo de murena. Dicho compuesto es de
vital importancia para conservar la forma y
17 darle rigidez a la clula bacteriana
Es as como la diferenciacin entre una bacteria gram positiva y gram

negativa radica en la composicin y grosor de su envoltura celular. La pared gruesa
de las bacterias Gram (+) permite que el colorante quede atrapado en su interior,
mientras que las bacterias Gram (-) por poseer una pared mas delgada son
decoloradas fcilmente.
La tcnica para la tincin requiere de cuatro pasos en que se aplican soluciones

bsicas:
1. Primer colorante: Cristal Violeta

Es un colorante bsico que en contacto con las clulas reacciona con ellas
colorendolas de un color azul intenso.
2. Solucin mordiente: Lugol

Fija las tinciones y aumenta la afinidad entre el colorante y las clulas bacterianas.
3. Agente Decolorante: Alcohol-Acetona

Es un disolvente orgnico que retira el colorante no internalizado por las clulas.
4. Colorante de contraste: Safranina

Es un colorante bsico que tie las clulas luego de ser decoloradas por el
solvente orgnico. Se manifiesta de una coloracin rosada intensa.
Los dos grupos bacterianos que distingue esta tcnica difieren en el color con el
que finalmente aparecen.
Las bacterias Gram (+) se teirn de azul por el cristal violeta y no perdern esta
coloracin en los pasos sucesivos.
Las bacterias Gram () se teirn de rosado intenso por la safranina, ya que

estas bacterias pierden la coloracin inicial del cristal violeta.
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La Tincin de Gram es una tincin que nos permite evaluar:
Afinidad Tintorial
Morfologa
Agrupacin
COCACEAS GRAM POSITIVAS BACILOS GRAM NEGATIVOS

AGRUPACIN EN RACIMOS AGRUPACIN IRREGULAR
COCACEAS GRAM POSITIVAS BACILOS GRAM POSITIVOS

AGRUPACIN EN CADENA AGRUPACIN EN CADENA
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Materiales
Portaobjetos Set de Tincin de Gram

Microscopio Placas con bacterias Gram (+) y Gram (-)
Aceite de inmersin Cubetas de tincin
1. Preparacin bacteriana:
En un portaobjeto
colocar una gota de
agua o caldo estril y a
partir de una placa de
cultivo se toma una
colonia con el asa y
posteriormente se
realiza una disolucin
de las bacterias
extradas del cultivo
con el agua.
La preparacin se
seca a temperatura
ambiente o al calor de
un mechero teniendo la
precaucin de no
exponerla demasiado
al fuego directo, ya que
esto perjudica la
evaluacin de la forma
y tincin de las
bacterias. Una vez
seca la lmina se tie.
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4. Tincin
Ejecute la tcnica de la forma que a continuacin se detalla:
1. Disponga la preparacin bacteriana sobre la cubeta diseada para realizar la

tincin.
1. Cubra la lmina con

Cristal violeta durante 1
minuto.
2. Lave el exceso de
colorante con agua
3. Cubra con Lugol durante 1

minuto.
4. Lave el exceso de lugol

con agua.
5. Decolore con solucin

alcohol-acetona durante
20 segundos.
6. Lave con abundante agua

para eliminar el exceso de
disolvente.
7. Cubra la lmina con

Safranina durante 30
segundos.
8. Secar la preparacin y
RESULTADOS Y OBSERVACIONES: observar al microscopio
con aceite de inmersin.
NOTA: Luego de cada lavado

elimine el exceso de agua
para evitar la dilucin del
colorante o solucin
empleada.
Disponga cada solucin
durante el tiempo
estrictamente estipulado.
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Resultados e interpretacin:
1. Visualice al microscopio la
morfologa de las bacterias (40x),
fijndose sobre todo en el color de
la preparacin para clasificarlas en
Gram + o Gram -.
Ej: Bacilos Gram (+), Bacilos Gram

(-), Cocaceas Gram (+) o Cocaceas
Gram (-)
2. Determine la agrupacin de las

bacterias observadas.
Ej: En cadena, racimos, agrupacin

irregular, etc.
OBSERVACIN MICROSCPICA
Su observacin:_____________________________________________________
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LABORATORIO N 4
CULTIVO E IDENTIFICACION DE BACTERIAS
MEDIOS DE CULTIVO Y MTODOS DE SIEMBRA
El cultivo de las bacterias en el laboratorio es esencial para la identificacin

de estos microorganismos. El cultivo consiste en observar el crecimiento de las
bacterias en medios especiales que contengan los nutrientes que favorezcan su
desarrollo. El medio que contiene estas sustancias alimenticias se denomina medio
de cultivo y existen en gran variedad. Para el crecimiento bacteriano adems de un
medio de cultivo adecuado es necesario mantener condiciones de temperatura,
humedad y pH.
CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
Los medios de cultivo son una mezcla equilibrada de nutrientes que en

concentraciones adecuadas y con condiciones fsicas ptimas permiten un buen
crecimiento de los microorganismos. Contienen una base mineral; fuente de
carbono, nitrgeno y azufre; atmsfera adecuada y los factores de crecimiento
necesarios.
Los medios de cultivo se pueden clasificar de acuerdo a su estado y de
acuerdo a sus componentes.
Segn su estado
Se pueden clasificar en slidos, lquidos y semislidos. El estado del medio o

