IDENTIFIKASI KANDUNGAN MINYAK ATSIRI DARI DAUN Polygonum pulchrum Blume DAN AKTIVITASNYA

SEBAGAI ANTIBAKTERI SERTA ANTIOKSIDAN

Muhammad Nurdin Mustamad.1, Sahidin2, Yamin3

1Strata-1 Fakultas Farmasi, Universitas Halu Oleo, Kendari
2,3Fakultas Farmasi, Universitas Halu Oleo, Kendari

Abstract
Essential oils is type of vegetable oil that has many benefit. Isolation and identification of essential oil from leaves Polygonum
pulchrum Blume and also their activities as antibacterial and antioxidant agents have been conducted. The oil was obtained by
hydrodistillation and analiyzed compound by using gas chromatography-mass spectrometry, and then comparison of the
spectroscopy data with similar data from literatures. The activities of essential oils were evaluated towards bacteria i.e.
Escherichia coli ATCC 35218, Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Salmonella typhi YCTC and also as antioxidant toward
DPPH (1,1-diphenyl-picryl-hidrazyl). The essential oil yield 0,0153% (v/w). Essential oils identified as Ethanol, methyl acetat,
ethyl acetat, isoprophyl acetat, ethyl propanoat, Acetat acid, 1-methyllprophyll ester, 2-pentadecanone, 6,10,14-trimetil,
hexanedionic acid, bis(2-etilhexil) Essential oils are not active toward E. coli ATCC 35218, S. aureus ATCC 25923 dan S. typhi
YCTC., however their showed activities as antioxidant agent with IC50 value 48,3196 ppm with vitamin C as a positive control
with IC50 values 3,90186 ppm.

Keywords: Essential oil, Polygonum pulchrum Blume, antibacterial, antioxidant.

