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CENTRO UNIVERSITRIO LUSADA

Estgio Supervisionado Curso de Biomedicina


Laboratrio de Anlises Clnicas
Relatrio de Atividades Microbiologia e Micologia

NOME: Murillo da Silva Santos N ALUNO: 401103115

1. NOME DO TESTE/ EQUIPAMENTO


Exame Micologico Direto

2. OBJETIVO:
Diagnstico rpido de infeces fungicas em diversos materiais biolgicos.

3. APLICAO CLNICA
O exame micolgico direto utilizado para diagnstico rpido das micoses, permitindo pronta ao
teraputica. usado tambm no diagnstico diferencial de outras afeces que se assemelham as
infeces fungicas.

4. PRINCPIO
Consiste na observao microscpica do material, tratada com corante e clareantes (hidrxido de
potssio) e montado em laminas e lamnulas com finalidade de identificar estruturas caractersticas
nos fungos em geral como hifas, pseudohifas, blastomidios, astromidios, filamentos e gros.

5. METODOLOGIA
Raspados cutneos, fragmentos de unha, secrees, lquidos e bipsias corados por hidrxido de
potassio 20% e examinados sob microscpio ptico.

6. AMOSTRA
A. Preparo do paciente
Evitar uso de hidatrante, perfumes e desodorantes na pele. Para o couro cabeludo no se deve lavar
o cabelo, usar cremes e afins pelo menos 3 dias antes da coleta. E para unhas, no cortar, no limpar
e no pintar.

B. Tipos de amostra
Escama de pele, pelos e cabelos, raspados de unha, secreo em geral, lquidos em geral, urina,
lavado bronco alveolar.

C. Armazenamento e estabilidade da amostra


Amostras de leses secas, unhas e plos: acondicionar em Placa de Petri estril (60x15), ou colocar a
amostra entre duas lminas vedadas (sanduche). Encaminhar em at 24 horas temperatura
ambiente (20 a 25C).
Amostras colhidas em swabs: acondicionar em tubo com salina estril (1 a 2mL). Em temperatura
ambiente (20 a 25C) analisar em at 2 horas ou em caixa trmica refrigerada (2 a 8C) em at 8
horas.
Amostras colhidas em coletores estreis: (secrees, fragmentos, lquidos corporais, urina) enviar
em temperatura ambiente (20 a 25C) em at 2 horas ou em caixa trmica refrigerada (2 a 8C) em
at 8 horas.

D. Volume mnimo
Volume suficiente para analise micolgica direta e cultura

E. Volume ideal
Volume suficiente para analise micolgica direta e cultura

F. Critrios para rejeio da amostra


Se no suspender medicao antifngica, tpica por no mnimo 20 dias antes da coleta. Se as unhas
estiverem com esmalte no feito o teste.

7. PADRES, CONTROLE, REAGENTES E INSUMOS.


Soluo de hidrxido de potssio a 20% (100 mL de gua destilada para 2 gramas e hidrxido de
potssio)

8. EQUIPAMENTOS E MATERIAIS NECESSRIOS


- Microscopio ptico
- Ala ou fio bacteriolgico
- Lmina
- Laminula
- Bico de bunsen
- culos de proteo
- Mascara
- Luvas

9. PROCEDIMENTO TCNICO

Escamas de Pele: Deve ser realizada com auxlio de bisturi dermatolgico ou com lmina de
microscopia, raspando-se as bordas das leses cutneas e o material acondicionado em placas de
Petri esterilizadas ou entre lminas.
- Em seguida o material deve ser analisado ao microscpio preparaes entre lmina e lamnula
com KOH 10-20%,
- Semear o material em gar Sabouraud com cloranfenicol e gar Micobiotic, manter a temperatura
ambiente (25 a 300 C) por 15 dias.
- Aps o crescimento, realizar microcultivo em gar batata, para anlise da micromorfologia e
identificao da espcie.

