APLICAO DA TCNICA DE ESPECTROMETRIA DE MASSAS EM CINCIAS

AMBIENTAIS ESTADO DA ARTE

Simone Perazzoli, Andr Battistelli

Departamento de Engenharia Qumica e de Alimentos, Universidade Federal de Santa Catarina, Florianpolis-SC, Brasil.
Departamento de Engenharia Ambiental, Universidade Federal de Santa Catarina, Florianpolis-SC, Brasil.

RESUMO
A espectrometria de massas (MS) uma tcnica analtica utilizada para identificar molculas de
interesse por meio da medio da sua massa e da caracterizao de sua estrutura qumica, com quantidades
bem pequenas de amostra (ao nvel do picograma) e em baixas concentraes em misturas quimicamente
complexas. Sendo considerada uma das mais importantes ferramentas analticas disponveis aos cientistas
na atualidade. No campo das cincias ambientais, a MS vem sendo aplicada para anlises quantitativas e
qualitativas de diversos poluentes, tais como: subprodutos de desinfeco, pesticidas, dioxinas, frmacos,
metais pesados, dentre outros. Nesse contexto, o presente artigo objetiva apresentar uma sntese do atual
conhecimento sobre os conceitos e fundamentos da tcnica de MS, bem como suas diversas aplicaes na
rea ambiental.

1 INTRODUO

A espectrometria de massas (MS Mass Spectrometry) uma poderosa ferramenta analtica

que permite a identificao da composio qumica de um determinado composto isolado, ou de
diferentes compostos em misturas complexas, atravs da determinao de suas massas
moleculares na forma inica, (ou seja, com carga eltrica lquida, positiva ou negativa), baseada
na sua movimentao atravs de um campo eltrico ou magntico. Esta movimentao
determinada pela razo entre a massa de um determinado composto (analito) e sua carga lquida,
designada pela relao m/z (mass to charge) Assim, conhecendo o valor de m/z de uma molcula
possvel inferir sua composio qumica elementar, e com isso determinar sua estrutura
(AEBERSOLD et al., 2003; MORAES e DO LAGO, 2003).
A MS tem sido utilizada para diversas aplicaes, porm, em anlises qualitativas que ela
tem se destacado, como na identificao de compostos em misturas e, principalmente, na
caracterizao estrutural de compostos desconhecidos, que pode ser alcanado atravs da
formao de ons-molcula e de seus respectivos ons-fragmentos (CHIARADIA, COLLINS e
JARDIM, 2008). A aplicao direta de MS em anlises quantitativas tambm pode ser realizada,
no entanto, muito raramente leva a resultados confiveis, devido alta sensibilidade da tcnica e,
dependendo da fonte, da possvel variao da eficincia de ionizao. Dessa forma, para anlises
quantitativas a MS comumente combinada a outras tcnicas, sobretudo a cromatografia a gs
(GC) ou cromatografia lquida de alta eficincia (HPLC), nestas condies, pequenas quantidades
de amostra entram no espectrmetro ao eluir da coluna e a quantificao torna-se possvel
(VOGEL, 2003).
Devido s caractersticas supracitadas a MS tem sido aplicada com sucesso em diversas reas
de estudo, como por exemplo, em fsica, qumica, biologia, medicina, cincia dos materiais,
cincia dos alimentos e cincias ambientais, dentre outras. Com seus novos horizontes e amplas
perspectivas de desenvolvimento, a MS vem se consolidando como uma ferramenta analtica
extremamente verstil e essencial nessas reas. Desde pesquisas aplicadas at as mais
fundamentais, a MS tem exercido papel de grande destaque, com crescente aplicao (DINIZ,
2011). Considerando esses aspectos, o presente trabalho buscou a realizao de uma reviso
bibliogrfica com respeito aos aspectos que envolvem a tcnica de MS, bem como suas principais
aplicaes em anlises ambientais.

