GLUCOLISIS AEROBICA

CICLO DE KREBS

DR. CONRAD ORTIZ

ALFARO
El alquimista en busca de la piedra filosofal Joseph Wright
 Objetivos de aprendizaje
Conocer las reacciones que intervienen en la
gluclisis.
Analizar y comprender la importancia de la
gluclisis.
Interpretar el papel de los carbohidratos en la
vida de los seres vivos.
Otto Warburg Hans von Euler- Gustav Embden Otto Meyerhof
Chelpin

Glucolisis en musculo
Glucolisis en levadura

Arthur
William
Harden
Young
 GLUCOSA

GLUCOLISIS
(10 REACCIONES SUCESIVAS)

PIRUVATO

CONDICIONES
AEROBICAS

2 ACETIL-CoA

Ciclo del
acido ctrico

4CO2 + 4 H2O

Clulas animales, vegetales y muchos

microorganismos en condiciones aerobicas
 GLUCOSA

GLUCOLISIS

2 ACIDO PIRUVICO
Tener en cuenta
En hemates es fundamental para la sntesis de ATP.
Ellos no tienen mitocondrias por lo que no tienen ciclo
de Krebs.
Reaccin de inversin se utilizan 2 ATP y 2 NAD+.
Reaccin de produccin se obtienen 4 ATP y 2
NADH.
Ganancia neta: 2ATP

Glucosa+ 2NAD+ + 2ADP + 2Pi 2 piruvatos +2NADH+2ATP+ 2H2O+ 2H+

 Que ocurre energticamente???

Glucosa+ 2NAD+ 2 piruvatos +2NADH+ 2H+

Energia exergonica: -146 kJ/mol

2ADP + 2Pi 2ATP+ 2H2O

Energia Endergonica: 61 kJ/mol

Glucosa+ 2NAD+ + 2ADP + 2Pi 2 piruvatos +2NADH+2ATP+ 2H2O+ 4H+

Energa Liberada: - 85 kJ/mol

 Importancia de Intermedios
fosforilados formados

La clula no gasta La fijacin de los

energa para su Conservan energa grupos fosfatos a los
retencin: No hay metablica despus de sitios activos de las
transportadores la rotura del ATP: enzimas disminuyen
1,3 bifosfoglicerato y la energa de
extracelulares para
activacin y aumenta
estos intermediarios. fosfoenolpiruvato. la especificidad de las
reacciones. (Casi
todas las enzimas
requieren Mg+2)
 GLUCOLISIS
TRANSFORMACIONES
QUIMICAS DE INTERES

1- La degradacin del esqueleto carbonado de la

glucosa que da piruvato.
2- La fosforilacin de ADP a ATP por compuestos
fosfatos de alta energa formados durante la
misma gluclisis.
3- La transferencia de tomos de hidrogeno o
electrones al NAD formando NADH.
 Primera reaccin La Hexoquinasa es una transferasa.
Ataque
El complejo MgATP es el sustrato.
nucleofilico El ATP solo, es inhibidor.
En el humano hay 4 Hexoquinasas.
En hepatocitos se denomina glucoquinasa
(isoenzima Hexoquinasa IV).

(Otros tejidos, musculo,

cerebro)
Km (0.1 mM)
Diferencia
funcional de
Hexoquinasa
(En higado, celulas
extrahepatica Km (10 mM) beta pancreaticas)
y la
glucoquinasa
 REGULACION DE HEXOQUINASA IV
1.- Hexoquinasa I, II y III musculares, inhibida por glucosa-6-P.
2.- Hexoquiasa IV heptica no es inhibida por G-6-P
Consecuencias y regulacin:
- Despus de un incremento de glucosa sangunea (mas de 10 mM) la actividad de la glucoquinasa
se incrementa formando G-6-P.
- En condiciones de glucosa sangunea baja (menor al Km de glucoquinasa) la glucosa formada por
gluconeognesis abandona la clula antes de ser atrapada por fosforilacin, en este estado la
Hexoquinasa IV es inhibida por una protena reguladora favorecida por el efector alosterico
fructosa-6-fosfato, anclndola en el ncleo.
- En glucosa sangunea elevada la glucosa entra al hepatocito por los GLUT2 y compite con la
fructosa-6-fosfato favoreciendo la disociacin de la protena reguladora de la hexoquinasa.