consistencia se obtiene a partir de un agente solidificante (agar) que en mayor o
menor concentracin permite obtener el estado adecuado para el medio
A.- Medios lquidos: el crecimiento de las bacterias se manifiesta por turbidez en

todo el medio.
B.- Medios slidos: el crecimiento de las bacterias se observa en forma de colonia

en la superficie del medio.
C.- Medios semislidos: el crecimiento de las bacterias se manifiesta por turbidez

en todo el medio y por colonias en la superficie.
Segn su composicin:
A.- Medios bsicos: Otorgan un mnimo de nutrientes a las bacterias.
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B.- Medios mejorados: Contienen sustancias enriquecedoras como sangre, suero,
etc.
C.- Medios selectivos: Medio que slo permite el crecimiento de un grupo de

microorganismos e inhibe el de otros.
D.- Medios diferenciales: Son aquellos destinados a demostrar alguna propiedad

bioqumica de la bacteria.
F.- Medios selectivos-diferenciales: Demuestran capacidad fermentativa o

metablica de las bacterias.
G.- Medios especiales: Permiten el aislamiento de una bacteria especfica.
Los medios de cultivo se pueden disponer en diferentes recipientes. Es as como en

el laboratorio existen medios dispuestos en placas y en tubos.
Medio extendido en tubo

o Agar tendido
METODOS DE SIEMBRA
Se pueden distinguir dos tipos de siembra:
En superficie: Corresponde a la modalidad ms empleada.
En profundidad: Se utiliza en las pruebas de identificacin bacteriana
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Las siembras se pueden realizar directamente desde una muestra clnica que
contenga un microorganismo, desde otro cultivo bacteriano o desde un inculo.
Inculo: suspensin de bacterias

en un volumen pequeo de
medio lquido que generalmente
es un caldo nutritivo bsico o
agua destilada.
Forma correcta de sembrar en tubo
Estra de crecimiento
Asa
Siembra en profundidad (picadura) Siembra en superficie
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Las siembras se pueden realizar con diferentes elementos, entre ellos:
a) Siembra con asa:
Se puede realizar:
tomando un inculo a partir de una suspensin de bacterias o para sembrar
muestras biolgicas lquidas (orinas, lquido cefalorraqudeo, etc.)
Para formar una estra de crecimiento a partir de un inculo realizado con
trula.
Para realizar traspaso de bacterias de un medio a otro, tomando
directamente una porcin de una colonia.
b) Siembra con trula:
La trula est compuesta de algodn hidrfilo, lo que permite empapar este

material con el fluido en el que se desea estudiar una bacteria. Generalmente
para que las bacterias permanezcan viables se utilizan medios de cultivo
denominados "de transporte", en el que se sumerge la trula.
La siembra se realiza depositando la trula sobre una seccin de la placa y
posteriormente se realiza la estra de crecimiento con asa.
c) Siembra con pipeta pasteur:
Se realiza para sembrar bacterias en suspensin.
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Materiales
Placas de Agar Mac Conkey y Agar Sangre Cultivos bacterianos
Tubos con caldo nutritivo Asa
Trulas estriles para toma de muestra Portaobjetos
Procedimiento N 1
1. Observe y registre las caractersticas ms importantes de los medios de cultivo

que se presentarn.
2. Observe las caractersticas macroscpicas de las colonias bacterianas presentes

en los cultivos que se le entregarn. (Color, Forma, Hemlisis, tamao)
Procedimiento N 2: Siembra
1. Usted dispone de dos medios de transporte que contienen material biolgico

contaminado con bacterias. (Trula N 1 y N 2)
2. De la trula N 1 realice una siembra en la mitad de una placa de agar Mac

Conkey de la manera en que se explic frente al grupo.
3. Realice una suspensin en caldo nutritivo sumergiendo la trula en el tubo que

contiene el medio.
NOTA: No olvide registrar la placa, tubo y portaobjeto con el nmero de la trula

trabajada y con una seal que identifique a su grupo.
4. De la trula N 2 realice una siembra en la mitad de una placa de agar Sangre.
5. Realice una suspensin en caldo nutritivo sumergiendo la trula en el tubo que

contiene el medio.
6. Luego de realizar estas siembras (placas y suspensiones) incube en estufa a

37 C durante 24 horas, tras las cuales debe evaluar el crecimiento bacteriano.
Procedimiento N 3: Siembra de muestras biolgicas
1. Realice una toma de muestra de secrecin nasal de alguno de los integrantes

del grupo.
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2. Siembre la muestra en las mitades restantes de las placas de agar sangre y
Mac Conkey e incube durante 24 horas a 37 C.
LABORATORIO N 5
ESTUDIO DE COCACEAS GRAM POSITIVAS
Dentro de las bacterias cocaceas Gram positivas destacan dos gneros de

gran importancia clnica: Staphylococcus y Streptococcus
Ambos gneros son morfolgicamente muy similares, sin embargo su
identificacin en el laboratorio se basa en pruebas que determinan caractersticas
propias de cada gnero y ms an entre las especies pertenecientes a cada
gnero.
Staphylococcus
Dentro de este grupo destacan algunas especies de importancia clnica como

