EMPLEO DE BIOCIDAS DE ORIGEN NATURAL

1. DEFINICIONES Y CLASIFICACIONES
En un sentido general, biocida es toda sustancia capaz de producir un
dao y/o la muerte a un organismo. El establecimiento de marcos
regulatorios para su uso y comercializacin ha llevado a la elaboracin
de definiciones y clasificaciones ms precisas y sistemticas, como por
ejemplo:
Agentes biocidas son aquellas sustancias y/o preparaciones que
contienen una o ms sustancias activas, preparadas en la forma en que
son suministradas al usuario, y que apuntan a destruir, repeler, volver
inofensivo, prevenir la accin o ejercer algn efecto de control sobre
cualquier organismo perjudicial, por medios qumicos o biolgicos.

La naturaleza es prdiga en este tipo de compuestos que, con diversos

grados de actividad, constituyen generalmente mecanismos de
proteccin y defensa de animales y plantas frente a otros organismos
invasores o competidores. Desde tiempos antiguos se observ, por
ejemplo, que ciertas plantas no crecan en la proximidad de otras, o que
los insectos no se acercaban a ellas, o que la ingestin de ciertas
especies vegetales poda producir diversos efectos nocivos. Y, de una
manera intuitiva y tradicional, se comenz a hacer uso de ellas y de su
potencial txico, primero en su forma natural hojas, races, frutos y
luego, con el desarrollo de tecnologas ms avanzadas, extrayendo y
concentrando sus principios activos. La mayor complejidad de la
organizacin social llev al surgimiento de individuos especializados en
el conocimiento y administracin de dichas plantas y extractos
generalmente en un marco religioso o mgico. En la civilizacin
moderna, podra decirse que dicha funcin fue heredada por los
naturalistas, botnicos, farmacuticos, qumicos, mdicos, cargndose
de un bagaje cientfico que permiti conocer ms sistemticamente la
naturaleza y mecanismos de accin de dichas sustancias, y por lo tanto
un uso ms racional, sin hablar de la gran posibilidad abierta en el siglo
XX de sintetizar compuestos activos ms efectivos que los naturales.
Pero en sociedades ms tradicionales, o menos influenciadas por la vida
moderna, es frecuente ver todava un uso de dichas plantas y sustancias
basado fundamentalmente en la observacin y la transmisin
intergeneracional. De acuerdo al criterio adoptado, diferentes
clasificaciones de las sustancias biocidas son posibles, por ejemplo:
Segn el organismo sobre el que actan: antimicrobianos
(bactericidas, fungicidas), insecticidas, herbicidas, nematicidas,
rodenticidas, etc.
Segn su naturaleza qumica: organofosforados, organoclorados,
terpenos, alcaloides, fenlicos, sales inorgnicas, etc.
Segn su selectividad: especficos o de amplio espectro.
Segn su mecanismo de accin: neurotxicos, citotxicos,
desorganizadores de la membrana celular, inhibidores
enzimticos, etc.
Segn su origen: naturales o sintticos; inorgnicos, botnicos o
microbianos, etc.

No existe un biocida ideal, sino biocidas ms o menos adecuados a

cada caso particular. Sin embargo, hay algunas caractersticas
deseables que debera reunir un buen biocida:

a) Ser efectivo a baja concentracin, tanto por motivos econmicos

como de salud.
b) Tener persistencia suficiente, es decir, una accin duradera en el
tiempo.
c) Tener baja toxicidad para el ser humano y otros mamferos; d) ser
soluble en agua.
d) Ser compatible y no reactivo con otros compuestos ambientales;
e) Poseer mecanismos de inactivacin rpida y controlable.
2. PLAGUICIDAS
Sustancia o mezcla de sustancias destinadas a prevenir, destruir o
controlar cualquier plaga, incluyendo los vectores de enfermedades
humanas o de los animales, las especies no deseadas de plantas y
animales que causan perjuicios o que interfieren de cualquier forma en
la produccin, elaboracin, almacenamiento, transporte o
comercializacin de alimentos, productos agrcolas (incluyendo no
alimenticios como el algodn, remolacha azucarera y otros), madera o
alimentos para animales o que pueden administrarse a los animales
para combatir insectos, arcnidos u otras plagas. El trmino incluye las
sustancias usadas como reguladoras del crecimiento de las plantas,
defoliantes, desecantes, agentes para reducir la densidad de frutas o
evitar la cada prematura de frutas y las sustancias usadas antes o
despus de las cosechas para proteger a los productos del deterioro
durante el transporte y almacenamiento
Es conocida la cantidad de enfermedades ocasionadas por la
proliferacin de parsitos, en especial insectos y otros artrpodos, que
actan como vectores de microorganismos patgenos. La malaria, el
dengue, el mal de Chagas, la fiebre amarilla, etc. son enfermedades
endmicas en amplias regiones del mundo, incluyendo nuestro pas [3].
Por otra parte, las prdidas econmicas asociadas a los daos
ocasionados por numerosos parsitos a las cosechas y productos
almacenados son tambin significativas, y motivo de preocupacin.
Tales prdidas no slo se limitan a los daos materiales, sino tambin a
la prdida de calidad y por consiguiente, de valor y de destinos posibles
de exportacin. En efecto, algunos mercados prohben el ingreso de
productos agrcolas provenientes de zonas infestadas o les exigen
costosos tratamientos cuarentenarios .
3. BIOPLAGUICIDAS

Dentro de la emergente categora de bioplaguicidas, los compuestos

de origen botnico (fitoqumicos) ocupan un lugar especialmente
destacado, tanto debido a su gran diversidad y abundancia, como al
hecho de haber evolucionado naturalmente como mecanismo de
defensa de numerosas especies vegetales contra predadores, parsitos
y plagas de diversa ndole.

Numerosos extractos de origen vegetal han sido estudiados y postulados

como agentes biocidas, identificndose los principales compuestos
responsables de su actividad, as como los distintos mecanismos de
accin txica . As, por ejemplo, un relevamiento reciente de trabajos
reportados en literatura indica que las tres principales familias de
compuestos responsables de la actividad insecticida de las plantas son:
(a) los terpenos, (b) los alcaloides, (c) los fenoles, como se observa en la
Figura 1.1.

FIGURA 1.1. Frecuencia (%) de tipos de compuestos qumicos en extractos de plantas

con actividad insecticida
 Como puede verse, los terpenos representan ms de la tercera parte de
los compuestos de origen vegetal con actividad frente a insectos y otras
plagas reportados en la literatura, constituyendo una alternativa
prometedora con buenas perspectivas de incorporarse a sistemas
combinados de manejo integrado de plagas, como lo demuestra el
creciente nmero de investigaciones y patentes.
Estos compuestos son extrados de las plantas en forma de mezclas
oleosas denominadas genricamente aceites esenciales. A
continuacin se describirn sus principales caractersticas.

4. ACEITES ESENCIALES
Se denomina aceite esencial al extracto voltil de numerosas plantas,
obtenido tradicionalmente por hidrodestilacin, de carcter oleoso, muy
poco soluble o insoluble en agua, soluble en solventes orgnicos, y de
aroma intenso
Los aceites esenciales son mezclas a la vez complejas y simples. Son
complejas ya que pueden estar constituidas por una elevada cantidad de
compuestos diferentes, pero son simples por cuanto sus componentes
suelen presentar un elevado grado de semejanza qumica. De hecho, la
fraccin principal de los aceites esenciales est constituida por
compuestos terpnicos, a los que se suman en menor proporcin otros
compuestos tales como ceras, pigmentos, cumarinas, flavonoides,
fenlicos, etc.
Su caracterstica principal es su volatilidad que los distingue de los
aceites fijos, es decir, los derivados de cidos grasos, por lo que
tambin se incluye en su definicin a los extractos voltiles obtenidos
por otros mtodos, como extraccin con solventes orgnicos, con fluidos
supercrticos o por prensado directo. El mtodo y las condiciones de
extraccin influyen en la composicin del aceite obtenido, y por lo tanto
en sus caractersticas fisicoqumicas y organolpticas.
Los terpenos constituyen una familia muy diversa y numerosa de
compuestos: actualmente se conocen alrededor de 30.000 molculas
diferentes. El qumico croata Leopold Ruzicka (1887- 1976), quien
trabaj intensamente en el campo de los compuestos terpnicos y su
 biosntesis, demostr que sus estructuras podan interpretarse como
unidades condensadas de isopreno (metil-1,3-butadieno, C5H8), unidas
en disposicin cabeza-cola o colacola [17], segn se muestra en la
Figura 1.2.