Niveles bajos de
glucosa
 Segunda reaccin

De Aldosa a cetosa.
Intermediario Enediol
Tambien demoninada
Fosfoglucosa isomerasa

Glucogeno Via de la
genesis pentosas

Tercera reaccin

PFK-1 es regulada
alostericamente.
Aumenta su actividad
cuando ATP disminuye.
Es inhibida por
incremento de ATP.
F-1,6-bP es solo de la
glucolisis.
Regulacin de PFK-1

Citrato sirve como seal intracelular

de que la clula esta alcanzando sus
niveles necesarios de metabolismo
productor de energa de al oxidar
grasas y protenas.

Fructosa 2,6 bifosfato es

fundamental para la actividad
enzimatica.

Considerado sensor de pH
intracelular.
pH de actividad 7.0-7.4.

Se encuentra en dos estados T

(tenso) y R (relajado).
Cuarta reaccin La aldolasa es de tipo I.
Se forma una base de schiff
intermedia.

Quinta reaccin

Interconversion de
triosas fosfato.
Enzima catalticamente
perfecta
Sexta reaccin
Reaccin de alta conservacin de energa.
El grupo aldehdo del gliceraldehido-3-
fosfato es oxidado a un anhdrido de acido
carboxlico con acido fosfrico (acil
fosfato).
G-3-P se une covalentemente a la
(GAPDH) deshidrogenas durante la reaccin.
El aldehdo de G-3-P reacciona con el SH
de un residuo Cys del sitio activo.

La cantidad de NAD+ en una clula (<10-5M)

es inferior a la cantidad de glucosa
metabolizada por ello el reciclaje de NADH,
para producir NAD+, es fundamental para la
viabilidad de la glucolisis.

El Mercurio inhibe
irreversiblemente la
enzima.

covalente
 RECICLAJE DEL NADH

1.- GAPDH y lactato

deshidrogenasa

GAPDH
2.- Lanzadera Malato-Aspartato

Fosforilacin oxidativa

AST: transaminasa t t
MDH: Malato deshidrogenasa
SLC25A: Transportadores
3.- Lanzadera Glicerol fosfato
Sptima reaccin

Transferencia del grupo

fosforilo (de alta energia)
desde el 1,3-BPG al ADP.
La enzima requiere el
complejo Mg+2-ADP
Obtencin de ATP.

Los pasos 6 y 7 de la gluclisis nos muestran un caso de acoplamiento de reacciones,

donde una reaccin energticamente desfavorable (paso 6) es seguida por una reaccin
muy favorable energticamente (paso 7) que induce la primera reaccin.

Como la clula se mantiene en equilibrio, el descenso en las reservas de 1,3

bifosfoglicerato empuja a la enzima GAP deshidrogenasa a aumentar sus reservas.

La cuantificacin de la energa libre para el acople de ambas reacciones es de alrededor

de -12 kJ/mol.
sta manera de obtener ATP sin la necesidad de O2 se denomina fosforilacin a nivel de
sustrato que es diferente a la fosforilacin ligada a la respiracin.
Octava reaccin

Se forma el producto intermediario 2,3-BPG, que es constantemente regenerado.

2,3 BPG se une a la desoxihemoglobina disminuyendo la afinidad de la hemoglobina por el
oxigeno (Derivacin de Rapoport-Luebering).
Por esta razn en eritrocitos se requiere mucho mas 2,3BPG (5mM) que en otras clulas.
Novena reaccin

Implica un intermediario enolico estabilizado por Mg+2.

 Transferencia del grupo fosforilo
Decima reaccin desde el fosfoenolpiruvato al ADP.
Requiere K+ y Mg+2
Fosforilacion a nivel de sustrato.
El piruvato aparece en forma enol y
luego se tautomeriza en su forma ceto.