son:
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus sapropyticus
Staphylococcus hominis
En general, este gnero se caracteriza por desarrollar colonias relativamente

grandes, redondas, lisas y brillantes. Al microscopio generalmente se agrupan en
forma de racimos. Poseen una pigmentacin blanca, amarilla o dorada segn la
especie. Al cultivar estas bacterias en agar sangre pueden o no presentar hemlisis,
es decir, lisan o rompen los glbulos rojos presentes en el medio de cultivo por la
presencia de enzimas especiales para este fin.
Tienen la caracterstica de crecer en medios con elevada concentracin de
sal o cloruro de sodio, lo que les brinda una caracterstica diferencial importante.
Otras caracterstica que permiten su identificacin son la produccin de Catalasa,
coagulasa y susceptibilidad a la Novobiocina.
CATALASA
Es una caracterstica de todas las especies de Staphylococcus. La catalasa es una

enzima que desarrollan como mecanismo de defensa que les permite neutralizar los
productos txicos derivados del metabolismo del oxgeno. Los Streptococcus no
poseen catalasa, por lo que esta prueba es muy importante a la hora de diferenciar
ambos grupos.
COAGULASA
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Esta prueba es til para identificar una especie de Staphylococcus en especial, el
Staphylococcus aureus. La sntesis de esta enzima permite la coagulacin del
plasma y una prueba positiva identifica con certeza a la especie mencionada.
SUSCEPTIBILIDAD A LA NOBOVIOCINA
Esta prueba es til para diferenciar el Staphylococcus sapropyticus de otras

especies coagulasa negativo. Se realiza poniendo en contacto las bacterias con el
antibitico, lo que permite evaluar si hay o no desarrollo bacteriano. La prueba
positiva indica que existe resistencia a la novobiocina, por que an cuando el
antibitico est presente, existe crecimiento.
PRUEBA S. aureus S.epidermidis S.saprophyticus S.hominis

Hemlisis + -/+ - -/+
Catalasa + + + +
Coagulasa + - - -
Novobiocina - - + -
Streptococcus
La clasificacin de los Streptococcus se basa principalmente en la hemlisis

que producen en agar sangre.
Los tipos de hemlisis que se pueden observar son:
Hemlisis parcial o Hemlisis: Se visualiza como un anillo verdoso en torno a
la colonia
Hemlisis Total o Hemlisis: Se visualiza como un anillo translcido en torno a
la colonia
Sin hemlisis o Hemlisis: no se observa actividad hemoltica
Existe otra clasificacin segn un componente estructural y se designan segn
letras maysculas:
Grupo A, B, C, D, G.
Para diferenciar las diferentes especies existen pruebas especiales como:
Optoquina, Bacitracina e Hipurato de sodio.
OPTOQUINA
Permite diferenciar Streptococcus pneumoniae hemoltico de otras especies
hemolticas. Slo el S.pneumoniae es sensible a la optoquina.
BACITRACINA
Permite diferenciar Streptococcus hemoltico del grupo A (S. pyogenes) del resto
de S. hemoltico que no son sensibles a la bacitracina.
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HIPURATO DE SODIO
Los microorganismos que poseen la enzima hipuricasa hidrolizan el hipurato sdico
formando benzoato sdico y glicina. La Ninhidrina es capaz de reaccionar con
productos de esta reaccin lo que permite observan un color morado. Esta prueba
permite identificar al S.agalactiae
ESQUEMA GENERAL DE IDENTIFICACIN
Streptococcus
hemoltico hemoltico
Optoquin Bacitracina
+ - + -
S. pneumoniae otros S. pyogenes Hipurato
+ -
S.agalactiae otros
30
___________________________________________________________________
Materiales
Placas de agar sangre con Staphylococcus Tubos con plasma

Placas de agar sangre con Streptococcus Asas
Sensidiscos de Novobiocina y Bacitracina Pinzas y frascos de alcohol
Portaobjetos Agua Oxigenada al 3%
PROTOCOLOS DE TRABAJO PARA EL ESTUDIO DE COCCEAS GRAM (+)
Estudio de Staphylococcus
Prueba de la catalasa
1. Tome una colonia de la placa de cultivo con un asa.

2. Perxido de hidrgeno al 3%
3. Si se producen burbujas la reaccin es positiva.
4. Si la prueba es positiva indica que es un Staphylococcus y si es negativa
es un Streptococcus
Prueba de la coagulasa
1. Tome una colonia de la placa de cultivo con un asa.

2. Sumerja el asa en un tubo con aproximadamente 1 ml de plasma.
3. Incube a 37 C en estufa de cultivo y observe peridicamente hasta 4 horas de
incubacin.
4. La formacin de un cogulo en el fondo del tubo indica una prueba positiva.
Prueba de la Novobiocina (30 g)
1. Realice una siembra de la colonia en estudio en un agar sangre.