Plos e Cabelos: Retirar os cabelos das regies de alopecia, removendo-se os pelos tonsurados de
dentro do folculo piloso, com auxlio de uma pina flambada.
- O material examinado por microscopia entre lmina e lamnula (clarificado com KOH) para
observao do tipo de parasitismo.
- O material deve ser semeado em gar Micobiotic e mantido a temperatura de 25 a 300 C por 15
dias. A identificao do isolado realizada pela observao da micromorfologia.

Unhas: Para coleta de leses de unhas deve-se retirar o material da regio de progresso e
confluncia do tecido saudvel com o tecido doente, com auxlio de tesouras, lixas, alicates de unha e
bisturis dermatolgicos.

Mucosas: Em material suspeito de Candidase utiliza-se swabs esterilizados, devido a predominncia


de leses midas.
- O exame laboratorial consiste na observao microscpica, entre lmina e lamnula com KOH 10-
20%.
- Observar a presena de blastocondios associados ou no a pseudohifas. A cultura realizada em
gar Sabouraud e CHROMgar Candida.
- Permite a deteco de infeces mistas por leveduras.
- As colnias crescem a temperatura de 25-300 C, por 24-72h.
- A identificao de gnero realizada com cultivo em lmina em gar fub com Tween 80 e a
identificao de espcie feita por provas bioqumicas de assimilao de fontes de carbono e
nitrognio, alm de tcnicas de fermentao.

10. CLCULOS
No aplicvel.

11. RESULTADO
Deve correlacionar a forma fungica identificada com o quadro clinico do paciente. Muitas vezes pode
ser encontrado um micolgico direto negativo com cultura positiva, o que tem influencia da tcnica e
local da coleta, alm da cultura ter maior sensibilidade. Para a preciso diagnstica deve ser feita a
cultura para fungos por apresentar maior sensibilidade que o exame micolgico direto.

12. CONTROLE DA QUALIDADE


No aplicvel.
13. VALORES DE REFERNCIA
Pesquisa negativa para fungos

14. INTERPRETAO (SIGNIFICADO CLNICO)


A pesquisa de fungos em secrees e em primeiro jato de urina, pode presumir candidase,
considerada a segunda maior causa de leucorria causando vulvo vaginite. Uma das formas de
transmisso de candidiase em mulheres decorre da colonizao fungica a partir de uma colonizao
decorrente da falta de assepsia previa ao coito. As principais queixas incluem aumento do fluxo
vaginal, prurido, ardncia e a secreo branca geralmente. A uretrite fungica no homem pouco
provvel.
Os dermatofitos ausam doenas (micoses superficiais) em estruturas queratinizadas, como pelos,
pele e unhas, e no invadem estruturas mais profundas. Entretanto nem todos os dermatofitos
invadem todas as estruturas queratinizadas. So classificadas de acordo com a rea comprometida e
no segundo o organismo. A importncia do exame micolgico direto a possibilidade de inicio
imediato de tratamento, se for observado algum fungo no material, j que alguns fungos patognicos
exigem um perodo demorado de incubao para obter seu crescimento.

15. VALORES CRTICOS


No aplicvel.

16. LINEARIDADE E LIMITE DE DETECO


No aplicvel.

17. LIMITES DO MTODO


No aplicvel.

18. REFERNCIA BIBLIOGRFICA


BARRA FILHO, Renato de Lacerda. Pesquisa de fungos. 2009. Disponvel em:
<http://laudos.labclim.com.br/intranet/documentos/micro/PROMIC-0017-1.pdf>. Acesso em: 20 ago.
2017.

HEINS, Elisabeth M.. COLETA DE MATERIAL BIOLGICO E IDENTIFICAO. 2017. Disponvel


em: <http://www.lusiada.br:13792/cursos/004001013303/materiaisdidaticos/3bim/COLETA DE
MATERIAL BIOLOGICO E IDENTIFICACAO Campus3.pdf>. Acesso em: 21 ago. 2017.