2 APLICAO DE ESPECTROMETRIA DE MASSAS EM CINCIAS AMBIENTAIS

A Espectrometria de Massas (MS) uma tcnica analtica qualitativa e quantitativa

empregada na identificao de compostos desconhecidos, quantificao de materiais conhecidos
bem como na elucidao das propriedades qumicas e estruturais de molculas. Pode ser realizada
com quantidades bem pequenas de amostra (ao nvel do picograma) e em baixas concentraes
(ppt) em misturas quimicamente complexas.
Os mtodos baseados em MS esto entre os mais poderosos, sensveis e confiveis
atualmente disponveis, especialmente quando se trata de anlises ambientais. Novos mtodos
vm sendo continuamente desenvolvidos, com vistas ao aperfeioamento/otimizao das tcnicas
de extrao e melhor aproveitamento da interface instrumental. Nesse sentido, as tcnicas de
cromatografia gasosa e lquida tm sido as interfaces de espectrometria de massa mais
comumente utilizadas para os mtodos ambientais. Estes mtodos so especialmente teis para a
investigao direcionada a compreender o destino de contaminantes ambientais encontradas na
gua e solos.
Dentre os compostos com caractersticas particularmente relevantes, devido ao potencial
risco que apresentam ao meio ambiente e sade humana, os quais podem ser analisados MS,
esto inclusos: retardadores de chama bromados; subprodutos de desinfeco; drogas de abuso e
seus metablitos; hormnios e outros compostos de desregulao endcrina; nanomateriais;
produtos farmacuticos; siloxanos; pesticidas e seus produtos de transformao; aditivos de
combustveis; explosivos, como trinitrotolueno (TNT) e ciclotrimetilenotrinitramina (RDX), e
seus produtos de transformao; compostos orgnicos txicos que ocorrem naturalmente, como
toxinas algais e biomarcadores, bem como compostos caractersticos de microrganismos
especficos (KANDA, GLENDINNING, 2011; FARR et al., 2012) .

2.1 Perspectiva Histrica

A origem da MS data 1897, quando Joseph John Thomson realizou os experimentos sobre
raios catdicos. Onde, ao aplicar um campo eltrico em um tubo, Thomson, observou uma
deflexo do eltron dentro do mesmo, sendo esta considerada uma das primeiras determinaes
da razo m/z (THOMSON, 1913). Essa descoberta proporcionou-lhe o Prmio Nobel de Fsica,
em 1906. Nessa poca, um dos seus alunos, F.W. Aston utilizou a nova tecnologia de MS na
descoberta de que muitos elementos so encontrados naturalmente como istopos estveis
(ASTON, 1942) e, por esse trabalho, ele tambm ganhou o Prmio Nobel em qumica em 1922.
Desde o desenvolvimento dessa tcnica, at seu estgio atual, um nmero considervel de
ganhadores do Premio Nobel em Qumica e em Fsica, vinculados aos avanos na tcnica,
alm de outros que a utilizaram na soluo de problemas aplicados de diferentes reas do
conhecimento tm sido reportado (LANAS, 2009). Os principais avanos em MS so
apresentados na Tabela 1. Uma reviso mais detalhada sobre os aspectos histricos relacionados
ao desenvolvimento da MS est referenciada por Wien (1999).
Na rea das cincias ambientais, a aplicao de MS data a dcada de 1970. Em 1794,
Rook descobriu o primeiro subproduto decorrente do processo de desinfeco qumica de guas
destinadas ao consumo humano: o clorofrmio (ROOK, 1974). Nesse mesmo ano, a Agncia
Americana de Proteo Ambiental (U.S.EPA) detectou a presena de 66 compostos orgnicos na
gua de abastecimento da cidade de Nova Orleans (EPA, 1974). Em 1976, O Instituto Nacional
do Cncer (National Cancer Institute, USA) publicou os resultados de um estudo que relacionava
o clorofrmio incidncia de cncer em animais de laboratrio (KOPFLER et al., 1976). Assim,
um importante problema de sade pblica nasceu e espectrometria de massa logo se tornaria a
ferramenta chave utilizada para anlises ambientais, no apenas para a gua potvel, mas para
outras amostras ambientais - guas superficiais, as guas residuais, amostras biolgicas e ar
(RICHARDSON, 2001).

Tabela 1 Principais avanos no desenvolvimento da Espectrometria de Massas(MS).