2. En medio de la siembra coloque un sensidisco de novobiocina.
3. Incube por 24 horas aproximadamente a 37 C.
4. Transcurrido el tiempo de incubacin observe si existe un halo alrededor del
sensidisco para ver si hay o no crecimiento bacteriano.
5. Si no existe crecimiento de las bacterias alrededor del disco, mida con una regla
el dimetro del halo o circulo que se observa alrededor de la novobiocina.
31
6. La prueba es negativa cuando existe crecimiento alrededor del sensidisco y se
dice que es resistente.
7. La prueba es positiva cuando se observa un halo de inhibicin alrededor del
disco de ms de 21 mm y se dice que es sensible.
Estudio de Streptococcus
Prueba de la Bacitracina
1. Realice una siembra de la colonia en estudio en placa de agar sangre.

2. En medio de la siembra coloque un sensidisco de bacitracina
3. Incube por 24 horas aproximadamente a 37 C.
4. Transcurrido el tiempo de incubacin observe si es sensible o resistente.
5. Es sensible cuando se observa halo de inhibicin alrededor del disco.
Prueba de catalasa Prueba de Coagulasa
Prueba de Bacitracina
32
LABORATORIO N 6
ESTUDIO DE ENTEROBACTERIAS
Las enterobacterias son bacilos Gram negativos, que en general no adoptan

agrupaciones caractersticas, no forman esporas y la mayora son mviles debido a
que poseen flagelos.
Se han desarrollado una serie de medios para cultivarlas, aislarlas e identificarlas
de acuerdo a sus propiedades bioqumicas.
Todas las enterobacterias tienen la propiedad de fermentar la glucosa y de
no poseer actividad de la citocromo oxidasa. Algunas enterobacterias de
importancia clnica son:
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Proteus mirabilis
Shigella sonnei
Salmonella typhi
La orientacin bsica hacia el estudio de las enterobacterias es la identificacin

de bacilos gram negativos a partir de la tincin de gram y de sus cultivo en agar
Mac Conkey (selectivo para este grupo de bacterias). Una vez realizadas estas
observaciones se realiza una batera de 5 tubos que contienen los siguientes
medios de cultivo: TSI (agar triple azcar-fierro), LIA (Agar lisina-fierro), MIO (agar
movilidad, indol, ornitina), agar Citrato y agar Urea.
TSI: Permite identificar bsicamente la fermentacin de azcares tales como

glucosa, lactosa y sacarosa por cambios de color en el medio. Adems permite ver
si producto de la fermentacin se produce gas y cido sulfhdrico o hidrgeno
sulfurado. El medio es de color rojo por la presencia de un indicador de pH de este
color. Producto de la fermentacin se produce una acidez que hace que el color vire
a amarillo. El gas se evidencia por la formacin de burbujas y el cido sulfhdrico
por un color negro en el medio.
LIA: Este medio evidencia si las bacterias descarboxilan la lisina o deaminan la

lisina. Tambin permite ver la formacin de gas y de cido sulfhdrico. La
descarboxilacin de la lisina se observa por un color violceo en la profundidad del
medio y la deaminacin de la lisina por un color rojo en la superficie.
33
MIO: Este medio es semislido, a diferencia de los anteriores que son slidos.
Permite el estudio de indol a partir de triptfano, por ser semislido permite ver la
movilidad de la bacteria, ya que cuando es as el medio se vuelve muy turbio,
porque la bacteria puede crecer en todo el medio. Tambin permite observar la
descarboxilacin de la ornitina que se evidencia por un color violceo en el medio.
El indol se visualiza agregando un reactivo que provocar la formacin de un anillo
color rojo.
CITRATO: Permite evidenciar la utilizacin del citrato como nica fuente de

carbono. Por medio de un indicador de pH se evidencia el viraje desde un color
verde a un color azul, cuando se utiliza el citrato.
UREA: Permite evidenciar la presencia de la enzima ureasa en la bacteria. Se

utiliza un medio de color naranja que por medio de un indicador de pH vira a fucsia
cuando existe esta enzima que hidroliza la urea presente en el medio.
La interpretacin de las pruebas se realiza en base a tablas que de acuerdo

a las propiedades entregadas por los medios de cultivo permiten identificar la
bacteria correspondiente.
Estas tablas se escogen de acuerdo a los resultados que presenten el TSI y
el LIA.
INTERPRETACIN E INFORME DE LAS PRUEBAS
TSI (Agar triple azcar-fierro)
POSIBLES INFORME INTERPRETACION

RESULTADOS
Amarillo/Amarillo A/A Fermentacin de glucosa, lactosa, sacarosa
Rojo/Amarillo K/A No fermentacin de Lactosa, Fermentacin de
glucosa y sacarosa
Rojo/Rojo K/K No fermentacin de glucosa, ni lactosa, ni sacarosa
LIA (Agar lisina-fierro)
POSIBLES INFORME INTERPRETACION