A. Pendahuluan
Tingginya angka kejadian permasalahan kesehatan
yang disebabkan oleh infeksi dan radikal bebas setiap
tahunya terus bertambah, bahkan diantaranya menjadi
penyebab kematian di Indonesia. Penyakit infeksi juga salah
satu penyebab utama kematian di dunia terutama di daerah
tropis seperti Indonesia sehingga digolongkan sebagai
penyakit yang berbahaya (Khunaifi, 2010).
Selain penyakit infeksi, penyakit degenaratif yang
dipicu oleh paparan radikal bebas juga memiliki angka
mortilitas yang cukup tinggi. Data WHO pada 2005
menunjukan bahwa lebih dari delapan belas juta kematian di
bumi ini akibat penyakit kardiovaskular. Selain itu juga
angka mortilitas penyakit jantung koroner di negara
berkembang terus meningkat, bahkan 50 diantaranya masih
berusia dibawah tujuh pulu tahun (masamasa produktif)
(Prahastuti dkk., 2011). Penyakit lain yang juga faktor
penyebabnya adalah radikal bebas seperti kanker, asma dan
sebagainya juga masih cukup tinggi pravelensinya di
Indonesia (Balitbangkes, 2013). Hampir seluruh terapi
pengobatan penyakit degeneratif saat ini memiliki harga
yang cukup mahal sehinga susah untuk dijalani oleh seluruh
elemen masyarakat. Hal ini mendorong para peneliti
menemukan alternatif pengobatan dengan terus mencari
senyawa-senayawa aktif baik dari mineral, hewani dan
tumbuhan.
Pemanfaatan tumbuhan sebagai obat tradisional
hanya berdasarkan atas pengalaman atau warisan tanpa
mengetahui kandungan kimianya secara detail (Chairul dan
Sulianti, 2002). Sehingga hal tersebut dapat dijadikan
sebagai salah satu pendekatan yang sangat membantu dalam
pencarian senyawa aktif dari alam yang disebut kajian
etnobotani (Ruslin dan Sahidin. 2008). Salah satu genus
tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai tanaman obat
adalah Polygonum.
Polygonum merupakan genus tanaman yang terkenal
menghasilkan berbagai metabolit sekunder termasuk
flavonoid, triterpenoid, antrakuinon, kumarin,
fenilpropanoid, lignan, sesquiterpenoid, stilben dan tannin
(Lopez dkk., 2006). Kandungan senyawa bioaktif dari genus
tanaman ini telah banyak diisolasi dan memiliki aktivitas
yang beragam. (Fandkk. 2010).
Tumbuhan genus Polygonum secara etnobotani
memiliki aplikasi yang cukup luas. Masyarakat Korea
dilaporkan memanfaatkan genus Polygonum digunakan
sebagai obat sakit gigi (Ban dkk., 2010), bahkan di Cina
telah terdaftar secara resmi pada Farmakope Cina sebagai
antidiare dan antitumor (Fan dkk., 2009). Suku Indian Toba
di kawasan timur laut Argentina memanfaatkan P.
punctatum sebagai desinfektan dan penyembuh luka (Penna
dkk., 2001). Untuk Tanaman P. pulchrum Blume sendiri
telah secara tradisional digunakan oleh masyarakat sebagai
obat penambah stamina, depuratif dan sebagai antibakteri
(Johnson. 1998).
Beberapa studi kajian bioaktivitas minyak atsiri dari
genus Polygonum, terhadap bakteri serta aktivitas
antioksidan terhadap radikal bebas 1,1-difenil-2-
pikrilhidrazil (DPPH) telah dilaporkan, namun untuk studi
khusus kajian minyak atsiri dari spesies P. pulchrum
Blumebelum ada sama sekali. Oleh karena itu, perlu
dilakukannya penyulingan dan kajian kandunngan senyawa
dalam minyak atsiri P. pulchrum Blume serta uji aktivitas
terhadap bakteri dan radikal bebas DPPH.
B. Metode Penelitian
1. Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu
satu set alat penyulingan sthal (gambar pada lampiran),
timbangan analitik (precisa), hot plate(stuart),
autoklaf(wisecrave ), laminar air flow(chuaire), spektronik
20D (thermo), oven (sop air concept), kuvet (hellma
analytics), vortex (stuart), elektromantel (boeco),
kromatografi gas-spektrometer massa (ShimadzuQP-
5000), erlenmeyer (pyrex), corong (pyrex), tabung reaksi
(pyrex), gelas kimia(pyrex), labu takar(pyrex),cawan
petri (anumbra), jarum ose, lampu spiritus, mistar, pinset,
pipet mikro, vial, batang pengaduk, cutter.
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini
adalah daun tanaman P. pulhrum Blume, Air, metanol
(teknis), bakteri (E. coli ATCC 35218, S. aureus ATCC
25923., dan S. typhi YCTC), NaCl (Otsuka), medium NA
(nutrient agar) (merck), antibiotik standar kloramfenikol
(Braco), Vitamin C (Braco), kertas saring (watmann
2012), aluminium foil (bagus), methanol (merck), asam
asetat (merck), air, etil asetat (merck), radikal DPPH.
2. Pengambilan sampel dan preparasi sampel
Daun tanaman P. pulchrum Blume diperoleh di
lingkungan Universitas Halu Oleo Kendari, Sulawesi
Tenggara.Sampel daundipetik pada pagi hari untuk
menghindari terjadinya paparan sinar matahari sehingga
dapat mempengaruhi kandungan minyak atsiri dalam daun.
Berdasarkan publikasi Maheswaran (2013), isolasi minyak
atsiri yang dikerjakan dari daun P. hydropiper menggunakan
sampel daun tanaman yang sudah tua, dikumpukan pada saat
keadaan masih segar dan bersih. Sampel yang telah diambil
kemudian dibersihkan, dipotong kecil-kecil, sampel dalam
keadaan tetap segar dan basah agar minyak atsiri yang
terkandung tidak menguap.
3. Penyulingan
Potongan daun P. pulchrum Blume disuling dengan
air1x8 jam, kemudian diulang hingga minyak atsiri terlihat
pada penampung destilat, minyak atsiri yang dihasilkan
dalam penampung akan terpisah dari air dengan sendirinya,
karena berat jenis minyak atsiri lebih ringan dari pada air
(Sastrohamidjojo, 2004).
4. Identifikasi komponen senyawa minyak atsiri
Minyak atsiri yang dihasilkan dari proses
penyulingan diidentifikasi komponen senyawa didalamnya
dengan data yang dihasilkan dari metode kromatografi gas
spektrometer mass (KG-MS). Data yang diperoleh
diterjemahkan dengan melihat literatur sehingga bisa
diketahui golongan dan strukturnya.
5. Uji aktivitas antibakteri
Cawan petri, erlenmeyer, tabung reaksi, spatula,
kertas saring, Nutrient Agar (NA), dan seluruh alat dan
bahan (kecuali pelarut dan minyak atsiri) yang akan
digunakan disterilisasi di dalam autoklaf pada suhu 121 oC
dan tekanan 1 atm selama 1520 menit, dikeringkan dan
dibungkus dengan kertas (Pelczar dan Chan, 1986).
Pada tahap pengujian antibakteri, digunakan media