Data Pesquisador Local Contribuio
1897 J.J. Thompson Manchester, Experimentos com tubos de raios catdicos
England (incio da MS).
1953 W. Paul Alemanha Inveno do Quadrupolo e ons trap
1968 M. Dole USA Desenvolvimento do Eletrospray
1974 Horning USA Desenvolvimento do APCI
1983 Vestal USA Desenvolvimento do Thermospray
1984 J. Fenn USA Demonstrao da aplicabilidade prtica do
Eletrospray
Fonte: Adaptado de Lanas (2009)

Cabe aqui destacar que, antes de 1970, apenas 100 compostos orgnicos haviam sidos
identificados em guas de abastecimento. No entanto, com a adoo da MS, em apenas 6 anos,
mais de 1500 compostos j haviam sido identificados (KEITH, 1976). Atualmente, milhares de
compostos, tanto orgnicos quanto inorgnicos, podem ser identificados (espcies desconhecidas)
e quantificados (espcies conhecidas). Alm disso, essa poderosa tcnica possibilita uma melhor
compreenso dos processos ambientais, tais como o destino dos compostos qumicos no meio
ambiente bem como dos processos fotolticos que ocorrem na atmosfera.

2.2 Princpios gerais de espectrometria de massas

Atualmente, a MS uma tcnica microanaltica utilizada para obter informao do peso

molecular e de caractersticas estruturais da amostra. A espectrometria de massa uma das mais
importantes ferramentas analticas disponveis aos cientistas, j que capaz de fornecer
informao sobre: i) a composio elementar de amostras; ii) a estrutura molecular; iii) a
composio qualitativa e quantitativa de misturas complexas; iv) a estrutura e a composio de
superfcies slidas e as propores isotpicas de tomos em amostras (SKOOG et al., 1998,
MADEIRA, FLORNCIO, 2012).
O princpio bsico da MS gerar ons a partir de compostos orgnicos ou inorgnicos por
um mtodo apropriado, separar estes ons (razo m/z) e, sequencialmente, detecta-los qualitativa e
quantitativamente. O alcance e a utilidade do mtodo de MS ditado pelo processo de ionizao.
O analito pode ser ionizado termicamente, por aplicao de um campo eltrico ou por impacto
energtico de eltrons, ons ou ftons. Os agentes ionizantes empregados podem ser distribudos
em duas categorias: as que requerem a amostra em fase gasosa e os agentes que provocam
dessoro em amostras slidas ou liquidas. A vantagem dos ltimos que so aplicveis a
amostras no volteis e termicamente instveis. Este o caso da tcnica de espectrometria de
massa com dessoro de plasma (SKOOG et al., 1998, GROSS, 2004, LABEDEV, 2012).
A Figura 1 ilustra um esquema genrico de um espectrmetro de massas (MS).
A amostra a ser analisada Figura 1 - Esquema das principais partes de um
Espectrmetro de Massas
introduzida por um inlet (dispositivo
para a introduo da amostra no
espectrmetro) e direcionada para a
fonte de ionizao. Nos estgios iniciais
do desenvolvimento da tcnica, a
amostra era introduzida por
vaporizao direta. No entanto, com o
desenvolvimento das tcnicas
cromatogrficas tornou-se comum o
uso de um cromatgrafo como fonte de
Fonte: Rodriguez (2003).
introduo da amostra. Neste caso, os
picos cromatogrficos gerados pela separao dos componentes da amostra so individualmente
introduzidos na fonte de ionizao do MS para gerar os ons a serem posteriormente separados
no analisador e encaminhados para deteco e quantificao. Um software apropriado
instalado em um computador efetua os clculos, gera os espectros de massas a serem impressos e
comanda as funes do espectrmetro (RODRIGUES, 2003, LANAS, 2009).

2.2.1 Sistema de introduo de amostras

 Quando a tcnica foi desenvolvida, o composto alvo era previamente isolado da matriz e
ento inserido diretamente na fonte de ons, atravs de uma sonda. Esse procedimento era lento e
acabava dificultando a anlise de impurezas em concentraes muito baixas. Como alternativa
para amostras com elevada volatilidade, optava-se pelo acondicionamento em frascos de vidro no
formato de bales, sendo que a introduo no MS ocorria pela abertura de vlvulas de controle.
No entanto, nas ltimas dcadas, o acoplamento da Espectrometria de Massas com a
Cromatografia Gasosa (GC-MS), por meio do uso de fontes de ionizao apropriadas,
possibilitou a aplicao da tcnica na realizao de anlises rotineiras para misturas complexas de
compostos em fase gasosa (compostos volteis e semi volteis, de baixa polaridade e baixa
massa molecular). J para os compostos que apresentam massa molecular maior e/ou maior
polaridade e menor volatilidade, o acoplamento entre Cromatografia Lquida e Espectrometria de
Massas (LC-MS) a tcnica mais apropriada (LANAS, 2009, LABEDEV, 2012).