RESULTADOS
Morado/Morado K/K Lisina deaminasa negativa y Lisina descarboxilasa
positiva
Morado/Amarillo K/A Lisina deaminasa negativa y Lisina descarboxilasa
negativa
Rojo/Morado R/A Lisina deaminasa positiva y lisina descarboxilasa
positiva
A: Acido; K: Alcalino
Informacin adicional que entrega TSI y LIA:
34
Produccin de H2S: Se visualiza de color negro en el medio. Indica produccin de

hidrgeno sulfurado y se informa como H 2S (+) o (-)
Produccin de gas de glucosa: Se visualiza con burbujas de aire en el medio o

espacios vacos. Se informa como G (+) o (-)
MIO (Agar movilidad, indol, ornitina)
POSIBLES INTERPRETACION
RESULTADOS
Turbidez Movilidad positiva (+)
Transparencia Movilidad Negativa (-)
Indol Positivo Anillo rojo en superficie al agregar reactivo de Kovacs
Indol Negativo No se forma anillo rojo al agregar el reactivo de Kovacs
Morado en Ornitina positiva (+)
profundidad Ornitina negativa (-)
Amarillo en todo el
medio
CITRATO
POSIBLES INTERPRETACION
RESULTADOS
Azul intenso en Citrato positivo (+): utilizacin de citrato como fuente de
superficie carbono
Verde en superficie Citrato negativo (-)
UREA
POSIBLES RESULTADOS INTERPRETACION

Fucsia Ureasa positivo(+): Tiene la enzima ureasa para
hidrolizar la Urea
Permanece el mismo color Ureasa negativo(-)
del medio ( naranjo)
METODOS DE SIEMBRA:
MEDIO SIEMBRA
TSI En profundidad y en superficie ( 1 picadura)
LIA En profundidad y en superficie ( 3 picaduras)
MIO En profundidad
Citrato Simmons En superficie
Urea En superficie
35
PICADURA:
Siembra en superficie
Pinchar el medio
con asa en aguja
INTERPRETACIN DE LAS PRUEBAS
36
37
Materiales
Placas con bacterias Gram (-) Asas en punta y anillo

Tubos con TSI, LIA, MIO, CITRATO, UREA
1. Observe las placas entregadas, anotando las caractersticas macroscpicas de

las colonias
2. Realice la siembra de una colonia en los medios de identificacin bacteriana

segn lo indicado en cada medio
3. Incubar a 37 C por 18 a 24 hrs
4. Observar resultados y anotar la interpretacin de las pruebas
5. Identificar la bacteria con su gnero y especie, llevando los resultados a las

tablas de interpretacin
TCNICA DE SIEMBRA
LABORATORIO N 7
38
ANTIBIOGRAMA
Cuando se realiza un cultivo de orina, sangre, heces, piel o de cualquier otra

parte de nuestro organismo, lo que intentamos es identificar al microorganismo
causante de la infeccin o enfermedad que estemos pasando.
Una vez que hemos logrado aislar el agente patgeno, cultivarlo e

identificarlo, procederemos a averiguar cual es el tratamiento adecuado. Este
procedimiento se realiza a travs de un "ANTIBIOGRAMA" que consiste en poner
en contacto al microorganismo con distintos antibiticos para ver cual de ellos es el
mejor a emplear como tratamiento.
Antibiograma
El Antibiograma se define como un mtodo de estudio de susceptibilidad

bacteriana. El mtodo mas utilizado es el de Kirby Bauer, que se realiza en placa
petri y en agar Mueller-Hinton.
Para su realizacin es necesario sembrar la bacteria que se ha aislado e
identificado previamente, en forma homognea sobre toda la superficie del agar a
modo de tapizar ste con el microorganismo.
Una vez que se ha realizado esta siembra, se colocan sobre el agar discos
pequeos empapados de sustancia antibitica que difundir en el agar.
Posteriormente se incuba en condiciones adecuadas y por un tiempo determinado.
(37C; 24 horas)
La sensibilidad o resistencia a estos antibiticos se evala por el crecimiento de

las bacterias alrededor del disco.
Sensibilidad: Una bacteria es sensible a un antibitico cuando no es capaz de

crecer alrededor de ste. Esto se manifiesta a travs de un "halo de inhibicin"
mnimo definido para cada antibitico.
Resistencia: Una bacteria es resistente a un antibitico cuando ste no es

capaz de inhibir su desarrollo y por lo tanto es capaz de crecer alrededor del
disco que lo contiene.
"Halo de inhibicin": Comprende la zona alrededor del disco en donde no se

observa crecimiento de las bacterias. Para cada antibitico se encuentra descrito un
halo de inhibicin mnimo que define la verdadera sensibilidad de una bacteria a un
antibitico ya que existe una relacin entre la concentracin del antibitico y su
capacidad de inhibir la cepa bacteriana.
El halo de inhibicin se evala por el dimetro en mm alrededor del disco.
Por ejemplo:
39
Tetraciclina (30g ) Sensible: 19 mm y Resistente 14 mm.
Halo de inhibicin
Medicin del dimetro del halo
Esta sensibilidad o resistencia viene indicada en una tabla
40
Materiales
Placas de Agar Mueller Hinton Tubos de Caldo tripticasa
___________________________________________________________________
41
Materiales
Placas de Agar Mueller Hinton Tubos con Caldo Tripticasa

