TECNOLOGA ENZIMTICA

Las enzimas son los catalizadores de la naturaleza y presentan una gran especificidad y
eficiencia termodinmica. La utilizacin de las enzimas abarca cuatro campos bien
diferenciados como son: agentes teraputicos, como herramienta para la manipulacin
de materiales biolgicos, como reactivos analticos y como catalizadores industriales.
Hace siglos que se utilizan enzimas y estas representan una de las formas ms antiguas
de biotecnologa. La utilizacin de las enzimas es posible gracias al conocimiento de la
funcin de las diferentes enzimas en los sistemas metablicos de los seres vivos, al
mejor conocimiento de su estructura y tambin gracias a la posibilidad de obtener
enzimas de diseo a travs de la manipulacin gentica de los microorganismos. Esto ha
dado lugar a que muchas empresas se dediquen a la produccin de enzimas, de origen
microbiano, a gran escala. Se han descrito con detalle alrededor de 3000 enzimas
diferentes y se estima que en la naturaleza hasta 10000 enzimas distintas. (Cooper &
Hausman, 2011)

Fuente: COOPER, 2011

Las enzimas pueden obtenerse a partir de varias fuentes como son tejidos animales,
tejidos vegetales o mediante procesos de fermentacin utilizando microorganismos
seleccionados. El uso de enzimas a nivel industrial se ve limitado por la disponibilidad y
costo, es por esto que los microorganismos como fuente de enzimas en comparacin con
plantas y animales ofrecen importantes ventajas como: espacios de produccin
reducidos, no son estacionales, poseen un rpido crecimiento sobre medios de cultivo
econmicos, la mayora de las enzimas son secretadas al medio de cultivo lo que facilita
su recuperacin. Adems, las enzimas microbianas son ms estables y su produccin es
ms conveniente y segura. Por esto un 50% de las enzimas son producidas por hongos y
levaduras, 35% por bacterias, y 15% por plantas y animales. (Castellanos Oscar,
Ramrez, & Mauricio, 2006)

Principales Enzimas Microbianas y sus aplicaciones

La

tecnologa enzimtica es una de las herramientas ms empleadas por la biotecnologa,

esta consiste en el uso de enzimas derivadas de organismos vivos para obtener algun
producto o modificar algun proceso.

