Caractersticas Fsico-Qumicas do Leite de Vacas Holandesas

Submetidas Restrio Alimentar1

2
FRUSCALSO, Vilmar
3
FISCHER, Vivian
4
ZANELA, Maira Balbinotti

RESUMO

Objetivou-se avaliar o efeito da restrio alimentar sobre a produo e

propriedades fsico-qumicas do leite. Doze vacas holandesas foram
aleatoriamente designadas aos tratamentos: dieta controle (T100) para atender
a 100% das exigncias nutricionais dos animais, utilizando 8 kg MS/100 kg
PV/dia de pastagem de capim-bermuda var. tifton (Cynodon dactylon), 5 kg/dia
de concentrado energtico e 2,5 kg/dia de feno de tifton; e dieta (T60) para
atender a 60% das necessidades, com reduo de 40% da disponibilidade
geral dos alimentos. A produo leiteira, a composio de macrocomponentes
e minerais do leite, a contagem de clulas somticas (CCS), a contagem total
de bactrias (CBT), a estabilidade ao lcool, a acidez titulvel, a densidade e o
ndice crioscpico foram avaliados no incio e no final do estudo. Os animais
submetidos restrio alimentar apresentaram reduo do peso vivo, da
produo de leite e dos seus componentes, mas houve aumento do ponto
crioscpico e da instabilidade do leite no teste do lcool. Entretanto, no alterou
a estabilidade trmica, a densidade, a CBT, a CCS e a concentrao dos
demais componentes do leite. A restrio alimentar diminui a produo leiteira
e a produo dos componentes lcteos e aumenta o nmero de resultados
positivos no teste do lcool 76% sem alterar a sua estabilidade trmica.

Palavras-chave: Estabilidade do Leite. Prova do lcool. Subnutrio.

1
Artigo baseado na Dissertao submetida ao Programa de Ps-graduao em Zootecnia da UFRGS,
2007. Acesse aqui na ntegra
2
Engenheiro agrnomo, mestre em Produo Animal, Emater, Cruzaltense/RS. E-mail
emcruzal@emater.tche.br
3
Engenheira agrnoma, doutora em Produo Animal, professora associada, Departamento de Zootecnia
- UFRGS. Bolsista do CNPq. E-mail: vfried@portoweb.com.br
4
Mdica veterinria, doutora em Produo Animal, professora adjunta, Departamento de Medicina
Preventiva, UFRGS. E-mail: maira.zanela@ufrgs.br.
1 INTRODUO

Atualmente, o Brasil o stimo maior produtor mundial de leite, com

23,3 milhes de toneladas anuais (FAO, 2006). Para avaliar sua qualidade e
aptido industrial, uma srie de anlises fsico-qumicas e microbiolgicas
realizada pelas indstrias. Conforme a Instruo Normativa n 51 do Ministrio
da Agricultura e Pecuria e Abastecimento (MAPA), entre as condies para
considerar o leite cru apto industrializao esto: ser estvel em soluo
alcolica com concentrao mnima de 72% v/v, apresentar teores mnimos de
protena, gordura e slidos desengordurados de, respectivamente, 2,9, 3,0 e
8,4% (BRASIL, 2002).
Com o crescimento do volume de leite processado em altas
temperaturas, como o caso do leite sob ultra high temperature (UHT) ou
longa vida, a indstria aumentou a concentrao alcolica da soluo do teste
de 72 para 76%, ou mesmo valores superiores, como 78 ou 80%, com a
expectativa de selecionar leite com maior resistncia ao tratamento trmico
UHT. Uma grande quantidade de amostras de leite precipita no teste com as
concentraes de lcool mais elevadas. Todavia, pesquisas vm
demonstrando que a correlao entre a positividade na prova do lcool e o
tempo de coagulao trmica moderada (NEGRI, 2002) e que a correlao
entre concentraes crescentes de etanol na soluo alcolica e a estabilidade
trmica baixa (MOLINA et al., 2001). No Rio Grande do Sul, cerca de 50%
das amostras de leite coletadas dos produtores apresentaram instabilidade na
prova do lcool 76% v/v, embora a acidez titulvel estivesse entre 14 e 18D
(MARQUES et al., 2007).
Considervel proporo do rebanho rio-grandense mantida em
condies inadequadas de alimentao, o que se reflete em reduo da
produtividade (MARTINS et al., 2007; GONZLES et al., 2007). Todavia, a
relao entre a subnutrio e as caractersticas fsico-qumicas do leite no foi
totalmente estabelecida. O presente estudo foi realizado com o objetivo de
estudar os efeitos da restrio alimentar sobre a produo leiteira, as
caractersticas fsico-qumicas, a CCS e a CTB do leite.
2 MATERIAL E MTODOS