Nutrien Agar (NA). Media disiapkan dengan cara
menimbang media NA sebanyak 2 gram, dilarutkan dalam
100 mL air suling dalam erlenmeyer dan dipanaskan
menggunakan hot plate sampai mendidih dan larut
sempurna kemudian disterilkan dalam autoklaf.
Mikroba uji yang digunakan dalam pengujian
aktivitas biologis minyak atsiri, terdiri dari tiga jenis bakteri
yaitu E. coli ATCC 35218, S. aureus ATCC 25923 dan S.
typhi YCTC. Mikroba yang digunakan masing-masing
diremajakan dengan cara memindahkan 1 atau 2 ose,
digoreskan pada media NA kemudian dimasukkan dalam
tabung reaksi dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 C. o atsiri yang dikerjakan dari daun P. hydropiper menggunakan
Nilai densitas standar inokulum bakteri ekuivalen
dengan Mc Farland Standar. Larutan 1 Mc Farland
Standar dibuat dengan komposisi 0,1 mL BaCl2 1% dan 9,9
mL H2SO4 1%. Kekeruhan larutan diatur hingga bernilai
antara 0,08 hingga 0,20 pada spektrofotometer UV-Vis
dengan panjang gelombang 625 nm.
Aktivitas antibakteri diuji dengan metode difusi agar
menggunakan kertas cakram. Metode ini dilakukan dengan
cara mencampur sebanyak 50 L suspensi bakteri ke dalam
15 ml media NA yang telah dicairkan ke dalam cawan petri
steril dan kemudian dibiarkan menjadi padat. Minyak atsiri,
Tabel 1. Hasil penyulingan minyak atsiri
Sampel Minyak atsiri
6.350 gram 1 mL
Minyak atsiri yang dihasilkan dari proses
penyulingan selama 26x8 jam memiliki bau khas yang
sangat tajam dengan warna kuning keemasan, visualisasi
dari minyak atsiri dapat dilihat pada gambar 4. Total minyak
atsiri yang didapatkan dari proses penyulingan sebanyak 1
ml. Dengan demikian dapat dipresentasekan persen kadar
kontrol negatif (pelarut), dan kontrol positif (kloramfenikol)
masing-masing diteteskan ke kertas cakram yang telah
disterilkan, kemudian diletakkan pada permukaan media
selanjutnya diinkubasi pada suhu 37C. Hasil uji daya
antibakteri didasarkan pada pengukuran diameter daerah
hambat (DDH) pertumbuhan bakteri yang terbentuk di
sekeliling kertas cakram.
6. Uji aktivitas antioksidan
Uji aktivitas antioksidan dilakukan secara kuantitatif,
1 ml DPPH ditambah metanol hingga menjadi 5 ml
(blanko). Minyak atsiri dibuat dengan 5 seri konsentrasi
yaitu 5, 10, 15 dan 20 ppm. Tiap larutan diambil 2 ml,
ditambahkan 1 ml DPPH lalu diencerkan dengan metanol
hingga volumenya menjadi 5 ml kemudian diinkubasi pada
suhu 37C selama 30 menit. Uji serapan dilakukan pada
panjang glombang 517 nm menggunakan spektrofotometer
UV-Vis. Persentase hambatan (%I) dihitung berdasarkan
{(serapan blanko-serapan sampel)/serapan blanko} x 100%.
Persamaan garis yang diperoleh digunakan untuk
menghitung Inhibition Concentration 50% (IC50) (Chow
dkk., 2003).
7. Pengolahan dan analisis data
Dari kromatogram KG-MS diperoleh informasi
jumlah senyawa yang terdeteksi dan dari spektra KG-MS
didapatkan struktur senyawa yang terdeteksi dalam minyak
atsiri P. pulchrum Blume dengan cara membandingkannya
dengan data sekunder dari literatur. Aktivitas minyak atsiri
dari nilai diameter zona hambat pada uji antibakteri dan,
nilai IC50 pada uji kuantitatif antioksidan.
C. Hasil Dan Pembahasan
1. Penyulingan Minyak Atsiri
Hasil penyulingan minyak atsiri dengan kualitas dan
kuantitas yang cukup baik memerlukan sampel yang waktu
pengambilannya tepat dan preparasi yang baik. Sampel
diambil pada pagi hari untuk mengurangi jumlah minyak
atsiri yang dikeluarkan dari daun P. pulchrum Blume. akibat
paparan dari sinar matahari. Daun yang terkumpul 250
gram perhari, banyaknya sampel daun yang digunakan
dalam proses penyulingan sebanyak 6,35 kg. Berdasarkan
publikasi Maheswaran pada tahun 2013, isolasi minyak
sampel daun tanaman yang sudah tua, dikumpukan pada saat
keadaan masih segar dan bersih. Perlakuan ini ditujukan
untuk menghindari hilang dan berkurangnya kandungan
minyak atsiri yang bersifat sangat mudah menguap.
Untuk mendapatkan hasil yang optimal dari proses
penyulingan jaringan sel-sel dari daun terlebih dahulu
dirusak. Pengerusakan ini ditujukan agar minyak atsiri yang
terkandung dalam daun lebih mudah terdifusi kedalam air
saat dipanaskan. Pengerusakan jaringan-jaringan pada daun
dapat dilakukan dengan memotong-motong daun menjadi
lebih kecil.
Visualisasi Bau
Warna kuning Tajam, kuat, Khas
keemasan
minyak atsiri yang terkandung dalam daun P. pulchrum
Blume sebagai berikut:
 () minyak atsiri dari dalam daun ke dalam pembawa (air).
Rendemen minyak = 100%
() Selain itu pemilihan metode penyulingan yang baik juga
= 1/6350 x 100% akan mempengaruhi kualitas senyawa yang terkandung di
= 0,0153 % v/b dalam minyak atsiri.
2. Identifikasi Senyawa dalam Minyak Atsiri
Identifikasi kandungan senyawa di dalam minyak
atsiri daun P. Pulchrum menggunakan kromatografi gas
yang ditandem menggunakan spektroskopi massa. Analisis
kromatografi gas menggunakan suhu oven kolom sampai
degan 60oC-290oC dan suhu injeksi 280oC. Untuk
spektroskopi massa, penentuan massa per muatan elektron
Rt:1,380 Rt:1,451
(m/z) dimulai dari 35,00 m/z sampai dengan 500,00 m/z.
Gambar 1. Hasil destilasi minyak atsiri Hasil kromatogram dari kromatogafi gas terlihat
Berdasarkan hasil presentase rumus kadar minyak minyak atsiri memiliki 8 kandungan senyawa yang
Rt:1,720minyak
atsiri v/b 100 % diatas, diketahui bahwa kandungan ditunjukan terbentuknya 8 puncak. Masing-masing puncak
atsiri di dalam daun P. pulchrum Blume sangat rendah. Hal mewakili 1 senyawa dan setiap puncak memiliki area luas
ini dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor salah satunya puncak yang dapat menggambarkan konsentrasi senyawa
karena lambatnya laju difusi dari minyak atsiri dari jaringan
Rt:1,907 dalam minyak atsiri. Hasil kromatogram (KG-MS) dapat
daun ke dalam air. Selain itu sampel yang digunakan juga
tidak memiliki bau tajam, ini mengindikasikan bahwa dilihat pada Gambar 2 dan Tabel 2.
sampel yang diuji memiliki sedikit kandungan minyak atsiri.
Rt:2,159 Rt:17,805
Pemiihan metode juga dapat mempengaruhi laju difusi
Rt:24.090