REGULACION DE PIRUVATO KINASA

 REGULACIN DE PIRUVATO KINASA
EN DIVERSOS TEJIDOS

L: Isoenzima heptica
M: Isoenzima Muscular
PKA: proteinkinasa dependiente de AMPciclico
REGULACION DE LA GLUCOLISIS
DURANTE EL EJERCICIO
 GLUCOSA

GLUCOLISIS

2 ACIDO PIRUVICO
Tener en cuenta
La enzima fosfofructoquinasa1 es la molcula clave de regulacin glucolitica el
cual es inhibida por altos niveles de ATP.
La reaccin que produce fructosa6fosfato es fcilmente reversible hacia el
aumento de la formacin de glucosa6fosfato.
Cuando las clulas tienen grandes fuentes de ATP, el metabolismo de la glucosa
es inhibida por la inactivacin de las enzimas hexoquinasa y fosfofructoquinasa.

El fosfoglicerato1,3bifosfato es el primer compuesto de alta energa producida

en la gluclisis.

El fosfoenolpiruvato es el segundo compuesto de alta energa producida en la

gluclisis. Ambos son necesarios para la conversin de ADP en ATP.

El NAD+ convertido en NADH sirve como donadores de electrones para otras

reacciones de oxidoreduccion dentro de las clulas.
 Determinacin enzimtica de
glucosa sangunea
Glucosa oxidasa
Glucosa + O2 --------------- Glucosa--lactona + H2O2

H2O2 + peroxidasa+comp.- H2O+ Comp. Coloreado

 (Musculo
y Rin)

(Ketohexokinasa)
(Hgado)

Rutas alimentadoras
de la Glucolisis
 GALACTOSEMIA
Deficiencia de cualquiera de las 3 enzimas.
Def. de Galactoquinasa aumenta galactosa
en sangre y orina.
Recin nacidos forman cataratas por
depsitos de Galactitol, un metabolito en el
cristalino.
glucolisis Esta patologa es reversible al tener cuidado
en la dieta.
La def. de Transferasa es mas grave poco
crecimiento en nios, anmalias del habla,
deficiencia mental y lesin heptica.
 CICLO DE KREBS
CICLO DE LOS ACIDOS TRICARBOXILICOS
CICLO DEL ACIDO CITRICO

DR. CONRAD ORTIZ

 PIRUVATO

ACETIL-CoA

Ciclo del
acido ctrico

4CO2 + 4 H2O
 PIRUVATO
COMPLEJO ENZIMATICO:
CO2 PIRUVATO DESHIDROGENASA
(Mitocondria)
2 ACETIL-CoA

TIAMINA
RIBOFLAVINA
NIACINA

Ac PANTOTENICO
 MECANISMO DE ACCION DE
PIRUVATO DESHIDROGENASA
Inhibida por + As+3
compuestos
del arsnico o
mercurio

Complejo
Piruvato
deshidroge
nasa

E1: Piruvato deshidrogenasa

E2: Dihidrolipoil transacetilasa
E3: Dihidrolipoil deshidrogenasa.

1. Descarboxilacin del piruvato

2. Transferencia de electrones y
del grupo acetilo desde TPP
hasta E2.
3. Obtencin de AcetilCoa.
4. Transferencia de hidrogenos
al FAD
5. Transferencia de hidrogenos
al NAD+
 REGULACION COVALENTE DE PDH

Exceso de
Acetil CoA y
NADH
+
+

La PDK1 se ha detectada en corazn, islotes pancreticos y msculo esqueltico.

La PDK2 se expresa en corazn, hgado y rin.
La PDK3 se encuentra nicamente en testculos, rin y cerebro.
La PDK4 es muy abundante en corazn, msculo esqueltico, hgado, rin e islotes pancreticos.
(aumentado en ayuno y diabetes).
Beriberi y alcoholismo
(deficiencia de Tiamina)
El Alcohol es un potente inhibidor de la absorcin de
tiamina.

Debera ser utilizado por PDH

Citosol Mitocondria

La encefalopata de Wernicke causa dao cerebral en

tlamo e hipotlamo (Confusin, prdida de coordinacin
muscular o ataxia, temblor en las piernas, movimientos
oculares anormales (nistagmo) visin doble, cada de los
prpados).