O experimento foi conduzido em uma propriedade agrcola familiar, no

municpio de Campinas do Sul, Rio Grande do Sul, de janeiro a fevereiro de
2006. Doze vacas holandesas PC, seis primparas e seis multparas, foram
submetidas a dois tratamentos. No incio do estudo, os animais apresentavam,
em mdia, peso corporal 499 + 47,2 kg, produo de leite 19,35 + 4,1 kg/vaca
e escore de condio corporal de 2,83 + 0,56, e estavam com 188 + 124 dias
de lactao. Os animais foram mantidos em pastagem de tifton (Cynodon
dactylon) e, durante o perodo pr-experimental de 14 dias, todos os animais
receberam oferta de pasto entre 6 e 8 kg MS/100 kg PV/dia.
Vacas produzindo entre 10 e 18 kg/dia receberam diariamente 4 kg de
concentrado energtico e aquelas com produo acima de 18 kg/dia
receberam, adicionalmente, 1 kg de concentrado proteico. O concentrado
energtico foi composto por 67,6% de gro de milho modo, 29% de gro de
cevada modo, 2% de sal mineral Bovigold da Tortuga e 1% de calcrio
calctico (Tabela 1).

Tabela 1 - Composio bromatolgica dos alimentos fornecidos a vacas

holandesas submetidas a dietas visando atender a 100 (T100)
e 60% (T60) das suas exigncias nutricionais.
DIVM
MS1 FDN2 FDA3 PB4 Ca6 P7 Mg8 K9
S5
Pasto tifton
28,44 71,87 35,67 12,67 61,12 0,40 0,26 0,24 1,90
(T100)
Pasto tifton (T60) 38,90 77,22 40,79 9,29 57,13 0,40 0,20 0,21 2,44
Feno tifton 81,96 68,88 30,18 9,75 60,22 0,31 0,18 0,20 1,72
Gro milho 88,12 13,54 3,99 9,25 - 0,04 0,26 0,10 0,37
Cevada 90,02 13,90 3,22 14,52 - 0,5 0,50 0,07 0,48
Gro soja 90,06 18,84 13,04 40,02 - 0,30 0,54 0,18 2,02
Farelo soja 88,00 15,09 8,98 46,40 - 0,36 0,61 0,31 1,87
1
matria seca (%). 2 Fibra em detergente neutro (%) expresso na matria seca. 3 Fibra em
detergente cido (%), expresso na matria seca. 4 Protena bruta (%) expressa na matria
seca. 5 Digestibilidade in vitro da matria seca (%). 6 Clcio (%) expresso na matria seca. 7
Fsforo (%), expresso na matria seca. 8 Magnsio (%) expresso na matria seca. 9 Potssio
(%) expresso na matria seca.