2.2.2 Fontes de ionizao

As formas de ionizao mais empregadas no acoplamento GC-MS, so o impacto

eletrnico (EI) e a ionizao qumica (CI), as quais operam em baixas presses. Dentre elas, o
impacto por eltrons a mais popular, pois fornece um grande nmero de ons os quais permitem
a identificao da substncia em estudo. J para o acoplamento LC-MS, as fontes que mostraram
melhor desempenho produzem a ionizao em presso atmosfrica (API). Assim, formas de
ionizao mais utilizadas so: Electrospray (ESI), Ionizao Qumica Presso Atmosfrica
(APCI), Ionizao por Ftons Presso Atmosfrica (APPI). Dentre estas, a forma de ionizao
ESI a mais empregada no acoplamento LC-MS, seguida da APCI e APPI (mais recente)
(SYAGE et al., 2008; LANAS, 2009). A tabela resume as principais caractersticas das fontes de
ionizao.
Comparativamente, a ESI uma tcnica de ionizao robusta e adequada para a anlise
de compostos polares ou inicos, termolbeis, ou com massa molecular superior a 1.000 Da
(ex.: protenas, aminocidos). Compostos no polares ou de polaridade muito baixa tendem a
apresentar melhor ionizao empregando-se APPI, enquanto que os pouco polares e de polaridade
intermediria geralmente do bons resultados com APCI (LANAS, 2009).
Tabela 2 - Princpios das fontes de ionizao
Fonte
Acoplamento Princpio
Ionizao
GC/MS EI Eltrons so emitidos por um filamento de aquecido (tungstnio ou rnio) e so
acelerados atravs da fonte por um potencial apropriado (5 - 100 V), de modo a atingir
a energia necessria para ionizar a molcula.
CI Uma pequena quantidade de tomos gasosos ionizada por coliso com tomos
produzidos pelo bombardeamento do gs reativo. CI requer uma configurao
diferenciada para a fonte de ons, uma fonte adicional de pressurizao e a utilizao
dos gases reagentes.
LC/MS ESI A amostra dissolvida e pressurizada em um tubo capilar (ao inox) onde
aplicada uma voltagem (3.000 - 5.000 V). Como resultado, o lquido emerge do
capilar presso atmosfrica, na forma de um aerossol. As gotculas formadas so
dessolvatadas e os ons fluem para o MS, induzidos pelos efeitos da atrao
eletrosttica e pelo vcuo (OBS: apenas o processo de ionizao ocorre presso
atmosfrica; a partir deste ponto, o MS se encontra sob vcuo).
APCI Os analitos so introduzidos em uma sonda capilar cuja extremidade circundada por
um sistema de aquecimento. No interior da sonda, um gs adicional passa
continuamente para volatilizar a amostra e solvente (gs nebulizador). Prximo
sonda, instalada uma agulha metlica (eletrodo de descarga tipo corona), que,
submetido a um potencial eltrico provoca uma descarga, resultando na ruptura
eltrica da atmosfera circundante do condutor devido ionizao provocada pelo
efeito corona.
APPI A absoro de ftons de luz pelo analito, ocasiona sua ionizao com perda de um
eltron, e formao um ction radicalar , que poder ser detectado nesta forma,
ou participar de reaes com o ambiente que o circunda, formando outros ons os
quais sero detectados. O processo mais comum, neste caso, ser a abstrao de um
tomo de hidrognio do solvente.
Fonte: Adaptado de Balogh (2006), Lanas (2009), Barden et al. (2014), Taylor (2015)