FIGURA 1.2.Unidad Estructural de Terpenos

FUNCIONES
Los terpenos son metabolitos secundarios que cumplen mltiples
funciones en las plantas, tales como:
Defensa contra depredadores y microorganismos patgenos
Atraccin de insectos polinizadores
Defensa contra otras plantas (alelopata)
Reserva de metabolitos
Proteccin en procesos de cicatrizacin (resinas)
Regulacin de los procesos de evaporacin de agua
Intermediarios y/o desechos del metabolismo vegetal

De acuerdo a ello, pueden acumularse en distintos rganos de las plantas,

como se muestra en la Tabla 1.1:

TABLA 1.1. Organos de acumulacin de aceites

 El rgano de acumulacin del aceite esencial determina en buena
medida los mtodos de pretratamiento y extraccin ms adecuados. As,
la HIDRODESTILACIN es el mtodo ms conveniente para extraer el
aceite a partir de hojas, races y flores. En el caso de algunas flores
que suelen ser ms sensibles a la temperatura se usa el tradicional
mtodo del enfleurage, que consiste en depositar los ptalos sobre
pelculas de grasa, que absorben en fro los componentes aromticos, y
que luego son recuperados por lavado de la grasa con etanol. Cuando el
aceite se encuentra en frutos o semillas, muchas veces el simple
prensado es suficiente para lograr una buena extraccin (como en el
caso de los aceites de los ctricos, alojados en vesculas ubicadas en la
piel de los frutos). Para una mayor descripcin de los mtodos
tradicionales de obtencin de aceites esenciales, se recomienda la
consulta del ya clsico libro The Essential Oils de Guenther .

ACEITES ESENCIALES DE HIERBAS Y ESPECIAS

Extrado de: Inhibe a: Compuesto activo:

Clavo, tomillo, pimienta, Clostridium Botulinum, Lysreria Timol, aldehdo

organo y canela. monocytogenes. cinmico, eugenol y
carvacol.
Cardamomo Salmonella typhimurium, Fenlicos.
Staphylococcus aereus.
Tomillo. Proteus mirabilis, Listeria 1,8-cienol. (linalol).
monocitogenes, Staphylococcus
aereus.
Organo. Fusariom avenaceum, Paecilomyces Mono y
variotii, Saccharomices cerevisiae. sesquiterpenos, 1,8-
cineolo, xido de
terpineno
espatulenol.
Romero Mycobacterium smegmatis,
Escherichia coli,Candida albucans.
MECANISMO DE ACCIN DE LOS AES FRENTE A LOS
MICROORGANISMOS
Generalmente se reconoce que la accin antimicrobiana depende del
carcter lipoflico o hidroflico del aceite esencial. Teniendo en cuenta la
gran cantidad de los componentes qumicos presentes en los AEs, lo
ms probable es que su actividad antimicrobiana no se puede atribuir a
un solo mecanismo, sino que se da a varios niveles en las clulas
microbianas (Carson et al., 2002). Los aceites fenlicos (fenoles y cidos
fenlicos), se han encontrado como buenos inhibidores de bacterias.
Caractersticas como un anillo aromtico, un grupo hidroxilo u otros
grupos como el tert-butil o el isopropal, alteran la polaridad y la
topografa de la molcula y por lo tanto pueden cambiar la afinidad de la
misma con sitios de unin diferentes en la bacteria. La hidrofobicidad y
descripciones estericas (tamao molecular y forma), tambin tienen
papeles importantes en la actividad antibacteriana (Si et al., 2006). La
prdida de potasio es la primera indicacin de dao en las membranas
de los microorganismos. Esto confirma el hecho de que la disrupcin de
las membranas contribuye al modo de accin de los grupos fenlicos
como el eugenol y el timol, como se observa en la figura 2.6 (Walsh et
al., 2003).
Investigaciones de los efectos de los terpenoides en membranas
bacterianas aisladas sugieren que su actividad esta en funcin de las
propiedades lipoflicas de los constituyentes de los terpenos, la potencia
de sus grupos funcionales y su solubilidad acuosa. Su sitio de accin
aparentemente es la capa fosfolipdica y mediante mecanismos
bioqumicos. Estos procesos incluyen la inhibicin del transporte de
electrones, translocacin protenica, pasos de fosforilizacin y otras
reacciones dependientes de enzimas (Dorman y Deans, 2000). Algunos
componentes de los AEs aparentemente actan a nivel de las protenas
embebidas en la membrana citoplasmtica, enzimas como las ATPasas
estn localizadas en la membrana citoplasmtica y bordeadas por
molculas lipdicas. Hay dos posibles mecanismos en los que participan
las molculas de hidrocarburos cclicos; las molculas de hidrocarburos
lipoflicos pueden acumularse en la capa lipdica y alterar la interaccin
lpido/proteina se puede dar una interaccin directa entre el
componente lipidico y la parte hidrfoba de la protena. Se ha observado
que se estimula la formacin de seudomicelios en ciertas levaduras al
adicionar AEs, lo que puede indicar que los aceites actan a nivel de la
regulacin energtica o en la sntesis de componentes estructurales
(Juven et al., 1994).

a
Tabla I. Antimicrobianos sintticos de accin directa

Antimicrobiano Microorganismos sobre los que acta

cido propinico y propionatos Mohos
cido srbico y sorbatos Mohos
cido benzoico y benzoatos Mohos y levaduras
Parabenos Mohos y levaduras
SO2 y sulfitos Bacterias, mohos y levaduras
Oxido de etileno y de propileno Mohos y levaduras
Diacetato de sodio Mohos
Nisina Bacterias cido lcticas, Clostridia
cido dehidroactico Insectos
Nitrito de sodio Clostridia
Etil-formato Mohos y levaduras
a
Jay (1991)
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE LOS ACEITES ESENCIALES
La actividad antioxidante es expresada como la capacidad de inhibir la
peroxidacin del cido linoleico y atrapar radicales libres. El organo
fresco y seco es un fuerte inhibidor de la peroxidacin del cido linoleco.
La habilidad para atrapar el radical libre DPP (2,2-difenil-1-picrilhidrazil),
puede exceder el 90% en especies de la familia Lamiaceae. Altos
contenidos de cido ascrbico y caretenoides son encontrados en menta
(Mentha piperita), organo (Origanum vulgare) y limn blsamo (Melissa
officinalis). Pero el secado de estas especies causa gran prdidas de
estos componentes (Capecka et al., 2005).
La actividad antioxidante tambin puede ser evaluada por la cantidad de
Malonaldehdo (MDA) formado por la oxidacin inducida por FeSO4 del
cido linoleco a 37 o C en buffer Trimza (pH 7.4). A una concentracin
de 1.5 mg/ml de cido linoleco, extractos de Moringa oleifera y Daucus
carota tienen una alta actividad antioxidante (83 y 80%) a comparacin
del -tocoferol (72%) (Arabshahi et al., 2007).
La composicin del medio de reaccin incide sobre los valores
observados de la actividad antioxidante. En emulsiones de agua/aceite
(margarina) sometidas a deterioro oxidativo por medio de radiacin
ultravioleta A-visibe (UVA-VIS), el aceite esencial del organo presenta
un accin antioxidante superior al cilantro y el romero, e incluso a la
vitamina E, en concentraciones de 1, 10 y 20 g/kg. Algunos compuestos
que no presentan actividad antioxidante notoria, al ser mezclados,
pueden aumentar la capacidad de las molculas que si son
antioxidantes. Este efecto de sinergia se pudo observar entre el romero
y el cilantro (Tafur et al., 2005).
El mecanismo de la accin antioxidante de los aceites esenciales no se
conoce con toda certeza. Sin embargo, en un estudio realizado por Fotti
e Ingold (2003), se sugiere que el -terpineno, presente en varios aceites
esenciales, acta como antioxidante al retardar la peroxidacin del cido
linoleico, porque los radicales peroxilo formados a partir de ste (HOO- )
reaccionan rpidamente con los radicales peroxilo del cido linoleico. De
tal forma que se disminuye la concentracin de los radicales peroxilo del
cido linoleico en el estado estacionario. Adicionalmente, autores como
Puertas et al. (2002), han mostrado que algunos aceites esenciales y
sus fitoconstituyentes poseen la capacidad de atrapamiento del catin-
radical 2,2-azinobis- (3-etilbenzotiazolina-cido sulfnico) ABTS+ y del
radical 2,2-difenil-1-picrilhidracilo DPPH igual o superior a la de
antioxidantes sintticos como la vitamina E, el trolox y el cido
ascrbico. En ese estudio se presenta un esquema de reaccin donde el
eugenol atrapa el radical DPPH de manera similar a la vitamina E.
Adicionalmente, mostraron que los AEs de organo y romero poseen
una capacidad alta para el atrapamiento el radical ABTS+, en
comparacin con el AE de cilantro.