O concentrado proteico foi composto por 75% de gro de soja modo e

25% de farelo de soja. Os animais, aleatoriamente escolhidos, foram
designados aos tratamentos T100 (oferta de dieta formulada para atender
100% das necessidades nutricionais) ou T60 (oferta de dieta para atender 60%
das necessidades nutricionais). O sal mineral apresentou a seguinte
composio: como percentagem da MS, 48 Na, 23 Ca, 15 S, 9 P, 2 Mg e como
ppm: 100 Co, 700 Cu, 80 I, 2000 Fe, 1250 Mn, 20 Se e 2700 Zn.
As necessidades foram estimadas a partir das seguintes consideraes:
a) os dados pr-experimentais refletiam o potencial das vacas, sendo utilizados
para os clculos; b) para as caractersticas nutricionais da forrageira foram
utilizados os resultados analticos mdios; c) para considerar a seleo dos
animais, o valor nutricional da forrageira foi estimado a partir da composio
mdia entre folhas e hastes para o T100, e entre folhas, hastes e matria morta
para o T60; d) os teores de fibra de detergente neutro (FDN) dos concentrados
foram considerados no clculo do consumo mximo de forragem; e) o modelo
de Mertens (1987) foi utilizado para estimar o consumo mximo de matria
seca (consumo mximo de FDN, em kg/dia=1,2% PV); f) a estimativa das
necessidades nutricionais foi realizada com Software do National Research
Council (NRC 2001) para gado de leite.
A dieta do tratamento T100 constituiu-se de oferta diria de 8 kg MS/100
kg PV de pastagem de tifton (Cynodon dactylon); 2,5 kg/vaca de feno de tifton
e 5 kg/vaca de concentrado energtico. Os animais designados ao tratamento
T60 receberam 50% dos concentrados oferecidos s vacas do tratamento
T100.
No perodo experimental, a pastagem no recebeu irrigao nem
adubao. A precipitao pluviomtrica total durante o ensaio foi de 292 mm.
Os piquetes, delimitados por cerca eltrica e com acesso gua e sombra,
localizaram-se em terreno suave ondulado distante, no mximo, 150 m da sala
de ordenha. Os animais entravam na pastagem com altura entre 30 e 40 cm,
onde permaneciam 24 horas, saindo apenas para as ordenhas.
A carga animal foi ajustada semanalmente, mediante a remarcao dos
piquetes, em funo da oferta de matria seca (MS) de forragem. Realizaram-
se trs amostragens para cada nvel de oferta, totalizando seis pontos
semanais, com 0,25 m de rea em cada local amostrado. O corte da forrageira
foi realizado rente ao solo. Para fins de clculo da rea dos piquetes, foi
utilizado o peso vivo (PV) dos animais obtidos no incio de cada perodo.
Trabalhou-se com o sistema de pastejo rotativo, em piquetes delimitados por
cerca eltrica, com tempo de ocupao de um dia e de descanso mdio de
vinte dias.
As amostras da forrageira, para os dois nveis de oferta de pasto, foram
separadas em folha, haste e matria morta. Aps secagem ao sol, as amostras
foram modas, acondicionadas em vidros e encaminhadas para o Centro de
Pesquisa em Alimentao (Cepa) da Universidade de Passo Fundo, onde
foram analisadas quanto aos teores de protena bruta, segundo a Association
of Official Analytical Chemist (AOAC, 1975), de fibra em detergente cido
(FDA) e FDN (GOERING; VAN SOEST, 1970), alm da determinao dos
teores de potssio, clcio, sdio e magnsio por espectrometria de absoro
atmica, e de fsforo por colorimetria.
O feno foi distribudo nos respectivos piquetes, aps a ordenha da tarde,
em vrios locais, com livre acesso a todos os animais do grupo. Os
suplementos, tanto energtico quanto proteico, foram fornecidos duas vezes ao
dia durante as ordenhas. Como fonte de minerais, foram utilizados sal mineral
Bovigold, calcrio calctico e NaCl.
As vacas foram ordenhadas pela manh, s 6h, e tarde, s 18h. Antes
da ordenha, foram realizadas rotineiramente a lavagem e a secagem dos tetos
e o teste da caneca de fundo preto. Depois da ordenha, realizou-se a ps-
imerso dos tetos com soluo antissptica. As amostras de leite individuais
foram coletadas, semanalmente, na ordenha da manh e da tarde, a partir da
ordenha completa das vacas. As amostras finais, formadas pela unio de
aproximadamente 100 ml da ordenha matutina, com igual volume da ordenha
vespertina, foram mantidas a 5C at a manh do dia seguinte, quando foram
encaminhadas para os respectivos locais de anlise.
Avaliaram-se nos animais as seguintes variveis: escore de condio
corporal (1 a 5), conforme a escala de Wildman et al. (1982); peso corporal, no
primeiro e ltimo dia do experimento; produo de leite, semanalmente; mastite
subclnica pelo California Mastitis Test (CMT), (SCHALM; NOORLANDER,
1957), quinzenalmente, e mastite clnica pelo teste da caneca de fundo preto,
diariamente. Foram realizadas semanalmente as anlises de acidez por
titulao (BRASIL, 1981); teste da fervura, realizado no 28 e no 56 dias
(BRASIL, 1981); densidade relativa a 15C, realizada semanalmente com
termolactodensmetro (BRASIL, 1981); crioscopia, medida com o Crioscpio
Eletrnico Digital ITR MK540, a partir do qual se obteve a leitura em graus
Horvet (TRONCO, 1997); prova do lcool, com a verificao da estabilidade
frente s diferentes concentraes (68, 70, 72, 74, 76, 78 e 80% v/v), mediante
a mistura, em placas de Petri, de 2 ml de leite com 2 ml de soluo alcolica,
com leitura realizada aps completa mistura. Classificaram-se como leite
instvel no cido (Lina) os leites que apresentaram acidez titulvel normal e
positividade na prova do lcool 76% v/v (MARQUES et al., 2007).
Avaliaram-se os teores de protena, gordura, lactose e slidos totais,
determinados por espectrofotometria com leitura infravermelha pelo
equipamento Bentley 2000 (BENTLEY INSTRUMENTS, 1995a), os teores de
potssio, clcio, sdio e magnsio por espectrometria de absoro atmica, e
de fsforo por colorimetria. A CCS foi realizada em contador eletrnico pela
citometria de fluxo (Somacount 300) (BENTLEY INSTRUMENTS, 1995b),
alm da CBT mensal, por citometria de fluxo (INTERNATIONAL DAIRY
FEDERATION, 1991).

