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Las enzimas son molculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones qumicas,
siempre que sean termodinmicamente posibles: Una enzima hace que una reaccin
qumica que es energticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja
transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, las
enzimas actan sobre unas molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten
en molculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las clulas
necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones
mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimticas. Las enzimas son un
ejemplo de que no slo es importante lo que comemos sino que adems es indispensable
una buena capacidad de absorber esos nutrientes.
OBJETIVOS
MARCO TERICO
Los pasos para transformar el almidn en jarabe glucosado son dos: licuefaccin, y
sacarificacin. Durante el proceso de licuefaccin se obtienen malto dextrinas empleando
la enzima alfa amilasa. Estas malto dextrinas contienen diferentes oligosacridos y
dextrinas y es ligeramente dulce. Luego se puede continuar la conversin a glucosa
usando la enzima amiloglucosidasa conocida tambin como glucoamilasa. Esta ltima
etapa se conoce como sacarificacin, donde la amiloglucosidasa puede transformar las
malto dextrinas casi completamente en glucosa; en la prctica se produce tambin un
poco de maltosa (Cruz, 2012).
Prctica de Laboratorio 2- Bioqumica
MATERIALES
Almidn soluble.
DNS
Lugol
Soluciones Buffer 0.1 M
Citrato con pH:3.5
Fosfato con pH:6.3
Fosfato con pH:9
PROCEDIMIENTO
Nmero de tubo pH
1 3,5
2 6,3
3 9
4 3,5
5 6,3
6 9
Llevar los tubos de ensayo por 3 minutos a bao de 90oC para temperar.
Agregar 0.5 mL de la enzima diluida a los tubos a los 1,2 y 3,
Agregar 0.5 mL agua destilada a los tubos a los 4,5 y 6
Agitar y dejar los 6 tubos en el bao de 90oC por 30 minutos.
Agregar 0.5ml de NaOH 2M a todos los tubos, para parar la reaccin.
Tomar 0,5 mL de cada uno de los tubos y agregar 30L de lugol.
Tomar 1 mL de cada uno de los tubos y agregarlos a un tubo seco y limpio.
Prctica de Laboratorio 2- Bioqumica
Nmero de tubo C
1 25
2 60
3 90
4 25
5 60
6 90
Nota: La actividad enzimtica ser reportada como mol de azucares formados por litro
de solucin por minuto por cantidad de enzima.