Rt:1,380 Rt:1,451
Rt:1,720
Rt:1,907

Rt:17,805 Rt:24.090
Rt:2,159

Gambar 2. Kromatogram minyak atsiri daun P.pulchrum Blume

Tabel 2.Data Komponen Minyak Atsiri Daun Polygonum pulchrum Blume
Waktu % Indeks
No Senyawa Dugaan Fragmentasi
Retensi area Kemiripan
1 1.380 0.20Etanol 96 45, 42
2 1.451 2.56Asam asetat, metil ester 98 41, 43, 59, 74
3 1.591 95.97Asam asetat, etil ester 95 43, 61, 70,89
4 1.720 0.01Asam asetat, 1-metiletil 74 41, 43, 61, 87, 106
ester
5 1.907 0.14 Asam propanoik, etil 93 45, 57, 74,102
ester
6 2.159 0.05 Asam asetat, 1- 89 43, 56, 73, 87, 101
metilpropil ester
7 17,805 0,29 2-pentadecanone, 90 41, 43, 58, 71, 85, 109, 124, 147,
6,10,14-trimetil 165, 250
8 24.090 0.79 hexanedionic acid, 98 41, 55, 57, 70, 84, 111, 129, 147,
bis(2-etilhexil) 241, 259
Di dalam detektor kromatografi gas setelah melihat base peaks dan membandingkannya menggunakan
pemisahaan senyawa diubah menjadi kromatogram seperti spektra referensi yang tersedia dalam komputer. Spektra
Gambar 5, senyawa volatil mengalami fragmentasi dalam referensi dapat dijadikan acuan struktur senyawa jika
spektroskopi massa. Dari peroses ini kemudian dihasilkan memiliki nilai indeks kemiripan (SI)>90. Terdapat 8 spektra
spektra dengan sumbu x adalah m/z dan sumbu y adalah dari analisis spektroskopi massa terhadap muatan elektron di
intesitas. Dari spektra yang dihasilkan dapat diketahui dalam seyawa minyak atsiri.
senyawa yang terkandung di dalam minyak atsiri dengan
 Gambar 3. Spektra senyawa puncak pertama
Senyawa puncak pertama pada waktu retensi 1,380 45 yang menunjukan senyawa dengan berat molekul 46
menit diperediksikan mirip dengan struktur senyawa etanol gram/mol. Perkiraan fragmen senyawa pada puncak pertama
dengan nilai indeks kemiripan (SI) 96 dengan dasar puncak dapat dilihat pada Gambar 3.