UTILIZACI
Farmacuti
N DE LAS Alimentos Textiles
ca
ENZIMAS

Se han
Detergent
Energa Papel
es
realizado muchas investigaciones acerca del uso de la tecnologa enzimtica en
diferentes campos, dentro de los cuales se cuenta las industrias alimenticia,
farmacutica, de detergentes, energtica, textil y papelera, as como tambin en
biorremediacin.
La mayor parte de procesos biotecnolgicos tradicionales como la obtencin de yogurt,
la produccin de cerveza o la fermentacin de la uva para fabricar vino, son realizados
por las enzimas que cada microorganismo produce para su particular metabolismo. Sin
embargo tambin es posible realizar los procesos biotecnolgicos con las enzimas, en
ausencia de los microorganismos.
En la actualidad son muchas las industrias donde se emplea la tecnologa enzimtica,
muchas de ellas son aplicaciones tradicionales que continuan incorporando enzimas en
sus procesos, tales como la produccin de quesos que ahora emplea, en lugar de la
enzima de origen animal, renina recombinante, producida por microorganismos.
Aun industrias muy tradicionales, como la cervecera, que tard en introducir en sus
procesos cambios que involucraran una disminucin en sus tiempos de procesamiento,
emplea ahora diferentes enzimas en la produccin del mosto, como celulasas y amilasas.
Industrias recientes, como la de biocombustibles, que se encuentra en un apogeo
impresionante buscando una disminucin en la emisin de gases con efecto invernadero,
que inici empleando sustratos como el azucar y ahora utiliza en sus procesos celulasas
y amilasas, buscando sustratos alternativos en la produccin de azucares fermentables
con el fin de no competir con la produccin de alimentos. El empleo de
penicilinoamidasa produce el cido 6-aminopenicilnico en la sntesis de antibiticos
semisintticos como la ampicilina y se constituye en uno de los procesos enzimticos de
mayor uso en la industria farmacutica.
Otra industria en la cual la tecnologa enzimtica es importante es en la de los
edulcorantes, donde enzimas tales como glucosa isomerasa, amilasas, glucoamilasa y
otras, permiten producir endulzantes con mayor poder edulcorante que la sacarosa o
azucar de caa empleada desde hace mucho tiempo, pero que presenta inconvenientes
tanto para la salud como para los procesos y productos en que se emplea.
Las enzimas polimricas tienen aplicaciones tan importantes como la obtencin de
diferentes carbohidratos polimricos como dextranas, levanas, pectina, almidn y otros,
cada uno de los cuales tiene diferentes aplicaciones en la industria farmacutica, de
alimentos y qumica, incluyendo la utilizacin de algunos de ellos en productos
funcionales como fuente de fibra soluble. Pero tambin en las herramientas de la
biologa molecular, donde encontramos como protagonistas a enzimas tan importantes
como la ADN y ARN polimerasa, que permiten la duplicacin de estas molculas en
procesos tan importantes como el PCR, con el que se pueden obtener grandes cantidades
de ADN o ARN partiendo de una baja cantidad de estas molculas. Cabe mencionar a
las enzimas de restriccin empleadas en el anlisis de ADN y ARN, que tienen una
especificidad tan alta que solamente cortan en ciertas secuencias muy especiales de
estos nucletidos y que han permitido el desarrollo de la biologa molecular, y la
ingeniera gentica y la genmica.
Otro avance importante, que modific el uso de enzimas en procesos, fue el hallazgo de
que las enzimas podan ser empleadas en solventes orgnicos, lo cual hizo que aquellas
de tipo hidroltico pudieran realizar reacciones de sntesis, en cuyo caso encontramos
una de las aplicaciones ms importantes de este proceso que consiste en la obtencin de
sustitutos de la manteca de cacao utilizando como sustrato un aceite vegetal, lo que
incrementa su valor agregado.
El desarrollo de la ingeniera de protenas, permite la modificacin de la estructura de
las enzimas, lo que ha hecho posible su uso en productos tan fuertes como los
detergentes, que al tener un pH muy alcalino son contaminantes ambientales; sin
embargo, con el uso de enzimas (biodetergentes) podemos tener productos menos
agresivos con el medioambiente y que produzcan resultados de limpieza empleando
menor cantidad de producto, en donde podemos encontrar enzimas tan variadas como
proteasas, lipasas y amilasas. (Pelez Acero, Meneces Mayo, Ayala Martnes, Loera
Corral, & Megas, 2011)
Asimismo, se encuentran proteasas en procesos tan agresivos ambientalmente como la
industria del cuero. En este caso, el uso de estas enzimas permite utilizar menor
cantidad de productos qumicos en el proceso de curtiembre. (Artime, 2010)
Obtencin de enzimas
Las enzimas en cuanto a su obtencin las podemos clasificar en dos grandes grupos:
intracelulares y extracelulares. En las primeras es obligatorio el rompimiento celular,
para lo cual existen diversos mtodos qumicos, fsicos y enzimticos, para las enzimas
extracelulares tan solo se requiere la separacin de la biomasa con el sobrenadante de la
fermentacin. (UNAD, 2012)
Ruptura celular: La dificultad de la ruptura celular depende del tipo de
microorganismo, as, las de mayor dificultad son las esporas y las de menor las
clulas animales. Existen formas fsicas, qumicas o enzimticas para realizar la
ruptura celular
En las formas fsicas podemos encontrar la homogenizacin mecnica,
homogeneizacin snica y desintegracin trmica. En las formas qumicas se
utilizan agentes que atacan la pared celular como etanol, ter de petrleo o
isopentanol. Las formas enzimticas utilizan enzimas capaces de hidrolizar las
paredes bacterianas permitiendo la salida del contenido intracelular.

Purificacin de enzimas: Es un procedimiento complejo, cuya metodologa es

unica para cada protena; cada paso sistemtico y el proceso total de la
 purificacin depende de tres aspectos: la naturaleza bioqumica (estabilidad y
actividad enzimtica), la utilizacin del enzima (analtica, industrial) y la
complejidad del proceso de purificacin (costos tecnolgicos).
Existen variados mtodos para la purificacin de enzimas entre los mas
utilizados tenemos las separaciones cromatogrficas, las cuales se basan en las
diferencias de carga, tamao o afinidad de las diferentes protenas.
Caracterizacin enzimtica
La caracterizacin enzimtica se refiere al conocimiento de parmetros
especficos de una enzima como su peso molecular, su punto isoelctrico, Vmax,
Km entre otros.

Produccin de enzimas a nivel industrial

La produccin de enzimas para uso industrial se ha ido desarrollado de forma gradual,
desde finales del siglo XIX con las primeras preparaciones de renina y de amilasas. En
un principio las preparaciones comerciales de las enzimas se obtenan de extractos
crudos de plantas y animales, con escasa contribucin de los microorganismos.
Debido a que las aplicaciones industriales de las enzimas requieren que estas sean
producidas a gran escala y a bajo costo, el empleo de algunas enzimas de origen vegetal
y animal ha ido decayendo, en favor de las enzimas de origen microbiano. Por sus
rpidas tazas de crecimiento, las principales fuentes de las enzimas son bacterias,
levaduras y hongos filamentosos, que se cultivan en medios slidos o lquidos
relativamente baratos y con tiempos cortos de produccin.
Obtencin de enzimas por fermentacin
Las enzimas de origen microbiano se obtienen por fermentacin en condiciones en las
que se encuentran controladas las cepas de alto rendimiento, en cultivos en superficie o
sumergidos.

Fuente: Ward, 1989

Las clulas microbianas excretan las enzimas extracelulares al medio y la primera etapa
de recuperacin de la enzima consiste en la separacin del lquido libre de las clulas,
que es el que contiene la enzima; esto se lo realiza mediante filtracin o centrifugacin.
Estos procesos con cultivos en superficie se utilizan ampliamente tambien para la
produccin de enzimas extrecelulares fungicas, en ese caso la masa semislida de la
post-fermentacin se extrae con agua antes de ser filtrada.
La recuperacin de las enzimas extracelulares industriales no exige una etapa de
fraccionamiento de la enzima, los caldos de cultivo con enzimas extracelulares
contienen enzimas contaminantes, y adems da mayor actividad y mejora las
prestaciones del producto. Un pequeo numero de casos de enzimas contaminantes
reducen la eficacia de las enzimas extracelulares en aplicaciones industriales
especficas, por lo cual deben ser desnaturalizadas y separadas del filtrado.
La fermentacin para la produccin de enzimas intracelulares debe terminar antes que
comience la lisis celular, porque daria lugar a la salidad de la enzima al medio. Se deben
aplicar tcnicas bioqumicas de purificaicn para recuperar la enzima intracelular con
unas especificaciones dadas. (Ward, 1989) (Picha & Zegarra, 2012)
Los aportes que la tecnologa enzimtica ha dado a la humanidad, y a sus crecientes
problemas, es cada da es mejor, pues podemos contar con muchas de las ventajas
proporcionadas por molculas naturales, y con el avance de la ciencia y la tecnologa
cada vez es mayor el numero de aplicaciones que podemos encontrar y el numero de
soluciones que esta tecnologa est aportando.

Referencias:
Cooper, G., & Hausman, R. (2011). La clula. Washington, Washington, USA:
Marbn Libros.
Castellanos Oscar, Ramrez, D., & Mauricio, V. (2006). Perspectiva en el
desarrollo de enzimas industriales a partir de inteligencia tecnolgica. Revista de
Ingeniera e Investigacin , XVI (2).
Ward, O. (1989). Enzimas Industriales. En Biotecnologa de la Fermentacin
(pgs. 233-237). Zaragoza, Espaa: Acribia.
Artime, R. (2010). Aplicaciones de las enzimas. Universidad de Salamarca,
Salamarca.
Pelez Acero, A., Meneces Mayo, M., Ayala Martnes, M., Loera Corral, O., &
Megas, M. (2011). Enzimas fibrolticas producidas por fermentacin en estado
slido para mejorar los ensilajes de la caas de azucar. Agrociencia , 45 (6), 6.
Picha, S., & Zegarra, K. (2012). Scribd. Recuperado el 29 de Noviembre de
2016, de Rutas alternas a la gliclisis: Fermentacin enzimtica:
https://es.scribd.com/doc/99153410/FERMENTACION-ENZIMATICA
UNAD. (2012). Universidad Nacional Abierta y a Distancia. Recuperado el 30
de Noviembre de 2016, de Extraccin, purificacin y caracterizacin de
protenas:
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/211619/Contenido_en_linea_eXe/leccin_
20_extraccin_purificacin_y_caracterizacin_de_proteinas.html