2.1 Anlise Estatstica

Os dados foram avaliados por meio da anlise de varincia,

considerando o delineamento completamente casualizado, testando os efeitos
de oferta de dieta (n = 2), dentro de cada perodo (pr-experimental e
experimental). Cada vaca constituiu-se em unidade experimental. O nmero de
semanas em lactao foi utilizado como covarivel, usando o programa
estatstico Statistical Analysis System (SAS), procedimento General Linear
Models (GLM). A separao das mdias foi realizada pelo Lsmeans, teste de
Fisher, nvel de significncia 0,05. Os valores do teste da fervura foram
computados como uma distribuio de frequncia, sendo atribudo valor 0
(zero) para resultado negativo (leite normal) e 1 (um) para positivo (coagulado).
A mesma anlise foi feita para a prova do lcool 76, na qual os valores 0 e 1
indicam leite estvel e instvel, respectivamente. Para esses dois parmetros
foram realizadas anlises no paramtricas, com o auxlio do teste de
distribuio 2 (MARKUS, 1973).
3 RESULTADOS E DISCUSSO

As vacas sob restrio alimentar consumiram quantidade insuficiente de

nutrientes, com reduo do peso corporal e produo leiteira, mas no
alteraram significativamente o seu escore de condio corporal em relao
quelas mantidas com a dieta controle. As concentraes mdias de protena,
lactose, slidos totais e desengordurados, potssio, clcio total, sdio,
magnsio e fsforo do leite no foram alteradas significativamente pela oferta
de alimento, assim como o escore de clulas somticas (ECCS) e a CBT.
Porm, a restrio alimentar tendeu a aumentar o teor de gordura do leite
(Tabela 2).