Gambar 4. Spektra senyawa puncak kedua

Senyawa puncak kedua pada waktu retensi 1,450 berat molekul 74 gram/mol. Perkiraan fragmen senyawa
menit diperediksikan adalah senyawa metil asetat memiliki pada puncak kedua dapat dilihat pada gambar 4.
nilai indeks kemiripan (SI) 98 dan dasar puncak 43 dengan

Gambar 5. Spektra senyawa puncak ketiga

Senyawa puncak ketiga pada waktu retensi 1,450 berat molekul 89 gram/mol. Perkiraan fragmen senyawa
menit diperediksikan adalah senyawa etil asetat memiliki pada puncak ini dapat dilihat pada Gambar 5.
nilai indeks kemiripan (SI) 95 dan dasar puncak 43 dengan

Gambar 6. Spektra senyawa puncak keempat

Senyawa puncak keempat pada waktu retensi 1,720
menit diperediksikan adalah senyawa etil asetat, yang
memiliki nilai indeks kemiripan spektra 74 dengan dasar
puncak 43 dan berat molekul 106 gram/mol. Rendahnya
nilai indeks kemiripan yang dimiliki spektra senyawa ini
terhadap spektra referensinya maka dapat diindikasikan
bahwa senyawa tersebut tidak sama seperti senyawa
referensi dan perl u dikaji ulang lebih mendalam. Perkiraan
fragmen senyawa pada puncak ini dapat dilihat pada
Gambar 6.
 Gambar 7. Spektra senyawa puncak kelima
Senyawa puncak kelima pada waktu retensi 1,905 puncak 59 dengan berat molekul 102 gram/mol. Perkiraan
menit diperediksikan adalah senyawa propanoic acid, ethyl fragmen senyawa pada puncak ini dapat dilihat pada
ester memiliki nilai indeks kemiripan (SI) 93 dan dasar Gambar 7.

Gambar 8. Spektra senyawa puncak keenam

Senyawa puncak keenam yang terdapat pada waktu
retensi 2,160 menit sama seperti pada senyawa puncak 6
yang memiliki indeks kemiripan di bawah 90. Senyawa
puncak ini diperediksikan adalah senyawa asam asetat, 1-
metilpropil ester, yang memiliki nilai indeks kemiripan
spektra 89 dengan dasar puncak 43 dan berat molekul 116
gram/mol. Rendahnya nilai indeks kemiripan yang dimiliki
spektra senyawa ini sehingga perlu dikaji ulang lebih
mendalam seperti senyawa puncak 4. Perkiraan fragmen
senyawa pada puncak ini dapat dilihat pada Gambar 8.

Gambar 9. Spektra senyawa puncak ketujuh

Senyawa puncak ketujuh adalah senyawa pertama kemiripan (SI) 90 dan dasar puncak 43 dengan berat
yang memiliki waktu retensi di atas 10 menit. Waktu retensi molekul 268 gram/mol. Perkiraan struktur senyawa pada
senyawa ini 17,805 menit diperediksikan adalah senyawa 2- puncak ini dapat dilihat pada Gambar 9.
Pentadecanone, 6,10,14-trimethyl. memiliki nilai indeks