Placas con bacterias Gram (+) y Gram (-) Frascos con alcohol
Sensidiscos Pinzas
Trulas estriles
Estudio de la sensibilidad de las bacterias a diferentes agentes bacterianos
Procedimiento
1. Usted recibe una placa de cultivo a partir de la cual deber preparar un inculo
2. Realice una siembra con trula en una placa de agar Mueller Hinton,
deslizndola en a lo menos tres direcciones, cubriendo de esta manera toda la
superficie de la placa. Cuando introduzca en la suspensin bacteriana al
momento de sembrar, tenga la precaucin de eliminar el exceso de lquido en
las paredes del tubo.
3. Luego de realizar el procedimiento anterior, deje secar la placa cerrada por unos
minutos.
4. Deposite uno a uno los discos sobre la superficie del agar, teniendo la
precaucin de esterilizar la pinza en la llama entre un disco y otro.
5. Luego de realizar esta siembra incube en estufa a 37C durante 24 horas, tras
las cuales debe evaluar el crecimiento bacteriano y medir los halos de inhibicin.
6. Segn los resultados concluya la sensibilidad y resistencia de la bacteria que

estudi de acuerdo a la informacin que proporciona la tabla adjunta.
7. Luego de evaluado el antibiograma complete el siguiente cuadro:
Antibitico usado Dimetro del Halo de Sensible o resistente

Inhibicin
LABORATORIO N 8
42
PARASITOS
PARASITISMO
Es la asociacin entre dos seres o especies diferentes, pudiendo vivir en el

interior o superficie de su husped, el cual le proporciona las condiciones de
ambiente y alimentacin que le son necesarios para conseguir su maduracin
sexual y le causa al husped dao en sus estructuras o funciones
PARSITO
Es todo organismo del reino animal o vegetal que vive a expensas de otro,
de acuerdo a esta afirmacin podemos decir que existen varios grados de
parasitismo segn la dependencia
Parsitos Se adaptan con facilidad a la vida libre o parasitaria

facultativos
Parsitos obligados Deben vivir siempre en el interior o en la superficie de su
husped. Existen dos tipos:
Temporal permanecen en contacto con su husped solo el
tiempo necesario para alimentarse
Permanente necesitan obligatoriamente al husped para
sobrevivir
Parsito accidental Invade al husped que no es adecuado para el desarrollo

de su especie
Parsito Tiene la capacidad de adaptarse a diferentes especies de

inespecfico huspedes, en los cuales habitualmente no vive
Parsito que se Parsito que se hospeda en otro parsito

hospeda en otro
parsito
Pseudo parsito Elemento animado o inanimado que se confunde con un
parsito
CICLO EVOLUTIVO DE UN PARASITO
El conjunto de etapas y transformaciones que experimenta un parsito

durante su desarrollo, se conoce como ciclo evolutivo o ciclo biolgico. Estos
ciclos pueden ser directos o monoxnicos si el parsito requiere de un solo
husped para todo su desarrollo e indirectos o heteroxnicos si necesita dos o
ms huspedes
CICLO DIRECTO
HUSPED
INFECTADO
43
Huevos
Quistes
AMBIENTE Ooquistes
FECALISMO FECALISMO
HUSPED
SUSCEPTIBLE
Los ciclos directos o monoxnicos son simples: el husped infectado transfiere al

medio ambiente las formas infectantes de los parsitos y estos llegan al husped
susceptible a travs del fecalismo
CICLO INDIRECTO
HUSPED
HUSPED DEFINITIVO
SUSCEPTIBLE
Parsito
CARNIVORISMO Adulto
AMBIENTE Huevos
METACESTODOS Quistes
larvas Ooquistes
FECALISMO
TEJIDOS HUSPED
INTERMEDIARIO
larvas
44
En los ciclos evolutivos indirectos o heteroxnicos, los parsitos necesitan
pasar por dos o ms huspedes de distinta especie para alcanzar su pleno
desarrollo. El husped infectado elimina al medio ambiente las formas infectantes,
por fecalismo llegan al husped intermediario, en ste se desarrolla un estado larval
o metacestodo en los tejidos y llega al husped susceptible a travs del
carnivorismo
HUSPED
Se denomina husped al ser vivo que alberga un parsito y podemos distinguir:

Husped definitivo: En el cual el parsito alcanza su madurez sexual y se
reproduce
Husped intermediario: Alberga las formas larvales de los parsitos y se
desarrolla parte de su ciclo biolgico
Husped paratnico: Aqul que transporta al parsito, pero en l no se
desarrolla ninguna etapa del ciclo biolgico
CLASIFICACION DE LOS PARSITOS
CLASIFICACION MORFOLGICA
Flagelados
Rizpodos
PROTOZOOS Ciliados
Apicomplexa
Nematodos
HELMINTOS Platelmintos Cestodos
Trematodos
METAZOOS Arcnidos
ARTROPODOS
Crustceos
Insectos
45
CLASIFICACIN TOPOGRAFICA
ECTOPARSITOS: Se ubican en la superficie del cuerpo

ENDOPARSITOS: Viven en el interior del organismo
SEGN LOCALIZACIN
ENTEROPARASITOS: Se ubican en el tubo digestivo

HISTOPARASITOS : Se ubican en los tejidos
HEMOPARASITOS: Se ubican en la sangre
ECTOPARASITOS: Se ubican en la superficie y/o en la piel
1. PROTOZOOS
Los protozoos estn constituidos por una sola clula que est formada por
ncleo citoplasma, la cual debe atender todas las necesidades vitales del individuo
como movilidad, secrecin, excrecin, nutricin y reproduccin.
Su tamao vara entre 7 y 120 micrones y durante su vida presentan dos
formas evolutivas:
Trofozoto Forma vegetativa, de alimentacin y reproduccin activa