2.2.3 Analisadores de massas

Em MS, o analisador de massas possui importncia particular, uma vez que responsvel
pela seleo e/ou separao dos ons, de acordo com a razo m/z de cada on. A escolha do
analisador deve ser efetuada considerando-se a aplicao (faixa de massas desejada), desempenho
(resoluo de massas) e custo. Em funo desses fatores, no existe um analisador de massas que
seja ideal para todas as aplicaes (LANAS, 2009, 2013). As caractersticas de construo e
operao diferem de um analisador para outro, assim como seus benefcios e limitaes,
conforme pode ser observado na Tabela 3.
Tabela 3 Benefcios e limitaes dos analisadores de massas
Analisador Benefcios Limitaes
Quadrupolo Reprodutibilidade, baixo custo, linearidade Baixa resoluo, discriminao de massa.
em anlises quantitativas, simplicidade.
Ion Trap Alta sensibilidade, capacidade de Produz espectro no usual se os ons ficam
escaneamento de multi-ons, alta armazenados no trap por um longo perodo,
resoluo. satura facilmente, ruim para substncias com
massa inferior a 100 Da, baixa faixa dinmica,
uso quantitativo limitado.
Time of Flight Maior transmisso de ons, alto espectro de Digitalizadores (rpidos) usados em TOF
(ToF) massa para todos os analisadores MS, podem limitar a faixa dinmica.
limite de deteco.
Campo Eltrico Alta reprodutibilidade, alta resoluo e Elevado custo e complexidade, velocidade
e/ou Magntico exatido, alta faixa dinmica, limite de limitada de varredura, sensibilidade baixa
deteco. quando operado em resolues elevadas,
potenciais problemas no acoplamento com LC-
ESI devido a formao de arco voltaico.
Transformada Maior resoluo (superior a 106), Custo elevado, necessidade de alto vcuo.
de Fourier (FT- Aplicao em estudos de fragmentao de
MS) molculas.
Orbitrap Alta resoluo (at 100.000), exatido das Alto custo de aquisio e operao.
medidas (taxa m/z na ordem de 1-2 ppm),
amplo intervalo dinmico da preciso de
massa, sensibilidade, estabilidade do
sistema
Fonte: Adaptado de Lanas (2013), CHROMacademy (2015)1

2.2.4 Detectores

O detector, ltimo mdulo de um MS, registra a carga induzida ou a corrente produzida

quando um on atravessa uma superfcie ou atinge sua superfcie. No caso de um equipamento
que possa efetuar uma varredura de massas, o sinal produzido no detector durante uma varredura
em funo da razo m/z ou posio do on na varredura, ir gerar um espectro de massas. Existe
uma variedade de detectores para MS, sendo a escolha efetuada a partir do projeto do
espectrmetro e suas aplicaes analticas. Os mais empregados so apresentados na Tabela 4.

Tabela 4 Principais detectores empregados em MS

Detector Caractersticas

1
Treinamento e-learning CHROMacademy Mass Spectrometry and LCMS. Disponvel em: http://www.chromacademy.com/mass-
spec-training.html (Acesso em 09/11/2015)
 Chapas Simplicidade operacional, baixa sensibilidade, preciso ruim, difcil
Fotogrficas quantificao, faixa linear dinmica pequena, necessidade de revelar a
imagem depois do experimento.
Copo de Faraday Apresenta baixa sensibilidade, no entanto, ainda empregado na
determinao de partculas carregadas devido a sua exatido em funo da
relao direta entre a corrente medida e o nmero de ons.
Multiplicao de Conhecidos como continuous-dynode EM (CDEM) ou channel electron
eltrons multiplier (CEM), so extremamente sensveis, utilizados na maioria dos
espectrmetros com ToF.
Fonte: Adaptado de Lanas (2009)

De maneira geral, os seguintes atributos so desejveis para um detector de ons: resposta

a uma ampla faixa de massas, baixo ou nenhum rudo, alta estabilidade, resposta independente da
massa, deteco simultnea e resposta. Atualmente, nenhum detector das necessidades analticas
para o qual o equipamento ser utilizado (KOPPENAAL et al., 2005, LANAS, 2009).

2.3 ANLISE DE CONTAMINANTES PRESENTES AMOSTRAS AMBIENTAIS

Os mtodos analticos usados para monitorar a presena de poluentes so essenciais para a

