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Universidade

Federal de Uberlndia
Faculdade de Cincias Integradas do Pontal
Curso de Cincias Biolgicas



Amostras estudadas pela gen6ca


forense: procedimentos de coleta e
armazenamento de amostras.

Prof. Dr. Alexandre Azenha Alves de Rezende Gen6ca Forense


Heptmetro de Quin6liano

Proposio de 7 perguntas para apurar um fato

Que?
Quem?

Quando?

Por qu?

Como?

Onde?

Com que auxlio?

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Mtodo de coleta
Para ns forenses o material biolgico (em especial o DNA) deve ser
coletado, acondicionado e manipulado com critrios rgidos e
restritos para que em anlises posteriores produza os resultados
desejados e dedignos.

O mtodo de coleta depender do estado e condio das amostras,


devendo-se coletar uma quan6dade signica6va.

Considera-se tambm que as amostras de DNA podem sofrer


alteraes que afetam a cadeia de nucleoXdeos, modicando assim
sua composio e estrutura, o que impossibilita o uso da amostra.
Para que isso no ocorra esta deve ser man6da em ambiente o mais
frio e seco possvel, evitando que sua a6vidade biolgica no seja
perdida (SILVA & PASSOS, 2006).

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Itens u6lizados nas coletas:
Luvas descartveis (de procedimento);
Mscara cirrgica;
Touca cirrgica;
Recipientes individuais de armazenamento: coletor universal, tubos
pls6cos, esptula descartvel
Suabe ou haste exvel (algodo ou dracon): coleta de material
lquido ou manchas secas;
gua des6lada estril: umedecer o suabe;
Pinas: coleta de cabelos, pelos ou material slido;
Seringas descartveis: coleta de lquidos;
Es6lete e/ou Bisturi (com lminas descartveis) efetuar cortes em
tecidos, couro, raspagem de amostras secas;
Caixa de isopor pequena .

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Tipos de material biolgico com potencial uso forense
e diferentes mtodos de coleta
Quando se trata de udos (sangue, esperma, saliva e outros), e este es6ve
em estado lquido e em pequenas quan6dades, dever ser coletado atravs
de suabe estril.

Se for em quan6dade maior usa-se uma seringa descartvel estril.

Se o udo es6ver seco e em pequenos objetos ou roupas, os mesmos


devero ser encaminhados para anlise

Se es6ver em grandes objetos ou em superjcies de metal, paredes ou


mveis, devero ser re6rados u6lizando-se bisturi ou esptula, ou ainda
suabe umedecido com gua estril.

Para objetos que possam ser cortados, u6liza-se tesoura e quando o udo
es6ver em partes do corpo humano u6lizam-se pinas para sua re6rada,
sempre em condies assp6cas.

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Tipos de material biolgico com potencial uso
forense e diferentes mtodos de coleta
No caso do sangue lquido coletado recomenda-se que este seja preservado
com an6coagulantes (no coletar em heparina, pois esta pode inibir a
reao de PCR. EDTA pode ser u6lizado).
No caso das amostras serem compostas de tecidos (osso, pele, sangue,
unhas, etc), rgos, pelos com bulbo capilar (raiz), estes devem ser
documentados pela descrio ou fotograa. O material de coleta deve ser
estril e cada item deve ser acondicionado separadamente, selado e
iden6cado (SILVA & PASSOS, 2006).
Caso se trate de manchas de uidos corporais (sangue, smen, saliva, etc),
faze-se a documentao e em seguida coleta-se parte do material biolgico
no qual este esteja aderido (por exemplo, lenol, vestes, etc.), ou quando se
trata de objetos maiores ou metlicos coleta-se com utenslios apropriados,
acondicionado as amostras em recipientes estreis, tendo o cuidado de
evitar contaminaes (SILVA & PASSOS, 2006).
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Isolamento do DNA

Kits de extrao

Dependendo do 6po de anlise desenvolvido, uma


goXcula de saliva coletada em um telefone, ou no selo de
uma carta contm DNA suciente para extrao e anlise.

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em BONACCORSO, N. S. Aplicao do exame de DNA na elucidao de crimes. 2005. Tese de Doutorado. Universidade de So Paulo.

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Isolamento do DNA

De forma geral, toda extrao de DNA apresenta 4 etapas


bsicas:

Lise das membranas lipdicas


Puricao do DNA

Precipitao do DNA

Reidratao do DNA

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Mtodos de extrao de DNA
Quando da escolha do mtodo de extrao de DNA a u6lizar,
vrios fatores devem ser considerados:
A quan6dade de amostra de que se dispe para a extrao.
O 6po de amostra ou fonte da qual se quer extrair.
O grau de pureza com que se quer obter o DNA extrado.
O tempo que cada mtodo consome, o seu custo e rendimento esperado.
O uso que se vai dar ao DNA extrado.

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Extrao de DNA e gentica forense: extrao diferencial

Verso modicada da extrao orgnica;

Casos de estupro;

Frao Feminina Frao Masculina
Clulas epiteliais Espermatozides

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Uso de DTT (Dithiothreitol) na extrao da frao masculina: Nos casos de
estupro em que so presentes os exsudatos vaginais das v6mas e/ou as
peas de vesturio;
Necessidade do uso de mtodo diferencial;

Extrao da frao masculina e frao feminina;

Pontes dissulto.



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Quantificao de DNA

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Isolamento do DNA

Amostras para anlises forenses geralmente so extradas com kits,


aumentando rendimento e pureza do DNA.

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Amostras Analisadas

Amostra Ques6onada:
Todo e qualquer vesXgio coletado em local de crime e em pessoa
vi6mada contendo material biolgico humano: sangue, smen, saliva,
urina, pele, pelo/cabelo com bulbo, dentes, ossos, secrees
corporais, etc.

Amostra Referncia:
Amostra biolgica coletada exclusivamente para estabelecer o vnculo
biolgico ou o confronto gen6co com a amostra ques6onada
(vesXgio).
Dentre os doadores de referncia, os mais frequentes so: a v6ma, o
suspeito e os familiares da v6ma.

Disponvel em hpp://ssp.to.gov.br/policia-cien6ca/ins6tutos/ins6tuto-de-gene6ca-forense/#sthash.qnmTYVHf.dpuf

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Cadeia de custdia
A Cadeia de Custdia um processo de documentar a histria
cronolgica da evidncia;

Visa garan6r o rastreamento das evidncias u6lizadas em processos


judiciais, registrar quem teve acesso ou realizou o manuseio desta
evidncia.

Se faz necessria em todas as a6vidades prossionais onde possa


ocorrer situaes que resultem em processos judiciais.

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