Gambar 10. Spektra senyawa puncak kedelapan

Senyawa puncak kedelapan adalah senyawa pertama
yang memiliki waktu retensi 24,090 menit diperediksikan
adalah senyawa hexanadioic acid, bis(2-ethylhexyl) ester.
Memiliki nilai indeks kemiripan (SI) 98 dan dasar puncak
129 dengan berat molekul 370 gram/mol. Perkiraan struktur
senyawa pada puncak ini dapat dilihat pada Gambar 10.
Hasil pembacaan fragmen menggambarkan senyawa-
senyawa yang terkandung didalam P. Pulchrum didominasi
dengan golongan asam asetat sampai dengan 96%.
Sebelumnya pernah dilakukan analisis minyak atsir dari
spesies P. Hydropiper dan terdapat golongan asam asetet
sampai dengan 76 %. Golongan etil asetat memiliki gugus
ester yang dapat menimbulkan bau yang tajam, gugus ester
juga banyak ditemukan didalam minyak atsiri. Golongan
asam asetat juga memiliki ciri pada spektranya dengan
puncak dominan (base peak) pada 43 m/z.
3. Uji Antibakteri
Minyak atsiri dilakukan pengujian aktivitas
biologisnya terhadap media bakteri E. coli ATCC 35218, S.
aureus ATCC 25923 dan S. typhi YCTC untuk melihat
potensi yang dimiliki minyak atsiri sebagai antibakteri.
 Kriteria penetapan aktivitas antibakteri yaitu
antibakteri aktif dan sangat aktif (zona hambatan > 11 mm),
aktif sedang (zona hambatan 6-11 mm), dan tidak aktif
(zona hambatan < 6mm) (Ela dkk., 1996). Diameter daerah
hambat yang terbentuk dari uji antibakteri diukur dan
(a) (b)
Gambar 11. Hasil Uji aktivitas antibakteri (a) E. coli (b) S. thpyi (c) S. aureus
Tabel 3. Hasil pengukuran diameter daerah hambat minyak atsiri
Diameter Zona Hambat (mm)
Cakram Uji
E. coli S. thypi
Minyak atsiri 0 0
Kloramfenikol 20 20
Etil Asetat 0 0
Pengujian minyak atsiri pada ketiga bakteri uji
dengan metode difusi cakaram tidak memiliki aktivitas
antibakteri, hal ini dapat disebabkan karena banyaknya
kandungan senyawa di dalam minyak atsiri. seperti yang
telah diketahui salah satu sifat dari bahan alam yang belum
diisolasi menjadi senyawa tunggal adalah saling
berkompetisi dalam memberikan aktivitas.
Berdasarkan hasil identifikasi kandungan senyawa
minyak atsiri yang telah dilakukan, diketahui pada puncak 7
dan 8 senyawa yang diperediksi terkandung di dalam
minyak atsiri daun Polygonum pulchrum Blume yaitu 2-
Pentadecanone, 6,10,14-trimethyl- dan Hexanedioic acid,
bis(2-ethylhexyl) es sebelumnya telah dianalisis dan
diujikan terhadap media biakan bakteri. Dilaporkan oleh
Yayli dkk. (2006) minyak atsiri dari Minuartia meyeri aktif
terhadap bakteri Gram positif dan Gram negatif dan setelah
dianalisis mengandung senyawa 2-Pentadecanone, 6,10,14-
trimethyl-. Kemudian pada Shobanna dkk. pada tahun
(2009) menguji aktivitas dari bawang putih varietas
(Ophioscordon and Sativum) yang kemudian dianalisis
menggunakan kromatografi gas dan terdapat senyawa
Hexanedioic acid, bis(2-ethylhexyl) es, ekstrak ini juga aktif
sebagai antibakteri.
Dilihat dari penelitian sebelumnya, bahwa minyak
atsiri yang dihasilkan dari daun P. pulchrum Blume
memiliki senyawa yang kemungkinan dapat aktif sebagai
antibakteri, tetapi dari penelitian ini tidak aktif. Hasil ini
disebabkan kemungkinan konsentrasinya yang begitu kecil.
Selain itu sifat dari metabolit sekunder yang dapat saling
menghambat aktifitas kerjanya dapat juga mempengaruhi
kerja dari senyawa puncak 7 dan senyawa puncak 8.
4. Uji Antioksidan
Pengujian antioksidan dilakukan menggunakan
metode DPPH, minyak atsiri direaksikan dengan radikal
bebas 1,1-Difenil 2-Pikrihidrazil. Radikal bebas DPPH
dibandingkan dengan kloramfenikol sebagai antibakteri
pembanding. Hasil pengujian antibakteri dapat dilihat pada
Gambar 11. sedangkan hasil pengukuran diameter DDH
pada uji antibakteri dapat dilihat pada Tabel 3.
(c)
Keterangan
S. Aureus
0 Tidak Aktif
18 Aktif
0 Tidak Aktif
memiliki elektron yang tidak berpasangan sehingga dapat
memberikan serapan yang kuat pada panjang gelombang
517 nm. Hal ini juga yang menyebabkan penampakan warna
ungu pada DPPH. Perubahan warna dan penurunan
absorbansi pada DPPH dapat terjadi saat antioksidan
mendonorkan elektronnya.
Pengujian ini ditujukan untuk melihat potensi dari
minyak atsiri mendonorkan elektron terhadap radikal bebas.
Analisis penentuan kemampuan minyak atsiri sebagai
antioksidan dilakukan secara kuantitatif. Analisis
pendahuluan kualitatif tidak dilakukan pada penelitian ini
dikarenakan sifat minyak atsiri yang mudah menguap.
Parameter yang dihasilkan dari analisis kuantitatif
antioksidan ini adalah nilai dari konsentrasi penghambatan
minyak atsiri terhadap radikal bebas (IC50). Nilai tersebut
adalah jumlah minyak atsiri yang dapat menyebabkan 50%
radikal bebas kehilangan karakternya atau tereduksi dengan
ditandai berubahnya warna ungu pada radikal DPPH dan
menurunya nilai absorbansi. Semakin besar konsentrasi
antioksidan yang ditambahkan nilai absorbansi akan
semakin menurun, sehingga menunjukan aktivitas
antioksidannya akan meningkat. Akan tetapi, bila
penambahan antioksidan yang berlebih, maka aktivitas
antioksidan akan berubah mejadi aktivitas prooksidan
karena dapat mempengaruhi laju oksidasi.
Aktivitas antioksidan dinyatakan dalam persen
inhibisi sampel terhadap radikal DPPH. Persen inhibisi ini
didapatkan dari perbedaan serapan antara absorban DPPH
dalam metanol dengan absorban sampel. Besarnya aktivitas
antioksidan ditandai dengan nilai IC50, yaitu konsentrasi
larutan sampel yang dibutuhkan untuk menghambat 50%
radikal bebas DPPH (Andayani dkk., 2008). Semakin kecil
nilai IC50 senyawa, maka semakin besar kemampuan
senyawa tersebut untuk menangkal radikal. Kurva dapat
dilihat pada Gambar 13.
 12.000