proteo da sade humana e animal, bem como para a reduo dos impactos causados ao meio
ambiente. Sendo que, um dos grandes desafios em anlises ambientais se refere ao controle dos
riscos associados s misturas dos contaminantes emergentes, as quais vm sofrendo mudanas
continuamente.
Dentre as tendncias mais importantes da qumica analtica se destaca o desenvolvimento
de procedimentos rpidos e eficientes para a anlise de compostos traos em matrizes complexas.
Nesse sentido, as melhorias alcanadas durante os ltimos anos em termos de sensibilidade
decorrem do desenvolvimento de tcnicas de cromatogrficas (LC, GC) associadas MS. Ainda
pode-se utilizar a MS com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS), no entanto, essa tcnica
acaba sendo limitada na presena de altos nveis de Na, S, Cl, K, e Ca (comuns em matrizes
ambientais), uma vez que esses elementos causam interferncias no espectro do ICP, originando
ons poliatmicos que se sobrepe aos istopos principais (Ti, V, Cr, Ni, Cu, Zn, As) e outros
elementos. Para exemplificar, o teor de slidos dissolvidos totais em uma amostra deve ser de no
mximo 2%, indicando a necessidade de um pr-tratamento para viabilizar a anlise por esse
mtodo (MCCURDY e PROPER, 2014).
 Mtodos que proporcionem a anlise de multi-resduos, reduo do tempo de execuo
das anlises (automatizao dos processos), bem como a reduo dos volumes de solventes
envolvidos em todo o processo analtico ainda continuam sendo um desafio. A fim de suprir tais
necessidades e melhorar os protocolos analticos para matrizes complexas, novas tendncias na
preparao e limpeza/extrao das amostras, o desenvolvimento de novos materiais e novos
analisadores de MS tem desempenhado um papel fundamental.

2.3.2 Matrizes Ambientais

2.3.1.1 guas de abastecimento, superficiais, residurias e solos

As tcnicas de MS aplicadas na anlise de solos, gua potvel, guas residurias e guas

superficiais so muito semelhantes devido similaridade dos compostos estudados, e
consequentemente, das metodologias utilizadas. Os tipos de compostos orgnicos e inorgnicos
presentes nesse grupo de amostras no mudaram muito ao longo dos anos, entretanto, os mtodos
de medies tm avanado significativamente, permitindo limites de deteco cada vez mais
baixos (ppt e at ppq) e anlises diretas de espcies inicas e polares que anteriormente no eram
possveis (RICHARDSON, 2001).
Dentre os poluentes analisados nesse tipo de amostra, os pesticidas (organofosforados,
organoclorados, carbamatos, Aldrin, DDT e etc) representam a classe dominante devido sua
elevada toxicidade e potenciais efeitos negativos sobre a sade humana e o meio ambiente.
Diversas tcnicas tm sido utilizadas com sucesso para esse fim, tais como LC-MS (MASI et
al., 2013; KEMMERICH et al., 2015) e GC-MS (ZACHARIS et al., 2012; MONTESINOS et al.,
2015). Entretanto, diversas outras tcnicas tambm so utilizadas para determinao dos mais
variados poluentes em amostras de solo e guas, tais como GCMS para determinao de PAHs e
PCBs (BARCO-BONILLA et al., 2015), dioxinas (MYERS, MABURY e REINER, 2012) e
COVs (CHARY e FERNANDEZ-ALBA, 2012), LCMS para determinao de frmacos
(FERRER e THURMAN, 2012) e ICPMS para determinao de metais pesados (PERGANTIS,
JONES-LEPP e HEITHMAR, 2012).

2.3.1.2 Ar
 A MS tambm uma tcnica bastante utilizada para anlises de amostras de ar, estes
estudos incluem principalmente medies de material particulado/ aerossis, emisses industriais
e gases de combusto (RICHARDSON, 2001). Por definio, os aerossis so quaisquer
partculas, slidas ou lquidas, em suspenso num gs, como por exemplo, poeira, neblina ou
fumaa. Dentre as tcnicas utilizadas para anlise desses compostos, a MS tem avanado
substancialmente desde a sua criao, tanto para anlises off-line quanto on-line (ZHANG et al.,
2011). As anlises off-line, utilizando MS por ionizao com laser (LM-MS), de ons
secundrios (SI-MS), e com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS) tem sido utilizadas com
frequncia. Contudo, devido elevada dificuldade de amostragem e a possvel alterao do
aerossol antes da anlise, elas tem sido preteridas nos ltimos anos por tcnicas on-line como por
ionizao e dessoro a laser (LDI-MS) e ionizao trmica (TI-MS) (NOBLE e PRATHER,
2000).
Com relao a emisses industriais e gases de combusto, a utilizao de MS por ionizao
a laser (LI-MS) tem sido relatada para monitoramento on-line de vestgios de compostos
aromticos, fenlicos e clorados em gases de combusto de incineradores, alm de fumaa de
cigarro. As tcnicas de GC-MS tm sido aplicadas principalmente na medio de dioxinas e
furanos. J a ICP-MS tem sido usada, por exemplo, para determinao de compostos como o
arsnio (ZIMMERMANN, HEGER e KETTRUP, 2009; LIU et al., 2013).

