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Caracterizacin

feno.pica, molecular y patolgica


de Colletotrichum acutatum asociada con la
antracnosis del chocho y tomate de rbol en los
Andes ecuatorianos

IV Congreso Mundial de la Quinua


I Simposio Mundial de Granos Andinos

7 de julio de 2013

Csar E. Falconi., R.G.F. Visser., A.W. van Heusden


El chocho (Lupinus mutabilis) Ventajas

Leguminosa na,va Andina que ha sido cul,vada


localmente por agricultores desde an,guas civilizaciones

Cul,vo estratgico que contribuye a reducir cambio clim,co

Fija su propio nitrgeno, como otras leguminosas

Previene la erosion del suelo debido a su sistema radicular

Importante en varios sistemas de produccin


en la zona andina ecuatoriana
Ventajas
El chocho (L. mutabilis)

Actualmente, importante fuente en


la nutricin humana y animal

Semillas con,nen alto contenido de


proteina (40 a 50%)
grasas no saturadas (15 a 23%),
hierro y vitaminas
Desventajas del chocho

Produccin promedio a nivel nacional es solo 220kg/ha.

La baja produccin se debe principalmente a que el chocho es


suscep,ble a enfermedades

Enfermedad ms devastadora . antracnosis


Antracnosis del chocho

Tpica Lesiones Afecta Lesiones en


torcedura severas en severamente vainas
del tallo los tallos a la semilla
principal (produccin)
Diversidad de cul,vos en Ecuador

Debido a su diversidad cultural y clim,ca,


Ecuador ha sido bendecido con una amplio
rango de frutas y vegetables

Ecuador es uno de los 17 pases mas


megadiversos en el mundo. En Ecuador
existen alrededor de 25,000 species de
plantas vasculares (10 % del total
mundial) (World Wildlife Fund 2012)
El tomate de rbol (Solanum betaceum)

Arbusto leoso de 2-3m de altura

Crece entre 16-24oC,


entre 1000-3000 m.s.n.m.

Cualidades nutricionales, bra,


vitaminas, reduce el colesterol

Producto de exportacin

Antracnosis enfermedad
devastadora
Antracnosis del tomate de rbol

Pudricin Marchas y Pudricin ojo de


brotes lesiones en de frutos pollo
hojas
La antracnosis en varios cul,vos

Raz,
Ramas
EL PATGENO Hojas
Flores
Frutos

Pudricin de la corona
Defoliacin,
SINTOMAS Tizn de capullos
Podredumbre de la fruta

Ms de una
especie de
Colletotrichum
ENFERMEDAD est asociado
con un nico
hospedero
Iden,cacin tradicional de la especie de
Colletotrichum basada en rango de hospederos

Fru,lla

Mango

Maracuy Tomate de rin

Papaya
Pimiento
Iden,cacin tradicional de especies de Colletotrichum

MORFOLOGIA DE LA
COLONIA

GRIS- CARMIN-
ROSA ROJO

A2 A4 A3 A5
Iden,cacin tradicional de especies de Colletotrichum
Forma de la conidia

Nirenberg et al., 2002


A la causa de la antracnosis del chocho y tomate de rbol en la
zona andina se la reporta tradicionalmente como

Colletotrichum gloeosporioides

A la causa de la antracnosis del chocho en Europa y Australia se


la conoce como
Colletotrichum lupini

Nirenberg et al. 2002
Los marcadores moleculares iden,can con precisin el agente
causal y clarican relaciones taxonmicas entre especies

MARCADORES
MOLECULARES

rDNA-ITS Tub2 AP-PCR

Espaciadores de
transcripcin interna Protena globular (micro Regiones en tandem en
tbulos de clulas el ADN
eucariotas)

Sistem,ca molecular a Mediante PCR Iden,ca


nivel de especies(raza Compara entre polimorsmos (individuos
geogrca) organismos diferentes gen,camente relacionados)
y miembros de una
especie
Estudios de rango de hospederos permiten claricar la
especicidad del patgeno con el hospedero
Obje,vos

(i) Determinar el agente causal de la antracnosis del chocho y tomate


de rbol en Ecuador,

(ii) Analizar aislamientos de Colletotrichum de chocho y tomate de


rbol en base a sus secuencias ITS,

(iii) Evaluar la variabilidad patognica y potencial rango de hospederos


Mtodos

Color de la
colonia
Caracters,cas
morfolgicas
Forma y tamao
de la espora

Sensibilidad a
benomil

Estudios
Crecimiento
siolgicos
miceliar a
diferentes
rangos de
temperatura
Mtodos