10.000
y = 0,657x + 18,254
8.000 R = 0,938

% Inhibisi
6.000

4.000

2.000

0.000
0 5 10 15 20 25
-2.000

Kosentrasi Minyak Atsiri (ppm)

Gambar 12. Hubungan konsentrasi minyak atsiri terhadap persen inhibisi

Persamaan garis yang didapatkan dari kurva antara
persen inhibisi dan konsentrasi minyak atsiri digunakan
untuk menentukan nilai IC50 dari minyak atsiri sebagai
antioksidan. Minyak atsiri daun Polygoum pulchrum Blume
memiliki nilai IC50 48,3196 ppm(l/L). Hal ini menunjukan
bahwasanaya dengan 47,556097 ppm minyak atsiri daun
Polygonum pulchrum Blume dapat mereduksi radikal bebas
sebanyak 50%.
Untuk melihat perbandingan kemampuan dari
minyak atsiri sebagai antioksidan maka diperlukan kontrol
positif yaitu senyawa yang telah umum digunakan sebagai
antioksidan. Selain itu kontrol positif juga bermanfaat untuk
melihat keberhasilan dan ketepatan dari metode pengujian
aktivitas yang dilakukan.

60
50
% inhibisi

40 y = 6.3168x + 25.396
30
20
10
0
0 1 2 3 4 5
konsentrasi Vitamin C (g/ml)