2.3.1.3 Microrganismos

A deteco de microrganismos em amostras ambientais de extrema importncia para

vrios segmentos, como a caracterizao da comunidade microbiolgica de um ecossistema
natural, a identificao de bactrias presentes em reatores biolgicos e, sobretudo, a identificao
e quantificao de patgenos em guas para abastecimento. Diversas tcnicas so utilizadas para
esse fim, como a cultura de clulas, mtodos imunolgicos, reao em cadeia da polimerase
(PCR), identificao microscpica e, mais recentemente, a MS (RICHARDSON, 2012).
As tcnicas de MS tem ganhado destaque, pois se baseiam na deteco de protenas e
peptdeos e/ou na deteco de cidos nucleicos possibilitando a obteno de informaes mais
rpidas e especficas sobre os microrganismos do que os mtodos microscpicos tradicionais
podem oferecer (SAUER e KLIEM, 2012). Dentre essas tcnicas, pode-se destacar a ionizao
por eletropulverizao (EPI-MS) que consiste na anlise direta do DNA microbiano e a Ionizao
e Dessoro a Laser Assistida por Matriz (MALDI-MS), a qual analisa perfis de protenas
extrados de bactrias e pode eficientemente detectar numerosas molculas simultaneamente
(SENG et al., 2009; ZHANG et al., 2011).

2.3.1.4 Matria orgnica natural

Matria orgnica natural (MON) uma mistura complexa de substncias, tais como
aminocidos, hidratos de carbono, lipdeos, ligninas, cidos orgnicos, cidos hmicos e flvicos.
Um dos principais problemas atrelados a essas substncias a potencialidade de formao de
subprodutos txicos quando em contato com agentes desinfetantes (cloro e oznio) nas unidades
de tratamento de gua para abastecimento (MATILAINEN et al. 2011). Nesse contexto,
evidente a necessidade de tcnicas analticas precisas para determinao desses compostos,
permitindo que novas formas de remoo sejam buscadas ou tecnologias de tratamento de gua
sejam otimizadas de forma a garantir sua qualidade final.
A MS sempre desempenhou um papel importante na caracterizao de MON ao longo dos
anos. A tcnica de GC-MS tem sido aplicada para anlise de MON em sua forma estrutural
completa, por meio da associao com a pirlise, ou aps sua quebra em molculas menores por
intermdio de reaes qumicas (HERTKORN et al., 2008). Mais recentemente, as tcnicas de
Ressonncia Ciclotrnica de ons por Transformada de Fourier (FT-ICR/MS) e de ESI-MS
tambm tm sido utilizadas com sucesso para essa finalidade (HERZSPRUNG et al., 2014;
NEBBIOSO e PICCOLO, 2015).

2.3.1.5 Amostras biolgicas

A anlise de amostras biolgicas de suma importncia em cincias ambientais, pois

fornece informaes sobre a absoro e interao dos poluentes ambientais no organismo de
diferentes espcies, inclusive os humanos. Os tecidos gordurosos, por exemplo, tm sido uma
fonte primria de bioacumulao para poluentes como PHA, PCB e dioxinas. Assim, a ingesto
de peixes que tenham sido expostos a estes contaminantes perigosos, por exemplo, pode fornecer
uma dose concentrada de poluentes para os seres humanos que os consomem (PLOMLEY,
LAUEVIC e MARCH, 2000).
Nesse contexto, a MS torna-se fundamental para a quantificao, bem como fornecimento
de informaes sobre os mecanismos de ao destes poluentes em humanos e outros organismos,
por meio da anlise de metabolitos polares, protenas e outros biomarcadores de exposio.
Tcnicas de extrao melhoradas, juntamente com avanos recentes em MS (ESI-MS, APCI-MS
e MALDI-MS), esto permitindo a anlise de metablitos altamente polares e outros
biomarcadores de exposio em nveis extremamente baixos em fluidos e tecidos biolgicos
(RICHARDSON, 2001).