Muy lbil a las condiciones ambientales
Quiste Forma de resistencia

Metabolismo mnimo
Permite la supervivencia de la especie debido a que puede
permanecer mucho tiempo en condiciones ambientales adversas
Existen varios protozoos de importancia mdica, algunos de ellos son:
Entamoeba histolytica
Entamoeba coli
Endolimax nana
Giardia lamblia
Trypanosoma cruzi
46
CICLOS EVOLUTIVOS
Entamoeba histolytica
Trofozoto
Quiste
Giardia lamblia
Trofozoto
Quiste
47
Entamoeba coli
Trofozoto
Quiste
Trofozoto
Quiste
48
Trypanosoma cruzi
49
2. NEMATODOS
Son helmintos redondos o cilndricos, alargados y aguzados en sus

extremos. De tamao variable, poseen un sistema digestivo, sistema excretor y son
gusanos que presentan dimorfismo sexual. Es una caracterstica que los machos
son siempre ce menor tamao que las hembras. Se reproducen por huevos que
salen al exterior junto con las deposiciones del husped. Del huevo nacen larvas
que maduran morfolgicamente pasando por cuatro estadios hasta alcanzar su
estado adulto.
Existen varios nematodos de importancia mdica, algunos de ellos son:
Ascaris lumbricoides
Enterobius vermicularis
Trichuris trichiura
Ascaris lumbricoides
Huevo
50
Enterobius vermicularis
HUEVO
Trichuris trichiura
HUEVO
51
3. CESTODOS
Los Cestodos son helmintos aplanados dorsoventralmente, semejan cintas y

por ello se les denomina Taenias. Son de tamao variable, tienen una constitucin
morfolgica en la que podemos diferenciar escolex, estrbila y progltidas. Son
de color blanco o grisceo, no poseen aparato digestivo, son hermafroditas, se
reproducen por huevos y tienen un gran potencial bitico ya que la progltida
grvida tiene la capacidad de almacenar gran cantidad de huevos. Los huevos son
infectantes de inmediato y permanecen viables en el medio ambiente por mucho
tiempo.
En su estado adulto viven en el intestino de vertebrados que son sus
huspedes definitivos, su estado larval lo desarrollan en diferentes animales, los
que constituyen los huspedes intermediarios.
Existen varios cestodos de importancia mdica, algunos de ellos son:
Taenia solium
Taenia saginata
Diphyllobothrium latum
Dypilidium caninum
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE LOS CESTODOS
52
Ciclo evolutivo Taenia
spp.
Taenia sp
53
4. TREMATODOS
Son platelmintos cuyos adultos son aplanados dorsoventralmente y tienen

aspecto ovalado o forma de hoja. Casi todos son hermafroditas. Presentan un
complicado ciclo evolutivo con fases de multiplicacin asexuada en moluscos y
fases de multiplicacin sexuada en vertebrados y ocupan varios huspedes
intermediarios para completar su ciclo. Se reproduce por huevos que son de gran
tamao.
Morfolgicamente estn constituidos por una cutcula escamosa provista de
espinas, su cuerpo es de tejido esponjoso. Posee una ventosa muscular peribucal y
una ventosa ventral o acetbulo.
La llegada al husped definitivo es a travs de va oral por consumo de la
forma infectante o metacercaria que se encuentra enquistada en los berros, en el
interior del organismo se desenquista y alcanza su estado adulto.
Dentro de los trematodos de importancia mdica
Fasciola hepatica
Fasciola hepatica
Ciclo evolutivo
54
5. ARTRPODOS
Son animales invertebrados de cuerpo segmentado, protegidos por un

exoesqueleto de quitina y en general son ectoparsitos. En general son parsitos
por s mismos o son eficientes huspedes, transmisores de enfermedades y por el
veneno que puedan inocular provocan graves cuadros clnicos.
Los principales artrpodos de inters medico son: insectos, arcnidos y
crustceos
Insectos Dpteros moscas, mosquitos y tbanos

Hempteros triatomas y chinches
Anopluros piojos
Sifonpteros pulgas
Blatarios cucarachas
Artrpodos terrestres con cuerpo constituido por cabeza, trax y abdomen
Arcnidos Araas
Escorpiones
Garrapatas
caros
Artrpodos acuticos que se han adaptado a la vida terrestre, la cabeza y el trax

estn fusionados formando el cefalotrax en araas y escorpiones, mientras que en
las garrapatas y caros forman juntos con el abdomen una sola masa corporal
Crustceos Cyclops
Diaptomus
Cangrejos
Artrpodos de tamao variable, su cuerpo est formado por cefalotrax y abdomen.