La psicosis de Korsakoff resulta del dao a reas del

cerebro involucradas con la memoria (Incapacidad para
formar nuevos recuerdos, prdida de la memoria que
puede ser grave, inventar historias (confabulacin)
alucinaciones.
 CICLO DEL
ACIDO CITRICO

ACETIL-CoA

Ciclo del
acido ctrico

4CO2 + 4 H2O
Sir Hans Adolf Krebs Albert Lehninger

Severo Ochoa
 IMPORTANTE:

El ciclo de Krebs no es solamente la

continuacin del metabolismo de
carbohidratos, es sobre todo una va
central para recuperar energa a partir de
cidos grasos y aminocidos que se
degradan hasta acetil-CoA.
Piruvato cidos grasos

3
Primera reaccin

El CoA liberado se recicla para

participar en la descarboxilacion del
piruvato a cargo del PDH.

Segunda reaccin A partir de cis aconitato se puede

producir a la vez citrato como
isocitrato, pero el consumo rpido de
isocitrato hace que la reaccin sea
en ese sentido.

Aconitasa: claro de luna

Aconitasa
(centro ferrosulfurado)

Tiene, adems, funcin

reguladora, as en
insuficiencia de hierro
puede convertirse en
protena reguladora de la
sntesis de hierro
 Tercera reaccin
Descarboxilacion oxidativa
Hay 2 tipos de enzimas ID las
que requieren NAD+ o las que
requieren NADP+.

Las que requieren NAD estn

en la matriz mitocondrial.
Las que requieren NADP
estn en la matriz
mitocondrial y en el citosol.
Cuarta reaccin
Descarboxilacion oxidativa Quinta reaccin

Sexta reaccin
En eucariotas el succinato se encuentra ligado
fuertemente a la membrana mitocondrial interna
(en bacterias a la membrana plasmtica).
El malonato, un anlogo del succinato, es un
inhibidor competitivo del succinato
deshidrogenasa.
 Octava reaccin

Sptima
reaccin El oxalacetato es eliminado
constantemente, manteniendo la
concentracion intracelular de
oxalacetato extremadamente baja.
 Tener en cuenta
La primera reaccin es la del acetilCoA
con el oxalacetato para formar citrato.
La coenzima A forma un puente de alta
energa para aadir un grupo fosfato a
GDP para formar GTP.
El ATP generado se forma de la reaccion
de succinilCoA a succinato.
 Regulacin del ciclo de
krebs

Los niveles incrementados de ADP y AMP sirven como

activadores de los complejos enzimticos:
piruvato deshidrogenasa.
Citrato sintasa.
Isocitrato deshidrogenasa
-cetoglutarato deshidrogenasa
Resultando en un aumento en la produccin de ATP.
Tener en
cuenta

Los
incrementos
de NADH y Reguladores
ATP inhiben del ciclo
los 3
complejos
enzimticos
mencionados
anteriormente
 Fosfofructokinasa-1

Regulacin
del ciclo de
krebs

Inhibicin

Activacin
 Aunque el ciclo genera solo una molcula de ATP
por cada vuelta, su importancia radica en la
GLUCOSA formacin de compuestos que dan lugar a un
flujo de electrones a travs de la cadena
respiratoria que posibilita la formacin de
muchas molculas de ATP por fosforilacin
oxidativa.
2 PIRUVATO
Por cada molcula de Ac Piruvico

3CO2 = 2CO2 producido por el ciclo de krebs

+ 1CO2 producido en la transformacin del
Acido piruvico.
2 ACETIL-CoA
2H2O = 1 H2O producida en la gluclisis +
1H2O producida en el ciclo de krebs

El rendimiento de un ciclo : 1 GTP, 3 NADH,

6CO2 + 4 H2O
1 FADH2.
 BIBLIOGRAFIA
Voet, donald - Voet, judith. Fundamentos de
bioqumica. la vida a nivel molecular. Ed
Panamericana. 2da ed. 2007.
Alberts, B. Jonson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts,
K., Walter, W. Molecular Biology of the Cell. 4ta
Edicin. Garland Science, Taylor & Francis Group,
Londres.