2.3.2 Preparo de amostras ambientais: Extrao e limpeza/ou purificao

A preparao da amostra o processo de extrao qumica dos resduos de uma amostra e

a subsequente purificao do extrato para isolar os resduos de interesse e remover qualquer
matriz interferente que possa afetar o sistema de deteco. Mesmo com o avano das tcnicas de
separao e deteco, a etapa de preparo da amostra essencial para a obteno de resultados
confiveis e manuteno do desempenho do equipamento. Alm disso, muitas vezes, este
procedimento demorado e dispendioso, havendo a necessidade de um mtodo de limpeza muito
eficiente quando se deseja alta taxa de transferncia (SHELVER; SMITH, 2002).
Quanto s tcnicas de preparao da amostra, geralmente as amostras lquidas so
processadas com maior facilidade quando comparadas s matrizes slidas, uma vez que os
resduos presentes se encontram distribudos com maior homogeneidade (KINSELLA et al.,
2009).
As primeiras etapas no preparo e extrao de amostras slidas so realizadas em geral
atravs da utilizao de mtodos convencionais j estabelecidas, tais como a extrao slido-
lquido (LSE), muitas vezes combinadas com micro-ondas ou ultrassom. Dentre as tcnicas
modernas, se destacam as que trabalham com o volume reduzido de solventes (ex.: disperso da
matriz em fase slida - MSPD, micro extrao em fase lquida - LPME) e algumas mais
sofisticadas (ex.: extrao com fludo supercrtico - SFE e extrao com lquido pressurizado -
PLE) (CARABIAS-MARTNEZ et al., 2005; BJRKLUND et al., 2006).
 J para a extrao de amostras lquidas e/ou purificao de extratos provenientes de
amostras slidas, a maioria das aplicaes so baseadas na extrao em fase slida (SPE) usando
aparatos online ou offline. Nesse sentido, a maioria das pesquisas tm sido direcionadas para o
melhoramento dos materiais adsorventes (materiais de acesso restrito RAMs, polmeros
molecularmente impressos MIPs), desenvolvimento de adsorventes contendo nanomateriais e
imuno-sorventes, alm de tcnicas baseadas no tamanho da partcula (cromatografia de excluso)
e cromatografia em fluxo turbulento TFC (FARR et al., 2012)

2.3.3 Deteco

Em anlises ambientais, o acoplamento de LC a analisadores quadrupolo ganhou

popularidade e tornou-se uma das tcnicas preferidas para a anlise de compostos polares
(PETROVIC et al., 2010). Contudo, apesar de apresentar boa sensibilidade, quando matrizes
complexas so investigadas, a seletividade desses analisadores insuficiente, comprometendo a
identificao dos compostos alvo. Para resolver problemas de seletividade e sensibilidade, novas
tcnicas denominadas Tandem MS (MS-MS) tm sido desenvolvidas e aprimoradas,
representando um grande avano no acoplamento com cromatografia, gerando sistemas como
LC/MS/MS que se tornaram populares nos ltimos anos (SMYTH, 2003, LANAS, 2009).
O Tandem MS-MS um sistema composto por um nmero de espectrmetros de massa
utilizados em sequncia, separados por uma cmara de coliso. Onde, no primeiro espectrmetro
ons so separados por carga, e seguem para a cmara de coliso, onde so fragmentados. Os
fragmentos formados passam para o segundo espectrmetro, onde so analisados e identificados
de acordo com a razo m/z (PIC, 2015).
Existem diferentes tipos de instrumentos que operam no modo MS-MS, tal como: triplo
quadrupolo (QqQ), quadrupolo time-of-flight (QqToF), quadrupolo ion trap (QIT) e quadrupolo-
linear ion trap (QqLIT). A quantificao de poluentes orgnicos presentes em baixas
concentraes e em matrizes complexas, por exemplo, requer alta seletividade e sensibilidade.
Nesse caso, os instrumentos mais indicados so QqQ e QLIT (FARR et al., 2012).

3 CONCLUSO
 O desenvolvimento de procedimentos rpidos e eficientes ainda um desafio a ser
superado. Esses mtodos analticos, em especial os que envolvem MS, so essenciais o
monitoramento de poluentes traos presentes em matrizes complexas, garantindo assim a
proteo da sade humana e animal, bem como para a reduo dos impactos causados ao meio
ambiente.
Levando em considerao os aspectos mencionados, pode-se dizer que a MS desempenha
um papel fundamental como tcnica analtica aplicada nas cincias ambientais, sobretudo quando
associada a outras tcnicas, como a GC ou LC, onde permite realizao de anlises qualitativas
e quantitativas extremamente precisas para uma elevada gama de compostos presentes em
amostras de diversas naturezas, como guas naturais, solos, microrganismos, ar, dentre outras.

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