Tabela 2 - Mdias por tratamento e sua significncia nos perodos pr-

experimental e experimental sobre os aspectos fsicos e
composio qumica do leite, ajustados para a co-varivel
semanas em lactao.
Perodo pr-experimental Perodo experimental
Variveis 1 2
T100 T60 P<F T100 T60 P<F
Peso corporal (kg) 517,21 471,68 0,2526 519,0 441,4 0,0426
Escore condio corporal 3,04 2,50 0,2450 2,68 2,35 0,4011
Produo leiteira (kg/vaca/dia) 19,21 19,57 0,9119 19,01 9,64 0,0011
3
Produo leiteira corrigida 16,83 16,35 0,8795 17,97 9,70 0,0005
Gordura (%) 3,21 3,04 0,6487 3,66 4,24 0,0946
Protena (%) 2,81 2,78 0,8201 2,98 2,88 0,5262
Casena (%) - - - 2,20 2,10 0,4139
Lactose (%) 4,60 4,63 0,6356 4,65 4,54 0,1628
Slidos totais (%) 11,47 11,30 0,6270 12,19 12,51 0,4259
Slidos desengordurados (%) 8,26 8,2 0,9735 8,53 8,28 0,1292
Potssio (g/l) - - - 1,66 1,73 0,3666
Clcio total (g/l) - - - 0,97 1,041 0,1871
Sdio (g/l) - - - 1,37 1,46 0,1355
Magnsio (g/l) - - - 0,10 0,10 0,1272
Fsforo (g/l) - - - 0,82 0,80 0,5489
5
Escore CCS 3,57 2,48 0,5375 4,15 3,91 0,7000
Contagem bacteriana total - - - 452,4 223,6 0,8712
4
lcool 76GL 0,33 0,00 0,1967 0,42 0,88 0,0410
lcool, % 78,03 78,45 0,8115 76,37 70,44 0,0762
Fervura - - - 0 0 1,00
Acidez titulvel (D) 16,06 16,16 0,9064 17,03 15,46 0,1573
Densidade (g/l) 1029,5 1029,7 0,8695 1030,9 1029,8 0,2054
Crioscopia (H) -0,5322 -0,5334 0,6892 -0,5668 -0,5543 0,0022
1 2 3
T100: oferta de dieta para 100% das necessidades. T60: oferta de dieta para 60% das necessidades.
4
Correo para 4% de gordura (NRC, 2000). Proporo de amostras positivas no lcool 76%, anlise da
distribuio de frequncias pelo teste do 2. Escore de clulas somticas. - valores no determinados.
5