Algunos de ellos son huspedes intermediarios de helmintos del hombre y de
animales.
Entre los artrpodos de importancia mdica estn:
Loxosceles laeta
Latrodectus mactans
Sarcoptes scabiei
Pediculus humanus variedad capitis
Phthirus pubis
Pulex irritans
55
Araas
Loxosceles laeta Latrodectus mactans
___________________________________________________________________
Pulgas
___________________________________________________________________
Piojos
56
Sarcoptes scabiei
Ciclo Evolutivo
57
1. PROTOZOOS:
1.- Observe al microscopio las preparaciones al fresco de deposiciones humanas y

realice un dibujo de lo observado
2.- Realice una comparacin de los quistes observados de acuerdo a lo siguiente:
Entamoeba coli Giardia.lamblia
Tamao Tamao
Forma Forma
N de ncleos N de ncleos
3.- Observe la lmina en el microscopio de una muestra que contiene un

tripomastigoto de Trypanosoma cruzi. Realice un dibujo
58
2. NEMATODOS:
1.- Examine la morfologa del parsito adulto y realice un dibujo
Ascaris lumbricoides Enterobius vermicularis Trichuris trichiura
2.- Observe al microscopio las preparaciones al fresco de deposiciones humanas y

realice un dibujo de los huevos observados
Ascaris lumbricoides Enterobius vermicularis Trichuris trichiura
59
3. CESTODOS:
1.- Examine la morfologa del parsito adulto y realice un dibujo
2.- Observe las preparaciones del escolex de cestodos, realice un dibujo y

compare sus estructuras
Taenia solium Taenia saginata Diphyllobothrium latum
60
3.- Observe los huevos, realice un dibujo y compare
Taenia sp Diphyllobothrium latum
4.- Observe las progltidas grvidas de los cestodos, dibuje y compare
Taenia solium Taenia saginata Diphyllobothrium latum
61
LABORATORIO N 9
PARASITOS
4. TREMATODOS
1.- Examine la morfologa del parsito adulto y realice un dibujo, observe la ventosa
peribucal y acetbulo
Fasciola hepatica
2.- Observe la preparacin con el huevo de Fasciola hepatica y realice un dibujo
62
Observe la preparacin que contiene un Quiste hidatdico y el parsito que lo

produce. Realice un dibujo
Quiste hidatdico Echinococcus granulosus
63
5. ARTROPODOS
1.- Examine la morfologa del parsito adulto y realice una comparacin entre
ambos arcnidos. Si es necesario aydese con una lupa
Loxosceles laeta Latrodectus mactans
Tamao
Color
N de
patas
2.- Observe al microscopio las caractersticas morfolgicas de Pulex irritans y

realice un dibujo
3.- Observe al microscopio la preparacin de Sarcoptes scabiei y realice un dibujo
64
4.- Observe al microscopio las preparaciones de Pediculus humanus y Phthirus

pubis, compare las caractersticas de ambos parsitos
Pediculus humanus Phthirus pubis
Tamao
Forma
Caractersticas de las
Patas
5.- Observe al microscopio al parsito adulto y los huevos o liendres del Pediculus
humanus, realice un dibujo
Pediculus humanus Liendre
65
66

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1. DETERMINACIN DE GRUPO SANGUINEO MEDIANTE CLASIFICACION EN

Lancetas desechables Suero Anti A

1. Coloque una gota de reactivo

2. Limpie la zona pulpar del

3. Realice una puncin capilar

4. Ponga en contacto una gota

5. Agite la reaccin en forma

Suero anti-A Suero anti-B Suero anti-AB

Grupo ABO ________________

ACCIN DE AGENTES EXTERNOS SOBRE LAS BACTERIAS

Ya que existen microorganismos que son perjudiciales para el ser humano,

CLASIFICACION DE LOS METODOS DE ESTERILIZACION

METODOS FISICOS METODOS QUIMICOS METODOS MECANICOS

Radiaciones: Se utiliza para materiales que no resisten altas temperaturas o

Radiaciones ultravioletas: Se utilizan para descontaminacin principalmente de

Desinfectantes: Son generalmente de accin bactericida y se aplican sobre

1. ACCION DE AGENTES QUIMICOS SOBRE LAS BACTERIAS

Placas de Agar Mac Conkey Solucin de cloro 0.5%

1. Usted tiene una batera de 6 tubos conteniendo cada uno 1 ml de suspensin

TUBO AGUA CLORO AL ETANOL AL ALCOHOL AGUA

** El tubo 6 corresponde a un tubo control

ESTERILIZACIN DEL ASA MICROBIOLGICA

3. Las placas sembradas se incubarn durante 24 horas en una estufa a 37 C.

4. Luego de transcurrido este tiempo evale el crecimiento bacteriano y compare el

5. Compare el crecimiento de cada espacio de la placa con el crecimiento

TUBO SOLUCION ESTERILIZANTE CRECIMIENTO BACTERIANO

** Registre el crecimiento bacteriano bajo los siguientes criterios:

1. Divida una placa de cultivo de Agar sangre en tres secciones.

Seccin N1: Dedo solo

2 Seccin N2: Dedo con jabn

5. Incube la placa en una estufa a 37C durante 24 horas.

6. Luego del tiempo de incubacin registre sus observaciones, en cuanto al

** Registre el crecimiento bacteriano bajo los siguientes criterios:

Las bacterias segn su morfologa se pueden clasificar en:

1. Cocos (esfricas). Presentan forma esfrica o casi esfrica ya que sus

2. Bacilos o Bastones (cilndricas). Estas clulas se caracterizan porque uno de

3. Helicoidales o curvas (Espirales). Generalmente de presentacin aislada; las

La observacin de la morfologa bacteriana se realiza utilizando colorantes

La tcnica es capaz de diferenciar las bacterias en dos grandes grupos: