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TRANSMISSO

DA VIDA TICA
E MANIPULAO GNICA

OS FUNDAMENTOS DA
HEREDITARIEDADE

EXPERIMENTO

Teste de paternidade

Verso: agosto 17, 2011 3:02 PM


Teste de paternidade

1. Resumo
Essa aula prope a simulao de um teste de paternidade por meio da anlise de fragmentos de DNA da crian-
a, de sua me falecida e de trs homens, um deles o pai biolgico da criana.

2. O experimento

2.1 Materiais
Papel;
Lpis ou caneta;
Tesoura.

2.2 Procedimento
Oriente previamente os alunos para que realizem uma pesquisa em casa ou na biblioteca sobre como os testes de
paternidade so atualmente realizados: qual material biolgico costumam usar, o que extraem dele, se necessitam
de grande quantidade de material e em que se baseia a anlise dos resultados do teste.

Professor, inicie a atividade com uma discusso sobre os fundamentos da hereditariedade.

Cada pessoa tem um padro DNA particular. Um filho herda 50% de suas molculas de DNA da me e 50% do pai. No
ncleo de cada clula somtica (clula dos tecidos que constituem o corpo) h 23 pares de cromossomos homlogos:
23 desses cromossomos vieram do vulo e os outros 23, do espermatozoide. A unio do vulo com o espermatozoide
deu origem ao zigoto. Esse zigoto originou o embrio e depois o feto que um dia fomos.
Cada cromossomos constitudo de uma molcula de DNA e de protenas, portanto, em cada clula somtica h
46 molculas de DNA.
O teste de paternidade compara o DNA dos pais com o do filho, com probabilidade de 99,9% de acerto para deter-
minao da paternidade.
Simplificadamente, nessa tcnica, o DNA dos indivduos isolado e multiplicado por meio de uma tcnica deno-
minada Reao em Cadeia da Polimerase - PCR, na qual so realizados ciclos de alterao de temperatura e usadas
enzimas, fragmentos para iniciar a sntese de DNA e nucleotdeos que possibilitaro que uma pequena quantidade de
DNA seja aumentada muitas vezes. Aps essa etapa de amplificao, o DNA quebrado em fragmentos atravs das
chamadas enzimas de restrio, que so capazes de clivar regies especficas das molculas de DNA. Esses fragmentos
so separados por tamanho e no por sua sequncia de bases (ou nucleotdeos) atravs da tcnica de eletroforese,
gerando uma espcie de imagem fotogrfica semelhante a um cdigo de barras. Esse cdigo de barras a impres-
so digital do indivduo. Os resultados so comparados, podendo identificar os pais indivduo. Vale lembrar que o
exame de DNA no compara a informao gentica dos indivduos, mas apenas os tamanhos dos fragmentos obtidos
de suas molculas de DNA.
O teste feito pelo DNA com sangue, de onde so obtidos os leuccitos, ou fio de cabelo. Em caso de pai falecido,
extrai-se o DNA dos ossos e dos dentes do corpo, desde que o material no tenha sido prejudicado pelo calor (crema-
o, por exemplo).

Nessa aula, ser simulado um teste de paternidade, de maneira simplificada, com o objetivo de subsidiar a discus-
so sobre os princpios de transmisso de caractersticas hereditrias.

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Teste de paternidade

Proponha um caso

Caio um menino de 5 anos. Sua me faleceu h um ano atrs e trs homens afirmam ser seu pai. Foi realizado um
teste de paternidade para tirar a prova.

No anexo do Roteiro de Trabalho esto os supostos fragmento de DNA dos envolvidos (Filho, me, suposto pai 1
(P1), suposto pai 2 (P2) e suposto pai 3 (P3).
Pea para os alunos completarem as fitas de DNA com as respectivas bases complementares dos fragmentos dos
DNA dos envolvidos (Anexo do Roteiro de Trabalho);

Os passos da simulao consistem em

1. Quebrar o DNA em fragmentos pela enzima de restrio.

Considere agora que a enzima de restrio utilizada reconhece a sequncia de bases GG e que corta o DNA entre
o primeiro e o segundo G.
Nota: Lembre-se que aps a etapa de amplificao o cromossomo, uma estrutura identificvel pela sua forma,
tamanho e constituda de uma molcula de DNA especfica, deixa de existir. No final desse processo, o que se obtm
uma mistura composta de todas as molculas de DNA que constituam todos os cromossomos das clulas do indiv-
duo.

Quando a sequncia GG for encontrada, faa um trao vertical separando G de G, como no exemplo da figura 1.

Figura 1: Sequncia hipottica de DNA exemplificando o trao separando G de G. As duas sequncias indicam as
duas fitas de DNA da molcula.

Corte, com uma tesoura (representa a enzima de restrio), a fita de DNA onde foram feitos os traos verticais,
obtendo, assim, fragmentos de DNA (Figura 2);

Figura 2: Sequncia hipottica de DNA exemplificando o corte em que foram feitos os traos.

Conte o nmero de pares de bases nitrogenadas de cada fragmento e marque no verso da fita.

Figura 3: Frente e verso do fragmento formado pela quebra da sequncia hipottica de DNA mostrada nas figuras 1 e 2.

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2. Separao dos fragmentos por eletroforese:

Preparo do Gel
Professor, o gel representado pela tabela 1.

Corrida do DNA
Aps cortados os fragmentos, pintar os quadrados (representao das bandas) de acordo com os fragmentos origi-
nados, na coluna representativa do material de coleta recebido (Tabela 1).
O DNA possui uma carga negativa, logo, os pares de base (pb) se deslocaro no sentido de aproximao do ctodo
(polo positivo) e afastamento do nodo (polo negativo). Como os fragmentos possuem a mesma carga, eles sero
separados por tamanho no gel. Quanto menor o fragmento, mais fcil passar nos espaos do gel e migrar mais ra-
pidamente.

No caso proposto, o suposto pai o sujeito 3. As bandas do DNA do filho que no correspondem ao DNA da me,
correspondem ao DNA do suposto pai 3. Chame ateno para a banda do DNA da me que contm 5 pares de base
(linha 5, coluna 1). Ela mais grossa que as demais, pois mais densa, ou seja, possuem vrios fragmentos iguais.
Chame a ateno tambm para o fato de que h bandas presentes na me e no suposto pai, ausentes na criana.
Como isso pode ser explicado?
E, se houvesse uma banda presente apenas na criana e ausente nos pais, como se explicaria isso?

Tabela 1: Resultado da simulao da corrida da eletroforese com as amostras dos DNA dos envolvidos.

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3.Sugesto de roteiro de trabalho


A seguir, sugerimos um roteiro de trabalho para ser utilizado na ntegra ou adaptado que poder ser entregue
aos alunos. Ele contm todas as orientaes necessrias para o desenvolvimento da aula prtica e tambm algu-
mas questes que auxiliaro no encerramento da atividade.

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Teste de paternidade

PRTICA LABORATORIAL DE BIOLOGIA

Teste de paternidade

Nome: __________________________ N_____ Srie: _____ Data: ________

Objetivo da aula prtica


Essa aula prope a simulao de um teste de paternidade por meio da anlise de fragmentos de
DNA da criana, de sua me falecida e de trs homens, um deles o pai biolgico da criana.

Procedimento
Abaixo, propomos um caso para ser resolvido, simulando um teste de paternidade.
Caso
Caio um menino de 5 anos Sua me faleceu e trs homens afirmam ser seu pai. Foi realizado um
teste de paternidade para tirar a prova.

Em anexo esto os supostos fragmento de DNA dos envolvidos (Filho, me, suposto pai 1 (P1),
suposto pai 2 (P2) e suposto pai 3 (P3).

1. Completar as fitas de DNA com as respectivas bases complementares dos fragmentos dos DNA dos
envolvidos (Anexo);
2. Quebrar em fragmentos pela enzima de restrio:

Considere agora que a enzima de restrio utilizada reconhece a sequncia de bases GG e que
corta o DNA entre o primeiro e o segundo G.
Nota: Lembre-se que aps a etapa de amplificao o cromossomo, uma estrutura identificvel
pela sua forma, tamanho e constituda de uma molcula de DNA especfica, deixa de existir. No final
desse processo, o que se obtm uma mistura composta de todas as molculas de DNA que constitu-
am todos os cromossomos das clulas do indivduo.

Quando a sequncia GG for encontrada, faa um trao vertical separando G de G;


Corte, com uma tesoura (representa a enzima de restrio), a fita de DNA em que foram feitos os
traos verticais, obtendo, assim, fragmentos de DNA;
Conte o nmero de pares de bases nitrogenadas de cada fragmento e marque no verso da fita.

3. Separao dos fragmentos por eletroforese:

Preparo do Gel
O gel representado pela tabela 1.

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Teste de paternidade

Corrida do DNA

Aps cortados os fragmentos, pintar os quadrados (representao das bandas) de acordo com os
fragmentos originados, na coluna representativa do material de coleta recebido (Tabela 1).
O DNA possui uma carga negativa, logo, os pares de base se deslocaro no sentido de aproxima-
o do ctodo e afastamento do nodo. Como os fragmentos possuem a mesma carga, eles sero
separados por tamanho no gel. Quanto menor o fragmento, mais fcil passar nos espaos do gel
e migrar mais rapidamente.

Tabela 1: Quadro representativo de um gel de eletroforese. Os cdigos horizontais na primeira


linha da tabela representam as amostras a serem aplicadas no gel. Os nmeros de 1 a 30 represen-
tam os pares de bases (pb) que ficaro retidos no gel.

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Teste de paternidade

Questes:

1. Como transmitido o material gentico dos pais para os filhos?

2. Por que metade das bandas dos pais coincidem com as do filho?

3. No caso proposto, quais fragmentos do DNA (quantidade de pares de base) do filho so herdados
do pai? E da me?

4. Quem o suposto pai?

5. Cite algumas caractersticas humanas que voc considera que so hereditrias. Justifique sua
resposta.

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Teste de paternidade

Anexo

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Teste de paternidade

4. Referncias complementares
1. Teste de Paternidade. Determinao pelo DNA. Site da Universidade Federal de Viosa com explicaes sobre
o teste de paternidade.
Disponvel em: http://www.ufv.br/dbg/BIO240/TP122.htm
Acesso em: 16/03/2010.

2. Como as pesquisas genticas esto presentes no cotidiano. Site da UOL Educao, rea Biologia gentica.
Disponvel em: http://educacao.uol.com.br/biologia/ult1698u19.jhtm
Acesso em: 16/03/2010.

3. Calculadora de paternidade sem o uso de testes ou exames de DNA. Site que utiliza clculos de probabilidade
para supor a paternidade atravs de caractersticas fsicas dos indivduos.
Disponvel em: http://www.exame-paternidade-dna.com.br/
Acesso em: 16/03/2010.

4. Paternidade consciente e conscincia da paternidade. Artigo que apresenta reflexes e questionamentos


ticos a respeito da paternidade por meio da avaliao do exame de DNA. Companhia da Escola.
Disponvel em: http://www.integral.br/zoom/imprimir_materia.asp?materia=35
Acesso em: 16/03/2010.

5. A DNA fingerprint Simulation. Different, simple, effective. Artigo em ingls sobre uma aula prtica de simu-
lao de DNA. Reed, E. The American Biology Teacher, vol. 63, n.6, 2001.

6. Animao, com texto em ingls, mostrando as etapas da realizao de um teste de paternidade.


Disponvel em: http://www.sumanasinc.com/webcontent/animations/content/paternitytesting.html
Acesso em: 16/03/2010.

7. Vdeo do programa Globo Reprter sobre o teste de paternidade, em linguagem simples.


Disponvel em: http://www.youtube.com/watch?v=t9I8JDQK0mY
Acesso em: 16/03/2010.

8. Site que disponibiliza vrios links para animaes de biologia molecular:


Um desses links mostra, de forma didtica, as etapas da amplificao do DNA por PCR.
Disponvel em: http://www.biomolweb.kit.net/pcrr.swf.
H tambm um link que mostra a tcnica de eletroforese em gel.
Disponvel em: http://www.biomolweb.kit.net/eletoforese.swf
Acesso em: 16/03/2010.

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FICHA TCNICA
Universidade Estadual de Campinas
Reitor: Fernando Ferreira Costa.
Vice-reitor: Edgar Salvadori de Decca.
Pr-reitor de ps-graduao: Euclides de Mesquita Neto.

Instituto de Biologia
Diretora: Shirlei Maria Recco Pimentel.
Diretor Associado: Flavio Antonio Mas dos Santos.

EXECUO Projeto EMBRIAO


Coordenao geral: Eduardo Galembeck.

Coordenao de Mdia - Audiovisuais: Eduardo Paiva.


Coordenao de Mdia - Software: Eduardo Galembeck.
Coordenao de Mdia - Experimentos: Helika A. Chikuchi, Marcelo J. de Moraes e Bayardo B. Torres.

Apoio Logstico/Administrativo: Eduardo K. Kimura, Gabriel G. Hornink, Juliana M. G. Geraldi.

OBJETO DE Teste de paternidade


APRENDIZAGEM
Coordenao do Experimento: Bianca Caroline Rossi Rodrigues.
Redao: Bianca Caroline Rossi Rodrigues, Eric Dias da Silva, Helika A. Chikuchi e Eduardo Galembeck.
Pesquisa: Bianca Caroline Rossi Rodrigues, Eric Dias da Silva.
Reviso de Contedo: Daniela Kiyoko Yokaichiya e Helika A. Chikuchi.
Adequao Lingustica: Lgia Francisco Arantes de Souza .
Diagramao: Thais Goes.

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do autor. O no cumprimento desta licena acarretar nas penas previstas pela Lei n 9.610/98.

Laboratrio de Tecnologia Educacional


Departamento de Bioqumica
Instituto de Biologia - Universidade Estadual de Campinas UNICAMP
Rua Monteiro Lobato, 255
CEP 13083-862, Campinas, SP, Brasil

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