VAS METABLICAS Y TOXICIDAD DE LOS ACEITES ESENCIALES

Kohlert et al., (2000) revisaron sobre el metabolismo de componentes
de los AEs. Los autores concluyeron que los componentes de los AEs
son rpidamente absorbidos va oral (1,8-cineol y -pineno), pulmonar
(alcanfor y mentol) o dermal (- y -pineno, alcanfor, 3 careno y
limoneno) y la mayora son metabolizados por los riones en forma de
glucorinidos o exhalados como CO2. Su acumulacin en el cuerpo es
improbable debido a la tasa rpida de eliminacin y a su vida media
corta. La degradacin y la cintica de carvacrol, timol y eugenol y
transcinamaldehido en el tracto intestinal en cerdos fue investigado por
Michiels et al. (2008). Los autores demostraron que estos compuestos
fueron absorbidos en el estmago y en la porcin proximal del intestino,
por lo tanto la microbiota improbablemente metaboliza los AEs.
Estudios de toxicidad en ratas (Jenner et al., 1964), muestran que la
dosis oral LD50 (mg/kg del peso vivo) de carvacrol, cinamaldehido, beta-
ionona y timol fue de 810, 220, 4590 y 980, respectivamente. Sin
embargo, cuando las ratas fueron suplementadas con 1000 y 10000
ppm, no se mostraron signos claros de intoxicacin.
Los AEs poseen actividad antimicrobiana contra un amplio rango de
bacterias. Dusan et al., 2006, investigaron la accin de algunos
compuestos (timol, carvacrol, cinamaldehido, AE de organo y tomillo),
sobre clulas intestinales y Escherichia coli. Los autores demostraron
que dosis de los AEs con capacidad de inhibir E. coli (0.05%), mostraron
relativamente una alta toxicidad en clulas intestinales cultivadas in vitro.
Bajas dosis de los AE (0.01%) solo inhibieron parcialmente E. coli
enteroinvasiva y su efecto sobre clulas Caco-2 fue modesto. Los
aceites de canela y clavo y su mayor compuesto eugenol, no tuvieron
efectos citotxicos a dosis bajas.
 BIBLIOGRAFIA

http://repositoriodigital.uns.edu.ar/bitstream/123456789/532/1/TESIS%20G
a%C3%B1an%20N.%202014.pdf

http://www.bdigital.unal.edu.co/2957/1/780199.2010.pdf