Gambar 13. Hubungan konsentrasi Vitamin C terhadap persen inhibisi

Vitamin C sebagai pembanding memiliki nilai IC50 2. Pengujian aktivitas antibakteri menunjukkanmiyak atsiri
3,90186 g/mL sehingga lebih kuat kemampuannya untuk tidak aktif terhadap E. coli, S. aureus dan S. typhi.
mereduksi radikal bebas dibanding minyak atsiri daun P. 3. Pengujian aktivitas antioksidan menunjukkanminyak
pulchrum Blume. Semakin kecil nilai IC50 maka semakin atsiri memiliki aktivitas antioksidan sangat tinggi dengan
besar kemampuan senyawa tersebut dalam menghambat IC50 48,3196 ppm(l/L).
radikal.Nilai IC50 vitamin C lebih kecil karena vitamin C DAFTAR PUSTAKA
merupakan senyawa murni, dibandingkan dengan minyak
atsiri yang masih terdiri dari campuran beberapa senyawa. Andayani R., Maimunah, Yovita L., 2008, Penentuan
Vitamin C dapat menstabilkan DPPH dengan cara Aktivitas Antioksidan, Kadar Fenolat Total dan
mendonorkan atom hidrogen-nya yang terdapat pada gugus Likopen pada Buah Tomat (Solanum
OH kepada DPPH. Setelah mendonorkan atom hidrogen- lycopersicum L), Jurnal Sains dan Teknologi
nya maka vitamin C akan teroksidasi menjadi asam Farmasi, 13(1)
dehidroaskorbat.
Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, 2013, Riset
5. Simpulan Kesehatan Dasar 2013, Kementerian Kesehatan
RI. Jakarta.
Kesimpulan dari penelitian ini adalah:
1. Senyawa yang terkandung di dalam minyak atsiri daunP. Ban, Suk-Ho., Young-Ran Kwon, Santosh Pandit, Young-
pulchrum Blume terkandung senyawa (Etanol), (Asam Soo Lee, Ho-Keun Yi, Jae-Gyu Jeon., 2010,
asetat, metil ester), (Asam asetat, etil ester), (Asam Effects of a bio-assay guided fraction from
asetat, 1-metiletil ester), (Asam propanoik, etil ester), Polygonum cuspidatum root on the viability, acid
(Asam asetat, 1-metilpropil ester), (2-pentadecanone, production and glucosyltranferase of mutans
6,10,14-trimetil) dan (hexanedionic acid, bis(2- streptococci, Fitoterapia,81(1), 3034.
etilhexil)).
Chairul dan Sulianti S. B., 2002, Pendayagunaan sumber
daya nabati (tumbuhan) dalam pelayanan
kesehatan masyarakat menuju Indonesia sehat
2010, Berita IPTEK,43 (1)
Chow S.T., Chaw W.W. dan Chung Y.C., 2003,
Antioxidant activity and safety of 50% ethanolic
red bean extract (Phaseolus raditus L, Var
Aurea), Journal of Food Science, 68(1)
Ela, M. A., N. S. El-Shaer, and N. B. Ghanem., 1996.
Antimicrobial evaluation and chromatographic
analysis of some essential and fixed oils.
Pharmazie. 51.
Fan, Peihong., Anne-Emmanuelle Hay, Andrew Marston,
Hongxiang Lou dan Kurt Hostettmann., 2009,
Chemical variability of the invasive neophytes
Polygonum cuspidatum Sieb. and Zucc. and
Polygonum sachalinensis F. Schmidt ex Maxim,
Biochemical Systematics and Ecology37(1)
Johnson, T., 1998, CRC Ethnobotany Desk Reference, CRC
Press, California.
Khunaifi, M., 2010, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun
Binahong (Anredera cordifolia (Ten) Steenis)
Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan
Pseudomonas aeruginosa, Skripsi, Fakultas Sains
dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Maulana
Malik Ibrahim, Malang.
Maheswaran R., dan Savarimuthu I., 2013, Bioefficacy of
essential oil from Polygonum hydropiper L.
against mosquitoes, Anopheles stephensi and
Culex quinquefasciatus, Ecotoxicology and
Environmental Safety 97 26(31)
Pelczar, M. J., dan Chan. E. C., 1986. Dasar-dasar
Mikrobiologi, Jilid I. Penerbit Universitas
Indonesia, Jakarta.
Penna, C., Marino S., Vivot brasiliensis E., Cruanes M.C.,
J.deD.Munoz, J. Cruanes, Ferraro G., Gutkind
G., dan Martino V., 2001, Antimicrobial activity
of Argentine plants used in the treatment of
infectious diseases. Isolation of active compounds
from Sebastiania, Journal of Ethnopharmacology
(77)
Ruslin dan Sahidin, 2008, Identifikasi dan Determinasi
Tanaman Obat Tradisional Masyarakat Sulawesi
Tenggara pada Arboretum Prof. Mahmud
Hamundu, Majalah Farmasi Indonesia,
19(2),101-107
Sastrohamidjojo, H., 2004, Kimia Minyak Atsiri, Gadjah
Mada University Press,Yogyakarta
Shobana, S.,V.G. Vidhya and M. Ramya, 2009,
Antibacterial Activity of Garlic Varieties
(Ophioscordon and Sativum) on Enteric
Pathogens, Current Research Journal of
Biological Sciences,1(3)
Yayli N., Canan G., Osman ., Ahmet Y., Serdar ., Kamil
C., Salih TERZ., 2006, Composition and
Antimicrobial Activities of Volatile Components
of Minuartia meyeri, Turkey Journal Chemistry
Tubitak, 30