A restrio alimentar aumentou a frequncia de amostras de leite com

resultados positivos no teste do lcool 76% e apresentou tendncia em reduzir
a estabilidade do leite (ou seja, a concentrao alcolica mnima para provocar
a coagulao do leite) de 76,37 para 70,44%. O ponto crioscpico do leite de
vacas submetidas restrio alimentar foi aumentado, todavia, a restrio
alimentar no alterou significativamente a positividade no teste da fervura, a
acidez titulvel e a densidade (Tabela 2).
Nveis insuficientes de alimentao so frequentemente associados
reduo do peso corporal e da produo leiteira, mas os teores de protena
total e de soroprotenas e, especialmente, da gordura aumentam (AULDIST et
al., 2000; GONZLES et al. 2007; ZANELA et al., 2006d). Entretanto, no
presente estudo, a reduo do aporte nutricional foi severa, mas proporcional
aos nutrientes presentes na dieta controle, ou seja, no foi alterada a
proporo entre nutrientes fornecidos nem entre concentrado e volumoso, o
que reduziu o volume e a sntese dos componentes lcteos, no alterando a
concentrao desses (SUTTON, 1989). Outro fator que pode ter influenciado
os resultados foi o estgio lactacional avanado, 188 dias em lactao, das
vacas no presente estudo. Zanela et al. (2006a) e Auldist et al. (2000)
verificaram, respectivamente, nenhuma ou pequena alterao nas
concentraes dos componentes lcteos durante a segunda metade da
lactao (mais de 180 dias).
Zanela et al. (2006a) mantiveram vacas jersey, confinadas, com oferta
de dieta de 100 e 60% das necessidades nutricionais recomendadas pelo NRC
(2001), e observaram reduo de 27% da produo leiteira, mas no
constaram diferenas significativas para as concentraes de gordura, protena
e lactose. Em outros trabalhos, Zanela et al. (2006b, 2006c) retiraram o
concentrado da dieta de vacas leiteiras confinadas e em pastejo e observaram
reduo da produo leiteira, dos percentuais de lactose e de protena e
reduo da produo leiteira e percentual de protena. Ponce Ceballo e
Hernandez (2005) verificaram reduo nos teores de protena total, casena e
lactose ao submeter vacas leiteiras a uma reduo de 30 e 50% da energia e
protena, respectivamente. Auldist et al. (2000) verificaram menores teores de
protena total e de casena, mas maiores teores de protenas de origem
sangunea no leite de vacas sob restrio de oferta de pasto.
A restrio alimentar no afetou a qualidade microbiolgica do leite,
parcialmente explicado pelos mesmos cuidados dispensados na ordenha a
todos os animais e na manipulao das amostras do leite e sua correta
armazenagem, alm do fornecimento vontade de sal mineral, o que est de
acordo com os resultados prvios de Zanela et al. (2006a, 2006b, 2006c).
A relao entre a restrio alimentar e a reduo da estabilidade na
prova do lcool pode estar associada s alteraes no grau de hidratao das
micelas de casena. A desidratao, alm do teor de sais, pH e temperatura,
modificou as interaes fsico-qumicas entre as casenas, podendo aumentar a
reatividade superficial das micelas, levando-as coagulao (NEGRI, 2002).
Devold et al. (2000) verificaram que sistemas de alimentao distintos
alteraram o tamanho das micelas de casena em amostras de leite cru e
aquecido.
Vrios estudos tm demonstrado que, em perodos de carncia
alimentar, a ocorrncia da instabilidade do leite ao lcool aumenta. Ponce e
Hernndez (2001, 2005), Marques et al. (2006a, 2006b), Zanela et al. (2006a,
2006b), Fischer et al. (2006) constataram maior frequncia de resultados
positivos na prova do lcool para o leite de vacas com deficincia nutricional.
Nos experimentos realizados por Ponce e Hernndez (2005), em Cuba,
alm da deficincia de protena degradvel no intestino (PDI), provvel que o
excesso de cana-de-acar na dieta tenha provocado acidose ruminal, com
consequente induo da acidose metablica. Marques et al. (2006c)
observaram que a induo de acidose metablica, provocada pela incluso de
sais aninicos na dieta de vacas em lactao, alterou as percentagens de
minerais no sangue, notadamente de fsforo e magnsio, aumentou a
quantidade de clcio inico no leite e aumentou a frequncia de resultados
positivos no teste do lcool. No entanto, no se constataram diferenas quanto
aos minerais do leite no presente estudo.
A ausncia de diferena significativa entre os tratamentos quanto ao
teste da fervura revela que, apesar de mais instvel ao lcool, o leite produzido
no T60 no foi necessariamente mais instvel termicamente. Esses resultados
corroboram as pesquisas de Negri (2002), a partir das quais a pesquisadora
concluiu que o teste do lcool, utilizado de forma isolada, no avalia
adequadamente a estabilidade trmica do leite.
A acidez titulvel, a densidade e o ponto crioscpico ficaram dentro dos
limites normais e legais, respectivamente, 14-18D, 1.028 a 1.034 g/l e nvel
mximo de 0,530H (BRASIL, 2002; SILVA, 1997). As diferenas encontradas
quanto ao ponto crioscpico podem ser relacionadas s deficincias de
protena, energia e minerais da dieta com restrio, que, segundo Mhlbach
(2003), resultam em uma produo de leite com menor densidade e maior
temperatura de congelamento. Os resultados obtidos nesse ensaio para o
ponto crioscpico concordam com esse relato, mas discordam em relao
densidade do leite.

4 CONCLUSES

A restrio alimentar reduz a produo leiteira e o peso vivo dos

animais.
A restrio alimentar no afeta de forma expressiva a composio
qumica do leite, mas altera negativamente o ponto crioscpico e a estabilidade
do leite no teste do lcool.

AGRADECIMENTOS

Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), Associao

Sulina de Crdito e Assistncia Rural (Ascar) e Cooperativa dos Pequenos
Agropecuaristas de Campinas do Sul (Coopasul ) pela oritentao tcnico-
cientfica e pelos recursos humanos e financeiros disponibilizados

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