Primers
especcos
Estudios
moleculares CaInt2; CgInt2

Secuenciacin
ITS1-5.8S-ITS2

Chocho
ECU-2658
ECU-7112-1
Rango de ECU-722-4
hospederos

Tomate de rbol
Gigante Comn
Comn
Resultados
Caracters,cas morfolgicas de la antracnosis del chocho (y tomate de rbol)

Color de la colonia
vara de plido a A B C

gris-oliva

A B C
Forma de las esporas vara
de cilndrica con bordes
redondeados a un lado
ausado y el otro
redondeado D E F

D E F

Caracteres morfolgicos solo deben usarse en iden,caciones preliminares


Resultados

Crecimiento radial de C. acutatum de chocho y tomate de rbol a 15-25C,


sensibilidad al benomil y reaccin a primers especcos
Resultados
Sensibilidad a benomyl y caracterizacin molecular

Isolate Benomyl Primer reacXon Species


sensitivity CaInt2 CgInt
test
Lup 1 + + - C. acutatum
Lup 4 + + - C. acutatum
Tam 6 + + - C. acutatum
Tam 7 + + - C. acutatum
Lup 14 + + - C. acutatum
Lup 16 + + - C. acutatum
Lup 18 + + - C. acutatum
Tam 20 + + - C. acutatum
Lup 28 + + - C. acutatum
IMI 356878 - - + C. gloeosporioides

C. acutatum es el agente causal de la antracnosis del chocho (y tomate de rbol)


y no C. gloeosporioides, u,lilizando primers especcos y sensibilidad a benomil

Esta informacin es nueva y vlida para un adecuado


manejo de la antracnosis en Ecuador
Relacin logen,ca entre la antracnosis del chocho y del tomate de rbol
Relacin logen,ca entre la antracnosis del chocho y del tomate de rbol

En base a secuencias ITS la


poblacin de patgeno del
chocho de Ecuador es
diferente de otras
poblaciones alrededor del
mundo

Similitud cercana de
aislamientos de
C. acutatum de chocho con
los de tomate de rbol
Relacin logen,ca entre la antracnosis del chocho y del tomate de rbol
Infeccin cruzada de hospederos de la antracnosis del chocho y tomate de rbol

23 Isolates collected from lupin Isolates collected from tamarillo

20
Mean lesion length (mm)

17

14

11
Lupin Tamarillo
Inoculated host

Aislamientos de chocho fueron patognicos en plantas de


tomate de rbol y los de tomate de rbol en chocho
Infeccin cruzada de hospederos de la antracnosis del chocho y tomate de rbol
Conclusiones

El dimetro de la colonia, forma de la espora e insensibilidad al benomil ubican a


los aislamientos de los dos hospederos en el grupo de C. acutatum

Diagns,co molecular usando primers especcos dio posi,vo para C. acutatum

Aislamientos de C. acutatum de chocho de la zona andina fueron dis,ntos de otros


aislamientos de C. acutatum colectados de chocho alrededor del mundo
Conclusiones

Un anlisis detallado de secuencias ITS ubic a los aislamientos del chocho y


tomate de rbol de la zona andina de Ecuador en dos grupos con alta probabilidad

En los estudios de infeccin cruzada, algunos aislamientos produjeron lesiones


grandes en el hospedero del cual fueron aislados, pero otros mostraron similar
agresividad en su hospedero alternante.

La coleccin de C. acutatum de chocho y tomate de rbol proporciona un


interesante material para el estudio de adaptacin cuan,ta,va al hospedero
Agradecimientos

Instituto Simn
Rodrguez -
Latacunga
Informacin adicional

Falcon, C. E., Visser, R. G. F., and van Heusden, A. W. 2013. Phenotypic, molecular,
and pathological characteriza,on of Colletotrichum acutatum associated with
Andean lupine and tamarillo in the Ecuadorian Andes. Plant Disease 97:819-827.

Falcon, C. E. 2013. Lupinus mutabilis in Ecuador with special emphasis on


anthracnose resiatence. PhD. Thesis. Wageningen University., The Netherlands.,
150 p.

Dr. Csar Falcon Sa


cefalconi@espe.edu.ec

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